SU759056A3 - Method of preparing l-lysine - Google Patents
Method of preparing l-lysine Download PDFInfo
- Publication number
- SU759056A3 SU759056A3 SU742032843A SU2032843A SU759056A3 SU 759056 A3 SU759056 A3 SU 759056A3 SU 742032843 A SU742032843 A SU 742032843A SU 2032843 A SU2032843 A SU 2032843A SU 759056 A3 SU759056 A3 SU 759056A3
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- fermp
- lysine
- antioxidants
- antibiotics
- sources
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
(:.4) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-лизин А(: .4) METHOD OF OBTAINING L-lysine A
Изобретение относитс к технике получени L-лизина путем культивиров ни микроорганизмов, используемого дл приготовлени пищевых продуктов и повышени их питательных свойств. Наиболее близким к изобретению вл етс известный способ получени L-лизина путем культивировани проду цирующих его микроорганизмов рода Corynebacter1 urn или Brevibacteriurn на питательной среде, содержащей источники углерода, азота, необходимые минеральные соли в присутстви антибиотиков или поверхностно-акти ных веществ, или антиокислителей с последующим выделением целевого про дукта l . Однако по известному способу выход L-лизина недостаточно высркий. Дл повышени выхода Ьлизина в предлагаемом способе из рода Согупе bacterium или Brev1bacteriurn испиль зуют штаммы Corynebacterium glutamicum FERMP-1987, FERMP-1613,FERMP-ISB или Brevibacteriurn lactofermentum FERMP-1944, FERMP-1711, FERMP-1857, FERMP-1572, FERHP-1574, FERMP-1575, FERMP-1841. Культивирование ведут на среде,содержащей в к честве источника углерода углеводы ИJlи спирты,или органические кислоты, в присутствии антибиотиков, выбранных из группы хлорамфеникол, эритромицин , диоксистрептомицин, тетрациклин , или поверхностно-активных веществ или антиокислителей в количествах , соответственно равных 3,525 мг/мл, 0,05-2% или 0,05-1,0 мг/мл. спосоо осуществл ют следующим образом. Продуцирующие L-лизин микроорганизмы из рода Corynebactcг 1 urn или Вгevibacterium культивируют на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и необходимые минеральные соли в присутствии антибиотиков , или поверхностно-активных веществ, или антиокислителей, в количествах, соответственно равных 3,5-25 мг/мл, 0,05-2% и 0,051 ,0 мг/мл, Из рода Corynebacterium или Brevibacterium используют штаммы Corynebacteriunr gjtamicum FERHP-1987 FERMP-1613, FERHP-1982 или Brevibacterium lact-ofermentum FERMP-1944, FERHP-1711, FERMP-1857, FERMP-1572, FERMP-1S74, FRRMP-1575, FErvMP-1841. В качестве источнижов углерода в среде культивировани используютThis invention relates to a technique for producing L-lysine by cultivating microorganisms used to prepare food products and enhance their nutritional properties. The closest to the invention is a known method of producing L-lysine by cultivating microorganisms producing it, of the genus Corynebacter1 urn or Brevibacteriurn, on a nutrient medium containing sources of carbon, nitrogen, essential mineral salts in the presence of antibiotics or surface active agents, or antioxidants, followed by highlighting the target product l. However, by a known method, the yield of L-lysine is not high enough. In order to increase the release of lizin, in the proposed method, from the genus Sogupa bacterium or Brev1bacteriurn, Corynebacterium glutamicum strains FERMP-1987, FERMP-1613, FERMP-ISB or Brevibacteriurn lactofermentum FERMP-1944, FERMP-1711, -PET, are being used by peers. 1574, FERMP-1575, FERMP-1841. Cultivation is carried out on a medium containing carbohydrates IJl and alcohols or organic acids as a carbon source in the presence of antibiotics selected from the group of chloramphenicol, erythromycin, dioxistrepomycin, tetracycline, or surfactants or antioxidants in amounts equal to 3.525 mg / ml , 0.05-2% or 0.05-1.0 mg / ml. The method is carried out as follows. L-lysine-producing microorganisms from the genus Corynebactcg 1 urn or Brévibacterium are cultured on a nutrient medium containing sources of carbon, nitrogen and necessary mineral salts in the presence of antibiotics or surfactants, or antioxidants, in amounts corresponding to 3.5-25 mg / ml, 0.05-2% and 0.051, 0 mg / ml, From the genus Corynebacterium or Brevibacterium, the following strains are used: Corynebacteriunr gjtamicum FERHP-1987 FERMP-1613, FERHP-1982 or Brevibacterium lact-ofermentum FERMP-1944, FERHP-1711, FERHP-1711, FERHP-1711 -1857, FERMP-1572, FERMP-1S74, FRRMP-1575, FErvMP-1841. As sources of carbon in the culture medium, use
углеводы или спирты , или органические кислоты.carbohydrates or alcohols, or organic acids.
Из углеводов используют глюкозу, фруктозу, мальтозу, сахарозу, крахмал , гидролизованный крахмал и мелассу . Из органических кислот используют уксусную, пропионовую, бензойную или фумаровую кислоты, а из спиртов - метанол, пропанол или этанол.Carbohydrates use glucose, fructose, maltose, sucrose, starch, hydrolyzed starch and molasses. Of organic acids, acetic, propionic, benzoic, or fumaric acids are used, and of alcohols, methanol, propanol, or ethanol.
Среда может содержать несколько источников углерода. Некоторые мутанты ассимилируют углеводороды в качестве основного или второстепенного источника углерода.The medium may contain several carbon sources. Some mutants assimilate hydrocarbons as a primary or secondary carbon source.
В качестве источников азота примен ют соли аммони , нитраты, карбг1миды , аминокислоты и жидкости, получаемые после вымачивани кукурузы, дрожжевой экстракт, м сной экстракт, рыбную муку, пептон, бульон, продукты гидролиза казеина и их смеси, а та,кже аммиак.The nitrogen sources used are ammonium salts, nitrates, carbides, amino acids and liquids obtained after soaking maize, yeast extract, meat extract, fish meal, peptone, broth, casein hydrolysis products and their mixtures, and also ammonia.
Необходимые неорганические ионы отмачивают сульфатом магни , фосфатом магни , первичным кислым фосфорнокислым ксшием, сульфатом железа, хлоридом марганца, хлоридом кальци , хлоридом натри и т.п.Necessary inorganic ions are soaked with magnesium sulfate, magnesium phosphate, primary acid phosphate, ferric sulfate, manganese chloride, calcium chloride, sodium chloride, and the like.
Антибиотики выбирают из группы хлорамфеникол, казугамицин, тетрациклин , экситетрациклим, эритромицин диоксистрептомицин, митомицин С, антиномицин D, циклозерин, соединение группы пенициллина, цефалоспорина , полимиксин и азосерин.Antibiotics are selected from the group of chloramphenicol, kazugamycin, tetracycline, excitetracyclim, erythromycin dioxistreptomycin, mitomycin C, antinomycin D, cycloserine, a compound of the penicillin group, cephalosporin, polymyxin and azoserine.
Из поверхностно-активных веществ в среду ввод т сульфат высшего спирта; алкилбензосульфонат; алкилфосфат и диалкил-сульфосукцинат; катионные вещества, например соли алкиламина и четвертичные аммониевые соли; неионные вещества, например алкильный простой эфир полиокталкилена, моноалкильный простой эфир полиоктэтленсорбитана и сорбитан монолаурат; амфотерные вещества, как имидазолин и бетаин.Of the surfactants, sulfate of higher alcohol is introduced into the medium; alkyl benzene sulfonate; alkyl phosphate and dialkyl sulfosuccinate; cationic substances, for example alkylamine salts and quaternary ammonium salts; non-ionic substances, such as alkyl ether polyoctalkylene, monoalkyl ether polyoctatylene sorbitan and sorbitan monolaurate; amphoteric substances like imidazoline and betaine.
Из антиокислителей в среду ввод т 4,4-диокси-З 3-диметилдифенил; 2,6-ди-3-бутилфенол , катехол, бутилкатехол , протокатеховую кислоту, « -токоферол , пирогаллал, галловую кислоту , сложный эфир галловой кислоты, нафтол;фенольнь1е соединени , наприме амфинофенол, амины, например нафтнламин , дифениламин, ди-2-бутил-И-фенилендиамин , б-этокси-2,3,4-триметил-1 ,2-дигидрохинолин, семикарбазид, фенотиазин и тетрафенилгидразин; соединение , содержащее серу, например тио-дипропионопа и тио-дигликолева кислота.From antioxidants, 4,4-dioxy-3 3-dimethyldiphenyl is introduced into the medium; 2,6-di-3-butylphenol, catechol, butylcatechol, protocatechuic acid, α-tocopherol, pyrogallal, gallic acid, gallic acid ester, naphthol; phenol compound, such as amphinophenol, amines, e.g. butyl-I-phenylenediamine, b-ethoxy-2,3,4-trimethyl-1, 2-dihydroquinoline, semicarbazide, phenothiazine, and tetraphenylhydrazine; a sulfur-containing compound, such as thio-dipropionopa and thio-diglycolic acid.
Водородный показатель рН ферментационной среды контролируют и поддерживают на уровне, необходимом дл оптимального получени L-лизина, преимущественно в пределах от 5,0 до 9,0, добавлением карбамида, аммиака.The pH of the fermentation medium is monitored and maintained at the level required for optimal production of L-lysine, preferably in the range from 5.0 to 9.0, by the addition of urea, ammonia.
углекислого кальци , органических и неорганических кислот в процессе ферментации.calcium carbonate, organic and inorganic acids in the fermentation process.
Ферментацию осуществл ют при температуре 24-37°С, значение которой зависит от культивируемого микроорганизма, при аэробных услови х в течение 2-7 дней. Fermentation is carried out at a temperature of 24-37 ° C, the value of which depends on the cultured microorganism, under aerobic conditions for 2-7 days.
L-лизин извлекают из жидкой среды (бульона) одним из известных способов , например путем адсорбции на О подход щих ионообменных смолах, с последукицим отмыванием, удалением клеточного материала и концентрированием фильтрата, содержащего L-лизин.L-lysine is removed from the liquid medium (broth) by one of the known methods, for example, by adsorbing on O suitable ion exchange resins, followed by washing, removal of cellular material and concentration of the filtrate containing L-lysine.
5 L-лизин идентифицируют по его мингидринной реакции на бумажной хроматограмме , по значению показател Rf на бумажной хроматограмме, по данным электрофореза, качественного5 L-lysine is identified by its minhydrin reaction on a paper chromatogram, by the value of Rf on a paper chromatogram, according to electrophoresis, qualitative
0 микробиологического определени и по реакцик с декарбоксилизой лизина, а также по результатам, получаемым при применении тождественных образцов. Количество L-лизина, выработанного в составе булЁонной культуры, определ ют калориметрическим методом, основанным на кислотной медной, нингидринной реакции.0 microbiological determination and according to the reactions with lysine decarboxylic, and also according to the results obtained using identical samples. The amount of L-lysine produced in the composition of the bouillon culture is determined by a calorimetric method based on an acid copper, ninhydrin reaction.
Получаемые результаты относ тс The results obtained are related
к сол нокислому производству.to hydrochloric acid production.
Пример 1. Готов т питательную сред дл культивировани следующего состава,%; глюкоза 10; сернок слый аммоний 4,5; первичный кислыйExample 1. Nutrient media are prepared for cultivation of the following composition,%; glucose 10; sulfuric ammonium 4.5; primary sour
фосфорнокислый калий 0,1; семиводный сернокислый магний 0,04; катион двухвалентного железа 2 млн ;катион двухвалентного марганца 2 млн ;биотин 50 мг/л; хлористоводородна соль тиамина 200 мг/л; продукт гидролизаpotassium phosphate 0,1; magnesium sulfate 0.04; ferrous iron cation 2 million; manganese divalent cation 2 million; biotin 50 mg / l; thiamine hydrochloride salt 200 mg / l; hydrolysis product
соевого протеина (общее содержание азота 7%) 1, углекислый кальций (стерилизован отдельно) 5. Устанавливают рН 8,0 и дел т на порции по 20 мл. К каждой порции добавл ютsoy protein (total nitrogen content 7%) 1, calcium carbonate (sterilized separately) 5. Set the pH to 8.0 and divide into 20 ml portions. To each portion add
хлорамфеникол или Мирамол 2МСА (торговое наименование катионного поверхностно-активного вещества), в указанных ниже количествах добавл ют в колбы по 500 мл, перемешиваютchloramphenicol or Miramol 2MSA (trade name of cationic surfactant), in the quantities indicated below, are added to 500 ml flasks, stirred
встр хиванием и стерилизуют.shake and sterilize.
Отмеренные порции инокулируют, соответственно Brevibacterium lactofermentum - 1944 (штамм, устойчивый к действию ЛЕС, полученный искусственным путем из BreviЬасteruimMeasured portions are inoculated, respectively Brevibacterium lactofermentum - 1944 (a strain resistant to LES, artificially obtained from Brevibacteruim
lactofermentum ATCC 13869 (и Corynebacterium glutamicum FERMP-1987 (штамм, устойчивый к действию АБС полученный искусственным путем из Micrococcus glutamicus ATCC 13032),lactofermentum ATCC 13869 (and Corynebacterium glutamicum FERMP-1987 (an ABS resistant strain obtained artificially from Micrococcus glutamicus ATCC 13032),
которые предварительно культивируют на косых желатиновых средах на бульоне , содержащем глюкозу. Культивирование провод т при 31°С и встр хивании.which are pre-cultured on oblique gelatin media in broth containing glucose. Cultivation was carried out at 31 ° C and shaking.
Затем отмеренные порции дел т на две группы порций.Then the measured portions are divided into two groups of portions.
К одной группе порций добавл ют хлорамфекол сразу или через 15 ч, счита от момента инокулировани , iChloramphecol is added to one group of servings immediately or after 15 hours, counting from the moment of inoculation, i
Примечание. Рост - после 26-кратного разбавлени , ПС сравнению с первоначальным объемом определ ют оптическую плотность при 562 тм.Note. Growth - after 26-fold dilution, PS compared with the initial volume, the optical density at 562 tm was determined.
Из ферментационных бульонов в которых культивируют оба штамма в среде, к которой не добавл ют антибиотики , отбирают более 300 колоний дл каждого и исследуют на способность вырабатывани L-лизина. При этом устанавливают, что все они обладают устойчивостью к ЛЕС, что служит доказательством пригодности штамма дл выработки L-лизина. ЭтоFrom fermentation broths in which both strains are cultivated in a medium to which no antibiotics are added, more than 300 colonies are selected for each and examined for the ability to produce L-lysine. It is established that all of them are resistant to WOOD, which is evidence of the suitability of the strain for the production of L-lysine. it
зина провод т ферментацию способом, описанным в примере 1, но добавл ют О,5 мг/мп эритромицина в начале инокулировани и 3 мг/мл эритромициколичествах , указанных в табл. 1, Процесс ферментации провод т 72 ч,оZina is fermented by the method described in Example 1, but 0.5 mg / MP of erythromycin is added at the beginning of the inoculation and 3 mg / ml of erythromycine amounts shown in Table. 1, The fermentation process is carried out 72 hours, o
т а б л и ц а 1 Table 1
свидетельствует также об отсутствии влени , обратной мутации дл применени мутайного штамма даже после 72 ч культивировани .also indicates the absence of a reverse mutation for the use of the mutant strain even after 72 hours of cultivation.
К другой группе порций добавл ют Миранол 2МСА (торговое наименование ) сразу или через 7 ч после инокулировани в количествах, приведенных в табл. 2.Miranol 2MCA (trade name) is added to another group of portions immediately or 7 hours after inoculation in the amounts shown in Table. 2
Т а б л и ц а 2Table 2
инокулировани .inoculating.
Культивируют 82 ч,при этом количество L-лизина, накопившегос в бульоне, приведено в табл. 3. Т а Ь л и да 3Cultivate 82 h, while the amount of L-lysine accumulated in the broth is given in table. 3. T a b l and yes 3
Пример 3. Ферментацию провод т способом описанным в примере 1, но добавл ют продукт TBeH-ZO (торговое наименование П р И м е р 4. Ферментацию провод т , как описано в примере 1, примен штамгал BrevJbacteriurn lactofermentum FERMP-1711 (обладает устойчивостью к АЕС и потребностью в аланине) Corynebacterium glutamicum FERMP-1613 (обладает устойчивостью к АЕС и потребностью в серине), Corynebacterium glutamicum FERMP-198 ( обладает устойчивостью к АЕС и потребностью в пролине), Brevibacterium lactofermentum FERMP-1857 (облаExample 3. Fermentation was carried out in the manner described in Example 1, but TBeH-ZO (trade name AP 4) was added. Fermentation was carried out as described in Example 1 using BrevJbacteriurn lactofermentum FERMP-1711 (resistant to AEC and the need for alanine) Corynebacterium glutamicum FERMP-1613 (resistant to AEC and the need for serine), Corynebacterium glutamicum FERMP-198 (resistant to AES and the need for proline), Brevibacterium lactofermentum FERMP-1857 (around
Диоксистрептомицин,Dioxistreptomycin,
МГ/МЛ :MG / ML:
вначале -0,5 0,97 4,7initially -0.5 0.97 4.7
через 24 ч - 4after 24 h - 4
без добавлени 1,05 4,2no added 1.05 4.2
Тетрациклин,мг/мл:Tetracycline, mg / ml:
вначале -1,0 1,0 2,8 P initially -1.0 1,0 2,8 P
через 24 ч - 7,0after 24 hours - 7.0
без добавлени 1,11 2,5without adding 1.11 2.5
Продолжение таблицы 3Continuation of table 3
полиоксиалкиленовых -производных сорбитан-монолаурата). Культивируют 72 ч. Количество накопившегос в бульоне L-лизина приведено в табл. 4.polyoxyalkylene derivatives of sorbitan-monolaurate). 72 hours are cultivated. The amount of L-lysine accumulated in the broth is given in table. four.
Т а б Л и ц а 4 дает устойчивостью к АЕС и потребностью в аланине и лейцине), Brevibacterium 1actofermentum FERMP-1574 (обладает устойчивостью к АЕС и потребностью в никотиновой кислоте или никотинамиде) и Brevibacterium lactofermentum FERMP-1575 (обладает устойчивостью к АЕС и потребностью в гипоксантине). Культивируют 72 ч. Количество L-лизина, накопившегос в бульоне, приведено в табл.5. Таблица 5TABL4 gives resistance to AES and the need for alanine and leucine), Brevibacterium 1actofermentum FERMP-1574 (resistant to AEC and the need for nicotinic acid or nicotinamide) and Brevibacterium lactofermentum FERMP-1575 (resistant to AEC and need for hypoxanthin). 72 hours are cultivated. The amount of L-lysine accumulated in the broth is given in Table 5. Table 5
Пеницилин,ед/мл:Penicillin, units / ml:
вначале - 1,0 ед/мл 0,93 3,3at the beginning - 1.0 u / ml 0.93 3.3
через 24ч5 ,0 ед/млafter 24h5, 0 u / ml
без добавлени 1,02 3,0without adding 1.02 3.0
Пример 5. Ферментацию провод т , как описано в примере 1, использу штаммы Corynebacterium glutamicum FERMP-1613; Corynebacterium glutamicum FERMP-1982; Micrococcus glutamictis ATCC 13286 (обладает потребностью в гомоозерине); Brevibacterium 1 асtofermenturn. FERMP-1572 (обладает устойчивостью к ЛЕС и потребностью в серине совместно с лейци ном); Brevibacterium 1actofermentum. FERMP-1574, Brev i bacter iutn lactoferglutamicum FERMP-1982 Micrococcus gluta micus ATCC 13286 Brevibacterium lactofermentum FERMP-1572 Brevibactorium 1actofermentum FERMP-1574Example 5. Fermentation was carried out as described in Example 1 using Corynebacterium glutamicum FERMP-1613 strains; Corynebacterium glutamicum FERMP-1982; Micrococcus glutamictis ATCC 13286 (has the need for homozerin); Brevibacterium 1 astofermenturn. FERMP-1572 (has resistance to FOREST and the need for serine together with leucine); Brevibacterium 1actofermentum. FERMP-1574, Brev i bacter iutn lactoferglutamicum FERMP-1982 Micrococcus gluta micus ATCC 13286 Brevibacterium lactofermentum FERMP-1572 Brevibactorium 1actofermentum FERMP-1574
7590561075905610
Продолжение таблицы 5 Continuation of table 5
4four
mentum FERMP-1575 и BrevibacterIum lactofermentum FERMP-1841.mentum FERMP-1575 and BrevibacterIum lactofermentum FERMP-1841.
Добавл ют также питательные вещества , поверхностно-активные вещества, соответственно, после 16 ч культивировани .Nutrients, surfactants, are also added, respectively, after 16 h of culture.
Культивируют 72 ч. Количество на ,копившегос в бульоне L-лизина приведено в табл, 6.72 hours are cultivated. The quantity of L-lysine stored in the broth is given in Table 6.
Таблица 6 без добавлени 3,0 Рипомин LH:4,3 0,1% без добавлени 3,8 Ованол 516:0,05%5,1 без добавлени 4,6 Рипонокс NCK: :0,13,6 без добавлени 3,1Table 6 without the addition of 3.0 Ripomin LH: 4.3 0.1% without the addition of 3.8 Ovanol 516: 0.05% 5.1 without the addition of 4.6 Riponox NCK:: 0.13.6 without the addition of 3, one
Примечание. Рипон LE110 - этаноламинова соль алкилбензолсульфокислоты; Рипонол LL103 - лаури сульфат, Рипомин 1Н - амфотерные поверхностно-активные вещества типа имидазолина; Рипонокс NCK - простой алкильный фенольный эфир полиоксиэтйлена/ Ованол 516 - агчфотерное поверхностно-активное вещество типа бетаина; Катионал НТВ - бензолконийхлорид; .Ниссаннонион LT221 - неионное поверхностноактивное вещество.Note. Ripon LE110 - alkylbenzenesulfonic acid ethanolamine salt; Riponol LL103 - lauri sulfate, Ripomin 1H - imidazoline type amphoteric surfactants; Riponoks NCK - Polyoxyethylene, an alkyl phenolic ester / Ovanol 516 - an aggfotheric surfactant such as betaine; Cation NTV - benzene; Nissannonion LT221 is a non-ionic surfactant.
Примере. Процесс получени L-лиэина провод т, как описано в примере 1, но в качестве микроорганизмов используюФ штаммы Brevlbacterlum lactofermentum FERMP-1944, FERMP-17ia, FERHP-1572, FERMP-1574, FER«P-15T5, FERMP-1841, Corynebacterlum glutainJcum FERMP-1987,FERMP-1613,Example The process of obtaining L-liine is carried out as described in Example 1, but as the microorganisms I use the F strains of Brevlbacterlum lactofermentum FERMP-1944, FERMP-17ia, FERHP-1572, FERMP-1574, FER "P-15T5, FERMP-1841, Corynebacterlum gluthromyntropyntrum, or FERMP-1841, FERMP-1841 FERMP-1987, FERMP-1613,
Brevlbacterium lactofermentum FERHP-1944Brevlbacterium lactofermentum FERHP-1944
BrevlbacteriumBrevlbacterium
lactofermentumFERHP-1711lactofermentumFERHP-1711
Гипоксантин-10Hypoxanthin-10
OL-метионин-150OL-methionine-150
Продолжение таблищл 6Continued table 6
FERMP-1982 И Micrococcus glutamicus ATCC-13286.FERMP-1982 And Micrococcus glutamicus ATCC-13286.
В среду добавл ют питательные вещества , необходимые в некоторых случа х , и антиоксиданты.Nutrients necessary in some cases and antioxidants are added to the medium.
Культивируют 72 ч.Cultivated 72 hours
Количество накопленного L-лизина приведено в табл. 7.The amount of accumulated L-lysine is given in table. 7
Т а бT a b
лицаfaces
Галлова кислота: вначЕше -0,5 без добавлени Gallic acid: above -0.5 without addition
L-аспаратнова кислота и лаурилгаллат:L-aspartic acid and lauryl gallate:
через 12 ч - 0,05 без добавлени after 12 h - 0.05 without addition
Тио-дигликоль:Thio-diglycol:
через 12 ч - 0,05 after 12 h - 0.05
без добавлени without adding
L-токоферол:L-tocopherol:
через 12 ч - 0,1 after 12 h - 0.1
без добавлени without adding
БутилоксиакизолButyloxyakisol
(ВИД):(VIEW):
через 12 ч - 0,05 after 12 h - 0.05
без добавлени without adding
Бутилкатехол:Butylcatechol:
через 12 ч - 0,1 after 12 h - 0.1
без добавлени without adding
Протокатехова Protokatehova
кислота:acid:
вначале initially
без добавлени without adding
Corynebacterium g 1 utami cum FERMP-1613Corynebacterium g 1 utami cum FERMP-1613
Brev i bac te r i urn 1actofermenturn FERMP-1982Brev i bac te r i urn 1actofermenturn FERMP-1982
Приме р7. Готов т питательную среду дл культивировани при рН 8,0, содержащую компоненты, %: свеко ;ьна меласса (в пересчете на глюкозу) 10; сернокислый аммоний 4,5/ первичный кислый фосфорнокислый калий 0,1: MgS04-7H2 0 0,04; продукт гидролиза осевого протеина (общее содержание азота - 7%) 1,5;углекислый кальций 5,0;катионы двухвалетного железа и двухвалетного марганца по 2 млн ; биотин 50 мг/л и хлористоводородна соль тиамина 200 мг/л.Среду дел т на отдельные порции по 20 мл и каждуюTake p7. A culture medium is prepared at pH 8.0, containing components,%: beet; molasses (in terms of glucose) 10; ammonium sulphate 4.5 / primary potassium phosphate 0.1: MgS04-7H2 0 0.04; the product of axial protein hydrolysis (total nitrogen content - 7%) 1.5; calcium carbonate 5.0; cation of two-iron iron and two-manganese, 2 million each; biotin 50 mg / l and thiamine hydrochloride salt 200 mg / l. The medium is divided into separate portions of 20 ml each
Контроль (гтсутствие)Control (gt presence)
Примере. Вгруibacteriurn lactofermentum FERHP-1711 культивируют , как в примере 7, но примен ют содержащую 15% свекольной мелассы (в пересчете.на глюкозу), а 0,1% Миранола 2МСА добавл ют через 26 ч после йнокулировани .Example In ibacteriurn lactofermentum, FERHP-1711 is cultured as in Example 7, but using 15% beetroot molasses (expressed in glucose) is used, and 0.1% Miranol 2MCA is added 26 hours after inoculation.
Культивируют 90 ч, при этом наколение в бульоне L-лизина равно 5,8 г/дл. При культивировании без Миранола 2МСА накопление L-лизина равно 5,2 г/дл.Cultivated for 90 hours, while the accumulation in the broth of L-lysine is 5.8 g / dL. When cultured without Miranol 2 MCA, the accumulation of L-lysine is 5.2 g / dl.
Продолжение табл. 7Continued table. 7
Бутилокситолуол:Butyloxytoluene:
через 12 ч - 0,05 after 12 h - 0.05
без добавлени without adding
ВНА и тио-дигликолева кислота:BHA and thio-diglycolic acid:
через 12 ч - 0,02 after 12 hours - 0.02
и 0,1 соответственноand 0.1 respectively
без добавлени without adding
помещгиот в 500 мл колбу, перемешивают встр хиванием и стерилизуют.Put in a 500 ml flask, mix by shaking and sterilize.
Затем отмеренные порции инокулируют штаммом Brevibacterium Jactofermentum FERHP-1711, культивированную ранее на косых желатиновых средах на бульоне, содержащем глюкозу .Then the measured portions are inoculated with a strain of Brevibacterium Jactofermentum FERHP-1711, previously cultured on oblique gelatin media in a broth containing glucose.
Культивируют при 31°С 72 ч при встр хивании и добавлении к средэ хлорамфеникола, эритромицина, Миранола 2МСА и/или Твена 20.Cultivate at 31 ° C for 72 hours with shaking and adding chloramphenicol, erythromycin, Miranol 2MCA and / or Twain 20 to the middle one.
Количество накопленного L-лизина приведено в табл. 8.The amount of accumulated L-lysine is given in table. eight.
ТаблицаTable
3,53.5
Пример 9. Corynebacterium glutamicum FERHP-1982 культивируют, как в примере 7, но примен ют патоку тростниково-CcixapHoro производства вместо свекольной мелассы и к среде добавл ют тетрациклин, Ниссаннонион LT221 или галловую кгслоту. Культивируют 72 ч.Example 9. Corynebacterium glutamicum FERHP-1982 is cultivated as in Example 7, but the reed cane molasses is used instead of beet molasses and tetracycline, Nissannioni LT221 or gallic acid is added to the medium. Cultivated 72 hours
Количество накопленного L-лизина в бульоне приведено в табл. 9.The amount of accumulated L-lysine in the broth is given in table. 9.
Галлова кислота 0,5%Gallic acid 0.5%
Контроль (отсутствие)Control (absence)
Claims (1)
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP5836173A JPS5138794B2 (en) | 1973-05-24 | 1973-05-24 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU759056A3 true SU759056A3 (en) | 1980-08-23 |
Family
ID=13082168
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU742032843A SU759056A3 (en) | 1973-05-24 | 1974-05-24 | Method of preparing l-lysine |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS5138794B2 (en) |
SU (1) | SU759056A3 (en) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5225573U (en) * | 1975-08-08 | 1977-02-23 |
-
1973
- 1973-05-24 JP JP5836173A patent/JPS5138794B2/ja not_active Expired
-
1974
- 1974-05-24 SU SU742032843A patent/SU759056A3/en active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS505592A (en) | 1975-01-21 |
JPS5138794B2 (en) | 1976-10-23 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
YAMADA et al. | Taxonomic studies on coryneform bacteria IV. Morphological, cultural, biochemical, and physiological characteristics | |
US4411991A (en) | Process for fermentative production of amino acids | |
KR960705947A (en) | Process for producing substance | |
US8592198B2 (en) | Method for culturing microorganisms on a growth substrate comprising biomass obtained from methanotrophic bacteria | |
JPH044887A (en) | Fermentative production of l-lysine | |
US3929571A (en) | Process for preparing L-lysine | |
Nakao et al. | Microbial Production of l-Glutamic Acid by Glycerol Auxotrophs: Part I. Induction of Glycerol Auxotrophs and Production of l-Glutamic Acid from n-Paraffins | |
EP0151488A2 (en) | Process for producing L-phenylalanine | |
US3729381A (en) | Process for producing l-methionine | |
SU759056A3 (en) | Method of preparing l-lysine | |
US5360731A (en) | Bacteria capable of stereospecifically hydrolyzing R-(-)-2,2-dimethylcyclopropanecarboxamide | |
JPS61146183A (en) | Microorganism containing phenylalanine-dehydrogenase, recovery thereof and production of l-alpha-amino acid | |
JP2817185B2 (en) | Method for producing L-ornithine by fermentation | |
US3668073A (en) | Preparation of l-leucine by fermentation | |
JPH01277495A (en) | Biological conversion of l-thirosine and l-phenylalanin to 2, 5-dihydroxyphenyl acetic acid | |
To et al. | Isolation of a collagenase-producing bacterium from traditional fermented food and its enzyme production | |
JPS6257316B2 (en) | ||
AU706876B2 (en) | Method for producing L-glutamic acid by continuous fermentation | |
KR100264740B1 (en) | A microorganism producing glutamic acid and a producing method of the glutamic acid using the same | |
US5587313A (en) | Method for fermentation of marine bacteria | |
US3201323A (en) | Production of glutamic acid | |
KR100513996B1 (en) | Method for preparing L-glutamic acid by continuous fermentation | |
NL8300224A (en) | PROCESS FOR THE FERMENTATIVE PREPARATION OF L-LEUCINE. | |
Campbell et al. | Characteristics of some psychrophylic bacteria | |
Yamada et al. | Extracellular accumulation of a new amino acid, O-2-hydroxypropylhomoserine, from 1, 2-propanediol by flavobacterium rigense |