SU147294A1

SU147294A1 - The method of selection gibberelin

Info

Publication number: SU147294A1
Application number: SU739836A
Authority: SU
Inventors: Б.Б. Дендзе-Плетман; Г.И. Клейнер; Г.С. Муромцев; М.Н. Нестюк
Original assignee: Б.Б. Дендзе-Плетман; Г.И. Клейнер; Г.С. Муромцев; М.Н. Нестюк
Priority date: 1961-07-24
Filing date: 1961-07-24
Publication date: 1961-11-30

Description

Известен способ выделени гибберелина нз культуральной жидкости экстракционным путем с применением в качестве экстр агента этилацетата , коэффициент распределени которого в воде весьма незначителен , что приводит к расходу большого количества экстрагента.A known method of isolating gibberelin ns culture liquid by extraction using ethyl acetate as an agent, whose distribution coefficient in water is very small, which leads to the consumption of a large amount of extractant.

Предлагаетс способ выделени гибберелина из культуральной жидкости, заключающийс в экстракции гибберелина н-бутиловым спиртом из кислого раствора с последующим реэкстрагированием продукта щелочными водными растворами и далее этилацетатом. При этом сокращаетс объем используемого растворител и расщир етс сырьева база.A method of isolating gibberelin from the culture fluid is proposed, consisting in extracting gibberelin with n-butyl alcohol from an acidic solution, followed by re-extracting the product with alkaline aqueous solutions and then with ethyl acetate. This reduces the amount of solvent used and the raw material base is expanded.

Изучение вли ни концентрации водородных ионов на коэффициент распределени гибберелина в системе -бутиловый спирт-вода показало, что при рН 2,0 3,0 коэффициент распределени равен 25-20 и, следовательно, применение небольших объемов растворител позвол ет извлечь гибберелин из водной фазы с высоким выходом.The study of the influence of the concentration of hydrogen ions on the distribution coefficient of gibberelin in the α-butyl alcohol-water system showed that at pH 2.0 3.0 the distribution coefficient is 25-20 and, consequently, the use of small volumes of solvent allows extracting gibberelin from the aqueous phase high output.

Пример. 18 л фильтрата культуральной жидкости с активностью 315 мг/мл (всего 5,65 г гибберелина) подкисл ют до ,62N-нoй сол ной кислотой и экстрагируют дважды н-бутиловым спиртом (по 3,6 л или 0,2 объема) путем перемешивани в течение 15 мин и разделени фаз на суперцентрифуге. Бутанольные экстракты объедин ют и обрабатывают 30 г активированного угл (ОУ марки А).Example. 18 l of filtrate of culture liquid with an activity of 315 mg / ml (total 5.65 g of gibberelin) is acidified to 62N hydrochloric acid and extracted twice with n-butyl alcohol (3.6 l each or 0.2 volume) by stirring for 15 minutes and phase separation in a supercentrifuge. The butanol extracts are combined and treated with 30 g of activated carbon (grade A AU).

Осветленный бутанольный экстракт реэкстрагируют трижды растворами бикарбоната натри следующих составов: 1,2 л 0,2%-ного раствора NaHCOs (рН выт жки 6,85); 1,2 л 0,1%-ного раствора NaHCOs (рН выт жки 7,2); 1,2 л 0,06%-ного раствора КаНССЗз (рН выт жки 7,2).The clarified butanol extract was extracted three times with sodium bicarbonate solutions of the following composition: 1.2 l of a 0.2% aqueous solution of NaHCOs (extract pH 6.85); 1.2 l of a 0.1% solution of NaHCOs (extract pH 7.2); 1.2 l of a 0.06% KANSS3 solution (pH of the extract 7.2).

Водные растворы объедин ют, подкисл ют сол ной кислотой до рН 2,5 и экстрагируют трижды этилацетатом (по 1 л или 0,3 объема). Этилацетатнь1Й экстракт сушат безводным хлористым кальциемч1 концентрируют под вакуумом до выпадени кристаллов, которые промыД Ь 147294-2вают лед ным этил ацетатом и сушат. В результате получают 3,35 гThe aqueous solutions are combined, acidified with hydrochloric acid to pH 2.5 and extracted three times with ethyl acetate (1 L or 0.3 volume). The ethyl acetate extract dried with anhydrous calcium chloride1 is concentrated under vacuum until the crystals precipitate, which is washed with ice ethyl acetate and dried. The result is 3.35 g

белых кристаллов с активностью 865 мг1мг; точка плавлени гарепарата - 210-212°, удельное вращение al/j 68°. Выход составл ет 186 мг гибберелина с одного литра культуральной жидкости или 51,2%.white crystals with an activity of 865 mg1mg; the melting point of the preparation is 210–212 °, the specific rotation al / j is 68 °. The yield is 186 mg gibberelin per liter of culture liquid, or 51.2%.

Предлагаемый способ позвол ет значительно повысить производительность процесса экстракции, резко сократить объем используемого растворител , использовать любые культуральные среды, в том числе и комплексные. Выход и качество продукта при этом не измен ютс .. Способ вл етс более технологичным по сравнению с известными способами .The proposed method allows to significantly increase the productivity of the extraction process, drastically reduce the amount of solvent used, and use any culture medium, including complex ones. The yield and quality of the product does not change. The method is more technological than the known methods.

Предмет изобретени Subject invention

Способ выделени гибберелина из культуральной жидкости экстракционным путем, отличающийс тем, что, с целью сокращени объема используемого растворител и расширен-н сырьевой базы„ экстракцию осуществл ют ««бутиловым спиртом из кислого раствора с последующим реэкстрагированием продукта щелочными водными растворами и далее этилацетатом.The method of isolating gibberelin from the culture fluid by extraction, characterized in that, in order to reduce the volume of solvent used and the expansion of the raw material base, the extraction is carried out with butyl alcohol from the acidic solution, followed by re-extraction with alkaline aqueous solutions and then with ethyl acetate.

20if20if