Claims (3)
АКТИНОМИЦЕТА . : Хлористь кальций0,05 : Po.cT ire:ibiioo (рапсовое) масло 0,2 Сухие дрож ш0,3 Од -юнорл- эльий уксусна кз €лота0,5 Среда имеет рН 6,5-7,0. Процесс кул т1шированн ведут при 45°С. Мешалка Еращаетс со скорост.гЗО 320 об/мин. Воздух пощюйд из рас-гета i масть его на 2 част пнтэтельгюй среды в мкк. Спуст 16 час с момеггга начала кулыивиро|ваии содержимое ферментера подвергают сепа рацкн . I Протеазиа актнипость остатка (максималь На ) 6,ii па 1 п. Его кснцентрзфуют, осаж.1тают п йсдворгают вакуук5ной сунтке. : П р и м е р 2. ЗакО сервпрС ааншлй мутант IMST 9515 п BUMS спор 1итамма теркюфгетыюго ак1ино ,1йцета перенос т в качестве прнвгшонюй куль туры с косого агара jsa среда, в состав которой вход т. й9с.%; Сухие дро5кжй0,3 Пегтгон -0,5 Cjcioc оПезжлрениое молоко0,5. Среда имеет sjH 7,0. Процесс су.пьп-1ЕИ5;ова5 и ведут 20 час, после чегО сгюрь смьпзают 0.01%-ным т вин - 80 раствором . Затем полученной ку.Лг) засевают .пгтаlaiLuiiys ) среду, каход цугос в круглой колбе объемом 500 мл, и ocyuiecTSJiiHor в течегтие б час ripii 50°С шкуоа1 ю на круглом качающемс столе. : По; ученную культуру в котпгчестве 5% ИС ; попьзуюг как посевной м щунал, которым засе: вают 4 срме«1-теры объемом 30 л. Поааедние содержат пмтзтельньгй раствор с.ве.а тпп5ето (;ост.5ва. Aiifiiaiii ку1суруззи,П aKCTpaicr Крах ма Хлорид натри Хлорид калыш Растнтелыгое уэапсопое) Сухне дролокн I н; ук:сусна кпспогв Среда ачеет рН 6,8-7р. Во вркглп культкБированн подцерж «ваю1 те.чшературу, равную , Мешалка вращаетс со скоростью 320об/ю1Н. Возедх подвод т из расчета часть его иа 2 части, питательного раствора в . Спуст 20 час с начала культивировани кутьгурзльщто Жидкость сепарируют. Выделенное вещество имеет акт1шно«ль гфотеазь 6,U монь на 1 мл. Фермент Р403{шо йсг О ьэовать в виде конентрата культуры или осадить этанолом или ртзпнческпми сол ми и исло/и.зовать в виде V/; .)го прегмрата. П р и м е р 3. Закоисеро рова1И{ую культуру утант iMETPSlS термофн-гьиого акти омнцета с осого агара пересевают ма среду, содержащую и ю5Й кукурузный экстракт н крахмал. Спуст 0час выранушани при 5б°С споры культуры iVbmaioT до 1% раствором твип-80. I/b-HoA полуеиной суспсизней засевают на среду, вес.%. Пептон0,5 Обезж. молоко0,5 Сухне ,3 Хлористьгй кальций0,05. Культуру нлкубируют на крутлом враащющемс столе ири скорости вращйпн 160 об/Мин. Температура, кульпшнроваин , продолжз телыюсть процесса 3 час. Затем напученную культуру пересевают по 0,5 мл в круглые колбы объемом 5Ш м с гштательной средой, имеющей состав, приведенный в примере 1. Культивирование ве.цут 16 час при на круглом колеблющемс столе, после чего Ш1цегаги удал ют путвм сепарации. В полученном веществе содержитс 0, моль тирозина. П р и м е р 4. Культивируют Tlurmoactinomyces vulgaris МЕТ 9515 iena на питательной среде, содержащей вес,%: Ж дюй кукурузный экстракт0,5 (5 г/л) Крахмал0,5 (5 г/л) Дронс :Т(О,Г (I г/л) Уксусна кислота0,05 (0,5 т/л) Рапсовое масло -0,1 (1,0 г/л) , (.1 г/л) САСЬ0,01 (0,1 г/л) КультийН ова11ие осуш.ествл ют аналошшю ijpiiMepaM к ACTINOMICETA. : Calcium Chloride; 0.05; Po.cT; ire: ibiioo (rapeseed) oil; 0.2 Dry yeast, sh0.3 Od —yunorl-eliy acetic acid; lot0.5 The medium has a pH of 6.5-7.0. The process of cooling is carried out at 45 ° C. Stirrer Erages from speed GZO 320 r / min. The air is out of suit-i its suit for 2 parts of the environmental medium in the MC. After 16 hours from the beginning of the cooking day, the contents of the fermenter are subjected to septic acid. I Protease actuality of the residue (max. Na) 6, ii and 1 p. It is found, precipitated by the vacuum of the suction. : EXAMPLE 2. ZAKO ServprS a mutant of IMST 9515 n BUMS spores 1 titam tercuryrethorn, 1yceta is transported as a culture from oblique aga jsa medium, which is composed of 9%; Dry pe5kzhy0.3 Pegtgon -0.5 Cjcioc o Péglrenie milk 0.5. Wednesday has a sjH of 7.0. The process of su.pp-1EI5; ova5 and lead to 20 hours, after chego syuru is applied with 0.01% t wines - 80 solution. Then, the resulting ku.Lg) are sown. PptalaiLuiiys) medium, as in zugos in a 500 ml round flask, and ocyuiecTSJiiHor during the course of a 50 ° C skewer on a round swinging table. : By; scientific culture in the quality of 5% IP; Use it as a seed sowing shchunal, with which a sowing: wate 4 srme “1-ter of 30 l. Each of them contains a micronized mortar with a bacterium and a php5that (; ref. 5th. Aiifiiaiii k1uruzzi, P aKCTpaicr Collapse of sodium chloride Chloride of calystum Rastntellye ueapsopoe) Sukhen drolokn In; yk: Susan kspogogv Wednesday acheet pH 6,8-7р. During the vortex control, the punch is equal to, the mixer is equal to, the agitator rotates at a speed of 320 rpm. Seduced is based on part of its 2 part, nutrient solution in. After 20 hours from the start of cultivation, the liquid is separated. The isolated substance has an actuality of 6 mg, U per 1 ml. Enzyme R403 {sho Ssg Oveat as a concentrate of culture or precipitated with ethanol or rn-salt salts and isl / i. Call as V /; .) th pregmrata. PRI me R 3. Zakoyerova1I {culture iMETPSlS utant thermofun-hyyogo acti omnett from axial agar was cultured on a medium containing u5Y corn extract n starch. After 0 hours of spraying at 5b ° C, iVbmaioT culture spores up to 1% tweep-80 solution. I / b-HoA polueinoi suspensions sown on medium, wt.%. Peptone 0.5 Go around. milk 0.5 Sukhne, 3 Calcium chloride 0.05. The culture is incubated on a steeply turning table and at a speed of 160 rev / min. The temperature, cultivrovein, continued the body sensation of the process for 3 hours. Then, the cultured culture is subcultured in 0.5 ml into round flasks with a volume of 5 m with a chemical medium having the composition shown in Example 1. Cultivation for about 16 hours with a round oscillating table, after which the broach is removed by separation path. The resulting substance contains 0 mol of tyrosine. PRI me R 4. Cultivate Tlurmoactinomyces vulgaris MET 9515 iena on a nutrient medium containing weight,%: W inc corn extract 0.5 (5 g / l) Starch 0.5 (5 g / l) Drons: T (O, G (I g / l) Acetic acid 0.05 (0.5 t / l) Rapeseed oil -0.1 (1.0 g / l), (.1 g / l) CAC0.01 (0.1 g / l) CultNia ovine dehydrated. analogue ijpiiMepaM to
2. В полученном кульгуралыю л растворе активность прогеазы составл ет 0.7/ моль на I мл, П р ${ м е р 5. При нспользоЕзгшк гаггателыюй среды, состо щей нэ %: жндк:ого кукурузного экстракта 3, крахмала э, дрожжей 3, уксусной кислоты 3, растительного .мзста 3, NaCi 2. In the resulting cultured solution, the activity of the progease is 0.7 / mole per I ml, Pp $ {me 5). When using an aggre- gated medium consisting of ne%: zhndk: th corn extract 3, starch e, yeast 3, acetic acid 3, vegetable. station 3, NaCi
3... CACJj 2 si при культиви{юва1ши, привед81шорл в примерах 1 2. nonyiiaioT культур-зльньй раствор с акгиБНОсПзЮ протеазы 1,3 Д1 моль на мл. Процентн :.га вьгход термо стабильной протеазы при культнвированш на предложенной питате .гьиой среде в сравнении с известными питательными qзeдaf.tк з Еаздг1 ельно выше. При K TibTiiBiipoBa«}ffl Thermoactinomyces vutgsns на известньи питательных средах получ-аетс 3 ,1 5отеолит1 ческн а сиганых компонента , i3 «.дат-эрьк только один взшегс термостабатьным . Колнчес-гво этого одашго KOivfiioneirra не установлено. 564353 Примен емый в приведенных примерах штамм был депонирован 13 ма 1971 г. Центоаль- , ным институтом Ernatirungr Potsdam АИ ГДР, ему был дан номер 217 des aLd Junei of Cofctections 6i Vicroorgfanisms. Штамм 5 .был обозначен тiiermoact-inomsces vuegotris 94-2, В инсттуте он имеет номер ЗМЕТ-9515, Формула изобретени ю Питательна q)eдa дл культивирозанк термофильного актиномицетз, содержаща ксючанки углерода, органического азота, зшористый кальций, хлористый натрий и воду, отлнчак - tS ща с тем, что, с целью повышею1 выхода целевого продукта, в питательную среау допош1ктельно ввод т жидкий кукурузный экстракт, растительное масло и уксусную кислоту, а в качестве источника углерода используют крахмал, а в качестве источника оргшшческого азота дрожжевой прюдукт при следующем соотношен5 и компонентов , в %: Жидкий кукурузный экстракт0,5-3,0 Крахмал0,5-5,0 Дрожжевой продукт0,1-3,0 Растительное масло0,05-3,0 Хлористый нат}Н1Й0,1 -3,0 Хлористый кальций0,05-2,0 Уксусна Ю1слота0,1-1,0 ВодаОсталыюе. Источники информаш1Н, притштые во вкимашге при экспертизе 1. Патент СССР hP 350266, кл.С 12 О 13/10, 1972. 2,Jqurnat of BacteHoeogs 19, 149-155.3 ... CACJj 2 si with a cultured {yuv1shi, reduced 81 shears in examples 1 2. NonyiiaioT culture is a diluted solution with aqBITH protease 1.3 D1 mol per ml. Percentage: a hedge of a thermo-stable protease when cultured on the proposed nutrient medium compared with the known nutrient nutrients is higher. With K TibTiiBiipoBa "} ffl Thermoactinomyces vutgsns on lime nutrient media, 3, 1 5 theolitical and scanty components, i3". Erk-erk component, are obtained, which is only thermally stable. The colniches-guvo of this one KOivfiioneirra is not established. 564353 The strain used in the examples was deposited on May 13, 1971 by the Centoral Institute of Ernatirungr Potsdam AI GDR, it was given the number 217 des aLd Junei of Cofctections 6i Vicroorgfanisms. The strain denoted tiiermoact .byl 5-inomsces vuegotris 94-2, In insttute it has number ZMET-9515, The nutritional formula of the invention w q) for eda kultivirozank thermophile aktinomitsetz comprising carbon ksyuchanki, organic nitrogen zshoristy calcium, sodium chloride and water, otlnchak - tS due to the fact that, in order to increase the yield of the target product, liquid corn extract, vegetable oil and acetic acid are pre-injected into the nutritional environment, and starch is used as a carbon source, and yeast product with the following ratios5 and components, in%: Liquid corn extract 0.5-3.0 Starch 0.5-5.0 Yeast product 0.1-3.0 Vegetable oil 0.05-3.0 Natrium chloride} H1-0-3 , 0 Calcium chloride 0.05-2.0 Acetic acid Slow-0.1-1.0 Water Residual. Sources of information nested in the metropolitan during examination 1. USSR patent hP 350266, class C. 12 O 13/10, 1972. 2, Jqurnat of Bacte Hoeogs 19, 149-155.