SU616568A1 - Устройство дл электрофоретического разделени веществ - Google Patents

Description

(54) УСТРЮЙСТВО ДЛЯ ЭПЕКТРОФОРЕТИЧЕСКСЯХ) РАЗДЕЛЕНИЯ ВЕШЕСТВ

Изобрегенне относигс  к элекгрофоре. ганеским аппаратам, примен емым в иоследовани х биол (зачески акгивных вещестъ дл  осушествпеюш процесса эл сгрс эаюировани  их вз гел  после разделени  методом 9лек1рофореза, и предназначено дл  применени  в биологии, медицине , биохимии, химии и г. д.

Известны аппараты дл  элекгроэпюшш , содержащие камеру с электродами 0 полупроницаемые Til.

Однако в таких аппаратах выход эпюируемых компонентов не превышает 65%. В них невозможно получить раздельные малые фракции образуклцие в геле узкие, близкорасположенные зоны, а врем  элюоии продолжшгельио.

Известен аппарат дЛ  плектрофорет ческ(Л эпюции, содержащий корпус, состое ший из двух электродных сосудов с гориз октальными электродами, расположенными один над другим, причем дно верхнеГ )) сосуда снабжено элюируюшей  чейкой, разделенной перегородк в виде сетки на два отделени  Г2. Верхнее отделение

имеет болыиийЫ$ъем и предназначено дл  гел , а нижнее с меньшим объемом дл  сбора.выделенных фракций. Нижнее 01 деление снизу шраничено полупроницаемой мембраной, установленной с зазором относительно сетки и герметично прижатой к телу  чейки ушютнительным кольцом . Дл  вывода элк 1р ге1Л 1х фракций в ниж:1ем отделении  чейки предусмотрев штуиер слива.

Однако и этот аппарат не обеспечивает полноты отбора и возможности увеличь шга концентрации вьзделенных. фракций.

Концентраци  белка в элюатах завис т от объема нижнего отделени  элюционн(Л  чейки, служащей дл  сбора и коыцентр ровашш белкюых фракций, и гем выше, чем меньше объем последнего. В извес1и иом аппарате вэменен е этого объема невоэмпкио, чго св зано с иеабход мостью размешэнв  с стекш отбора вь деленных /рела Л

Кроме , при 0р1 ведевт1 алектроалюировашп п овсхолвг процесс оседани  мосщрдгемых компове гов ыа ао у проницаемую мембрану, вызванный дейсгвкем эпекгрического гока и  влением элекгродекангации. Вследсгвие чего в известном аппарате дл  полного огбора выделенных компонентов необходимо прсн. ведение цикла вымывани  осажденных фра ций буферным раствором, чго приводит к снижению .концентрации бедка в эпюатах Цель изобретени  - увеличение концен трации и полно1ы огбора выделенных фрак ЦИЁО Это достигаетс  тем, что дополнитель но устансшлена втора  перегородка в виде сетки, служаща  псщложкой дл  полупроницаемой ме8лбраны, а штуцер дл  от бора выделенных фракций размещен в ценгре . На фиг. 1 изображено предлагаемое устройство в разрезе, сйишй вид; на фнг. 2 о- эшоагонна   чейка, рабочее положение. Усгр(сгво содержит верхний 1 0 ниж ний 2 энектройные сосуды с горизонгаш нымн 3, pacnont ieиными один над кругам. Крышка 4 нижнего сосу да 2 имеет  чейку 5 дл  помещени  геп , образованную резиновым съемным кольцом 6. Сверху  чейка 5 отделена от верхнего электродного сосуда 1 перегородкой в виде армированной сепси 7. Снизу  чейка 5 ограничена перегородкой 8, к которой вплотную прилегает полупроницаема  мембрана 9 с подложкой 10 выполнейИЕй также в вкде сетки и служащей дл  ограничени  прогиба мембраны 9 и сокраненн  постшшным объема этоционн;  чейки 11. Все ежи вместе скреп лены по периметру нижнего элекгродного сосуда 2 уплопштвльной гайкой 12 так, что при заполнении устрсйства гелем и буфершлмй растворамш образуют элюционную  чейку 11 дл  сбора элюиру& мых фракций. В центре мембрань 9 размешен шту цер отбора ш 1деаен 1ых 1 : акаий, который выполнен ъз свликоноьой резнны разборным , из двух часгей сщна из которых вверху имеет воронкообраэвую форму .13 в размещена на. виутренней пстерхиости мембрашы 9. На цшшндрвческс: части штуцера выполнен прилив 14, которому втора  часть в виде кольца 15 плотно прижата а наружной поверхности полупроницаемой мембраны 9. Устройство рйботаег следующим образом .Вырезанные нз блока полвакриламидно гад  фракции, подлежащие алюированию размельчаю ре  и пми1ещаютс  в  чейку 5 Эдекгродные сосуда 1 в 2 герметично Скрепл ютс  между собой и запольшюгс  буферным раствором гак, чтобы электроды 3 были полностью погружены в буфер. Под дейсгвием выпр мленного напр жени , поданного на электроды 3, белковые компоненты мигрируют из гел  через сегку 7 к полупроницаемой мем°бране 9 и cKai ливаютс  в центре элюционной  чейки 11, откуда вывод тс  по истечении времени элюции через Ш1уцер отбора Предлагаемое устройство, благодар  усганоысе полупроницаемой мембраны между двум  сепсами, одна из которых служит подложксйд скреплению их совмесгно по периметру крышки нижнего электродного сосуда, позвол ет образовать  чейку дл  элюируемых фракций путем прогиба полупроницаемой мембраны. Дл  поддержани  посто нного прогиба использована подложка, выполненна  в вид$ cei ки, котора  позвол ет ограниолгь прогиб мембраны а тем самым создает возможность получить элюируе 1ые фракций высокой конценграции в минимальном объеме, Дл  полноты огбора выделенных фракц й штуцер установлен непосредсгвенно на мембране, а го, что он выполнен из силиконовой рез0иы и разборным, обеспечивает легкое укрепление его непосредс венно на поверхности feмбpaEЫ и полную герметизацшо сгедннешщ без специальных прокладок и креплений. Така  консгрук ци  создает удобства при эксплуатации устройства, а именно, обеспечивает лег. кос1ъ разборки его дл  -проведени  очиср KB и стершшзации. Формул/а изобретени  Усгройс1 во дл  эл©ктрЕ)форетического разделени  веществ, содёрткашее верхний и нижшай элекгродшле сосуды с горизонтальными злектродамв, расположенными один над другим, полупроницаемую мембрану , перегородку в виде сетки, усга- новленную над полупроницаемой мембраной , и шгуцер дл  отбора вьзде енных фраков, отличающеес  гем, что, с целью повышени  полноты отбора в ЕоиценграцввЕ выделенных фракций, в нем допо нигельно установлена втора  перегородка в виде сетки, под- ложкойдл  полупроницаемой мембраны, а шгуцер дл  отбора вьщеленных фракций размещен в центре мембраны, Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе: 1. Патент США Nfc 3255100, кп. 204. 180, 1960. - 2. За вка № 2080651/26 от 26.05,76 по которой пршшто решение о выдаче  вгопского сви егельства.