SU1363072A1 - Method of determining glycosil compounds containing ketoamine bond in blood - Google Patents

Method of determining glycosil compounds containing ketoamine bond in blood Download PDF

Info

Publication number
SU1363072A1
SU1363072A1 SU864035900A SU4035900A SU1363072A1 SU 1363072 A1 SU1363072 A1 SU 1363072A1 SU 864035900 A SU864035900 A SU 864035900A SU 4035900 A SU4035900 A SU 4035900A SU 1363072 A1 SU1363072 A1 SU 1363072A1
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
acid
blood
added
glycosil
determining
Prior art date
Application number
SU864035900A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Владимир Константинович Городецкий
Елена Анатольевна Карпова
Original Assignee
Институт Биологической И Медицинской Химии Амн Ссср
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Институт Биологической И Медицинской Химии Амн Ссср filed Critical Институт Биологической И Медицинской Химии Амн Ссср
Priority to SU864035900A priority Critical patent/SU1363072A1/en
Application granted granted Critical
Publication of SU1363072A1 publication Critical patent/SU1363072A1/en

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

Изобретение может быть использовано дл  диагностики диабета и га- лактоземии. Цель изобретени  - ускорение и повышение чувствительности способа. Смесь цельной крови и три- хлоруксусной кислоты нагревают.После охлаждени  к пробам добавл ют 40%-ную трихлоруксусную кислоту и центрифугируют. К надосадку добавл ют сол ную и тиобарбитуровую кислоты . Смесь инкубируют и измер ют величину абсорбции. Кроме того, опре- . дел ют величину абсорбции фона и рас- считьшают количество гликозилирован- ного гемоглобина. i (Л ее О5 со юThe invention can be used to diagnose diabetes and galactosemia. The purpose of the invention is to accelerate and increase the sensitivity of the method. The mixture of whole blood and trichloroacetic acid is heated. After cooling, 40% trichloroacetic acid is added to the samples and centrifuged. The hydrochloric and thiobarbituric acids are added to the supernatant. The mixture is incubated and the amount of absorption measured. In addition, defined. the background absorption value is divided and the amount of glycated hemoglobin calculated. i (L her O5 soy

Description

Изобретение относитс  к биохимии и медицине и может быть использовано в эндокринологии дл  диагностики и контрол  за ходом лечени  диабета и галактоземии.The invention relates to biochemistry and medicine and can be used in endocrinology to diagnose and monitor the progress of treatment of diabetes and galactosemia.

Цель изобретени  - ускорение и по- вьппение чувствительности способа.The purpose of the invention is to accelerate and increase the sensitivity of the method.

Способ осуществл етс  следующим образом,The method is carried out as follows.

К пробе цельной крови объемом 1 мл добавл ют 0,2 М трихлоруксусную кислоту, вьщерживают в течение 1 - 1,5 ч на вод ной бане, затем добавл ют равные объемы 0,02 М тиобарбиту- ровой кислоты и концентрированной сол ной кислоты, инкубируют на кип щей вод ной бане в течение 6-7 мин, охлаждают пробы и измер ют интенсивность окраски на спектрофотометре при 432-433 нм.0.2 M trichloroacetic acid is added to a 1 ml sample of whole blood, held for 1-1.5 hours in a water bath, then equal volumes of 0.02 M thiobarbituric acid and concentrated hydrochloric acid are added, and the mixture is incubated in a boiling water bath for 6–7 min, samples are cooled and the color intensity is measured on a spectrophotometer at 432–433 nm.

Пример, КО,1 мл цельной крови добавл ют 0,9 мл дистиллированной воды и 0,5 мл 0,2 М трихлоруксус- ной кислоты. Смесь нагревают 1 ч 15 мин на кип щей вод ной бане. Нос- .лё охлаждени  к пробам добавл ют ;0,5,мл 40%-ной трихлоруксусной кис- лоТы дл  осаждени  белков. Пробы .центрифугируют 1Омин при 7000об/мин .. К 0,5 мл надосадка добавл ют 0,5 мл концентрированной сол ной кислоты и 0,5 мл 0,02 М тиобарбитуровой кислоты . Смесь инкубируют 6 мин на кип щей вод ной бане. После инкубации из Мер ют величину абсорбции известного комплекса (А ) при 432,5 нм, Так как в цельной крови присутствуют свободные сахара, необходимо определение величины абсорбции фона (), Определение абсорбции фона провод т аналогично определению величины абсорбции цветного комплекса.Example, CO, 1 ml of whole blood is added with 0.9 ml of distilled water and 0.5 ml of 0.2 M trichloroacetic acid. The mixture is heated for 1 hour and 15 minutes in a boiling water bath. After cooling, samples are added; 0.5, ml of 40% trichloroacetic acid to precipitate proteins. Samples are centrifuged with 1Omin at 7000 rpm. To 0.5 ml of the supernatant, add 0.5 ml of concentrated hydrochloric acid and 0.5 ml of 0.02 M thiobarbituric acid. The mixture is incubated for 6 minutes in a boiling water bath. After incubation, the absorbance value of the known complex (A) at 432.5 nm is measured. Since free sugars are present in whole blood, it is necessary to determine the absorbance value of the background (). The absorbance measurement of the background is carried out similarly to determine the absorbance value of the color complex.

Редактор И,Рыбченко Заказ 6398/34Editor And, Rybchenko Order 6398/34

Составитель Н,Гул ева Техред Л,СердюковаCompiled by N, Gul eva Tehred L, Serdyukova

Корректор Corrector

Тирал 776ПодписноеTiral 776 Subscription

Государственного комитета СССР USSR State Committee

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, , Раушска  наб, , д,4/5on affairs of inventions and discoveries 113035, Moscow,, Raushsk nab, 4/5

Производственно-полиграфическое предпри тие, г,Ужгород, ул,Проектна , 4Production and printing company, Uzhgorod, Proektna st, 4

исключа  стадию нагревани  на кип щей вод ной бане в течение I ч (А.excluding the stage of heating in a boiling water bath for 1 h (A.

цв.. А oHtf ) Расчет количества гликозилированного гемоглобина ведут по стандартной кривой фрук- тозоглицин на основе полученных значений величин абсорбции, Ацв. комл. 0,385; А Фока . - 0,087; А - 0,385 - 0,087 0,298, Количество гликозилированного гемоглобина 10%, tsv .. A oHtf) The calculation of the amount of glycated hemoglobin is carried out according to the standard curve of fructosoglycine based on the obtained values of absorption values, Atsv. set 0.385; And Fock. - 0.087; A - 0.385 - 0.087 0.298, The amount of glycated hemoglobin is 10%,

Изобретение обеспечивает ускорение и повьшение чувствительности способа в 2 раза.The invention provides an acceleration and increase the sensitivity of the method in 2 times.

Claims (1)

Формула изобретени Invention Formula Способ определени  в крови глико- зилированных соединений, содержащих кетоаминовую св зь, путем забора крови , добавлени  к пробе кислоты,проведени  кислотного гидролиза нагреванием при , осаждени  белков трихлоруксусной кислотой и их отделени , добавлени  тиобарбитуровой кислоты , инкубации и спектрофотометриро- вани , отличающий с  тем, что, с целью ускорени  и повышени  чувствительности способа, в .качестве кислоты при проведении кислотного гидролиза используют трихлоруксусную кислоту в концентрации 0,2 М, нагревание провод т в течение l,25tO,25 ч, тиобарбитуровую кислоту берут в концентрации 0,02 М, дополнительно добавл ют концентрированную сол ную кислоту в соотношении гидролизованна  проба тиобарбитуров-а  кислота - сол на  кислота 1 : 1 г 1, нагревают в течение 6,5tO,5 мин, а спектрофото- метрирование провод т при длине волны 432,510,5 нм, ,.The method for detecting glycosylated ketoamic bond compounds in blood by taking blood, adding acid to the sample, performing acid hydrolysis by heating, precipitating the proteins with trichloroacetic acid and separating them, adding thiobarbituric acid, incubating and spectrophotometrically characterized by that, in order to accelerate and increase the sensitivity of the method, as the acid, when carrying out acid hydrolysis, trichloroacetic acid is used in a concentration of 0.2 M, the heating is carried out during l, 25tO, 25 h, thiobarbituric acid is taken in a concentration of 0.02 M, concentrated hydrochloric acid is added in a ratio of hydrolyzed thiobarbituric acid — hydrochloric acid 1: 1 g 1, heated for 6.5 tO, 5 min, and spectrophotometry was carried out at a wavelength of 432.510.5 nm,,. Корректор А.ЗимокосовProofreader A.Zimokosov
SU864035900A 1986-02-12 1986-02-12 Method of determining glycosil compounds containing ketoamine bond in blood SU1363072A1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU864035900A SU1363072A1 (en) 1986-02-12 1986-02-12 Method of determining glycosil compounds containing ketoamine bond in blood

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU864035900A SU1363072A1 (en) 1986-02-12 1986-02-12 Method of determining glycosil compounds containing ketoamine bond in blood

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU1363072A1 true SU1363072A1 (en) 1987-12-30

Family

ID=21225955

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU864035900A SU1363072A1 (en) 1986-02-12 1986-02-12 Method of determining glycosil compounds containing ketoamine bond in blood

Country Status (1)

Country Link
SU (1) SU1363072A1 (en)

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Gabbay К.Н. et al. Diabetes, 1979, V 28, № 4, p.337, *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Maehly [143] Plant peroxidase
Heyrovsky A new method for the determination of inulin in plasma and urine
Anfinsen et al. The kinetics of formation of native ribonuclease during oxidation of the reduced polypeptide chain
Kato et al. A simple and sensitive assay for dopamine-β-hydroxylase activity by dual-wavelength spectrophotometry
Eggleton et al. The estimation of creatine and of diacetyl
Kodicek Estimation of nicotinic acid in animal tissues, blood and certain foodstuffs: Method1
Lovenberg et al. Chemical nature of rubredoxin from Clostridium pasteurianum
Rippa et al. Purification and properties of two forms of 6‐phosphogluconate dehydrogenase from Candida utilis
Boratyński Colorimetric method for the determination of ketoses using phenol-acetone-boric acid reagent (PABR)
SU1363072A1 (en) Method of determining glycosil compounds containing ketoamine bond in blood
MERTZ et al. A rapid micromethod for the determination of indirect bilirubin
Jordan Uroporphyrinogen III cosynthetase: a direct assay method
Ambrose A shortened method for the fluorometric determination of phenylalanine
US4349352A (en) Test for glucosylated hemoglobin and other glucosylated proteins
Uehara et al. An Improved Method for the Determination of Tyrosine Residues in Proteins Using 1-Nitro-2-napthol
Szalkowski et al. Colorimetric determination of calcium pantothenate
Bonnichsen Catalase from horse kidney and human liver
Korber et al. Quantitative measurement of adenosine deaminase from human erythrocytes
CA1146769A (en) Process for the determination of diabetes
Pan et al. Determination of phenylacetic acid and phenylacetamides in samples from penicillin fermentations
JPH02195900A (en) Determination of glycoprotein and determination reagent
SU1355933A1 (en) Method of detecting sialic acids in biological material
Adachi et al. Study on the reduced pyridine nucleotide dehydrogenase of bovine erythrocytes: I. Crystallization and properties of the reduced pyridine nucleotide dehydrogenase of bovine erythrocytes
Moses et al. Simultaneous determination of serum cholesterol and triglycerides after preliminary column chromatography
SU1347014A1 (en) Method of determining glycoside compounds conatining ketoamine binding in blood