SU1063831A1 - Штамм @ @ @ -2384,используемый дл очистки промышленных сточных вод коксохимических производств от роданидов - Google Patents

Abstract

Штамм,Thiobacillus thiodyanoxidans В-2384 (депонирован в Центральном музее про№Л1шенных микроорганизмов института ВНИИгёнетика, коллекционный номер ЦМПМ В-2384), используемой дл  очистки промышленных сточных вод коксохимических производств от роданидов. (Л о: оо 00 со

Description

Изобретение относитс  к микробио логической промышлейности и касает нового штамма бактерий, используемо го дл  разрушени  роданидов при очистке промышленных сточных вод ко сохимичесцих производств. Известны штаммы роданразрушающих микроорганизмов, близких к роду Pseudomonas поп ligusactis и сходных с Bakt „ th iocyanoxidaijs Happoid Штаммы имеют следующую характеристи ку. Морфологические признаки.. Короткие , мелкие, утолщенные палочки, напоминающие кишечные, но размером меньше в 4-5 раз. Длина клеток 0,20 ,5 мкм. Неподвижные. По Граму окра шиваютс  отрицательно или в неопред ленный розовато-голубой цвет. Физиологические признаки. Аэроб. Оптимальна  температура жизнеде тел ности 25-30°С. Оптимальный рН 6,8-7 Культуральные свойства. При росте на агаризованной среде образуютс  колонии в виде росинок. На м сопептонном агаре вырастают подобные колонии, но более крупные, при этом среда окрашиваетс  в желто-зеленый. цвет. После культивировани  на м co-nentOHHOM агаре тер ет способность окисл ть роданиды. Биохимические свойства. Не измен ют молоко и Сахаров, не продуциру индол и сероводород, не разжижают м со-пептонную желатину 1 . Известны штаммы вида Thiobaoiiiu thiocyanoxidan.s разрушающие роданид в сточных водах и имеющие следующую характеристику о Морфологические свойства. Мелкие , короткие, палочки с округленны ми -кра ми, похожие на ко1 кобактерии Длина клеток 0,5-0,7 мкм, ширина 0,2-0,3 мкм. Располагаютс  отдельно Спор не образуют. Окрашиваютс  по Граму отрицательно. Слабо окрашиваютс  метиленовым синим и фуксином . Подвижны. Размножаютс  делением . Типичный признак: посто нство формы и величины клеток. Культуральные признаки. На м сопептонном агаре и плотных элективных родановых средах образуют очень мелки, прозрачные, круглые колонии Растут на питательных средах, включающих промышленные сточные воды, содержащие роданиды. Биохимические признаки. Не ферментируют лактозу, глюкозу, маннит, мальтозу, сахароэ-у., не образуют индол, выдел ют сероводород Я}. Недостатками штаммов  вл ютс : сравнительно цизка  интенсивность окислени  роданидов в промышленных сточных водах (до 80 г/м . сутки) , медленное развитие бактерий (5-6 су ток и низка  удельна  скорость роста бактерий. Цель изобретени  - создание нового штамма, интенсифицирующего процесс окислени  роданидов в сточных водах. Поставленна  цель достигаетс  использованием штамма Thiobacilfus thiocyanoxidans В-2384 дл  очистки промьш.шенных сточных вод коксохимических производств от роданидов. Предлагаемый штамм отличаетс  от известных своими морфологическими, физиологическими и биохимическими свойствами , а также выраженной способностью окисл ть роданистые соединени . Штамм выделен из почвы и адаптирован на питательных средах, содержащих роданиды до 0,4 мг/л. Штамм имеет следующую характеристику . Морфологические признаки. Клетки палочковидные, мелкие, короткие, размером О , .,5-0 ,6 мкм с закругленными кра ми. Располагаютс  поодиночно , размножаютс  делением. Полиморфные , По методу Грама окрашиваютс  отрицательно. Окраска клеток равномерна , интенсивна . Кислоточувствительны . Включений и спор не имеют, выраженной капсулы не образует. Подвижные , Физиологические свойства. Аэроб, температурный . диапазон роста 25-42С. Оптимальна  концентраци  водородных ионов среды (рк)- 8,0, при рН 77 ,5 рост слабый. Добавление к м сопептонному бульону поваренной соли до 2% стимулирует рост, концентраци  соли 6% и выше приводит к полной задержке роста культуры. Культуральные свойства. На м сопептонном агаре (МПА суточна  культура образует колонии диаметром 23 мм с блест щей поверхностью, возвышенным центром, ровным и плоским краем. Колонии бесцветные, непрозрачные , легко снимаютс  петлей. Агар вокруг колоний не окрашиваетс . На МПА с добавлением 3-5% крови зоны гемолиза не дает. На средах Эндо, Левина , Плоскирева колонии мелкие, диаметром 0,5-1 мм сухие, матовые, плоские с приподн тым центром, на висмут-сульфит агаре роста нет. На МПБ по Хиттигеру штамм дает равномерную муть без образовани  пленки. На синтетической агаризованной родановой среде при 30-37 0 штамм через 48 ч образует мелкие точечные колонии, выпуклые с блест щей поверхностью , ровным краем, непрозрачные . Петлей снимаютс  легко. Штамм приводит к легкой опалесценции жидкой родановой среды в первые сутки роста при 30-37 0, через 48 ч дает 1:)авномерную муть. Биохимические свойства. Неактивен в отношении глюкозы лактозы, мальтозы , сахарозы, ксилозы, арабинозы.

галактозы, маннита, дульцита, инозита , сорбита. Проба Хью-Лейфсона отрицательна  (окисление и ферментаци  глюкозы не происход т), Ацетилметилкарбонил не образует, реакци  с метил-рот отрицательна . Крахмал не гидролизует. Протеолитическими свойствами не обладает (желатин не разжижает, молоко не свертывает, реакцию молока не измен ет). Индол и сероводород не образуетi Продуцирует оксидазу/кат.алазу, не облада- ет уреазной активностью.Цитрат в качестве единственного источника углерода не может использовать. В среде Виноградского.окисл ет нитриты до нитратов (в пределах 30% от и.С ходного количества нитритов).

Не утилизирует аргинин, лизин и орнитин (аргининдигидролаза) лизини орнитиндекабоксилазы отсутствуют.

Штамм депонирован во Всесоюзном научно-исследовательском институте генетики и селекции промышленных микроорганизмов и ему присвоен шифр ДМПМ В-2384. Хранитс  в музе х живых культур микробов Кузнецкого филиала Восточного научно-исследовательского углехимического института и кафедры микробиологии Новокузнецкого института усовершенствовани  врачей.

Выделенный штамм сохран ют в лабораторных услови х на жидкой родановой среде следующего состава: водопроводна  вода 1 л} 0,3 г 0,5 г; MpS04 0,1 г; FeSO следы; K HPOij 0,5 г.

Роданразрушающа  активность штамма поддерживаетс  путем пересевов на жидкие родановые среды (соотношение 1:4). Инкубаци  24 ч при 30 с, в последующем штамм следует хранить при температуре в темноте.

Пример. Штамм ThiobaciJTus thiocyanoxidang, В-2384 используют дл  обезроданивани  промышленных сточных вод коксохимических производств .

Роданазна  активность штамма проверена на лабораторной установке со окгочными водс1ми коксохимических производств. Основные, параметры бактериального обезроданивани  промьшшенных сточных вод следующие: оптимальна  температура процесса обезроданивани  28-30с, рН среды 7,8-8,0. Испытани  провод т в ферментаторах периодического ку ьтивировани  микроорганизмов.

Сточна  вода коксохимического производства, содержаща  роданиды .450 мг/л, фенолу 1-5 мг/л, общий азот 3000 мг/л, цианиды 15-20 мг/л/ смолы и масла 5р-60 мг/л обезроданиваетс  за 4-5 сут, относительна 

скорость окислени  73-92 мг/л в сутки . Остаточное содержание роданидов составл ет 1-3 мг/л.

П р и м е р 2. Штамм ThiobacilJ-is tliiocyanoxidans В-2384 используют дл  обезроданивани  родановой жидкой среды с концентрацией роданидов () 240 мг/л,- 500 мг/л/ KH.PO(j 500 мг/л; Ре804следы. Обезроданивание производ т в услови х примера 1. Относительна  скорость обезроданивани  120 мг/л в сутки. Остаточное содержание роданидов до 1 мг/л.

Предлагаемый штамм интенсивно развиваетс  народановых синтетических средах и МПА в первые сутки.

В динамике обезроданивани  многократно изучались ферментативные свойства штамма и существенных отклонени от характеристик исходного штамма не отмечено.

При сравнительно короткой лагфазе период экспоненциального роста культуры наступает уже через 3-5 ч культивировани  в отличие от известного , у которого развитие наблюдаетс  на 5-6 сутки. По исследованным параметрам периодическа  культура предлагаемого штамма охарактеризована как быстрорастуща .

Таким образом, штамм Tliiobacillus thiocyanoxidans В-2384 обеспечивает эффективное обезроданивание, например , характеризуетс  высокой (1 сутки ) скоростью роста и стабильностью ферментативных свойств.

Активность штамма без аэрации приведена в .табл. 1 и с аэрацией подтверждаетс  данными, приведенными в табл. 2.

Результаты испытаний, ь период проведени  испытаний массова  концентраци  роданидов в среде и сточной воде колебались от 240 до 500 мг/л, а конечна  1-3 мг/л. Исследовани  проводились с подачей и без подачи воздуха в ферментатор. Длительность .эксперимента составл ла от 1 до 7 суток.

Таким образом, лабораторные испытани  штамма В-2384 показали высокую окислительную способность по отношению к роданидам на синт.етической родановой среде 169 мг/Л:- сут , ), а на промышленных водах 83 , что выше известного штамма (до 80 г/м- сут) .

Использование предлагаемого штамма дл  очистки коксохимических сточных вод от роданидов позволит сократить врем  обезроданивани  (с 5 суток до 1 суток), и увеличить съем роданидов.

Таблица

Claims (1)

1. ШТАММ THIOBACILLUS THIOCYANOXIDANS В-2384, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ОЧИСТКИ . ПРОМЫШЛЕННЫХ СТОЧНЫХ ВОД КОКСОХИМИЧЕСКИХ ПРОИЗВОДСТВ ОТ РОДАНИДОВ. (57) штамм,Thiobaciilus thiodyanoxidans В-2384 (депонирован в Центральном музее промышленных микроорганизмов института ВНИИгенетика, коллекционный номер ЦМПМ В-2384), используемый для очистки промышленных сточных вод коксохимических производств от роданидов.