SU1377738A1 - Method of determining cardiomyocyte contractility - Google Patents

Method of determining cardiomyocyte contractility Download PDF

Info

Publication number
SU1377738A1
SU1377738A1 SU853981422A SU3981422A SU1377738A1 SU 1377738 A1 SU1377738 A1 SU 1377738A1 SU 853981422 A SU853981422 A SU 853981422A SU 3981422 A SU3981422 A SU 3981422A SU 1377738 A1 SU1377738 A1 SU 1377738A1
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
cardiomyocyte
rod
lever
bifurcation
minutes
Prior art date
Application number
SU853981422A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Евгений Алексеевич Годин
Марат Рахимович Мукумов
Ефим Шеликович Штенгольд
Original Assignee
Институт Проблем Механики Ан Ссср
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Институт Проблем Механики Ан Ссср filed Critical Институт Проблем Механики Ан Ссср
Priority to SU853981422A priority Critical patent/SU1377738A1/en
Application granted granted Critical
Publication of SU1377738A1 publication Critical patent/SU1377738A1/en

Links

Landscapes

  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относитс  к медицине и может быть использовано в кардиологии дл  диагностики состо ни  миокарда на клеточном уровне сердечно-сосудистых заболеваний и в фармакологии дл  определени  механизмов действи  лекарственных веществ. Цель изобретени  - пс ыаение точности способа путем определени  оценки сократимости кардиомиоцита за счет измерени  параметров сокращени  при физиологически нормальных услови х . Дл  его ферментативного выде- лени , прикладывани  стимула и визуальной оценки сокращени  после вьще- лени  кардиомиоцита к одному его концу прикрепл ют закрепленный в держателе рычаг, к другому концу - стержень с осесимметричным телом на конце , завод т последнее в цилиндрический канал, а нагрузку на кардиомиоцит задают путем создани  потока жидкости в канале, кроме того, прикрепление к кардиомиоциту рычага и стержн  производ т путем подведени  к кардиомиоциту жестко закрепленного в микроманипул торе рычага с развоен- ным концом и капелькой биологического кле  внутри раздвоени  с установкой просвета раздвоени  над концом кардиомиоцита и последующим опусканием рычага и подведени  через 3-5 мин к кардиомиоциту стержн  с заполненньм клеем раздвоением на одном конце с осесимметричным телом на другом и с боковым отводом, закрепленным с возможностью освобождени  в зажиме другого манипул тора, с установкой просвета раздвоени  над другим торцом кардиомиоцита, с последующим опусканием стержн  и его освобождением через 3-5 мин. Кроме того, рычаг и стержень изготовлены скручиванием из тонкой проволоки , 1 ил. i л с 00 vj со 00The invention relates to medicine and can be used in cardiology to diagnose the state of the myocardium at the cellular level of cardiovascular diseases and in pharmacology to determine the mechanisms of action of drugs. The purpose of the invention is to determine the accuracy of the method by determining the assessment of cardiomyocyte contractility by measuring the contraction parameters under physiologically normal conditions. For its enzymatic isolation, application of the stimulus and visual assessment of the contraction after the cardiomyocyte is infused, a lever fixed in the holder is attached to one end, a rod with an axisymmetric body at the end is attached to the end of the cylindrical channel, and the load is the cardiomyocyte is set by creating a flow of fluid in the channel; in addition, the attachment of the lever to the cardiomyocyte and the rod is carried out by applying a lever rigidly fixed in the micromanipulator to the cardiomyocyte and a droplet of biological glue inside the bifurcation with the installation of a bifurcation lumen over the end of the cardiomyocyte and subsequent lowering of the lever and leading in 3-5 minutes to the cardiomyocyte rod with a glue filled with bifurcation at one end with an axisymmetric body at the other and with a side branch fixed with the possibility of release in the clip another manipulator, with the installation of a bifurcation lumen above the other end of the cardiomyocyte, followed by lowering the rod and its release after 3-5 minutes. In addition, the lever and the rod are made by twisting from a thin wire, 1 sludge. i l from 00 vj from 00

Description

Изобретение относитс  к медицине, а именно к способам диагностики оо сто ни  миокарда на Клеточном уровне , и может быть использовано в кар- диологии дл  диагностики сердечнососудистых заболеваний, в физиологии дл  исследовани  механизмов регул ции сократимости миокарда и в фармакологии дл  определени  механизмов ю ействи  биологически активных веществ .The invention relates to medicine, in particular, to methods of diagnosing myocardium at the Cellular level, and can be used in cardiology to diagnose cardiovascular diseases, in physiology to study the mechanisms of myocardial contractility regulation and in pharmacology to determine the mechanisms of biologically active substances.

Цель изобретени  - -повышение точ- кости способа за счет возможности исследовани  в физиологических уело- 15The purpose of the invention is to increase the accuracy of the method due to the possibility of research in the physiological

ВИЯХ.Viyah.

Способ определени  сократимости кардиомиоцита осуществл ют следующим образом.The method for determining cardiomyocyte contractility is carried out as follows.

Каплю суспензии ферментативно вы- 20 еленных кардиомиоцитов помещают в прозрачную перфузионную камеру I (фиг. 1), размещенную на предметном столике микроскопа. Выбирают неповрежденный кардиомиоцит, подвод т к 25 одному его торцу закрепленный в микроманипул торе 2 стержень 3 с раздвоением на конце и с капелькой биоогического кле  в просвете раздвоеи . Раздвоение устанавливают над 30 торцом кардиомиоцита 4 и опускают стержень 3 с помощью микроманипул тоа 2 так, чтобы клей в просвете развоени  стержн  3 охватил торец кар- иомноцита 4. Через 3-5 мин, необ- ходимых дл  надежной полимеризации кле , к другому торцу кардиомиоцита подвод т второй стержень 5 с раздвоением на конце и с капелькой биологического кле  в просвете раздвое- 40 ни . Стержни 3 и 5 могут быть изготовлены путем скручивани  из тонкой проволоки диаметром не более 10 мкм. На конце стержн  5 имеетс  арик 6, которьй проще всего изгото д вить путем нанесени  на конец стержн  капельки кле . Диаметр шарика 6 составл ет 5-10 диаметров стержн  5, а длина стержн  5 - 10-15 диаметров щарика 6. Стержень 5 .зажат в микрозажиме 7, закрепленном во втором микроманипул торе 8. Раздвоение устанавливают над вторым торцом кариомиоцита 4 и опускают стержень 5 с помощью |микроманипул тора 8 так, чтобы клей охватил тОрец кардиомиоцита 4. Через 5 мин после полимеризации кле  освобождают микрозажим 7 и с помощью микроманипул тора 2 пе50A drop of the suspension of enzymatically isolated cardiomyocytes is placed in a transparent perfusion chamber I (Fig. 1) placed on the microscope stage. An intact cardiomyocyte is selected, a rod 3 fixed in a micromanipulator 2 is attached to one of its 25 ends with a split at the end and with a drop of bio-adhesive in the lumen of the split. The split is placed over the 30 end of the cardiomyocyte 4 and the rod 3 is lowered with the help of micromanipulum 2 so that the glue in the lumen of the dilution of the rod 3 engulfs the end of the caromomocyte 4. After 3-5 minutes, necessary for reliable polymerization of the adhesive, to the other end of the cardiomyocyte The second rod 5 is supplied with a split at the end and with a drop of biological glue in the lumen of the split-40. The rods 3 and 5 can be made by twisting from a thin wire with a diameter of not more than 10 microns. At the end of the rod 5 there is arik 6, which is easiest to make by applying a drop of glue to the end of the rod. The diameter of the ball 6 is 5-10 diameters of the rod 5, and the length of the rod 5 is 10-15 diameters of the ball 6. The rod 5 is pressed in the micro clamp 7 fixed in the second micromanipulator 8. The split is set over the second end of the karyomyocyte 4 and the rod 5 is lowered using a micromanipulator 8 so that the glue engulfs the end of the cardiomyocyte 4. After 5 minutes after polymerization, the adhesive is released by the micro clamp 7 and using the micromanipulator 2 pe50

5five

0 5 0 0 д 0 5 0 0 d

00

ремещают кардиомиоцит 4 со стержн ми 3 и 5 влево таким образом, чтобы шарик 6 зашел в цилиндрический канал 9. Диаметр цилиндрического канала 9 составл ет ,1-1,5 диаметра шарика 6. Затем по цилиндрическому каналу создают поток жидкости, обеспечива  усилие на кардиомиоцит. Чрезмерное раст жение кардиомиоцита предотвращаетс  упором бокового отвода стержн  5 в утенку цилиндрического канала 9. Затем через платиновые электроды 10 и 11 производ т электростимул цию кардиомиоцита 4 импульсами длительностью 10-1-5 мс напр жением 30-50 В и частотой 0,1-0,6 Гц. Процесс сокращени  кардиомиоцита 4 регистрируют на кинопленку путем съемки через микроскоп.cardiomyocyte 4 is moved with rods 3 and 5 to the left so that the ball 6 goes into the cylindrical channel 9. The diameter of the cylindrical channel 9 is 1-1.5 diameters of the ball 6. Then a fluid flow is created along the cylindrical channel providing a force on the cardiomyocyte . Excessive stretching of the cardiomyocyte is prevented by focusing the lateral retraction of the rod 5 into the duckling of the cylindrical channel 9. Then electrostimulation of the cardiomyocyte 4 by pulses with a duration of 10-1-5 ms with a voltage of 30-50 V and a frequency of 0.1-0 is performed through platinum electrodes 10 and 11 6 Hz. The process of contraction of cardiomyocyte 4 is recorded on a film by shooting through a microscope.

П р и м е р 1. Определение скоростной компоненты сократимости кар- диомиоцита крысы.PRI me R 1. Determination of the velocity component of contractility of a rat cardiomyocyte.

Брали крысу линии Вистар весом 280 г , производили ее декапитацию, вскрывали грудную клетку и отсекали сердце на уровне дуги аорты и предсердий . Получение кардиомиоцитов производили по стандартной методике Айзенберга. Проводили ретроградную перфузию изолированного сердца по методике Лангендорфа под давлением 80 мм рт.ст. бескальциевым раствором Тироде в течение 15 мин, подключив сердце к специальной перфузион- ной системе. В течение 15 мин пер- фузировали сердце при том же давлении стандартным раствором №роде с добавлением 0,1% коллагеназы. Сердце отсоедин ли от перфузионной системы , рассекали на куски размером 2-4 мм, которые помещали в камеру с мещалкой и с нормальным раствором Тироде плюс 0,1% коллагеназы на 15 мин, затем сливали раствор с поврежденными при рассечении сердца кар- диомиоцитами и наливали свежий. Через 30 мин полученный раствор сливали и центрифугировали при 10 g в течение 10 мин. Раствор сливали, а в пробирку с кардиомиоцитами наливали нормальный раствор Тироде без кол- лагеназы.They took a Wistar rat weighing 280 g, made its decapitation, opened the chest and cut off the heart at the level of the aortic arch and atria. Cardiomyocytes were obtained by the standard Eisenberg method. Retrograde perfusion of the isolated heart was performed using the Langendorff method under a pressure of 80 mm Hg. Calcium-free Tyrode solution for 15 minutes, connecting the heart to a special perfusion system. For 15 minutes, the heart was perfused at the same pressure with a standard solution of Hydrode with the addition of 0.1% collagenase. The heart was disconnected from the perfusion system, dissected into pieces 2–4 mm in size, which were placed in a chamber with a messenger and with a normal solution of Tyrode plus 0.1% collagenase for 15 minutes, then the solution was removed from the cardiomyocytes damaged by dissection of the heart and poured fresh. After 30 minutes, the resulting solution was decanted and centrifuged at 10 g for 10 minutes. The solution was poured, and a normal Tyrode solution without collagenase was poured into a tube with cardiomyocytes.

Каплю суспензии кардиомиоцитов помещали в специальную прозрачную перфузионную камеру, размещенную на предметном столике микроскопа фирмы Карл Цейс. Выбирали неповрежденный кардиомиоцит (кардиомиоцит считалс A drop of a suspension of cardiomyocytes was placed in a special transparent perfusion chamber placed on the stage of the microscope of the company Carl Zeiss. An intact cardiomyocyte was selected (the cardiomyocyte was considered

неповрежденньм, если отсутствовали его спонтанные сокращени  и нарушени  формы) длиной 75 мкм и шириной 18 мкм. Подводили к торцу кардиоми- оцита жестко закрепленный в микроманипул торе рычаг с раздвоенньм концом , изготовлен1а1Й скручиванием из медной проволоки диаметром 10 мкм с капелькой биологического цианакри латного сосудистого кле  внутри раздвоени . Раздвоение устанавливали над торцом кардиомиоцита и опускали рычаг с помощью микроманипул тора так, чтобы клей охватьшал кардиоми- оцит. Через 5 мин клей полимеризовал- с , после чего к другому торцу кар- диомиоцита подводили стержень с раздвоением на конце, в котором помещали капельку биологического кле . . Стержень изготавливали из медной проволоки диаметром 10 мкм путем скручивани  таким образом, чтобы образовать боковой отвод на рассто нии 200 мкм от разветвлени  длиной 100 мкм. За отводом стержень имел длину 1200 мкм. На конце стержн  имелс  шарик диаметром 75 мкм, полученный путем нанесени  капельки эпоксидного кле . Боковой отвод размещали в зажиме, установленном на микроманипул торе. Раздвоение устанавливали над свободным концом кардиомиоцита и опускали стержень так, что клей охватывал торец кардиомиоцита. Через 5 мин после затвердевани  кле  подводили сбоку цилиндрический канал внутренним диаметром 100 мкм так, чтобы от торца канала до бокового отвода было рассто ние 200 мкм. Затем разжимали зажим, освобожда  боковой отвод, и удал ли зажим из пол  зрени  микроскопа с помощью микроманипул тора. К цилиндрическому каналу подавали разрежение нужной величины. Шарик стержн  предварительно был откалиброван таким образом, что было известно, какое . усилие на кардиомиоцит создаетс  при создании заданного разрежени . Калибровка шарика проводилась с помощью торсионных весов.intact if there were no spontaneous contractions and abnormalities (75 microns long and 18 microns wide). A lever with a bifurcated end rigidly fixed in the micromanipulator was brought to the end of the cardiomyocyte; it was made by twisting from a copper wire with a diameter of 10 µm with a drop of biological cyanoacrylate vascular glue inside the bifurcation. The split was placed over the end of the cardiomyocyte and the lever was lowered using a micromanipulator so that the glue covered the cardiomyocyte. After 5 minutes, the glue polymerized, after which a rod was placed at the other end of the cardiomyocyte with a split at the end, in which a drop of biological glue was placed. . The rod was made of copper wire with a diameter of 10 µm by twisting in such a way as to form a side tap at a distance of 200 µm from a branching length of 100 µm. Behind the tap, the rod had a length of 1200 μm. At the end of the rod there was a ball with a diameter of 75 µm, obtained by applying a drop of epoxy adhesive. A lateral outlet was placed in a clamp mounted on a micromanipulator. The splitting was established over the free end of the cardiomyocyte and lowered the rod so that the glue covered the end of the cardiomyocyte. Five minutes after the glue had hardened, a cylindrical channel with an internal diameter of 100 µm was brought in from the side so that the distance from the channel to the side outlet was 200 µm. The clamp was then opened, releasing a side retraction, and the clamp was removed from the microscope field of view using a micromanipulator. To the cylindrical channel filed a vacuum of the desired size. The ball of the rod was previously calibrated so that it was known which one. an effort on the cardiomyocyte is created when a given vacuum is created. The ball was calibrated using torsion weights.

Устанавливали разрежение, достаточное дл  того, чтобы боковой отвод прикоснулс  к торцу цилиндрического канала. Оно равн лось 4,2 мм рт.ст.A vacuum was established sufficient to allow the side tap to touch the end of the cylindrical channel. It was 4.2 mm Hg.

Затем подаваши через платиновые электроды, расположенные на рассто нии 50 мкм от кардиомиоцита, электрические импульсы длительностью 15нсThen, through platinum electrodes located at a distance of 50 µm from the cardiomyocyte, electric pulses with a duration of 15 ns are applied.

напр жением 36 В и частотой 0,5 Гц, Одновременно цилиндрический канал перекрывали ниже шарика по потокуvoltage 36 V and frequency 0.5 Hz. Simultaneously the cylindrical channel was blocked below the ball downstream

так, что усилие, приложенное к кар- диомиоциту, становилось равным нулю. Происходило сокращение кардиомиоцита, которое регистрировалось на киноплен™ ку камерой Красногорск, Максималь-so that the force applied to the cardiomyocyte becomes zero. There was a contraction of the cardiomyocyte, which was recorded on kinoplen ™ ku camera Krasnogorsk,

на  скорость сокращени  кардиомиоцита равн лась 2jl 1/с (180 мкм/с), что свидетельствует 6 хорошей скоростной кo ffloнeйтe сократимости миокарда (максимальна  скорость- сокращени  папилл рной мьшцы крысы в норме при 22 С равн етс  1,7 + 0,2 /с). Пример 2. Определение силовой компоненты сократимости кардиомиоцита крысы.the cardiomyocyte contraction rate was 2jl 1 / s (180 µm / s), which indicates 6 good speed rates of myocardial contractility (the maximum rate of contraction of the papillary rat papillary normal at 22 ° C is 1.7 + 0.2 / with). Example 2. Determination of the strength component of contractility of a rat cardiomyocyte.

Брали крысу линии Вистар весом 260 г. Ферментативное вьвделение кар диомиоцита производили аналогично примеру 1. Бьш выбран кардиомиоцит длиной 67 мкм и шириной 16 мкм. ПриA Wistar rat weighing 260 g was taken. The enzymatic induction of the cardiomyocyte was performed as in Example 1. A cardiomyocyte 67 µm long and 16 µm wide was selected. With

крепление кардиомиоцита производили аналогично примеру 1.cardiomyocyte attachment was performed analogously to example 1.

Устанавливали разрежение 3,4 мм рт.ст. до касани  боковым отводом торца цилиндрического кана-Installed a vacuum of 3.4 mm Hg until it touches the lateral end of the cylindrical canal

ла, прикладывали электрические импульсы длительностью 10 мс, напр жением 42 В и частотой 0,5 наблюдали сокращени .I applied electrical pulses of 10 ms duration, voltage of 42 V and frequency of 0.5 observed reductions.

Затем устанавливали заведомо большое разрежение 120 мм рт.ст.Then a deliberately large vacuum of 120 mmHg was established.

так, что клетка не могла сократитьс . После этого постепенно умень шали разрежение до по влени  первых признаков перемещени  мышцы, которое наблюдалось при разрежении 56 мм рт.ст. Это соответствовало усилию 0,047 мг и напр жению 0,23 г/мм , что соответствует о хорошей силовой компоненте сократимости миокарда. (Напр жение, развиваемое папилл рной мьшцей крысы в норме , составл ет 0,1-0,15 г/мм).so that the cell could not shrink. After that, the rarefaction was gradually reduced until the appearance of the first signs of muscle movement, which was observed at a vacuum of 56 mm Hg. This corresponded to a force of 0.047 mg and a voltage of 0.23 g / mm, which corresponds to a good strength component of myocardial contractility. (The voltage developed by the rat papillary mouth is normally 0.1-0.15 g / mm).

Пример 3.. Определение силовой компоненты сократимости кардиомиоцита крысы после ишемического повреждени .Example 3. Determination of the strength component of contractility of a rat cardiomyocyte after ischemic damage.

Брали крысу весом 250 г.Фермента- тивное выделение и прикрепление диомиохщта производили аналогично примеру 1, однако после перфузии бескальциевьм раствором производили остановку перфузии на 10 мин дл  соз- создани  ишемии. Был выбран кардно- миоцит размером 72x18 мкм.Измер лиA rat weighing 250 g was taken. Enzymatic isolation and attachment of diomyoacid were performed as in Example 1, however, after perfusion with calcium-free solution, perfusion was stopped for 10 minutes to create ischemia. A cardiomyocyte with a size of 72x18 µm was chosen.

максимальное изометрическое напр жение аналогично примеру 2, которое оказалось равным 0,019 мг, что соответствовало напр жению О,08 г/мм . Это свидетельствует о том, что ише- мическое повреждение существенно снизило сократительную способность кардиомиоцита.The maximum isometric voltage was the same as Example 2, which turned out to be 0.019 mg, which corresponded to a voltage O, 08 g / mm. This indicates that ischemic damage significantly reduced the contractile ability of the cardiomyocyte.

Пример 4. Определение дисперсии сократительных свойств кар- диомиоцитов крысы.Example 4. Determination of the dispersion of the contractile properties of rat cardiomyocytes.

V К крысы линии Вистар весом 270 г в соответствии с примером 1 получали кардиомиоциты. Измерени  максимального изометрического усили  кар- диомиоцитов проводили в соответствии с примером 2. Было определено, что напр жение, развиваемое кардиомиоци- тами крысы, равно 0,18 + 0,01 г/мм. Это говорит о малом разбросе сократительных свойств кардИомиоцитов крысы в норме.V To a Wistar rat weighing 270 g in accordance with example 1 received cardiomyocytes. Measurements of the maximum isometric force of the cardiomyocytes were carried out in accordance with Example 2. It was determined that the voltage developed by rat cardiomyocytes was 0.18 + 0.01 g / mm. This indicates a small scatter of the contractile properties of rat cardiomyocytes in normal conditions.

П р и м е р 5. Определение вли ни  биологически активных веществ на сократимость сердечной мышцы крысы.Example 5: Determination of the effect of biologically active substances on the contractility of rat cardiac muscle.

У крысы весом 260 г был получен кардиомиоцит длиной 76 мкм и шириной 20 мкм в соответствии с примером 1. Прикрепление кардиомиоцита и измерение максимального изометрического усили  производили аналогично примеру 2. Измеренное усилие равн лось 0,038 мг. Затем в раствор добавл ли раствор дигоксина из расчета 5 х X 10 г/л, прсле чего вновь измер ли максимальное изометрическое уси лие, которое оказалось равным 0,051 мг, т.е. на 37% больше. Это говорит о существенном положительном изотропном вли нии дигоксина на сократительную активность кардиомиоцита крысы.In a rat weighing 260 g, a cardiomyocyte was obtained with a length of 76 µm and a width of 20 µm in accordance with Example 1. The attachment of the cardiomyocyte and the measurement of the maximum isometric force were performed as in Example 2. The measured force was 0.038 mg. Then a solution of digoxin at the rate of 5 x X 10 g / l was added to the solution, after which the maximum isometric force was again measured, which turned out to be 0.051 mg, i.e. 37% more. This suggests a significant positive isotropic effect of digoxin on the contractile activity of rat cardiomyocyte.

Дисперсии измер емых характеристи уменьшаютс  по сравнению с прототипом . Если при F a6oTe по известному способу среднеквадратичный разбросDispersions of measured characteristics are reduced in comparison with the prototype. If at F a6oTe in a known way the root-mean-square spread

максимальной скорости сокращени  больше 20%, то при использовании предлагаемого способа этот разброс не превьш1ает 5%. Повьшение точности достигаетс  также за счет того, что в предлагаемом способе кардиоми- оцит сокращаетс  в физиологических услови х, под нагрузкой, составл ющей 25-30% от максимального изометрического усили , в то врем  как нагрузка на кардиомиоцит в известном способе равна нулю.the maximum reduction rate is greater than 20%, then when using the proposed method, this spread does not exceed 5%. Improvement of accuracy is also achieved due to the fact that in the proposed method, cardiomyocyte is reduced under physiological conditions, under a load of 25-30% of the maximum isometric force, while the load on the cardiomyocyte in the known method is zero.

Claims (1)

15 Формула изобретени 15 claims 00 5 five Способ определени  сократимости кардиомиоцита путем его ферментативного вьщелени , закреплени  в камере, заполИенной буферным раствором, .. электрической стимул ции с последующей регистрацией сокращени , отличающийс  тем, что, с целью повьппени  точности способа за счет возможности исследовани  в физиологических услови х, при закреплении кардиомиоцита к одному его торцу подвод т стержень с раздвоением на конце и каплей биологического кле  в просвете раздвоени , вьщержи- вают в течение 3-5 мин, к другому торцу кардиомиоцита подвод т фиксированный в зажиме стержень с раздвоением на одном конце и каплей биологического кле  в просвете раздвоени  и шариком на другом конце, вновь выдерживают в течение 3-5 мин, осво- бо вдают второй стержень, перемеща  первый стержень, ввод т шарик в цилиндрический канал, затем дополнительно создают нагрузку на кардиоми- оцит потоком раствора, пропускаемого в камере через цилиндрический канал, при этом диаметр шарика составл ет 3-10 диаметров второго стержн  диаметр цилиндрического канаЛа - 1,1- 1,5 диаметра шарика, а длина второго стержн  - 10-15 диаметров шарика.A method for determining the contractility of a cardiomyocyte by enzymatic cleavage, fixing it in a chamber filled with a buffer solution, electrical stimulation followed by recording the contraction, characterized in that, in order to increase the accuracy of the method due to the possibility of studying under physiological conditions, the cardiomyocyte is attached to one of its ends is supplied with a rod with a split at the end and a drop of biological glue in the lumen of the split; hold it for 3-5 minutes, to the other end of the cardiomyocyte the rod fixed in the clamp with a split at one end and a drop of biological glue in the bifurcation lumen and a ball at the other end is again held for 3-5 minutes, the second rod is released, moving the first rod, the ball is inserted into the cylindrical channel, then In addition, a cardiomyocyte load is created by the flow of the solution passing through the cylindrical channel in the chamber; the ball diameter is 3-10 diameters of the second rod; the diameter of the cylindrical channel is 1.1-1.5 ball diameter, and the length of the second rod is 1 0-15 ball diameters. 5five 00 5five 00 ww // 1one II NTNT ЛL
SU853981422A 1985-11-21 1985-11-21 Method of determining cardiomyocyte contractility SU1377738A1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU853981422A SU1377738A1 (en) 1985-11-21 1985-11-21 Method of determining cardiomyocyte contractility

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU853981422A SU1377738A1 (en) 1985-11-21 1985-11-21 Method of determining cardiomyocyte contractility

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU1377738A1 true SU1377738A1 (en) 1988-02-28

Family

ID=21206970

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU853981422A SU1377738A1 (en) 1985-11-21 1985-11-21 Method of determining cardiomyocyte contractility

Country Status (1)

Country Link
SU (1) SU1377738A1 (en)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5380651A (en) * 1990-12-31 1995-01-10 The Johns Hopkins University Method of determining odorant compounds and antagonists of odorants using a primary culture of olfactory neurons
EP1728856A1 (en) 2005-06-01 2006-12-06 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. A method for optically determining the dynamic behaviour of contracting muscle cells
RU2524134C2 (en) * 2009-02-09 2014-07-27 Конинклейке Филипс Электроникс Н.В. Device, containing cardiomyocytes, and method of production and application thereof

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Tirri R. Vorhanen М., et al. Acta Physiol. Scand. V. 116, p. 257-263. *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5380651A (en) * 1990-12-31 1995-01-10 The Johns Hopkins University Method of determining odorant compounds and antagonists of odorants using a primary culture of olfactory neurons
EP1728856A1 (en) 2005-06-01 2006-12-06 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. A method for optically determining the dynamic behaviour of contracting muscle cells
RU2524134C2 (en) * 2009-02-09 2014-07-27 Конинклейке Филипс Электроникс Н.В. Device, containing cardiomyocytes, and method of production and application thereof

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Telzer et al. Assembly of microtubules onto kinetochores of isolated mitotic chromosomes of HeLa cells.
Lange et al. Absence of a cumulative deterioration of regional function during three repeated 5 or 15 minute coronary occlusions.
Reese Olfactory cilia in the frog
Tilney The polymerization of actin. III. Aggregates of nonfilamentous actin and its associated proteins: a storage form of actin.
Rambourg et al. Three‐dimensional architecture of the Golgi apparatus in Sertoli cells of the rat
Wagner et al. Internephron coupling by conducted vasomotor responses in normotensive and spontaneously hypertensive rats
Costantin et al. Depolarization of the internal membrane system in the activation of frog skeletal muscle
Jaramillo et al. Displacement-clamp measurement of the forces exerted by gating springs in the hair bundle.
Hu et al. Mechanically activated currents in chick heart cells
Chabanel et al. Increased resistance to membrane deformation of shape-transformed human red blood cells [published erratum appears in Blood 1987 Sep; 70 (3): 893]
Ciuffo et al. Reduction of sympathetic inotropic response after ischemia in dogs. Contributor to stunned myocardium.
Niijima et al. THE ACROSOME REACTION IN MYTILUS EDULIS: I. Fine Structure of the Intact Acrosome
US10209243B2 (en) Cardiomyocyte containing device, manufacturing method and measuring method
Ockleford et al. Growth, breakdown, repair, and rapid contraction of microtubular axopodia in the heliozoan Actinophrys sol
SU1377738A1 (en) Method of determining cardiomyocyte contractility
Tilney et al. Acrosomal reaction of the Thyone sperm. III. The relationship between actin assembly and water influx during the extension of the acrosomal process.
Levin et al. Functional effects of in vitro obstruction on the rabbit urinary bladder
Travis et al. Microtubule‐dependent reticulopodial motility: Is there a role for actin?
Jones et al. Contraction of protoplasm. IV. Cinematographic analysis of the contraction of some peritrichs
Bett et al. Activation and inactivation of mechanosensitive currents in the chick heart
Schackow et al. Electrophysiology of adult cat cardiac ventricular myocytes: changes during primary culture
Harder Increased sensitivity of cat cerebral arteries to serotonin upon elevation of transmural pressure
Boldin et al. Cultivation, morphology, and electrophysiology of contractile rat myoballs
WO2009076942A1 (en) Mounting for micro-pipette
Parikh et al. Contraction and relaxation of isolated cardiac myocytes of the frog under varying mechanical loads.