SU1340582A3

SU1340582A3 - Method of producing 4-aminobutyric acid derivatives or calcium or lysine salt thereof

Info

Publication number: SU1340582A3
Application number: SU843720297A
Authority: SU
Inventors: Йонеда Наото; Хауаси Кимиаки; Сугавара Йоси; Харигайя Чоиси
Original assignee: Танабе Сейяку Ко,Лтд. (Фирма)
Priority date: 1984-03-30
Filing date: 1984-03-30
Publication date: 1987-09-23

Abstract

Изобретение касаетс производ- ньпс аминокислот, в частности 4-ами- номасл ной кислоты или ее солей общей формулы (I) R-C(0)-0-CHj-C(CH,)2- -CH(CH)-C(O)NH(CH)-C(O)OH, где R - разветвленный С -С -алккп, которые как обладакщие физиологической активностью в части обменных процессов головного мозга при расстройстве его функций могут быть использованы в медицине. Дл вы влени физиологической активности веществ указанного класса получены новые I реакцией соответствующего оксипроизвод- ного и ангидрида или хлорангидрида соответствующей кислоты. Процесс ведут при 0-20 с в инертном растворителе . При необходимости I могут быть переведены в Са- или L-лизиновую соль. Лучшую активность про вл ют D-изомеры. При R - изо-С -алкил D-кислота имеет т.пл. 82-3,, угол вращени при концентрации 1 моль/л в зтаноле б +37&deg;. Активность ее измер ют хроматографически по снижению уровн гопантеновой кислоты в плазме крови. При дозе 389 ммоль/кгживой массы содержание гопантеновой кислоты через 1ч составл ет 32,9t2,7 мг/мл, через 2 ч - 16,413,5 мг/мл. 6 табл. СО смThe invention relates to the production of amino acids, in particular 4-aminobutyric acid or its salts with the general formula (I) RC (0) -0-CHj-C (CH) 2- -CH (CH) -C (O) NH (CH) -C (O) OH, where R is a branched C-C -alkkp, which, as having physiological activity in terms of metabolic processes of the brain in the breakdown of its functions, can be used in medicine. To reveal the physiological activity of substances of the indicated class, new I reactions were obtained by the corresponding oxy derivative and the anhydride or acid chloride of the corresponding acid. The process is carried out at 0-20 s in an inert solvent. If necessary, I can be converted to the Ca- or L-lysine salt. D-isomers exhibit better activity. When R - iso-C-alkyl, D-acid has so pl. 82-3 ,, rotation angle at a concentration of 1 mol / l in ethanol b + 37 °. Its activity is measured by chromatography to reduce the level of hopantenic acid in the blood plasma. At the dose of 389 mmol / kg of the living mass, the content of hopantenic acid after 1 hour is 32.9 t2.7 mg / ml, after 2 hours - 16.413.5 mg / ml. 6 tab. SB see

Description

2020

2525

113А0582113A0582

Изобретение относитс к способу получени новых производных 4-ами- номасл ной кислоты формулыThe invention relates to a process for the preparation of new derivatives of 4-aminobutyric acid of the formula

СНCH

RCOOCH2.-C-СН-СОКН(СН2,зСООН СНзОИ П)RCOOCH2.-C-CH-SOWN (CH2, UNC SNZOI P)

где R - линейный или развет;вленный ю С,-Са-алкил или его кальциевых лизиновых солей, про вл ющих биологическую активность дл улучшени обменных процессов головного мозга и 15 при расстройстве его функций. Целью изобретени вл етс изыскание новых соединений, про вл ющих более высокую биологическую активность и более длительное действие при введении в кровь и мозг и обладающих более сильным действием дл улучшени обменных процессов головного мозга .where R is linear or branched; incorporated C, -Ca-alkyl or its calcium lysine salts exhibiting biological activity to improve the metabolic processes of the brain and 15 in the breakdown of its functions. The aim of the invention is to find new compounds that exhibit higher biological activity and a longer effect when introduced into the blood and brain and have a stronger effect to improve the metabolic processes of the brain.

Соединени (1) содержат один асимметрический атом углерода в молекуле и, следовательно, имеют два оптических изомера. Изобретение включает все эти изомеры. Из этих изомеров соединени , у которых асимметрический атом углерода имеет D-конфигурацию, вл ютс особенно предпочтительными дл использовани в медицине.Compounds (1) contain one asymmetric carbon atom in the molecule and, therefore, have two optical isomers. The invention includes all of these isomers. Of these isomers, compounds in which the asymmetric carbon atom has the D configuration are particularly preferred for use in medicine.

Соединени (1) можно использовать в форме свободной кислоты или в форме ее фармацевтически приемлемой соли . Подход щими вл ютс кальциева СОЛЬ:, лизинова соль. В качестве средства дл улучшени обмена в головном мозге примен ют гопантенат кальци . Предлагаемый способ выполнен на основе того, что при пероральном введении гопантена- та кальци последний находитс в органах тела (например, в плазме кро- ви и в головном мозге) в виде гопан-, теновой кислоты, и когда повьшаетс уровень гопантеновой кислоты в плазме крови и п головном мозге, повышаетс и активность дл улучшени обменногоCompounds (1) can be used in the form of the free acid or in the form of its pharmaceutically acceptable salt. Calcium SOL:: lysine salt is suitable. Calcium hopantenate is used as a means of improving metabolism in the brain. The proposed method is based on the fact that, upon oral administration of calcium hopanantum, the latter is found in organs of the body (e.g., in blood plasma and in the brain) in the form of hopanic, tenoic acid, and when the level of hopantenic acid in the blood plasma increases. and n the brain, and the activity to improve metabolic

ку соединени (1) показывают наличие более высокого уровн гопантеновой кислоты, чем в случае перорального введени гопантената кальци , соединени (1) вл ютс лучшими в отношение гопантената кальци в качестве средства дл улучшени обменных процессов в головном мозге,. Соединени Compounds (1) show a higher level of hopantenic acid than in the case of oral administration of calcium hopantenate, compounds (1) are superior to calcium hopantenate as a means to improve the metabolic processes in the brain. Compounds

30thirty

3535

4040

(О ввод т перорально, они гидроли- зуютс в тепле, преобразу сь в гопан- теновую кислоту.(O are orally administered, they are hydrolyzed in heat, converted to hopantenoic acid.

Соединени (1) или их фармацевтически приемлемую соль предпочтительно ввод т перорально (но так же можно вводить и парентерально) в виде обычных препаратов, например твердых препаратов, таких как таблетки, пилюли , порошки, капсулы или гранулы, и жидких препаратов, такие как растворы , суспензии или змульсии. Такие препараты можно получить обычным способом , например путем смешени соеди- некм формулы (1) или его фармацевтически приемлемой соли с обычным носителем или разбавителем, таким как карбонат кальци , фосфат кальци , кукурузный крахмал, картофельньй крахмал, лактоза, тальк и стеарат магни .Compounds (1) or a pharmaceutically acceptable salt thereof are preferably administered orally (but can also be administered parenterally) in the form of conventional preparations, for example, solid preparations, such as tablets, pills, powders, capsules or granules, and liquid preparations, such as , suspensions or emulsions. Such preparations can be prepared in a conventional manner, for example by mixing the compounds of formula (1) or a pharmaceutically acceptable salt thereof with a conventional carrier or diluent, such as calcium carbonate, calcium phosphate, corn starch, potato starch, lactose, talc and magnesium stearate.

Доза соединений (1) или их фарма- цевтически приемлемых солей может измен тьс в зависимости от типа заболевани , возраста и веса пациентов, т жести заболеваний и способа введени препарата, но обычно oHfi составл ет 1-20 мг/кг в сутки, предпочтительно 2-10 мг/кг в сутки до перорального введени .The dose of compounds (1) or their pharmaceutically acceptable salts may vary depending on the type of disease, the age and weight of the patients, the severity of the disease and the method of administration, but usually oHfi is 1-20 mg / kg per day, preferably 2 -10 mg / kg daily prior to oral administration.

В случае, когда примен ютс соединени (1) или их фармацевтически приемлемые соли они имеют высокий уровень содержани в крови и голо.вном мозге, что подтверждаетс следующими экспериментами.In the case where compounds (1) are used or their pharmaceutically acceptable salts, they have a high level in the blood and the brain, which is confirmed by the following experiments.

Эксперимент 1. Используют крыс SD мужских особей весом 200 г в возрасте 7 недель, голодавших в течение ночи (одна группа: 4 крысы).Каж- дой крысе перорах(ьно ввод т суспензию (2 мл) испытываемого соединени в растворе (О,5%)карбоксиметилцеллю- лозы при помощи желудочного зонда (доза испытываемого соединени 389 fu моль/кг, что соответствует 100 мг/кг гопантената кальци ).Через один или два часа после введени препроцесса в головном мозге. Посколь-50 парата крыс умертвили, перерезавExperiment 1. Male SD rats weighing 200 g at the age of 7 weeks, starving overnight (one group: 4 rats) were used. Each rat perora (a suspension (2 ml) of the test compound in solution (O, 5 %) carboxymethylcellulose using a gastric probe (dose of test compound 389 fu mol / kg, which corresponds to 100 mg / kg of calcium gopanthenate). One or two hours after the preprocessing in the brain. After 50 parats were killed, the rats were killed by cutting

сонные артерии и собрали кровь. Кровь каждой крысы центрифугируют (2800 об/мин, 15 мин) дл отделени плазмы крови,, Концентрацию гопан- 55 теновой кислоты в плазме кровиcarotid arteries and collected blood. The blood of each rat is centrifuged (2800 rpm, 15 min) to separate the blood plasma, the concentration of hopanic acid in the blood plasma.

(0,1 мл) определ ют при помощи газовой хроматографии и масс-спектромет рии.(0.1 ml) was determined by gas chromatography and mass spectrometry.

00

5five

5 five

00

5five

00

Эксперимент 1. Используют крыс SD мужских особей весом 200 г в возрасте 7 недель, голодавших в течение ночи (одна группа: 4 крысы).Каж- дой крысе перорах(ьно ввод т суспензию (2 мл) испытываемого соединени в растворе (О,5%)карбоксиметилцеллю- лозы при помощи желудочного зонда (доза испытываемого соединени 389 fu моль/кг, что соответствует 100 мг/кг гопантената кальци ).Через один или два часа после введени преРезультаты представлены в табл.1.Experiment 1. Male SD rats weighing 200 g at the age of 7 weeks, starving overnight (one group: 4 rats) were used. Each rat perora (a suspension (2 ml) of the test compound in solution (O, 5 %) carboxymethylcellulose using a gastric probe (dose of the test compound is 389 fu mol / kg, which corresponds to 100 mg / kg of calcium gopanthenate). One or two hours after administration, the results are presented in Table 1.

Эксперимент 2. Используют крыс SD мужских особей весом 200 г в возрасте 7 недель, голодавших в течение ночи (одна группа: 4 крысы).Каждой крысе при помощи желудочного зонда перорально ввод т суспензию (2 мл) испытываемого соединени в 0,5%-ном растворе карбоксийетилцеллюпозы (доза испытываемого соединени 389,4 |имоль/кг, что соответствует 100 мг/кг гопантената кальци ). Через два или три часа после введени соединени головной мозг был извлечен и промыт физиологическим раствором . К мозгу прибавл ют в 9 раз больший объем воды, смесь подвергают гомогенизации в гомогенизаторе в течение одной ми1туты при охлаждении льдом и затем центрифугируют со скоростью 10000 об/мин при 4°С в течение одного часа . Концентрацию гопантеновой кислоты во всплывшем слое (1 мл соответствует О,1 г мозга) определ ют при помощи газовой хроматографии и масс-спектрометрии.Experiment 2. Male rats weighing 200 g at the age of 7 weeks, starving during the night (one group: 4 rats) are used in rats. Each rat is orally administered with a stomach probe suspension (2 ml) of the test compound in 0.5% - A solution of carboxyethylcellulose (the dose of the test compound is 389.4 | imol / kg, which corresponds to 100 mg / kg of calcium hopantenate). Two or three hours after administration of the compound, the brain was removed and washed with saline. A larger volume of water is added to the brain 9 times, the mixture is homogenized in a homogenizer for one mile with ice cooling and then centrifuged at 10,000 rpm at 4 ° C for one hour. The concentration of hopantenic acid in the supernatant (1 ml corresponds to O, 1 g of the brain) is determined by gas chromatography and mass spectrometry.

Результаты представлены в табл.2 Испытывались те же соединени , что и в эксперименте 1.The results are presented in Table 2. The same compounds were tested as in Experiment 1.

Как видно .из вьш1еприведенных экспериментальных данных, при перорал ном введении крысам в дозе 389 ,4 fu моль/кг соединений изобретени (Л-4-(К-(4-изобутироилокси-3,3- диметил-2-окси-н-бутирил)-н-масл - ной кислоты и D-4-(N-(4-изовалерШ1- окси-3,3-диметил-2-окси-н-бутирил ) - амино -н-масл ной кислоты) наблюдаетс высокий уровень содержаний гопантеновой кислоты в плазме крови, в 1,2-1,9 раз превышающий содержани этой кислоты в плазме крови при введении гопантената кальци , а также наблюдаетс высокое содержание гопантеновой кислоты в головном мозге в 1,5-2,2 раза превьш1ающее содержание этой кислоты в головном мозге в случае введени гопантената кальци As can be seen from the above experimental data, when orally administered to rats at a dose of 389, 4 fu mol / kg of the compounds of the invention (L-4- (K- (4-isobutyryloxy-3,3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl ) -n-butyric acid and D-4- (N- (4-isovaler-1-hydroxy-3,3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) -amino-n-butyric acid) plasma level of hopantenic acid, is 1.2-1.9 times higher than plasma levels of this acid when calcium hopantenate is administered, and high content of hopantenic acid is observed in the brain in 1.5-2.2 times and prevsh1ayuschee content of the acid in the brain in the case of administration of calcium gopantenata

Кроме того, соединени (1) изобретени имеют низкую токсичность и, следовательно, высокую безопасность Например, соединени изобретени : D-4-(N-(4-изобутироилокси-З,3-диме- тил-2-окси-н-бутирил)амино)-н-масл на кислота и D-4-(N-(4-изовалерил- окси-3,3-диметил-2-окси-н-бутирил) амино)-н-масл на кислота показываIn addition, the compounds (1) of the invention have low toxicity and, therefore, high safety. For example, the compounds of the invention: D-4- (N- (4-isobutyryloxy-3, 3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) amino) -n-butyric acid and D-4- (N- (4-isovaleryl-hydroxy-3,3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) amino) -n-butyric acid showing

5five

00

5five

ют максимальную толерантность 2000 мг/кг при испытании на Mbmiax (указанную максимальную толерантность определ ют путем введени испытываемого соединени мышам и, определ количество погибших мьш1ей через 48 ч после обработки; максимальна толерантность представл ет собой дозу чуть меньшую, чем доза, вызвавша смерть мышей).The maximum tolerance is 2000 mg / kg when tested on Mbmiax (the maximum tolerance indicated is determined by administering the test compound to the mice and determining the number of dead mice 48 hours after the treatment; the maximum tolerance is slightly less than the dose that caused the death of the mice) .

Таким образом, соединени изобретени превращаютс в гопантеновую кислоту in vivo после введени их животным и обеспечивают высокую концентрацию гопантеновой кислоты в крови и мозге по сравнению с гопантена- том кальци при высокой безопасности и, следовательно, вл ютс полезными в качестве лекарственных препаратов дл улучшени метаболизма головного мозга при расстройстве его функции.Thus, the compounds of the invention are converted to hopantenic acid in vivo after administration to animals and provide a high concentration of hopantenic acid in the blood and brain compared to calcium hopantenant with high safety and, therefore, are useful as drugs for improving brain metabolism. brain in the breakdown of its function.

Пример 1. Полугидрат D-4-(N- (2,4-диокси-З,3-диметил-н-бутирил) амино)-н-бутирата кальци (5,2 г) раствор ют в воде (20 мл) и при перемешивании одновременно по капл м добавл ют в смесь 1 н. водный раствор едкого натра (40 мл) и ангидрид изомасл ной кислоты (6,4 г) при охлаждении в течение 30 мин, одновременно поддержива рН смеси 8-9. После завершени добавлени смесь перемешивают при этой же температу- 5 ре в течение 40 мин.Example 1. D-4- (N- (2,4-dioxy-3, 3-dimethyl-n-butyryl) amino) n-butyrate calcium hemihydrate (5.2 g) is dissolved in water (20 ml) and while stirring at the same time, 1 n is added dropwise to the mixture. an aqueous solution of sodium hydroxide (40 ml) and isobutyric anhydride (6.4 g) with cooling for 30 minutes while maintaining the pH of the mixture 8-9. After the addition is complete, the mixture is stirred at the same temperature for 40 minutes.

Реакционную смесь промывают этил- ацетатом, водный слой подкисл ют при помощи 10%-ной сол ной кислоты и затем экстрагируют этилацетатом. Экст- 0 ракт промывают водой, сзгшат и затем концентрируют при пониженном давлении . Остаток перекристаллизовывают из смеси зтилацетата с н-гексаном и получают Б-4-(К-(4-изобутироилокси- 5 3,3-диметил-2-окси-н-бутирил)амино)- н-масл ную кислоту (2,3 г, 37,4%) в виде бесцветных кристаллов, т.пл. 73-75°С.The reaction mixture is washed with ethyl acetate, the aqueous layer is acidified with 10% hydrochloric acid and then extracted with ethyl acetate. The extract is washed with water, dried and then concentrated under reduced pressure. The residue is recrystallized from a mixture of ethyl acetate and n-hexane to obtain B-4- (K- (4-isobutyryloxy-5 3,3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) amino) -n-butyric acid (2,3 g, 37.4%) in the form of colorless crystals, so pl. 73-75 ° C.

ИК (нуйол)(смТ : 3320, 1715, 0 1610.IR (Nujol) (cmT: 3320, 1715, 0 1610.

Масс-спектрометри (т/е): 303 (M ),W +37,2° (с.1, этанол).Mass spectrometry (t / e): 303 (M), W + 37.2 ° (p.1, ethanol).

Повторив перекристаллизацию продукта из смеси этилацетата и изопро- 55 пилового эфира, получают бесцветные призмы, т.пл. 82-83,5 С.By repeating the recrystallization of the product from a mixture of ethyl acetate and isopropyl ether, colorless prisms are obtained, mp. 82-83,5 S.

W +37° (, этанол).W + 37 ° (, ethanol).

И р и м е р 2. D-4-(N-(4-изобутироилокси-З , З-диметил-2-окси-н-бутирил )амино)-н-масл ную кислоту (1,0 г раствор ют в этаноле (20 мл) и к ней прибавл ют гидроокись кальци (0,15 г) и воду (2 мл). Смесь смешивают при комнатной температуре в течение 40 мин. Реакционную смесь профильтровывают дл удалени нерастворившихс частиц и фильтрат концентрируют при пониженном давлен ш. Оста ток обрабатывают н-гексаном и получают D-4-(N-(4-изобутироилокси-З,3- диметил-2-окси-н-бутирШ1)амино)-н- бутират кальци (0,85 г, 80,0%) в виде бесцветного порошка.And pm. Me d 2. D-4- (N- (4-isobutyryloxy-3, 3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) amino) -n-butyric acid (1.0 g dissolved in ethanol (20 ml) and calcium hydroxide (0.15 g) and water (2 ml) were added to the mixture.The mixture was mixed at room temperature for 40 minutes. The reaction mixture was filtered to remove insoluble particles and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue is treated with n-hexane and D-4- (N- (4-isobutyryloxy-3, 3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl-1) amino) -n-calcium butyrate (0.85 g, 80.0 %) in the form of a colorless powder.

+28,3° (, этанол). Использу методику примера 1, были получены следующие соединени . + 28.3 ° (, ethanol). Using the procedure of Example 1, the following compounds were obtained.

П р и м е р 3. D-4-(N-(4-иэoвaлe- рилокси-3,З-диметил-2-окси-н-бутирил амино)-н-бутират в виде бесцветных призм, т.п. 84-86 С.EXAMPLE 3. D-4- (N- (4-I-ovovaleryl-3-3, 3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl amino) -n-butyrate as colorless prisms, etc. 84-86 C.

ИК (нуйол),д„кс ( 3300, 1720, 1610.IR (Nujol), dkcs (3300, 1720, 1610.

Масс-спектрометри (т/е): 317 (М ),М +34,1° (, этанол).Mass spectrometry (t / e): 317 (M), M + 34.1 ° (, ethanol).

П р и м е р 4. Б-4-(И-(4-изовале- рилокси-3,3-диметил-2-окси-н-бутирш амино)-н-бутират кальци в взаде бесцветного порошка « I, +26,1° (, этанол).Example 4. B-4- (AND- (4-isovaleryloxy-3,3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyrsh amino) -n-calcium butyrate in the back of the colorless powder “I, + 26.1 ° (, ethanol).

П р и м е р 5, 1)4-(К-(4-иэогекса ноилокси-3,3-диметил 2-окси-н-бути- рил)амино)-н-масл ную кислоту в виде бесцветного-в зкого масла.,Example 5, 1) 4- (K- (4-isohexanoyl-3,3-dimethyl 2-hydroxy-n-butyryl) amino) -n-butyric acid as a colorless-viscous oils.,

ИК (пленка) (см }. 3330, 1720 1610.IR (film) (see}. 3330, 1720 1610.

Масс-спектром три .(т/е): 331 (У/),И +31,6 (, этанол).With a mass spectrum of three. (T / e): 331 (U /), and +31.6 (, ethanol).

П р и м е р 6. (И(4-пивалош окси-3,З-диметил-2-окси-н-бутирил) амино)-н-масл ную кислоту в виде бесцветных кристаплов. После перекристаллизации из смеси этилацетата с н-гексаном, т.п. 79-82 С,Example 6 (AND (4-pivalos hydroxy-3, 3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) amino) -n-butyric acid in the form of colorless Cristapes. After recrystallization from a mixture of ethyl acetate and n-hexane, etc. 79-82 C,

ИК (нуйол)0„о,Дсм-. 3350, 1730, 1610.IR (Nujol) 0 "O, Dsm-. 3350, 1730, 1610.

Масс-спектрометри (га/е): 317 (М).Mass spectrometry (ha / e): 317 (M).

П р .к м е р 7. 1)--4-(К-(4-3,3-ди- метил-н-бутироилокси-3,З-диметил-2- окси-н-бутирил)амино)-н-масл ную кислоту в виде бесцветных кристаллов, т.п. 102-104°С.P p. Memer 7. 1) - 4- (K- (4-3,3-dimethyl-n-butyryloxy-3, 3-dimethyl-2 - oxy-n-butyryl) amino) - n-butyric acid in the form of colorless crystals, etc. 102-104 ° C.

ИК (нуйол):,;. (см): 3340, 1735, 1715, 1610.IR (Nujol):,;. (cm): 3340, 1735, 1715, 1610.

Масс-спектрометри (т/е): 331 (M),W +32,0 ( этанол).Mass spectrometry (t / e): 331 (M), W +32.0 (ethanol).

П р и м е р 8. (4-f2-этил- н-бутироилокси-3,3-диметил-2-оксиPRI me R 8. (4-f2-ethyl-n-butyroyloxy-3,3-dimethyl-2-hydroxy

лак.с 1lak.s 1

масла. -( см :oils. -( cm :

3350, 1720,3350, 1720,

00

н бутирил) амино J -гн--масл ной кислоты (2,3 г, 50,9%) в виде бесцветного в зкого масла.n butyryl) amino J -n-butyric acid (2.3 g, 50.9%) as a colorless, viscous oil.

Ж-(пленка) ,,., (см ): 3350, 1730, 1710, 1645.F- (film) ,,., (Cm): 3350, 1730, 1710, 1645.

Масс-спектрометри (т/е): 361 ( +25,9 (, этанол).Mass spectrometry (t / e): 361 (+25.9 (, ethanol).

II р и м е р 9. Кальций D-4-(N-(4- 2-этил-н-бутироилокси-З,З-диметил-2 окси-н-бутирил)амино)-н-бутират, Wr +24,7° (, этанол).II p example. Calcium D-4- (N- (4- 2-ethyl-n-butyryloxy-3, 3-dimethyl-2 hydroxy-n-butyryl) amino) -n-butyrate, Wr +24 , 7 ° (, ethanol).

Ир им е р 10. Б-4-(И-(4-ацеток- си-3,З-диметил-2-окси-н-бутирил)ами- g но)-н-масл ную кислоту в виде бесцветного в зкогоIr im er 10. B-4- (I- (4-acetoxy-3, 3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) amine-g) n-butyric acid as a colorless viscous

ИК (пленка) 1640.IR (film) 1640.

Масс-спектрометри (т/е): -275 (м ),« +33,1 (, этанол).Mass spectrometry (t / e): -275 (m), “+33.1 (ethanol).

Пример 11. D-4-(N-(nponHOHHJx окси-3,З-диметил-2-окси-н-бутирил) амино)-н-масл ную кислоту в виде бесцветного в зкого масла.Example 11. D-4- (N- (nponHOHHJx hydroxy-3, 3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) amino) -n-butyric acid as a colorless viscous oil.

ИК (пленка)0, (см): 3350, 1640.IR (film) 0, (cm): 3350, 1640.

Масс-спектрометри (т/е): 289 (М ) WP +30,0° (, этанол).Mass spectrometry (m / e): 289 (M) WP + 30.0 ° (, ethanol).

Пример 12„ D-4-(N-(4-н-бути роилокси-З,З-диметил-2-окси-н-бути- рил)амино)-н-масл ную кислоту в виде бесцветного в зкого масла.Example 12 D-4- (N- (4-n-buty-royloxy-3, 3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) amino) -n-butyric acid as a colorless viscous oil.

ИК (пленка)-5 (см): 3350, 1720, 1640,IR (film) -5 (cm): 3350, 1720, 1640,

Масс-спектрометри (т/е): 303 (М)Мц° +30,2° (, этанол)..Mass spectrometry (t / e): 303 (M) Mts ° + 30.2 ° (, ethanol) ..

П р и м е р 13. D-4-(Nr(4-H-Ba- лерилокси-3,З-диметил-2-окси-н-бу- тирил)амино)-н-масл ную кислоту в виде бесцветного в зкого масла.Example 13: D-4- (Nr (4-H-B-leryloxy-3, 3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) amino) -n-butyric acid as colorless viscous oil.

ИК (пленка) (см): 3350, 1720, 40 1640.IR (film) (cm): 3350, 1720, 40 1640.

Масс-спектрометри (т/е): 317 (M + ), +31,8 (, этанол).Mass spectrometry (t / e): 317 (M +), +31.8 (, ethanol).

Пример 14. 1г-лизиновую соль D-4-(N-(4-валерилокси-3,3-диметш1-2- 45 окси-н-бутирил)амино)-н-масл ной кислоты в виде бесцветного порошка,Example 14. The 1g-lysine salt of D-4- (N- (4-valeryloxy-3,3-dimesh1-2- 45 hydroxy-n-butyryl) amino) -n-butyric acid as a colorless powder,

5five

00

3535

т.пл. 130-133 С. m.p. 130-133 S.

+25,5 (, этанол). И р и м е р 15. (Н-(4-вале- 50 рилокси-3,З-диметил-2-окси-н-бути- рил(амино)-н-бутират кальци в виде бесцветного порошка.+25.5 (, ethanol). And Example 15 (H- (4-val-50-rhyloxy-3, 3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl (amino) -n-butyrate calcium as a colorless powder.

Пример 16. D-4-(N-(4-гекса- 55 ноил-3,З-диметил-2-окси-н-бутирил) амино)-н-масл ную кислоту в виде бесцветного в зкого масла.Example 16. D-4- (N- (4-hexa-55-noyl-3, 3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) amino) -n-butyric acid as a colorless viscous oil.

ИК (пленка)5,„ (см ): 3350, 1720, 1640.IR (film) 5, „(cm): 3350, 1720, 1640.

Масс-спектрометри (m/e): 331 (М), Wp°-t-27,6 (, этанол).Mass spectrometry (m / e): 331 (M), Wp ° -t-27.6 (, ethanol).

Пример 17. L-лиэиновую соль D-4-(N-(4-н-гексаноилокси-3,3-диме- тил-2-окси-н-бутирил)амино)-н-масл - ной кислоты в виде бесцветного порошка , т.п. 131-134 С, +25,1° (,5, этанол).Example 17. L-liene salt of D-4- (N- (4-n-hexanoyloxy-3,3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) amino) -n-butyric acid as a colorless powder etc. 131-134 С, + 25.1 ° (, 5, ethanol).

Пример 18. D-4-(N-(4-н-гепта ноилокси-3,З-диметил-2-окси-н-бути- рил)амино)-н-масл ную кислоту в виде бесцветного в зкого масла.Example 18. D-4- (N- (4-n-heptoyloxy-3, 3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) amino) n-butyric acid as a colorless viscous oil.

Ж (пленка) ;)„д 3330, 1720 1640.F (film);) "D 3330, 1720 1640.

Масс-спектрометри (m/e): 345 (M ),«tl +30,2 (, этанол).Mass spectrometry (m / e): 345 (M), “tl +30.2 (, ethanol).

Пример 19. D-4-(N-(4-H-OKTaH илокси-3,З-диметил-2-окси-н-бути- рил)амино)-н-масл ную кислоту в виде бесцветного в зкого масла.Example 19. D-4- (N- (4-H-OKTaH yloxy-3, 3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) amino) n-butyric acid as a colorless viscous oil.

ИК (пленка)-;) (): 3340, 1710, 1640.IR (film) -;) (): 3340, 1710, 1640.

Масс-спектронетри (га/е): 359 (М),Ы +27,4 (,5, этанол).Mass spectronetry (ha / e): 359 (M), L +27.4 (, 5, ethanol).

И р и м е р 20. 1)-4-(Ы-(4-нонано- илокси-3,З-диметил-2-окси-н-бутирил) амино)-н-масл ную кислоту в виде бесцветного в зкого масла.And pmimer 20. 1) -4- (L- (4-nonano-yloxy-3, 3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) amino) -n-butyric acid as a colorless, viscous oils.

ИК (пленка) (см): 3330, 1720, 1640.IR (film) (cm): 3330, 1720, 1640.

Масс-спектрометри (m/e): 373 (M),WB +26,2 (, этанол).Mass spectrometry (m / e): 373 (M), WB +26.2 (, ethanol).

П р и м е р 21. L-лизиновую соль D-4-(N-(4-н-нонаноилокси-З,3-диме- тил-2-окси-н-бутирил)амино)-н-масл - ной кислоты в виде бесцветного порошка , т.пл. 158-161 0, W J +22,9° (,5, этанол).EXAMPLE 21 L-lysine salt D-4- (N- (4-n-nonanoyloxy-3, 3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) amino) -n-oil acid in the form of a colorless powder, so pl. 158-161 0, W J + 22.9 ° (, 5, ethanol).

Эксперимент 3. Были использованы самцы крыс SD весом около 200 г в возрасте 7 недель, голодавшие в течение ночи (одна группа: 4 крысы). Каждой крысе перорально ввод т суспензию (2 мл) испытуемого соединени в 0,5%-ном растворе карбоксиметил- целлюлозы с помощью желудочного зонда (доза испытуемого срединени : 389,4 имоль/кг, что соответствует 100 мг/кг гопантената Ксшьци ). Через полчаса, час или два часа после введени крыс забивают, перереза целиком каротидные артерии, и собирают их кровь. Кровь каждой крысы центрифугируют (2800 об/мин, 15 мин) дл отделени плазмы крови. Концентрацию гопантеновой кислоты в плазме (0,1 мл) измер ют с помощью газовой хроматографии и масс-спектрометрии.Experiment 3. Male SD rats weighing about 200 g at the age of 7 weeks, starving during the night were used (one group: 4 rats). Each rat was orally administered a suspension (2 ml) of the test compound in a 0.5% solution of carboxymethylcellulose by means of a gastric probe (dose of the test medianeni: 389.4 imol / kg, which corresponds to 100 mg / kg of Kszci gopantenate). Half an hour, an hour or two hours after the injection, the rats are killed, the entire carotid artery is cut, and their blood is collected. The blood of each rat is centrifuged (2800 rpm, 15 min) to separate the blood plasma. Plasma concentration of hopantenic acid (0.1 ml) was measured by gas chromatography and mass spectrometry.

Q Q

Результаты приведены в табл. 3. Эксперимент 4. Дл эксперимента используют самцов крыс SD весом прис мерно 200 г в возрасте 7 недель, голодавших в течение ночи (одна группа: 4 крысы). Каждой крысе перорально ввод т суспензию (2 мл) испытуемого соединени в 0,5%-ном растворе карбоксиметилцеллюлозы с помощью желудочного зонда (доза испытуемого соединени 389,4 мкмоль/кг, что соответствует 100 мг/кг Гопантената кальци ). Через полчаса, час, два иThe results are shown in Table. 3. Experiment 4. For the experiment, male SD rats weighing approximately 200 g at the age of 7 weeks, starving during the night (one group: 4 rats) were used. Each rat was orally administered a suspension (2 ml) of the test compound in a 0.5% carboxymethylcellulose solution using a gastric probe (the dose of the test compound was 389.4 µmol / kg, which corresponds to 100 mg / kg of calcium gopanthenate). In half an hour, an hour, two and

5 или три часа после введени мозг извлекают и промывают физиологическим раствором. К нему добавл ют дев ти- кратньй обьем воды и смесь гомогенизируют в гомогенизаторе в течение5 or three hours after injection, the brain is removed and washed with saline. A nine-fold volume of water is added to it and the mixture is homogenized in a homogenizer for

0 1 мин при охлаждении льдом, а затем центрифугируют со скоростью 10000 об/мин при в течение 1 ч. Концентрацию гопантеновой кислоты в супернатанте (1 мл в пересчете на0 1 min while cooling with ice, and then centrifuged at 10,000 rpm for 1 hour. The concentration of hopantenic acid in the supernatant (1 ml in terms of

5 0,1 г мозга) измер ют с помощью газовой хроматографии и масс-спектро- скопии. Испытуемые соединени те же, что и в эксперименте 1.5 0.1 g of brain is measured by gas chromatography and mass spectroscopy. Test compounds are the same as in Experiment 1.

Результаты приведены в табл. 4,The results are shown in Table. four,

00

П р и м е р 22. 308 г кальци PRI me R 22. 308 g calcium

D-4-(N-(2,4-дигидрокси-З,3-диметил- н-бутирил)амино)-н-бутират гемигидра- та суспендируют 2,4 л тетрагидрофу- рана и к смеси добавл ют 59 г концентрированной сол ной кислоты при 8-10 С. Смесь перемещивают при той же температуре в течение 30 мин. К смеси добавл ют 153 г изобутирилхло- рида и перемешивают ее при комнатной температуре в течение 2,75 ч. К реакционной смеси добавл ют 2 л этилацетата и смесь промывают 2 л воды 3 раза, а затем промывают 1 л раствора хлорида натри . Раствор в этилацетате высушивают и концентрируют при. пониженном давлении дл удалени растворител . Остаток вают н-гексаном и кристаллизуют в смеси 350 мл этилацетата и 350 мл н-гексана. Кристаллы собирают фильтрованием . Эти кристаллы раствор ют в 430 мл этилацетата при нагревании и к ним при перемешивании добавл ют 325 мл н-гексана. Кристаллический 5 осадок собирают фильтрованием. Получают 159 г Е1-4-(К-(4-изобутироилок- си-3,3-диметил-2-гидрокси-н-бутирил} амино)-н-бутировую кислоту в видеD-4- (N- (2,4-dihydroxy-3, 3-dimethyl-n-butyryl) amino) n-butyrate of the hemihydrate is suspended with 2.4 l of tetrahydrofuran and 59 g of concentrated salt is added to the mixture. acidic at 8-10 ° C. The mixture is moved at the same temperature for 30 minutes. 153 g of isobutyryl chloride was added to the mixture and stirred at room temperature for 2.75 hours. To the reaction mixture was added 2 liters of ethyl acetate and the mixture was washed with 2 liters of water 3 times and then washed with 1 l of sodium chloride solution. The ethyl acetate solution is dried and concentrated at. reduced pressure to remove solvent. The residue is watered with n-hexane and crystallized in a mixture of 350 ml of ethyl acetate and 350 ml of n-hexane. The crystals are collected by filtration. These crystals are dissolved in 430 ml of ethyl acetate with heating and 325 ml of n-hexane are added to them with stirring. Crystalline 5 precipitate is collected by filtration. 159 g of E1-4- (K- (4-isobutyroyl-3,3-dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) amino) -n-butyric acid are obtained in the form

5five

00

5five

9191

бесцветных кристаллов. Выход 43,7%. Физико-химические свойства этого про дукта идентичны продукту, полученному в примере 1.colorless crystals. Yield 43.7%. The physicochemical properties of this product are identical to the product obtained in Example 1.

Пример 23. 5,2 г кальций . D-4-(N-(2,4-дигидрокси-З,3-диметил- н-бутирил (амино)-н-бутират гемигид- рата раствор ют в 20 мл воды и к этому раствору одновременно добавл ют 30 мл 1 н. раствора гидроокиси натри и 7,4 г изовалерилхлорида при охлаждении льдом и перемешивании в течение 30 мин, при этом рН раствора поддерживают при 8-9. По окончании добавлени смесь перемешивают при той же температуре 40 мин. Смесь промывают этилацетатом и водный слой подкисл ют 10%-ной сол ной кислотой. Водную смесь экстрагируют этилацетатом . Экстракт промывают водой, высушивают и концентрируют при пониженном давлении дл удалени растворител . Остаток перекристаллизуют из смеси этилацетата и н-гексана. Получают 1,9 D-4-(N-изовалерилокси-З,3 диметил-2-гидрокси-н-бутирил)амино)- н-бутировой кислоты в виде бесцветных кристаллов. Выход 29,6%, т.пл. 84-86°С.Example 23. 5.2 g of calcium. D-4- (N- (2,4-dihydroxy-3, 3-dimethyl-n-butyryl (amino) -n-butyrate hemihydrate) is dissolved in 20 ml of water and 30 ml of 1 n is added to this solution simultaneously. A solution of sodium hydroxide and 7.4 g of isovaleryl chloride is cooled at ice and stirred for 30 minutes while the pH of the solution is maintained at 8 to 9. After the addition is complete, the mixture is stirred at the same temperature for 40 minutes the mixture is washed with ethyl acetate and the aqueous layer is acidified 10% hydrochloric acid. The aqueous mixture is extracted with ethyl acetate. The extract is washed with water, dried and concentrated under reduced pressure to remove the solvent. The residue is recrystallized from a mixture of ethyl acetate and n-hexane. 1.9 D-4- (N-isovaleryloxy-3, 3 dimethyl-2-hydroxy-n-butyryl) amino) -n-butyric acid is obtained in a form of colorless crystals. Yield 29.6%, mp 84-86 ° C.

ИК (нуйол),о( 1610.IR (Nujol), o (1610.

Масс-спект.рометри (т/е): 317 (М +34,1 (, этанол).Mass spectrometry (t / e): 317 (M +34.1 (, ethanol).

Соединени (1) согласно изобретению имеют максимальную толерантность примерно 2000 мг/кг и ЛД;;, гопанте- ната кальци составл ет 1,80 г/кг (т.е. 1800 мг/кг).The compounds (1) according to the invention have a maximum tolerance of about 2000 mg / kg and LD ;;, the calcium hepantinate is 1.80 g / kg (i.e., 1800 mg / kg).

Таким образом, токсичность соединений (1) аналогична контрольному соединению (гопантенату кальци ). Однако, как следует из данных сравнительного испытани , соединени (l) согласно изобретению показывают более высокий уровень гопантеновой кислоты в мозгу и в плазме крови и сохран ют свою активность в течение большего времени по сравнению с контролем . Таким образом, соединени (l согласно изобретению имеют преимущество по сравнению с контрольным в качестве средства дл улучшени мозгового обмена вещества и более сложных расстройств мозговых функций.Thus, the toxicity of the compounds (1) is similar to the control compound (calcium hopantenate). However, as follows from the comparative test data, the compounds (l) according to the invention show a higher level of hopantenic acid in the brain and in the blood plasma and retain their activity for a longer time compared to the control. Thus, the compounds (l according to the invention have an advantage over the control as a means for improving the brain metabolism of the substance and more complex disorders of the brain functions.

(): 3300, 1720,(): 3300, 1720,

М ;M;

Claims

Invention Formula

The method of obtaining the 4-g1-butyric acid derivative of the general formula

BUT

R СООСН- - С -CH-CO HlCHx jCOOH

sns he

where R is linear or branched

C (-Cg-alkyl,

or a calcium or lysine salt thereof, characterized in that the A-aminobutyric acid derivative of the general formula

U

HOCH -C - CH-C (HH (CH2) UNC

sns he

is reacted with anhydride or carboxylic acid chloride Q acid of general formula

RCOOH, R

Where

has the indicated values

at a temperature of

0 ° C

to room

25 temperatures, and, if necessary, the resulting product is converted into its calcium or lysine salt.

Table 1

Compound

The content of hopantenic acid in the blood plasma,

3 pjr / ml

(mean ± standard deviation)

One hour after drug administration

Two hours after drug administration

five

2

Control

32.912.7 37.3 ± 1.8

19.4 ± 1.9

16.4t3.5 21.3tl, 8

14,2tl, 6

Note. Compound 1 is B-4- (H- (4-isobutyryloxy-3,3-di methyl-2-hydroxy-n-bugyr1-sh) amino) n-butyl acid.

Compound 2-D-4 - (- N- (4-isovaleryl-hydroxy-3, 3-dimethyl-2-01Cy-n-butyryl) amino) -n-butyric acid. The control is D-4- (N- (2,4-dioxy-3,3-dimethyl-n-butyryl) amine) calcium n-butorate (calcium hopantenate).

134058212

Table 2

Compound - Content of gopanthenic kinii slots in the brain

(HS / G

(average is standard deviation)

Two hours later. Three hours after exercise, after administration of the drug

1l, 57iO, 25 0.63 ± 0.13

2l, 42iO, 32 0.56 ± 0.07

Control0, 7010.110.37 ± 0.07

Table3

The level of hopantenic acid in the blood plasma, µg / ml

Time, h, after the introduction

0.5 1 I Average iC.O. (relative value)

38.7 ± 2.5 32.9 ± 2.7 16.4 ± 3.5 (5.0) (1.7) (1.2)

34.0 ± 5, D 37.3 ± 1.8 21,, 8 (4.4) (1.9) (1.5)

7.7 ± 2.1 19.4 ± 1.9 14.2 ± 1.6, (1.0) (1.0) (1.0)

-4- (N- (2,4-dihydroxy-3,3-dimethyl-n-butyryl)

tyrat.

The values are calculated using the following formula:

The level of hopantenic acid (mean ± S.O.) in the blood plasma in the animal group ps, to which the test compound is administered

but

Level hopantenic acid

(mean ± S.O.) in the blood plasma in the control group

Same as in table. one.

The relative value is calculated using the following formula: The level of hopantenic acid (mean ± C, 0.) In the brain of animals that were injected with the test compound

The level of hopantenic acid (average tC.O.) in the brain of animals in the control group

151340582

Table5

Calcium D-4- (N- (2,4-dioxy-3, 3-DI-methyl-n-butyl) amino) -n-butyrate.

Plasma content of hopantenic acid in the test compound (mean standard deviation)

Relative

content Content of hopantenic acid in the blood plasma in the control (mean i standard deviation)

""

Compiled by N.Gozalova Editor G.Volkova Tehred L.Serdyukova

4355/58

Circulation 371 Subscription

VNIIPI USSR State Committee

for inventions and discoveries 113035, Moscow, Zh-35, Raushsk nab., 4/5

Production and printing company, Uzhgorod, st. Design, 4.

sixteen

Table 6

connect

Content of hopantenic acid in the brain (relative content)

CH

(CH,) gos

(CH,) iCHCH4

H-SUN, ("g-lysine salt)

H-CjH, j H-StN, y

H-CjH, (“b-lysine salt)

Control

""

1.8 17.5

8.3 13.0

11.4

h; 1

3.0

6.0 1.0

Calcium) -4- (K- (2,4-dihydroxy-3,3-dimethyl-n-butyryl) amino) -n-butyrate.

The content of hopantenoic acid in the brain (mean ± standard deviation) in the test compound

Relative

content The content of hopantenic acid in the brain (mean ± standard deviation) in the control compound.

h

Proofreader E.Roshko