SU1681261A1

SU1681261A1 - Method for detecting immune complexes in biological fluids

Info

Publication number: SU1681261A1
Application number: SU884618423A
Authority: SU
Inventors: Валерий Владимирович Туркин; Татьяна Владимировна Толмазова; Светлана Витальевна Качанова; Авенир Михайлович Яковлев
Original assignee: Ленинградский педиатрический медицинский институт
Priority date: 1988-12-09
Filing date: 1988-12-09
Publication date: 1991-09-30

Abstract

Изобретение относитс к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано дл исследовани патогенетической роли иммунных комплексов в грудном молоке Целью изобретени вл етс упрощение вы влени иммунных комплексов у женщин в период лактации. Цель достигаетс тем, что в качестве биологической жидкости используют грудное молоко, которое центрифугируют, затем обрабатывают 2%-ной уксусной кислотой, что дает возможность удалить жиры и казеин, существенно вли ющие на светорассеивание при фотоколориметрировании, а также за счет последующей преципитации иммунных комплексов в 2%-ном растворе ПЭГ-6000. Предлагаемый способ достаточно информативен , обладает высокой чувствительностью , прост в реализации с/ сThe invention relates to medicine, in particular to immunology, and can be used to study the pathogenetic role of immune complexes in breast milk. The aim of the invention is to simplify the detection of immune complexes in women during lactation. The goal is achieved by using breast milk as a biological fluid, which is centrifuged, then treated with 2% acetic acid, which makes it possible to remove fats and casein, which significantly affect light scattering during photocolorimetry, as well as by subsequent precipitation of immune complexes in 2% solution of PEG-6000. The proposed method is quite informative, highly sensitive, easy to implement s / s

Description

Изобретение относитс к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано дл исследовани патогенетической роли иммунных комплексов в грудном молоке.The invention relates to medicine, in particular to immunology, and can be used to study the pathogenetic role of immune complexes in breast milk.

Целью изобретени вл етс упрощение вы влени иммунных комлексов у женщин в период лактации за счет использовани в качестве биологической жидкости грудного молока.The aim of the invention is to simplify the detection of immune complexes in women during lactation due to the use of breast milk as biological fluid.

Изобретение осуществл етс следующим образом,The invention is carried out as follows.

Грудное молоко предварительно центрифугируют в течение 30 мин при 6000 об/мин, а затем обрабатывают 2%-ной уксусной кислотой с последующей инкубацией смеси 2 ч при температуре 37°С (можно на ночь).Breast milk is pre-centrifuged for 30 minutes at 6000 rpm, and then treated with 2% acetic acid, followed by incubation of the mixture for 2 hours at 37 ° C (overnight).

Выпавший осадок удал ют центрифугированием в течение часа при 8000 об/мин. Иммунные комплексы определ ют в надоса- дочной жидкости методом преципитации в растворе ПЭГ-6000The precipitate was removed by centrifuging for 8 hours at 8,000 rpm. Immune complexes are determined in a supernatant liquid by the method of precipitation in a PEG-6000 solution.

Пример Больна Г 33 года. Диагноз: в анамнезе выкидыш ОРВИ в 22 недели с высокой температурой У ребенка внутриутробна инфекци .Example Ill 33 years. Diagnosis: a history of miscarriage ARVI at 22 weeks with a high temperature. The child has intrauterine infection.

Грудное молоко (1,5-2,0 мл) центрифугируют при 6000 об/мин в течение 30 мин, удал ют жировую пленку и к 1,0 мл надоса- дочной жидкости добавл ют 2%-ный раствор уксусной кислоты в соотношении 1:1, Полученную смесь выдерживают 2 ч при 37°С, а затем центрифугируют при 8000 об/мин в течение 1 ч. К 0,5 мл над- осадочной жидкости добавл ют равное кооBreast milk (1.5-2.0 ml) was centrifuged at 6000 rpm for 30 minutes, the fatty film was removed, and a 2% solution of acetic acid was added to 1.0 ml of a supernatant in a ratio of 1: 1, The resulting mixture was incubated for 2 hours at 37 ° C, and then centrifuged at 8000 rpm for 1 hour. To 0.5 ml of supernatant liquid is added equal to

0000

юYu

OsOs

личество 2%-ного раствора ПЭГ (мол.м, 6000). В качестве контрол используют пробы с добавлением в них 0,5 мл 0,87%-ного раствора хлорида натри . После перемешивани пробы инкубируют при температуре 4°С в течение 2 ч (можно на ночь) и центрифугируют при 6000 об/мин в течение 30 мин. Фотоколометрирование производ т на спектрофотометре (СФ-26) при длине волны 380 нм в кювете с длиной оптического пути 1 см. Полученный результат выражают в условных единицах экстинкции (разниц исследуемой и контрольной проб, умноженна на 100). В данном случае он был равен 10 условным единицам.The amount of 2% solution of PEG (mol.m., 6000). Samples with the addition of 0.5 ml of 0.87% sodium chloride solution are used as a control. After stirring, the samples are incubated at 4 ° C for 2 hours (overnight) and centrifuged at 6000 rpm for 30 minutes. Photometric measurements are made on a spectrophotometer (SF-26) at a wavelength of 380 nm in a cuvette with an optical path length of 1 cm. The result obtained is expressed in arbitrary units of extinction (the difference of the test and control samples, multiplied by 100). In this case, it was equal to 10 conventional units.

Предложенным способом было исследовано 49 проб грудного молока. В исследо- ванных пробах содержание иммунных комплексов колебалось в пределах от 0 до 13 условных единиц.The proposed method was investigated 49 samples of breast milk. In the studied samples, the content of immune complexes ranged from 0 to 13 arbitrary units.

Claims

The method is quite informative, highly sensitive and can be used to diagnose immunological disorders in various pathological processes. The method is not laborious, simple to implement. DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION A method for detecting immune complexes in a biological fluid, including their precipitation with polyethylene glycol and determination by spectrophotometry, characterized in that breast milk is used as biological fluid in order to simplify the method in women during lactation 30 min at 6000 rpm, 2% acetic acid solution in the ratio 1: 1 is added to the lactic plasma, incubated for 2 h at 37 ° C and re-centrifuged for 1 h at 8000 rpm.