SU1632427A1

SU1632427A1 - Medium for ischemic damage tissues prevention during organs transplantation

Info

Publication number: SU1632427A1
Application number: SU884443960A
Authority: SU
Inventors: Юрий Викторович Никитченко; Виктория Николаевна Троянова; Виктор Васильевич Лемешко
Original assignee: Харьковский государственный университет им.А.М.Горького
Priority date: 1988-06-20
Filing date: 1988-06-20
Publication date: 1991-03-07

Abstract

Изобретение относитс к медицине и касаетс сред дл предотвращени ише- мического повреждени , тканей при трансплантации органов. Цель - повышение жизнеспособности тканей. Среда содержит глутаминовую кислоту, пируеат натри , изоцитрат натри , состав Хенкса при определенном соотношении компонентов .Зтабл.The invention relates to medicine and relates to media for the prevention of ischemic damage to tissues during organ transplantation. The goal is to increase tissue viability. The medium contains glutamic acid, sodium pirueate, sodium isocitrate, Hanks composition at a certain ratio of components.

Description

Изобретение относитс к медицине и касаетс сред дл уменьшени ишемическо- го повреждени тканей.The invention relates to medicine and relates to media for reducing ischemic tissue damage.

Цель изобретени - повышение жизнеспособности тканей.The purpose of the invention is to increase the viability of tissues.

Пример1.В сбалансированную солевую смесь Хенкса без глюкозы, содержащую , мас.%: феноловый красный 0,002; NaCI 0,8; KCI 0,04; CaCl2 2НзО 0,019; MgS04 7Н20 0,02; NaaHPO-i НаО 0,006; КН2Р04 0, 006; NaHCOa 0, 035, добавл ют 0,200 мас.% глюкозы и перемешивают на магнитной мешалке. Затем добавл ют 0,037 мас.% глутаминовой кислоты , 0,028 мас. % пирувата натри , 0,089 мас.% изоцитрата натри , тщательно перемешива среду после добавлени каждого компонента. При этом довод т рН среды до 7,4 (1-2 капл ми 0,1 н. КОН). Готовую среду фильтруют через стекл нный фильтр и насыщают кислородом воздуха.Example 1. In balanced salt mixture Hanks without glucose, containing, wt.%: Phenol red 0,002; NaCl 0.8; KCI 0.04; CaCl2 2HzO 0.019; MgS04 7H20 0.02; NaaHPO-i NaO 0.006; KH2P04, 006; NaHCOa 0, 035, add 0.200 wt.% Glucose and mix on a magnetic stirrer. Then 0.037 wt.% Glutamic acid, 0.028 wt. % pyruvate sodium, 0.089 wt.% sodium isocitrate, thoroughly mixing the medium after the addition of each component. The pH of the medium is adjusted to 7.4 (1-2 drops of 0.1 N KOH). The prepared medium is filtered through a glass filter and saturated with oxygen.

П р и м е р 2. Готов т состав как указано в примере 1, но добавл ют 0,015 мас.% глутаминовой кислоты, 0,011 мас.% пирувата натри , 0,036 мас.% изоцитрата натри .EXAMPLE 2 A formulation was prepared as indicated in Example 1, but 0.015% by weight glutamic acid, 0.011% by weight sodium pyruvate, 0.036% by weight sodium isocitrate was added.

П р и м е р 3. После декапитац ии крыс линии Вистар 12-мес чного возраста сердце быстро извлекают и помещают в холодную среду Хенкса на 3 мин. Остановленное и охлажденное сердце взвешивают, каню- лируют аорту и помещают в установку дл перфузии, термостатируемую при 37°С. В течение первых 3 мин сердце перфузируют средой Хенкса без глюкозы (контроль) или средой, включающей указанные метаболиты . Среду перфузии насыщают кислородом воздуха, а скорость перфузии с помощью перистальтического насоса устанавливают равной 5 мл в 1 мин на 1 г ткани сердца. После указанной 3-минутной перфузии сердце , периодически подвергают ишемии по схеме: 19 мин тотальной ишемии - 1 мин реперфузии аэрированной средой.PRI me R 3. After decapitating 12-month-old Wistar rats, the heart is quickly removed and placed in cold Hanks medium for 3 minutes. The stopped and cooled heart is weighed, the aorta is cannulated and placed in a perfusion unit, thermostatically controlled at 37 ° C. During the first 3 min, the heart is perfused with Hank's medium without glucose (control) or medium including the indicated metabolites. The perfusion medium is saturated with air oxygen, and the perfusion rate using a peristaltic pump is set to 5 ml per 1 minute per 1 g of heart tissue. After this 3-minute perfusion, the heart is periodically subjected to ischemia according to the scheme: 19 minutes of total ischemia - 1 minute of reperfusion with an aerated medium.

С целью испытани предлагаемой среды на каждой 20-й мин в течение 3 ч ишемии отбирают минутный перфузат и определ ют в нем лактатдегидрогеназную активность.For the purpose of testing the proposed medium, at every 20th min for 3 hours ischemia, a minute perfusion solution is taken and lactate dehydrogenase activity is determined in it.

Результаты отражены в табл. 1, при этом глутаминовую кислоту, пируват, изоцитрат в вариантах 1-3 добавл ют в концентрации 0,074, 0,055, 0,179 мас.% соответственUCLJBThe results are shown in Table. 1, while glutamic acid, pyruvate, isocitrate in variants 1-3 are added at a concentration of 0.074, 0.055, 0.179 wt.% Corresponding to ECLJB

юYu

оabout

Сд N3 -N Ю Sd N3 -N Yu

вариантах 4-6 - 0,037, 0,028, 0.089 мас;% соответственно. Глюкозу во всех случа х добавл ют в концентрации 0,200 мас.% в соответствии с известной средой. Число опытов 5-22.options 4-6 - 0.037, 0.028, 0.089 wt;%, respectively. Glucose in all cases is added at a concentration of 0.200 wt.% In accordance with a known medium. The number of experiments 5-22.

П р и м е р 4. Известно, что при ишемии увеличиваетс интенсивность перекисного окислени липидов и накопление его конечных продуктов. При этом степень уменьшени накоплени продуктов перекисного окислени липидов, обусловливаема действием испытываемых веществ, может быть показателем их противоишемических свойств,PRI me R 4. It is known that during ischemia, the intensity of lipid peroxidation and the accumulation of its end products increase. The degree of reduction in the accumulation of lipid peroxidation products, caused by the action of the test substances, can be an indicator of their anti-ischemic properties,

С этой целью измер ют содержание одного из конечных продуктов перекисного окислени липидов (малонового диальдеги- да) в гомогенатах миокарда крыс после 3 ч ишемии. В течение 3 ч ишемии ткань миокарда снабжают сбалансированной солевой средой Хенкса без глюкозы (контроль), средой Хенкса, содержащей 0,200 мас.% глюкозы (известна среда), и предлагаемой средой. Содержание малонового диальде- гида определ ют с 2-тиобарбитуровой кислотой .For this purpose, the content of one of the end products of lipid peroxidation (malondialdehyde) in myocardial homogenates of rats after 3 hours of ischemia is measured. Within 3 hours of ischemia, myocardial tissue is supplied with Hanks balanced salt medium without glucose (control), Hanks medium containing 0.200% by weight glucose (medium is known), and the medium proposed. The content of malonic dialdehyde is determined with 2-thiobarbituric acid.

Как видно из данного примера (табл.2), известна среда снижает накопление малонового диальдегида при ишемии только на 26% по сравнению с контролем, а предлагаема на 47%.As can be seen from this example (Table 2), the known medium reduces the accumulation of malondialdehyde during ischemia by only 26% compared with the control, and is offered by 47%.

П р и м е р 5. Вли ние на сохранение сократительной активности сердца после 20, 40, 60 и 80 мин прерывистой ишемии.Example 5: Effect on the preservation of contractile activity of the heart after 20, 40, 60 and 80 minutes of intermittent ischemia.

С этой целью крыс линии Вистар 12-мес чного возраста декапитируют, сердце быстро извлекают и помещают в охлажденную среду Хенкса на 3 мин. Остановленное и охлажденное сердце взвешивают, канюлируют аорту и помещают в установку дл перфузии, термостатируемую при 37°С. В течение первых 5 мин сердце перфузируют средой Хенкса, включающей указанные ме- таболиты, или средой, включающей только глюкозу (известна среда). Среду перфузии насыщают кислородом воздуха, а скорость перфузии с помощью перистальтического насоса устанавливают равной 5 мл в 1 мин на 1 г ткани сердца. После 5-минутной перфузии сердце периодически подвергают ишемии по схеме: 19 мин тотальной ишемии - 1 мин реперфузии аэрированной средой. После 20, 40, .60 или 80 мин прерыви- стой ишемии начинают реперфузию с целью регистрации возобновлени сократительной активности сердца. Дл выравнивани условий испытани сердец, подвергнутых прерывистой ишемии с предлагаемой сре- дои и известной, постишемическую перфузию провод т одной средой - известной. Результаты отражены в табл.3. Предлагаема среда позвол ет увеличить степень защитного противоишемиче- ского действи .To this end, 12-month-old Wistar rats are decapitated, the heart is quickly removed and placed in cooled Hanks medium for 3 minutes. The stopped and cooled heart is weighed, the aorta is cannulated and placed in a perfusion unit thermostatically controlled at 37 ° C. During the first 5 minutes, the heart is perfused with Hank's medium, which includes the indicated metabolites, or medium, which includes only glucose (medium is known). The perfusion medium is saturated with air oxygen, and the perfusion rate using a peristaltic pump is set to 5 ml per 1 minute per 1 g of heart tissue. After a 5-minute perfusion, the heart is periodically subjected to ischemia according to the scheme: 19 minutes of total ischemia - 1 minute of reperfusion with an aerated medium. After 20, 40, .60, or 80 minutes of intermittent ischemia, reperfusion is initiated in order to detect the resumption of the contractile activity of the heart. In order to smooth out the test conditions of hearts subjected to intermittent ischemia with the proposed medium and the known, post-ischemic perfusion is carried out with one medium, the known one. The results are shown in table 3. The proposed environment allows an increase in the degree of protective anti-ischemic effect.

Claims

Claims Environment for preventing ischemic tissue damage during organ transplantation, containing Hanks composition, characterized in that, in order to increase tissue viability, it also contains glutamic acid, sodium pyruvate, sodium isocitrate in the following ratio of components, May. %:

Glutamic acid 0.015-0.074

Pyruvate sodium 0,011-0,055

Isocitrate sodium 0,036-0,179

The composition of Hanks

, Q5 Regarding the control. Regarding the prototype Regarding options 1-5.

table 2

Table 3