SU1175487A1

SU1175487A1 - Способ определени состо ни противокоревого иммунитета

Info

Publication number: SU1175487A1
Application number: SU833618589A
Authority: SU
Inventors: Тамара Алексеевна Мамаева; Нина Тимофеевна Тихонова; Галина Борисовна Данилова
Original assignee: Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им.Г.Н.Габричевского
Priority date: 1983-06-03
Filing date: 1983-06-03
Publication date: 1985-08-30

Abstract

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОСТОЯНИЯ ПРОТИВОКОРЕВОГО ИММУНИТЕТА путем вы влени специфических антигемолизинов в сыворотках крови, отличающийс тем, что, с целью повышени точности определени , упрощени и сокращени времени исследовани , вы вление специфических антигемолизинов осуществл ют при 45±1&deg;С в течение 1,5-2 ч в реакции задержки пр мого гемолиза, при этом используют стабильный гемолизирующий антиген , полученный обработкой вируссодержащей жидкости твином-эфиром.

Description

01

00

Изобретение относитс к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано дл определени состо ни противокоревого иммунитета у людей, больных и переболевших корью, у привитых коревыми вакцинами, а также у экспериментальных животных.

Целью изобретени вл етс повышение точности определени , упрош,ение и сокраш ,ение времени исследовани .

Способ осушествл етс следуюш,им образом .

В реакции используют не живой вирус кори, а коревой гемолизируюш,ий антиген, полученный из суспензии живых вирусных частиц путем обработки ее твином-эфиром по методу Norrby, а контакт антигена исследуемой сыворотки и эритроцитов обезь н провод т в течение 1,5-2 ч при 45+1 °С.

При обработке твином-эфиром гемолитическа активность увеличиваетс в 10-20 раз по сравнению с исходной, в результате чего получают коревой антиген, обладающий способностью вызывать полный лизис эритроцитов обезь н, что вл етс основой разработки нового способа определени состо ни противокоревого иммунитета - реакции задержки пр мого гемолиза (РЗПГ).

Определение титра противокоревых антигемолизинов в испытуемой сыворотке провод т в РЗПГ с 2 гемолитическими единицами коревого антигена, с 5%-ной взвесью эритроцитов обезь н, при инкубации смеси при 45±1°С. Учет реакции осушествл етс сразу же после наступлени полного гемолиза в контроле антигена, представл ющего смесь двух гемолитических единиц антигена и 5% взвеси эритроцитов обезь н. За титр антигемолизинов в испытуемой сыворотке принимают ее наивысшее разведение, вызывающее видимую задержку гемолиза по сравнению с полным лизисом в контроле антигена .

По сравнению с прототипом в реакции задержки гемолиза (РЗГ) разработанный способ определени состо ни противокоревого иммунитета - РЗПГ, более прост в исполнении. Твином-эфиром обрабатываетс исходна культуральна вируссодержаща жидкость, а не концентрированный вирус и, следовательно, исключаетс необходимость использовани ультра центрифуг. Учет результатов проводитс визуально без применени спектрофотометров, что не только упрощает метод, но и существенно снижает врем проведени исследований. Врем , затрачиваемое на постановку и учет реакции, сокращаетс также за счет повыщени температуры инкубации смеси антигена, исследуемой сыворотки и эритроцитов обезь н до 45±1°С, что позвол ет уменьшить врем контакта до 1,5-2 ч.

Полученный гемолизирующий антиген стабилен и высокоактивен, что повышает

точность определени специфических антигемолизинов в сыворотках не менее чем на 10%. Так, при обследовании 198 детей в возрасте 6-10 лет, привитых живой коревой вакциной Л-16 (ЖКВ Л-16) 3-8 лет назад, специфические антигемолизины вы влены в РГЗ (1) у 96 детей (48,4%), в РЗПГ у 127 детей (64,1%). При обследовании 52 детей в возрасте от 1 до 3,5 лет, не болевших корью и не привитых против этой инфекции, противокоревые антигемолизины не были вы влены ни с помощью известного, ни с помощью разработанного способов. На 20-27 день после введени этим дет м ЖКВ Л-16 про5 тивокоревые антигемолизины вы влены в РЗГ в сыворотках 37 детей (71,1%), в РЗПГ У 43 детей (82,7%).

Пример 1. Больна М., 19 лет, поступила в 1 КИБ г. Москвы с подозрением на корь (№ истории болезни 5907). С целью

0 подтверждени клинического диагноза больна обследована на 3 и 10 день с момента по влени сыпи. С помощью РЗПГ в первой сыворотке противокоревые антигемолизины вы влены в титре 1:16, во второй - 1:512. Более чем 4-кратное нарастание титра противокоревых антител подтвердило правильность клинического диагноза.

Пример 2. При обследовании В. Е. 1975 года рождени до и после введени

0 ЖКВ Л-16 с помощью РЗПГ установлено, что до вакцинации ребенок не имел в крови противокоревых антигемолизинов, на 27 день после введени вакцины специфические антитела вы влены в титре 1:160. Результаты обследовани свидетельствуют о формировании у данного ребенка поствакцинальной невосприимчивости к вирусу кори.

Следовательно, предлагаемый способ позвол ет оценить состо ние противокоревого иммунитета при заболевании и вак0 цинопрофилактике.

К насто щему времени с помощью данного способа обследовано 171 человек в возрасте от 1 г до 33 лет, больных корью,

5 67 человек в возрасте 45-60 лет, переболевших корью в раннем детстве, 296 человек в возрасте от 1 г до 16 лет, привитых ЖКВ Л-16, и 52 ребенка в возрасте от 1 г до 3,5 лет, не болевших корью и не привитых ЖКВ (контрольна группа).

0 Всего исследовано 757 сывороток. Установлено , что заболевание корью и введение ЖКВ Л-16 приводит к интенсивному синтезу противокоревых антигемолизинов, которые обнаруживаютс в течение длительного периода времени после заболевани или вакцинации. Однако у 23% привитых противокоревые антигемолизины не вы вл ютс через 4-6 лет после вакцинации, что свидетельствует о возможности утраты с годами

311754874

поствакцинального противокоревого иммуни-ных контингентов населени , при этом оттета у некоторых привитых детей.личаетс простотой и легкостью постановки

Таким образом, предлагаемый способ оп-ведени исследований, а получение стабильределени состо ни противокоревого им-ного активного гемолизирующего антигена

мунитета позвол ет вы вл ть иммунных иувеличивает точность исследований не менее

неиммунных к вирусу кори лиц среди раз-чем на 10%.

и учета реакции, сокращаетс врем про

Claims

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОСТОЯНИЯ ПРОТИВОКОРЕВОГО ИММУНИТЕТА путем выявления специфических антигемолизинов в сыворотках крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности определения, упрощения и сокращения времени исследования, выявление специфических антигемолизинов осуществляют при 45±1°С в течение 1,5—2 ч в реакции задержки прямого гемолиза, при этом используют стабильный гемолизирующий антиген, полученный обработкой вируссодержащей жидкости твином-эфиром.