SU1761806A1 - Фрагмент ДНК - Google Patents

Фрагмент ДНК Download PDF

Info

Publication number
SU1761806A1
SU1761806A1 SU904854156A SU4854156A SU1761806A1 SU 1761806 A1 SU1761806 A1 SU 1761806A1 SU 904854156 A SU904854156 A SU 904854156A SU 4854156 A SU4854156 A SU 4854156A SU 1761806 A1 SU1761806 A1 SU 1761806A1
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
ala
leu
glu
gly
glv
Prior art date
Application number
SU904854156A
Other languages
English (en)
Inventor
Сергей Борисович Вакуленко
Елена Геннадиевна Энтина
Инесса Петровна Фомина
Сергей Михайлович Навашин
Original Assignee
Всесоюзный научно-исследовательский институт антибиотиков
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Всесоюзный научно-исследовательский институт антибиотиков filed Critical Всесоюзный научно-исследовательский институт антибиотиков
Priority to SU904854156A priority Critical patent/SU1761806A1/ru
Priority to SU904854156D priority patent/SU1761807A1/ru
Application granted granted Critical
Publication of SU1761806A1 publication Critical patent/SU1761806A1/ru

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Использование: биотехнологи , генетическа  инженери . Сущность изобретени : из R-плазмиды трансконьюгата клинического штамма E.coli выделена детерминанта рези- стентности к гентомицину размером 2273 п.н., содержаща  неизвестный ранее ген аасС2а, определена нуклеотидна  последовательность этой детерминанты. 2 табл.

Description

Изобретение относитс  к биотехнологии , в частности к генетической инженерии, и представл ет собой фрагмент ДНК, обусловливающий синтез З -аминогликозидаце- тилтрансферазы.
3 -аминогликозидацетилтрансфераза - фермент, продуцируемый клиническими штаммами микроорганизмов и обусловливающий инактивацию таких клинически важных антибиотиков, как гентамицин, тоб- рамицин, сизомицин и нетилмицин, в результате чего продуцирующий этот фермент штамм микроорганизма приобретает рези- стентность к перечисленным антибиотикам.
Известны детерминанты резистентное™, кодирующие гены аасС2 и продуцирующие фермент ААС(3)-11. Гены аасС2 выделены из штаммов, распространенных в Чили и Нидерландах .
На основании известной нуклеотидной последовательности сконструирован ДНК- зонд, представл ющий собой Sphl-Sall фрагмент ДНК размером 0,8 т.п.н.
Целью изобретени   вл етс  создание ДНК-зонда дл  вы влени  неизвестного ранее гена аасС2а.
Типы аминогликозидинактивирующих ферментов можно определить по профилю резистентности штаммов к аминогликозид- ным антибиотикам. По профилю резистентности , детерминанта устойчивости, клонированна  нами, кодирует фермент типа ААС(3)-11а, не описанный ранее и отличающийс  по профилю резистентности от фермента типа ААС(3)-11 более высоким уровнем резистентности к изепамицину - аминогликозиду, используемому дл  определени  типов ферментов, инактивирующих гентамицин.
Дл  вы влени  штаммов микроорганизмов, содержащих ген, кодирующий фермент ААС(3)- 11 а, необходимо выделить детерминанту резистентности содержащую распространенный в СССР ген З -аминогликозидацетилтрансферазы типа 11а и на основании его нуклеотидной последовательности сконструировать ДНК-зонд. Этот зонд, используемый дл  вы влени  гена аасС2 в клинических штаммах микроорга (Л
ч о
00
о
о
низмов, может примен тьс  в химиотерапии гнойно-септических и особо опасных инфекций.
Дл  достижени  поставленной цели из R-плазмиды трансконъюганта штамма E.coli, продуцирующего фермент ААС(З)- 11 а, клонирована детерминанта резистент- ности к гентамицину, представл юща  собой Hind III фрагмент размером около 2,3 т.п.н., и при помощи метода Сангера определена нуклеотидна  последовательность этой детерминанты резистентности. Нуклеотидна  последовательность Hind III фрагмента содержащего ген аасС2а, приведена в табл.1.
Ген, вход щий в состав секвенированной детерминанты резистентности, содержит открытую рамку считывани  размером 856 п.н., кодирующую фермент ААС(З)-11 и локализованную между 819 и 1676 нуклеотидами, начина  от 5 конца. Показано, что ген кодирует белок с мол.м. 30,6 килодальтон. Вы влено, что секвенированный ген содержит отличный от известных ранее промотор и р д нуклео- тидных замен в структурной части. Эти изменени  позвол ют отнести секвенированный нами ген к типу аасС2а.
В табл. 2 представлены регул торные области гена аасС2 из плазмид pWP14a, pWP116а и pJ V03, а также секвенированно- го гена аасС2а. Регул торные области гена аасС2 из плазмид pWP14a и pWP115a идентичны регул торной области плазмиды pJV03 за исключением участка прот женностью 20 п.н., присутствующего в промо- торной области плазмиды pJV03. Последовательность длиной 20 п.н. плазмиды pJVOo содержит альтернативный - 10 бокс промотора. В регул торной области секвени- рованного гена в направлении к 5 концу, начина  от старт-кодона, расположен участок длиной 18 п.н., совпадающий с таковыми ре- гул торных областей генов аасС2 плазмид pWP14a, pWP116a и pJV03. В этом участке расположена последовательность Шайна- Дальгарно GG AG. За гомологичным участком расположена последовательность длиной 9 п.н., отсутствующа  в генах, секвенирован- ных ранее. Далее вновь следует область длиной 8 п.н., присутствующа  в плазмидах pWP14a,pWP116anpJV03. Вслед за участками гомологии в гене из плазмиды pSV11 (плазмида p(JC19, содержаща  Hind III фрагмент с геном аасС2а) следует прот женна  область , абсолютно отличающа с  от регул торных областей генов аасС2 плазмид pWP14a, pWP116a и pJV03.
При сравнении структурной части сек- венированного гена с геном из плазмиды
pWP113а показано наличие 3,5% замен нук- леотидов и 5,6% аминокислотных замен в молекуле фермента. При сравнении структурной части секвенированного гена со
структурными част ми генов аасС2 плазмид pWP14a, pWP116a и pJV03 вы влено 3,15% нуклеотидных замен и 4,2% аминокислотных замен в молекуле фермента. На основании этих данных можно сделать вывод, что
0 секвенированный нами ген эволюционно ближе к гену из плазмид pWP14a, pWP116a и pJV03.
При сравнении последовательности структурной части секвенированного гена с
5 последовательност ми структурных частей генов аасС2 плазмид pWP14a, pWP116a, pJV03 и pWP113a обнаружено в общей сложности 43 нуклеотидные замены, определ ющие 20 аминокислотных замен в мо0 лекуле фермента, т.е. наблюдаетс  5,0% различий в нуклеотидном составе и 7,3% - в аминокислотном. Нуклеотидные замены, обуслоЕливающие замены аминокислот в последовательности гена,локализованы до5 статочно случайным образом. На основании определени  степени гомологии секвенированного гена и известных генов аасС2. секвенированный ген отнесен к типу аасС2а. Дл  достижени  цели сконструирован
0 ДНК-зонд, основанный на неизвестной ранее за вленной нуклеотидной последовательности клонированного фрагмента ДНК, содержащего ген аасС2а. ДНК фрагмента размеров 2273 п.н. подвергнут гидролизу
5 эндонуклеазой рестрикции EcoR V, образовавшиес  фрагменты разделен методом электрофореза в агарозном геле, фрагмент размером 537 п.н. элюирован из агарозы, очищаем при помощи двукратной экстра0 кции фенолом и двукратного осаждени  этанолом . Полученный таким образом фрагмент ДНК радиоактивно или нерадиоактивно мет т и используют в экспериментах по ДНК-ДНК гибридизации.
5Пример. Клетки клинического штамма
E.coli 164, резистентного к гентамицину, тобрамицину, сизомицину, нетилмицину и продуцирующего фермент ААС(3)-11а, выращивают в L-бульоне в течение ночи при
0 37° С. Из бактериальной суспензии изолируют ДНК R-плазмиды, имеющую мол.м. 70 Мд и содержащую детерминанту резистентности к гентамицину, тобрамицину, сизомицину и нетилмицину. Выделенную ДНК
5 гидролизуют эндонуклеазой рестрикции Hind III и лигируют с ДНК векторной плазмиды pUC19, гидролизованной эндонуклеазой Hind 111. Смесью, содержащей лигированные молекулы, трансформируют реципиентный штамм E.coli JM 101. Трансформанты , содержащие рекомбинантные плазмиды, отбирают на агаризованных средах , содержащих гентамицин в концентрации 10 мкг/мл. Отобранные трансформанты рассевают до отдельных колоний на агаризован- ной среде LB, содержащей 10 мкг/мл гентамицина. Отдельную колонию выращивают в жидкой питательной среде LB в течение ночи и выдел ют ДНК щелочным методом. Провод т в стандартных услови х гидролиз плазмидной ДНК эндонуклеазной рестрикции Hind III и в присутствии маркеров молекул рной массы устанавливают, что детерминанта резистентности к гентамицину, сизомицину, тобрамицину и нетилмицину находитс  в составе Hind III фрагмента размером 2,3 т.п.н.
При помощи метода Сэнгера определ ют нуклеотидную последовательность клонированной детерминанты резистентности. В результате компьютерной обработки результатов ген отнесли к типу аасС2а.
Из лабораторного штамма E.coli, содержащего рекомбинантную плазмиду pSV11, щелочным методом выдел ют плазмидную ДНК в препаративных количествах. Провод т рестрикцию плазмидной ДНК эндонук- леазой Eco RV. Фрагмент размеров 537 п.н. вырезают из гел , провод т электроэлюцию в диализный мешок, очищают двукратной экстракцией фенолом, двукратным осаждением этанолом. Радиоактивное мечение фрагмента провод т реакцией ник-трансл - ции. Радиоактивно меченый фрагмент используют в качестве зонда в экспериментах
по ДНК-ДНК гибридизации.
Таким образом, определена нуклеотид- на  последовательность гена аасС2а. Сконст- руированный на основании этой последовательности гибридизационный
зонд, представл ющий собой Eco RV фрагмент размером 537 п.н., может быть использован дл  вы влени  этого гена. Полученный в результате осуществлени  поставленной цели зонд радиоактивно или нерадиоактивно
мет т и используют в экспериментах по ДНК- ДНК гибридизации. Результаты, полученные при гибридизации со сконструированным из ДНК гена аасС2а зондом, могут примен тьс  дл  рационального выбора антибиотика вхимиотерапии гнойно-септических и особо опасных инфекций.

Claims (1)

  1. Формула изобретени  Фрагмент ДНК, содержащий ген резистентности к аминогликозидам аасС2а, кодирующий 3 -аминогликозидацетилтрансферазу типа 11а, полученный в результате элюции из гел  продукта гидролиза рестриктазой Hind III рекомбинантной плазмиды pSV11, реплицируемой в лабораторном штамме Escherichia coli
    KI2, размером 2273 п.н. со следующей нуклео- тидной последовательностью.
    Таблица
    IV 2U 3 4ft 50 7У 80 90 100 110 1 TTTGGTftCTC ТСЙБААТАСС CTTTTGAGTT CGTTTTTGTG CCAACAGAAC AGCCCGTAGG TAAftTCTCGG AGCATTTCAG GAflGTGTCTG TGTGAGTTGft ATCTGAftTGG
    111СйбТТААТАТ TTTAGTGGTC PAGGTCFAG GCGftGTTGAA TGChSGGCWCCTCGTTTTT TSGCftGGCG6 TTTTACAACfi GGAGGEAGAA СТАПТТСТС ААСАССТТС6
    221C6TGCTGGAA TCATGGTTGC ATCACGGACT AATAT6PCCG ATTAAC3TATСС6СЙАБЙТГ GGftCTTCACC ЙТСТБСТСАТ GAACGCGAGT G&TTAGTTTA CGCGCTGCAA
    331АТТСЙ6СААА AACPCGGCTA ААТ6ТСССП CGCTGGGTAG ПТТТТнТЙСAGATTGAAGC CeCAAATTCG CCGCAATCTA CGATCAACTT CTAGGC6TTC AATCAA6CCC
    441CGTGTGGTGA CGATAffiAAG TTCAGCTTTT CCAATAPAAG 3CACA13XAAAGCGCftGCG GTCA3CAGGA GGTCTTCCCA САБСАСАССС TTGATATTG6 TATACCAAGG
    51 ATTCGATGTC ACTCCACTCG AGCACACGAA TAATGCGTTL EAGCTTT6A6 CTGATGCCGT CCTAAATCGG CTGCGACTAA AG6AATAAGT TCGTATTSTA AGKTTGAAA
    -35 TTGACA -10 TATAAT 661 CCGTTGTTTG AGAAAAGGGC TTAATGTAGT ATFCATGCT6 TfiGATGTTAG GGTGTTGGTT ТАБААБСТСА TTTTAACATC TACAACTTTT TTCAAAAAAT GTTAATTCAG
    Met 771 GCT6TTT6TE &AGTTTTGCA AGTGCCTCGA TTTP3ACGA6 PTATC5C6AT GCATftCGCSG AA6GCAATAA CGGAGGCGCT ГСАААААСТС GGAGTCCAAA CCGGTGftCCT
    /
    831 AITGATGGTG CATGCCfCAC TTAAftXEftT TGGTICSS C GAA3Gf,G3AC CGGHGACbGT CGTTGCCGCG TTACGCTCCG CG6TTGGGCC 6ACTGGCACT GTGA1EGGAT W uCeLATCGTG GEAClGATCT CCC ftCGftGb РЕАСТССГ й TS5CGCTC6G Ттс-ЗЙТБЙСЙ eflACCCGCCG TACCT6C-:CG CCGTTCGATC CC6CAACGGC CGGSACTTAC
    lli.l 3GTGGGTTCG GCCT6CTGAA TCAGTTTCTG ETTCfl iGCCC CCG3CGCGCG GCUCftGCGCG LACCCCGftTG CATCGAT6GT CGCGGTTGGT CCACTEGCT6 AAAC3CTGAC 121 36AGCCTCAC AAGCTCS6TC ЙСБССТТ66Б 3G-i№CGTCG СССбТСЁнЕС GGTTCGTTCG CCTTGGCGEG AAG6CCCTGC T6TT66GTGC GCCGCTAAAC TCCGTTACCG i::i CATTGCACTA СБССЗЙБ6С5 GTTGCCWTA TCCCCPACAA iiCGGCGGGTG ACGTAT&RbA TGCCGATBCT TGGAAGCAAC GGCGAAGTD3 CCTGGAAAAC GGCATCGGAT H:I THCGATTCAA ACGGCATTCT CGATTGCTTT GCTATCGAAG GHAAGCCGGA TGCGGTCSAA ACTATAGCAA АТБСТТАСБТ ЕААБСТСББТ CGCCATCGAG AAGGTGTCGT 1541 65GCTTTGCT CAGFGCTACC TGTTC3AC5C GCHG5ACATC GTGACBTTCG 6CGTCACCTA TCTTGASAftG CATTTCGGAA CCACTCCGAT CGTGCCAGCA CACGAAGTCG 1651 CCGAGbCTC TTGC3ACCCT TCACGTTAGA GCLCGTCGrfC ААТЗйТйАТС TGCATCAACG EACCTTTCGG CGCGGGAAA6 ACGACGCTC5 CTGAGCG5TT GCGCGATCT-G 1761 C6TTCCAAAT С8СТЕЙТСТТ TGACCCCCAG CfiP TCSGGT TCGTISTGAA AGAAACGGTC CCCATGCCGG CGAECGbflGA CTrtTCAGGAT СТСГТАПч ЗСМТТААТС
    157i СААЙИАЛ6С ССЙОРРР6ТТ AATAATCTftG AAT CTTTCC LTT6PuT(3TTCAAAGGAACT TCTAATAAAT ЙПйТТИнБ AAAATArifiCA АТСТйТТСРйАнМТТСмйБ
    1481 ААйтАТТйСА ТАССйТАйИ CCiGTTCAGT TATCT6PAGA TTCTSAPAATGAATA ЧС GA&rGCTGTC AAAATCAATA AATGCAGCAT TTAAAAACT3CGC-ftGCCAAA
    :u9 C A3bAGAAh TTATTnHSG ЗСЙАСАГА А АтАй:-ТТАБ ujf 3T:TK J№№M TTPtCTCCTT 6GATAAATCA TPPCATCAAG ААйТнБАСЛTTAA Tjf,A:
    21i 1 CrriiTTCTTA AASTTCTAbT f TLA:ATCт ftSCTGCTHG ВДртисААТАТТЯ:ССАТА CCCTGCTTTT TAA
    Таблица2
    (DWP116A) Met His ThrlArg Lvs Ala Us TnrGlu AlallleHArglLys Lsu 51 v Va
    (oSVii) 1 Met His ThrlArg Lys Ala lie R--61u Ala I Leu1- iGlnllvs Leu 31s Val
    (DWP113A) Met His T rlGlnl Lys Ala He ThrGlu Alalleul iGlnAys Leu Glv Val L JrUJL J
    Gin ThrJGlylAsp Leu Leu Ket Val His Ala Se- Leu LysJAlallle Gly Fro Val Glu
    17 Gin ThrlGlvlAso Leu Leu Met Val His Ala Ser Leu Lvs Alaille 61 v Vsl Glu
    Gin ThrlSerlAsD Leu Leu Met Val His Ala Ser Leu LvslSerllle Glv fro Val Glu
    Gly Gly Ala Glu Thr Val Val Ala Ala Lea Arg Ser Ala Val Gly Pro Glv Thr
    36 Glv Gly Ala Glu Thr Val Val Ala Ala Leu Arg Ber Ala Val Glv Pro Thr Gly Thr
    Gly Gly Ala Glu Thr Val Val Ala Ala Leu Arc Ser Ala Val Gly Pro Thr Gly Th|1
    Val Met Gly Tvr Ala Ser Tro Aso Arg Ser с го Туг Glu Glu Thr I Leu1 ASP Gly Ala
    55 Val Met Glv Туг Ala Ser Tro ASD Arg Ser cro Tyr Glu Glu ThrlArglAsr, Glv Ala Val Met Gly Tyr Ala Ser Tro ASD Arg Se Tvr Glu Glu TnrlueulAsn Gly Ala
    Arg Leu ASD AsulLysl JAlalArg Arg Thr Trp Pro Pro Phe ASD Pro Ala Tnr Ala Glv
    74 Arg Leu ASD Aso1LvsSiThriArg Arg Thr Fro Pro Phe ASD Fro Ala Ttr Ala Sly
    Ara Leu ASD AspJAsnllAlalAra Ara Thr Tro Pro pro Phe ASD Pro Ala Thr Ala Giv
    r i,i. Tyr Arg Gly Phe Gly Leu Leu Asn Gin phe Leu Val Gin AU Fro Gly Ala Arg
    93 Thr Tvr Arg Gly Phe Glv Leu Leu Asn Gin гЬе Leu Val Gin Ala Pro Glv Ala Arg
    Thr Tyr Arg Gly Phe Gly Leu Leu Asn Gin Dhe Leu Val Gin Ala Pro Glv Ala Arc
    Arg Ser Ala His Pro Aso Ala Ser Met Val Ala Val Glv Pro Leu Ala Glu Thr Leu
    112 Arg Ser Ala His Pro ASD Ala Ser Met Val Ala Val Glv Pro Leu Ala Glj Thr Leu
    Arg Ser Ala His Pro ASD Ala Ser Met Val Ala Val Glv o Leu Ala Glu Thr Leu
    Thr Glu Pro HislGlulLeu Glv His Ala Leu Glv Glu Gly Ser WiVailGlu Arg Pns
    131 Thr Glu Pro HislLyslLeu Gly His Ala Leu Gly Glu Gly Ser -rolVal Glu Arg
    Thr Glu Pro HislGlulLeu Gly His Ala Leu Glv Glu Glv Ser Fro Asn .Glu A-g Fhe
    Val Arg Leu Glv Glv Lys Ala Leu Leu Leu Glv Ala Fro Leu Asn SerVal Thr Ala
    150 Val Arg Leu Gly Gly Lys Ala Leu Leu Leu Gly Ala F ro Leu ASP 5s Val Thr Ala
    Val Arg Leu Glv Gly Lys Ala Leu Leu Leu Gly Ala F rc Leu Asn SerVal Thr Ala
    Leu His Tyr Ala Glu Ala Val Ala ASD lie Pro Asn Lys ArgiT-oiValTbr Tyr Glu
    169 Leu His Tyr Ala Glu Ala Val Ala ASD He Pro Asn Lys A-g qrgb lThr Tvr Gij
    Leu His Tyr Ala Glu Ala Val Ala ASD lie D-o Asn Lys ArghrolValTir Ту- Glu
    Met Pro 161у IArg i Met Pro Met I Leui61 у ISer
    Met Pro Met
    GlyIArg
    fisnlGly Glu Val Ala Tro Lvs Tbr Ala Eer Glu Tyr A;D lAsrHGly Glu Val Ala Tro Lvs т Ala beriAsoHyr ASP
    IftsolGlv Glu Val Ala T-о Lvs Thr Hi a ASD Ii ,,l
    Tbr
    Ser Asn Gly lie Leu Aso Cvs Phe Ala He Glu Glv Lvs pro Asorila al 51 j Tbr
    7 Ser Asn Gly He Leu ASD Cvs Phe Ala He Glu Glv LvslPro Asjч a al 3u TrSer Asn Gly He Leu ASD Cys Phe Ala He Glu Glv Lys GlnlHsoАи з G .u Trr
    11
SU904854156A 1990-06-27 1990-06-27 Фрагмент ДНК SU1761806A1 (ru)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU904854156A SU1761806A1 (ru) 1990-06-27 1990-06-27 Фрагмент ДНК
SU904854156D SU1761807A1 (ru) 1990-06-27 1990-06-27 Штамм бактерий ЕSснеRIснIа coLI

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU904854156A SU1761806A1 (ru) 1990-06-27 1990-06-27 Фрагмент ДНК

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU1761806A1 true SU1761806A1 (ru) 1992-09-15

Family

ID=21529271

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU904854156D SU1761807A1 (ru) 1990-06-27 1990-06-27 Штамм бактерий ЕSснеRIснIа coLI
SU904854156A SU1761806A1 (ru) 1990-06-27 1990-06-27 Фрагмент ДНК

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU904854156D SU1761807A1 (ru) 1990-06-27 1990-06-27 Штамм бактерий ЕSснеRIснIа coLI

Country Status (1)

Country Link
SU (2) SU1761807A1 (ru)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5439808A (en) * 1993-07-23 1995-08-08 North American Vaccine, Inc. Method for the high level expression, purification and refolding of the outer membrane group B porin proteins from Neisseria meningitidis

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Allmansberger R. et al. Mol. Gen. Genet., 1985,198,514-520. Vliegenthart I. et al. Antimicrob. Agents. Chemother., 1989,33, №8, 1153-1159. *

Also Published As

Publication number Publication date
SU1761807A1 (ru) 1992-09-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Duplay et al. Silent and functional changes in the periplasmic maltose-binding protein of Escherichia coli K12: I. transport of maltose
Emr et al. Importance of secondary structure in the signal sequence for protein secretion.
Kort et al. The xanthopsins: a new family of eubacterial blue‐light photoreceptors.
De Lorimier et al. Genes for the alpha and beta subunits of phycocyanin.
Nieto et al. The hha gene modulates haemolysin expression in Escherichia coli
Pollock et al. Cloning, sequencing, and expression of the gene encoding the high-molecular-weight cytochrome c from Desulfovibrio vulgaris Hildenborough
Kodaira et al. The dnaX gene encodes the DNA polymerase III holoenzyme τ subunit, precursor of the γ subunit, the dnaZ gene product
Lintermans et al. Isolation and nucleotide sequence of the F17-A gene encoding the structural protein of the F17 fimbriae in bovine enterotoxigenic Escherichia coli
Hagenmaier et al. A new periplasmic protein of Escherichia coli which is synthesized in spheroplasts but not in intact cells
US5885811A (en) Leader sequence inducing a post-translational modification of polypeptides in bacteria gene therefor and subtilin variant of enhanced stability and activity
Murayama et al. vidence for Involvement ofEscherichia coliGenespmbA, csrAand a Previously Unrecognized GenetldD, in the Control of DNA Gyrase byletD (ccdB) of Sex Factor F
Ivashina et al. The pss4 gene from Rhizobium leguminosarum bv viciae VF39: cloning, sequence and the possible role in polysaccharide production and nodule formation
Roine et al. Purified HrpA of Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000 reassembles into pili
Steck et al. VirD2 gene product from the nopaline plasmid pTiC58 has at least two activities required for virulence
ES2312441T3 (es) Bacteriocina anti-listeria.
US6664386B1 (en) System for efficient secretion of recombinant proteins
AU697156B2 (en) Cloning and expression of the chondroitinase I and II genes from (p. vulgaris)
Schoemaker et al. Identification of the gene lon (capR) product as a 94-kilodalton polypeptide by cloning and deletion analysis
Frick et al. Cloning of immunity and structural genes for colicin V
SU1761806A1 (ru) Фрагмент ДНК
Surek et al. Evidence for two different gas vesicle proteins and genes in Halobacterium halobium
Smith et al. The pyocin Sa receptor of Pseudomonas aeruginosa is associated with ferripyoverdin uptake
Van Kaer et al. Interaction of the Bacillus subtilis phage phi 105 repressor DNA: a genetic analysis.
Komano et al. Identification of a vegetative promoter in Myxococcus xanthus: a protein that has homology to histones
Finlay et al. Nucleotide sequence of the tra YALE region from IncFV plasmid pED208