I Изобретение относитс к синтезан а именн вьм химическим соединени м. к ди-М-оксисукцинимидному эфиру щавелевой кислоты формулы 00 НгС-СО.99CO- CH I N-O-C-C-O-N:: I HgC-CO СО СИ которое может найти применение в качестве реагента дл синтеза N-OKCHcyкциIffl aздныx эфирен Ы-эащищенных аминокислот, использующихс в качест ве промежзггочных соединений в пептид .ном синтезе. В насто щее врем широкое примене1шб дл синтеза пептидов получают активированные Ы-оксисукхщиимидные эфирь Н-защ{щенных аминокислот lj . Активированные В-оксисукцинимивные обладают высокой стабильностью tl, при использовании этих эфиров не наблкщаетс рацемизахщи продуктов 2j , кроме того, образз ф1йс в процессе реакции №-оксисукирннимид растворим в воде, что значительно облегчает в1аделение продуктов конден сации 3j. Известен способ получени активированных N-oкcиcyкцини вiдныx эфиров конденсацией Н-за(Е;ищенной аминокислота с N-оксисукцинимидом в присутствии дициклогексилкарбодиимида j.Cno с.об характеризуетс простотой проведени экспериментальных операций, достаточно высоким выходом и чистото1 целевых продуктов il. Однако при использовании этого способа довольно часто наблкщаетс нежелательное образование ацилмочевины , что приводит к снижению выхода целевого продукта. Кроме того, ди1щк логексилкарбодиимид обладает высокой токсичностью и вл етс сильным аллергеном . Наиболее близким к изобретению в л етс ди-Ы-оксисукцинимвдилкарбонат формулы со-сНг Нг€ - СО N-O-eo-NC } НгС-со СО-СИ ( П) используемый так же дл получени N-оксисукцинимидных эфиров (4J . 72 Однако, получение ди-Ы-.оксисукцини мдшIкapбoнaтa св зано с использо .ванием в качестве исходного сырь фосгена, который вл етс высокотоксичным соединением, что ограничивает его применение. Цель изобретени - изыскание реагента дл синтеза N-оксисукцинимид- ных Ы-запщщенных аминокислот, получаемого из доступного сырь по простой технологии с высоким выходом. Указанна цепь достигаетс химической структурой ди-Ы-оксисукцинимидного эфира щавелевой кислоты формулы (1) . Соединение формулы (1) получают взаимодействием 2 моль триметилсилилового эфира N-оксисукцинимида с 1 моль хлорангидрида щавелевой, кислоты в сре е органического растворител . Пример 1. Получение ди-N-oKсисукцинимидного эфира щавелевой кислоты C1COCOCL I Й|С-С0 С 0-СНг HjC-co, и и ., N-O-C-C-e- СО -сИг к охлажденному до раствору 44j3 г (0,234 моЛь) триметилсилилового эфира N-оксисукцинимида в 50 мл абсолютного ацетонитрила прикапывают по капл м 14,9 г (0,117 моль) хлорангидрида щавелевой,кислоты в 10 мл ацетонитрила. После окончани прибавлени раствора оксалил хлорида, реакционную массу вьщерживают при комнатной температуре в течение 1,5 - 2 ч, Вьшавший белый осадок отфильтровывают , промывают на фильтре холодным ацетонитрилом и сушат в вакууме масл ного насоса над п тиокисью фосфора до посто нного веса. Получают 27,0 г (82%) целевого продукта в виде порошка белого цвета. Т.пл. 240-242 0. Найдено, %: С 42,03; Н 2,97; N 10,24. CioHflOgN %: С 42,20; Н 2,82; Вычислено, N 9,85.I The invention relates to the synthesis of exactly one chemical compound m. To the di-M-oxysuccinimide ester of oxalic acid of formula 00 NgC-CO.99CO-CH I NOCCON :: I HgC-CO CO SI which can be used as a reagent for the synthesis of N -OKCHYcIcyIffl ester ethers of N-ea-protected amino acids used as intermediate compounds in peptide synthesis. It is now widely used for the synthesis of peptides that the activated N-hydroxyscchimido esters of H-protected {l amino acids lj are obtained. Activated B-oxysuccinic ones have a high tl stability; when using these esters, racemysis of products 2j is not observed; moreover, the image of fyis in the course of the n-oxysucrynnimide reaction is soluble in water, which greatly facilitates the separation of condensation products 3j. A known method of producing N-oxycicine activated vidic esters by H-for-condensation (E; sought amino acid with N-hydroxysuccinimide in the presence of dicyclohexylcarbodiimide j. Cno c.) Is characterized by simplicity of experimental operations, rather high yield and pure 1 il products. However, this This method often causes undesirable acylurea formation, which leads to a decrease in the yield of the desired product. In addition, dihexa lehexylcarbodiimide has a high toxicity and is the strongest allergen. The closest to the invention is the di-N-hydroxysuccinim di-carbonate of the formula co-cHg Ng € —CO NO-eo-NC} NgC-with CO-SI (P), which is also used for the preparation of N-oxysuccinimide esters (4J. 72 However, the preparation of di-L-.oxysuccinium m-Icabonate is associated with the use of phosgene as a raw material, which is a highly toxic compound, which limits its use. The purpose of the invention is to find a reagent for the synthesis of N-oxysuccinimide L-amino acids obtained from the available raw materials for simple technology nology with high yield. This chain is achieved by the chemical structure of the di-L-oxysuccinimide ester of oxalic acid of formula (1). The compound of formula (1) is obtained by reacting 2 mol of N-oxysuccinimide trimethylsilyl ester with 1 mol of oxalic acid chloride, an acid in an organic solvent. Example 1. Preparation of di-N-oK succinic imidate ester of oxalic acid C1COCOCL I | | C-C0 C 0-CHg HjC-co, and., NOCCe- CO -sIg to cooled to a solution of 44j3 g (0.234 moles) of trimethylsilyl ester of N- oxysuccinimide in 50 ml of absolute acetonitrile is added dropwise 14.9 g (0.117 mol) of oxalic acid chloride in 10 ml of acetonitrile. After completing the addition of the oxalyl chloride solution, the reaction mass is held at room temperature for 1.5 - 2 h. The white precipitate is filtered off, washed on the filter with cold acetonitrile and dried in a vacuum of an oil pump over phosphorus pentoxide to constant weight. 27.0 g (82%) of the expected product are obtained in the form of a white powder. M.p. 240-242 0. Found,%: C 42.03; H 2.97; N 10.24. CioHflOgN%: C 42.20; H 2.82; Calculated N 9,85.
. Строение подтверждено ИК-спектром. Ди-Ы-оксисукцинимвдный эфир щавелевой кислоты, полученный описанным способом, используют дл синтеза O-C-C-0-iJ ZR-COOH-Iн « со00 где Z - защитна группа; R - остаток аминокислоты. К раствору, содержащему 5 ммоль аминокислоты и 15 ммоль пиридина в абсолютном диметилформамиде, добавл ют 7,5 ммоль диоксисукцинимвдного эфира щавелевой кислоты. Реакционную массу перемешивакуг несколько часов при комнатной температуре, отфильтро вывают избыточное количество N,N дисукцинимвдолоксалата , фильтрат упа ривают в вакууме. Остаток раствор ют в этилацетате и промывают 5%-ньм раствором бикарбоната натри , водой, сунит над сульфатом натри и упарива ют. В итоге получают N-оксисукциниювдный Э1|мр N-защищенной аминокислоты . П р и м е р 2, Получение N-оксисукцинимидного эфира трет-бутилоксикарбонилаланина . К раствору, содержащему 1,0 г (5,29 нмоль) трет-бутилоксикарбо нилаланииа и 1,28 г (15,9 ммоль) пиридина в диметилформамиде, добавл ют 2,25 г (7,95 ммоль) ди-М-оксисукци|КИ ведного эфира щавелевой кислоты. Реакционную масоу перемешивают в течение Э ч при комнатной температуре. Отфильтровывают избыточное количество ди-Н-оксисукцинимидного эфира.щавелевой кислоты, фильтрат упаривают в вакууме. Масл ный остаток промывануг 5%-ным раствором бикарбоната натри и водой. Этилацетатную выт %ку сушат над сульфатом натри и затем упаривают досуха. Получают 1,2 г про дукта, т.пл. () (168-1б9°лит. Л 50,63 (с 2 диокс). П р и м е р 3. Получение N-оксисукцинимидного эфира карбобензоксиглицина . К раствору, содержащему 1,0 г (4,78 ммоль)- карбобензоксиглицина и 1,13 г (14,3 ммоль) пиридина в 10 мп димётллформамида, добавл ют 2,03 г (7,15 ммоль) ди-N-oкcиcyкцинимиднoгo щавелевой кислоты. Реакционную. The structure is confirmed by the IR spectrum. Di-N-oxysuccinim oxalic acid ester obtained by the method described above is used to synthesize O-C-C-0-iJ ZR-COOH-In "ω00 where Z is a protective group; R is the amino acid residue. To a solution containing 5 mmol of amino acid and 15 mmol of pyridine in absolute dimethylformamide, add 7.5 mmol of dioxysuccinim oxalic ester. The reaction mass is stirred for several hours at room temperature, excess N, N disuccinim in doloxalate is filtered, and the filtrate is evaporated in vacuo. The residue is dissolved in ethyl acetate and washed with 5% sodium bicarbonate solution, water, sunite over sodium sulfate and evaporated. The result is an N-oxysuccinium-E1 | mr N-protected amino acid. Example 2, Production of tert-butyloxycarbonylalanine N-oxysuccinimide ester. To a solution containing 1.0 g (5.29 nmol) of tert-butyloxycarbonylalanium and 1.28 g (15.9 mmol) of pyridine in dimethylformamide, was added 2.25 g (7.95 mmol) of di-M-oxysuccinium KI ved oxalic acid ester. The reaction masou is stirred for eh at room temperature. An excess amount of di-H-oxysuccinimide ester of oxalic acid is filtered off and the filtrate is evaporated in vacuo. The oily residue is washed with a 5% sodium bicarbonate solution and water. The ethyl acetate extract was dried over sodium sulfate and then evaporated to dryness. 1.2 g of product is obtained, m.p. () (168-1b9 ° lit. L 50,63 (c 2 diox). EXAMPLE 3. Preparation of carbobenzoxyglycine N-oxysuccinimide ester. To a solution containing 1.0 g (4.78 mmol) - carbobenzoxyglycine and 1.13 g (14.3 mmol) of pyridine in 10 ml of dimethylformamide, 2.03 g (7.15 mmol) of di-N-hydroxyl cinimidic oxalic acid are added.
N-оксисукцинимидных эфиров М-защищенных аминокислот.N-oxysuccinimide esters of M-protected amino acids.
Обща методика получени N-Ьксисукцинимидных эфиров Z-R-C-ON; со массу перемешивают в течение 5 ч при комнатной температуре. Нерастворивщийс ди-Ы-оксисукцинимццный эфир щавелевой кислоты отфильтровывают, фильтрат упаривают в вакууме. Остаток раствор ют в этилацетате и промьгаают последовательно 5%-ны1-1 раствором бикарбоната натри и водой. Этилацетатную выт жку сушат над сульфатом натри и затем упаривают досуха. Получают 1,44 г (98%) продукта, т.пл. 113-115°С. П р и м е р 4. Получение N-оксисукцинимидного эфира трет-бутилоксикарбонипглицина . К раствору, содержащему 0,5 г (2,85 ммоль) трет-бутилоксикарбонилглицина и 0,68 г (8,55 ммоль) пиридина в 12 МП ДМФА, добавл ют 1,22 г (4,27 ммоль) ди-Н-оксисук1ШНимидного эфира щавелевой кислоты. Реакционную массу перемешивают при комнатной температуре 5 ч. Затем отфильтровывают нерастворивошйс ди-Н-оксисукцинимидный эфир щавелевой кислоты, фильтрат упаривают досуха. Остаток раствсф ют в этилацетате и пpo e Iвaют последовательно 5%-ню 1 раствором бикарбоната натри и водой. Этилацетатную выт жку сушат сульфатом натри . После упаривани получают 0,65 г (84%) продукта , т.пл. 165-167°С. П р и м е р 5. Получение N-оксисукциним1щного эфира трет-бутилоксикарбонШ1про|1ина . К раствору, содержащему 0,7 г (3,25 ммоль) трет-бутилоксикарбонилпролина и 0,78 г (9,75 ммоль) пиридина в диметилформамиде, добавл ют 1,38 г (4,86 ммоль) ди-N-oкcиcyкцинимидного эфира щавелевой кислоты. Реакционную массу перемешивают в течение 14 ч при комнатной температуре, отфильтровывают избыточное количество ди-Ы-оксисукцинимиДного эфира щавелевой кислоты, фильтрат упаривают , осуха. Остаток раствор ют в этилацетате , раствор промьшают последовательно 5%-ным раствором бикарбоната натри и водой сушат над сульфатом натри . После упаривани растворител получают 0,95 г (94%) продукта, Т.Ш1. 134-135°С. П р и м е р 6, Получение N-оксисукцинимидного эфира трет-бутилоксикарбонилфенилаланина . К раствору, содержащему 1,85 г (7,0. мноль) трет-бутилоксикарбонил: фенилаланина и 1,66 г(21,0 ммоль)пиридина в диметилформамиде, добавл ют ,2,98 г (10,5 ммоль) ди-Н-оксисукцини мвдного эфира щавелевой кислоты. Реакционную массу перемеишвакл- в течение 10 ч при комнатной температуре, после чего нерастворившийс ди-N-oKсисукцинимиднь1й эфир щавелевой кислоты отфильтровывают, фильтрат упаривают . Остаток раствор ют в этилаце тате, проь&гаают последовательно 5%-ным раствором бикарбоната натри и водой. Этилацетатную выт жку сушат сульфатом натри и после упаривани растворител получают 1,95 г (80%) продукта. В таблице представлено получение N-oкcиcyкцини шдныx эфиров аминокислот с помощью ди-Н-оксисукцинимидного эфира щавелевой кислоты (ВОС-трет .бутилоксикарбонильна группа, СВ карбоб ензооксигруппа. Таким образом, использование в качестве этерифицирующего реагента ди-Ы-оксисукцинимидного эфира щавелевой кислоты позвол ет получить N-OKсисукцинимидные эфиры N-защищенных аминокислот с достаточно высокими выходами и высокой степени чистоты. Кроме того, и N-дисукцинимидилоксалат , и целевые -продукты не требуют дополнительной очистки. Новый реагент получают из доступного химического сырь , не обладающего токсичностью, что исключает применение фосгена, используемого в 4j , и значительно упрощает технологический процесс, с точки зрени техники безопасности. Ди-Н-оксисукцинимидный эфир щавелевой кислоты может быть использован в качестве этерифицирующего peareHT.aN дл N-оксисукцинимццных эфиров N-защдщенных аминокислот.General procedure for the preparation of N-xisuccinimide esters of Z-R-C-ON; The mixture is stirred for 5 hours at room temperature. The undissolved di-N-oxysuccinim ethyl oxalate was filtered off and the filtrate was evaporated in vacuo. The residue is dissolved in ethyl acetate and washed successively with 5% -1-1-1 sodium bicarbonate solution and water. The ethyl acetate extract was dried over sodium sulfate and then evaporated to dryness. Obtain 1.44 g (98%) of the product, so pl. 113-115 ° C. PRI me R 4. Obtaining the N-oxysuccinimide ester of tert-butyloxycarbonylglycine. To a solution containing 0.5 g (2.85 mmol) of tert-butyloxycarbonylglycine and 0.68 g (8.55 mmol) of pyridine in 12 MP of DMF, was added 1.22 g (4.27 mmol) of di-N- oxysuc1CHNimide ester of oxalic acid. The reaction mass is stirred at room temperature for 5 hours. Then the insoluble di-N-oxysuccinimide oxalic acid ester is filtered off and the filtrate is evaporated to dryness. The residue is taken up in ethyl acetate and, in turn, is taken up in succession with 5% 1% sodium bicarbonate solution and water. The ethyl acetate extract was dried with sodium sulfate. After evaporation, 0.65 g (84%) of product is obtained, m.p. 165-167 ° C. PRI me R 5. Preparation of tert-butyloxycarbonyl 1 -pro | 1in N-oxysuccinimine ester. To a solution containing 0.7 g (3.25 mmol) of tert-butyloxycarbonylproline and 0.78 g (9.75 mmol) of pyridine in dimethylformamide, 1.38 g (4.86 mmol) of di-N-oxyhydroxymethyl ester was added oxalic acid. The reaction mass is stirred for 14 hours at room temperature, an excess amount of di-Na-oxysuccinimine ester of oxalic acid is filtered off, the filtrate is evaporated and dried. The residue is dissolved in ethyl acetate, the solution is washed successively with 5% sodium bicarbonate solution and dried with water over sodium sulfate. After evaporation of the solvent, 0.95 g (94%) of the product, T.Sh. 134-135 ° C. Example 6, Preparation of tert-Butyloxycarbonylphenylalanine N-oxysuccinimide ester. To a solution containing 1.85 g (7.0 mol) of tert-butyloxycarbonyl: phenylalanine and 1.66 g (21.0 mmol) of pyridine in dimethylformamide, was added 2.98 g (10.5 mmol) of di- N-hydroxysuccini oxalic acid double ester. The reaction mixture was stirred for 10 hours at room temperature, then the undissolved di-N-oK sulfonyl ether of oxalic acid was filtered off and the filtrate was evaporated. The residue is dissolved in ethyl acetate and is subsequently quenched with 5% sodium bicarbonate solution and water. The ethyl acetate extract was dried with sodium sulfate and, after evaporation of the solvent, 1.95 g (80%) of the product was obtained. The table shows the preparation of N-hydroxy amino acid esters of amino acids using di-N-oxysuccinimide ester of oxalic acid (BOC-tert. Butyloxycarbonyl group, SV carbobenzo-oxygroup. Thus, using a di-L-oxysuccinimide ester ether ester ether, ester ester ether. to obtain N-OKsuccinimide esters of N-protected amino acids with sufficiently high yields and high purity. In addition, both N-disuccinimidyl oxalate and the desired products do not require additional purification. the reagent is obtained from an available non-toxic chemical raw material, which eliminates the use of phosgene used in 4j and greatly simplifies the process from a safety point of view. The oxalic acid di-hydroxysuccinimide ester can be used as etherifying peareHT.aN for N-oxysuccinim ethers of N-alkaline amino acids.