SU450798A1

SU450798A1 - Coumarin Separation Method

Info

Publication number: SU450798A1
Application number: SU1757466A
Authority: SU
Inventors: Ипполит Ипполитович Мониава; Мери Дурусовна Алания; Дурмишхан Гиоргиевич Турабелидзе; Этери Петровна Кемертелидзе
Original assignee: Институт Фармакологии Им.И.Г.Кутателадзе Академии Наук Грузинской Сср
Priority date: 1972-03-10
Filing date: 1972-03-10
Publication date: 1974-11-25

Description

1one

Изобретение относитс к способу разделени кумаринов, которые наход т широкое применение в фармакологии.This invention relates to a method for the separation of coumarins, which are widely used in pharmacology.

Кумарины получают из растительных веществ , в которых зачастую они содержатс в виде комплекса. Выделение н разделение кумаринов на индивидуальные компоне1Лы св заны с трудност ми. Дл разделени суммы кумаринов широко примен ютс колоночнохроматографические методы, чаще всего на нейтральной или кислой окиси алюмини .Coumarins are obtained from plant substances, in which they are often contained as a complex. The isolation and separation of coumarins into individual components is associated with difficulties. Column chromatography methods, most often on neutral or acid alumina, are widely used to separate the amount of coumarins.

Ввиду глубокой адсорбции кумаринов на окиси алюмини не достигаетс их полное элюирование. В то же самое врем процесс разделени длителен и требует большого количества разнообразных органических растворителей . Эффект разделени недостаточен: из сложного комплекса кумаринов только некоторые составные части можно получить в индивидуальном виде.Due to the deep adsorption of coumarins on alumina, their complete elution is not achieved. At the same time, the separation process is long and requires a large variety of organic solvents. The separation effect is insufficient: from a complex coumarin complex, only some of the constituent parts can be obtained individually.

Цель изобретени - интенсификаци процесса ч повышение .выхода кумаринов.The purpose of the invention is to intensify the process of increasing the yield of coumarins.

Дл этого разделение кумаринов провод т распределительной хроматографией на липофильном гель-адсорбенте сефадексе L Н-20 путем использовани его способности набухать в разных растворител х, например в 80%-ном метаноле, что дает возможностьFor this, the separation of coumarins is carried out by partition chromatography on the lipophilic gel adsorbent Sephadex L H-20 by using its ability to swell in different solvents, for example in 80% methanol, which allows

создать одну из фаз, в частности стационарную , а в качестве подвижной фазы, элюирующей кумарины из колонки, примен ют другие , не смешивающиес со стационарной фаЗОЙ растворители, например петролейный э-фир.To create one of the phases, in particular the stationary one, and other solvents that are not miscible with the stationary phase, for example, petroleum e-firm, are used as the mobile phase eluting coumarins from the column.

Используемые дл разделени флавонондов II катехинов сефадексы марки «G набухают только в воде и не набухают в органическихUsed for the separation of flavononds II catechins, Sephadexes of the “G” brand swell only in water and do not swell in organic

растворител х, что исключает возможность создани неподвижной фазы в виде органических растворителей н, в частности, в виде метанола . В отличие от сефадексов марки «G, в органических растворител х набухают липофильные сефадексы, например сефадекс LH-20. Использование неподвижной фазы в виде спирта при разделении кумаринов в данном случае вл етс об зательным, так как кумарины в основном раствор ютс в сп;фтахsolvents, which excludes the possibility of creating a stationary phase in the form of organic solvents and, in particular, in the form of methanol. Unlike Sephadexes of the G mark, lipophilic Sephadexes, for example, Sephadex LH-20, swell in organic solvents. The use of the stationary phase in the form of an alcohol in the separation of coumarins in this case is imperative, since coumarins mostly dissolve in sp;

и практически не раствор ютс в воде.and practically insoluble in water.

Поэтому сефадексы марки «G не могут быть использованы дл разделени кумарпнов .Therefore, Sephadexes of the "G" brand cannot be used to separate the coumarpnas.

Только использование липофильного сефадекса LH-20 дает возможность создать неподвижную фазу Б виде метанола, котора в зависимости от степени растворимости задерживает отдельные кумарины и .при элюнровании органическими растворител ми позвол етOnly the use of lipophilic Sephadex LH-20 makes it possible to create a stationary phase B in the form of methanol, which, depending on the degree of solubility, detains individual coumarins and, when eluted with organic solvents, allows

получить индивидуальные кумарины.get individual coumarins.

Таким образом, дл подвижной и неподвиж .(юй фаз используют органические растворители .Thus, organic and mobile solvents are used for the mobile and immobile phases.

Дл создани двух несмвшивающихс фаз, необходимых в распределительной хроматографии дл разделени кумаринов и фурокумаринов , иснользуют соответственно нижнюю и верхнюю части системы растворителей 80%-ный метанол петролейный эфир (1:1). Разделение суммы кумаринов и фурокумаРИ .НОВ. Выделенную из метанольного экстракта корней Heracleum wilhelmsii техническую сумму кумаринов и фурокумаринов подвергают очистке на кислой окиси алюмини .To create two non-mixing phases required in distribution chromatography for separating coumarins and furocoumarins, the lower and upper parts of the solvent system are used, respectively, 80% methanol petroleum ether (1: 1). The separation of the amount of coumarins and furokumari .NOV. The technical amount of coumarins and furocoumarins, isolated from the methanolic extract of the roots of Heracleum wilhelmsii, is purified on acidic alumina.

45 г сефадекса LH-200 перемешивают с нижней частью системы 80%-ный метаиол- петролейный эфир (1 : 1), оставл ют на 1 час и набухший адсорбент перенос т на колонку (,I см).45 g of Sephadex LH-200 is mixed with the lower part of the system 80% methiol-petroleum ether (1: 1), left for 1 hour and the swollen adsorbent is transferred to the column (I cm).

Через колонку пропускают верхнюю часть системы. 2,0 г указанной суммы кумаринов раствор ют в 15 мл 80%-ного метанола, смешивают с 5 г сефадекса (той же марки) и перенос т на приготовленную колонку. Элюирование нровод т верхней частью системы. Фракции собирают ио 100 мл. Таким иутем все 8 кумариновых соединений, вход щих в сумму, получают в индивидуальном виде, причем распределение отдельных кумарннов на адсорбенте настолько четко, что в процессе вымывани между отдельными компонентами получают несколько пустых фракций.Through the column pass the upper part of the system. 2.0 g of this amount of coumarins is dissolved in 15 ml of 80% methanol, mixed with 5 g of sephadex (of the same brand) and transferred to a prepared column. Elution is carried out at the top of the system. Fractions are collected by about 100 ml. Thus, all 8 coumarin compounds included in the sum are obtained individually, and the distribution of the individual coumarins on the adsorbent is so clear that in the process of leaching between the individual components, several empty fractions are obtained.

Выделение вешеств, г Остол0,264Allocation of substance, Ostol0,264

Пимпинеллин0,009Pimpinellin0.009

Изобергаптен0,345Isobergapten 0.345

Ангелидин0,441Angelidin0,441

Бергаптен0,011Bergapten0.011

Псорален0,340Psoralen 0.340

Изонимпинеллин0,370Izonympinellin0,370

Сфондин0,112.Spondin 0.112.

Общий выход составл ет 94,6% содержащихс в технической сумме кумаринов.The total yield is 94.6% of the technical sum of coumarins.

По такой же схеме раздел ют неочищенную сумму кумаринов из кормей Н. wilhelmsii. Изолированы в названных, а также суберозин и бергаптол в индивидуальном виде. Эффективность разделени суммы кумаринов достигаетс в чистой и неочищенной сумме кумаринов, что не только исключает необходимость предварительной обработки ее дл очистки су.ммы кумаринов, но и в некоторых случа х даже можно считать единственным путе.м дл получени некоторых индивидуальных веществ, нанример выделенных суберозина и бергаптола, которые сильно адсорбируютс на окиси алюмини и поэтому не выдел ютс .According to the same scheme, the unpurified amount of coumarins from H. wilhelmsii feeds is separated. Isolated in the named, as well as suberosin and bergaptol individually. The efficiency of separation of the amount of coumarins is achieved in a clean and unpurified amount of coumarins, which not only eliminates the need for pretreatment of it to purify the su.mma of coumarins, but in some cases can even be considered the only way to obtain some individual substances, such as the isolated suberosin and bergaptol, which strongly adsorb onto alumina and therefore are not released.

Предлагаемый способ целесообразно атриг .ен ть дл разделени оксикумаринов н ихThe proposed method is advantageously attributed to the separation of oxycoumarins and their

гликозидов, только с заменой растворителейglycosides, only with the replacement of solvents

на хлороформ-бутанол-вода (3:3:2) приon chloroform-butanol-water (3: 3: 2) at

сохранении той же технологии.keeping the same technology.

Предмет изобретени Subject invention

Способ разделени кумаринов распределительной хроматографией, отличающийс A method of separating coumarins by partition chromatography, characterized by

тем, что, с целью интенсификации процесса и повышени выхода кумаринов, разделение провод т на липофильном гель-адсорбенте сефадексе LH-20 размещением его в одной из фаз двух несмешивающихс между собой растворителей , например петролейного эфира - 80%-ного метанола, в метаноле с последующим элюированием кумаринов из колонки второй фазой этой же системы растворителей.so that, in order to intensify the process and increase the yield of coumarins, the separation is carried out on the lipophilic gel adsorbent Sephadex LH-20 by placing it in one of the phases of two immiscible solvents, for example, petroleum ether - 80% methanol, in methanol the subsequent elution of coumarins from the column with the second phase of the same solvent system.