SU699016A1

SU699016A1 - Bacillus thuringiensis var.dindro limus c-5 straindendrobacillin producent

Info

Publication number: SU699016A1
Application number: SU782644298A
Authority: SU
Inventors: Борис Патваканович Карабеков; Микаэль Гарегинович Оганесян; Маина Михайловна Скворцова
Priority date: 1978-07-07
Filing date: 1978-07-07
Publication date: 1979-11-25

Description

1one

Изобретение относитс к микробиологическому производству, в частности, к производству бактериальных энтомощадных препаратов, и представл ет собой новый устойчивый к бактериофагам штамм.The invention relates to microbiological production, in particular, to the production of bacterial entomoscidal preparations, and is a new bacteriophage resistant strain.

В производстве энтомицидных бактериальпых препаратов используют различные штаммы Вас. thuringiensis 1 .В числе их штаммы № 497 , № 58. Однако зти производственные штаммы , как и другие штаммы этого вида микроорганизмов , чувствительны к бактериофагам и в производственных услови х часто подвергаютс фаголизису.In the production of bacterial anthomotic drugs, you use various strains. thuringiensis 1. Among their strains are No. 497, No. 58. However, these production strains, like other strains of this type of microorganism, are susceptible to bacteriophages and are often subject to phagolysis under production conditions.

Целью изобретени вл етс получение штамма , устойчивого к встречающимс в производстве бактериофагам и не уступающего по продуктивности и вирулентности примен емому в насто щее врем производственному штамму Вас. thuringiensis var. dendrolimus № 58 2, из которого предлагаемый штамм полученThe aim of the invention is to obtain a strain resistant to bacteriophages encountered in production and not inferior in terms of productivity and virulence to the currently used production strain You. thuringiensis var. dendrolimus No. 58 2, from which the proposed strain is obtained

Предлагаемый штамм имеет следующие ха- рактеристики.The proposed strain has the following characteristics.

Морфологические признаки. Клетки пр мые, палочковидные, размером 3,0-6,0 к 0,8-1,3 мкMorphological signs. Cells are straight, rod-shaped, 3.0-6.0 in size to 0.8-1.3 microns

Подвижные. Встречаютс в виде коротких и длинных цепочек. Грамполож1ггель ты. Образуют овальные споры и ромбоввдные параспориальные включени - кристаллический эндотоксин .Moving They are found in the form of short and long chains. Grampolo1ggel you. They form oval spores and rhombic parasporial inclusions - crystalline endotoxin.

М сопептонный агар. Беловато-кремовые плоские зернистые колонии с ризоид 1ыми кра ми . Колонии легко снимаютс петлей. Пигменты не образуютс .M Sappton agar. Whitish cream flat granular colonies with rhizoid of the 1st margins. Colonies are easily looped off. No pigments are formed.

Физиологические признаки.Physiological signs.

Отношение к кислороду: факультативный аэроб. Максимум роста при температуре 2830°С . Оптимальные значени рН в пределах 7,0-7,4.Attitude to oxygen: optional aerobic. Maximum growth at a temperature of 2830 ° C. The optimum pH values are between 7.0 and 7.4.

Сбраживает глюкозу, крахмал, зскулин, цсллабиозу с образованием кислоты без выделени газа. Не сбраживает сахарозу, маннозу. Уреазу не образует. Обладает протеолитической активностью .Ferments glucose, starch, zsculin, cllabiose with the formation of acid without gas evolution. Does not ferment sucrose, mannose. Ureazu does not form. Possesses proteolytic activity.

Сероаглют1шаци . Специфически аглютинируетс с сывороткой И 4а4б.Seroaglutus. Specifically agglutinated with serum AND 4a4b.

Вирулентен дл гусениц непарного шелкопр да . Обладает устойчивостью к стрептомищ ну в концентрации до 5000 мкг/мл. 369 Устойчив к бактериофагам, выделенным на производстве бактериальных средстй защиты растений (этобактерина и дендробациллина) и не подвергаетс фаголизису при заражении этими фагами в культуре на жидких и плотных питательных средах. Дл получени предлагаемото штамма вначалеиз исходного штамма № 58 был отобран спонтаршый мутант, устойчивьш к стрептомицину . Благодар зтому свойству возникла возможVirulent for caterpillars of unpaired silkworm. Possesses resistance to strepticheski well in a concentration of up to 5000 µg / ml. 369 Resistant to bacteriophages isolated in the production of bacterial plant protection agents (etobacterin and dendrobacillin) and does not undergo phagolysis when infected with these phages in culture on liquid and dense nutrient media. To obtain the proposed strain, a spontaneous streptomycin resistant spontaneous mutant was selected first from the original strain No. 58. Thanks to this property there is a possibility

кость вести направленную селеквдю на получение устойчивых к бактериофагам мутантов. Резистент шй к стрептомицину мутант обрабатывают нитрозогуанвдином в концентращш 100 мкг/мл в течение 30 мин при температуре 30°С в цитратном буфере рН 6,0. Выжившие клетки высе ли на пластинки 2,57о-ного м соИзучение свойств полученного штамма в отношении устойчивости к дев ти бактериофагам Вас. thuringiensis показало, что штамм С-5 устойчив к ним.the bone should be directed to the selection of bacteriophage resistant mutants. The mutant to streptomycin mutant is treated with nitrosoguanvidin in a concentrate of 100 µg / ml for 30 minutes at a temperature of 30 ° С in citrate buffer pH 6.0. The surviving cells were plated onto 2.57 o-mn plates to study the properties of the resulting strain in terms of resistance to nine bacteriophages of Vas. thuringiensis showed that the C-5 strain is resistant to them.

Результаты лабораторных исследований гфедлагаемого и исходного штамма приве;дены в таблице. пептонного агара, содержащего 100 мкг/мл стрегпомицина. Лредварителыю поверхность агара .пропитывают фаголизатом (1,0 х Ю фаговых частиц на 1 мл). Фаголизаты тотов т на исходном чувствительном к стрептомицину штамме N 58. Выросшие колонии отбирают и изучают на устойчивость к различным п|Х)изводствегшым бактериофагам. В результате получают предлагаемый штамм С-5.The results of laboratory studies of the device and initial strain are given in the table. peptone agar containing 100 μg / ml Stregpomycin. The larynual surface of the agar is impregnated with phagolysate (1.0 x Yu phage particles per ml). The phagolysates of the m-ts on the original streptomycin-sensitive strain N 58. Grown colonies are selected and studied for resistance to various n | X) bacteriophages. The result is the proposed strain C-5.

12,7 12.7

48 4848 48

Claims

1.56 1.82 14.5 Testing the strain under production conditions showed good qualities of the proposed strain. Claims of the invention Strain Bacillus thuringiensis var. dendroiim C-5 is a producer of dendrobacillin. It is stored in the Central Museum of Industrial Microorganisms of the All-Union Scientific Research Institute of Hepegics and Selection of Industrial Microorganisms. Morphological signs. Cells are direct rod-shaped, 3.0-6.0 x 0.8-1.3 microns in size. They are mobile, gram-positive. They form oval spores and rhombic parasporial inclusions - crystalline endotoxin. On m-nam-aggon agar forms whitish-cream flat: silky colonies with shrive edges. Colonies are easily looped off. Pigments do not produce.

10 10 10 10 10 10 - 10 10 Physiological signs. Optional zrob. Maximum growth is observed at 280 ° C. The optimum pH values are between 0-7.4. It sprays glucose, starch, zxulin and ellabiozu with the formation of acid without extracting gas}. Does not ferment sucrose, mannose. Possesses proteolytic activity. Ureazu does not form. Seroaglyutknatsi. Specificly agglutinated with serum H 4a4b. Virulent for caterpillars of unpaired silkworm. Resistant to bacteriophages. Sources of information taken into account in the examination 1.Aleshina OA Biological method of dealing with pests and diseases of agricultural plants. M .: - Knowledge, 1975, p. 3337.

2. Takalaev E.V. Microbiologists. 1956, 25, p. 99-102 (prototype).