SU1594210A1 - Камера дл хемотаксисного разделени попул ции микроорганизмов - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к устройствам дл  хемотаксисного разделени  попул ций микроорганизмов при определении их класстерной гетерогенности. Цель изобретени  - повышение точности и полноты разделени  попул ции микроорганизмов при анализе их класстерной гетерогенности и выделени  таким образом наиболее активных штаммов. Камера содержит чашку Петри 1, вкладыш в виде круглой пластины 2, имеющий сверху центральную лунку 3 дл  инокул та, периферийные лунки 4 и 6 дл  исследуемых образцов и каналы 5 и 7 дл  хемотаксисной жидкости. Все каналы имеют одинаковую длину. Камера обеспечивает исследование различных попул ций микроорганизмов и позвол ет вы вл ть и характеризовать штаммы по их хемотаксисной подвижности. 2 ил.

Description

Изобретение относитс  к устройстам дл  хемотаксисного разделени  опул ций микроорганизмов при аналр1 е их класстерной гетерогенности и ожет быть использовано в области эк- перстшнтальной мшсробиологии.

Цёлыо изобретени   вл етс  повыение точности и полноты разделени  опул ции микроорганизмов при аналие их класстернрй гетерогенности и ыдел ени  таким образок наиболее активных штаммов,

На фиг. 1 изображена камера, ввд сверху на фиг. 2 - разрез А-А на фиг. 1.

Каме а дл  хемотаксисного разделени  попул ции микроорганизмов со де1щит чашку Петри 1 и размещенный в ней -вкладыш в виде круглой шшсти- ны 2, имеющей сверху лунку 3 дл  irao- кул та, лунку 4 дл  исследуемого образца , микроорганизмов и канал 5 дл  хемотаксиеной жидкости,, Лунка 3 дл  шокул та расположена но центру пластины 2, где имеютс  дополнительные лунки 6 дл  исследуемых образцов микроорганизмов, размещенные равномерно по окружности и по периферии пластины 2.. Кажда  лунха 6 соединена каналом 7 дл  хемотаксисной жидкости с центральной лункой 3, Кана лы 7 имеют одш1акову1о длину.

Камера работает елед: тощим образом.

Перед началом работы камеру стерилизуют . Затем в центральную лунку 3 внос т инокул т, например суспенз5-цо эшерихий, а в периферийные лунки 6 - исследуемые образг ы микроорганизмов, В каналы 7 внос т хемотаксисную ; ж йдкость. Одну из лунок 6 или 4 заполн ют тдкже хемотакснсной жидкостью, служащую контролем. После этого камеру закрывают крьшшой i-з помещают в инкубатор . Через огфеделенное врем  ин- кубации из периферийных лунок 6 берутс  пробы и засеваютс  на плотнуй питательную среду. В процессе инкубировани  каждый из образцов микроорганизмов диффундирует в каналы 7. Результаты оцениваютс  по каждому

образцу.

Приме р. Работа с камерой при оценке динамики хемотаксиса и отбор к онов мутантов по хемотаксису.

Берут несколько одинаковых камер, заполн ют взвесью обработанных мутагенами бактерий (инду1 ированна  мута

S

0

5

0

5

45

50

55

ци ) и помещают в термостат - инкубатор , В течение эксперимента камеры через определенные интервалы времени (например, через Ю мин) по одной извлекают из термостата, к поверхности пластин 2 прикладывают жесткий диск, обт нутый стерильным бархатом, снимают отпечаток и ос тцествл ют координатный перенос клеток на плотную питательную среду. На следующий день производ т подсчет колоний и определ ют их координаты. Клоны, образовавшиес  113 клеток-мутантов, неспособных к хемотаксису, имеют координаты 1|ентральной лунки в отпечатке, сделанном в конце эксперимента. Радиальное расположение каналов 7 с одной общей центральной лункой 3 и изолированными периферийными лунками 6 дает возможность исследовать таксис клеток на одновременное воздействие р да а 1 трактантов и репеллентов или на различные концентрации одного аттрактанта.

образом, камера обеспечивает широкий спектр исследований раз- пкчкых попул ций микроорганизмов при повышении точности разделени  попул ций и позвол ет вы вл ть наиболее активные штаммы по их хемотаксисной подвижности.

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Камера дл  хемотаксисного р азде- ленн  попул ции микроорганизмов, со- держаща  чашку Петри и размещенный в ней вклад.ыш в виде круглой пластины, имеющей сверху лунку дл  инокул та, лунку дл  исследуемого образца микро- организмов и канал дл  хемотаксисной жидкости, отличающа с  тем, что, с целью повьшзени  точности и полноты разделени  попул ции микроорганизмов при анализе их класстерной гетерогенности и выделени  таким образом наиболее активных штаммов, лунка дл  инокул та расположена по центру пластины, при этом в пластине выполнены дополнительные каналы и дополнительные лунки дл  исследуемых -образцов, все лунки размещены равномерно по окружности по периферии пластины и кажда  из Hi-tx соединена каналом ал  хемотаксисной жидкости с центральной лункой, причем все каналы имеют одинаковую длину.

   Фиг.2