SU1381399A1 - Method of assessing immune status - Google Patents

Method of assessing immune status Download PDF

Info

Publication number
SU1381399A1
SU1381399A1 SU864055205A SU4055205A SU1381399A1 SU 1381399 A1 SU1381399 A1 SU 1381399A1 SU 864055205 A SU864055205 A SU 864055205A SU 4055205 A SU4055205 A SU 4055205A SU 1381399 A1 SU1381399 A1 SU 1381399A1
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
cells
auto
rock
immune status
patient
Prior art date
Application number
SU864055205A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Елена Рэмовна Черных
Ольга Юрьевна Леплина
Георгий Зиновьевич Шубинский
Original Assignee
Институт клинической иммунологии СО АМН СССР
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Институт клинической иммунологии СО АМН СССР filed Critical Институт клинической иммунологии СО АМН СССР
Priority to SU864055205A priority Critical patent/SU1381399A1/en
Application granted granted Critical
Publication of SU1381399A1 publication Critical patent/SU1381399A1/en

Links

Landscapes

  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относитс  к медици- ,не, а именно к исследованию иммунно- ГО статуса, и может быть использовано в клинической иммунологии различных заболеваний. Целью изобретени   вл етс  повышение точности оценки иммунного статуса за счет вы влени  ранних этапов дифференцировки Т-кле- ток. Дл  этого мононуклеары обследуемых инкубируют в течение 18 ч в присутствии и в отсутствии Т-активина. По приросту количества ауторозетко- образуюттщх клеток определ ют в интервалах: от О до 1,5 ч пре-ауто- РОК, от О до 6 или от 3 до 6 ч - пре-Т-клетки и от 6 до 18 ч - способность ауто-РОК к дифференцировке. По количеству и соотношению этих клеток, а также их чувствительности к Т-активину суд т об иммунном ста- - тусе. 1 табл.The invention relates to medicine, not specifically to the study of the immune status, and can be used in the clinical immunology of various diseases. The aim of the invention is to improve the accuracy of assessing the immune status by detecting the early stages of differentiation of T-cells. For this, the mononuclear cells of the examined are incubated for 18 h in the presence and in the absence of T-activin. According to the increase in the number of autorosetting cells, they are determined in intervals: from 0 to 1.5 h pre-autoROC, from O to 6 or from 3 to 6 h - pre-T cells and from 6 to 18 h - the ability of auto -ROOK to differentiation. According to the number and ratio of these cells, as well as their sensitivity to T-activin, the immune status is judged. 1 tab.

Description

Изобретение относитс  к медицине, :а именно к исследованию состо ни  ;иммушюго статуса, и может быть ис- |пользовано в клинической иммунологии.The invention relates to medicine, namely to the study of the condition of the immunological status, and can be used in clinical immunology.

Целью изобретени   вл етс  повышение точности оценки иммунного .ста- :туса за счет вы влени  ранних этапов дифференцировки Т-клеток, ; Способ осуществл ют .следуюищм |образом,The aim of the invention is to improve the accuracy of the evaluation of the immune system: tus by detecting the early stages of T-cell differentiation; The method is carried out in the following way,

Мононуклеары (МК) выдел ют путем центрифугировани  гепаринизированной венозной крови (5 мл, содержащей 500 Ед гепарина) в градиенте плотности фиколла-верографина (З мл, плотность 1,077) при 3000 об/мин, Выде- . ленные МК инкубируют в пробирках в среде 199, дополненной 10% тел чьей сыворотки в отсутствии или присутствии Т-активина (1 мкг/мл) при 37°С. Количество клеток в одной пробирке составл ет 1 млн в 1 мл культу- ральной смеси.Mononuclear cells (MK) were isolated by centrifuging heparinized venous blood (5 ml, containing 500 units of heparin) in a ficoll-urografin density gradient (3 ml, density 1.077) at 3000 rpm. MKs are incubated in tubes in medium 199, supplemented with 10% calf serum in the absence or presence of T-activin (1 μg / ml) at 37 ° C. The number of cells in one tube is 1 million in 1 ml of the culture mixture.

Прирост ауто-РОК обусловлен дифференThe increase in auto-ROCK is due to the difference

Тест ауторозеткообразовани  прово- 25 рок-Е пре-Т-клеток.The test for autorosetting wire- 25 rock-E pre-T cells.

:д т следую1 щм образом.: d t following1

: 50 мкл лимфоцитов (-концентраци  5 млн/мл) смегшвают с равным объемом сыворотки человека АВ (IY ) группы: 50 µl of lymphocytes (-concentration 5 mln / ml) are smeared with an equal volume of human serum AB (IV) group

Пример 1. ферической крови пе тодами вы влено сод клеток в присутствиExample 1. Ferric blood was detected by sod cells in the presence of

Пример 1. Больной А, В периферической крови перечисленными методами вы влено содержание пре-Т- клеток в присутствии (пре-Т -клеток)Example 1. Patient A, In peripheral blood, the listed methods revealed the content of pre-T cells in the presence of (pre-T cells)

(предварительно инактивированной про- 30 отсутствии {пре-Т -клеток) Т-акти .греванием и адсорбированной бараньи|ки и человеческими эритроцитами), ин-. кубируют смесь при 4 С в .течение 30 мин и затем добавл ют 50 мкл 1%- ной взвеси аутологичнь х эритропитов, ,(a pre-inactivated pro-absence of {pre-T-cells) by T-activation by heating and adsorbed lamb and human erythrocytes), in-. the mixture is quenched at 4 ° C for 30 minutes and then 50 µl of autologous erythrophyte 1% suspension is added,

;Далее клеточную взвесь центрифугируют; Next, the cell suspension is centrifuged

5 мин при 1000 об/мин и инкубируют в течение ночи при 4 С, после чего производ т подсчет ауто-РОК.5 min at 1000 rpm and incubated overnight at 4 ° C, after which an auto-ROCK was counted.

Т-клетки выдел ют методом градиент-40 ративного заболевани . У больногоT cells were isolated by a gradient-40 method of disease. The patient

вина; пре-Т-клеток 12,5, пре-Т-кле- ток 18,5; пре-ауто-РОК 6; пре-ауто-РОК 9; ауто-РОК 1,5, Сравнива  доли содержани  соответствующих клеток больного с нормой оцениваем, что дол  пре-Т-клеток и пре-ауто-РОК увеличена, содержание ауто-РОК снижено. Состо ние иммунного статуса характерно дл  лимфопролифеного центрифугировани  Е-РОК. Дл  этого 0,5-мл МК периферической крови (концентраци  И) млн/мл) смешивают с 0,1 мл 20%-ной взвеси эритроцитов барана (ЭБ) в присутствии 15% инактивированной и адсорбированной ЭБ сыворотки доноров АВ ( IV ) группы. Клеточную смесь инкубируют 15 мин при 37 С центрифугируют 5 мин при 1000 об/мин и вновь инкубируют в те- чениё 1 ч при °С, Осадок осторожно ресуспендируют и центрифугируют в .; течение 20 мин.wine; pre-T cells 12.5, pre-T cells 18.5; pre-auto-rock 6; pre-auto-rock 9; auto-ROCK 1.5, Comparing the proportion of the content of the corresponding cells of the patient with the norm, we estimate that the proportion of pre-T cells and pre-auto-ROCK is increased, the content of auto-ROCK is reduced. The state of the immune status is characteristic of E-ROCK lymphoprolife centrifugation. To do this, 0.5 ml of peripheral blood IC (concentration I) mln / ml is mixed with 0.1 ml of a 20% suspension of sheep erythrocytes (EB) in the presence of 15% inactivated and adsorbed EB of the serum of donors of the AV (IV) group. The cell mixture is incubated for 15 minutes at 37 ° C., centrifuged for 5 minutes at 1000 rpm and again incubated for 1 hour at ° C. The sediment is carefully resuspended and centrifuged in; for 20 minutes

При 1800 об/мин в градиенте плотности фиколла-верографина (d 1,077), Паход 1чиес  в. осадке с Т-клетками ЭБ после удалени  над- осадочной жидкости лизирзпот гипоосмо- л рным DJOKOM. После этого оставшие .с At 1800 rpm in the density gradient ficoll-urografin (d 1.077), Pahod 1chees c. sediment with T-cells of EB after removal of the supernatant lysirpot fluid with the hypo-osmolar DJOKOM. After that, the remaining .c

лимфосаркома. Примерlymphosarcoma. Example

2, Больной Б. В пери2, Patient B. In the peri

4545

5050

5555

ферической крови больного вы влены следующие содержани : пре-Т -клеток 0; пре-Т -клеток 0; пре-ауто-РОК 0; пре-ауто-РОК 0; ауто-РОК 25. Сравнива  долю содержани  соответствующих клеток больного с нормой, оце ниваем, что содержание пре-Т-клеток пре-ауто-РОК снижено, а ауто-РОК повышено . Состо ние иммунного статуса характерно дл  аутоиммунного заболевани . У больного ревматоидный артрит .The following contents of the patient's blood are revealed: pre-T cells 0; pre-T cells 0; pre-auto-rock 0; pre-auto-rock 0; auto-ROCK 25. Comparing the proportion of the content of the corresponding cells of the patient with the norm, we estimate that the content of pre-T cells of pre-auto-ROCK is reduced, and auto-ROCK is increased. The immune status is characteristic of an autoimmune disease. The patient has rheumatoid arthritis.

И р и м е р 3, Больной В. В пери ферической крови больного вы влены следующие содержание незрелых Т-кле- точных пред1иественников: пре-Т -клеТ-клетки троекратно отмывают средойAnd patient 3, Patient B. In the patient's peripheral blood, the following contents of immature T-cell precursors were revealed: pre-T cells and T cells were washed three times with medium

199 и довод т до концентрации199 and adjusted to concentration

5 млн/мл. Инкубацию МК и сепарированных Т-клеток провод т в течение 18 ч указанным способом. Количество ауто- РОК определ ют в исходных культурах через 1,5; 3; 6; 18 ч культивировани . По приросту ауто-РОК от О до5 million / ml. Incubation of MK and separated T cells was carried out for 18 hours in the indicated manner. The number of auto-ROCKs is determined in the initial cultures after 1.5; 3; 6; 18 h cultivation. According to the increase in auto-ROCK from O to

1,5 ч суд т о количестве предшественников ауто-РОК. Дифференцировка Е ауто клеток в К ауто клетки у доноров - это Т-активин - зависимый процесс. Среднее количество преауто-РОК , определ емое как прирост ауто-РОК в культурах МК с Т-активи- ном, составл ет у здоровых доноров 5,1 + 1,0% (п Н) и соответствует количеству Т-активин-чувствительных1.5 hours is judged on the number of predecessors of auto-ROCK. Differentiation of E auto cells in K auto cells from donors is a T-activin-dependent process. The average amount of preauto-ROCK, defined as an increase in auto-ROCK in MK cultures with T-activin, is in healthy donors 5.1 + 1.0% (nH) and corresponds to the number of T-activin-sensitive

пре-ауто-РОК,определ емому в культурах сепарированнь1Х Т-клеток 5,9 - 1,3% (п 16).pre-auto-ROK determined in cultures of separated T cells 5.9 - 1.3% (P 16).

Прирост ауто-РОК на шести часах обусловлен дифференцировкой в ауторок-Е пре-Т-клеток .The increase in auto-ROCK at six hours is due to differentiation into pre-T cells in autoroc-E.

Пример 1. Больной А, В периферической крови перечисленными методами вы влено содержание пре-Т- клеток в присутствии (пре-Т -клеток)Example 1. Patient A, In peripheral blood, the listed methods revealed the content of pre-T cells in the presence of (pre-T cells)

отсутствии {пре-Т -клеток) Т-актиративного заболевани . У больного in the absence of (pre-T cells) T-activating disease. The patient

вина; пре-Т-клеток 12,5, пре-Т-кле- ток 18,5; пре-ауто-РОК 6; пре-ауто-РОК 9; ауто-РОК 1,5, Сравнива  доли содержани  соответствующих клеток больного с нормой, оцениваем, что дол  пре-Т-клеток и пре-ауто-РОК увеличена, содержание ауто-РОК снижено. Состо ние иммунного статуса характерно дл  лимфопролифелимфосаркома . Примерwine; pre-T cells 12.5, pre-T cells 18.5; pre-auto-rock 6; pre-auto-rock 9; auto-ROCK 1.5, Comparing the proportion of the content of the corresponding cells of the patient with the norm, we estimate that the proportion of pre-T cells and pre-auto-ROCK is increased, the content of auto-ROCK is reduced. The state of the immune status is characteristic of lymphoprolifelaphosarcoma. Example

2, Больной Б. В пери2, Patient B. In the peri

ферической крови больного вы влены следующие содержани : пре-Т -клеток 0; пре-Т -клеток 0; пре-ауто-РОК 0; пре-ауто-РОК 0; ауто-РОК 25. Сравнива  долю содержани  соответствующих клеток больного с нормой, оцениваем , что содержание пре-Т-клеток и пре-ауто-РОК снижено, а ауто-РОК повышено . Состо ние иммунного статуса характерно дл  аутоиммунного заболевани . У больного ревматоидный артрит .The following contents of the patient's blood are revealed: pre-T cells 0; pre-T cells 0; pre-auto-rock 0; pre-auto-rock 0; auto-ROCK 25. Comparing the proportion of the content of the corresponding cells of the patient with the norm, we estimate that the content of pre-T cells and pre-auto-ROCK is reduced, and auto-ROCK is increased. The immune status is characteristic of an autoimmune disease. The patient has rheumatoid arthritis.

И р и м е р 3, Больной В. В периферической крови больного вы влены следующие содержание незрелых Т-кле- точных пред1иественников: пре-Т -клеток 30 ,5; пре-Т -клеток 29; пре-аутй- ,5; пре-ауто-РОК П,5; ауто- РОК-8,5. Сравнива  полученные результаты с нормой, видим, что дол  пре- Т-клеток увеличена, дол  пре-ауто- РОК и ауто-РОК снижена. Состо ние иммунного статуса характерно дл  лим- фопролиферативных заболеваний с аутоиммунным компонентом. У больного лим- фогранулематоз.And patient 3, Patient B. The following contents of immature T-cell predecessors were revealed in the patient's peripheral blood: pre-T cells 30, 5; pre-T cells 29; pre-out-, 5; pre-auto ROCK P, 5; auto-ROCK-8.5. Comparing the results obtained with the norm, we see that the proportion of pre-T cells is increased, the proportion of pre-auto-ROCK and auto-ROCK is reduced. The state of the immune status is characteristic of lymphoproliferative diseases with an autoimmune component. A patient has lymphogranulomatosis.

Сравнительные данные по точности оценки иммунного статуса по известному и предложенному способам приведены в таблице.Comparative data on the accuracy of assessing the immune status of the known and proposed methods are given in the table.

Из данных табли15-1 следует, чтоFrom the data of table 15-1 it follows that

.точность предложенного способа поthe accuracy of the proposed method

сравнению с известным повышена наcompared with the known increased by

29,5-65%.29.5-65%.

НИИ доли ауто-РОК по сравнению с нормой оценивают состо ние иммунного статуса, характерное, дл  аутоиммунных заболеваний, при увеличении доли пре-Т-клеток, снижении доли пре-ауто- РОК и ауто-РОК по сравнению с нормой оценивают состо ние иммунного стату ,са, характерное дл  лимфопролифера- тивных заболеваний с аутоиммуннымThe research institutes of auto-ROCK share compared with the norm assess the state of the immune status characteristic of autoimmune diseases, while increasing the share of pre-T cells, reducing the share of pre-auto-ROK and auto-ROCK compared with the norm assess the state of the immune stat is characteristic of lymphoproliferative diseases with autoimmune

.компонентом..component.

2020

Claims (1)

Формула изобретени Invention Formula Способ оценки иммунного статуса путем определени  субпопул ций Т-клеток , отличающийс  тем, что, с целью повышени  точности оценки за счет вы влени  ранних этапов дифференцировки, определ ют в присутствии Т-актйвина и без него содержание пре-Т-клеток, пре-аутОрозетко- образующих клеток (пре-ауто-РОК), ауторозеткообразующих клеток (ауто- РОК), устанавливают соотношение между показател ми и при увеличении доли пре-Т-клеток, пре-ауто-РОК и уменьше- НИИ доли ауто-РОК по сравнению с нормой оценивают состо ние иммунного статуса, характерное дл  лимфопроли- феративных заболеваний, при уменьше-- НИИ доли пре-Т-клеток , пре-аутО-РОК и неизменном или повышенном содержаThe method of assessing the immune status by determining subpopulations of T cells, characterized in that, in order to increase the accuracy of assessment by detecting the early stages of differentiation, the content of pre-T cells is determined in the presence of T-activin, and without it, Orozetko - forming cells (pre-auto-ROCK), autorosetting cells (auto-ROCK), establish the ratio between the indicators and with an increase in the proportion of pre-T cells, pre-auto-ROCK and a decrease in the share of auto-ROCK compared to normal state of the immune status, characteristic for limfoproli- ferativnyh diseases in umenshe-- SRI share pre-T cell, pre-auto-ROCK and unaltered or elevated containing Лимфогранулематоз65Lymphogranulomatosis 65 Хронический гломеруло- нефрит 56Chronic glomerulo-nephritis 56 Ревматоидный артрит 58,5Rheumatoid Arthritis 58.5 2929 Примечание,Note, Точность оценки иммунного статуса рассчитывали как 100% - % зоны перекрыти  показателей, оп- редел екшх соответствующим способом .The accuracy of the assessment of the immune status was calculated as 100% -% of the overlap zone, determined by the corresponding method.
SU864055205A 1986-04-11 1986-04-11 Method of assessing immune status SU1381399A1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU864055205A SU1381399A1 (en) 1986-04-11 1986-04-11 Method of assessing immune status

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU864055205A SU1381399A1 (en) 1986-04-11 1986-04-11 Method of assessing immune status

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU1381399A1 true SU1381399A1 (en) 1988-03-15

Family

ID=21233188

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU864055205A SU1381399A1 (en) 1986-04-11 1986-04-11 Method of assessing immune status

Country Status (1)

Country Link
SU (1) SU1381399A1 (en)

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Hayvord A.R. et al, Jornal of Immunology, 1978, v.l21, n.l, . *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Kiessling et al. „Natural” ︁ killer cells in the mouse. I. Cytotoxic cells with specificity for mouse Moloney leukemia cells. Specificity and distribution according to genotype
Klimas et al. Immunologic abnormalities in chronic fatigue syndrome
Schiff et al. Membrane receptors and in vitro responsiveness of lymphocytes in human immunodeficiency
Dore-Duffy et al. Antinuclear antibodies in multiple sclerosis
EP0643838B1 (en) Method for the detection of antibodies in seronegative individuals
Weber, F Weber, H Petry, W Lüke Immune response in progressive multifocal leukoencephalopathy: an overview
Takasugi et al. Interaction analysis of selective and nonselective cell-mediated cytotoxicity
US5846758A (en) Method for diagnosing autoimmune diseases
Yust et al. Cytotoxicity mediated by human lymphocyte-dependent antibody in a rapid assay with adherent target cells
WO1997020217A9 (en) Method for diagnosing autoimmune diseases
Kinnman et al. Tuberculous meningitis: immune reactions within the central nervous system
SU1381399A1 (en) Method of assessing immune status
Lolli et al. Increased reactivity to HTLV‐I in inflammatory nervous system diseases
Kowalczyk et al. Migration inhibition of T lymphocytes from human peripheral blood by specific antigen and lymphokines.
Rapoport et al. A study of autoantibodies in chronic mycobacterial infections
Forastiero et al. Comparison of various screening and confirmatory tests for the detection of the lupus anticoagulant
US4402934A (en) Diagnostic technique for rheumatoid arthritis
Nugent et al. Serum lysozyme in inflammatory bowel disease
CA2433768A1 (en) Method for detecting in/vitro food antigen intolerance
Strelkauskas et al. Functional characteristics of human T-lymphocyte subsets identified by sera from patients with systemic lupus erythematosus
US4716107A (en) Method for diagnosis of A.I.D.S.
RU2179316C2 (en) Method of diagnosis of immunodeficiency state
EP0154499B1 (en) Method for diagnosis of a.i.d.s.
Jouini et al. Hemophagocytic lymphohistiocytosis associated with an IgG Cold agglutinin
SU1464088A1 (en) Method of assessing specific sensitization of the organism to allergens