SU211030A1 - Способ определения количества пепсина - Google Patents
Способ определения количества пепсинаInfo
- Publication number
- SU211030A1 SU211030A1 SU1113326A SU1113326A SU211030A1 SU 211030 A1 SU211030 A1 SU 211030A1 SU 1113326 A SU1113326 A SU 1113326A SU 1113326 A SU1113326 A SU 1113326A SU 211030 A1 SU211030 A1 SU 211030A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- solution
- pepsin
- milk
- standard
- amount
- Prior art date
Links
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 22
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 claims description 19
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 claims description 19
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 18
- 210000004080 Milk Anatomy 0.000 claims description 10
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 10
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 9
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 claims description 9
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- 229960000583 Acetic Acid Drugs 0.000 claims description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 claims description 3
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 claims description 3
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 claims description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000011121 sodium hydroxide Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 4
- 210000002966 Serum Anatomy 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 2
- 229940088598 Enzyme Drugs 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
Description
Известен способ определени количества пепсина в препаратах, его содержащих, согласно которому готов т раствор эталона и раствор испытуемого препарата и этими растворами (порознь) воздействуют на пробу молока , предварительно стабилизированную ацетатным буфером (водным раствором смеси лед ной уксусной кислоты и едкого натра), замер при этом продолжительность свертывани молока и определ расчетным путем количества фермента (в условных единицах).
Дл определени количества пепсина в весовых единицах и упрощени способа раствор испытуемого препарата и раствор эталона перед воздействием на пробу молока стабилизируют ацетатным буфером, при этом в раствор эталона одновременно со стабилизатором ввод т глицерин. В качестве раствора эталона следует использовать раствор аморфного пепсина.
Способ состоит в следующем.
Готов т ацетатный буфер из 92 г лед ной уксусной кислоты и 45 г едкого натра, дл чего их раствор ют в дистиллированной воде, довод общий объем до 1000 мл. Хран т приготовленный раствор в закрытом виде. Затем из 20 мг чистого аморфного пепсина, который помещают в 200 мл колбу, приготовл ют раствор . Дл этого приливают 50 мл ацетатного буфера и 50 мл дистиллированной воды. Раствор ют пепсин, приливают 80 мл глицерина, размещивают и довод т до метки дистиллированной водой. В 1 мл приготовленного раствора содержитс 0,1 мг чистого свиного пепсина . Раствор эталона стоек при хранении в темноте и на холоде.
Готов т молочно-ацетатную смесь, т. е. пробу свежего коровьего молока, которую смешивают пополам с ацетатным буфером (рН не должен быть ниже 5) и став т на хо- лод. После отсто сливок смесь сливают сифоном . Срок хранени этой смеси на холоде около двух недель. Затем приготавливают раствор испытуемого препарата.
В зависимости от вида препарата пепсина (сывороточного, пищевого или медицинского) мен етс методика приготовлени раствора. Так, препарат сывороточного пепсина отвешивают в количестве 1 г, раствор ют в колбе литрового объема, прилива в нее 100 мл ацетатного буфера, после чего дистиллированной водой объем содержимого довод т до метки.
Концентраци приготовленного раствора составл ет 0,1 %.
Приготовление раствора препаратов пищевого пепсина и медицинского отличаетс дозировкой этих препаратов, соответственно составл ющей 2 г и 5 г, что в свою очередь обеспечивает получение растворов 0,2 и 0,5%ной концентрации.
От растворов эталона и испытуемого препарата отливают в пробирки по 0,1 мл, причем температура растворов должна быть равна 25°С. В другие пробирки наливают по о мл молочно-ацетатной смеси. Затем раствор эталона и раствор испытуемого препарата порознь приливают в пробирки с молочной смесью . Замечают врем начала испытани и врем по влени на стенках пробирок едва заметных хлопьев казеина. Продолжительность свертывани молока в параллельных определени х может отличатьс на 2-3 сек. Затем расчетным путем определ ют содержание пеисина в испытуемом препарате.
Дл этого полученные данные подставл ют в формулу
Ya.
Х b
где X - количество пепсина в 1 мл испытуемого раствора, в мг;
У - количество пепсина в растворе эталона в мг;
а - продолжительность створаживани
молока под действием эталона в сек;
b - продолжительность створаживани
молока под действием испытуемого
раствора в сек.
Пример 1. Анализировали препарат сывороточного пепсина. При этом получили а - 70 сек, b - 88 сек. Если У 0,1%, то
А 0,0795 мг/мл. 88
Так как готовили 0,1%-ный испытуемый раствор , то содержание пепсина в сухом препарате составл ет 7,95%.
Пример 2. Анализировали препарат медицинского пепсина. Полученные данные составили а - 70 сек, b - 140 сек; так как У 0,1%, то
А:
: : 0,05 мг/мл . 140
Содержание пепсина в сухом препарате (был приготовлен 0,5%-ный раствор) равно 1%.
Предмет изобретени
Claims (2)
1.Способ определени количества пепсина в препаратах его содержащих путем раздельного воздействи раствора эталона и раствора испытуемого препарата на пробу молока,
стабилизированного ацетатным буфером (водным раствором смеси лед ной уксусной кислоты и едкого натра), с последующим замером продолжительности свертывани молока и расчетом количества пепсина, отличающийс тем, что, с целью определени количества пепсина в весовых единицах (миллиграммах) и упрощени способа, раствор испытуемого препарата и раствор эталона перед воздействием на пробу молока стабилизируют ацетатным буфером, при этом в раствор эталона одновременно со стабилизатором ввод т глицерин .
2.Способ по п. 1, отличающийс тем, что, в качестве раствора эталона используют раствор аморфного пепсина.
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU211030A1 true SU211030A1 (ru) |
Family
ID=
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Shannon | The control of the renal excretion of water: I. the effect of variations in the state of hydration on water excretion in dogs with diabetes insipidus | |
Powell et al. | Normalization of plasma arginine vasopressin concentrations when children with meningitis are given maintenance plus replacement fluid therapy | |
BALL et al. | A Manometric Assay Of Insulin And Some Results Of The Application Of The Method To Sera And Isletcontaining tissues | |
Burch et al. | Improved method for measurement of delta-aminolevulinic acid dehydratase activity of human erythrocytes | |
Shetlar et al. | Determination of serum polysaccharides by the tryptophane reaction. | |
Henderson et al. | The effects of chronic and acute alcohol administration on fetal development in the rat | |
Tsang et al. | Neonatal parathyroid function: role of gestational age and postnatal age | |
Beard et al. | Fluid and electrolyte balance during acute withdrawal in chronic alcoholic patients | |
US3983004A (en) | Preparation of a diagnostic agent for measuring the coagulability of blood | |
Brady et al. | Insulin binding and sensitivity in rat skeletal muscle: effect of starvation | |
Nakanishi et al. | Effect of acidosis on contractile function in the newborn rabbit heart | |
US4164573A (en) | Composition and method for making a suppository for introducing a hypoglycemic agent into a mammal | |
Magnusson et al. | Glucose metabolism in the human preterm and term placenta of IUGR fetuses | |
Smith | The in vitro absorption of water and solutes from the intestine of goldfish, Carassius auratus | |
Rygielski et al. | Erythrocyte ghost Na+, K+-ATPase and blood pressure. | |
SU211030A1 (ru) | Способ определения количества пепсина | |
Kippen et al. | Effects of renal fuels on uptake of PAH and uric acid by separated renal tubules of the rabbit | |
Tatum | Alkaline reserve capacity of whole blood and carbohydrate mobilization as affected by hemorrhage | |
Jähnchen et al. | Determination of phenylbutazone in plasma | |
De la Huerga et al. | Standardized reagent for thymol turbidity test | |
CN113834942B (zh) | 一种胎盘生长因子质控品及其制备方法 | |
Eriksson et al. | Effect of age and body weight on neurohumoral variables in healthy Cavalier King Charles spaniels | |
Okuda et al. | Polarographic microdetermination of d-glucose anomers with β-d-glucose oxidase | |
Lawrie | The excretion of l (—)-tyrosine in urine | |
CN112098663B (zh) | 保持维生素d水溶液稳定的组合物及其制备方法和应用 |