SU659617A1 - Штамм 147-а -продуцент кислотоустойчивой -амилазы и глюкоамилазы - Google Patents

Description

Полученный штамм имеет следующую морфологическую и физиологическую характеристики Морфологи , У п тисуточной культуры гифы тонкие и толстые,разделенные на рг1вные пр моугольные клетки„ Конидиеносцы бесцветные, несептированные, неветв щиес  размером (330--858) х (6 , б .-13,2),мк, средний их размер ббОх х9,9 мк. Конидиальные головки радиальные . Конидиальные пузырьки круглой формы диаметром 26,4-66,0 мк, средний диаметр 46,2 мк. Стеригмы цилиндрические, двур дные , причем первичные -длиннее вторичных . Размер стеригм первого пор  ка 13, 2--19, 8 мк , в/среднем 15,2 мк, Стеригмы второго пор дка размером 4,0-9,9 мк, в среднем 6,6 мк. На стеригмах расположены конидии круглые, диаметром 4,6-11,5 мк, сре ний диаметр 6,6 мк« Органическа  среда. П тисуточна  гигантска  колони  п-Лоска  кругла , диаметром 9-10.см Конидиальные головки крупные в цент ре колонии, мелкие по краю Конидке ношение обильное светло-коричиевое. Стерильный край, колоний 0,5-1,0 см. Минеральна  среда {г/п}: NaNO,- 4,0; KHjPO - 1,0 крахмал - 20,0; пшеничные отруби -4 Рост колоний в виде гомогенной каши цеобразной массы светло-коричневато цвета. Отношение к источникам углерода Гидролизует амилозу, амилопектин и лодобные поли- и олигосахариды с №-1,6 глюкановой св зью. Наблюдает с  интенсивный рост на среде, содер жащей 1люкозу, сахарозу и мальтозу в ка естве единственного источника углерода. отношение к источ-ника - азота, АЗОТ, нитрата усваивает легче, чем азот аммони . Наиболее интенск ный рост наблюдаетс  на нитратах. Отюшение к источь;икам фосфора. Усваивает разнообразные фосфорные оединени , в том числе и в трехалентной форме. На среде, содержащей крахмал в качестве источника углерода, синтезирует кислотоустойчивую сб -амилазу и глгокоамилазу, в этих же услови х протеолитические ферменты синтезируютс  в следовых количествах. Активность по кислотоустойчивой о{. -амилазе - 1,5 ед/мл, по глюкоамилазе - 12,1 ед/м.п. П р и м е р 1, Штамм AsperdiEEus n-idep 147--А получен путем облучени  ультрафиолетовыми лучами Б дозе 3,2х X Ю эрг/см конидий исходного штаммаAsper iEEusni er 475. Культивирование мутанта проводили на среде следую це:го состава (г/л) : NaNOj4,0 КНрРО 1,0 Mg604 0,5 Крахмал 20,0 Пшеничные отруби4,0 при 30°С на качалке (180 об/мин) в течение 72 час. Посевныг.1 материалом служила суспензи  конидий грибов, выращенных на скошенном сусло-агаре в течение 20 суток. Грибы культивировали в колбах объемом 750 мл, содержащих 150 мл среды. Параллельно выращивали AsperdiEEus 475. Данные лабораторной проверки культуральной жидкости на активность ферментов амилолитического комплекса нами полученного штамма , в сравнении с известньач Aspergi €us niger 475 приведены в табл. 1. АКТИВНОСТЬ об -амилазы определ ли колориметрическим методом Рухл девой и Гор чевой. Активнасть глюкоамилазы-определ ли по ДальквисТ .У, а об активности трансглюкозилазы судили по способности фермента образовывать олигосахара из мальтозы (наличие на хроматограмме п тна изомальтозы и Пановы),

AspergiEBus niger 1,512,1

Aspev 6iEeu6 niger 4750,6512,0

Т а б л и ц а 1

нет

есть Как видно из таблицЕЛ, полученный штамг/1 AspergiEEus njger 147-А, отличающийс  от Asper tEEus nider 475 по морфологическим и биохимическим признакам, .обеспечивает повышенную активность кислотоустойчивой об -ами лазы, а также отсутствие нежелатель ного фермента траксглюкозилазы. Кислотоустойчивую об -амилазу с успехом можно использовать в тех отрасл х пищевой промь иленности и медицины, где процесс прш.5енени  фермента сопр жен с кислым значение рН среды, например, в клебопекарной промьшленности, когда при внесении жидких дрожжей рН среды резко падает . Использование указанного штамма будет эффективно также в спиртовой про / ышленности. При энзимотерапии важную роль играет кислотность желудочного сока подавл ющего активность ферментов, в этих услови х кислотонеустойчи ва  (и -амилаза полностью тер ет активность , в то врем  как ккслотоустойчива  с6 -амилаза со хран ет бол 90% энзиматической активности, Пример2. 8мг ферментного препарата кислотоустойчивой ой По предлагаемому

способу:

препарат из КЖ AspenoiEBus nioen 147-А

По прототипу: амилоризин П10Х

Контрольный вариант

Хлеб выпеченный с добавлением ферментного препарата кислотоустойчивой ci -амилазы и глюкоамилазы из Aspergi&Eus 147-А, отличаетс  лучшими вкусовыми качествами, более замедленным процессом черствени  и более равномерной структурой пористости .

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Штамм AspergiBSus продуцент кислотоустойчивой «, -лмила535

   508

   2,15

   10

   470

   2,36

   зы и глюкоаьжлаэы. Хранитс  в музее коллекции культур Института биохимии растений АН Грузинской СССР. Морфологичебкие признаки, У п тисуточной культуры гкфы тонкие и толстые, разделенные на равные пр моугольные клетки. Кон}здиеносцы бесцветные, несептированные, невет в щиес , размером (330-8Ь8)х(6,б13 ,2)мк, средний размер 660x9,9 мк. Конидиалькые головки радиальные. 17 амилазы и глгокоамилазы Asper iPPiis 147-А, полученного осаждением эти- ловыг 1 спиртом, с aicTHBHocTbro кислотоустойчивой oL: -амилазы-250 ед/г и глюкоамилазы-840 ед/г вместе с 415 мл воды, 10 г хлористого натри  и 20 г дрожжей интенсивно перемешивают с 740 г муки первого сорта до получени  однородного теста, затем став т в термостат () на два чао (перемешивают тесто через каждьзй -iac) . Полученное таким образом тесто дел т на две части и выпекают формовой и подовой хлеб Параллельно в аналогичных условн х выпекают хлеб с добавлением амилоризина П-ЮХ-ферментного препа™ ратау который в насто щее врем  примен етс  в СССР как добавка с целью улучшени  качества хлебобулочных изделий,и контрольный варинт - без добавлени  ферментного препарата, В табл,2 привод тс  данные использовани  ферментных препаратов кислотоустойчивой об -амилазы и глюкоамилазы Asper SBus niger 147-А амилоркзина- ПЮХ и контрольного варианта (без внесени  фермента), Конидиальные пузырьки круглой формы диаметром 26,4-66,0 мк, средний диаметр 46,2 мк. Стеригмы цилиндрические, двур дные , причем первичные длиннее вторичных . Размер стеригм первого пор дка 13/2-19,7мк, в среднем 15,2м Стеригмы второго пор дка размеро 4,6-9,9 мк ;в среднем6,6 мк. На стеригмах расположены конидии круглые, диаметром 4,6-11,5 мк, средний диаметр 6,6 мк. Культуральные признаки. Органическа  среда. П тисуточна  колони  плоска , кругла , диаметром 9-10 см. Конидиальные головки крупные в центре колонии, мелкие по краю. Конидиеношение обильное светлокоричневое . Стерильный край колоний О,5-1,О см. Минеральна  среда (г/л): NoN03-4,0; KHjPqj - 1,Q-, М 50 крахмал - 20,0; пшеничные отруби 4% . Рост колоний в виде гомогенной кашицеобразной массы светло-коричне го цвета. Отношение к источникам углерода Гидролизует амилозу, амилопектин и 8 подобные поли- и олигосахарилы с Л- 1,6 глюкановой св зью. Наблюдаетс  интенсивный рост на среде, содержащей глюкозу или сахарозу или мальтозу в качестве единственного источника углерода. Отношение к источникам азота. АЗОТ нитрата усваивает легче, чем азот аммони . Интенсивный рост наблюдаетс  при использовании нитратов . Отношение к источникам фосфора. Усваивает фосфорные соединени . На среде,содержащей крахмал в качестве источника углерода, синтезирует кислотоустойчивую сО -амилазу и глюкоамилазу , в этих же услови х протеолитические ферменть синтезируютс  в следовых количествах. Предложенный штамм характеризуетс  повышенной активностью, а также отсутствием нежелательного фермента трансглюкозилазы. Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе 1. Прикладна  биохими  и микро1975 , т,Х1, вып.4. биологи