SU1088708A1 - Способ диагностики бесплоди - Google Patents

Abstract

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ БЕСПЛОДИЯ , включающий определение подвижности сперматозоидов в содержимом заднего свода влагалища и канала , шейки матки женщины, отличающийс  тем, что, с целью повьщ1ени  точности диагностики инфекционного бесплоди , дополнительно определ ют цитотоксическое действие секрета заднего свода влагалища и шейки матки на сперматозоиды после двухчасового культивировани  их в услови х термостата и комнатной температуры .

Description

00

00 Изобретение относитс  к медицине и может быть использовано в клинической практике при диагностике и лечении инфекционного бесплоди  в семье. Известен способ диагностики бесплоди  у мужчин путем микроскопичес кого исследовани  э кул та. Способ лишь констатирует факт па тоспермии, но не устанавливает причину бесплоди . Наиболее близким  вл етс  способ диагностики экскреторного бесплоди  в супружеской паре (проба Шуварского ), который основан на определеНИИ наличи  и подвижности сперматозоидов в содержимом заднего свода влагалища и канала шейки матки, вз  том через 2-3 ч после половой близости в период овул ции у женщины Однако недостатком пробы  вл етс  то, что она не учитывает и не позвол ет распознать инфекционное бесплодие, отдифференцировать его от других видов бесплоди . Цель изобретени  - повышение точ ности диагностики инфекционного бесплоди . Указанна  цель достигаетс  тем, что согласно способу, включающему определение подвижности сперматозои дов в содержимом заднего свода влагалища и канала шейки матки женщины , дополнительно определ ют цитото сическое действие секрета заднего свода влагалища и шейки матки женщины на сперматозоиды после двухчасового культивировани  их в услови х термостата и комнатной температуры . Способ осуществл ют следующим об разом. Сперму у обследуемых мужчин полу чают путем массажа или маструбации после полового воздержани  в течение 4-5 дней, в период овул ции у жены (определ ют путем измерени  базельной температуры в течение трех мес цев), предварительно обрабатывают наружное отверстие мочеис , пускательного канала дезраствором (например раствор сулемы, хлорамина оставл ют ее в стерильных услови х при комнатной температуре на 2040 мин, в течение которых сперма полностью разжимаетс . Затем сперму тщательно перемешивают, разливают в р д стерильных пробирок из расчет 5-8x10 клеток (0,01 мл) на одну пробирку. В качестве контрол  используют культуру сперматозоидов фертильного мужчины, которую готов т к исследованию аналогично культуре мужчины, обследуемого в бесплодном браке. В пробирке со сперматозоидами обследуемого и фертильного мужчины внос т по 0,01 мл содержимого заднего свода влагалища и шеечного секрета (по два параллельных р да). Пробирки с содержимым оставл ют на 30 мин дл  контакта. До истечении срока контакта в каждую пробирку внос т по 1,0 мл стандартной питательной среды, например среда Игла или 199, содержащей 1% фруктозы, и культивируют в течение 2 ч в услови х термостата, а затем при комнатной температуре 20-25 С в темной емкости в течение -24-48 ч. Просмотр пробирок производ т через 6, 12, 24, 48 ч с об зательным приготовлением мазков и окраской по Граму и 5%-ным эозином, при этом учитывают наличие цитотоксического эффекта по увеличению количества патологически измененных и мертвых сперматозоидов, а также наличие спермагглютинации. При просмотре проб производ т высев культур жидкости подопытных и контрольных проб на дифференциальнодиагностические среды дл  вьщелени  чистой культуры микроорганизмов, их идентифицировани  и определени  лекарственной чувствительности,При наличии у женщины патогенных дл  сперматозоидов микроорганизмов, Л-форм микроорганизмов, микоплазм, хламидий, вирусов или грибов происходит помутнение питательной среды с культурой сперматозоидов, и при микроскопии мазков видна степень поражени  сперматозоидов относительно контрол . Высев культруральной жидкости из пробирок на селективные среды позвол ет вьщелить микробный возбудитель , идентифицировать культуру до вида, определить лекарственную чувствительность и назначить этиотропную терапию бесплоди . Пример. Супружеска  пара В. состо ли в бесплодном браке в течение 5 лет. При объективном осмотре и по данным анамнеза отклонений развити  и состо ни  органов половой системы эндокринного характера не установлено. Муж и жена ранее лечились по поводу воспалительных проце сов в половых органах, которые субъективно себ  ничем не про вл ли При объективном исследовании мужа отмечены некоторые отклонени  со стороны предстательной железы: очаговые уплотнени , чувствительные при пальпации. У жены избыточна  секреци  влагалищной слизи.Путем трехмес чного измерени  базальной температуры у жены установлен день овул ции - 14 день от начала менстр ального цикла (при 28-дневном цикле За 5 дней до овул ции у жены муж воздерживалс  от половой близости. После обработки кистей рук и полового члена 2%-ным раствором хлорами на муж получил э кул т в стерильную пробирку в стерильных услови х.. Параллельно у жены брали стерильной пипеткой емкостью 1,0 мп-содержимое заднего свода влагалища в стерильную пробирку, аналогично получали содержимое шеечного канала. Сперму мужа и фертильного донора оставл ли до полного разжижени  при комнатной температуре, периодически ее перемешива . Разжижение у обследуемого наступило через 35 мин, у донора - через 20 мин. После этого э кул т стерильн.о разливали в два р да опытных и контрольных проб по 0,01 мл (в каждом р ду по 4-5 пр бирок) . Затем добавл ли в каждый из р дов по 0,01 МП содержимого заднего свода влагалища и шеечного канала (последний в случае малого количества разбавл ют раствором Рин гера) и оставл ют на 30 мин дл  кон такта. Через 30 мин в каждую пробир ку добавл ли по 0,1 мл стандартной питательной среды Игла, содержащей 1% фруктозы, и инкубировали в термостате 2 ч. Через 2 ч пробирки перенести из термостата в емкость, не пропускающую освещение, и оставл ли при 20-25 С. Просмотр пробирок начали через 6 ч. Предварительно перед культивированием определ ли исходные показатели спермограммы у обследуемого и у донора. В первом случае концентраци  сперматозоидов бьша равной 5,6x10 в 1 млгживых 50 подвижных 45, мертвых 5, патологически измененных 40%, спермагглютинаци  (+++); во втором случае концентраци  сперматозоидов 7,4х 10 в 1 мл: живых 76, подвижных 72, мертвых 24, патологически измененных 16%, спермагглютинаци  г. После 6 ч инкубации отмечено слабое помутнение в опытных пробирках, в контрольных - без изменений. При просмотре мазков в опытных пробирках более выраженные изменени  спермограммы в пробе с влагалищным содержимым: живых 12%, подвижных нет, мертвых 88%, патологически измененных 92%, спермагглютинаци  (++++), менее выраженные в пробе с содержимым шеечного-канала: живых 24, подвижных 3, патологически измененных 76%, спермагглютинаци  (++++), в контрольной пробе живых 40, подвижньк 36, мертвых 60, патологически измененньсх 44%. Произвели вьюев культур жидкости подопытных и контрольных проб на дифференциально-диагностические среды дл  вьщелени  чистой культуры микроорганизмов, их идентифицировани  и определени  лекарственной чувствительноо ги и продолжили инкубацию. Из опытных пробирок вьщелили микробную ассоциацию: альфа-гемолитический стрептококк и эпидермальный стафилококк в концентрации соответственно 3 X 10 микробных тел в 1 мл и 1 X 10 микробных тел в культуре сперматозоидов с содержимым заднего свода влагалища и 1 х 10 микробных тел как стрептококка, так и стафилококка . Из контрольных пробирок вьщелили альфа-гемолитический стрептококк в концентрации 2 х 10 микробных тел в 1 мл в пробирке с секретом заднего свода влагалища и 1 х 10 микробных тел в пробирке с секретом ще.ечного канала. При определении лекарственной чувствительности стрептококк оказалс  высоко чувствительным к бенемицину, а стафилококк - к фузидину. При просмотре проб через 12 ч как в опыте, так и в контроле, все пробирки были мутными, а при изучении мазков сперматозоиды мертвыми (цитопатогенньм эффект). Следовательно, бесплодие в супружеской паре обусловлено инфекцией как со стороны жены - альфа-гемолитический стрептококк, так и со стороны мужа - эпидермальный стафилококк (в контрольной пробе выделен только стрептококк, следовательно , этот микроорганизм имеетс 

только в секретах поповых органов жены обследуемой пары).

Мужу назначено соответствуищее лечение с учетом чувствительности микрофлоры к фузидину, а жене - к бенемицину.

В тех случа х, когда данные опыной и контрольной проб совпадают, рекомендуетс  дополнительно производить высев из культуры сперматозоидов мужа без примеси секретов жены, что позвол ет дифференцировать этиологический фактор бесплоди  в супружеской паре.

Таким образом, предлагаемый способ позвол ет достоверно диагностировать бесплодие в семье, обусловленное инфекционным агентом, изолировать последний в чистом виде, определить лекарственную его чувствительность и назначить этиотропную терапию, наиболее адекватную дл  мужа и жены.

Claims (1)

1. СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ БЕСПЛОДИЯ, включающий определение подвиж- ности сперматозоидов в содержимом заднего свода влагалища и канала шейки матки женщины, отличающийся тем, что, с целью повышения точности диагностики инфекционного бесплодия, дополнительно определяют цитотоксическое действие секрета заднего свода влагалища и шейки матки на сперматозоиды после двухчасового культивирования их в условиях термостата и комнатной температуры.