SU1727075A1 - Способ определени активности комплемента - Google Patents
Способ определени активности комплемента Download PDFInfo
- Publication number
- SU1727075A1 SU1727075A1 SU894766973A SU4766973A SU1727075A1 SU 1727075 A1 SU1727075 A1 SU 1727075A1 SU 894766973 A SU894766973 A SU 894766973A SU 4766973 A SU4766973 A SU 4766973A SU 1727075 A1 SU1727075 A1 SU 1727075A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- complement
- serum
- lysis
- added
- accuracy
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к медицине, а именно к биохимическим способам исследовани комплемента человека при различных заболевани х. Цель изобретени - повышение точности Способа. Выделенную сыворотку крови инкубируют с последовательно добавл емыми порци ми эритроцитов, а активность комплемента определ ют по их лизису. По сравнению с прототипом увеличиваетс точность способа в 2-3 раза..,
Description
Изобретение относитс к медицине, а именно к биохимическим способам исследовани комплемента человека при различных заболевани х, а также дл изучени вли ни на него каких-либо факторов.
Цель изобретени - повышение точности .
Способ осуществл етс следующим образом .
В термостатированную при 37°С кювету спектрофотометра помещают 0,1 мл сыворотки крови, добавл ют мединаловый буфер (рН 7,4), содержащий 0,1 % желатина до объема 0,8 мл. После прогревани в течение 3 мин в инкубационную смесь добавл ют 0,02 мл буфера, содержащего 0,36-106 сенсибилизированных эритроцитов барана (СЭБ). Регистрируют скорость лизиса эритроцитов при 800 нм. После завершени лизиса в инкубационную смесь добавл ют следующую, равную предыдущей, порцию СЭБ, регистрируют скорость лизиса и/ipo- должают последовательно добавл ть равные порции СЭБ до полного истощени
сыворотки. Стро т график зависимости скорости лизиса СЭБ от количества добавл емых клеток. Путем экстрапол ции графика на соответствующую ось регистрируют активность комплемента, которую сначала определ ют как количество СЭБ полностью истощающих 0,1 мл сыворотки (Е), а затем рассчитывают активность комплемента; ко (Л
С
тора равна
0,1 0,9 10°
(ед. СНбо). где
0,1 - количество сыворотки в инкубационной смеси; 0,9-106-количество СЭБ, равное половине от стандартного, прин того при определении СНво; CHso - величина, обратна количеству сыворотки, лизирую- щей 50% стандартной взвеси эритроцитов. Пример1.В термостатированную при 37°С кювету помещают 0,1 мл сыворотки крови донора, мединаловый буфер (рН 7,5), содержащий 0,1% желатина до объема 0,8 мл. После прогревани смеси в течение 3 мин внос т 0,02 мл буфера, содержащего 0,36 -106 эритроцитов, регистрируют скорость лизиса при 800 нм, после завершени лизиса внос т следующую порцию эритроцитов и продолжают процедуру до полного истощени комплемента, регистрируемое по отсутствию возобновлени лизиса после добавлени очередной порции.
Результаты представлены в таблице.
Количество СЭБ, лизированных 0,1 мл сыворотки крови составл ет 13,750,36х ,95-10В клеток
СНат 4 95 1°
55.
0,1 0,9 106
Степень истощени комплемента малой порцией зимозана (0,5 мг), определ ема по прототипу, измен етс в гораздо больших пределах, чем при регистрации ее по предлагаемому способу.
Точность предлагаемого способа определени активности комплемента повышаетс в 2-3 раза.
Предлагаемым способом можно определить в данном источнике комплемента компонент, который лимитирует процесс лизиса гетерологичных клеток. С этой целью после полного истощени комплемента в
исследуемой пробе необходимо добавить в инкубационную смесь какой-либо компонент комплемента. Если при этом источник комплемента восстанавливает свою литическую активность, значит данный момент в исходном материале был истощен первым , т.е. он лимитирует процесс лизиса гетерологичных клеток. Этим способом, кроме того/можно оценивать качество приготовл емых дл клинических целей реагентов дл определени отдельных компонентов комплемента. Реагент должен обладать достаточным резервом литической активности . С помощью метода можно определ ть
оптимальный способ приготовлени реагента .
Claims (1)
- Формулаизобретени Способ определени активности комплемента в сыворотке крови, включающийинкубацию сыворотки с порцией эритроцитов барана, отличающийс тем, что, с целью повышени точности способа, инкубацию сыворотки осуществл ют при последовательном добавлении порцийэритроцитов барана. .Количество добавл емых порций зрит. поО.36-106 Кл Скорость лизиса, V-10fr IOi/MHH1 234 5 6 7 89 10 11 12 13 6.8 6.2 5,7 5,2 4.9 4.2 4.1 3.4 3,1 2,6 2,3 1,8 0,6
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU894766973A SU1727075A1 (ru) | 1989-12-05 | 1989-12-05 | Способ определени активности комплемента |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU894766973A SU1727075A1 (ru) | 1989-12-05 | 1989-12-05 | Способ определени активности комплемента |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1727075A1 true SU1727075A1 (ru) | 1992-04-15 |
Family
ID=21483563
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU894766973A SU1727075A1 (ru) | 1989-12-05 | 1989-12-05 | Способ определени активности комплемента |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1727075A1 (ru) |
-
1989
- 1989-12-05 SU SU894766973A patent/SU1727075A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Кэбот Е., Майер М. Экспериментальна иммунохими . - М.; 1968, с. 66-69. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4876189A (en) | Process for the quantification of cell populations or subpopulations and a reagent suitable therefor | |
| Crissman et al. | Simplified method for DNA and protein staining of human hematopoietic cell samples | |
| Rendel et al. | Variants of ovine alkaline serum phosphatases and their association with the RO blood groups | |
| US5030554A (en) | Conservative whole blood sample preparation technique | |
| Sears et al. | Binding of intracellular protein to the erythrocyte membrane during incubation: the production of Heinz bodies | |
| US4587222A (en) | Reagent comprising treated red blood cells and methods for detecting rheumatoid factor | |
| US4714672A (en) | Immunoassays involving complement lysing of chromophore containing microcapsules | |
| SU1727075A1 (ru) | Способ определени активности комплемента | |
| Kirk et al. | Haptoglobin types in south-east Asia | |
| GB1596914A (en) | Protein determination | |
| Tew et al. | A radioimmunoassay for human antibody specific for microbial antigens | |
| Karlsson et al. | A comparative study of three approaches to the routine quantitative determination of spinal fluid total proteins | |
| US4820634A (en) | Immunoassay method and immunoreactive cell reagent | |
| Ravin | A quantitative study of autogenic and allogenic transformations in Pneumococcus | |
| Hellema et al. | Comparison of the tray agglutination technique with the gelatin agglutination technique for the detection of spermagglutinating activity in human sera | |
| D'orazio et al. | Potentiometric electrode measurement of serum antibodies based on the complement fixation test | |
| Rathbun et al. | The reversal of triparanol-induced cataract in the rat. IV. Reduced sulfhydryl groups in soluble protein and glutathione | |
| Dickson et al. | Automated fluorometric method for screening for erythrocyte glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency | |
| Levinson et al. | Anion transport in the Ehrlich ascites tumor cell: The effect of 2, 4, 6‐trinitrobenzene sulfonic acid | |
| Mattiasson et al. | Partition Affinity Ligand Assay (PALA): Applications in the Analysis of Haptens, Macromolecules, and Cells | |
| Gupta et al. | The titration of tetanus antitoxin I. Factors affecting the sensitivity of the indirect haemagglutination test | |
| Corbett | Factors influencing substrate utilization by Tetrahymena pyriformis | |
| Pitney et al. | Cold haemagglutinins associated with splenomegaly in New Guinea | |
| Singer et al. | Effect of metabolic state on phytohemagglutinin-P agglutination of normal human erythrocytes | |
| Lubahn et al. | A rapid silver-stain procedure for use with routine electrophoresis of cerebrospinal fluid on agarose gels. |