SU1679252A1

SU1679252A1 - Method ofr making preparation of vascular channel of organs

Info

Publication number: SU1679252A1
Application number: SU894753568A
Authority: SU
Inventors: Лариса Михайловна Давиденко; Иван Иванович Бобрик; Михаил Русланович Игнатищев; Василий Владимирович Васько
Original assignee: Киевский Медицинский Институт Им.Акад.А.А.Богомольца
Priority date: 1989-10-24
Filing date: 1989-10-24
Publication date: 1991-09-23

Abstract

Изобретение относитс к медицине, конкретнее к гистологии, и предназначено дл подготовки образцов дл изучени сосудистого русла. Цель - упрощение способа при приготовлении препаратов органов человека в .раннем плодном периоде за счет уплотнени пунктируемого участка поверхности аорты. На поверхности сосуда, через который производитс инъекци , нанос т 20%-ный раствор формалина, воздейству в течение 10-20 мин в зависимости от возраИзобретение относитс к медицине, а именно к гистологии, и предназначено дл подготовки образцов дл изучени сосудистого русла органов. Цель изобретени - упрощение способа при приготовлении препарата органов человека в раннем плодном периоде за счет уп- лотнени пунктируемого участка поверхности аорты. ста плода человека 10-16 недель или размера животного, что приводит к уплотнению стенки сосуда и облегчению введени канюли . При наступлении достаточного уплотнени раствор формалина смывают, в надрез сосуда ввод т канюлю соответствующего диаметра, фиксируют ее и производ т инъекцию сосудистого русла одной из инъекционных масс. Затем исследуемый орган извлекают, фиксируют, изготовл ют срезы, дегидратируют их в спиртах возрастающей концентрации, обезвоживают в ксилоле, заключают в бальзам и изучают под микроскопом . Благодар использованию данного метода можно инъецировать сосуды гемо- микроциркул торного русла в раннем плодном периоде у человека, а также сосудистое русло мелких животных; это позволит определить архитектонику сосудов, вы вить особенности их ветвлени , плотность сосудистой сети, провести морфометрию всех звеньев микроциркул торного русла в важные дл развивающегос организма сроки, когда образуетс замкнута сосудиста сеть и наступает дифференцировка отдельных звеньев сосудистой системы. Поставленна цель достигаетс предварительным нанесением на место пункции 20%-ного раствора формалина экспозицией 10-20 мин. Способ осуществл ют следующим образом . Дл посмертной визуализации сосудистого русла исследуемого органа плода человека 10-16 недель или сосудов мелкого животного на обнаженный сосуд, в который сл с L О о ю сл ю 2The invention relates to medicine, more specifically to histology, and is intended for the preparation of samples for studying the vascular bed. The goal is to simplify the method for the preparation of preparations of human organs in the early fetal period by compacting the punctured portion of the aortic surface. A 20% formalin solution is applied to the surface of the vessel through which the injection is made, affected for 10-20 minutes depending on the invention. The invention relates to medicine, namely to histology, and is intended to prepare samples for studying the vascular bed of organs. The purpose of the invention is to simplify the method for preparing a preparation of human organs in the early fetal period due to the sealing of the punctured portion of the aortic surface. One hundred human fetus 10-16 weeks or the size of an animal, which leads to a seal of the vessel wall and facilitate the introduction of the cannula. When sufficient compaction occurs, the formalin solution is washed off, a cannula of the appropriate diameter is inserted into the vessel incision, fixed, and the vascular bed of one of the injection masses is injected. Then, the test organ is removed, fixed, sliced, dehydrated in increasing concentration alcohols, dehydrated in xylene, enclosed in a balm and examined under a microscope. Through the use of this method, it is possible to inject vessels of the hemocirculatory bed in the early fetal period in humans, as well as the vascular bed of small animals; This will determine the architectonics of the vessels, reveal the features of their branching, density of the vascular network, carry out the morphometry of all links of the microvasculature in important periods for the developing organism, when a closed vascular network forms and differentiation of individual links of the vascular system occurs. The goal is achieved by preliminary application of a 20% formalin solution to the puncture site with an exposure time of 10-20 minutes. The method is carried out as follows. For the postmortem visualization of the vascular bed of the test organ of a human fetus 10-16 weeks or small animal vessels on a naked vessel, in which the next L 2

Description

будет введена канюл (например, аорту), нанос т несколько капель 20%-ного формалина , что приводит к постепенному уплотнению стенки.a cannula will be inserted (for example, the aorta), a few drops of 20% formalin are applied, which results in a gradual compaction of the wall.

Врем экспозиции - 10-20 мин - зави- сит от возраста плода или размера животного , что согласуетс с размером сосуда. Чем меньше диаметр сосуда, тем более короткое врем (в пределах 10-20 мин) воздействи формалина. При наступлении достаточного уплотнени раствор формалина смывают, в надрез сосуда ввод т канюлю соответствующего диаметра, фиксируют ее и производ т инъекцию сосудистого русла одной из инъекционных масс. Затем исследуемый ор- ган извлекают, фиксируют, изготовл ют срезы, дегидратируют их в спиртах возрастающей концентрации, обезвоживают в ксилоле, заключают в бальзам и изучают под микроскопом.The exposure time is 10–20 minutes — it depends on the age of the fetus or the size of the animal, which is consistent with the size of the vessel. The smaller the vessel diameter, the shorter the time (within 10-20 minutes) of formalin exposure. When sufficient compaction occurs, the formalin solution is washed off, a cannula of the appropriate diameter is inserted into the vessel incision, fixed, and the vascular bed of one of the injection masses is injected. Then, the test organ is removed, fixed, sliced, dehydrated in increasing concentration alcohols, dehydrated in xylene, enclosed in balsam and examined under a microscope.

Пример 1. Грудную клетку плода человека 10 нед вскрывают, обнажают грудную часть аорты, нанос т несколько капель 20%-ного формалина на 10 мин и после наступлени уплотнени стенки аорты ввод т канюлю в ее надрез, фиксируют ее в аорте и под давлением 100-120 мм. рт. ст, ввод т 10%-ную взвесь черной туши на дистиллированной воде. Исследуемые органы (поджелудочна железа, желудок, печень, тонка кишка и т.д.) извлекают, фиксируют 10%-ным раствором формалина в течение 7 сут, после окончани фиксации материал промывают в проточной водопроводной воде в течение нескольких часов, затем на криостате делают срезы толщиной 100- 200 мкм. Срезы дегидратируют в спиртах возрастающей концентрации, просветл ют в ксилоле, заключают в бальзам.Example 1. The human fetal thorax is opened for 10 weeks, the thoracic aorta is exposed, a few drops of 20% formalin are applied for 10 minutes and after the aortic wall is thickened, a cannula is inserted into its incision, fixed in the aorta and under pressure 120 mm. Hg st, impose a 10% suspension of black ink on distilled water. The test organs (pancreas, stomach, liver, small intestine, etc.) are removed, fixed with 10% formalin solution for 7 days, after the fixation is completed, the material is washed in running tap water for several hours, then slices with a thickness of 100-200 microns. Sections are dehydrated in alcohols of increasing concentration, clarified in xylene, enclosed in balsam.

Применение предлагаемого способа в данном примере дает возможность произвести инъекцию и исследовать ангиоархи- тектонику органов человека в ранний плодный период, установить особенности ветвлени сосудов функционально различ- ных органов, определить такие морфомет- рические параметры, как плотность сосудистой сети, диаметр сосудов принос щего , обменного и вынос щего звеньев сосудистого русла органов 10-недельных плодов The application of the proposed method in this example makes it possible to make an injection and investigate the angioarchy tectonics of human organs in the early fetal period, to establish the features of the branching of vessels of functionally different organs, to determine morphometric parameters such as vascular density, diameter of vessels that bring, exchange and vascular organs of the 10-week-old fetuses

человека, когда сосуды включаютс в общий кровоток.human when vessels are included in the general bloodstream.

Пример 2. Грудную клетку плода 15-16 нед вскрывают, обнажают грудную часть аорты, производ т аппликацию 20%- ного раствора формалина на то место сосуда , где будет произведено введение канюли, После наступлени уплотнени стенки аорты (около 20 мин) в надрез ее ввод т канюлю соответствующего диаметра и фиксируют ее в аорте. Затем под давлением 120-130 мм рт.ст. ввод т 0,25%-ный раствор нитрата серебра на дистиллированной воде. По окончании инъекции исследуемые органы извлекают и фиксируют в 10%-ном растворе формалина. На следующий день материал промывают в водопроводной воде и изготовл ют на криостате срезы толщиной 100-200 мкм. Затем срезы облучают под кварцевой лампой в течение 2 мин, дегидратируют в спиртах возрастающей крепости, просветл ют в ксилоле, заключают в баль- зам И просматривают под микроскопом.Example 2. The chest of the fetus 15-16 weeks open, expose the thoracic part of the aorta, produce a 20% formalin solution in the vessel where the cannula will be inserted. After the aortic wall is compacted (about 20 minutes) into the incision A cannula of the appropriate diameter is inserted and fixed in the aorta. Then under pressure of 120-130 mm Hg. A 0.25% solution of silver nitrate in distilled water was introduced. At the end of the injection, the test organs are removed and fixed in 10% formalin solution. The next day, the material is washed in tap water and sections of a thickness of 100-200 µm are made on the cryostat. Then the sections are irradiated under a quartz lamp for 2 minutes, dehydrated in alcohols of increasing strength, illuminated in xylene, enclosed in balm, and viewed under a microscope.

Благодар использованию новой совокупности признаков можно изготовить образец дл вы влени сосудов кровеносного русла различных органов в раннем плодном периоде у человека, а также сосудов мелких животных, чего раньше не достигалось. Такой образец позволит вы вл ть особенности архитектоники сосудов исследуемого органа у плодов человека сразу после подключени сосудистого русла в общий кровоток, вы вить особенности ветвлени этих сосудов, их морфометрические параметры и т.д.Through the use of a new set of features, it is possible to make a sample for detecting the vessels of the bloodstream of various organs in the early fetal period in humans, as well as vessels of small animals, which had not been achieved before. Such a sample will make it possible to reveal the features of the architectonics of the vessels of the studied organ in human fetuses immediately after connecting the vascular bed to the general circulation, to reveal the branching features of these vessels, their morphometric parameters, etc.

Claims

Invention Formula

A method for preparing organ vascular bed preparations, including puncturing the aorta and filling the vascular bed with an injection mass, extracting and fixing the organ, making sections, dehydrating in alcohols, enlightening in xylene, entering into a balm, which, in order to simplify the method for preparing organs a person in the early fetal period due to the sealing of the punctured portion of the aortic surface; a 20% formalin solution is applied to the puncture site for 10-20 minutes.