SU1720010A1

SU1720010A1 - Способ определени изотипа антител

Info

Publication number: SU1720010A1
Application number: SU904778119A
Authority: SU
Inventors: Юрий Анатольевич Кузьмин; Борис Вольфович Каральник
Original assignee: Научно-Исследовательский Институт Эпидемиологии, Микробиологии И Инфекционных Болезней
Priority date: 1990-01-04
Filing date: 1990-01-04
Publication date: 1992-03-15

Abstract

Изобретение относитс к медицине, а именно к иммунологической диагностике. Цель изобретени - повышение точности способа за счет повышени чувствительности иммунологической реакции. При этом антигенный эритроцитарный диагностикум после экспозиции с исследуемой сывороткой отмывают и в концентрации 0,05-0,1% добавл ют к 0,5%-ноМу антиизотиповому эритроцитарному диагностикуму. Повышаетс точность за счет повышени чувствительности иммунологической реакции в 4-5 раз. 4 табл.

Description

Изобретение относитс к иммунологии и может быть использовано дл определени изотипов антител.

Цель изобретени - повышение точности способа за счет повышени чувствительности иммунологической реакции..

П р.и м е р 1. Сыворотку больного эхи- нококкозом титруют на 0,85%-ном растворе хлористого натри в пробирках в объеме 2,0 мл с разведением 1:200. В каждую пробирку внос т по 0,5 мл 0,5%-ного эхинококкового антигенного эритроцитарного диагностику- ма, смешивают содержимое пробирок и выдерживают их в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем пробирки центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 мин. Над- осадок сливают, а осадок эритроцитов трижды отмывают 0,85%-ным раствором хлористого натри , содержащим 0,05%-но- го твина-20. После этого к осадку добавл ют Ov85%-Horo раствора хлористого натри , который содержит 0,03% бычьего сывороточного альбумина, до концентрации эритроцитов 0,1%. По-25 мкл этой взвеси перенос т в чейки планшета, содержащие 50 мкл 0,85%-ного раствора хлористого натри с 0,03% бычьего сывороточного альбумина . Дл каждой исследуемой пробы сыворотки делают несколько одинаковых р дов обработанного последовательными разделени ми пробы антигенного эритроцитарного диагностикума - по числу примен емых антиизотиповых диагностикумов. Во все чейки одного р да внос т по 25 мкл 0,5%- ного антительного эритроцитарного диагно- стикума к одному изотйпу иммуноглобулина, второго р да - к другому изотйпу иммуноглобулина и т.д. Учет осуществл ют по агглютинации через 2 ч.

В табл. 1 представлены результаты по обоснованию используемой концентрации эритроцитарного диагностикума.

Из табл. 1 видно, что оптимальным вариантом вл етс концентраци эритроцитарного диагностикума 0,1-0,05%.

В табл. 2 представлены результаты по сравнению чувствительности определени разных классов антиэхинококковых антител предлагаемым и известным способами.

Из табл. 2 следует, что чувствительность определени антител каждого изотипа в 4-5

СО

с

VJ

ю о о

о

раз выше при использовании предлагаемого способа в сравнении с известным.

В табл. 3 и 4 представлены результату по изучению специфичности предлагаемого способа.

Как видно из табл. 3 и 4, при большей чувствительности предлагаемого способа, продемонстрированной в примере 2, его специфичность хуже, чем известного способа .

Claims

Формула изобретени

Способ определени изотипа антител путем взаимодействи исследуемой сыворотки со специфическим антигенным эрит- роцитарным диагностикумом с последующим определением титра антител в реакции гемагглютинации, отличающийс тем,

что, с целью повышени точности способа за счет повышени чувствительности иммуно7 логической реакции, дополнительно после взаимодействи реагентов осуществл ют отмывание эритроцитов и добавление их в

концентрации 0,05-0,1 % к 0,5%-мому анти- изотиповому антительному эритроцитарно- му диагностикуму.

Спонтанна гемагглюти- наци

Таблица

Таблица2

ТаблицаЗ

Таблица