SU1506471A1

SU1506471A1 - Способ моделировани паркинсонизма

Info

Publication number: SU1506471A1
Application number: SU874336389A
Authority: SU
Inventors: Леонид Семенович Годлевский; Алексей Антонович Шандра; Андрей Миронович Мазарати
Original assignee: Одесский Медицинский Институт Им.Н.И.Пирогова
Priority date: 1987-11-30
Filing date: 1987-11-30
Publication date: 1989-09-07

Abstract

Изобретение относитс к медицине, а именно к нервным болезн м. Цель - повышение воспроизводимости способа. С этой целью животному билатерально в черную субстанцию мозга ввод т раствор дельта-сон индуцирующего пептида в дозе 5-10 нмоль. Применение способа позвол ет повысить воспроизводимость модели паркинсонизма на 55% по сравнению с прототипом.

Description

Изобретение относитс к медицине, а именно к нервным болезн м.

Цель изобретени - повышение воспроизводимости способа.

Способ осуществл ют следующим образом .

Крысу под гексеналовым наркозом (100 мг/кг) фиксируют в стереотак- сическом аппарате, затем производ т срединный разрез кожных покровов черепа , удал ют надкостницу, бормашиной высверливают трепанационные отверсти и ввод т направл ющую канюлю (внешний диаметр 0,5 мм) по координатам (АР -5,3, L 2,5; Н , 8,0). Фиксацию канюль осуществл ют с помощью быстротнердеющей зубоврачебной пластмассы типа Норакрил. Прооперированное животное в течение 10-14 дней находитс при обычном содержании и кормлении. Дл адаптации животного к услови м эксперимента и предсто щей внутримозговой инъекции препарата его ежедневно в течение 5 мин держат в руках. На 1(|-1А-м день после операции

через имплантированную канюлю с помощью микроинъектора производ т введение раствора дельта-сон индуцирующего пептида. При этом в течение 2-3 мин ввод т 1-3 мкл раствора (5- 10 нмоль в физиологическом растворе), после введени еще в течение 2-3 мин канюлю оставл ют на месте дл более полной диффузии препарата и предотвращени его обратного вытекани . После извлечени канюли крысу помещают в прозрачную камеру дл визуальной регистрации изменений.

Пример 1. Крысе-самцу линии Вистар массой 275 г под гексеналовым наркозом (100 мг/кг) стереотаксичес- ки билатерально имплантируют канюли (наружный диаметр 0,5 мм) в зону черной субстанции (АР -5,3, L 2,5; Н 8,0). Канюли фиксируют с помощью быстротвердеющей зубоврачебной пластмассы Норакрил. Через 10 дней после операции (в течение всего времени животное находилось в обычных услови х содержани и кормлени ) в услови х

§

(Л

СП

о

Од

и

свободного поведени крысы с помощью микроинъектора билатерально ввод т свежеприготовленный раствор дельта- сон индущфующего пептида в дозе 5,0 нмоль в 1 мкл физиологического раствора. При этом каждое введение осуществл ют в течение 2,5 мин и после прекращени введени канюли продолжают оставатьс на месте в тече- кие 3 мин. Затем крысу помещают в прозрачную камеру (40 х 60 х 30 см) дл визуальной регистрации поведенческих изменений. Через 5 минут после инъекции у крысы отмечаетс замира- ние, в течение 2,5 мин у животного развиваетс флексорна установка туловища - голова прижимаетс к передним лапам, развиваетс характерна горбатость, задние конечности рас- ставлены в стороны и выдвинуты вперед . Длинник затьшок-основание хвоста составл ет 11,8 см (до введени пептида в состо нии поко 13,5 см). При пассивном отведении конечности ощущаетс значительное сопротивление Частота сердечных сокрал1ений снижаетс с 410 до 350 в минуту, а частот дыхани - со 112 до 82 в минуту. Определение двигательной активности ме тодом пр мой актометрии (подсчет числа колебаний сейсмодатчика установленного в подвижном полу за 2 мин) показало снижение этого показател с 817 до 130j отмечаетс также сниже ние горизонтального и вертикального поведени в открытом поле: число пересеченных квадратов до введени ДСИ составл ло 21 за 2 мин, после введени - 1, а число вepтикaльн JГX стоек - соответственно В и 0. У крысы развиваетс птоз, движени вибрисс отсутствуют . В период непродолжительной локомоции, провоцируемой болевым раз дражеи11ем, наблюдаетс скованность движений, уменьшение длины шага.

Таким образом, у крысы воспроизведен остро формирующийс акинетико- ригидный паркинсонический синдром.

П р и м е р 2. Крысе-самцу линии Вистар массой 290 г под гексеналовым наркозом (100 мг/кг) стереотаксичес- ки билатерально имплантируют канюли (наружный диаметр 0,5 мм) в зону черной субстанции (ЛР -5,3, L 2,5; Н 8,0). Канюли фиксируют с помощью быстротвердеющей зубоврачебной пластмассы Норакрил. Через 11 дней после операции (в течение

5 0 Q

0

этого времени животное находилось в обычных услови х содержани и кормлени ) в услови х свободного поведени крысы С помощью микроинъектора билатерально ввод т свежеприготовленный раствор дельта-сон индуцирующего пептида в дозе 7,5 нмоль в 2 мкл физиологического раствора. При этом каждое введение осуществл ют в течение 3 мин и после прекращени введени канюли продолжают оставатьс на месте в течение 3 мин. Затем крысу помещают в прозрачную камеру (40 х X 60 X 30 см) дл визуальной регистрации поведенческих изменений. Через 6 мин после инъекции у крысы отмечаетс замирание и п течение последующих 1,5 мин у животного развиваетс флексорна установка туловища - голова прижимаетс к передним конечност м , по вл етс характерна горбатость , задние конечности расставлены в стороны и выдвинуты вперед. Длинник затылок - основание хвоста составл ет 11,9 см (до введени пептида в состо нии поко 13,4 см). Отмечаетс птоз, уменьшаетс движение вибрисс . При пассивном отведении правой передней конечности ощущаетс значительное сопротивление. Частота сердечных сокращений снижаетс с 385 до минуту, а частота дыхани - с 98 до 84 в минуту. Определение двигательной активности методом пр мой актометрии (подсчет числа колебаний сейсмодатчика, установленного в подвижном полу, за 2 мин) показало снижение этого показател с 736 до 57; отмечаетс также cнIiжeниe горизо - тального и вертикального поведени в открытом поле: число пересеченных квадратов до введени составл ло 17 за 2 минуты, после введени - 3, а число вертикальных стоек - соответственно 4 и 0. В период непродолжительной спонтанной локомоции, отмечаемой через 15,5 мин после введени пепт1- да, у животного наблюдаетс скованность движений, уменьшение длины шага. Животное не реагирует на предъ вление воды и ПИ11Ш. Изучение элек- тромиограм а1 камбаловидной М1лшцы и ЭЭГ-изменений показалб, что в период описанных поведенческих нарушений имеет место увеличение мьш1ечного тонуса и развитие пароксизмальной синхронизированной активности в хвостатых драх мозга.

, 1506Д71,

jо

Таким образом, у крысы воспроиз- -левой передней конечности ощущаетс

веден остро формирующийс акинетико-значительное сопротивление. Частота

ригидный паркинсонический синдром.сердечных сокращений снижаетс с ЗД9

Пример 3. Крысе-самке линиидо 297 в минуту, а частота дыхани - Вистар массой 280 г под гексеналовымс 102 до 89 в минуту. Определение наркозом (100 мг/кг) стереотаксическидвигательной активности методом пр - билатерально имплантируют канюли (на-мой актометрии (подсчет числа коле- ружный диаметр 0,5 мм) в зону чернойбаний сейсмодатчика, установленного субстанции (ЛР -5,3; L 2,5; Н tO подвижном полу, за 2 мин) показало 8,0). Канюли фиксируют с помощьюснижение этого показател с 895 до быстротвердеющв зубоврачебной пласт-107, отмечаетс снижение горизонталь- масс,1 Норакрил. Через 14 дней посленого и вертикального поведени в от- операции в услови х свободного пове-крытом поле: число пересеченных квад- дени животного (в течение всего это-15 ДО введени составл ло 27 за го времени крыса находилась в обычных2 мин, после введени - 7, а число услови х содержани и корм чени ) свертикальных стоек - соответственно помощью микроин7-,ектора билатерально5 и 1 . В период непродолжительной ввод т свежеприготовленный растворлокомоции, провоцируемой болевьп раз- дельта-сон индуцирующего пептида в20 дражителем, наблюдаетс скованность дозе 10,0 нмоль в 2 мкл физиологичес-движений, уменьшение длины шага. Жи- кого раствора. При этом каждое введе-вотное не реагирует на предъ вление ние осуществл ют в течение 3 мин иводы и пищи.

Claims

после прекращени введени канюпиТаким образом, у крысы воспроизве- продолжают оставатьс на месте в те-25 ден остро формирующийс акинетико- чение 3 мин. Затем крысу помещают вригидный паркинсонический синдром, прозрачную камеру (40 х 60 х 30 см)Применение способа позвол ет по- дл визуальной регистрации поведен-высить воспроизводимость модели пар- ческих изменений. Через 8,5 мин послекинсонизма на 55% по сравнению с из- инъекции у крысы отмечаетс замира- О вестным способом, ние, в течение 3 MVIH у животного развиваетс флексорна установка туло-Формула изобретени вища - голова прюкимаетс к передним

лапам, отмечаетс характерна горба-Способ моделировани паркинсонизма

тость, задние конечности расставленыпутем введени животному химического

в стороны и вьщвинуты вперед. Длинниквещества, отличающийс

затылок - основание хвоста составл -тем, что, с целью повышени воспроет , 11,2 см (до введени пептида визводимости способа, ввод т раствор

состо нии поко 12,9 см). У крысыдельта-сон индуцирующего пептида в

развиваетс птоз, движени вибрисс,Q дозе 5-10 нмоль билатерально в черную

отсутствуют. При пассивном отведениисубстанцию мозга.