Изобретение относитс к экспериментальной биологии, и медицине и может быть использовано дл регистрации клеточной активности движущихс возбудимых тканей, например, коры головного мозга, сердечной мыш цы и т.д. Пульсации головного мозга чрезвычайно затрудн ют длительную регис рацию активной де тельности отдельн нейронов, особенно корковых, поэто предложены различные конструкции невесовых микроэлектродов. Известно устройство дл регистра гции электрической активности клеток пульсирующих тканей, состо щее из держател , соединенного с микроманипул тором , на конце, которого ус тановлена платинова .петл , и микроэлектрода , припа нного к петле легкоплавким материалом. Микроэлект род соединен с амортизационной пет лей, компенсирующей вес микроэлектр да. После нахождени желаемого нейрона материал расплавл етс током пропускаемым 4ерез платиновую прово локу и микроэлектрод, наход щийс вблизи нейрона и поддерживаемый амортизационной .петлей tl.. К недостаткам конструкции относ тс невозможность многократного поиска нейронов и отсутствие -уравновешенных сил вне вертикальног направлени . Известно устройство дл регистрации электрической активности клет пульсирующих тканей, содержащее микроэлектрод с держателем, приспособ ление дл удержани микроэлектрода возле клетки, кронштейн дл подсоединени последнего к микроманипул тору С2. . Конструкци допускает многократный поиск нейронов, но ее недостатком вл етс уравновешивание веса микроэлектрода лишь в вертикальном направлении, что затрудн ет регистрацию электрической активности нейрона при пульсации мозга в других направлени х. Цель изобретени - повышение эффективности исследовани за счет жесткого удержани микроэлектрода возле или внутри клетки ткани. Поставленна цель достигаетс тем, что в устройстве дл регистрации электрической активности клеток пульсирующих тканей,содержащем микроэлектрод с держателем, приспог собление дл удержани микроэлектрода возле клетки, кронштейн дл подсоединени последнего к микроманипул тору , приспособление дл .удержани микроэлектрода возле клетки содержит цилиндрический сосуд дл жидкости, жестко св занный с кронштейном, охватывающий сосуд пр моугольную раму, к верхней перекладине которой подсоединен поплавок , а к нижней - держатель с микроэлектродом . На чертеже изображено предлагаемое устройство дл регистрации электрической активности клеток пульсирующих тканей, общий вид. Устройство состоит из цилиндрического сосуда 1 дл жидкости плавающей проволочной рамки 2 (диаметр 0,3 мм),.микроэлектрода 3 и поплавка 4. К микроманипул тору (не показан) сосуд 1 прикреплен с помощью крон.штейна 5. Верхн часть рамки 2 .имеет вертикально идущий вниз отрезок проволоки б из нержавеющей стали, скрепленный с поплавком 4,. выполненным из пробки. К краю сосуда 1 прикреплена проволока скольцом 7, помещенным в центре сосуда 1. Проволока с кольцом 7 служит- дл фиксации центрального расположени поплавка 4. На нижней части рамки 2 посредине укреплен держатель 8, сквозь который без электрического контакта с рамкой проходит хлорированна серебр на проволока 9 диаметром 0,5 мм, выступающа на 2 мм из нижнего конца резиновой трубки 8, а сверху на 4 мм. Микроэлёктрод 3 надеваетс на серебр ную проволоку 9, нижний конец которой оказываетс в растворе электролита, заполн ющего микроэлектрод 3. Серебр на проволока 9в свою очередь тонкой проволокой 10диаметром 50 мкм соедин етс с микроконтактом 11, закрепленным на стенке сосуда 1. От последнего гибкий проводник 12 идет на истоковый повторитель. Объем поплавка 4 выбираетс таким, чтобы система, состо ща из рамки 2 с микроэлектродом 3, сохран ла наименьшую положительную плавучесть. Дл точного отслеживани системой движений мозга вес ее должен быть минимален, в св зи с чем следует использовать микроэлектроды с длиной широкой части не более . 10 мм. Устройство работает следующим образом . После присоединени конкретного микроэлектрода 3 добиваемс минимальной плавучести системы, приклеива кусочки пластилина к держателю 8, затем в сосуд 1 заливаем воду, пока рассто ние между верхним концом серебр ной проволоки 9 и дном сосуда 1 не сократитс при визуальном контроле примерно до 0,1-0,2 мм. ВО врем введени микроэлектрода 3, при опускании всей несущей системы, в некоторый Момент времени кончик микроэлектрода 3 упираетс в поверхность мозга. Плавуча система выходитThe invention relates to experimental biology and medicine, and can be used to record the cellular activity of moving excitable tissues, such as the cerebral cortex, cardiac muscle, etc. Pulsations of the brain make it extremely difficult for the long-term recording of the active activity of individual neurons, especially cortical ones, so various designs of non-weight microelectrodes have been proposed. A device is known for recording the electrical activity of cells of pulsating tissues, consisting of a holder connected to a micromanipulator, at the end, which is mounted a platinum loop, and a microelectrode, soldered to a loop with a low-melting material. The microelectic genus is connected to a depreciation loop that compensates for the weight of the microelectronic. After finding the desired neuron, the material is melted by the current passed through the platinum wire and the microelectrode located near the neuron and supported by a damping loop tl .. The design drawbacks include the inability to repeatedly search for neurons and the absence of balanced forces outside the vertical direction. A device for recording the electrical activity of pulsating tissue cells, containing a microelectrode with a holder, a device for holding the microelectrode near the cell, a bracket for connecting the latter to the C2 micromanipulator, is known. . The design allows multiple searches for neurons, but its disadvantage is to balance the weight of the microelectrode only in the vertical direction, which makes it difficult to record the electrical activity of the neuron during brain pulsation in other directions. The purpose of the invention is to increase the research efficiency due to the hard retention of the microelectrode near or inside the tissue cell. The goal is achieved by the fact that, in a device for recording the electrical activity of cells of pulsating tissues containing a microelectrode with a holder, it is suitable for keeping the microelectrode near the cell, a bracket for connecting the latter to the micromanipulator, a device for holding the microelectrode near the cell contains a cylindrical vessel for liquid, rigidly connected to the bracket, enclosing the vessel, a rectangular frame, with a float attached to the upper crossbar and a holder with a mic roelectrode. The drawing shows the proposed device for recording the electrical activity of cells of pulsating tissues, a general view. The device consists of a cylindrical vessel 1 for a fluid floating wire frame 2 (diameter 0.3 mm), microelectrode 3 and a float 4. The vessel 1 is attached to a micromanipulator (not shown) with a crown bracket 5. The upper part of the frame 2 has vertically running down a piece of stainless steel wire b, held together with a float 4 ,. made of cork. The wire is attached to the edge of the vessel 1 with a skid 7 placed in the center of the vessel 1. The wire with the ring 7 serves to fix the central location of the float 4. At the bottom of the frame 2, the holder 8 is fixed in the middle, through which chlorineated silver passes without electrical contact with the frame 9 with a diameter of 0.5 mm, protruding 2 mm from the lower end of the rubber tube 8, and on top of 4 mm. The microelectrode 3 is put on silver wire 9, the lower end of which is in the electrolyte solution filling microelectrode 3. The silver on wire 9 is in turn connected to a microcontact 11 fixed to the wall of the vessel 1. From the latter, flexible conductor 12 goes to the source follower. The volume of the float 4 is chosen such that the system consisting of the frame 2 with the microelectrode 3 keeps the least positive buoyancy. In order for the system to monitor the movements of the brain accurately, its weight should be minimal, and therefore microelectrodes should be used with the length of the wide part no more. 10 mm. The device works as follows. After attaching a specific microelectrode 3, we achieve the minimum buoyancy of the system, gluing pieces of clay to holder 8, then pour water into vessel 1 until the distance between the upper end of silver wire 9 and the bottom of vessel 1 is reduced by visual inspection to approximately 0.1-0. 2 mm. At the time of insertion of the microelectrode 3, while lowering the entire carrier system, at some point in time, the tip of the microelectrode 3 abuts against the surface of the brain. Floating system coming out
ИЗ положени равновеси , но в силу ее невесомости микроэлектрод 3 прекращает ее продвижение, пока не упретс в дно сосуда 1 верхний конец серебр ной проволочки 9. С этого момента начинаетс истинное погружение .микроэлектрода вглубь моэГа и поиск требуемого нейрона. По обнаружении последнего микроманипул тор останавливаетс , а затем с помощью микроманипул тора поднима- 0 ем на 0,1-0,2 мм. В результате плавающа система возвращаетс вположение равновеси , а микрозлектрод 3 своим кончиком надежно фиксируетс за счет сил сцеплени между его кон- 15 чиком и тканью мозга вблизи нейрона . При необходимости можно прекратит ь регистрацию активности данногр нейрона, и произвести поиск следующего, причем поверхностно- 20 го, так и глубже лежгицего.From the equilibrium position, but due to its zero gravity, microelectrode 3 stops its advancement until the upper end of the silver wire 9 stops the top of the silver wire 9 from the bottom of the vessel. From this moment, a true immersion of the microelectrode into the depth of the microelectric and the search for the desired neuron begins. Upon detection of the latter, the micromanipulator stops, and then with the help of the micromanipulator, we raise it to 0.1-0.2 mm. As a result, the floating system returns to equilibrium, and microelectrode 3 with its tip is securely fixed due to adhesion forces between its tip and the brain tissue near the neuron. If necessary, you can stop recording the activity of a given neuron, and search for the next one, moreover, superficially and deeper than the legacy one.
Эффективность работы предлагаемой конструкции особенно ощущаетс при регистрации нейронов коры головного мозга, когда кончик микроэлектро- 25 да 3 погружаетс на глубину не более 3-4 NM. Можно визуально наблюдать перемещение микроэлектрода вместе с корой при ее движени х.The efficiency of the proposed design is especially felt when registering neurons of the cerebral cortex when the tip of microelectrode 25 is immersed to a depth of no more than 3-4 NM. It is possible to visually observe the movement of the microelectrode along with the crust during its movements.
Кроме того, предлагаема конструкци обеспечивает большее число . степеней свободы микроэлектрода. О чрезвычайно проста в изготовлении и может быть воспроизведена в любой физиологической лаборатории. По сравнению с известной предлагаема конструкци может использоватьс более длительное врем , так как некоторые элементы противопоставл емой конструкции имеют ограниченный срок годности; Например пружина, к которой крепитс микроэлектрод со в ременем тер ет свои упругие свойства и ее нужно замен ть.In addition, the proposed design provides a larger number. degrees of freedom of the microelectrode. About extremely easy to manufacture and can be played in any physiological laboratory. In comparison with the known, the proposed construction can be used for a longer time, since some elements of the opposing design have a limited shelf life; For example, the spring to which the microelectrode is attached with the belt loses its elastic properties and needs to be replaced.
Предлагаема конструкци опробо-;вана на кошках в острохроническом опыте, в котором животное на ходитс в бодрствующем состо нии, голова жестко крепитс в специальном держателе, а туловище и конечности могут осуществл ть ограниченные движени .The proposed design was tested on cats in an acutely chronic experience in which the animal is in a waking state, the head is rigidly fixed in a special holder, and the body and limbs can perform limited movements.