SU1335568A1

SU1335568A1 - Method of determining activity of mesophilic lactacidic streptococci used for producing bacterial analysis concentrate

Info

Publication number: SU1335568A1
Application number: SU843826201A
Authority: SU
Inventors: Инна Владимировна Лагода; Наталья Александровна Бавина; Галина Васильевна Косарева
Original assignee: Всесоюзный Научно-Исследовательский Институт Молочной Промышленности
Priority date: 1984-08-31
Filing date: 1984-08-31
Publication date: 1987-09-07

Abstract

Изобретение относитс к молочной промышленности. С целью повьшени точности н ускорени процесса, приготовление рабочего раствора резазу- рина осуществл ют путем разбавлени основного раствора водой в соотношении 1:15, обесцвечивание провод т при температуре 28-32&deg;С, а подсчет количества бактериальн лх клеток в биомассе мезо тьных молочно-кислых стрептококков осуществл ют по формуле К«42 :п, К - количество бактериальных клеток, содержащеес в 1 г исследуемой биомассы; 42 количество клеток, содержащеес в 1 г стандартной биомассы при обесцвечивании ее в течение 1 мин; п - врем обесцвечивани исследуемой биомассы, по которому оценивают активность мезо- фильных молочно-кислых стрептококков. кл с оо оо ел СП о 00The invention relates to the dairy industry. In order to increase the accuracy and speed up the process, the preparation of the resazurin working solution is carried out by diluting the basic solution with a water ratio of 1:15, bleaching is carried out at a temperature of 28-32 ° C, and counting the number of bacterial cells in the biomass lactic streptococci are carried out according to the formula K "42: n, K is the number of bacterial cells contained in 1 g of the studied biomass; 42 the number of cells contained in 1 g of standard biomass when bleaching it for 1 min; and n is the bleaching time of the biomass under study, from which the activity of mesophilic lactic streptococci is evaluated. kl oo oo ate sp about 00

Description

Изобретение относитс к молочной промьшленности и может быть испольэо вйно дл .быстрого определени активнсти биомассы путем подсчета количе- ства клеток мезофильных молочно-ки с- лЫх стрептококков в ней,The invention relates to dairy industry and can be used to quickly determine biomass activity by counting the number of mesophilic milky cells with streptococci in it,

,Цель изобретени - повышение точности и ускорение процесса,The purpose of the invention is to improve the accuracy and speed up the process,

Способ осуществл етс следующим образом.The method is carried out as follows.

Из основного раствора резазурина готов т рабочий раствор разбавлением последнего прокип ченной и охлажденной дистиллированной водой в соотно- шении 1:15, Это соотношение подобран в результате опытов, как наиболее оптимальное дл быстрого и точного определени активности именно мезофильных молочно-кислых стрептококков Только при таком разведении основног раствора резазурина определено оптимальное количество клеток в 1 г биомассы , а именно 42 , вошедшее в формулу дл подсчета, Процент ошиб- ки при данном разведении наименьший.A working solution is prepared from the basic solution of resazurin by diluting the latter with boiled and cooled distilled water at a ratio of 1:15. This ratio is selected as a result of experiments as the most optimal for a quick and accurate determination of the activity of mesophilic lactic acid streptococci. Only at this dilution The basic solution of resazurin determined the optimal number of cells in 1 g of biomass, namely 42, which is included in the formula for counting. The percentage of error at this dilution is the smallest.

Дл определени количества клеток в биомассе берут две пробирки с . 10 МП стерильной воды, подогретой до 28-32 С, В одну пробирку помещают 1 биомассы, хорошо ее перемешивают с водой так, чтобы не было комочков. В другую пробирку наливают 1 мл рабочего раствора резазурина, Содержи- мое двух пробирок соедин ют в одну, закрывают резиновой пробкой, смешивают путем медленного трехкратного переворачивани пробирки дл более полного смешивани . Пробирку помеш;ают в вод ную баню с температурой 28-32°С, оптимальной дл развити мезофильных молочно-кислых стрептококков, замер ют врем обесцвечивани содержимого пробирки. Определив врем обесцвечи- вани , определ ют количество клеток в биомассе по формулеTo determine the number of cells in the biomass, take two tubes. 10 MP of sterile water, heated to 28-32 ° C. In one test tube, 1 biomass is placed, it is well mixed with water so that there are no lumps. 1 ml of the resazurin working solution is poured into the other tube. The contents of the two tubes are combined into one tube, sealed with a rubber stopper, and mixed by slowly turning the tube three times over to complete the mix. The tube is placed in a water bath with a temperature of 28-32 ° C, optimal for the development of mesophilic lactic streptococci, and the bleaching time of the tube contents is measured. After determining the bleaching time, the number of cells in the biomass is determined by the formula

42 -10 К ----,42 -10 C ----,

где К - количество клеток, содержаш;еес в Г г исследуемой биомассы;where K is the number of cells containing; ees in G g of the studied biomass;

42 - количество клеток, содержащеес в 1 г стандартной биомассы при обесцвечивани ее в течение 1 мин.; п - врем обесцвечивани 1 г исследуемой биомассы.42 is the number of cells contained in 1 g of standard biomass when it is discolored for 1 minute; n is the bleaching time of 1 g of the studied biomass.

Пример 1, Берут две пробирки с 10 мл стерильной воды при 28°С, В одну пробирку помещают 1 г биомассы симбиоза № 440а, состо щего из Streptococcus lactis (16+20j,., ) , Str, асе- toinicus 826, Str, cremoris UB, хорошо перемешивают ее с водой так, чтобы не было комочков, В другую пробирку наливают 1 мл рабочего раствора резазурина. Содержимое двух пробирок соедин ют в одну, закрывают резиновой пробкой и смешивают путем медлен11ого трехкратного переворачивани пробирки. Последнюю помещают в вод ную баню с температурой 28 С и включают секундомер,Example 1 Two tubes are taken with 10 ml of sterile water at 28 ° C. Into one tube is placed 1 g of symbiosis biomass No. 440a consisting of Streptococcus lactis (16 + 20j. cremoris UB, mix it well with water so that there are no lumps. Pour 1 ml of the working solution of resazurin into another tube. The contents of the two tubes are combined into one, sealed with a rubber stopper and mixed by slowly turning the tube over three times. The latter is placed in a water bath at a temperature of 28 ° C and includes a stopwatch,

Обесцвечивание содержимого пробирки происходит за мин.The discoloration of the contents of the tube occurs in minutes.

По формуле подсчитывают количество бактериальных клеток.в 1 г биомассы К 52,5 -Ш ,According to the formula, the number of bacterial cells is counted. In 1 g of biomass K 52.5 -Sh,

Таким образом, в 1 г исследуемой биомассы содержитс 525 млрд мезофильных молочно-кислых стрептококков Активность исследуемой биомассы высока , поэтому ее смешивают с защитной средой в соотношении 1:4,Пример 2, Берут две пробирки с 10 мл стерильной воды при 32°С, В одну пробирку помещают 1 г биомассы,Thus, 1 g of the studied biomass contains 525 billion mesophilic lactic streptococci. The activity of the studied biomass is high, so it is mixed with a protective medium in a ratio of 1: 4, Example 2, Take two tubes with 10 ml of sterile water at 32 ° C, B one tube is placed 1 g of biomass,

полученной с использованием двухви- довой закваски № 32, состо щей из Str, lactis (3548+4385+8546+3516) Str, acetoinicus 254 и хорошо ее перемешивают с водой, В другую пробирку наливаю 1 мл рабочего раствор резазурина. Содержимое обоих пробиро соедин ют в одну, закрывают резиново пробкой и смешивают. Пробирку помещают в вод ную баню с температурой 32°С и включают секундомер.obtained using dvuhvidovoy starter № 32, consisting of Str, lactis (3548 + 4385 + 8546 + 3516) Str, acetoinicus 254 and mix it well with water, Pour 1 ml working solution of resazurin into another tube. The contents of both probiro are combined into one, closed with a rubber stopper and mixed. The tube is placed in a water bath with a temperature of 32 ° C and the stopwatch is started.

Обесцвечивание содержимого пробирки происходит за 3,5 мин. Количество бактериальных клеток в 1 г биомассы К 12 , .The discoloration of the contents of the tube takes 3.5 minutes. The number of bacterial cells in 1 g of biomass K 12,.

Таким образом, в 1 г исследуемой биомассы содержитс 120 млрд клеток. Активность ее невысока , поэтому ее смешивают с защитной средой в соотношении 1:2,Thus, 120 g cells are contained in 1 g of the studied biomass. Its activity is low, so it is mixed with a protective environment in a 1: 2 ratio,

По предлагаемому способу результа получают за 1-5 мин, в то врем как при определении количества клеток и их активности чашечным методом или посевом биомассы по пределам результаты получают через 3 сут.According to the proposed method, the result is obtained in 1-5 minutes, while in determining the number of cells and their activity by the plate method or seeding biomass on the limits, the results are obtained after 3 days.

Если обесцвечивание резазурина происходит за врем до 1,5 мин, вIf the discoloration of rezazurin occurs within a time of up to 1.5 minutes,

биомассе содержитс до 240 млрд бактериальных клеток высокой активностиbiomass contains up to 240 billion high activity bacterial cells

1 г биомассы свертывает 1 л молока за 3 ч после высушивани , баккон- центрат в 1 порции содержит до 2010 бактериальных клеток и свертывает л молока за 4,5-5 ч, i1 g of biomass rolls up 1 l of milk 3 hours after drying, bacterial concentrate in 1 portion contains up to 2010 bacterial cells and rolls 1 l of milk for 4.5-5 hours, i

Качественные показатели сухого бактериального концентрата завис т от соотношени биомассы и защитной среды, что определ етс количеством и активностью клеток в биомассе.The qualitative indicators of the dry bacterial concentrate depend on the ratio of the biomass and the protective environment, which is determined by the number and activity of the cells in the biomass.

Быстрое и точное определение количества клеток в биомассе позвол ет установить правильное соотношение биомассы и защитной среды и получить сухой бактериальный концентрат высокого качества и в больших количествах .Rapid and accurate determination of the number of cells in biomass allows us to establish the correct ratio of biomass and protective environment and to obtain a dry bacterial concentrate of high quality and in large quantities.

Claims

Invention Formula

The method for determining the activity of mesophilic lactic acid streptococci used to prepare bacon concentrate, which involves preparing a basic solution of resazurin, obtaining a working solution by dissolving it in water, sampling the samples being studied, mixing it with a worker

25

Editor And, Gorna

Compiled by I. Privalova

Tehred V. Kadar Proofreader A, Obruchar

Order-4018/22 Circulation 499 Subscription

VNIIPI USSR State Committee

for inventions and discoveries 113035, Moscow, Zh-35, Raushsk nab., 4/5

Production and printing company, Uzhgorod, st. Project, 4

a solution of resazurin, aging in a water base until bleaching, determining the duration of bleaching, and then counting the number of viable bacterial cells, characterized in that, in order to improve the accuracy and speed up the process, the biomass of mesophilic lactic acid streptococci is mixed with Resazurin working solution is carried out at a ratio of 1:15, bleaching is carried out at 28-32 ° C,

the number of bacterial cells is calculated according to the formula

19 ° n

TO

42

where K is the number of cells contained in 1 g of the biomass studied;

42 -10 is the number of cells contained in 1 g of standard biomass when bleached for 1 minute; and n is the bleaching time of 1 g of the biomass under study, from which the activity of mesophilic lactic acid streptococci is evaluated.