SU1707499A1

SU1707499A1 - Способ окрашивани перехватов Ранвье

Info

Publication number: SU1707499A1
Application number: SU894708484A
Authority: SU
Inventors: Игорь Николаевич Замураев
Original assignee: Институт Физиологии Им.И.П.Павлова
Priority date: 1989-06-22
Filing date: 1989-06-22
Publication date: 1992-01-23

Abstract

Изобретение отмоетс к медицине, а именно к нейрогистологии. Цели изобретени - увеличение количества окрашенных перехватов Ранвье нервных волокон. Цель достигаетс многоступенчатой обработкой нервных волокон. Вначале их фиксируют 2 ч в 5%-ном глютаровом альдегиде на дистиллированной воде, затем инкубируют 1 ч в 0,01 М растворе хлористого железа (рН 1,5) и 20 мин 81%-ном растворе желтой кров ной соли (рН 2,0). Затем нервные волокна инкубируют 10-20 мин с 3-4%-ном растворе нитрате серебра и после зтого 27-30 мин в 1,5 ±0,5% растворе красной кров ной со ли (рН 2). Затем препараты заключают j глицерин-желатин и изучают под микроскопом.

Description

Изобретение относитс к медицине, в частности к нейрогистологии.

Цель изобретени - повышение качества окраски за счет увеличени количества окрашенных перехватов Ранвье нервных волокон.

Окрашивание по предлагаемому способу включает фиксацию в 5%-ном глутараль- дегиде на дистиллированной врде, инкубацию в течение 1 ч в растворе хлорного железа и затем в растворе ферроцианида кали с последующей заливкой дл микроскопического исследовани , дополнительно после двух vKa dhMh.x инкубации препарат инкуоиру 0т в J -ч /о ном рыСтпсрс нитрата серебра в течение 10-20 и 27-30 мин в 1,5 ± 0,5%-ном растворе феррицианида кали , используют глутаральдегид на дистиллированной воде, а заливку осуществл ют в глицерин-желатин.

Пример 1. Кролика после предварительного эфирного наркоза умерщвл ли де- капитацией. После этого в районе подколенной мки обнажали седалищный нерв и вырезали его часть и вырезали его часть длиной 1 см. Нерв фиксировали 2 ч в 5%-ном глутарэльдегиде на дистиллированной воде. Объем фиксирующей жидкости 40 мл. Затем нерв промывали в 5 порци х дистиллированной воды 4 раза. Потом под микроскопом МССО тонкими иглами удал ли с нерпа эпинесрмй. После удалени эпинео- ри основной нервный стеол р сг:л;г т на р д болие тонких нервных пучкиа (илщи- ной 0,5-1 мм, которые выдел ли и далее проводили по растворам отдельно.

С

««I

4

ч. ч

ч

j

Выделенные нервные пучки после этого инкубировали 1 ч в 0,01 М растворе хлорного железа (рН 1,5). рН раствора доводили 0.1 н сол ной кислотой, а затем провер ли по рН- метру. Далее нервы промывали 5 раз по 5 мин в дистиллированной воде. Затем нервные пучки инкубировали 20 мин в 1 %-ном растворе желтой кров ной соли (рН 2). рН раствора доводили как указано. Промывали нервы в 5 порци х дистиллированной воды по 5 мин. После этого инкубировали нервы 20 мин в 3%-ном растворе нитрата серебра. Промывали в 5 порци х по 5 мин дистиллированной воды. Затем инкубировали нервы 30 мин в 1 %-ном растворе красной кров ной соли (рН 2). Промывали нервы в 5 порци х дистиллированной воды по 5 мин. После этого заключали нервные пучки на предметные стекла в глицерин-желатин. Сразу после этого препараты можно изучать под световым микроскопом.

Результаты. У 50 произвольно выбранных волокон на прот жении 880 мкм было обнаружено 29 окрасившихс перехватов. У 50 волокон, обработанных по способу-прототипу , на прот жении 880 мкм удалось вы вит ь лишь 2 окрашенных перехвата.

Пример 2. Л гушку умерщвл ли декапитацией. После этого вырезали участок седалищного нерва в области бедра длиной 0,5 см. Фиксировали, как и в примере 1. После промывки в дистиллированной воде снимали эпиневральную соединитель- нотканую оболочку. Затем нерв проводили по растворам тем же способом, как и в примере 1. Нервы заливали в глицерин-желатин .

Результаты. В перехватах Ранвье выпал темно-кор1:;невый осадок. У 50 произвольно выбранных волокон на прот жении 889 мкм было обнаружено 48 окрашенных перехватов , а у обработанных по способу-прототипу 6.

Пример 3. Л гушку умерщвл ли декэпитацией. После этого вскрывали cnvi- номозговой канал и выдел ли левый дореальный корешок X пары спиномозгооых нервов. Затем осуществл ли с нервом те же операции, что и в примерах 1 и 2.

Результаты. В толстых нервных пучках м котных афферентных волокон вы вились

перехваты Ранвье и насечки Шмидта-Лан- термана. У 50 произвольно выбранных волокон на рассто нии 880 мкм было обнаружено 36 перехватов Ранвье. У такого же количества волокон на рассто нии 880 мкм из нервных пучков, обработанных по.

способу-прототипу, вы влено 19 окрашенных перехватов, насечки Шмидта-Лантер- мана не вы вились.

Форм, у л а изобретени Способ окрашивани перехватов Рэн- вье, включа ющий фиксацию в глутаровом альдегиде, инкубацию в течение 1 ч в растворе хлористого железа и затем в растворе ферроцианидэ капи , отличающийс тем, что с повышени качества окраски за счет увеличени в препарате количества окрашенных перехватов Ранвье, дополнительно провод т инкубацию в 3- 4%-ном растворе нитрата серебра в течение 5 10-20и27-30 мин в 1,5±0,5%-ном растворе .феррицианида кали .

Claims

Форм.ула изобретения

Способ скрашивания перехватов Ранвье, включа'ющий фиксацию в глутаровом альдегиде, инкубацию в течение 1 ч в растворе хлористого железа и затем в растворе ферроцианида калия. отличающийся тем, что с цел>ю повышения качества окраски за счет увеличения в препарате количества окрашенных перехватов Ранвье, дополнительно проводят инкубацию в 34%-ном растворе нитрата серебра в течение 10~20и27-30 мин в 1,5±0,5%-ном растворе феррицианида калия.