4 00 4 00
-AW,-AW,
Ш2 Ш2
О 00 Изобретение относитс к новому биологически активному соединению аналогу энкефалина, обладающему анальгетическим действием,которое может найти применение в медицине. .Природные энкефалины - метионин и лейцин Н Tyr-Gly-Gly-Phe ОН и Н Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu ОН, соответственно про вл ют морфиноподобную активность в опытах на специфических модел х оциатного рецептора и подавл ют стереоспецифическое св зывание с рецептором опиатного антагониста налоксона в гомогенатах мозга, Однако эти энкефалины про вл ют слабую и кратковременную (5-15 мин) анальгезию при внутрижелудочковом введении в мозг мыши и не активны при внутривенном перрорйльном и дру гих способах введени . Наиболее близким структурным аналогом описываемого соединени . в л етс (D-Arg) - лейцин.энкефалин, обладающий анальгетической активностью при внутримозговом введении. При внутривенном введении этот аналог анальгезией не обладает. Цель изобретени - расширение арсенала средств воздействи на живой организм, обладающих анальгетическим Действием, Цель достигаетс предлагаемым аналогом энкефалина формулы Н Tyr-D Arg-Gly-Phe Ш обладающим анальгетическим действие Отесываемое соединение. - (D-Arg дез-Ьеи) - энкефалинамид синтезиро ван с испо.пьзованием известных мето дов пептидной химии по схеме с использованием в качестве конденсирую щего агента дициклогексилкарбодиими да, а также пентафторфениловых эфиров трет-бутилоксйкарбониламинокислот , Гуанйдинова функци D-аргинина быпа защищена нитрогруппой, гидр кси тирозина - бензильным радикало Карбоксильную группу глицина защища ли этерификацией, Вос-группы в синтезе пептида удал ли 50%-ным раство ром трифторуксусной кислоты (TFА) в хлористом метилене. Нитро- и бензил ную защиты снижали каталитическим гидрогенолизом. Обща схема синтеза приведена на чертеже. Дл синтеза (D-Arg, дез-Lei энкефалинамида используют аминокислоты и их производные фирмы Reanal. Все аминокислоты, кроме D-аргинина имеют L-конфигурацию. Температуру плавлени веществ определ ют в капилл ре (без коррекции). Индивидуальность промежуточных соедгшений контролируют с помощью тех на пластинках Silufol (ЧССР) в следующих системах растворителей: хлороформ - этанол уксусна КИСЛОТА АсОН), 85:10:5 (А), Н. бутанол - пиридин - АсОН - , 15:10:3:6 (В), н. бутанол - АсОН - HjO, 4:1:1 (С). Аналог энкефалина хроматографируют на пластинках фирмы Meric в системах: хлороформ - метанол - АсОН - HjO, 30:20:4:6 (D), н. бутанол - пиридин - АсОН - , 15:12:3:10 (Е). Удельное., оптическое вращение пептидов измер ют на пол риметре Pefkin-Elmer- 141 М C1IIA) . Кислотный гидролиз провод т в запа нных ампулах в 6 ц.сол ной кислоте при в течение 24 ч. Аминокислотный состав определ ют на анализаторе Jeol-3. Дл всех соединений данные элементного анализа удовлетворительно совпадают с вычисленным содержанием С. Н, N. Этиловьй эфир ,ет-бутилоксикарбонил-Н -нитро-1)аргинил-глици- на (1). К раствору 6,38 г (20 м оль) N -трет-бутилоксикарбонил-К -нитроD-аргинина и 3,24 г (24 ммоль) 1оксибензотриазрла в 20 мл д1Ю1етйпформамида (ДМФА) при охлаждении до -15°С прибавл ют 4,12 г (20 ммоль) дициклогексш1карбоди1 ида (ДСС) .в 8 мл ддаА, перемешивают 3 ч при ОС, затем добавл ют 3,07 г (22 ютоль) этилового глицина гидрохлорида, 3,08 мл (22 ммоль) триэтилами а и перемешивают 24 ч при 2р°С. Реакционную массу разбавл ют этилацетатом и водой (до разделени слоев). Этилацетатшлй слсий отдел ют и промывают последовательно 5%-ным раствором KHSO, 5%-ным раствором NaHCO,, водой, насыщенным раствором NaCl, сушат над безводным . Растворитель отгон ют, остаток перекристал лизовывают из этилацетата. Выход 6,24 г (О (77%), т.пл. 119 С (разм гчаетс при 96 С), М1 - 13,5 (с 1. ДМФА): ,68 (В). Этиловый эфир N-трет-бутилоксикapбoнил-o-бeнзил-L-тиpdзил-N -нитpo-D-аргинил-глицина . А,04 г(10ммол дипептида (1) раствор ют в 15 мл 50%-ного раствора TFA в дихпорметане и выдерживают 30 мин. Раствор1итель отгон ют, остаток растирают с эфиром и сушат в вакуум-эксикаторе над КОН. Получают 4,01 г (96%) трифторадетата (11), ,48 (В). . 2 г (5 ммоль) трифторадетата (11) раствор ют в 10 мл ДМФА, охлаждайт до ,и при перемешивании добавл ют 0,6 мл (5 ммоль) триэтиламина в 2 мл ДМФА и 2,46 г (5 ммоль) н-нитро фенилового эфира N-трет-бутилоксикарбонйл-о-бензшт-Ъ-тирозина , растворенного в 10 мл ЛМФА. Смесь выдер живают 1 ч при -5 С, 24 ч при 0°С и еще 24 ч при комнатной температуре . Затем реакционную массу выливают в 500 мл воды со льдом, выделивше ес - в осадок вещество отфильтровываю Осадок раствор ют в этилацетате и . промывают/ 5%-ным раствором KHSQ, водой,5%-ным раствором KHCO, водой, насыщенным раствором NaCl и высзшивают над безводным Na 804. Растворитель отгон ют, продукт этиловый эфир Н-бутилоксикарбонил-о-бензил-Ьтирозил-к -нитро-В-аргинил-глицина (III) пёрекристаллизовывают из Этилацетата . Вызсод t,77 г (54%) трипептида (III), Т.Ш1. 162-164®С,,1° . (с 1, даФА); R.|.0,65 (А). К-трет-бутилоксикарбонил-о-бензщ1 Ь-тирозил-Ы нитро-О-аргинил-гли .Щ1н (IV), 9,66 г (1 ммоль) трип птида (III) раствор ют в 15 мл метанола прибавл ют 1 и. раствор NaOH до рН 10-11 и выдерживают несколько минут до окончани гидролиза (хроматографический контроль). Отгон ют растворитель, добавл ют воды и подкисл ют 1 н. HG1 до рН 3. Выпашший осадок отфильтровывают и хроматографируют на колонке с силикагелем в системе хлороформ-этанол-этилацетатAeOH-Hj 0,85:5:8:2:0,25. Получают 0,34 г (54%) т рипептида (IV), т.пл. ,,3° (с. 1, ДМФА) 5 ,60 (С). . . . / Ы-трёт-бутилок:сикарбонш1-о-бензил Ь-тирозил-Ы -.нитро-В-аргинил-глицилL-фенилаланинамид . 3,15 г (5 ммоль) трипептида (IV) раствор ют в 10 мл этилацетата, охлаждают до О С и при 03 .4 перемешивании добавл ют 1,01 г (5,5 ммоль) пентафторфенола и 1,13 г (5,5 ммоль) лес, растворенных в этилацетате. Через 2 ч смесь этилацетате, охлаждают до -10 С, вьтавшую дициклогексилмочевину отфильтровывают, растворитель отгон ют, маслообразный остаток растирают с гексаном до затвердени . Получают 3,54 г пентафторфенилового эфира (V); ,90 (С). 0,89 г (4,45 ммоль) гидрохлррида L-фенилаланинамида (VI) раствор ют в 6 мл ДМФА и при перемешивании добавл ют 0,62 мл (4,45,ммоль) триэтиламина в 2 мл ДМФА и 3,54 г (4,45 ммоль) пентафторфенштового эфира (V), растворенного в 4 мп ДМФА. Реакционную массу перемешивают несколько часов, ДМФА отгон ют при 40 С, остаток раствор ют в этилаце- тате и обрабатывают аналогично соединению (III). Продукт К-трет-бутилoкcикapбoнил-o-бeнзил-L-тиpoзил-N нитро-В-аргинил-глицил-Ъ-фенилаланинамид (VII), полученный после отгонки растворител , растирают с теплым этилацетатом, отфильтровывают и сушат в вакуум-эксикаторе. Выход 1,44 г (42%) защищенного амида тетрапептида (VII), т.пл. 173175°С , -6,3°(с.1, ДМФА), ,43 (А), ,74 (В). Ъ-тирозил-В-аргинил-глицил-Ь-фенилаланинамид . 0,5 г (0,64 ммоль) тетрапептида (VII) раствор ют в 7 мл 50%-ного раствора TFA в дихлорметане и выдерживают в течение 30 мин. Раствор упаривают, остаток растирают с эфиР° сушат в вакуум-эксикаторе над КОН. Получают 0,46 г трифторацетата ( VIII); ,85 (Д). К раствору 0,46 г (0,58 ммоль) соединени (VIII) в 5 мл метанола добавл ют палладиевую чернь, 0,2 мл уксусной кислоты и гидрируют 6-ч при 20 С. Катализатор отфильтровывают , фильтрат упаривают досуха, остаток растирают с эфиром, отфильтровывают , промывают эфиром на фильтре, сушат над КОН Ь-тирозил-В-аргинилглицил-2-фенилаланин (IX) в вакууме. Полученный продукт (0,42 г) очищают на КМ-целлюлозе. Соответствующую фракцию собирают и лиофилизуют. Выход 0,20 г (57%) амида тетрапептида энкефалина (IX),uilD +23,7° бс 1, метанол), +43,3 (с,1. 0,2 н АсОН); ,75 (Д), ,62 (Е аминокислотньй состав: Туг 0,87; Phe 1,04; Gly 1,00; Arg 0,97. Биологическа активность (D-Arg, двз-Leu)-энкефаЛИНамида исследована в опытах in vivo. В работе использованы беспорбдньш мьпни-самцы массой 20 г. Описываемое вещество, растворенное в стерильном физиологическом растворе, ввод т при помощи 1-образной иглы в cisterna magna мозга неанестезнррванньм мьшам в количестве 10 мкл. Исследован диапазон доз: t,0 - too,О мкг/жив. Контрольным животным ввод т to мкл стерильного физиологического раствора, ,Кажда акспериментальна группа состоит из to мышей. Анальгетичёский эффект соединени оценивают по тесту tail pinch при помощи артериального зажима, который накладывают на основание хвоста. Определение болевой реакции провод т через 5, 15, 30, 60,90 мин после введени и затем каждые 30 мин до исчезновени анальгетической реакции. Результаты выражают альтернативным методом в проценте мьнвей, пока 3 авших ан аль ге тическую реакцию. При вычислении ЕД (эффективна доза исследуемого вещества , котора вьГзывает анальгетический эффект у 50% подопытных живот ных) используют метод Литчфилда и Уилкоксойа. Анальгетическа активность исследованных соединений приве дены в табл. 1. (D-Arg, дез-Leu)-энкефалинамид про вл ет значительный и пррдолжительньй анальгетическнй эф|1ект. Максимальный эффект наблюдают на 530 мин после введени . Анальгетическа активность предл гаемого аналога энкефалина в 2 раза превышает анальгетическую активност известного аналога энкефалина(D-Arg -лейцин-энкефалина на мол рной основе (табл. 1). Кроме того, описываемый аналог энкефалина в отличие от своего структурного прототипа активен при внутривенном введении(ЕД 28,0, 17,9-АЗ,7 мг/кг). Характерной особенностью описанного аналога вл етс значительна , пролонгаци анальгетического эффекта. Продолжительность его анальгезии составл ет 4 ч против нескольких минут (5-15) природных энкефалинов. Анальгетическа активность природных эн :ёфалинов и сопоставила по величине к продолжительности с анальгетической активностью морфина (табл. 1). Таблица 1 223(160-310) Лейцин-энкефалин 146( 99-215) Метионин-энкефалин ( D-Arg)-лейцин-эн5 ,3(2,9-9,3) кефалин ( D-Arg, дез-Leu )2 ,5(0,9-7,2) энкефалинамид 1,8(0,5-5,6) Морфин В табл.. 2 представлен анальгетический эффект описываемого (D-Arg, дез-Leu)-энкефалинамида, полученный в опытах на мьшах при интерацистернальном введении в дозах 1-100 мкг/животных. 91 Эффективна доза соединени () вычисленна на основании данных таблиц , составл ет 2,5 нмоль/жив, или 1,7 мкг/жив. Из данных табл. 2 видно чт;о токсические признаки соединени начинают про вл тьс в дозах, -йревышающих эффективную в 59 раз ( . ). следовательно. 1,7 мкг/жив, терапевтический индекс соединени /JlfljQ /ЕДуо/ больше 59 и вл етс достаточно безЬпасным интервалом дл лекарственного средства. Интервал между дозой, вызывающей минимальный анальгетический эффект. 3 и дозой, вызывающей первые признаки токсичности (терапевтическа широта), также достаточно велик. Он составл ет более сотни , 100 мкг/жив. ) и вл етс безопас1 ,О мкг/жив. ным дл лекарственного средства. Результаты биологических испытаНИИ описываемого {B-Arg, дез-Leu )энкефалинамида показали, что предлагаемое соединение малотс ксично и обладает рко выраженным анальгетическим действием при интрацистернальном введении.O 00 The invention relates to a new biologically active compound, an Enkephalin analogue, which has an analgesic effect, which can be used in medicine. Natural enkephalins, methionine and leucine H Tyr-Gly-Gly-Phe OH and H Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu OH, respectively, show morphine-like activity in experiments on specific models of the excate receptor and suppress stereospecific binding to The opiate antagonist receptor naloxone in brain homogenates, however, these enkephalins exhibit weak and short-term (5-15 min) analgesia when administered intraventricularly to the mouse brain and are not active when administered intravenously peroral or other methods of administration. The closest structural analogue of the described compound. in (D-Arg) - leucine. enkephalin, which has analgesic activity after intracerebral administration. When administered intravenously, this analogue does not have analgesia. The purpose of the invention is to expand the arsenal of means of influencing a living organism with an analgesic Action. The goal is achieved by the proposed enkephalin analogue of the formula H Tyr-D Arg-Gly-Phe III having an analgesic effect. - (D-Arg-Leu des) - enkefalinamid van synthesized with known ispo.pzovaniem Meto rows peptide chemistry scheme using a condensing agent present ditsiklogeksilkarbodiimi yes, pentafluorophenyl ester and tert-butiloksykarbonilaminokislot, Guanydinova function of D-arginine protected with nitro bypa , hydroxyl tyrosine — a benzyl radical, the carboxyl group of glycine was protected by esterification; Boc groups in peptide synthesis were removed with a 50% solution of trifluoroacetic acid (TFA) in methylene chloride. Nitro and benzyl protection was reduced by catalytic hydrogenolysis. The overall synthesis scheme is shown in the drawing. For the synthesis (D-Arg, des-Lei enkephalinamide, amino acids and their derivatives from Reanal are used. All amino acids except D-arginine have the L configuration. The melting point of the substances is determined in the capillary (without correction). The personality of the intermediate compounds is controlled by those on Silufol (Czechoslovakia) plates in the following solvent systems: chloroform - ethanol acetic acid AcOH), 85: 10: 5 (A), N. butanol - pyridine - AcOH -, 15: 10: 3: 6 (B), n . butanol - AcOH - HjO, 4: 1: 1 (C). Enkephalin analogue is chromatographed on Meric plates in the following systems: chloroform - methanol - AcOH - HjO, 30: 20: 4: 6 (D), n. butanol - pyridine - AcOH -, 15: 12: 3: 10 (E). Specific., Optical rotation of the peptides was measured using a Pefkin-Elmer-141 M polarimeter (C1IIA). Acid hydrolysis is carried out in sealed ampoules in 6 cent. Hydrochloric acid for 24 hours. The amino acid composition is determined on a Jeol-3 analyzer. For all compounds, the elemental analysis data satisfactorily coincide with the calculated content of C. H, N. Ethyl ether, et-butyloxycarbonyl-H-nitro-1) arginyl-glycine (1). To a solution of 6.38 g (20 m ol) of N-tert-butyloxycarbonyl-K-nitro-D-arginine and 3.24 g (24 mmol) of 1-oxybenzotriazrel in 20 ml of d1Hl-ytyformamide (DMF) add 4, under cooling to -15 ° C. 12 g (20 mmol) of dicyclohexylcarbodylide (DCC). In 8 ml of ddA, mix for 3 hours at OC, then add 3.07 g (22 toluene) of ethyl glycine hydrochloride, 3.08 ml (22 mmol) of triethyla a and mix 24 h at 2 ° C. The reaction mixture is diluted with ethyl acetate and water (before separation of the layers). The ethyl acetate is separated and washed successively with a 5% KHSO solution, a 5% NaHCO solution, water, a saturated NaCl solution, and dried over anhydrous. The solvent is distilled off, the residue is recrystallized from ethyl acetate. Yield 6.24 g (O (77%), mp. 119 C (softens at 96 C), M1 - 13.5 (with 1. DMF):, 68 (B). N-tert-ethyl ester butyloxycarbonyl-o-benzyl-L-typrdzil-N-nitro-D-arginyl-glycine A, 04 g (10 mmol of the dipeptide (1) is dissolved in 15 ml of a 50% TFA solution in dichloromethane and incubated for 30 minutes. The solvent is distilled off The residue is triturated with ether and dried in a vacuum desiccator over KOH. 4.01 g (96%) of trifluorodetate (11), 48 (B) is obtained. 2 g (5 mmol) of trifluorodedetate (11) is dissolved in 10 ml of DMF, cool until, and with stirring, 0.6 ml (5 mmol) of triethylamine in 2 ml of DMF and 2.46 g (5 mmol) of n-nitro-phenyl ether are added N-tert-butyloxycarbonyl-o-benzst-b-tyrosine dissolved in 10 ml of LMFA. The mixture is kept for 1 hour at -5 ° C, 24 hours at 0 ° C and another 24 hours at room temperature. Then the reaction mass is poured into 500 ml of ice water, precipitated out with EC - filtering off the precipitate. The precipitate is dissolved in ethyl acetate and washed with a 5% KHSQ solution, water, a 5% KHCO solution, water, a saturated NaCl solution and dried over anhydrous Na 804. The solvent distilled, the product of the ethyl ester of H-butyloxycarbonyl-o-benzyl-tyrosyl-K -nitro-B-arginyl-glycine (III) is recrystallized from ethyl acetate. Vyzsod t, 77 g (54%) of the tripeptide (III), T.Sh1. 162-164®С ,, 1 °. (from 1, daFA); R. | .0.65 (A). K-tert-butyloxycarbonyl-o-benzch1 L-tyrosyl-S nitro-O-arginyl-gly. Shch1n (IV), 9.66 g (1 mmol) of bird (III) tryp are dissolved in 15 ml of methanol and 1 is added . NaOH solution to pH 10-11 and incubated for several minutes until the end of the hydrolysis (chromatographic control). The solvent is distilled off, water is added and acidified with 1N. HG1 to pH 3. The precipitated precipitate is filtered and chromatographed on a silica gel column in a chloroform-ethanol-ethyl acetate AeOH-Hj 0.85: 5: 8: 2: 0.25 system. Obtain 0.34 g (54%) of the ripeptide (IV), so pl. ,, 3 ° (p. 1, DMF) 5, 60 (C). . . . / L-trt-butyl: Sicarbone-1-o-benzyl L-tyrosyl-L-nitro-B-arginyl-glycyl-L-phenylalaninamide. 3.15 g (5 mmol) of tripeptide (IV) is dissolved in 10 ml of ethyl acetate, cooled to 0 ° C and 1.01 g (5.5 mmol) of pentafluorophenol and 1.13 g (5, 5 mmol) wood, dissolved in ethyl acetate. After 2 h, the mixture is ethyl acetate, cooled to -10 ° C, the dicyclohexyl urea is filtered off, the solvent is distilled off, the oily residue is triturated with hexane until solid. 3.54 g of pentafluorophenyl ether (V) are obtained; , 90 (C). 0.89 g (4.45 mmol) of L-phenylalaninamide (VI) hydrochloride is dissolved in 6 ml of DMF and with stirring, 0.62 ml (4.45 mmol) of triethylamine in 2 ml of DMF and 3.54 g are added ( 4.45 mmol) of pentafluorofenster ether (V) dissolved in 4 mp DMF. The reaction mass is stirred for several hours, the DMF is distilled off at 40 ° C, the residue is dissolved in ethyl acetate and treated similarly to the compound (III). The product of tert-butyl oxycarbonyl-o-benzyl-L-tyrosyl-N nitro-B-arginyl-glycyl-b-phenylalaninamide (VII), obtained after distilling off the solvent, is triturated with warm ethyl acetate, filtered and dried in a vacuum desiccator. The output of 1.44 g (42%) of the protected amide of tetrapeptide (VII), so pl. 173175 ° C, -6.3 ° (p.1, DMF),, 43 (A),, 74 (B). B-tyrosyl-B-arginyl-glycyl-b-phenylalaninamide. 0.5 g (0.64 mmol) of tetrapeptide (VII) is dissolved in 7 ml of a 50% TFA solution in dichloromethane and incubated for 30 minutes. The solution is evaporated, the residue is triturated with ether; Rp. Dried in a vacuum desiccator over KOH. 0.46 g of trifluoroacetate (VIII) is obtained; , 85 (D). Palladium black and 0.2 ml of acetic acid are added to a solution of 0.46 g (0.58 mmol) of compound (VIII) in 5 ml of methanol and hydrogenated for 6 hours at 20 ° C. The catalyst is filtered off, the filtrate is evaporated to dryness, the residue is triturated with ether, filtered, washed with ether on the filter, dried over KOHL-tyrosyl-B-arginylglycyl-2-phenylalanine (IX) in vacuo. The resulting product (0.42 g) is purified on KM-cellulose. The appropriate fraction is collected and lyophilized. Yield 0.20 g (57%) of the tetrapeptide enkephalin (IX) amide, uilD + 23.7 ° bs 1, methanol), +43.3 (s, 1. 0.2 n AcOH); , 75 (D),, 62 (E amino acid composition: Tug 0.87; Phe 1.04; Gly 1.00; Arg 0.97. Biological activity (D-Arg, dvz-Leu) -enkefLINNamide was studied in experiments vivo. In this work we used 20-gram-free young males. The described substance, dissolved in sterile saline solution, was injected with a 1-shaped needle into the brain cisterna magna in non-anesthesia amount of 10 µl. Dose range: t, 0 - too , About µg / live. Control animals are administered to µl of sterile saline,, Each experimental group is made up of mice. The effect of the compound is evaluated by the tail pinch test using an arterial clamp that is applied to the base of the tail. The pain response is determined 5, 15, 30, 60.90 minutes after administration and then every 30 minutes until the analgesic reaction disappears. The method in percentage of men, while the top three were an anti-algetic reaction. When calculating the ED (the effective dose of the analyte that causes an analgesic effect in 50% of experimental animals), the method of Litchfield and Wilcoxoy is used. The analgesic activity of the compounds studied is given in Table. 1. (D-Arg, des-Leu) -enkephalinamide exhibits a significant and lasting analgesic effect | 1kt. The maximum effect is observed at 530 minutes after administration. The analgesic activity of the proposed enkephalin analogue is 2 times greater than the analgesic activity of the known enkephalin analogue (D-Arg-leucine-enkephalin on a molar basis (Table 1). In addition, the described enkephalin analog is active when administered intravenously ( AU 28.0, 17.9-AZ, 7 mg / kg. A characteristic feature of the described analog is significant, prolongation of the analgesic effect. The duration of its analgesia is 4 hours against a few minutes (5-15) of natural enkephalins. The ethical activity of natural en: ephalins and compared in magnitude to duration with the analgesic activity of morphine (Table 1). Table 1 223 (160-310) Leucine-enkephalin 146 (99-215) Methionine-Enkephalin (D-Arg) -leucine en5, 3 (2.9-9.3) kefalin (D-Arg, des-Leu) 2, 5 (0.9-7.2) enkephalinamide 1.8 (0.5-5.6) Morphine Table .. 2 presents the analgesic effect of the described (D-Arg, des-Leu) -enkephalinamide, obtained in experiments on mice with interacisternal administration in doses of 1-100 μg / animal. 91 The effective dose of compound () calculated from the data in the tables is 2.5 nmol / live, or 1.7 µg / live. From the data table. 2 that the toxic signs of the compound begin to appear in doses that are 59 times more effective (.). Consequently. 1.7 µg / live, the therapeutic index of the compound (JlfljQ / EdUo / greater than 59) is a rather safe interval for the drug. The interval between the dose that causes the minimum analgesic effect. 3 and the dose that causes the first signs of toxicity (therapeutic latitude) is also quite large. It is over a hundred, 100 µg / live. ) and is safe1, O µg / is alive. for drug. The results of biological testing of the described {B-Arg, des-Leu) enkephalinamide showed that the proposed compound is of minor toxicity and has a pronounced analgesic effect when administered intracisternally.