ю Изобретение относитс к м сной промьштенности и может быть использо вано при определении гликогена в тка н х животных на м сокомбинате, м соконтрольных станци х, ветеринарных лаборатори х. Цель изобретени - повышение точности и ускорение процесса исследовани путем предварительной фиксации ткани этанолом и проведени гидролиза раствором гидроксида кали и этанолом . Способ осуществл етс следующим образом. Отобранные пробы фиксируют, дл чего их измельчают и смешивают с 96% этанолом в соотношении 1:2-1:5.Смесь подогревают 2-3 раза до кипени . В таком виде материал может хранитьс несколько суток, при этом количество гликогена не снижаетс . У указанной смеси добавл ют 30%-ный КОН при соотношении ткани, спирта и щелочи 1:(2-5):(6-12). Гидролиз провод т на кип щей вод ной ба не в течение tO-20 мин. После раство рени ткани пробы охлаждают до комнатной температуры и добавл ют этиловый спирт, затем центрифугируют в течение 30 мин при 2000 об/мин. Надосадочную жидкость сливают. Осадок гликогена при необходимости переосаждают спиртом. Затем осадок .раствор ют в гор чей дистиллированно воде, нейтрализуют в серной кислоте и добавл ют на холоду антроновый ре актив. Смесь помещают на 10 мин в кип щую вод ную баню, после чего ох . лаждают до комнатной температуры и колориметрируют на ФЭКе с красным светофильтром (620 нм). Расчеты провод т на основании калибровочной кривой, построенной по I стандартным растворам глюкозы,умножа полученное количество на коэффициент 0,9. Пример 1. Навески мьшщ и пе чени по 1 г внос т в центрифуж:ные пр бирки и приливают 3 мл 96% этанола. Смесь подогревают до кипени . Зафиксированные таким образом пробы доставл ют в лабораторию дл дальнейших исследований. После чего к указанной смеси добавл ют 7 мл 30%-ного водного раствора гидроксида кали и провод т- гид ролиз на кип щей вод ной бане в тече ние 15 мин (до полного растворени 12 41 тканей). Затем добаз:1л ют 3 мл дистиллированной воды, несколько капель концентрированной серной кислоты и 10 мл этанола 96%, Затем центрифугируют в течение 30 мин при 2500 об/мин, Надосадочную жидкость сливают. Полученный осадок после высушивани раствор ют в 5 мл гор чей дистиллированной воды, нейтрализуют серной кислотой и добавл ют 20 мл антронового реактива (0,2%-ный раствор антрона в серной концентрированной кислоте) , После чего пробирки помещают в вод ную баню и кип т т в течение 10 мин, затем охлаждают до комнатной температуры . Содержимое колориметрируют на ФЭКе с красным светофильтром (б20нм). Расчет провод т на основании калибровочной кривой, построенной по стандартным растворам глюкозы, умножа полученное количество на коэффициент 0,9. Полученные результаты свидетельствуют , что транспортировка туш свиней на рассто ние 100 км снижает количество гликогена. Предлагаемый ускоренный метод определени , количества гликогена позвол ет производить систематический контроль за содержанием гликогена и регулировать качество получаемой продукции ,Дл исследований отбирали пробы на м сокомбинате. Сразу же часть проб фиксировали согласно предлагаемого способа, а другую часть сохран ли при 3-4°С. Количество гликогена ог-редел ли сразу же после отбора проб и через 6 и 24 ч предлагаемым способом и известным . Результаты приведены в табл. 2,The invention relates to meat industry and can be used in the determination of glycogen in animal tissues at a food processing facility, monitoring stations, veterinary laboratories x. The purpose of the invention is to improve the accuracy and speed up the research process by pre-fixing the fabric with ethanol and carrying out hydrolysis with a potassium hydroxide solution and ethanol. The method is carried out as follows. Selected samples are fixed, for which they are crushed and mixed with 96% ethanol in a ratio of 1: 2-1: 5. The mixture is heated 2-3 times to boil. In this form, the material can be stored for several days, while the amount of glycogen is not reduced. For this mixture, 30% KOH is added with a ratio of cloth, alcohol and alkali 1: (2-5) :( 6-12). The hydrolysis is carried out on a boiling water bath for tO-20 min. After the rhenium is dissolved, the samples are cooled to room temperature and ethyl alcohol is added, then centrifuged for 30 minutes at 2000 rpm. The supernatant is drained. The precipitated glycogen, if necessary, is re-precipitated with alcohol. The precipitate is then dissolved in hot distilled water, neutralized in sulfuric acid and the anthrone reagent is added in the cold. The mixture is placed for 10 min in a boiling water bath, then oh. Clutter to room temperature and colorimeter on a PEC with a red filter (620 nm). The calculations are carried out on the basis of a calibration curve constructed using standard glucose solutions of I, multiplying the quantity obtained by a factor of 0.9. Example 1. Samples of 1 g each were added to the centrifugal tubes and 3 ml of 96% ethanol was added. The mixture is heated to boiling. The samples thus recorded are delivered to the laboratory for further investigation. After that, 7 ml of a 30% aqueous solution of potassium hydroxide is added to this mixture and hydrolysis is carried out in a boiling water bath for 15 minutes (12,4 tissues are completely dissolved). Then dobaz: 1 ml of distilled water, a few drops of concentrated sulfuric acid and 10 ml of 96% ethanol are added, then centrifuged for 30 minutes at 2500 rpm. The supernatant is drained. After drying, the obtained precipitate is dissolved in 5 ml of hot distilled water, neutralized with sulfuric acid, and 20 ml of anthrone reagent (0.2% solution of anthrone in sulfuric concentrated acid) is added, and the tubes are placed in a water bath and boiled t for 10 min, then cooled to room temperature. The contents are colorimetric on a PEC with a red light filter (b20nm). The calculation is carried out on the basis of a calibration curve plotted using standard glucose solutions, multiplying the amount obtained by a factor of 0.9. The results suggest that transporting pig carcasses to a distance of 100 km reduces the amount of glycogen. The proposed accelerated method for determining the amount of glycogen allows one to systematically control the content of glycogen and to regulate the quality of the products obtained. For the research, samples were taken at the mill. Immediately, a part of the samples were fixed according to the proposed method, and the other part was stored at 3-4 ° C. The amount of glycogen was determined immediately after sampling and after 6 and 24 hours by the proposed method and known. The results are shown in Table. 2,
Таблица 2table 2