SU663379A1 - Reagent for lysis of erythrocytes - Google Patents

Reagent for lysis of erythrocytes

Info

Publication number
SU663379A1
SU663379A1 SU762339597A SU2339597A SU663379A1 SU 663379 A1 SU663379 A1 SU 663379A1 SU 762339597 A SU762339597 A SU 762339597A SU 2339597 A SU2339597 A SU 2339597A SU 663379 A1 SU663379 A1 SU 663379A1
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
lysis
reagent
erythrocytes
solution
acid
Prior art date
Application number
SU762339597A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Алексей Аркадьевич Алексеев
Эльвира Семеновна Карпенко
Original Assignee
301 Ордена Красной Звезды Военный Госпиталь
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 301 Ордена Красной Звезды Военный Госпиталь filed Critical 301 Ордена Красной Звезды Военный Госпиталь
Priority to SU762339597A priority Critical patent/SU663379A1/en
Application granted granted Critical
Publication of SU663379A1 publication Critical patent/SU663379A1/en

Links

Description

Изобретение относитс  к области мед цины, а именно гематгшогии.Известен сапонин - реактив дл  гем лиза эритроцитов l. Однако этот реактив не позвол ет ди ференцировать лизис эритроцитов. Целью изобретени   вл етс  дифферен цированный лизис , эритроцитов.Это достигаетс  тем, что реактив со стоит из двух растворов, причем первый содержит уксусную и серную кислоты и перекись водорода, вторсй - пепсин и со л ную, кислоту при следующем количественном соотношении ингредиент,ов г/мл: Первый раствор О.б -2,6 Уксусна  кислота 0,О7-О,48. Серна  кислота Перекись водорода 0,2-2,3 Вода Остальное Второй раствор Пепсин , 0,3-4,0 0,05-3,50 Сол на  кислота Остальное. Сначала готов т первый раствор. В мерный цилиндр наливают 60-80 мл дистиллированной воды и последовательно добавл ют 1 , 5 5 мл пергидроли (29% активного кислорода) О,22 мл концентрированной серной кислоты, 1,6 мл лед нсй уксусной кислоты и довод т дистиллированной водой до 10О мл. В зависимости от процентного содержани  активного кислорода в пергидр оли дл  достижени  оптимального соотношени  пе згидроль добавл ют в следующем количеств ве: Активный кислород,% Пергидроль, мл ,73 271,67 281,60 29.1,55 301,50 311,45 321,40 Затем готов т второй раствор. Дл  этого в ,мерный цилиндр наливают 60-8О мл дистиллированной воды, 0,7 мл сол ной Концентрированной кислоты и довод т дис тиллированной всиой до 100 кт,- з& тёЙ Д ;бавл ют 2,2 г пепсина. Используют 1ерез 2-3 дн  после приготовлени . Растворы хран т в Посуде из темного стекла при Комнатной температуре более мес ца, Изменени  концентрации ингредиентов растворах от оптимального соотношени  ведет к аакономерным изменени м свойст смеси. Изменени  процентного содержанй  уксусной кислоты в определенных пределах не ухудшает свойств слеси, но снижение до 0,8 г/мл и более ведет к замедлению реакции лизиса и к ускоренному разрушению лейкоцитов и тррмбоцитов;повышение концентрации улучшает их сохранность, но ускорени  лизиса эри-гроцитов не наблюдаетс . Снижение процентного соотношени  серной ведет к Замедлению рёакцйй лизиса, а содержание менее 0,О7 г/м к остановке; повышение при неизменной концентрации уксусной кислоты приводит к быстрому разрушению лейкоцитЬв боцитов. Одновременное Повышение и ук сусной кислоты у-лучшаёт их сохранность, йбухудШаетс лизирование эритроцитов СниЖёЧйё ршентИоГО соотношеми  пгереки си водорода ведет с замедлению лизироваНй  эритроцитов, повышение - к затруднению во врем  забора крови и ускоренному разрушению лейкоцитов и тромбоцитов. Исследовани  показали, что лейкоциты и тромбгадиты могут длительное .врем  сохран тьс  в. Первом и втором растворах. реактива. В первом растворе через 5-3О мин и 6 ч,ас после вз ти  крови отсутствует повреждаемость лейкоцитов и тромбоцитов, через 24 час намечаетс  частичноеповреждение тромбоцитов, а затем и лейкоцитов, но такое повреждение позвол ет производить . гтодсчет с обычной точностью. Отсутствие повреждаемости этих клеток может наблюдатьс  и через 48 час в зимнее врей , когдаТ емпература помещени  не превышает 18-20°С. В этих случа х лизирование эритроцитов после добавлени  Второго раствори происходит ранее, чем за 1-2 МИШ и подсчет требуетс  проводить сразу же после просветлени  смеси растворов с кровью. Предлагаемый реактив позвол ет производить лизирование эритроцитов до белКОЁЫХ компонентов и- подсчитывать на аппаратах - сче,тчиках не только лейкоциты, но и тромбоциты. Предлагаемый реактив доступен и дешев и может быть применен в любой лаборатории. Формула р е т е н и   Реактив дл  лизиса Эритроцитов,-о т - личающи|йс  тем, что, с целью дифференцировайиого лизиса эритроцитов, н состоит из двух растворов, причем . ервый содержит уксусную, серную кислоты и перекись водорода, второй пепсин и сол ную кислоту при следующем колиественном соотношении чнгредйентов, г/мл. Первый раствор 0,8-2,6 Уксусна  кислота Серна  кислота 0,07 -0,48 Перекись водорода 0,2 -2,3 Остальное Второй раствор Пепсин 0,3 -4,0 Сол на  кислота 0,05 -3,50 Остальное Источники информации, прин тые во нимание при экспертизе 1. Кост Е. А. Справочник по клиничеким лабораторным методам исследовани . ., 1975, с. 34.This invention relates to the field of medicine, namely hematgogia. A known saponin is a reagent for erythrocyte hem lysis. However, this reagent does not allow differentiation of erythrocyte lysis. The purpose of the invention is differentiated lysis of erythrocytes. This is achieved by the fact that the reagent consists of two solutions, the first one containing acetic and sulfuric acids and hydrogen peroxide, the second is pepsin and solo acid, with the following quantitative ratio / ml: First solution O. -2 -2 Acetic acid 0, O7-O, 48. Sulfuric acid Hydrogen peroxide 0.2-2.3 Water Else The second solution is Pepsin, 0.3-4.0 0.05-3.50 Salt-acid The rest. First, prepare the first solution. 60-80 ml of distilled water are poured into the measuring cylinder, 1.5 5 ml of perhydrol (29% of active oxygen) O, 22 ml of concentrated sulfuric acid, 1.6 ml of ice acetic acid are added successively and brought to 10 O with distilled water. . Depending on the percentage of active oxygen in perhydra ol, in order to achieve the optimum ratio, pehydrol is added in the following amounts: Active oxygen,% Perhydrol, ml, 73 271.67 281.60 29.1.55 301.50 311.45 321.40 A second solution is then prepared. For this purpose, 60-8 O ml of distilled water, 0.7 ml of hydrochloric Concentrated acid are poured into the measuring cylinder and brought to 100 kt in distilled water, s &Teuy; Bavly 2.2 g of pepsin. Use 1–2 days after preparation. The solutions are stored in a dark glass dish at room temperature for more than a month. Changes in the concentration of the ingredients in the solutions from the optimum ratio leads to aaconomeric changes in the properties of the mixture. Changes in the percentage of acetic acid within certain limits do not impair the properties of the slides, but a decrease to 0.8 g / ml or more leads to a slower lysis reaction and accelerated destruction of leukocytes and troutmocytes; is observed. A decrease in the percentage of sulfuric leads to a slowdown in Ryoak lysis, and a content of less than 0, O7 g / m to a halt; an increase at a constant concentration of acetic acid leads to the rapid destruction of leukocyte Bocytes. Simultaneous Enhancement and Acetic Acid Improve Their Preservation, Red Blood Cells Licking Research has shown that leukocytes and thrombgadites can last for a long time. The first and second solutions. reagent. In the first solution, after 5-3 O min and 6 h, ac after blood collection there is no damage to leukocytes and platelets, after 24 hours a partial damage to the platelets and then to leukocytes is planned, but this damage allows to produce. standard count with standard accuracy. The absence of damage to these cells can be observed even after 48 hours in winter, when the temperature of the room does not exceed 18-20 ° C. In these cases, the erythrocyte lysing after the addition of the Second solution occurs earlier than 1-2 MISCs and must be counted immediately after the solution mixture has cleared up with the blood. The proposed reagent allows the lysing of erythrocytes to protein components, and it is possible to count on the apparatus — sy, notch, leukocytes, but also platelets. The proposed reagent is available and cheap and can be applied in any laboratory. The formula of Retien and Reagent for the lysis of the Erythrocytes, -o t is different because, in order to differentiate the erythrocyte lysis, it consists of two solutions, and moreover. The first one contains acetic acid, sulfuric acid and hydrogen peroxide, the second pepsin and hydrochloric acid in the following quantitative ratio of gredyrentov, g / ml. The first solution is 0.8-2.6 Acetic acid Sulfuric acid 0.07 -0.48 Hydrogen peroxide 0.2 -2.3 The rest The second solution Pepsin 0.3 -4.0 Soline acid 0.05 -3.50 The rest Information sources accepted in the examination 1. Kost Ye. A. Reference book on clinical laboratory research methods. ., 1975, p. 34

SU762339597A 1976-03-24 1976-03-24 Reagent for lysis of erythrocytes SU663379A1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU762339597A SU663379A1 (en) 1976-03-24 1976-03-24 Reagent for lysis of erythrocytes

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU762339597A SU663379A1 (en) 1976-03-24 1976-03-24 Reagent for lysis of erythrocytes

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU663379A1 true SU663379A1 (en) 1979-05-25

Family

ID=20654063

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU762339597A SU663379A1 (en) 1976-03-24 1976-03-24 Reagent for lysis of erythrocytes

Country Status (1)

Country Link
SU (1) SU663379A1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0305491A1 (en) * 1987-03-13 1989-03-08 Coulter Electronics System for isolating and identifying leukocytes.
FR2685482A1 (en) * 1991-12-24 1993-06-25 Melet Francois METHOD FOR NUMERATING HEMATIES OR THROMBOCYTES AND DEVICE FOR IMPLEMENTING SAME.

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0305491A1 (en) * 1987-03-13 1989-03-08 Coulter Electronics System for isolating and identifying leukocytes.
EP0305491A4 (en) * 1987-03-13 1991-01-09 Coulter Electronics Inc. System for isolating and identifying leukocytes
FR2685482A1 (en) * 1991-12-24 1993-06-25 Melet Francois METHOD FOR NUMERATING HEMATIES OR THROMBOCYTES AND DEVICE FOR IMPLEMENTING SAME.

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Alper et al. Human C′ 3: evidence for the liver as the primary site of synthesis
Bothwell et al. The determination of iron in plasma or serum
Trinder Rapid determination of salicylate in biological fluids
Vermylen et al. A rapid enzymatic method for assay of fibrinogen fibrin polymerization time (FPT test)
Boger et al. Vitamin B12: correlation of serum concentrations and age
Fredricks et al. Zinc in human blood cells: normal values and abnormalities associated with liver disease
Ewing Clinical pathology of the blood
Vahouny et al. A rapid, quantitative determination of total and free cholesterol with anthrone reagent
SU663379A1 (en) Reagent for lysis of erythrocytes
Kekki Serum protein turnover in experimental hypo-and hyperthyroidism
Kench et al. Haemopoiesis in lead poisoning
Lee et al. The contribution of citrate to the ferroxidase activity of serum
Morris A comparison of methods for the estimation of serum cholesterol and values in random samples of populations in the 55-64 age group
Singer et al. Studies on abnormal hemoglobins: VII. The composition of the non-S hemoglobin fraction in sickle-cell anemia bloods. A comparative quantitative study by the methods of electrophoresis and alkali denaturation
Praetorius Plasma uric acid in aged and young persons
Tomokuni et al. Relationship between activation of delta-aminolevulinic acid dehydratase by heating and blood lead level
Scholander et al. Microdetermination of lactic acid in blood and tissues
US3915643A (en) Determination of salicylate
ALLEN Amino acid accumulation by human reticulocytes
Wandrup et al. The concentration of free calcium ions in capillary blood from neonates on a routine basis using the ICA 1
Patel Semimicro method for determination of serum uric acid using EDTA—hydrazine
Salter et al. Serum'hormonal'iodine in relation to thyroid function and treatment with adrenocorticotrophic hormone (ACTH)
Bayani-Sioson et al. Quantitative studies on the haptoglobin of apparently healthy adult male twins
Zalusky et al. Physiologic response to increased oxygen partial pressure III. Hematopoiesis
Kuhnert et al. Lead and δ-aminolevulinic acid dehydratase in RBC's of urban mothers and fetuses