SU843953A1 - Способ диагностики кишечной инфекции - Google Patents

Description

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в серологических исследованиях, направленных на обнаружение антигенов в различном материале.

Известен способ диагностики кишечной инфекции путем проведения с пробой фекалий реакции нейтрализации антител с эритроцитарным диагностикумом с последующим диагностированием наличия заболевания по положительному результату [1].

Однако регистрируемые при этом отрицательные результаты реакции могут быть ложными из-за присутствия в исследуемом материале агентов, непосредственно агглютинирующих эритроциты (лектины и др.). Кроме того, этот способ не гарантирует полной индикации антигенов во всех исследуемых пробах, содержащих искомый антиген, и, следовательно, точность диагностики оказывается недостаточной.

Цель изобретения — повышение точности способа.

Эта цель достигается тем, что с пробой фекалий предварительно ставят реакцию прямой гемагглютинации, затем при наличии положительного результата пробу истощают фиксированными эритроцитами и реакцию нейтрализации проводят с истощенной пробой.

Пример 1. Исследуют пробы фекаций двух больных с клиническим диагнозом паратифа В. Суспензию исследуемой пробы фекалий в 0,85%-ном растворе NaCl (при5 мерно 1:1) прогревают в кипящей водяной бане 15—20 мин и центрифугируют 3 мин при 3000 об/мин. Наличие О-антигена паратифозных В бактерий определяют известным и предлагаемым спо10 собами.

По известному способу из надосадка каждой пробы фекалий готовят ряд последовательных разведений (от 1:1 до 1 : 64) в объеме 0,25 мл в 0,85%-ном растворе 15 NaCl. Затем во все разведения вносят в объеме 0,25 мл раствор неадсорбированной паратифозной В сыворотки в разведении, содержащем две минимальные агглютинирующие дозы в отношении эритроцитарного 20 О-диагностикума группы В. Минимальную агглютинирующую дозу сыворотки определяют путем предварительного титрования посредством реакции пассивной гемагглютинации. После 30 мин экспозиции во все 25 лунки ряда вносят по 0,25 мл коммерческого эритроцитарного О-диагностикума группы В. Результаты учитывают через 1,5— 2,0 ч.

По предлагаемому способу с каждой 30 пробой фекалий сначала проводят реакцию прямой гемагглютинации. Для этого из каждой пробы фекалий готовят по одному ряду разведений (от 1 : 1 до 1 : 4) в объеме 0,5 мл в 0,85%-ном растворе NaCl. Во все разведения вносят по 0,25 мл 0,75%ной взвеси формалинизированных эритроцитов. Результат прямой гемагглютинации учитывают через 1,5 ч. С первой пробой фекалий результат — отрицательный, со второй — положительный. На этом основании осуществляют истощение второй пробы фекалий формалинизированными эритроцитами. Для этого к осадку от 1,0 мл 10%-ной взвеси формалинизированных эритроцитов прибавляют 1,0 мл цельного экстракта фекалий, смесь встряхивают и оставляют на 1 ч при комнатной температуре. Затем пробу центрифугируют 3 мин при 3000 об/мин и надосадочную жидкость исследуют по известному способу.

У первого больного, у которого проба прямой гемагглютинации с фекалиями -отрицательная, О-антиген выявлен обоими способами. У второго больного проба прямой гемагглютинации с фекалиями — положительная, что свидетельствует о наличии в фекалиях агента или агентов, непосредственно агглютинирующих эритроцитов. В пробе фекалий известным способом О-антиген не обнаружен, а предлагаемым способом выявлен в титре 1 : 8. При наличии в фекалиях больного агентов, непосредственно агглютинирующих эритроциты, лабораторный диагноз инфекции может быть поставлен только при использовании предлагаемого способа.

П р и мер 2. Исследованию на содержание О- и Н-антигенов паратифозных В бактерий посредством известного и предлагаемого способов подвергнуты пробы фекалий 209 переболевших паратифом В и находящихся с ними в контакте людей. Для проведения реакции нейтрализации антител применен коммерческий эритроцитарный сальмонеллезный О-диагностикум группы В, приготовленный эритроцитарный Hb-диагностикум и коммерческая неадсорбированная паратифозная В-сыворотка. Известный и предлагаемый способы осуществляют аналогично примеру 1.

При известном способе постановки реакции нейтрализации антител с 209 пробами фекалий получены отрицательные результаты.

По предлагаемому способу пробы испытаны в реакции прямой гемагглютинации. 29 проб (13,9±2,4%) дали прямую гемагглютинацию в разведениях не ниже 1 : 4. 5 Следовательно, данные пробы фекалий (13,9%) содержат агент (агенты), вызывающий прямую агглютинацию эритроцитов. Все пробы фекалий подвергают истощению. В 10 из 29 полученных надсадков 10 экстрактов истощенных фекалий в реакции нейтрализации антител обнаружены О- и

11-антигены паратифозных В бактерий.

Предлагаемый способ в проведенном обследовании позволяет дополнительно 15 выявить специфические антигены в 5% проб фекалий с отрицательным по известному способу результатом.

Предлагаемый способ обеспечивает более точную диагностику кишечных инфек20 ций. Обнаруженные с помощью предлагаемого способа всех людей, в выделениях которых имеются антигены того или иного возбудителя, особенно важно для правильной экстренной и ретроспективной диагно25 стики заболеваний и проведения необходимого объема противоэпидемических мероприятий.

Claims (1)

1. Способ диагностики кишечной инфекции путем проведения с пробой фекалий реакции нейтрализации антител с эритроцитар35 ным диагностикумом с последующим диагносцированием наличия заболевания по положительному результату, отличающ и й с я тем, что, с целью повышения точности, с пробой фекалий предварительно 40 ставят реакцию прямой гемагглютинации, затем при наличии положительного результата пробу истощают фиксированными эритроцитами и реакцию нейтрализации проводят с истощенной пробой.