SI26055A - Nanomicelarna farmacevtska sinergijska sestava z antioksidacijskimi, protivnetnimi, imunomodulatornimi, protivirusnimi lastnostmi, namenjena za več terapevtskih aplikacij - Google Patents

Abstract

Izum se nanaša na nanomicelarno farmacevtsko sinergijsko sestavo, sestavljeno iz kurkumina (0,1-5 %), bosvelije (0,1-5 %), artemizinina (0,1-3 %), vitamina C (0,1-6 %) in neobvezno tudi kanabinoidov (0,1-5 %) in / ali nitroksidov (0,1-2 %). Sestava je lahko proizvedena v tekoči obliki (peroralno pršilo za sluznico, kapljice) ali farmacevtsko sprejemljivi trdni obliki, z antioksidacijskimi, protivnetnimi, imunskomodulirajočimi, protivirusnimi lastnostmi, lastnostmi, ki se bojujejo tudi proti raku, in je namenjena za več terapevtskih aplikacij.

Description

Nanomicelama farmacevtska sinergijska sestava z antioksidacijskimi, protivnetnimi, imunomodulatornimi, protivirusnimi lastnostmi, namenjena za več terapevtskih aplikacij

OPIS

TEHNIČNO PODROČJE

Izum se nanaša na nanomicelarno farmacevtsko sinergijsko sestavo, sestavljeno iz kurkumina (0,1-5 %), bosvelije (0,1-5 %), artemizinina (0,1-3 %), vitamina C (0,1-6 %) in neobvezno tudi kanabinoidov (0,1-5 %) in / ali nitroksidov (0,1-2 %).

Ta izum se nanaša na nanomicelarno farmacevtsko sinergijsko sestavo z antioksidacijskimi, protivnetnimi, immunomodulatomimi, protivirusnimi lastnostmi, proti rakavimi lastnostmi, in je namenjena za več terapevtskih aplikacij.

Ta izum se nanaša na micelamo farmacevtsko sinergijsko sestavo, proizvedeno v tekoči obliki (peroralno pršilo za sluznico, kapljice) ali v farmacevtsko sprejemljivi trdni obliki (prah).

OZADJE IZUMA

Rastline so že dolgo prepoznane po svojih terapevtskih lastnostih. Domorodne kulture po vsem svetu že stoletja uporabljajo tradicionalna zeliščna zdravila za zdravljenje mnogih bolezni. V nasprotju s tem pa je vzpon sodobne farmacevtske industrije v preteklem stoletju temeljil na izkoriščanju posameznih aktivnih spojin z natančnimi načini delovanja. Ta usmeritev v farmaciji je prinesla zelo učinkovita zdravila, ki se pogosto uporabljajo v zdravstvu, vključno s številnimi rastlinskimi naravnimi proizvodi in analogi, pridobljenimi iz teh izdelkov, vendar ni uspela zagotoviti učinkovitih zdravil za zapletene človeške bolezni z zapletenimi vzroki, kot so rak, diabetes, avtoimunske motnje in degenerativne bolezni. Medtem ko so rastline še naprej pomemben vir za kemične spojine, ki podpirajo odkrivanje zdravil, bogate tradicije zeliščnega zdravljenja, ki so bile v tisočletjih razvite s poskusi in napakami na ljudeh samih, vsebujejo neprecenljive biomedicinske informacije, ki čakajo na odkritje s sodobnimi znanstvenimi pristopi.

V mnogih tradicionalnih sistemih zeliščnega zdravljenja recept pogosto vsebuje več sestavin, pomešanih v določenem razmerju v eni sami formuli, pri čemer posamezni sestavini v izolaciji včasih primanjkuje terapevtskih aktivnosti, ki jih vidimo v celotni formulaciji, pojavu, znanem kot kombinacijski učinek. Predpostavlja se, da se lahko farmakološka učinkovitost poveča ob hkratnem delovanju več kemikalij, ki ciljajo na številna mesta, in / ali sinergijskem delovanju na enem mestu. Glede na omejen uspeh sodobnih farmacevtskih izdelkov na osnovi ene spojine pri zdravljenju zapletenih bolezni, kot so virusi gripe, rak, sladkorna bolezen tipa II, avtoimunske motnje in degenerativne bolezni, bo razjasnitev osnov mehanizma za kombinacijski učinek dobro uveljavljenih celostnih tradicionalnih zeliščnih receptov osvetlila zapleteno biologijo bolezni in pomagala pri oblikovanju novih zdravil.

Posodabljanje celovitih tradicionalnih zeliščnih receptov

Ker vsaka rastlinska vrsta v svojem metabolomu vsebuje veliko metabolitov, je uživanje cele rastline kot zdravila oblika kombinatornega zdravila. Poleg tega v mnogih tradicionalnih sistemih zeliščnih zdravil, zlasti tistih v azijskih državah, dobro uveljavljeni recepti pogosto vsebujejo več sestavin, pomešanih v določenem razmerju, kar kaže na to, da sinergijski učinek več aktivnih sestavin, kijih vsebujejo različni deli rastlin, temelji na učinkovitosti teh načinov zdravljenja. Čeprav je bil začetni razvoj teh celovitih tradicionalnih zeliščnih receptov znan že pred sodobno znanostjo, je postopek temeljil na večtisočletnih človeku prilagojenih kliničnih preskušanjih, ki temeljijo na fenotipu. Medtem so generacije zeliščarjev zabeležile tudi natančne opise simptomov bolezni in sistematične medicinske teorije, ki so terapevtske lastnosti različnih zdravilnih rastlin povezovale z njihovo uporabnostjo pri zdravljenju določenih simptomov. Toda večina temeljnih konceptov je v tradicionalnih medicinskih sistemih - na primer konceptov jin proti jang in mraz proti vročina v tradicionalni kitajski medicini - ločenih od sodobnih opisov normalnih in bolezenskih stanj v jeziku fiziologije in molekularne biologije. Pomanjkanje sodobnih znanstvenih in kliničnih dokazov o varnosti, učinkovitosti in načinu delovanja preprečuje, da bi bili ti celoviti recepti rastlinskega izvora sprejeti izven njihove kulture izvora. Tako je treba podrobnim fitokemičnim, farmakološkim in kliničnim študijam tradicionalnih celovitih zeliščnih receptov nujno določiti sodobne smernice za njihovo uporabo. Poleg tega bo razumevanje molekularne osnove sinergijskih učinkov teh celovitih zeliščnih zdravil verjetno prineslo nov vpogled v zapletene mehanizme bolezni in nove namige za prihodnji farmacevtski razvoj.

Večina naravnih rastlinskih spojin, kot so kurkuminoidi, bosvelične kisline, artemizinin, kanabinoidi, resveratrol, hipericin, bakozidi, cmo seme, ekstrakt ginsenga in mnogi drugi, imajo dokazano več terapevtskih koristi, na primer delujejo protivnetno, antioksidativno, pomagajo v boju proti debelosti, izboljšujejo spomin, delujejo antialergijsko, protimikrobno, pomagajo v boju proti raku in imajo še številne druge zdravilne lastnosti. Toda zaradi njihove slabe biološke uporabnosti in pomanjkanja stabilnosti v telesu je bilo s temi molekulami za preprečevanje in zdravljenje bolezni doseženega malo.

Kljub temu pa so številne zgoraj omenjene rastlinske molekule hidrofobne narave in zato niso topne v vodi. Kljub njihovim tradicionalno znanim prednostim je slaba biološka uporabnost teh molekul razlog, da teh učinkovitih naravnih zdravil na trgu primanjkuje. Po drugi strani pa biofarmacevtski izdelki niso tako učinkoviti, ker so nestabilni in biološko razgradljivi, preden dosežejo ciljno mesto. V zadnjih dveh desetletjih je bilo torej oblikovanih več strategij formulacij za izboljšanje topnosti zdravil, da bi povečali hitrost in obseg absorpcije zdravil iz gastro intestenalnega trakta - GIT [109; 76; 49; 93],

Poleg tega obstaja velika potreba po farmacevtski sestavi s sinergijskimi lastnostmi, primernimi za človeške bolnike, in sicer z močnejšimi učinki kot je le preprosta vsota učinkov posameznih komponent, in hkrati sinergijski s standardnim kliničnim zdravljenjem različnih bolezni.

Vnetje

Vnetje igra temeljno vlogo pri obrambi gostitelja in napredovanju imunsko pogojene bolezni. Vnetni odziv se sproži kot odziv na poškodbe (npr. rane, ishemija in tujki) in okužbo (npr. bakterijska ali virusna okužba) z več dogodki, vključno s kemičnimi mediatorji (npr. citokini in prostaglandini) in vnetnimi celicami (npr. levkociti). Zanj je značilen povečan pretok krvi v tkivo, kar povzroča pireksijo, eritem, zatrdline in bolečino.

Citokini

Citokini, zlasti IL-Ιβ, IL-6, IL-8 in TNF-α, igrajo pomembno vlogo pri vnetnem procesu. TNF-α, pleiotropni citokin, proizvajajo predvsem makrofagi, lahko pa ga proizvajajo tudi druge vrste celic. TNF-α izpostavi koristne in tudi patološke aktivnosti. Poleg tega ima lastnosti, ki spodbujajo in zavirajo rast ter samoregulativne učinke. Koristne funkcije TNFα vključujejo vzdrževanje homeostaze z uravnavanjem telesnega cirkadianega ritma, izboljševanje imunskega odziva na bakterijske, virusne, glivične in parazitske okužbe, nadomeščanje ali preoblikovanje poškodovanega tkiva s spodbujanjem rasti fibroblastov in, kot že ime pove, uničevanje nekaterih tumorjev.

Čeprav TNF-α igra pomembno vlogo pri prirojenih in pridobljenih imunskih odzivih, neustrezna tvorba TNF-α lahko povzroči patološke spremembe, ki povzročijo kronično vnetje in poškodbe tkiva. Izkazalo seje, da ima TNF-α ključno vlogo pri patogenezi mnogih kroničnih vnetnih bolezni, kot je vnetna črevesna bolezen, revmatoidni artritis, juvenilni revmatoidni artritis, psoriatični artritis, osteoartritis, neodziven revmatoidni artritis, kronični nerevmatoidni artritis, osteoporoza / resorpcija kosti, koronama srčna bolezen, vaskulitis, ulcerozni kolitis, luskavica, sindrom dihalne stiske pri odraslih, diabetes tipa preobčutljivostne motnje in Alzheimerjeva bolezen.

Interlevkin-1 (IL-1) je pomemben del prirojenega imunskega sistema, ki uravnava funkcije prilagodljivega imunskega sistema. Ravnotežje med IL-1 in antagonistom receptorjev IL-1 (IL-1 ra) v lokalnih tkivih vpliva na možen razvoj vnetne bolezni in posledične strukturne poškodbe. V prisotnosti prevelike količine IL-1 se lahko razvijejo vnetne in avtoimunske motnje v sklepih, pljučih, prebavilih, centralnem živčnem sistemu (CNS) ali krvnih žilah. Dva klinično pomembna citokina, ki se sproščata v sinoviju, sta IL-Ιβ in TNF-α. TNF-a lahko poveča svoj učinek in olajša izražanje drugih genov, vpletenih v RA, vključno z ILΙβ, IL-6, IL-8, ciklooksigenazo-2 (C0X-2), inducibilno sintetazo dušikovega oksida (iNOS), medcelično molekulo adhezije 1 (ICAM-1), molekulo adhezije vaskulamih celic 1 (VC AM-1) in E-Selectin. Ta vrsta pozitivne regulativne zanke lahko okrepi in ohrani lokalne vnetne odzive. Zato neustrezna ali prekomerna ekspresija TNF-α vodi do usklajenega povečanja ekspresije mnogih genov, katerih produkti posredujejo vnetne in imunske odzive in tako povzročijo klinične manifestacije bolezni.

Vzpodbujanje in zadrževanje levkocitov je ključni dogodek v patogenezi vseh kroničnih vnetnih motenj, vključno z RA. Poleg tega je tudi adhezija krožnih levkocitov, zlasti monocitov, na vaskulami endotelij ključnega pomena pri razvoju ateroskleroze. Ta postopek je odvisen od interakcije med adhezijskimi molekulami, izraženimi na površini endotelijskih celic, kot so ICAM-1, VCAM-1 in E-Selectin, ter njihovimi sorodnimi ligandi na levkocitih. Zato so ICAM-1, VCAM-1 in E-Selectin odgovorni za rekrutiranje vnetnih celic, kot so nevtrofilci, eozinofili in limfociti T, iz obtoka na mesto vnetja. Ti adhezijski proteini so običajno na nizki ravni na površini endotelijskih celic, vendar jih močno inducirajo različni vnetni citokini, kot je TNF-a.

Drugi vnetni procesi, vnetna bolezen črevesja (KVČB) je skupina procesov, ki povzročajo vnetje črevesja. Vnetje traja dlje časa in se običajno ponavlja. Dve glavni vrsti bolezni KVČB sta Crohnova bolezen in ulcerozni kolitis.

Crohnova bolezen se pojavi, ko se sluznica in stena črevesja vnameta, kar povzroči razjede. Čeprav se Crohnova bolezen lahko pojavi v katerem koli delu prebavnega sistema, se pogosto pojavi v spodnjem delu tankega črevesa, kjer se združi z debelim črevesom.

Ulcerozni kolitis je kronična vnetna bolezen neznane etiologije, ki prizadene debelo črevo. Potek bolezni je lahko neprekinjen ali recidiven, blag ali hud. Najzgodnejša lezija je vnetna infiltracija z nastankom abscesov na dnu Lieberktihnovih kript (črevesnih kript). Koalescenca teh napihnjenih in pretrganih kript povzroča ločitev zgornje sluznice od njene oskrbe s krvjo, kar vodi do razjed. Znaki in simptomi bolezni vključujejo krče, bolečine v spodnjem delu trebuha, rektalne krvavitve in pogoste, tekoče iztrebke, sestavljene predvsem iz krvi, gnoja in sluzi z redkimi fekalnimi delci. Pri akutnem, hudem ali kroničnem nenehnem ulceroznem kolitisu bo morda potrebna popolna kolektomija.

Še ena vnetna bolezen je ateroskleroza. Ateroskleroza je bolezen, ki prizadene arterijske krvne žile. Gre za kronični vnetni odziv v stenah arterij, predvsem zaradi odlaganja lipoproteinov (plazemskih proteinov, ki prenašajo holesterol in trigliceride). Običajno se imenuje otrdevanje ali oblaganje arterij. Povzroča ga tvorba več plakov v arterijah, kar povzroči vnetje arterij.

Najpogostejša terapija za zdravljenje vnetnih procesov vključuje uporabo nesteroidnih protivnetnih zdravil (NSAID), npr. naproksena, diklofenaka, ibuprofena za lajšanje simptomov, kot je bolečina. Kljub široki uporabi nesteroidnih protivnetnih zdravil pa mnogi posamezniki ne prenašajo dobro potrebnih odmerkov za zdravljenje bolezni dlje časa, saj je znano, da nesteroidna protivnetna zdravila povzročajo erozije želodca. Poleg tega nesteroidna protivnetna zdravila le zdravijo simptome bolezni in ne odpravljajo vzroka.

Virusi

Huda bolezen akutnega respiratornega sindroma, povezana s koronavirusom (COVID-19), je sindrom virusne replikacije skupaj z vnetnim odzivom gostitelja. Citokinska nevihta in virusno izogibanje celičnih imunskih odzivov imata lahko enako pomembno vlogo pri patogenezi, klinični manifestaciji in rezultatih COVID-19. Sistemski protivnetni citokini in biomarkerji so povišani, ko bolezen napreduje v višje faze, in so pomenijo slabše možnosti za preživetje.

SARS-CoV-2 aktivira prirojeni imunski sistem in povzroči sproščanje velikega števila citokinov, vključno z IL-6, kar lahko poveča prepustnost žil in povzroči odtekanje tekočine in krvnih celic v alveole ter posledično simptome, kot so dispneja in dihalna odpoved [33], Višja smrtnost je povezana z rezultatom poslabšanja ARDS (sindrom akutne respiratorne stiske) in poškodbami tkiva, ki lahko povzročijo odpoved organov in / ali smrt.

Patogeneza COVID-19 in strategija za uporabo užitnih rastlin

Za boljši vpogled v to, kako lahko nutracevtiki ali fitomolekule učinkovito delujejo proti novim koronavirusom, je nujno razumeti strukturne značilnosti ter z njimi povezane cilje in receptorje. Poleg tega je lahko razumevanje mehanizma delovanja običajnih protivirusnih zdravil in odgovornih ciljev za razvoj zdravil koristno za oblikovanje režima zdravljenja za

COVID-19 iz naravnih virov. SARS-CoV-2 je tako kot drugi HCoV pozitivno občutljivi enoverižni virus RNK z dvema skupinama beljakovin, ki tvorita značilne označevalce: strukturni protein, kot so špike (S), nukleokapsid (N), matrix (M), ovojnica (E); in nestruktume beljakovine, kot so nspl2-RNA-odvisna RNA-polimeraza (RdRp), nsp3papain-podobne proteinaze, nsp5-3C-podobna glavna proteaza in nsP13 SARS-CoV helikaza [33, 6], Primarno nsP13 helikaza, 3CL proteaza, nspl2-RNA, ki je odvisna od RNA-polimeraze (RdRp), postanejo glavni cilj za razvoj zdravil. Poleg teh beljakovin lahko cilj predstavlja tudi vezava in intemalizacija virusnega špike glikoproteina (S) znotraj receptorjev ACE-2 gostiteljskih celic, da se prepreči vstop virusa v novejše gostiteljske celice [9], SARS-CoV-2 prepozna človeški angiotenzin-pretvorbeni encim-2 (ACE-2), s čimer dokazuje, da je ta bistven za vstop v gostiteljske celice z invazijo alveolamih epitelijskih celic, poznejšo replikacijo virusa in primarno okužbo pljučnih celic gostitelja, saj je ACE-2 zelo izražen v srcu, pljučih, črevesju, ledvicah in krvnih žilah [128], Izraženost ACE-2 je pri bolnikih s sladkorno boleznijo in hipertenzijo bistveno povečana, povezovalni člen s tem povezane komorbidnosti pa je receptor za angiotenzin-pretvorbeni encim-2 (ACE2), ker je ta receptor mesto razmnoževanja virusa, zato je bila zasnovana strategija za razvoj novejših protivirusnih zdravil, kije za primemo tarčo opredelila ravno ACE-2 [69], Različne rastline proizvajajo molekule fito, ki jih je mogoče uporabiti za ciljanje teh virusnih tarč, kar je bilo že storjeno v primem drugih virusnih bolezni, kot so SARS, HIV, HCV itd. [108, 49, 94],

Na molekulami ravni se vims SARS-CoV-2 veže na angiotenzin-pretvorbeni encim-2 (ACE-2), kije prisoten v pljučih človeškega gostitelja. Vezava virusa na gostiteljske celice preko svojega trimemega špike glikoproteina naredi ta protein za ključno tarčo potencialnih terapij in diagnostike. Poročali so, da v SARS-CoV-2 podenota S2 v vsakem monomeru špike vsebuje fuzijski peptid, transmembransko domeno in citoplazemsko domeno, kije zelo ohranjena in bi lahko bila možna tarča za protivirusne (anti-S2) spojine [16]. Pojavi se razmnoževanje virusov, ki povzročijo celični odziv. Pojavi se infiltracija velikega števila vnetnih celic, ki obsegajo prirojene imunske celice in prilagodljive imunske celice [135, 123]. Nevtrofilci so večinoma prirojene imunske celice, ki povzročajo poškodbe pljuč [124], Po drugi strani pa so prilagodljive imunske celice predvsem T-celice, tj. citotoksične CD8 + T celice, ki ne samo, da uničijo vims, ampak še dodatno poškodujejo pljuča [114]. To pospešuje napredovanje sistemskega vnetnega odziva, kar vodi do obsežnega povečanja različnih citokinov, kot so TNFa, IL1, IL6, IL10 itd. To imenujemo val citokinov. Zaradi povečanja različnih citokinov pride do vnetja in apoptoze celic tipa 1 in tipa 2 v alveolah. To prekine funkcije prenosa kisika, kar povzroči celično smrt v pljučnih alveolah in povzroči akutno dihalno stisko ali sindrom (ARDS) [17]. Slika 2 prikazuje patogenezo bolezni, ki vodi do citokinske nevihte in disfunkcije več organov ter končno do smrti.

Med predlaganimi mehanizmi pljučne poškodbe, ki jo povzroča SARS-CoV-2, obstaja citokinska nevihta, ki jo sproži neuravnovešen odziv T-pomožnih celic tipa 1 in tipa 2, kar povzroči nenadzorovan in vsesplošen vnetni odziv [96], Povišani vnetni citokini (Interferon γ, interlevkin (IL-) 1 β, IL-6, IL-12) in kemokini (CXCL10 in CCL2), ki krožijo po telesu, so povezani z vnetjem pljuč in patogenezo ARDS zaradi vnetne poškodbe alveolamekapilame membrane, kar ima za posledico povečano prepustnost pljuč in izločanje tekočine pljučnega edema, bogatega z beljakovinami, v zračne prostore, kar ima za posledico respiratorno insuficienco in glavne vzroke zapletov, ki vodijo do odpovedi več organov [138]. Protivirusne rastline z dodanimi protivnetnimi lastnostmi, ki ščitijo pljuča pred okužbami, je mogoče raziskati za namene sinergijske terapije.

Šibki imunski mehanizmi, povezani s porastom citokinov, so eden glavnih vzrokov, ki na koncu vodijo do zmanjšane celične oksigenacije na ravni alveolov, ki naj bi bil glavni vzrok smrti pri COVD-19. Poleg te dihalne okvare se pojavijo tudi trombocitni dogodki, ki vključujejo odprte bralne okvire (ORF), zlasti beljakovine ORF8, ki po vezavi na SARSC0V2 vodijo do disociacije železa iz 1-beta verige hemoglobina, ki se veže na površinski glikoprotein porfirin in s tem povzroči okvaro notranjega dihanja [62],

SARS-CoV2 ima v povprečju daljše inkubacijsko obdobje 2-14 dni v človeškem telesu, verjetno zaradi lastnosti imunskega izogibanja, ki učinkovito uide imunskemu zaznavanju gostitelja v zgodnji fazi okužbe [91], Zeliščni pripravki, ki delujejo imunomodulatomo, lahko služijo kot profilaktično zdravljenje, če so dodani v vsakodnevno prehrano, za preprečevanje okužb v tem intervalu kritičnega širjenja na ravni skupnosti in pomagajo obvladovati bolezen v skupnosti ter pomagajo pri hitrejšem okrevanju po okužbi. Ob upoštevanju zgornjih strategij za zdravljenje, obvladovanje in preprečevanje COVID-19 lahko iskanje potencialnih rastlin z zgoraj navedenimi lastnostmi pomaga pri razvoju naravnih rastlinskih protivirusnih zdravil proti pandemični bolezni.

Obstaja torej potreba po razvoju izboljšanih in naravnih nadomestnih zdravil s sinergijskimi lastnostmi z zmanjšanimi stranskimi učinki za preprečevanje in zdravljenje vnetnih obolenj, kijih povzročajo povečani IL-1 in TNF-a. Zelišča so po vsem svetu znana in se uporabljajo za zdravljenje številnih obolenj. Obstajajo dokazi, da imajo proizvodi, pridobljeni iz rastlin, potencialne farmakološke in večkratne terapevtske učinke pri zdravljenju številnih bolezni in imajo ponavadi manj škodljive stranske učinke kot sintetična zdravila.

PREGLED PODOBNIH PATENTOV

Številni poskusi uporabe zgoraj omenjenih naravnih rastlin in sintetičnih sestavin ločeno ali v sinergijski kombinaciji so predstavljeni v patentni literaturi, in sicer:

V ameriški patentni publikaciji US7776911B2 so avtor Govindarajan Padmanaban in sodelavci, prejemnik: Indijski inštitut za znanost (Bangalore), predstavili antimalarično zdravilo, ki vsebuje sinergijsko kombinacijo kurkumina in artemizinina.

V korejskem patentu KR 1020090099238A, 2009 so predstavljena protivirusna sredstva, pridobljena iz Curcuma longa, ki preprečujejo ptičjo gripo, prašičjo gripo in novo gripo.

V WO2014197129A2 so avtor Ghorbani in sodelavci (ZDA) predstavili sestavo in način zdravljenja bolečine. Sestava vključuje ekstrakt kurkume, ekstrakt bosvelije, ekstrakt ingverja, ekstrakt svete bazilike, ekstrakt rožmarina, ekstrakt bele vrbe in alfo-lipolno kislino, vsakega v zelo majhnih količinah.

V US20030096027A1 so Babish in sodelavci, prejemnik: Metaproteomics LLC, ZDA, predstavili kurkuminoidno sestavo, ki kaže sinergijsko zaviranje ciklooksigenaze-2 (COX2), zmanjšanje vnetja v želodcu in ledvicah.

V indijski patentni prijavi IN202021022497, ki pripada Rukhmini Enterprises, je predstavljena formulacija, ki združuje posebno obliko standardiziranega kurkumina, vitamina K2-7 (PureK2TM), vitamina C in L-selenometionina (RightSelTM) kot profilakso za izbruhe COVID-19. Največja prednost te formulacije so njene dvosmerne lastnosti. Medtem ko krepi imunost, virus napada tudi tako, da blokira replikacijski protein. Prisotnost vitamina C in L-selenometionina (RightSelTM) pomaga pri krepitvi imunosti, medtem ko kurkumin in vitamin K2-7 (PureK2TM) delujeta protivirusno.

Sanjeeb Kumar Sahoo je v W02011101859A1 (2011) opisal v vodi topen sistem nanodelcev, napolnjen s kurkuminom, za zdravljenje raka, sestavljen iz gliceril monooleata (GSO), polivinil alkohola (PVA) in pluronika F-127, z enakomerno velikostjo delcev, ki je manjša od 200 nm, ki ima visok površinski naboj in visok zeta potencial, približno - 32 mV, kar povečuje topnost, stabilnost in biološko uporabnost ujetega kurkumina, ki se uporablja za zdravljenje raka. Sistem nanodelcev, napolnjenih s kurkuminom, se pripravi tako, da se kurkumin vključi v tekočo fazo GSO, nato pa se ta zmes emulgira s PVA in pluronsko raztopino F-127. Nato je bila končna emulzija liofilizirana z liofilizatorjem, da so dobili liofiliziran prah. Raziskali so, da kurkumin kaže svojo proliferacijsko aktivnost proti rakavim celicam z indukcijo apoptoze.

Ranchodbhai Patel, EP2587940A1, je predstavil sestave nanodelcev hidrofobnih fenolnih spojin, kot so kurkuminoidi ali izoflavoni in polimetoksilirani flavoni v kombinaciji s hidrofobnimi polimeri, kot so zein, gliadin, hordein, sekalin ali kombinacije teh polimerov. Ta sestava je pokazala večjo vodno disperznost, stabilnost proti kopičenju in sedimentaciji ter večjo biološko uporabnost. To je posledica nanonizacije hidrofobnih fenolnih spojin in hidrofobnih prolaminov, ki vsebujejo polimer. Uporabljajo se kot antioksidanti, protivnetna sredstva in sredstva proti raku.

Ketan Desai je v US20100179103A1 predstavil kombinacijo kurkumin ciklodekstrina v obliki mikroemulzije, trdnih lipidnih nanodelcev, trdnega praška, tekočine in mikrokapsuliranega olja ali gela, ki se uporablja za preprečevanje in zdravljenje različnih bolezni kot so Alzheimerjeva bolezen, astma, revmatoidni artritis, onkološke bolezni itd., ker ima kurkumin protivnetne in antiangiogene lastnosti. Ker se kurkumin zelo slabo absorbira in ima zelo nizko biološko uporabnost, je patent opisal metodo za povečanje oddajanja kurkumina s kompleksiranjem s ciklodekstrinom, ki lahko poveča biološko uporabnost.

Thomas M. DiMauro je v US20100292512A1 predstavil metilirane hibridne molekule kurkumin-metoksi stilbene, uporabljene predvsem pri zdravljenju raka. Kurkumin ne prodre zlahka skozi človeški prebavni trakt in je podvržen črevesni presnovi in zavrnitvi, v plazmo pa vstopi manj kot 1 % peroralnega kurkumina. Majhna količina kurkumina, ki pride v krvni obtok, se hitro presnovi v ledvicah in jetrih. Čeprav je kurkumin zelo lipofilen (in zlahka prehaja krvno-možgansko pregrado), so v serumu in možganskem tkivu zaznane le zelo majhne količine peroralno danega kurkumina. Poročali so, da visoki peroralni odmerki kurkumina povzročajo težave, kot so izpuščaj in driska ter glavoboli, ki jih verjetno povzročajo presnovki kurkumina. Opisujejo intranazalno uporabo formulacije z dovajanjem učinkovite količine kurkumina v vohalno sluznico čez kribriformno ploščo in v možgane za zdravljenje nevrodegenerativnih bolezni, kot je Alzheimerjeva bolezen.

AU2015220913B2 avtorja Bombardelli in sodelavcev, Indena S. p. A (IT) je izum, ki se nanaša na sestavo z analgetičnim in protivnetnim delovanjem. Sestava z analgetičnim in protivnetnim delovanjem, ki jo sestavljajo kurkumin v kompleksu s fosfolipidi in izvleček iz korenin in korenike ozkolistnega ameriškega slamnika.

V US6264995B1 so Newmark in sodelavci (ZDA) opisali izum, ki predstavlja zeliščno sestavo, ki zmanjšuje vnetje v kosteh in sklepih z zaviranjem encima ciklooksigenaze-2, pripravljenega iz svete bazilike, kurkume, ingverja, zelenega čaja, rožmarina.

V W02012168450A1 so avtor Thimmermann in sodelavci za prejemnike Queen Mary in Westfield College (GB) predstavili izum, ki je namenjen za zdravljenje ran ali krvavitev zaradi poškodb organov in s tem povezanih motenj (zlasti možganov, opeklin in poškodb možganov) z uporabo snovi proti malariji, ki se imenuje artemizinin, in njegovih derivatov. Pričujoči izum se nanaša tudi na zdravljenje miokardnega infarkta in koronarne srčne bolezni (in z njo povezanih motenj) z uporabo snovi proti malariji, ki se imenuje artemizinin, in njegovih derivatov. Pričujoči izum se nanaša tudi na uporabo artemizinina in njegovih derivatov pri operaciji obvoda koronarne arterije, presaditvi srca in boleznih, povezanih z ishemij o/reperfuzij o.

V US8232417B1 avtorja Gupta in sodelavcev, prejemnik je Bioderm Research, Scotsdale, AZ (ZDA) je predstavljen izum, ki se nanaša na nekatere derivate artemizinina, ki so razvrščeni kot seskviterpeni z endoperoksidno skupino. Spojine v tem izumu imajo široko spektralno antibakterijsko in protiglivično biološko aktivnost, kije primerna za topikalno ali oralno uporabo za zdravljenje okužb in kožnih bolezni pri sesalcih, vključno z aknami, rozaceo, lokalnimi ranami, okužbami, prhljajem.

Korejski patent KR101682512B1 je razkril sinergijsko kombinacijo 3-O-acetil-l 1-ketobeta-bosvelične kisline (AKBA), selektivno obogatenega izvlečka bosvelije in ekstrakta nekislinske smole bosvelije (BNRE). Prehranski, farmacevtski in prehranski dodatki. Sestavo (-e) lahko uporabimo za preprečevanje, nadzor poteka in zdravljenje bolezni, povezanih z vnetjem, vključno z vnetjem in astmo, artritisom, endotelijsko disfunkcijo in podobnim. Izum vključuje tudi lajšanje vnetnih biomarkerskih proteinov ali molekul, katerih izraz / tvorba se spremeni v procesu vnetne bolezni.

V US9381221B2 avtorja Velez-Rivera in sodelavcev (MX) je predstavljena fitosestava, ki vsebuje skupaj z drugimi naravnimi rastlinami izvleček bosvelije za zdravljenje bolečin, povezanih z boleznimi sklepov. Med najpogostejšimi boleznimi sklepov najdemo revmatoidni artritis, osteoartritis, fibromialgijo in protinski artritis.

V US2009/0209581 Al avtorja Habasha in sodelavcev je opisana sestava in metoda, ki sta uporabni pri zdravljenju ali preprečevanju imunoloških bolezni, kot je avtoimunska bolezen. Kot se uporablja v tem patentu, je imunološka bolezen tista, ki vključuje ustrezne ali pretirane imunske reakcije gostitelja. V prednostni izvedbi je sredstvo, ki se uporablja za spreminjanje vzorca izražanja gena, povezanega s temi boleznimi, nitroksidni antioksidant. Tempol je stabilen nitroksidni radikal, za katerega je značilna kemična formula 4-hidroksi2.2.6,6-tetrametilpiperidin-l-oksil, ki ima antioksidativne lastnosti. Sedanji prejemniki so odkrili, da ima tempol poleg tega tudi novo lastnost spreminjanja izražanja genov, ki kodirajo proteine, povezane z imunološkimi boleznimi, kot je avtoimunska bolezen.

V US2010/0196456A1, US 2010/0129453A1 je Strasser (MiVital, Švica) uporabil arabsko gumo ali / in kolofonijo kot naravna emulgatorja za emulgiranje slabo topnih zdravil, vključno s Q10, kurkuminom in drugimi. A pomanjkanje stabilne kakovosti naravnih pomožnih snovi je očitna. Te emulzije so lahko pomembne samo kot prehransko dopolnilo.

V US2015/0072012A1 so Sripathy in sodelavci in v US2011/0229532A1 so Nair in sodelavci (Laila Pharmaceuticals Pvt, IN) trdili, da se nanoformulacije hidrofobnih spojin lahko uporabljajo kot ajurvedske / dietetične sestave farmacevtskih / nutracevtskih zdravil. Toda te emulzije se nanašajo na mikroemulzije ločenih solubiliziranih srednjih vrednosti 200 nm in s precej bolj razširjenimi 80 % emulgatorji. Poleg tega tudi trdijo, da sproščanje API, ki traja več kot 24 ur, ne vpliva na spontano samoemulgiranje po metodi tega izuma.

V seriji patentov US2008/022.0102A1, US 2016/0128939 A9, US2004/0192768A1, US 20200129452 avtorja Behnama, Dariusha, prejemnik je Aquanova AG (Darmstadt, DE), je trdil, da so različne topnosti ločenih aktivnih kemikalij večinoma na precej visokem odstotku neionskih površinsko aktivnih snovi, zlasti polisorbat 20/polisorbat 80 in pogosto etanolna topila in nimajo nič skupnega s SNEDDS.

V US2018/0071210A1 in PCT/GB20 19/050009 so avtor Wilkhu in sodelavci, prejemnik je družba GW Research Limited, Cambridge (VB), predstavili kanabinoide brez olj, ki so predvsem v trdni obliki in obliki gela z pomožnimi snovmi in s poloksamerjem kot emulgatorjem. Topilo je mogoče izbrati iz skupine, ki jo sestavljajo diacetin, propilen glikol, triacetin, monoacetin, propilenglikol diacetat, trietil citrat in njihove mešanice. Peroralna farmacevtska formulacija tipa IV (OPF), ki vsebuje vsaj en kanabinoid, vsaj eno topilo in vsaj en poloksamer, se lahko rehidrira z dodajanjem 20 ml vode za injekcije pri sobni temperaturi ali z dodajanjem 20 ml vode za injekcije pri 37 °C. Formulacija je lahko v bistvu brez vode, brez alkohola in / ali brez olja, vendar ta izum ne predstavlja nobene spontane reakcije samo-nano-emulgiranja zgoraj omenjenih formulacij.

V US205/0232952A1, W02003074027A2 avtorja Lamberta in sodelavcev, prejemnik je Novagali Pharma SA (FR), je predstavil sistem za dovajanje zdravil, ki vsebuje eno ali več terapevtskih sredstev, ki so slabo topna v vodi ali so v vodi netopna, vitamin E, eno sotopilo, izbrano iz propilen glikola in etanola, eno ali več žolčnih soli, TPGS in še eno nadaljnjo površinsko aktivno snov, pridobljeno iz hidrogeniranega ricinusovega olja tiloksapol in polioksil. Na žalost, ko je bila koncentracija zdravil višja od 1,5 % m/m, se je zdravilo iz nastalih mikroemulzij zlahka oborilo. Čas cepljenja je bil približno 2 uri, saj je bila koncentracija povišana na 2,5 % m/m.

V WO2012/033478 so Murty in sodelavci, prejemniki so Murty Pharmaceuticals, Inc., 518 Codell Drive, Lexington, KY 40509 (ZDA) uporabili pripravke kanabinoidov SEDDS na osnovi tipa I, tipa II in tipa III.

Najprimernejši micelami nano-samoemulgimi sistem (SNEDDS), primeren za sestavo v pričujočem izumu, je opisan v prijavi SIPO na Uradu RS za intelektualno lastnino (2021) P202100024 in prijavi patenta na uradu za patente v Rusiji (2021) W21013724/2021106347 avtorja Victorja Boldueva in sodelavcev (SI). Trenutno številni slabo topni naravni proizvodi na trgu trdijo, da imajo visoko biološko uporabnost, kije pridobljena z uporabo fosfolipidov ali olj rastlinskega izvora itd. Vendar noben od prejšnjih odkritij ne raziskuje samonanoemulgime formulacije (SNEDDS), ki vsebuje sinergijske lastnosti kurkumina, bosvelije, artemizinina, vitamina C in po izbiri kanabinoidov in / ali nitroksidov, da bi z njimi dosegli spontano samoemulgiranje API brez oljne faze.

NAMEN IZUMA

Namen tega izuma je torej razviti izboljšano in naravno alternativno zdravilo s sinergijskimi lastnostmi z zmanjšanimi stranskimi učinki za preprečevanje in zdravljenje vnetnih motenj, povzročenih s povečanjem IL-1 in TNF-α, s citokinsko nevihto in zagotoviti antioksidativne, protivnetne, imunomodulatome, protivirusne lastnosti in proti rakave lastnosti,, ki so lahko zasnovane za več terapevtskih aplikacij.

Predstavljeni izum opisuje novo zeliščno sestavo, ki vključuje sinergijske lastnosti kurkumina, bosvelije, artemizinina, vitamina C in neobvezno kanabinoide in / ali nitrokside. Sestava se lahko uporablja za zdravljenje različnih vnetnih težav z minimalnimi stranskimi učinki. Poleg tega je izumljena sestava na nanomicelamem nosilcu in ima samo-emulgime lastnosti.

Kolikor vemo iz dostopnih virov ni nobenega poročila o podobnih nano samonanoemulgimih farmacevtskih sinergijskih sestavah iz kurkumina (0,1-5 %), bosvelije (0,1— 5 %), artemizinina (0,1-3 %), vitamina C (0,1-6 %) in neobvezno kanabinoidov (0,1-5 %) in nitroksida (0,1-2 %). Sestava je lahko na tekočih ali na trdnih farmacevtsko sprejemljivih nosilcih, lahko pa se uporablja tudi v kombinaciji z vsaj enim drugim protivnetnim sredstvom.

KRATEK OPIS SLIK

SLIKA 1 Diagram poteka za sintezo CimetrA™

SLIKA 2 Teža - moški

SLIKA 3 Teža - ženska

SLIKA 4 Teža organov — moški

SLIKA 5 Teža organov - ženska

SLIKA 6 Skupina 4M. Žival #42, možgani - hipokampus. Brez patoloških in citotoksičnih sprememb.

SLIKA 7 Skupina 4M. Žival #42, srce. Brez patoloških in citotoksičnih sprememb.

SLIKA 8 Skupina 4M. Žival #42, pljuča. Brez patoloških in citotoksičnih sprememb.

SLIKA 9 Skupina 4M. Žival #42, jetra. Brez patoloških in citotoksičnih sprememb.

SLIKA 10 Skupina 4M. Žival #42, ledvice. Brez patoloških in citotoksičnih sprememb.

SLIKA 11 Skupina 4M. Žival #42, vranica. Brez patoloških in citotoksičnih sprememb. Bela pulpa je videti aktivna.

SLIKA 12 Skupina 4M. Žival #42, hrbtenjača, vratni segment. Brez patoloških in citotoksičnih sprememb. Bela snov kaže vakuolizacijo zaradi tehničnega artefakta.

SLIKA 13 Skupina 4M. Žival #42, išijatični živec. Brez patoloških in citotoksičnih sprememb.

SLIKA 14 Skupina 4M. Žival #42, jezik. Brez patoloških in citotoksičnih sprememb. Puščice označujejo nekaj mastocitov (rezidenčnih celic) v progasti mišici.

SLIKA 15 Sposobnost preživetja PBMC

SLIKA 16 Koncentracija TNF-a

SLIKA 17 Koncentracija IL-6

SLIKA 18 Koncentracija IL-1 β

SLIKA 19 IL -1 Ra koncentracija

SLIKA 20 SLIKA 21 IL -IRa koncentracija

SLIKA 21 Dnevna sprememba NEWS-lestvice v obeh obravnavanih skupinah

POVZETEK IZUMA

Izum se nanaša na nanomicelarno farmacevtsko sinergijsko sestavo, sestavljeno iz kurkumina (0,1-5 %), bosvelije (0,1-5 %), artemizinina (0,1-3 %), vitamina C (0,1-6 %) in neobvezno kanabinoidov (0,1-5 %) in / ali nitroksidov (0,1-2 %), pri čemer so navedeni odstotki masni odstotki.

Ta izum se nanaša na nanomicelamo farmacevtsko sinergij sko sestavo z antioksidacijskimi, protivnetnimi, imunomodulatomimi, protivirusnimi, proti rakavimi lastnostmi in je namenjen za več terapevtskih aplikacij.

Ta izum se nanaša na micelamo farmacevtsko sinergij sko sestavo, proizvedeno v tekoči obliki (peroralno pršilo za sluznico, kapljice) ali farmacevtsko sprejemljivi trdni obliki (prah).

PODROBEN OPIS IZUMA

Razumeti je treba, da so podroben opis in konkretni primeri, ki prikazujejo izvedbene primere izuma, podani zgolj kot ponazoritev, saj bodo različne spremembe in modifikacije v duhu in obsegu izuma razumljive strokovnjakom za to področje. Strokovnjak lahko na podlagi tukaj opisanega opisa ta izum uporabi v največji možni meri. Naslednje konkretne izvedbene primere je treba razumeti kot zgolj ilustrativne in nikakor ne omejujoče za preostali del razkritja.

Če ni drugače določeno, imajo vsi tukaj uporabljeni tehnični in znanstveni izrazi enak pomen, kot ga običajno razume strokovnjak s področja, ki mu izum pripada.

Izraz vnetna motnja, kot ga uporabljamo tukaj, se nanaša na bolezen ali stanje, za katerega je značilno kronično vnetje, vključno z (vendar ne omejeno le na) revmatoidnim artritisom, osteoartritisom, juvenilnim revmatoidnim artritisom, psoriatičnim artritisom, neodzivnim revmatoidnim artritisom, kroničnim nerevmatoidnim artritisom, osteoporozo / resorpcijo kosti, koronarno srčno boleznijo, aterosklerozo, vaskulitisom, ulceroznim kolitisom, psoriazo, Crohnovo boleznijo, sindromom dihalne stiske pri odraslih, preobčutljivostnimi motnjami kožne zakasnitve, sindromom septičnega šoka in vnetnimi črevesnimi boleznimi.

Izraz farmacevtsko sprejemljiv, kot ga uporabljamo tukaj, pomeni, da mora biti nosilec, razredčilo, pomožne snovi in / ali sol združljiv z drugimi sestavinami formulacije in ne sme biti škodljiv za prejemnika.

Izraz farmacevtsko sprejemljiv nosilec, kot ga uporabljamo tukaj, pomeni nestrupen, inertno trden, poltrden, razredčilni, inkapsulacijski material ali pomožno snov kakršne koli vrste. Nekateri primeri materialov, ki lahko služijo kot farmacevtsko sprejemljivi nosilci, so sladkorji, kot so laktoza, glukoza in saharoza; škrobi, kot sta koruzni škrob in krompirjev škrob; celuloza in njeni derivati, kot so natrijeva karboksimetil celuloza, etil celuloza in celulozni acetat; slad; želatina; smukec; kot tudi druga nestrupena kompatibilna maziva, kot sta natrijev lavril sulfat in magnezijev stearat, pa tudi barvila, sredstva za sproščanje, sredstva za prevleko, sladila, arome in parfumi; po presoji formulatorja so v sestavi lahko prisotni tudi konzervansi in antioksidanti.

Pregledane rastline v skladu s tem izumom, ki imajo antioksidativne, protivnetne, imunomodulatorne, protivirusne in protirakave lastnosti

Artemizinin (ART) je izoliran iz tradicionalne kitajske medicine Artemisia annua L [4], Rastlina je znana tudi pod imeni qinhao ali sladki pelin. Artemisia annua (qinghao) je rastlina iz družine Asteraceae, ki se že stoletja uporablja v tradicionalni kitajski medicini [126], Seskviterpen laktonski artemizinin (ART), aktivna zdravilna učinkovina, je bil odkrit v sedemdesetih letih prejšnjega stoletja. Od takrat so bile izvedene študije kemijske strukturne modifikacije, da bi dobili nove spojine z okrepljenim antimalarijskim delovanjem in izboljšanimi farmakološkimi lastnostmi. Derivati ART so vama zdravila, ki se jih dobro prenaša. Ta varnost je eden od razlogov, zakaj so preučevali njihovo učinkovitost pri drugih boleznih, ne samo pri malariji. Derivati ART so aktivni proti drugim parazitom, rakavim celicam in virusom, čeprav z nižjo jakostjo, z učinkovito koncentracijo v mikromolamem območju v primerjavi z nanomolarnim območjem kot antimalariki [31]. Številne študije dokazujejo aktivnost artemizinina in njegovih derivatov, med drugim proti različnim virusnim boleznim, kot so HCMV, HHV-6A, HSV-1, EPV, HBV, HCV, BVDV, HIV-1 in (R) CMV [30, 98, 23].

ch₃ H =

O

Kurkuma (Curcuma longa L.) spada v družino ingverjev (Zingiberaceae). Korenine rastlin vsebujejo več sekundarnih presnovkov, vključno s kurkuminoidi, seskviterpeni, in steroidi [82]; pri čemer je kurkuminoidni kurkumin glavna sestavina rumenega pigmenta in glavna bioaktivna snov. Kemično je kurkumin diferuloilmetan, diarilheptanoid, ki spada v razred naravnih fenolov. Curcuma longa L. in njegova polifenolna spojina kurkumin so bili zaradi obsežne tradicionalne uporabe in nizkih stranskih učinkov predmet številnih protimikrobnih preiskav. Antimikrobne aktivnosti ekstrakta kurkumina in korenike C. longa proti nukleotidom se predlagajo kot terapevtska tarča protivirusnih in protirakavih spojin. Med 15 različnimi polifenoli se kot močna protivirusna spojina s tem postopkom predlaga kurkumin z zaviralnim delovanjem proti učinku IMPDH bodisi na nekonkurenčen ali konkurenčen način [24], Poročali so o študiji različnih biokonjugatov kurkumina proti različnim virusom, vključno z različnimi bakterijami, virusi, glivicami in paraziti. Obetavni rezultati protimikrobne aktivnosti kurkumina so bili dober primer za povečanje zaviralnega učinka obstoječih protimikrobnih učinkovin s sinergizmom [75]. Dokazano je, da ima kurkumin kot rastlinski derivat širok spekter protivirusnega delovanja proti različnim virusom.

Bosvelija ali indijsko kadilo, je smolnati zeliščni izvleček drevesa boswellia, ki ga prakse naravne medicine uporabljajo že stoletja. Njegovi protivnetni učinki pomenijo, da lahko pomaga pri vnetnih stanjih, kot so revmatoidni artritis, vnetne črevesne bolezni in astma. Zdravljenje teh stanj se običajno osredotoči na zmanjšanje vnetja. S pomočjo obvladovanja vnetja lahko bosvelija zmanjša simptome kroničnih vnetnih stanj [112]. Spojine iz smole z resničnimi protivnetnimi učinki so pentaciklični triterpeni vrste bosvelične kisline.

Bosvelične kisline zavirajo biosintezo levkotriena v nevtrofilnih granulocitih. Učinek sproži bosvelična kislina, ki se veže na encim. V kliničnih preskušanjih so obetavne rezultate opazili pri bolnikih z revmatoidnim artritisom, kroničnim kolitisom, ulceroznim kolitisom, Crohnovo boleznijo, bronhialno astmo in peritumoralnimi edemi možganov [1], Tudi njegove zdravilne lastnosti so splošno priznane, predvsem za zdravljenje vnetnih stanj, pa tudi pri nekaterih rakavih boleznih, celjenju ran in njegovem protimikrobnem delovanju. Znanstvene raziskave že začenjajo podpirati prednosti bosvelije, vendar je večina dosedanjih študij uporabljala celične ali živalske modele. Znanstveniki ne poznajo poglobljenih učinkov te snovi na človeka, zato je potrebnih še veliko kliničnih preskusov na ljudeh, preden lahko zdravniki priporočijo to zdravljenje [112]. Študije in vitro in živalski modeli kažejo, daje bilo ugotovljeno, da bosvelične kisline zavirajo sintezo specifičnih protivnetnih encimov, ki povzročajo celično nasičenost in optimalno zmanjšanje tveganja za bolezni srca, kapi in raka pri zdravih posameznikih. Askorbinski kislini kot antioksidant in antiaterogenu se pripisuje številne koristi za zdravje. Obstajajo prepričljivi dokazi o antioksidativni zaščiti lipidov z askorbinsko kislino tako z dodatki železa kot brez njih pri živalih in ljudeh [1], Prišlo je do dolgotrajne bronhokonstrikcije, kemotaksije in povečane žilne prepustnosti [2, 3].

HO'

O:

Askorbinska kislina (vitamin C) je eden pomembnejših in glavnih vitaminov za zdravje ljudi. Potreben je za številne fiziološke funkcije v človeški biologiji. Na podlagi razpoložljivih biokemičnih, kliničnih in epidemioloških študij naj bi bil trenutni priporočeni dnevni odmerek za askorbinsko kislino 80-90 mg/dan [32], da bi razpravljali o vlogi askorbinske kisline pri krepitvi imunosti med prehladnimi okužbami. Dokazano je, da askorbinska kislina spodbuja imunski sistem s povečanjem proliferacije T-celic kot odziv na okužbo. Te celice lahko s citolizo uničijo okužene tarče s proizvodnjo velikih količin citokinov in s pomočjo celicam B, da sintetizirajo imunoglobuline za nadzor vnetnih reakcij. Nadalje je bilo dokazano, da askorbinska kislina blokira poti, ki vodijo do apoptoze T-celic in tako spodbujajo ali ohranjajo proliferacijo T-celic, da napadajo okužbo. Ta mehanizem je predlagan za okrepljen imunski odziv, opažen po dajanju vitamina C med okužbami s prehladom [11],

HO

Kanabinoidi so skupina spojin, ki posredujejo svoje učinke s pomočjo kanabinoidnih receptorjev. Odkritje A9-tetrahidrokanabinola (THC) kot glavnega psihoaktivnega načela v marihuani ter identifikacija kanabinoidnih receptorjev in njihovih endogenih ligandov je privedlo do pomembne razvoja raziskav, namenjenih razumevanju fizioloških funkcij kanabinoidov. Kanabinoidni receptorji vključujejo CB1, ki se pretežno izraža v možganih, in CB2, ki ga najdemo predvsem na celicah imunskega sistema. Dejstvo, da so na imunskih celicah našli receptorje CB1 in CB2, nakazuje, da imajo kanabinoidi pomembno vlogo pri uravnavanju imunskega sistema. Nedavne študije so pokazale, daje dajanje THC pri miših sprožilo izrazito apoptozo v celicah T in dendritičnih celicah, kar je povzročilo imunosupresijo. Poleg tega je več študij pokazalo, da kanabinoidi zmanjšujejo regulacijo proizvodnje citokinov in kemokinov, v nekaterih modelih pa nadregulirajo T-regulativne celice (Tregs) kot mehanizem za zatiranje vnetnih odzivov [78],

___Glavni razredi naravnih kanabionidov
_________Vrsta__________	Skeletna formula	Ciklizacija
Kanabigerol CBG	1 OH Γ 7 H i <3 JI JI ~ Ji AH	ιΊ 0 J jA
Kanabikromen CBC	Bil Ja? _____ __	A—' o __

Kanabidiol CBD	/Π\ <5 2) OH \6 1/ 1 — 'λ ΙΙβ'^ΪΙ H	0^	0
Tetrahidrocanabinol in kanabinol THC, CBN	. 1 °°\ < _k m) /σΓο\ o JT/ / to \« o/ O en ) ' T		0
Kanabielsoin CBE	/X®\5a <? /79 \ O / 5 \ __/ 9bp 4Π V JA? H	ox	—0
Mo-tetrahidrokanabinol zso-THC	7 10 H	0^
Kanabiciklol CBL	/Tal/ Zla TKAo	0^	***0
Kanabicitran CBT			**0

Eden glavnih mehanizmov imunske supresije s kanabinoidi je indukcija celične smrti ali apoptoze v populacijah imunskih celic. V normalnih pogojih je za vzdrževanje homeostaze potrebna apoptoza, ki vključuje morfološke spremembe (tj. krčenje celic, fragmentacijo jedra in mehurjenje membran) ter molekularne spremembe (tj. Indukcijo kaspaz in uhajanje citokroma c). Zunanja pot apoptoze se začne z ligacijo smrtnih receptorjev (tj. CD95) na površini celice, kar vodi do aktivacije glavnih kaspaz, kot so kaspaza 3, 8 in 10. Notranja pot apoptoze se začne preko mitohondrijev in kaspaze 9; citokrom c in kaspaza 3 sta glavna dejavnika pri indukciji celične smrti [78],

Kanabinoidno delovanje na citokine

Citokini so signalni proteini, ki jih sintetizirajo in izločijo imunske celice ob stimulaciji. So modulacijski dejavniki, ki uravnotežijo sprožitev in odpravo vnetja. Eden od možnih mehanizmov imunskega nadzora s pomočjo kanabinoidov med vnetjem je disregulacija proizvodnje citokinov s strani imunskih celic in motnje dobro urejenega imunskega odziva. Poleg tega lahko kanabinoidi vplivajo na imunski odziv in odpornost gostitelja z motenjem ravnovesja med citokini, ki jih proizvajata podskupini T-pomočnikov, Thl in Th2. Opravljene so bile študije in vitro za primerjavo učinka THC in kanabinola na proizvodnjo citokinov s človeškimi T, B, CD8 +, NK in eozinofilnimi celičnimi linijami. Rezultati pa so bili spremenljivi glede na celične linije in uporabljene koncentracije. V tej študiji so bili dokazani tako protivnetni kot protivnetni učinki THC, ki kažejo, da imajo različne celične populacije različne pragove odziva na kanabinoide. Na splošno so se ravni TNF-α, GM-CSF in IFN-γ z zdravljenjem z zdravili zmanjšale. Zanimivo je, da seje protivnetni citokin IL-10 po zdravljenju s THC zmanjšal, vendar se je povečalo število vnetnih citokinov IL-8. V drugih študijah so pokazali, da ima kanabinoid CP55,940 pri nanomolamih koncentracijah stimulativni učinek na več citokinov v človeški promielocitni celični liniji HL-60. Na molekulami ravni je tudi dokazano, da THC zavira z LPS stimulirano izražanje mRNA IL1α, IL-Ιβ, IL-6 in TNF-α v gojenih mikroglijskih celicah podgan; vendar je bil učinek neodvisen od kanabinoidnih receptorjev. V neki drugi študiji so mišim dovajali Corynebacterium parvum in vivo, čemur je sledilo dovajanje sintetičnih kanabinoidov WIN55,212-2 in HU210. Nato so živali izzvali z LPS. Rezultati so pokazali znižanje ravni TNF-α in IL-12, vendar zvišanje ravni IL-10 v serumu. Pokazalo se je, daje ta učinek odvisen od receptorjev CB1. Med kroničnim vnetjem lahko zatiranje IL-6 zmanjša poškodbe tkiva. Poročali so, da AjA preprečuje poškodbe sklepnega tkiva pri živalskih modelih adjuvantnega artritisa. Nedavne študije so pokazale, da dodajanje AjA človeškim makrofagom, ki so pridobljeni iz monocitov in vitro, zmanjša izločanje IL-6 iz aktiviranih celic, kar kaže na to, da je AjA primeren za zdravljenje vnetja sklepov pri bolnikih s sistemskim eritematoznim lupusom (SLE), revmatoidnim artritisom (RA) in osteoartritisom.

Opazili so, da je agonist CB2 HU-308 oslabil jetrno ishemijo / reperfuzijsko poškodbo z zniževanjem ravni TNF-a, ΜΙΡ-la in MIP-2 v serumu in jetrnih homogenatih. Nedavne študije in vitro so pokazale tudi močan protivnetni učinek sintetičnih kanabinoidov (CP55,940 in WIN55,212-2). Tako CP55,940 kot WIN55,212-2 sta znižali regulacijo proizvodnje IL-6 in IL-8 citokinov iz IL-ip-stimuliranih revmatoidnih sinoviocitov, podobnih fibroblastom (FLS), prek mehanizma, ki ni posredovan s CB1 / CB2 [78],

Kanabinoidi in multipla skleroza

Multipla skleroza (MS) je avtoimunska motnja, ki jo posredujejo mielinsko specifične samoreaktivne T-celice, makrofagi / mikroglijalne celice in astrociti. Delovanje teh celic vodi do demielinizacije živčnih vlaken in aksonov v CNS pri ljudeh in povzroči številne znake in simptome, kot so mišični krči, tremor, ataksija, šibkost ali paraliza, zaprtje in izguba nadzora nad mehurjem. Obstajajo tako anekdotični kot klinični dokazi, ki dokazujejo učinkovitost kanabinoidov pri zdravljenju MS. Leta 1994 je bila izvedena raziskava z 112imi bolniki z MS (57 moških in 55 žensk) iz ZDA in Velike Britanije; vsi bolniki so se zdravili sami s pomočjo konoplje. Rezultati raziskave so pokazali, da uporaba konoplje pri več kot 90 % bolnikov izboljša simptome njihove bolezni, kot so spastičnost, bolečina, tremor in depresija. V osmih različnih kliničnih študijah so bolniki z MS tudi poročali o koristih THC (uporabljenega z zaužitjem, inhalacijo, injekcijo ali rektalnimi supozitoriji), konoplje (uporabljene z zaužitjem ali vdihavanjem) in agonista kanabinoidnih receptorjev Nabilone TM (uporabljenega z zaužitjem) za zdravljenje spastičnosti, bolečine, tremorja in ataksije. Uporaba kanabinoidov je izboljšala tudi objektivne rezultate testov, kot so testi rokopisa in testi obvladovanja mehurja. Kanabinoidi so na splošno koristni pri zdravljenju MS, ker imajo nevroprotektivne in imunosupresivne lastnosti. V tem poglavju se bomo osredotočili na slednje in razpravljali o delovanju endogenih, naravnih in sintetičnih kanabinoidov na imunske celice v CNS med MS [78].

Kanabinoidi in kolitis

Med vnetjem se v črevesnem traktu aktivira več različnih celičnih poti, kar vodi v patološko stanje [132], Izkazalo se je, da se funkcionalni receptor CB1 izraža v človeškem ileumu in debelem črevesu, število celic, ki izražajo CB1, pa seje po vnetju znatno povečalo [72, 86]. Zaščitna vloga teh receptorjev CB1 med vnetjem je bila prikazana v študiji, ki analizira vlogo endogenega kanabinoidnega sistema pri razvoju eksperimentalnega kolitisa pri miših, ki ga sproži intrarektalna obdelava 2,4-dinitrobenzen sulfonske kisline (DNBS) ali peroralni natrijev dekstran dajanje sulfata (DSS) [72]. Model DSS, o katerem je prvotno poročal Okayasu in njegovi sodelavci, je bil uporabljen za raziskovanje vloge levkocitov pri razvoju kolitisa [81]. Peroralna uporaba 5 % DSS v pitni vodi lahko povzroči akutni kolitis zaradi kemične poškodbe debelega črevesa. Poleg tega dolgotrajno dajanje DSS povzroči kolorektalni karcinom, kije podoben zaporedju displazije in karcinoma, ki ga opazimo med razvojem raka pri človeškem ulceroznem kolitisu [136], Po drugi strani pa ima črevesno vnetje, ki ga povzroči intrarektalno dajanje DNBS, številne značilne značilnosti Crohnove bolezni pri ljudeh, vključno z indukcijo vnetja, ki ga povzroča IL-12, z velikim odzivom, ki ga posreduje Thl [80]. Vključenost endogenega kanabinoidnega sistema v modulacijo akutne faze kolitisa, ki gaje povzročil DNBS, je bila dodatno podprta z večjimi stopnjami transkripcij, ki kodirajo CB1 pri divjih miših po indukciji vnetja. Opazili so, daje genetska ablacija receptorjev CB1 povzročila, da so miši bolj občutljive na vnetne poškodbe. Poleg tega je podobno kot pri miših s pomanjkanjem CB1 tudi farmakološka blokada CB1 s specifičnim antagonistom SR141716A povzročila poslabšanje kolitisa [72], Zaščitno vlogo endogenega kanabinoidnega sistema so opazili 24 ur po zdravljenju z DNBS, ki je postala bolj očitna 2. in 3. dan. Vendar pa je bila povečana aktivnost spontanega povečevanja gladke mišične celične membrane pri debelem črevesu, obdelanem z DNBS, pri miših CB1 - / opazna že 8 ur po zdravljenju z DNBS, kar kaže, da seje draženje gladkih mišic zaradi vnetja pojavilo v zgodnejši fazi kot pri divjih miših. To dodatno podpira idejo, da je endogeni kanabinoidni sistem zaščiten pred vnetnimi spremembami. Ti podatki kažejo, daje aktivacija CB1 in endogenega kanabinoidnega sistema zgodnji in pomemben fiziološki korak pri samozaščiti debelega črevesa pred vnetji.

Kanabinoidni sistem in poškodba jeter

V zadnjih nekaj letih seje zavedanje o kanabinoidnem sistemu v patofiziologiji bolezni jeter dobilo povečalo. Izkazalo se je, da sta receptorja CB1 in CB2 v zgodnjih fazah poškodbe j eter povišana [14]. Čeprav j e bilo dokazano, da embrionalna j etra izražaj o mRNA receptorj a

CB2, so hepatociti in endotelijske celice odraslih jeter pokazali le šibko fiziološko stopnjo izražanja receptorjev CB1 in pokazali, da proizvajajo nizko raven endokanabinoidov. Ugotovljeno je bilo, da imajo receptorji CB1 povečano regulacijo v vaskulamem endoteliju in v miofibroblastih, ki se nahajajo v fibrotičnih pasovih cirotičnih jeter pri ljudeh in glodalcih [121], CB2 receptorji se izražajo tudi v miofibroblastih, vnetnih celicah in celicah žolčnega epitelija [58]. V zadnjih letih je vse več dokazov, ki kažejo na to, da lahko endokanabinoidi uravnavajo patofiziologijo bolezni jeter, vključno z akutnimi oblikami poškodb jeter, fibrozo jeter in cirozo. V normalnih jetrih so endokanabinoidi nizki, kar je lahko posledica visoke ravni izražanja FAAH, ki je odgovoren za razgradnjo AEA [21], Dokazano je, da se raven AEA v jetrih in serumu pri akutnem hepatitisu in zamaščenih jetrih poveča [83]. V zamaščenih jetrih je povečanje AEA posledica zmanjšane sposobnosti FAAH, da razgradi AEA. Zgornje študije skupaj kažejo, da imajo lahko endokanabinoidi in njihovi receptorji ključno vlogo pri uravnavanju fibrogeneze jeter; zato je lahko usmerjanje kanabinoidnih receptorjev novo orodje za preprečevanje in zdravljenje poškodb jeter.

Kanabinoidi in RA

Revmatoidni artritis je kronična vnetna bolezen, ki prizadene približno 1 % človeške populacije in se odraža v uničenju sklepov, deformaciji in izgubi funkcije, povezane s togostjo sklepov, bolečino, oteklino in občutljivostjo [54], Glavne populacije imunskih celic, ki sodelujejo pri poškodbah sklepov, so makrofagi, T-celice, fibroblastom podobni sinoviociti in DC. Glavna citokina sta TNF-α in IL-1 [54, 87]. Kanabinoidi in njihove protivnetne lastnosti so preučevali na živalskih modelih RA in na človeških celicah bolnikov z RA in te študije dokazujejo antiartritične lastnosti teh naravnih rastlinskih spojin [84,142, 42, 5]. Zanimivo je, da se večina študij o RA in kanabinoidih osredotoča na uporabo nepsihoaktivnih kanabinoidov. CBD je glavna nepsihoaktivna sestavina konoplje in njen zaščitni učinek se je pokazal pri mišjem artritisu, ki ga povzroča kolagen [70]. V tej študiji so avtorji pokazali, da vsakodnevno peroralno (5 mg/kg) ali intra-peritonealno (25 mg/kg) dovajanje CBD zavira napredovanje bolezni. Poleg tega je študija pokazala, da imajo miši, ki so jih zdravili s CBD, manj razmnoževanja v ex vivo aktiviranih odvajajočih se celicah bezgavk, imajo zmanjšano raven IFN-γ, ki ga izločajo aktivirane celice bezgavk, in zmanjšano nastajanje TNF-α v sinovialnih celicah v kolenu. Sumariwalla in sodelavci je uporabil še en sintetični nepsihoaktivni kanabinoid, HU-320, in pokazal, da je ta spojina izboljšala že obstoječi artritis pri miših [119]. Celice bezgavk miši, zdravljenih s HU-320, so pokazale zmanjšan proliferativni odziv, ko so celice miši 7 dni po vnetju, inkubirali s kolagenom II.

Kanabinoidi in raki z vnetnimi komponentami

Vnetje močno vpliva na razvoj nekaterih vrst raka, kar naj bi se odražalo na 15-20 % vseh smrtnih primerov zaradi raka po vsem svetu [5]. Značilnosti vnetja, povezanega z rakom, vključujejo prisotnost vnetnih celic v tumorskem tkivu in uravnavanje rasti tumorjev, metastaz in angiogeneze z vnetnimi mediatorji (npr. kemokini, citokini in prostaglandini). Povezava med vnetjem in rakom je zdaj splošno sprejeta in dokazano je, da nesteroidna protivnetna zdravila zmanjšujejo različno tveganje za nastanek raka. Uporaba teh zdravil zmanjša tveganje za nastanek raka debelega črevesa za 40-50% in naj bi bila preventivna za raka pljuč, požiralnika in želodca [71]. Zato lahko vnetje štejemo za terapevtsko priložnost pri nekaterih vrstah raka. Kanabinoidi so se nedavno začeli širše uporabljati tudi kot protitumoma sredstva [46, 104], ki temeljijo na njihovi sposobnosti zaviranja tumorske angiogeneze [15] ali induciranja neposredne apoptoze ali zastoja celičnega cikla v neoplastičnih celicah [78]. Predlaganje bil poudarek na antiproliferativnih učinkih teh spojin na različne tumorje, kot so rak dojke in prostate, feokromocitom in maligni gliomi [46, 78]. Naš laboratorij je poročal, da lahko in vitro THC in drugi kanabinoidi povzročijo apoptozo v transformiranih mišjih in človeških T-celicah [65], vključno s primarnimi akutnimi limfoblastnimi celicami človeške levkemije. Poleg tega bi zdravljenje miši s T-celično levkemijo s THC lahko ozdravilo približno 25 % miši [65]. Nadalje smo pokazali, da je zdravljenje s THC povzročilo prekinitev signalnega modula MAPK/ERK kinaze/ERK, kije bil potreben za apoptotično smrtnost [57, 74]. Vloga endokanabinoidov kot potencialnih zaviralcev rasti endogenih tumorjev je bila predlagana v študiji, kjer so ugotovili, da so bile ravni AEA in 2-AG pri predrakavih polipih višje kot pri popolnoma razvitih karcinomih v debelem črevesu [63]. Nedavne študije in vivo kažejo, daje selektivno ciljanje receptorjev CB2 povzročilo zaviranje rasti kolorektalnega tumorja z apoptozo, ki je bila posredovana s stimulacijo ceramida [63]. V ksenograftskem modelu raka ščitnice so snovi, ki so blokirale razgradnjo endokanabinoidov, povečale tudi ravni AEA in 2-AG v tkivu ter zmanjšale rast tumorja [20], Izvedeni so bili različni poskusi inaktiviranja encimov, ki razgrajujejo kanabinoide, s čimer se je povečala lokalna koncentracija endokanabinoidov na površini tumorskih celic. To vodi do protitumorskih učinkov CB-receptorjev, ki so pokazatelji pri različnih vrstah raka, kot so rak ščitnice, možganov in prostate [78], Čeprav je večina učinkov kanabinoidov posredovana s CB-receptorji, se je izkazalo, da AEA učinkuje na rakave celice z interakcijo z receptorjem TRPV1 [78] ali z lipidnimi splavi, bogatimi s holesterolom [29]. Poročali so tudi, da kanabinoidi različno uravnavajo signalne poti v normalnih celicah v primerjavi z rakavimi celicami. Pri malignih boleznih, kot so rak ščitnice, limfom, melanom, trebušna slinavka in rak dojke, so ravni kanabinoidnih receptorjev v tumorju pogosto višje v primerjavi z običajnimi celicami istega izvora, kar posledično poveča občutljivost na kanabinoide pri malignih boleznih [15, 78]. Poleg tega so številne študije na živalih poročale o antiproliferativnih in proapoptotičnih učinkih kanabinoidov na tumorske celice, ne pa tudi na normalno tkivo [15, 40]. Tako vloga kanabinoidnega sistema pri raku kaže, da je ta sistem vključen v uravnavanje številnih funkcij, ki so bistvene za razvoj raka.

TEMPO (ali tempol) je mimetik superoksid dismutaze (SOD), ki prepušča majhne molekule in lahko deluje kot SODI, SOD2, SOD3 in katalaza in vivo (NE SME se ga zamenjati z blagovno znamko paracetamol Tempol, znano tudi kot acetaminofen, analgetik, ki je na voljo brez recepta in je generična oblika zdravila Tylenol®).

OH

Omili vnetje, povzročeno s superoksidnim anionom in peroksitnitritom, znižuje krvni tlak v različnih modelih in kaže nevroprotektivne učinke. Obnavlja funkcije mitohondrijev in srca pri oksidativnem stresu, ki ga povzroča TNFa, in zmanjšuje srčno hipertrofijo pri kroničnih hipoksičnih podganah.

Dr. Christopher S. Wilcox v članku »Učinki tempola in redoks-cikličnih nitroksidov v modelih oksidativnega stresa« [131] pojasnjuje: Tempol je redoks-ciklični nitroksid, ki spodbuja presnovo številnih reaktivnih kisikovih vrst (ROS) in izboljšuje biološko uporabnost dušikovega oksida. Obširno so ga preučevali na živalskih modelih oksidativnega stresa. Dokazano je, da tempol ščiti mitohondrije pred oksidativnimi poškodbami in izboljšuje oksigenacijo tkiva. Tempol je izboljšal odzivnost na inzulin pri modelih sladkorne bolezni tipa II in izboljšal dislipidemijo, zmanjšal povečanje telesne mase in preprečil diastolično disfunkcijo in srčno popuščanje pri modelih presnovnega sindroma, ki se hranijo z maščobo. Tempol je številne organe, vključno s srcem in možgani, zaščitil pred ishemijo / reperfuzijsko škodo. Tempol je na modelih odvečne soli in mineralokortikosteroidov preprečil poškodbe podocitov, glomerulosklerozo, proteinurijo in postopno izgubo ledvične funkcije. Zmanjšal je poškodbe možganov ali hrbtenjače po ishemiji ali travmi in učinkoval analgetično na hrbtenico. Tempol je izboljšal preživetje pri več modelih šoka. Normalne celice je zaščitil pred sevanjem, hkrati pa ohranil občutljivost tumorskih celic na sevanje. Njegovo paradoksalno prooksidativno delovanje v tumorskih celicah je povzročilo zmanjšanje spontanega nastanka tumorja. Tempol je bil učinkovit pri nekaterih modelih nevrodegeneracije. Tako je tempol učinkovito preprečil številne škodljive posledice oksidativnega stresa in vnetij, ki so podlaga za poškodbe zaradi sevanja in številne bolezni, povezane s staranjem.

Zdravljenje Covida-19 s tempolom

Medtem ko je bila predmet več kot 2000 publikacij seje SOD-mimetična nitroksidna oznaka tempol izkazala kot učinkovita pri eksperimentalnem zdravljenju več bolezni ljudi in živali, hkrati pa kaže minimalno toksičnost [90, 133]. S tem ko podpira vlogo redoks-signalizacije v svojem mehanizmu delovanja, tempol modulira številne redoks-odvisne sisteme celičnih sporočil. Sem spadajo npr. BRCA1, CtBPl, p53, PARP, HIF-Ια, HIF-2a, VEGF, IL-6, BARDI, RAD51, uPAR, NF-κΒ in mGluR-ji, več izmed katerih je bilo zaznanih v patogenezi Covida-19. Pomembno je, daje bilo zdravljenje alopecije v začetni fazi povezano s terapevtsko uporabo zdravila tempol, kije več let spodbujalo druge pripomočke. Eden od navdihov za to aplikacijo je bilo odkritje sredi sedemdesetih let, da orgotein, farmakološka formulacija govejih jeter SODI, zavira izpadanje dlake (efluvij) pri poskusnem diabetesu pri glodalcih. To pomeni vlogo redoks-signalizacije pri sladkorni bolezni in v laserskem ciklusu, splošni model za redoks-modulacijo cikličnih celičnih procesov [89, 88], Tempol izboljša tudi izpadanje las, ki ga povzroča sevanje pri ljudeh, ki je oblika anagenega efluvija [36]. Tu poročamo o očitni učinkovitosti zdravila tempol pri zdravljenju zgodnjega Covida19 (okužba s SARS-CoV-2), ki podpira ključno vlogo oksidativnega stresa in redokssignalizacije pri Covidu-19. To lahko pojasni tudi skupno povezavo zdravila Covid-19 z alopecijo in domnevno učinkovitost nekaterih sredstev za zdravljenje izpadanja las pri poskusnem zdravljenju te bolezni.

Izraz terapevtsko učinkovita količina, kot ga uporabljamo tukaj, pomeni količino spojine ali sestave (npr. kurkumin (0,1-5 %), bosvelija (0,1-5 %), artemizinin (0,1-3 %), vitamin C (0,1-6 %) in neobvezno CBD/CBG (0,1-5 %) in nitroksidi TEMPO (0,1-2 %), ki zadostuje, da znatno povzroči pozitivno spremembo stanja, ki ga je treba urediti ali zdraviti, vendar dovolj nizko, da se v obsegu zdrave medicinske presoje izognemo morebitnim stranskim učinkom (ob razumnem razmerju med koristjo in tveganjem). Terapevtsko učinkovita količina spojine ali sestave bo odvisna od določenega stanja, ki se zdravi, starosti in fizičnega stanja končnega uporabnika, resnosti stanja, ki se zdravi / preprečuje, trajanja zdravljenja, narave sočasne terapije, uporabljena specifična spojina ali sestava, določen uporabljen farmacevtsko sprejemljiv nosilec in podobni dejavniki. Kot je uporabljeno tukaj, so vsi odstotki masni, če ni drugače določeno.

Izraz aktivna farmacevtska sestavina, kot se tukaj uporablja, se nanaša na kurkumin, bosvelijo, artemizinin, vitamin C in neobvezno na kanabinoide CBD/CBG in nitrokside TEMPO.

Dejanske doze aktivne sestavine, kurkumina, bosvelije, artemizinina, vitamina C in neobvezno kanabinoidov CBD/CBG in nitroksidov TEMPO v okviru izuma se lahko spreminjajo tako, da dobimo količino aktivne sestavine, kije učinkovita za dosego želenega terapevtskega odziva za določenega bolnika, sestavo in način uporabe.

Izbrana raven odmerjanja bo odvisna od številnih dejavnikov, vključno z aktivnostjo določene učinkovine, kurkumina, bosvelije, artemizinina, vitamina C in neobvezno uporabljenih kanabinoidov CBD/CBG in nitroksidov TEMPO, načina dovajanja, časa dovajanja, hitrosti izločanja določene sestave, ki se uporablja, trajanja zdravljenja, uporabe v kombinaciji z drugimi izvlečki, starosti, spola, teže, stanja, splošnega zdravstvenega stanja in predhodne zdravstvene zgodovine bolnika, ki se zdravi, in dejavnikov, dobro znanih v medicinski stroki.

Sestave predstavljenega izuma so primerne za zdravljenje tako akutnih kot kroničnih oblik vnetnih motenj, kijih povzročajo TNF-α, interlevkini (IL-1, IL-6, IL-8) in ICAM-1, VCAM1 in E-selectin, zlasti revmatoidni artritis, juvenilni revmatoidni artritis, psoriatični artritis, osteoartritis, neodzivni revmatoidni artritis, kronični nerevmatoidni artritis, osteoporoza / resorpcija kosti, koronarna srčna bolezen, vaskulitis, ulcerozni kolitis, luskavica, sindrom dihalne stiske pri odraslih, Alzheimerjeva bolezen pri ljudeh. Prav tako lahko sestave tega izuma uporabimo za zdravljenje vnetij pri boleznih, kot so vnetne črevesne bolezni, Crohnova bolezen, sindrom septičnega šoka, ateroskleroza in različne avtoimunske bolezni med drugimi kliničnimi stanji. Predloženi izum je povezan tudi s postopkom za zdravljenje vnetnih motenj, ki obsega dovajanje sestav selektivno peroralno.

Naslednji primeri ponazarjajo, vendar ne omejujejo obsega izuma. Strokovnjaki s tega področja naj bi razumeli, da je pričujoča razprava zgolj z nekaj primeri izvedb in ni namenjena omejevanju širših vidikov pričujočega izuma, katerega širši vidiki so vključeni v zgledno konstrukcijo.

Covidu-19 pridružena citokinska nevihta

Zdravljenje SARS-CoV-2 s sestavo v okviru predloženega izuma

Huda bolezen akutnega respiratornega sindroma, povezana s koronavirusom 2019 (COVID19), je sindrom virusne replikacije skupaj z vnetnim odzivom gostitelja. Citokinska nevihta in izogibanje virusa celičnm imunskim odzivom imata lahko enako pomembno vlogo pri patogenezi, klinični manifestaciji in rezultatih COVIDa-19. Sistemski proinflamatorni citokini in biomarkerji so povišani, ko bolezen napreduje v višje faze, in so povezani s slabšimi možnostmi za preživetje [95],

SARS-CoV-2 aktivira prirojeni imunski sistem in povzroči sproščanje velikega števila citokinov, vključno z IL-6, kar lahko poveča prepustnost žil in povzroči odtekanje tekočine in krvnih celic v alveole ter posledični simptomi, kot so dispneja in dihalna odpoved [39], Višja smrtnost je povezana z rezultatom poslabšanja ARDS (sindrom akutne respiratorne stiske) in poškodbami tkiva, ki lahko povzročijo odpoved organov in / ali smrt [92]. Glede na študije, objavljene oktobra 2020, je ARDS vzrok za smrt pri 70 % smrtnih primerov zaradi COVIDa-19 [50]. V analizi ravni citokinov v plazmi tistih s hudim sars-CoV-2 so ravni številnih interlevkinov in citokinov izredno povišane, kar kaže na nevihto citokinov pri tistih, ki so bili najbolj prizadeti [92], Poleg tega je postmortalni pregled bolnikov s COVIDom-19 pokazal veliko kopičenje vnetnih celic v pljučnih tkivih, vključno z makrofagi in Tpomožnimi celicami [120], Za Covid-19, ki ga povzroča SARS-CoV-2, so značilni heterogeni simptomi, od blage utrujenosti do življenjsko nevarne pljučnice, nevihte s citokini in odpovedi več organov [38], Poročali so tudi o citokinski nevihti pri bolnikih s SARSom, kije bila povezana s slabimi rezultati [52]. Čeprav so mehanizmi poškodb pljuč in odpovedi več organov pri Covidu-19 še vedno v preiskavi, [112] poročajo o hemofagocitozi in povišani ravni citokinov - pa tudi o koristnih učinkih imunosupresivov - pri prizadetih bolnikih, zlasti tistih, ki so najtežje bolni, se nakazuje, da lahko citokinska nevihta prispeva k patogenezi Covida-19 [24—8] [25—8]. Ravni citokinov v serumu, ki so povišane pri bolnikih s citokinsko nevihto, povezano s Covidom-19, vključujejo interlevkin-ΐβ, interlevkin-6, IP10, TNF, interferon-γ, makrofagni vnetni protein (MIP) la in 1β ter VEGF [51, 141], Višje ravni interlevkina-6 so močno povezane s krajšim preživetjem [28], Relativna frekvenca krožečih aktiviranih CD4+ in CD8+ T celic in plazemskih blastov se poveča pri Covidu-19 [73]. Poleg povišanih sistemskih ravni citokinov in aktiviranih imunskih celic pri Covid-19 opažajo tudi več kliničnih in laboratorijskih nepravilnosti, kot so povišane ravni CRP in ddimera, hipoalbuminemija, ledvična disfunkcija in efuzija, saj so v citokinih nevihtne motnje. Ugotovljeno je bilo, da rezultati laboratorijskih testov, ki odražajo hipervnetje in poškodbe tkiva, napovedujejo poslabšanje izidov pri Covidu-19 [14]. Čeprav so v hudih primerih Covida-19 opazili imunološko disregulacijo [67], ni znano, ali je v hudih primerih imunska hiperaktivnost ali neuspeh pri razrešitvi vnetnega odziva zaradi stalne replikacije virusa ali imunske disregulacije. Povezava med nazofaringealno virusno obremenitvijo in ravnjo citokinov (npr. Interferon-a, interferon-γ in TNF) ter upadajoča virusna obremenitev v zmernih, a ne hudih primerih kaze na to, daje imunski odziv pozitivno povezan z virusnim bremenom [67], Druga odkritja prirojenih napak imunosti imunskega sistema tipa I in avtoprotiteles proti interferonom tipa I v najhujših primerih Covida-19 kažejo, da lahko pri nekaterih bolnikih s Covidom-19 pride do neustreznega protivirusnega odziva [139, 7, 61], Imunski odzivi gostiteljev in simptomi, povezani z imunskim sistemom, se med asimptomatskimi bolniki (ki imajo učinkovit nadzor nad SARS-CoV-2) in bolniki s hudim Covidom-19 (ki virusa ne morejo nadzorovati) zelo razlikujejo, kar kaže na to, da imunska disregulacija gostitelja prispeva v nekaterih primerih do patogeneze. Drug hipotezni mehanizem vključuje avtoimunost zaradi molekularne mimikrije med SARS-CoV-2 in samoantigenom. Ti mehanizmi so lahko vključeni v podskupine bolnikov, kot so otroci z multisistemskim vnetnim sindromom po okužbi, stanje, ki se zdi, da se izboljša z imunskomodulatomimi terapijami, kot so intravenski imunski globulin, glukokortikoidi ter anti-interlevkin-1 in anti-interlevkin-6 terapije. Bolniki z multisistemskim vnetnim sindromom zelo jasno ustrezajo definiciji citokinske nevihte, saj SARS-CoV-2 ni več prisoten; vendar ni jasno, ali je citokinska nevihta gonilna sila Covida-19 ali je to sekundarni proces. Poleg tega je zdaj jasno, da so lahko bolniki z okužbo s SARS-CoV2 asimptomatski ali imajo akutni Covid-19 s heterogeno pomembnostjo, kronični potek Covid-19 ali multisistemski vnetni sindrom. Kritično vprašanje se nanaša na dejavnike, ki prispevajo k hudemu citokinom podobnemu fenotipu, opaženemu pri majhnem delu bolnikov. Sočasna stanja, kot so hipertenzija, diabetes in debelost, so povezana s hujšimi primeri Covida-19, verjetno zaradi že obstoječega kroničnega vnetnega stanja ali nižjega praga za razvoj disfunkcije organov zaradi imunskega odziva.

Treba je opozoriti na nekaj pomembnih razlik v terapevtskih vidikih med citokinsko nevihto, povezano s Covidom-19, in številnimi drugimi motnjami s citokinskimi nevihtami. Prvič, citokinska nevihta, ki jo sproži okužba s SARS-CoV-2, lahko zaradi drugih vzrokov zahteva drugačne terapije od tistih, ki se uporabljajo za citokinske nevihte. Citokini so lahko ključni sestavni del citokinske nevihte in bistveni dejavnik protimikrobnega odziva. Tako lahko blokiranje signalizacije citokinov dejansko poslabša očistek SARS-CoV-2, poveča tveganje za sekundarne okužbe in povzroči slabše rezultate, kot je razvidno iz virusa gripe [61], Ker so interlevkin-6 in drugi citokini potencialno kritični tako za zdrav odziv na SARS-CoV-2 kot škodljivo nevihto citokinov, je še posebej pomembno, da so za zdravljenje pravočasno izbrane prave podskupine bolnikov s Covidom-19. Kljub pozitivnim anekdotičnim poročilom dve veliki, naključni, nadzorovani raziskavi terapij s protitelesi proti interlevkinu6 nista pokazali koristi preživetja pri hospitaliziranih bolnikih s Covidom-19 [48, 118].

Drugič, primarno mesto okužbe in bolezni najverjetneje prispeva k razlikam v imunskih odzivih in mehanizmih, na katerih temelji citokinska nevihta, kar ima posledice za zdravljenje. Na primer, selektivno izločanje primarnega virusnega rezervoarja, je koristno pri bolnikih z multicentrično Castlemanovo boleznijo, povezano s HHV-8, vendar pri bolnikih s Covidom-19 ni mogoče.

Tretjič, limfopenije niso pogosto opazili pri motnjah citokinskih neviht, je pa značilnost hude bolezni Covid-19. Trenutno ni jasno, ali je limfopenija, opažena pri Covidu-19, posledica infiltracije tkiva ali uničenja limfocitov.

Četrtič, težave s strjevanjem se lahko pojavijo pri motnjah citokinskih neviht, toda trombembolični dogodki so pogostejši pri citokinskih nevihtah, povezanih s Covidom-19 [60]. Nazadnje, čeprav citokinskih plošč niso merili istočasno na isti platformi prek citokinskih neviht, povezanih s Covidom-19, in drugih motenj citokinskih neviht, predhodni rezultati kažejo, daje raven kroženja več citokinov, kot je interlevkin-6, in drugih vnetnih markerjev, kot je feritin, v Covidu-19 manj povišana kot pri nekaterih drugih motnjah citokinskih neviht [67]. Ravni vnetnih mediatorjev v pljučnem tkivu med okužbo s SARSCoV-2 ostajajo neznane.

Kljub številnim neznankam nedavno naključno, nadzorovano preskušanje, ki kaže, da deksametazon zmanjšuje smrtnost med najhujšimi primeri Covida-19, za katerega so značilne povišane ravni CRP in dodatne potrebe po kisiku, v blažjih primerih pa lahko poslabša rezultate, kaže, da vnetje v pozni fazi prispeva k smrtnosti [122]. Meta analiza sedmih naključnih preskušanj je pokazala, daje bila 28-dnevna smrtnost zaradi vseh vzrokov pri kritično bolnih s Covidom-19 pri tistih, ki so se zdravili z glukokortikoidi, nižja kot pri tistih, ki so bili deležni običajne nege ali placeba [116]. Opazovalna študija, ki kaže, da imajo bolniki s Covidom-19 dober odziv na glukokortikoide, ko je raven CRP visoka, a slab odziv, kadar je raven nizka, je skladna s temi ugotovitvami [59]. Nadaljnja podpora prihaja iz pozitivnih poročil o usmerjenih antagonistih proti interlevkinu-1, faktorju, ki stimulira kolonijo granulocitov in makrofagov ter JAKI in JAK2 pri bolnikih s Covidom-19 [37, 26, 97]. Podobno je ugotovitev, da imajo vnetna sredstva, kot je inhalacijski interferon-β, pozitiven učinek, če jih dajemo zgodaj v toku bolezni, skladna z modelom, v katerem je imunska stimulacija, ki povečuje protivirusno aktivnost, koristna zgodaj (in verjetno škodljiva pozno), medtem ko je imunosupresija koristno pozno in škodljivo zgodaj. Tako kot pri deksametazonu bo čas zdravljenja in izbira podskupin bolnikov, vključenih v študije, najverjetneje vplival na rezultate.

Kljub neznankam glede vloge imunske disregulacije in citokinske nevihte v Covidu-19 trenutno preiskujejo na stotine imunomodulatomih zdravil [37]. Mnogo teh zdravljenj so uporabljali pri drugih motnjah citokinskih neviht. Canakinumab, monoklonsko protitelo proti interlevkinu-ΐβ in anakinra se preučujeta za ARDS, ki ga povzroča Covid-19.

Acalabrutinib, selektivni zaviralec bruton tirozin kinaze, ki uravnava signalizacijo in aktivacijo B-celic in makrofagov, se lahko obeta za dušenje hipervnetnega odziva pri Covidu-19 [100]. Zaviralca JAKI in JAK2, ki sta odobrena za zdravljenje številnih avtoimunskih in neoplastičnih stanj, lahko zavirata signalizacijo po interferonu tipa I, interlevkinu-6 (in drugih receptorjih družine gpl30), interferonu in interlevkinu-2, med drugimi citokini [140]. Podobno kot pri zdravljenju protiteles proti interlevkinu-6 se lahko zaviranje bruton tirozin kinaze in JAK izkaže za škodljivo ali neučinkovito, če se daje prezgodaj, ko je imunski odziv na SARS-CoV-2 ključnega pomena pri nadzoru replikacije in očistka virusa.

Zdravljenje citokinske nevihte

Splošna strategija zdravljenja citokinske nevihte vključuje podporno oskrbo za vzdrževanje kritičnega delovanja organov, nadzor osnovne bolezni in odpravo sprožilcev za nenormalno aktivacijo imunskega sistema ter ciljno imunomodulacijo ali nespecifično imunosupresijo, da se omeji kolateralna škoda aktiviranega imunskega sistema. Kot je bilo omenjeno v tem pregledu, so številna zdravila učinkovita pri številnih motnjah pod dežnikom citokinskih neviht, še vedno pa so lahko učinkovita pri več pogojih, ki še niso bili raziskani.

Glede na naraščajoče število novih terapevtikov, usmerjenih na različne vidike imunskega sistema, in našo sposobnost preiskovanja bioloških mehanizmov bolezni, bi se morale nadaljnje raziskave osredotočiti na identifikacijo zdravil, ki se lahko uporabljajo pri motnjah citokinskih neviht, in natančno diagnostiko za izbiro prava zdravila za prave bolnike, ne glede na osnovno stanje [8, 25]. Študija, v kateri so sodelovali bolniki s sistemskim juvenilnim idiopatskim artritisom, je razkrila podskupine bolnikov s citokinskimi profili, v katerih sta prevladovala interlevkin-6 in interlevkin-18, kar kaže na razpoložljive terapevtske pristope [110]. Podobno so nedavno pokazali, da biomarkerji učinkovito napovedujejo, kateri odrasli bolniki s Stillovo boleznijo bodo imeli odziv na anakinro ali tocilizumab [127]. Napredek pri natančni onkologiji kaže na to, da so upravičena podobna prizadevanja pri motnjah citokinskih neviht za določitev specifičnih terapevtskih ciljev in podpisov odziva na nekatera zdravila, ki presegajo meje bolezni. Signalizacija JAK je zanimiva tarča v citokinski nevihti, ker je mogoče istočasno ciljati več parov citokinov-receptorjev, kar je lahko učinkovito pri več boleznih, ki jih povzročajo različni citokini. Poleg tega se pri motnjah citokinskih neviht ocenjujejo tako izmenjava plazme kot tudi plazemske filtracijske kolone.

Preprečevanje citokinske nevihte

Vseeno pa ostaja glavno vprašanje, in sicer, zakaj so nekateri bolniki bolj nagnjeni k citokinski nevihti kot drugi. Različne genske mutacije so tudi lahko dejavnik tveganja za težji potek bolezni in pojav citokinskih neviht pri COVIDu-19. Podatki, pridobljeni iz svetovne populacije, kažejo, da je na alelske spremembe v citokinskih genih močno vplivala tudi zemljepisna širina [115, 27]. Geografska širina je glavni okoljski dejavnik, na katerega vpliva naša evolucijska zgodovina glede na izbiro okolja. Zemljepisna širina je torej povezana z različnimi dejavniki, ki vključujejo genetsko ozadje, biometeorološke dejavnike in socialno-ekonomske vplive. Glede na vlogo biometeoroloških dejavnikov ima sončna svetloba osrednjo vlogo pri sintezi vitamina D, ki ima ključno vlogo pri ohranjanju imunske homeostaze. Znano je, da genetski dejavniki predstavljajo do 28 % medsebojne variabilnosti koncentracij 25(OH)D v serumu [109]. V različnih populacijah so poročali o genetskih in individualnih razlikah v statusu vitamina D [64]. Glede na to je mogoče domnevati, da obstaja možnost, da ima status vitamina D vpliv na geografsko varianco COVIDa-19 [22].

Poleg tega lahko pomanjkanje vitamina D povzroči povečano avtoimunost in povečano dovzetnost za okužbe. Vitamin D dejansko zavira proizvodnjo vnetnih citokinov (tj. TNF-a in IFN-γ) in spodbuja sproščanje protivnetnih citokinov. Vitamin D z različnimi mehanizmi zmanjšuje tveganje za mikrobno okužbo in smrt. V nedavnem pregledu so bili ti mehanizmi razvrščeni v tri skupine, vključno s fizično oviro ter prirojeno in prilagodljivo imunostjo [99], Virusi COVIDa-19 motijo celovitost povezave, kar poveča dovzetnost za okužbo z virusom in drugimi mikroorganizmi [101], medtem ko vitamin D podpira vzdrževanje celovitosti celičnega stika [ 105]. Vitamin D je lahko dragocen pri nadzoru citokinske nevihte in poteka bolezni pri bolnikih s COVIDom-2019. Pomanjkanje tega vitamina je vzrok za večje tvegane, zato bi lahko potencialno uporabili dodatke vitamina D [45], Regulacija citokinov pa je odvisna od različnih gorvodnih regulatorjev, kot so cestninsko podobni receptorji (TLR), in ti so povezani z drugimi komponentami prirojenega imunskega sistema, kot so elementi komplementa. TLR so družina prirojenih beljakovin imunskega senzorja, ki imajo ključno funkcijo v procesih okužbe, vnetja in imunosti [103]; pot TLR je lahko pomembno vpletena v citokinsko nevihto, ki se pojavi med okužbo s COVIDom-19. Do danes ni študij o vlogi signalizacije TLR pri okužbi s SARS-CoV-2. Prejšnje študije pa kažejo, da so genetske spremembe znotraj TLR ali signalizacije TLR vplivale na okužbo s SARS-CoV [109, 103, 125, 43],

V izvedbi lahko sestava v okviru predloženega izuma vsebuje aditive, ki se običajno uporabljajo za pripravo farmacevtskih formulacij. Ti lahko vključujejo pH-pufre, želime snovi in stabilizacijske komponente.

Pri izvedbi je pH-pufer izbran iz skupine, ki jo sestavljajo ocetna kislina, led ocetna kislina, mlečna kislina, citronska kislina, fosforjeva kislina, ogljikova kislina, histidin, glicin, barbital, ftalna kislina, adipinska kislina, askorbinska kislina, maleinska kislina, jantarna kislina, vinska kislina, glutaminska kislina, benzojska kislina, asparaginska kislina in soli (npr. kalij, natrij itd.) ali njihove kombinacije. Antioksidant je vključen v primerni količini za oksidacijo odvečnih ionov v formulaciji. V prednostni formulaciji vsebuje antioksidant manj kot približno 10 mas. % celotne formulacije in, še bolj prednostno, od približno 0,05 mas. % do približno 6 mas. % celotne formulacije.

V izvedbeni obliki je sredstvo za želiranje izbrano iz skupine, ki jo sestavljajo ksantan gumi, karagenan, gumi rožičevca, guar guma, modificirane celuloze, nizkoestrificirani pektini in koloidni silicijev dioksid.

Pri izvedbi je stabilizirajoča komponenta formulacije izbrana iz skupine, ki jo sestavljajo vitamin-E a-tokoferol, askorbil palmitat, BHT (butil hidroksitoluen), BHA (butil hidroksi anizol), propil galat ali jabolčna kislina.

Po želji lahko formulacija nadalje vključuje običajne farmacevtske dodatke. Primeri farmacevtskih dodatkov, ki se med drugimi lahko vključujejo, so so-površinsko aktivne snovi (na primer natrijev lavril sulfat), barvila, arome, konzervansi, stabilizatorji in / ali sredstva za zgoščevanje. Formulacija ima lahko tekočo ali poltrdo obliko in jo po želji napolnimo v želatinsko kapsulo. Po dovajanju kapsula poči in sprosti formulacijo. Ko formulacija pride v stik z vodnim okoljem, na primer v prebavilih, formulacija spontano tvori emulzijo. Ena od prednosti izuma je, da se aktivna sredstva s slabo topnostjo v vodi lahko raztopijo in oblikujejo v koristno terapevtsko formulacijo.

Nekatere izvedbe, ki so razkrite v tem dokumentu, se nanašajo na prosto tekoče trdne praške, pripravljene iz tega izuma samo-nano formulacij e SNEDDS. Praški se lahko pripravijo tako, da se nano-formulacija podvrže kapsuliranju, sušenju z nano-brizganjem, tankoslojnemu sušenju ali liofiliziranju; ali s kombiniranjem nano-formulacije z nosilcem, izbranim iz skupine, ki jo sestavljajo mikrokristalna celuloza, oborjeni kremen, brezvodni dvobazni kalcijev fosfat, manitol, hidroksipropil metilceluloza, celuloza in njihove mešanice.

Različne izvedbe se nanašajo na zdravljenje bolezni, izbranih iz skupine, ki jo sestavljajo različni virusi, vnetja, imunskomodulirajoči, osteoartritis, alergija, debelost, nevrodegenerativne motnje, diabetes, rak, kardiovaskularne motnje in mikrobiološke motnje z dajanjem tukaj opisanih nanoemulgirajočih (SNEDDS) formulacij subjektom, ki to potrebujejo.

Razvite so bile različne formulacije z uporabo ene ali kombinacije hidrofobnih spojin skupaj s posamezno ali kombinacijami površinsko aktivnih snovi, ki so tukaj ponazorjene. Po opisu razkrite vsebine s sklicevanjem na nekatere izvedbe bodo drugi izvedbeni primeri strokovnjaku postali očitni iz upoštevanja specifikacije.

Vsebina je nadalje opisana s sklicevanjem na naslednje primere. Strokovnjakom bo razumljivo, da se lahko izvajajo številne modifikacije materialov in metod, ne da bi pri tem odstopali od obsega predstavljene teme.

PRIMERI

Ta izum je nadalje razložen v obliki naslednjih primerov. Vseeno pa treba razumeti, da so zgornji primeri zgolj ilustrativni in jih ni treba jemati kot omejitev obsega izuma. Različne spremembe in modifikacije predstavljenih izvedb bodo znali prepoznati strokovnjaki. Takšne spremembe in modifikacije se lahko izvedejo, ne da bi se odstopalo od obsega izuma.

Primer 1

ArtemiC ™ / CimetrA ™ so lastniške formulacije, usmerjene na zdravljenje simptomov COVIDa-19, ki jihje razvilaMGC Pharma (UK) Ltd., registrska številka: 09750155, Central Working Ecclestone Yards, 25 Ecclestone Plače, London, Združeno kraljestvo, SW1W 9NF

ArtemiC™ je prehransko dopolnilo v micelami obliki, ki je podprto s tehnologijo MyCell™, primemo za sestavo pričujočega izuma, je predstavljeno v patentih US2010/0196456A1 in US 2010/0129453A1 (MiVital, SWISS).

CimetrA™ - armacevtska sestava na nano-samoemulgimih sistemih za dovajanje zdravil (SNEDDS), ki je podprta z GraftBio™ tehnologijo, primerna za sestavo po pričujočem izumu in je opisana v prijavi SIPO na Uradu RS za intelektualno lastnino (2021) P202100024 in prijavi patenta na uradu za patente v Rusiji (2021) W21013724/2021106347 avtorja Victorja Boldueva in sodelavcev (SI).

CimetrA™ je sistem za peroralno samo-nanomulgiranje zdravila (SNEDDS), kije v skladu s tem izumom, ki vsebuje vse sestavine API (kurkumin, bosvelija, artemizinin) kot lipofilno jedro micele in emulgatorje kot lupino micele, vitamin C je stabilizator SNEDDS in regulator pH-vodne faze.

Naslednja formulacija SNEDDS CimetrA™ je najprimernejša (za kapljice, razpršila).

Tabela 1. Formulacija CimetrA™

Formulacija CimetrA™	m/m % vsebnosti
artemizinin	0,6 %	API
bosvelija	1,5 %	API
kurkumin 95 %	2,0 %	API
askorbinska kislina	6,0 %	pomožna snov
kremafor CH-40	20%	emulgator
PEG-400	5%	sotopilo
drugo	neobvezno	pomožna snov
destilirana voda	64,9 %

Kurkumin: uporabljeni izdelek kurkumina je bil izdelek Kurkuma Oleoresin kurkumin v prahu 95 %, ki ima kodo EP-5001 podjetja Green Leaf Extraction Pvt Limited, Kerala, Indija. Kurkumin v prahu je CAS št. 458-37-7 in je naravni izdelek, ki ga dobimo z ekstrakcijo korenike Curcuma Longa s topilom. Vsebnost kurkumina v prahu je po navedbah proizvajalca najmanj 95 %. Ta vsebnost kurkumina se določi po metodi ASTA 18.0.

Bosvelija: izraz bosvelija se nanaša predvsem na izvleček smole rastline kadila. Upoštevajo se lahko zlasti: alfa-bosvelična kislina (številka CAS 471-66-9), beta-bosvelična kislina (številka CAS 631-69-6) in njihovi derivati, 3-O-acetil-alfa-bosvelična kislina (številka CAS 89913-60-0), 3-O-acetil-beta-bosvelična kislina (številka CAS 5968-70-7), 11 -keto-betabosvelična kislina (KBA, številka CAS 17019-92-0), in 3-O-acetil-ll-keto-beta-bosvelična kislina (AKBA, številka CAS 67416-61-9).

Artemizinin, imenovan tudi qinghaosu, je antimalarično zdravilo, pridobljeno iz rastline sladkega pelina, Artemisia annua. Artemizinin je seskviterpenski lakton (spojina, sestavljena iz treh izoprenskih enot, vezanih na ciklične organske estre), ki se destilira iz posušenih listov ali cvetnih grozdov Artemisia annua.

Samoemulgiranje je odvisno od narave para olje / površinsko aktivna snov, koncentracije površinsko aktivne snovi in razmerja olje / površinsko aktivna snov ter temperature, pri kateri pride do samoemulgiranja. Le zelo specifične kombinacije pomožnih snovi vodijo do učinkovitih samoemulgimih sistemov (SNEDDS). Učinkovitost vključitve zdravila v SNEDDS je odvisna od posebne fizikalno-kemijske združljivosti zdravila / sistema. Torej so potrebne študije topnosti in faznega diagrama pred formulacijo, da dobimo optimalno zasnovo formulacije.

Priprava SNEDDS CimetrA™

1. Pripravite in sterilizirajte stekleno posodo za mešanje sestavin (3 posode) in za shranjevanje končnega izdelka.

2. Posoda št. 1

2.1. Pri sobni temperaturi 22-25 °C zmešajte 24 % LINCOLORH 40/CG in 6 % Kollisolv PEG 400. Mešajte 15 minut. Mešanico segrejte na 60 °C.

Vizualni pregled kvalitete. Rezultat: svetlo rumena homogena prozorna zmes.

2.2. Injicirajte 1,5 % bosvelije. Bosvelijo med 15-minutnim mešanjem popolnoma raztopite. Mešanico segrejte na 90 °C.

Vizualni pregled kvalitete. Rezultat: temno rumena homogena prozorna zmes.

2.3. Injicirajte 2,0 % kurkumina. Bosvelijo med 15-minutnim mešanjem popolnoma raztopite. Mešanico segrejete na 95—98 °C.

Vizualni pregled kvalitete. Rezultat: temno rdeča (skoraj črna) homogena zmes.

2.4. Izklopite segrevanje. Med mešanjem pustite, da se zmes ohladi na temperaturo 60

OC

3. Posoda št. 2

3.1. Razplinite (vakuumsko odplinjanje z mešanjem) destilirano vodo.

3.2. V posodo št. 2 nalijte 53,4 % destilirane vode. Segrejte na 50 °C.

3.3. V segreto destilirano vodo dodajte 6 % askorbinske kisline. Askorbinsko kislino raztapljajte 10 minut pri stalnem mešanju in vzdrževanju temperature 50 °C.

Vizualni pregled kvalitete. Rezultat: bistra zmes.

3.4. V segreto destilirano vodo dodajte 0,5 % Kollidon 17PF. Kollidon 17PF raztapljajte minut pri stalnem mešanju in vzdrževanju temperature 50 °C.

Vizualni pregled kvalitete. Rezultat: bistra zmes.

4. V posodo št. 2 počasi vlivajte vsebino posode št. 1. Temeljito mešajte 20 minut in vzdržujte temperaturo 50 °C.

Vizualni pregled kvalitete. Rezultat: temno rdeča homogena neviskozna prozorna zmes.

5. Emulzijo ohladite na sobno temperaturo (20-25 °C).

6. Posoda št. 3

6.1. 0,6 % artemizinina injicirajte v 2,4 % acetona in ga med mešanjem 5 minut pri sobni temperaturi popolnoma raztopite.

Vizualni pregled kvalitete. Rezultat: prozorna zmes.

6.2. V posodo št. 3 dodajte 4,8 % Tween 80 in 1,2 % Kollisolv PEG 400. Mešajte 10 minut.

Vizualni pregled kvalitete. Rezultat: svetlo rumena homogena prozorna zmes.

6.3. Končno zmes dajte iz posode št. 3 v posodo št. 2. Mešajte 20 minut pri sobni temperaturi. Med mešanjem se aceton upari.

7. Nastalo emulzijo vakumirajte 10 minut.

8. Dobljeno nanoemulzijo vlijte v pripravljeno posodo za shranjevanje.

Nastala emulzija vsebuje naslednje API-je (v mas. %):

• artemizinin - 0,6 % • bosvelijo - 1,5 % • kurkumin - 2,0 % • askorbinsko kislino - 6,0 % • destilirano vodo - 53,4 %

Značilnosti emulzije:

• topnost v vodi (tehnologija SNEDDS), • prosojnost (velikost micele je manjša od 50 nm), • nizka viskoznost, visoka pretočnost (zelo primerna za uporabo v razpršilih), • stabilnost med skladiščenjem (ohranjanje vseh lastnosti, tudi brez nastanka usedline, motnosti ali ločevanja faz sestavin).

Diagram poteka za proizvodnjo CimetrA™ je prikazan na shemi (SLIKA 1).

Primer 2

Trdni samoemulgimi / mikroemulgimi sistemi za dovajanje zdravil (S-SNEDDS)

Samoemulgimi / mikroemulgimi sistemi za dovajanje zdravil zahtevajo vgradnjo v kapsule neposredno ali pretvorbo v zrnca, pelete in praške za suho napolnjene kapsule, pa tudi pripravke tablet. Slednje so možne z inovativnimi prilagoditvami običajne opreme s sorazmerno lahkoto in preprostostjo postopka z uporabo metod, kot so granulacija taline, ekstruzija taline, adsorpcija na trdni podlagi, hlajenje z razprševanjem, sušenje z razprševanjem, nadkritične metode na osnovi tekočine in homogenizacija pod visokim tlakom. Pred kratkim so pelete, ki vsebujejo samoemulgime mešanice, pripravljali s tehniko ekstrudiranja in kroženja.

Visoko vsebnost tekoče formulacije lahko naložimo (do 70 %) na nosilec, ki ne samo, da ohranja dobro pretočnost, temveč omogoča tudi izdelavo tablet z dobrimi kohezivnimi lastnostmi in dobro enakomernostjo vsebnosti tako v kapsulah kot v tabletah. To jasno širi možnosti, ki jih ima formulator. Poleg zagotavljanja očitnih prednosti in vivo sistema za dovajanje odmerkov v obliki tablet (izboljšana absorpcija zdravila itd.) je prednost razvoja trdnih dozirnih oblik tudi to, da je mogoče na vsebnik naložiti visoko vsebnost tekoče formulacije in postopek daje dobro vsebinsko enakomernost. Kar zadeva funkcionalnost in učinkovitost, ne smeta vplivati ne na adsorpcijo tekoče formulacije na nosilec, kot tudi ne na stanje zdravila v hpidni formulaciji in na lastnosti topnosti končne trdne dozirne oblike.

Samoemulgiranje je odvisno od narave para olje / površinsko aktivna snov, koncentracije površinsko aktivne snovi in razmerja olje / površinsko aktivna snov ter temperature, pri kateri pride do samoemulgiranja. Le zelo specifične kombinacije pomožnih snovi vodijo do učinkovitih samoemulgimih sistemov (SNEDDS). Učinkovitost vključitve zdravila v SNEDDS je odvisna od posebne fizikalno-kemijske združljivosti zdravila / sistema. Torej so potrebne študije topnosti in faznega diagrama pred formulacijo, da dobimo optimalno zasnovo formulacije.

Razvoj in karakterizacija trdnih SNEDDS CimetrA™

Razmerje adsorbenta in SNEDDS

Ustrezno razmerje adsorbenta Aerosil 200 s tekočim SNEDDS CimetrA™ lahko ustvari prosto tekoče lastnosti trdnega SNEDDS. V tem primeru je enaka količina Aerosil 200 in tekočega SNEDDS CimetrA™ (50/50 % m/m) proizvedla prosto tekoče praške, ki so bili primerni za takojšnje stiskanje tablet. Po drugi strani pa je večja in manjša količina Aerosil200 s tekočim SNEDDS CimetrA™ (33/67 % m/m) ustvarila pomembne prašne in mastne lastnosti prahu.

Prosto tekoče praške lahko dobimo na preprost način z dodajanjem optimalne količine tekoče lipidne formulacije na izbrani nosilec. V primeru so razmerja med tekočimi SNEDDS m Aerosil 200 50/50 (% m/m) proizvedla suh prosto tekoč prah. Med temi razmerji m bilo opaženih bistvenih sprememb zaradi visoke adsorpcijske sposobnosti adsorbenta (Aerosil200) in zadrževanja tekočih SNEDDS v njihovih notranjih porah. Pri vizualnem pregledu so bili na tej točki vsi praški SNEDDS suhi in prosto tekoči, kar kaže na idealno izbiro razmerja 50/50 (% m/m).

Primer 3

Eksperimentalne in klinične preiskave za COVID-19

Podatki o korelaciji med COVIDom-19 in disregulacijo citokinov / kemokinov so še vedno omejeni, vendar sedanje in vitro in klinične študije, ki so na voljo, kažejo na podobnost s poročili o okužbah s SARS in MERS.

Do zdaj so poročali o malo študijah okužbe s SARS-CoV-2. Ena zanimiva študija je primerjala obnašanje SARS-CoV-2 in SARS-CoV v pljučnem tkivu. Raziskovalna skupina je viruse cepila v vzorce človeškega pljučnega tkiva ex vivo in poročala, da je SARS-CoV2 učinkovitejši od SARS-CoV tako pri razmnoževanju kot pri okužbi človeških pljučnih tkiv. Poleg tega je bila okužba s SARS-CoV-2 manj kompetentna za indukcijo ekspresije kakršnih koli IFN, kar kaže na to, da se lahko SARS-CoV in SARS-CoV-2 razlikujeta po svoji zmožnosti nadzora nad sproščanjem vnetnih citokinov in kemokinov. Dejansko se je okužba s SARS-CoV povečala za 11 od 13 vnetnih dejavnikov, preizkušenih v tej študiji, medtem ko je SARS-CoV-2 nadziral le pet izmed njih (tj. CXCL10, IL6, CCL2, CXCL1 in CXCL5), čeprav se je učinkoviteje razmnoževal. Izraženost 12 od 19 med testiranimi geni IFN in citokinov / kemokinov je bila v vzorcih ljudi, okuženih s SARS-CoV-2, bistveno nižja kot vzorci, okuženi s SARS-CoV. Predvsem je transkripcijo CXCL8 povečala le SARS-CoV, ne pa tudi okužba s SARS-CoV-2, medtem ko je bilo pri CXCL10 zaznano ravno nasprotno [19],

Druga raziskovalna skupina je izolirala SARS-CoV-2 pri bolniku z že razvitim COVIDom19 m primerjala virusni tropizem in sposobnost replikacije s SARS, MERS in 2009 pandemično gripo H1N1 (HlNlpdm) v ex vivo vzorcih človeških pljuč in bronhusa. Za oceno zunajpljučne okužbe so avtorji uporabili ex vivo kulture človeškega epitelija veznice (potencialni portali okužbe za SARS-CoV-2) in človeške kolorektalne adenokarcinomske celične linije [135], SARS-CoV-2 je lahko okužil sluznice, trepalnice in palice celic pnevmocitov bronhialnega epitelija tipa 1 v pljučih in sluznici veznice. V bronhiju je bila rephkacija SARS-CoV-2 višja od SARS in podobna MERS in nižja od HlNlpdm. V pljučih je bila rephkacija SARS-CoV-2 primerljiva s SARS in HlNlpdm, vendar nižja od MERS. V konjunktivi je bila rephkacija SARS-CoV-2 boljša od SARS-CoV. SARS-CoV-2 je bil manj učinkovit pri indukciji vnetnih citokinov kot H1N1 in MERS. Tako SARS-CoV kot SARS-CoV-2 se tako primerljivo replicirata v alveolamem epiteliju; SARS-CoV-2 se v bronhiju razmnoži širše kot SARS-CoV. Te ugotovitve podpirajo dragocen vpogled v prenosljivost okužbe s SARS-CoV-2 in razlike med drugimi dihalnimi patogeni [53],

V retrospektivni študiji so ocenili klinične in imunološke značilnosti 21 bolnikov (17 moških in štiri ženske), ki jih je prizadel COVID-19. Ti bolniki so bili v skladu s smernicami Nacionalne zdravstvene komisije Kitajske razvrščeni v različne stopnje resnosti. Zlasti pri 11 bolnikih s hudo obliko se je pokazala znatno povečana vrednost IL-6, IL-10 in TNF-α v serumu v primerjavi z reduciranim absolutnim številom T-limfocitov, CD4 + T celic in CD8 + T celic glede na zmerne primere. Ta retrospektivna opazovalna študija kaže, da lahko okužba s SARS-CoV-2 vključuje predvsem limfocite T, zlasti CD4 + in CD8 + T celice, kar vodi do zmanjšanja števila T limfocitov in tvorbe IFN-γ s CD4 + T celicami. Ti potencialni imunološki označevalci so lahko pomembni zaradi povezanosti z resnostjo bolezni COVID19 [18],

Za karakterizacijo transkripcijskih podpisov gostiteljskega vnetnega odziva na SARS-CoV2 so Xiong in sodelavci izvedli transkriptomsko sekvenciranje različnih vnetnih genov iz RNA, izoliranih iz tekočine bronho-alveolamega izpiranja in mononukleamih celic periferne krvi bolnikov s COVIDom-19. Ta analiza je pokazala različne profile vnetnih citokinskih gostiteljev do okužbe s SARS-CoV-2 in podpira povezavo med patogenezo COVID-19 in nepravilnim sproščanjem citokinov; zlasti CXCL10 je bil reguliran v mononukleamih celicah periferne krvi, vendar niso zaznali nobene regulacije gena CXCL10 v bronhoalveolami tekočini za izpiranje. Poleg tega je SARS-CoV-2 povzročil aktivacijo številnih genov, vključenih v apoptozo in P53, v limfocitih, kar je vodilo v domnevo, da je ta aktivnost lahko glavni vzrok limfopenije, ki jo pogosto zaznamo v primerih COVID-19. Analiza sekvenciranja transkriptomov bolnikov s COVIDom-19 predstavlja pomemben vir za klinične smernice o protivnetnem zdravljenju in za razumevanje molekularnih mehanizmov gostiteljskega odziva [134],

Druga študija, kije vključevala 65 bolnikov, pozitivnih na SARS-CoV-2, je pokazala, da se absolutno število CD4 + in CD8 + T celic in B celic postopoma zmanjšuje glede na povečano resnost bolezni [129]. Poleg tega so Yang in sodelavci analizirali 48 cirkulirajočih citokinov pri 53 bolnikih s COVIDom-19 (34 hudih primerov), 14 pa je pri bolnikih s hudo klinično anamnezo COVID-19 dosegla višje rezultate. Med njimi so bili antagonisti receptorjev CXCL10, CCL7 in IL-1 močno povezani s težjo boleznijo in, kar je še pomembneje, so bile ravni CXCL10 edine, ki so imele pozitivno in pomembno korelacijo z virusno obremenitvijo [137].

Pri 70 bolnikih, ki so preživeli hudo pljučnico COVID-19, jih je 66 pokazalo znatno škodo, kot je pokazala CT-preiskava, opravljena pred odpustom iz bolnišnice. Poškodbe so bile različne: od gostih grudic tkiva, ki ovirajo krvne žile alveolov, do tkivnih lezij. Lezije tkiva lahko predstavljajo znake kronične pljučne bolezni in so lahko nepopravljive, zaradi česar je bolnik ranljiv [130]. Poleg tega imajo lahko ljudje, ki so preživeli ARDS zaradi COVIDa19, trajne pljučne brazgotine [114]. Če pljučna tkiva nadomestimo z brazgotinami, ta ne delujejo več kot običajna pljučna tkiva, kar lahko privede do slabe izmenjave plinov. Podobna škoda je bila zabeležena tudi pri preživelih MERS in SARS, tudi če so te bolezni prizadele le eno krilo pljuč.

Pomembno je upoštevati več dejavnikov pri obvladovanju citokinske nevihte. Nevtralizacija določenega citokina, katerega raven je v obtoku povišana, z obstoječim sredstvom (antiinterlevkin-6, anti-TNF, anti-interferon-γ ali protitelo proti interlevkinu-ΐβ) ne bo vedno učinkovita in blokiranje citokina z nizko ali normalno koncentracijo v obtoku je lahko učinkovito, če je ključna sestavina hipervnetnega vezja ali če je njegova raven v tkivu potencialno povišana.

Poleg tega imajo različne terapije, omenjene v tem pregledu, značilne profile stranskih učinkov in tveganja. Vsa ciljno usmerjena zdravila imajo ciljno specifična tveganja, kombinirano zdravljenje pa ima več potencialnih tveganj kot zdravljenje z enim samim zdravilom. Poleg tega je patološko hipervnetje že samo po sebi imunska pomanjkljivost, ki lahko ogrozi bolnike zaradi okužb, imunosupresivi pa najverjetneje še večajo tveganje. V tej dobi profiliranja citokinov in pri individualizirani medicini je treba bolnike nadzorovati in jim zagotoviti ustrezno profilakso, kadar se empirično zdravijo, za oceno učinkovitosti in varnosti pa je treba vedno izvajati naključna, kontrolirana preskušanja.

Za napredovanje raziskav in zdravljenja citokinske nevihte bo treba združiti vzorce za omične študije in sodelovanje med strokovnjaki v različnih pogojih. Uvedba Mednarodne klasifikacije bolezni, 10. revizija, koda sindroma sproščanja citokinov leta 2021 bi morala olajšati elektronsko raziskovanje naravne zgodovine, patogeneze in zdravljenja na podlagi zdravstvenih kartotek. Ko bo dosežen zadosten znanstveni napredek pri individualiziranem zdravljenju citokinskih neviht, ki ga vodijo biomarkerji, bodo potrebni zanesljivi, hitri in dostopni testi za merjenje topnih mediatorjev vnetja v plazmi in tkivih.

CimetrA

CimetrA je sestavljen iz naravnih aktivnih sestavin in je oblikovan v mikroskopskih strukturah, znanih kot micele. Elementi, ki tvorijo strukturo teh micel, so sami po sebi tudi izključno naravnega izvora. Edinstvena formulacija ima zelo zaželene farmakološke lastnosti, ki zagotavljajo sicer nedosegljivo visoko biološko uporabnost aktivnih sestavin, za katere je namenjena.

Odmerki preskusnih zdravil so opredeljeni v skladu z naslednjim:

• Skupina 1: CimetrA s celotnim odmerkom, ki vsebuje kombinacijo artemizinina 12 mg, kurkumina 40 mg, bosvelije 30 mg in vitamina C 120 mg pri dovajanju razpršila je razdeljen na 4 ločene odmerke, vključno z odmerki ob 2. uri zjutraj in 14. uri popoldan v 48 urah.

• Skupina 2: CimetrA, s celotnim odmerkom, ki vsebuje kombinacijo artemizinina 15,6 mg, kurkumina 52 mg, bosvelije 39 mg in vitamina C 156 mg v razpršilu je razdeljen na 4 ločene odmerke, vključno z odmerki ob 2. uri zjutraj in 14. uri popoldan v 48 urah.

Primer 4

Predklinični podatki

4.1. Študija akutnega toksina

Študija je bila izvedena v predklinični ustanovi SIA - Science in Action, Ness Ziona, Izrael. Science in Action je obvezan spoštovati OECD načela dobre laboratorijske prakse ENV/MC/CHEM (98) 17 za študije toksičnosti; vendar ta študija ne upošteva vseh predpisov o DLP in zato velja za študijo, ki ne velja za DLP. Študija sledi temu protokolu in SOP-jem Science in Action.

Cilj te študije je bil oceniti varnost in toksičnost razpršila CimetrA v manjših odmerkih z brizganjem v ustno votlino.

Ravnanje z živalmi je bilo izvedeno v skladu s smernicami Nacionalnega inštituta za zdravje (NIH) in Združenja za ocenjevanje in akreditacijo laboratorijske oskrbe živali (AAALAC). Živali so bile nameščene v polietilenskih kletkah (3 na kletko), velikosti 35 x 30 x 15 cm, z vrhom iz nerjavečega jekla, kjer je bila peletirana hrana in pitna voda v plastični steklenici; posteljnina: uporabljali so se čisti neoluščeni otrobi, sterilizirani s paro, posteljnina pa se je menjala skupaj s kletko vsaj dvakrat na teden. Študija je bila izvedena po odobritvi Izraelskega odbora za poskuse na živalih v skladu z Izraelskim zakonom o zaščiti živali in Odborom za etiko.

Vsako skupino 3 + 3 podgane smo tretirali z brizganjem v ustno votlino prvi dan z eksperimentalnimi substancami.

Vsako žival so stehtali pred zdravljenjem.

Skupina 1 (n=3M + n = 3 Ž): 50 μΐ fiziološke raztopine na podgano

Skupina 2 (n=3M + n = 3Ž): 48 pg CimetrA / na kg podgane

Skupina 3 (n=3M + n = 3Ž): 96 μ g CimetrA / na kg podgane Skupina 4 (n=3M + n = 3Ž): 192 pg CimetrA / na kg podgane M pomeni podgano moškega spola, Ž pomeni podgano ženskega spola

V vseh 7 dneh poskusa smo živali spremljali in opazovali težo, da bi odkrili pojav nenormalnih kliničnih znakov.

Po 7 dneh smo odvzeli vzorce krvi vseh podgan za celoten hematološki in kemijski panel. Krvi 0,2 za nevezani EDTA test za hematološko ploščo in 0,5 ml za ločljivo epruveto z gelom, do 0,25 ml seruma za ploščo sestave krvne kemije.

Po odvzemu krvi so živali žrtvovali, organe: možgane, pljuča, srce, jetra, vranico in ledvice so odstranili, stehtali in hranili v formalinu 4 % ter poslali na patološki pregled.

4.1.1. Rezultati

Rezultati so prikazani v SLIKAH (SLIKE 2, 3, 4, 5).

Rezultati histopatologije

Odvzeti so bili vzorci (n = 168) jeter, srca, možganov, vranice, hrbtenjače (materničnega, prsnega in ledvenega), išijatičnega živca, ledvic (L + R), pljuč in jezika 24 podgan, fiksiranih v 4 % formaldehidu, ki so prispeli v Patho-Logico v fiksatorju in so ga v fiksativu držali 48 ur za nadaljnjo fiksacijo. Nato so bila tkiva obrezana, vstavljena v kasete za vdelavo in rutinsko obdelana za vdelavo parafina. Za vsako žival je bilo pripravljenih sedem kaset. Parafinske bloke smo razrezali s približno 4 mikroni debeline. Odseke smo položili na steklena stekelca in obarvali s hematoksilinom in eozinom (HinE). Slike so bile posnete z Olympusovim mikroskopom (ΒΧ60, serijska št. 7D04032) pri objektivni povečavi X4 in XI0 in mikroskopsko kamero (Olympus DP73, serija NO. OH05504).

Histološka ocena

Diapozitivi, obarvani s HinE, so bili pregledani, opisani in ocenjeni s pomočjo polkvantitativne razvrstitve petih stopenj (0—4) glede resnosti patoloških sprememb (Schafer in sodelavci):

Ocena 0: Tkivo je videti normalno, brez kakršnih koli sprememb.

1. stopnja: minimalne patološke spremembe.

2. stopnja: blage patološke spremembe.

3. stopnja: zmerne patološke spremembe.

4. stopnja: hude patološke spremembe.

Histopatološka ocena je vključevala primerjavo med zdravljenimi in kontrolnimi ali naivnimi živalmi. Patološke ugotovitve so bile opisane, ocenjene in prikazane na reprezentativnih histoloških slikah. Na zahtevo stranke in samo v posebnih študijah ΤΟΧ so bile vrednosti NOAEL in LOAEL določene po pregledu vseh vzorcev iz kontrolnih in zdravljenih skupin ter primerjavi med vsemi zdravljenimi skupinami (kontrolni, nizki; vmesni in visoki odmerki).

Rezultati

Histopatologija • Na splošno odseki, obarvani s HinE, niso pokazali patoloških sprememb v vseh testiranih vzorcih živali.

• Vranica vseh testiranih živali je bila reaktivna in pokazala je izrazito razraščanje belih pulpnih limfocitov. Vendar se to ne šteje za patološko najdbo in najverjetneje ni povezano s preizkušenim zdravljenjem.

• V mišicah jezika vseh vzorcev so opazili populacijo mastocitov. Te celice so običajno na tem področju; zato se ta najdba ne šteje za patološko. V vseh hrbtenjačah je bila bela snov videti difuzno vakuolizirana. Ta sprememba zaradi postopka dekalsifikacije velja za artefakt. Teh sprememb v odsekih možganov nismo opazili.

• Preučevali smo tudi patološko oceno, vključno z razvrščanjem, pri posameznih živalih v različnih skupinah (SLIKE 6-14).

Povzetek in sklepi

Vsi vzorci so bili videti normalno in niso pokazali nobenih patoloških sprememb.

4.2. Študija in vitro

Cilj študije je bil preučiti učinek CimetrA in njihovih sestavnih delov na sposobnost preživetja mononukleamih celic človeške periferne krvi (PBMC) in njihovo sposobnost oslabitve vnetnega odziva ob stimulaciji z lipopolisaharidom, pridobljenim iz E-coli.

Priprava razredčitev CimetrA in njihovih sestavin v gojišču, kot je navedeno v Tabeli 2.

Tabela 2. Raztopine CimetrA in njegovih sestavin v gojišču

Ime	Koncentracija zalog (%)	Zaloge konc. (mg/ml)	Ciljna konc. v gojiščih (μg/ml)	Faktor redčenja
polna sestava	CimetrA TM	artemizinin	0,6	6	3,704	1620
M vitamin C	1,5	15	9,259	1620
raztopljeni vitamin C	4,5	45	27,778	1620
smola kadilne bosvelije (bosvelija)	1,5	15	9,259	1620
kurkumin	2	20	12,346	1620

		artemizinin	2	20	3,704	5400
	mešanica vitamina	M vitamin C +	1,5	15	9,259	1620
mono komponente	C 6%	raztopljeni vitamin C	4,5	45	27,778	1620
	smola kadilne bosvelije (bosvelija)	2,5	25	9,259	2700
		kurkumin	6 -	60	12,346	4860 ---

Postopek

PBMC smo odtajali in zasejali z gostoto 5x105 celic / vdolbinico v 100 μΐ gojišča.

PBMC smo inkubirali 18 ur pri 370 °C v 5 % CO2.

Za preskus sposobnosti preživetja smo celice po inkubacijskem obdobju 8 minut centrifiigirali pri 300 g in gojišče gojili z gojišči, ki so vsebovali preskusne izdelke same ali v kombinaciji, kot je prikazano v Tabeli 3.

Tabela 3: Skupine zdravljenja

Skupina	Zdravljenje
1	CimetrA™

2	artemizinin
3	kurkumin

4	bosvelija
5	mešanica vitamina C
6	artemizinin + kurkumin
7	artemizinin + bosvelija
8	mešanica artemizinina + vitamina C
9	artemizinin + kurkumin + mešanica vitamina C
Skupina	Zdravljenje
10	artemizinin + kurkumin + bosvelija
11	bosvelija + kurkumin + mešanica vitamina C
12	bosvelija + artemizinin + mešanica vitamina C
13 L___L	kurkumin + bosvelija ----

14	kurkumin + mešanica vitamina C
15	bosvelija + mešanica vitamina C
16	vehikel —

Obdelave smo izvajali v treh izvodih.

Vodnjaki s celicami v gojiščih, ki vsebujejo vodo celične kulture (vehikel), so služili za kontrolo. PBMC smo inkubirali s preskušanci / kontrolo 24 ur pri 37 °C v 5 % CO2. Na koncu inkubacijske dobe so bili PBMC v skladu z navodili proizvajalca ovrednoteni s sposobnostjo preživetja z uporabo testa preživetja celic Real Time-Glo (TM) MT. Za preučevanje protivnetnega učinka so bili PBMC predhodno obdelani s preskušanci posamezno ali v kombinacijah, kot je navedeno v zgornji tabeli, in inkubirani 3 ure pri 37 °C v 5 % CO2. Po inkubacijskem obdobju smo PBMC stimulirali s 100 ng/ml LPS z ali brez testnih elementov in inkubirali 24 ur pri 37 °C v 5 % CO2. Dodatni nabor PBMC, predhodno obdelanih s formulacijo CimetrA, smo sočasno stimulirali z 10 ng / ml LPS s formulacijo CimetrA in inkubirali 24 ur pri 370 °C v 5 % CO2. PBMC, obdelani samo z LPS 10 ng/ml, so služili za kontrolo. Na koncu inkubacijske dobe smo zbrali kondicionirane medije in jih podvrgli analizi citokinov z uporabo kompleta za testiranje magnetnega lumineksa za TNFa, IL-IRa, IL-Ιβ, IL-6 in IL-2 v skladu z navodili proizvajalca.

4.2.1. Rezultati

Rezultati so prikazani na sliki (SLIKA 15).

Izločanje citokinov

Koncentracija TNF-a, IL-IRA, IL-Ιβ, IL-6 in IL-2 v kondicioniranem mediju s PBMC po predhodni obdelavi s preskušanci 3 ure in sočasni stimulaciji z LPS 24 ur je bila ovrednotena z uporabo testa Human Magnetic Luminex (SLIKE 16-20).

Zaključki

V študiji in vitro na inducirani celični kulturi je CimetrA potrdil sposobnost preprečevanja citokinskih neviht.

Primer 5

Klinični podatki

Naključno nadzorovano klinično preskušanje na zmerno hospitaliziranih bolnikih s COVIDom-19 je bilo izvedeno v Izraelu in Indiji. V študijo je bilo vključenih 50 bolnikov, 33 v skupini za zdravljenje in 17 v skupini, kije prejemala placebo. 40 bolnikov so vključili v študijo v treh bolnišnicah v Izraelu in 10 v eni bolnišnici v Indiji.

Namen študije: ta študija je bila zasnovana za oceno varnosti in učinkovitosti zdravila CimetrA pri bolnikih z diagnozo COVID-19.

Končne točke študije

Primarni rezultati • Čas do kliničnega izboljšanja, opredeljen kot nacionalna ocena zgodnjega opozarjanja 2 (NEWS2) od <1= 2, je trajal 24 ur v primerjavi z rutinskim zdravljenjem.

• Odstotek udeležencev z določenimi ali verjetnimi neželenimi učinki, povezanimi z zdravili.

Sekundami rezultati:

• Čas do negativnega PCR.

• Delež udeležencev z normalizacijo vročine in nasičenosti s kisikom do 14. dne od začetka simptomov.

• Nadzorovana klinična študija III. faze, namenjena oceni učinka CimetrA pri bolnikih z diagnozo COVID-19.

• Preživetje, povezano s COVIDom-19.

• Pogostost in trajanje mehanskega predihavanja.

• Incidenca bivanja na oddelku intenzivne nege.

• Trajanje bivanja na oddelku intenzivne nege.

• Trajanje dovajanja dodatnega kisika.

Sl • Za dopolnitev osnovnega sklopa rezultatov bodo zabeleženi dodatni podatki.

Populacija, zajeta v študijo

Merila za vključitev

1. Potrjena okužba s SARS-CoV-2.

2. Hospitaliziran bolnik s COVIDom-19 zmerno stabilne ali poslabšane resnosti, ki ne potrebuje sprejema na oddelek za intenzivno nego in po drugi strani nima kliničnega izboljšanja ob stalni standardni negi.

3. Starost je 18 let in več.

4. Preiskovanci morajo biti pod nadzorom ali sprejeti v nadzorovani objekt ali bolnišnico (domača karantena ne zadostuje).

5. Imajo možnost zdravljenja s pršenjem v ustno votlino.

Merila za izključitev

1. Hranjenje po cevi ali parenteralna prehrana.

2. Bolnik, ki potrebuj e oskrbo s kisikom poleg uporabe šob ali preproste maske po oceni 4.

3. Dekompenzacija dihal, ki zahteva mehansko predihavanje.

4. Nekontroliran diabetes tipa 2.

5. Avtoimune bolezni

6. Nosečnice ali doječe matere.

7. Potreba po sprejetju na oddelek za intenzivno nego med sedanjo hospitalizacijo kadar koli pred zaključkom sodelovanja v študiji.

8. Kakršen koli pogoj, ki bi po mnenju glavnega preiskovalca preprečil polno udeležbo v tem preskušanju ali bi motil oceno končnih točk preskušanja.

Metodologija

Študija, nadzorovana z več središči. 50 odraslih bolnikov, ki trpijo za okužbo s COVIDom19. Varnost so ocenili z zbiranjem in analizo neželenih dogodkov, laboratorijskimi preiskavami krvi in urina ter vitalnimi znaki. Po presejalnem obisku so zdravilo prejemali dvakrat na dan zjutraj in zvečer (vsakih 12 ur) med (1. dan in 2. dnevom). Bolniki so bili naključno izbrani v razmerju 2 : 1 za preskušano zdravilo in standardno oskrbo oziroma placebo in standardno oskrbo. Študija je trajala 2 tedna do zaključka 15. dne ali do odpusta iz bolnišnice, skratka, glede na to, kar je nastopilo pozneje. V primeru odpusta iz bolnišnice v obdobju izvajanja študije se je po protokolu nadaljevalo do 15. dne, ne glede na to, kje je bil preiskovanec. V primeru daljše hospitalizacije več kot 15 dni so osebe še naprej spremljali glede varnosti in končnih točk do odpusta. Osnovne značilnosti bolnikov so predstavljene v Tabeli 4.

Tabela 4. Izhodiščne značilnosti skupin, ki so prejemale zdravilo, in skupin, ki so prejemale placebo.

	Cimetr A™	Placebo	P
Starost	52±14	53± 14	0,857
Spol:
moški	17(52)	8(47)
ženski	15 (46)	9(53)	0,708
Rasa:
azijska	9(27)	1(6)
bela	23 (70)	16(94)	0,139
Kajenje:
trenutno	5(15)	3(18)
v
preteklosti	1(3)	3(18)
nikoli	26 (79)	11(65)	0,277

Alkoholna pijača:
občasno	2(6)	0
tedensko	0	1(6)
nikoli	30(91)	16(94)	0,321

Podatki o učinkovitosti

NEWS analiza rezultatov

Vseh 33 bolnikov v obravnavani skupini je imelo pri zadnjem merjenju rezultate NEWS manj ali enake 2, v primerjavi s samo 12 od 17 v skupini s placebom; P=0,015.

Pri povprečnem rezultatu NEWS pri prvem obisku ni bilo nič drugače, medtem ko je bil pri zadnjem merjenju bistveno nižji rezultat. Glejte Tabelo 5.

Tabela 5. NEWS Sprememba ocene v obeh obravnavanih skupinah

Statistika skupin
	Skupine	St.	Povprečje	Standardno odstopanje	Standardno povprečje napak	P
skupek NEWS 1	CimetrA	33	1.5152	2.00189	.34848
placebo	17	1.8824	2.05798	.49913	0.546
končne NEWS	CimetrA	33	.5152	.66714	.11613
placebo	17	2.2353	3.19236	.77426	0.042

V analizi ITT z uporabo imputacije v zadnjem delu opazovanja seje med skupinama pojavila bistvena razlika (SLIKA 21).

Sobni zrak ali dodatni 02 pri bolnikih je predstavljen v Tabeli 6.

Tabela 6. Sobni zrak ali dopolnilni 02 s strani pacientov

	Obisk 1	Med študijo	Nazadnje opaženo
CimetrA n=33	4 bolniki	4 bolniki	0 bolnikov
Placebo n=17	3 bolniki	5 bolnikov	4 bolniki

Varnostni podatki

Med študijo niso poročali o nobenih neželenih učinkih ali neželenih učinkih, povezanih z zdravili.

Zaključki

Klinična študija faze lije pokazala popoln profil varnosti in učinkovitosti zdravila CimetrA, podkrepljen z rezultati predklinične študije.

Primer 6

Pakiranje in označevanje zdravila

Formulacije CimetrA bodo hranjene v neprozornih steklenicah z razpršilom pri sobni temperaturi in označene v skladu z GCP in lokalnimi zahtevami MoH.

Formulacije CimetrA bodo pakirane in označene z dvodelnimi nalepkami. Prvi del bo trdno pritrjen na stekleničko, drugi del pa bo ločljiv in bo priložen zapisu o odgovornosti za zdravila v CRF, ko se bo dovajal CimetrA. Nalepka bo vsebovala naslednje podatke:

• številka protokola, • odmerek, • številka serije, • datum proizvodnje, • datum ponovnega preizkusa.

• naziv sponzorja, • navodila za uporabo in shranjevanje, • izjava »Samo za uporabo v preizkusih«.

6.1. Dobava, distribucija in odprema

MGC in / ali njegov pooblaščenec bo preskušane izdelke dobavil na klinično mesto. Preizkušeni izdelek bo proizvajalo podjetje MGC pod proizvodnimi pogoji EU-GMP in bo zadostno za dokončanje preskusa.

Vsaka pošiljka, poslana v študijo, bo vsebovala obrazec pošiljke, ki opisuje vsebino pošiljke. Ta obrazec bo pomagal voditi tekoče in natančne podatke v evidenci. Ko pošiljko prejme, bo preiskovalec, koordinator ali farmacevt potrdil njeno vsebino in potrdil prejem zalog preskušenega izdelka s podpisom obrazca za pošiljko in pošiljanjem po faksu na predstavnika MGC. Če se po prihodu na preiskovalno mesto zaloge preskušenega izdelka poškodujejo ali manjkajo, je treba takoj kontaktirati MGC.

6.2. Skladiščenje, razdeljevanje in vračilo preiskovalnih izdelkov

Vsi preiskovalni proizvodi, poslani v študijski center, morajo biti shranjeni pod določenimi pogoji na varnem območju, dostopnem samo preiskovalcu in pooblaščenemu osebju. Vse preiskovalne izdelke je treba hraniti in popisovati v skladu z veljavnimi vladnimi predpisi in študijskimi postopki. Temperaturo je treba vzdrževati med 20-25 °C.

Prazne steklenice je treba vrniti sponzorju, da jih uniči ali zavrže kot kemično nevarne odpadke v skladu z lokalnimi predpisi.

6.3. Odgovornost in skladnost preiskovanih izdelkov

Skladnost osebe z režimom doziranja zdravila v preskušanju bo ocenilo študijsko osebje, ki bo upravljalo zdravila v preskušanju.

V študijskem centru se bo uporabljal dnevnik odgovornosti za zdravila za vodenje natančnih evidenc preiskovanih zalog zdravil v centru (datum in količina, ki jo je prejel preiskovalec, datumi dajanja preiskovancem, datumi, ko se neuporabljena zdravila vrnejo sponzorju ali so odstranjena).

Preiskovalec ali imenovani uslužbenec bo odgovoren za vodenje natančnih evidenc o količini in datumih vseh prejetih, upravljanih in vrnjenih zalog preskuševalnih izdelkov. Prav tako je treba upoštevati in dokumentirati količino izgubljenega, pogrešanega, uničenega itd. izdelka v preskušanju. Na koncu študije mora biti mogoče uskladiti evidence o dobavi z evidencami o uporabi in vrnjenih zalogah. V primeru odstopanj je treba navesti račune.

Vladni predpisi zahtevajo, da se vsi preskusni materiali, ki se ne uporabljajo v kliničnih preskušanjih, vrnejo sponzorju pred ali ob zaključku študije. Preiskovalec bo vrnil določene kopije izpolnjenega razdeljevalnega in inventarnega zapisa, kot je navedeno na obrazcu.

NAVEDENI VIRI

1. Ammon, H. P. T. Boswellic acids (compounds of francincense) as active principles for the treatment of chronic inflammatory diseases. Wien. Med. Wochenschr. 152, 373-378 (2002).

2. Ammon, H. P. T. Boswellic acids and their role in chronic inflammatory diseases. vol. 928 (2016).

3. Ammon, H. P. T., Mačk, T., Singh, G. B. in Safayhi, H. Inhibition of leukotriene B4 formation of rat peritoneal neutrophils by an ethanolic extract ofthe gum resin exudate of Boswellia serrata. Planta Med. 57, 203-207 (1991).

4. Bai, L. in sodelavci. Immunosuppressive effect of artemisinin and hydroxychloroquine combination therapy on IgA nephropathy via regulating the differentiation of CD4+ T celi subsets in rats. Int. Immunopharmacol. 70, 313-323 (2019).

5. Balkwill, F., Mantovani, A. Inflammation and cancer: back to Virchov? Lancet. 2001; 357:539—545. [PubMed] [Google Scholar]

6. Bamard, D. L., Kumaki, Y. (2011). Recent developments in anti-severe acute respiratory syndrome coronavirus chemotherapy. Future Virol 6(5):615-631. https://d0i.0rg/l 0.2217/fvl. 11.33

7. Bastard, P., Rosen, L. B., Zhang, Q. in sodelavci. Auto-antibodies against type IIFNs in patients with life-threatening COVID-19. Science 2020, 24. september (V elektronski obliki.).

8. Behrens, E. M., Koretzky, G. A. Review: cytokine storm syndrome: looking toward theprecision medicine era. Arthritis Rheumatol 2017; 69:1135-1143.

9. Belouzard, S., Millet, J. K., Licitra, B. N., Whittaker, G. R. (2012). Mechanisms of coronavirus celi entry mediated by the viral špike protein. Viruses 4(6):1011-1033. https://doi.org/10.3390/v4061011

10. Bronte, V., Ugel, S., Tinazzi, E. in sodelavci. Baricitinib restrains the immune dysregulation in patients with severe COVID-19. J Ciin Invest 2020. 3. november (V elektronski obliki.).

11. Campbell, J. D., Cole, M., Bunditrutavom, B. in Vella, A. T. Ascorbic acid is apotent inhibitor of various forms ofT celi apoptosis. Celi. Immunol. 194, 1-5 (1999).

12. Cao, R., Hu, H., Li, Y„ Wang, X., Xu, M., Liu, J., Zhang, H., Yan, Y., Zhao, L., Li, W. in sodelavci. Anti-SARS-CoV-2potential of artemisinins in vitro. ACS Infect. Dis. 2020; 6:2524-2531. doi: 10.1021/acsinfecdis.0c00522. [PMC free article] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

13. CAO, H. W. in sodelavci. Effect of artemisinin on lung injury in septic rats. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2007(10): 31.

14. Caricchio, R., Gallucci, M., Dass, C. in sodelavci. Preliminarypredictive criteriafor COVID-19 cytokine storm. Ann Rheum Dis 2020, 25. september (V elektronski obliki.).

15. Carracedo, A., Gironella, M., Lorente, M. in sodelavci. Cannabinoids induce apoptosis of pancreatic tumor celiš via endoplasmic reticulum stress-related genes. Cancer Res. 2006; 66:6748—6755. [PubMed] [Google Scholar]

16. Cascella, M., Rajnik, M., Cuomo, A„ Dulebohn, S. C., Di Napoli, R. (2020). Features, evaluation and treatment coronavirus (COVID-19). V: Statpearls [internet]. StatPearls Publishing.

17. Channappanavar, R., Perlman, S. (2017). Pathogenic human coronavirus infections: causes and consequences of cytokine Storm and immunopathology. V: Seminars in immunopathology vol 39. Springer Berlin Heidelberg., str. 529-539. doi: https://d0i.0rg/l 0.1007/s00281 -017-0629-χ

18. Chen, G., Wu, D., Guo, W., Cao, Y., Huang, D., Wang, H. in sodelavci. Clinical and immunological features of severe and moderate Coronavirus disease 2019. J Ciin Investig. (2020) 130:2620-9. doi: 10.1172/JCI137244

19. Chu, H., Chan, J. F. W., Wang, Y., Yuen. TT-T, Chai, Y., Hou, Y., in sodelavci. Comparative replication and immune activationprofiles ofSARS-CoV-2 andSARS-CoVin human lungs: an ex vivo study with implications far the pathogenesis ofCOVID- 19. Ciin Infect Dis. (2020): ciaa410. doi: 10.1093/cid/ciaa410 (V elektronski obliki.).

20. Cianchi, F., Papucci, L., Schiavone, N. in sodelavci. Cannabinoidreceptor activation induces apoptosis through tumor necrosis factor a-mediated ceramide de novo synthesis in colon cancer celiš. Ciin Cancer Res. 2008; 14:7691-7700. [PubMed] [Google Scholar]

21. Cravatt, B. F., Giang, D. K., Mayfield, S. P., Boger, D. L., Lemer, R. A., Gilula, N. B. Molecular characterization of an enzyme that degrades neuromodulatory fatty-acid amides. Nature. 1996; 384:83-87. [PubMed] [Google Scholar]

22. Cytokine Storm in COVID-19: “When You Come Out ofthe Storm, You Won ’t Be the Same Person Who Walked in 2020 Vanessa Castelli, Annamaria Cimini, Claudio Ferril0.3389/fimmu.2020.02132 Frontiers in Immunology.

23. D’alessandro, S. in sodelavci. The use of antimalarial drugs against viral infection. Microorganisms 8, (2020).

24. Dairaku, L, Han, Y., Yanaka, N. in Kato, N. Inhibitory effect of curcumin on IMP dehydrogenase, the target far anticancer and antiviral chemotherapy agents. Biosci. Biotechnol. Biochem. 74, 185-187 (2010).

25. De Jesus, A. A., Hou, Y., Brooks, S. in sodelavci. Distinct interferon signatures and cytokine patterns define additional systemic autoinflammatory diseases. J Ciin, Invest 2020;130:1669-1682.

26. De Luca, G., Cavalli, G., Campochiaro, C. in sodelavci. GM-CSF blockade with mavrilimumab in severe COVID-19 pneumonia and systemic hyperinflammation: a singlecentre, prospective cohort study. Lancet Rheumatol 2020; 2(8): e465-e473.

27. Debnath, M., Banerjee, M., Berk, M. Genetic gateways to COVID-19 infection: implications for risk, severity, and outcomes. FASEB J. (2020) 34:8787-95. doi: 10.1096/fj .202001115R.

28. Del Valle, D. M., Kim-Schulze, S., Huang, H-H. in sodelavci. An inflammatory cytokine signaturepredicts COVID-19 severity andsurvival. Nat Med 2020; 26:1636-1643.

29. DeMorrow, S., Glaser, S., Francis, H. in sodelavci. Opposing actions of endocannabinoids on cholangiocarcinoma growth: recruitment of Fas and Fas ligand to lipid rafts. J Biol Chem. 2007; 282:13098-13113. [PubMed] [Google Scholar]

30. Efferth, T. in sodelavci. The antiviral activities of artemisinin and artesunate. Ciin. Infect. Dis. 47, 804-811 (2008).

31. Efferth, T., Wilhnar Schwabe Award 2006: Antiplasmodial andantitumor activity of artemisinin - From bench to bedside. Planta Med. 73, 299-309 (2007).

32. EFSA. Overview on Dietary Reference Values for the EUpopulation as derived by the EFSA Panel on Dietetic Products, Nutrition andAllergies (NDA). (2017).

33. Elfiky, A. A. (2020). Anti-HCV, nucleotide inhibitors, repurposing against COVID19. Life Sci 248:117477. https://doi.Org/10.1016/j.lfs.2020.l 17477

34. Espinoza, J. A., P. A. Gonzalez in A. M. Kalergis. Modulation of Antiviral Immunity by Heme Oxygenase-1. The American Journal of Pathology, 2017. 187(3): 487^493.

35. Etzel, R. Special extract of BOSWELLIA serrata (H15) in the treatment of rheumatoid arthritis. Phytomedicine 3, 91-94 (1996).

36. F. A. Gallant, Azoulay, D. Roberge. Hair-Sparing Whole Brain IMRT and Topical Tempol in Patients with Brain Metastases: A Prospective Phase II Trialfor the Prevention of latrogenic Alopecia. International J. Radiation Oncology, letnik 81, številka 2, dodatek, S677, 1. oktober, 2011. https://www.redjoumal.org/article/S0360-3016(11)01759-7/fulltext 37. Fajgenbaum, D. C., Khor, J. S., Gorzewski, A. in sodelavci. Treatments administered to the first 9152 reported cases of COVID-19: a systematic review. Infect DisTher 2020; 9:435-149.

38. Fajgenbaum, D. C., June, C. H. (2020). Cytokine Storm. New England Journal of Medicine, 383(23), 2255-2273.

39. Farsalinos, K., Barbouni, A., Niaura, R. (2020-05-09). Systematic review of the prevalence of current smoking among hospitalized COVID-19 patients in China: could nicotine be a therapeutic option? Intemal and Emergency Medicine. 15 (5): 845-852.

40. Galve-Roperh, L, Sanchez, C., Cortes, M. L. in sodelavci. Anti-tumoral action of cannabinoids: involvement of sustained ceramide accumulation and extracellular signalregulated kinase activation. Nat Med. 2000;6:313-319. [PubMed] [Google Scholar]

41. Gao, T., Hu, M., Zhang, X., Li, H., Zhu, L., Liu, H. in sodelavci. Highly pathogenic coronavirus N protein aggravates lung injury by MASP-2-mediated complement overactivation. Infect Dis (except HTV/AIDS). (2020). doi: 10.1101/2020.03.29.20041962.

42. George, K. L., Saltman, L. H., Stein, G. S., Lian, J. B., Zurier, R. B. Ajulemic acid, a nonpsychoactive cannabinoid acid, suppresses osteoclastogenesis in mononuclear precursor celiš and induces apoptosis in mature osteoclast-like celiš. J Celi Physiol. 2008; 214:714-720. [PubMed] [Google Scholar]

43. Gralinski, L. E., Menachery, V. D., Morgan, A. P., Totura, A. L., Beall, A., Kocher, J. in sodelavci. Allelic variation in the toll-like receptor adaptor protein Ticam2 contributes to SARS-Coronavirus pathogenesis in mice. G3. (2017) 7:1653-63. doi: 10.1534/g3.117.041434.

44. Gralinski, L. E., Sheahan, T. P., Morrison, T. E., Menachery, V. D., Jensen, K., Leist, S. R, in sodelavci. Complement activation contributes to severe acute respiratory syndrome Coronaviruspathogenesis. mBio. (2018) 9: e01753-18. doi: 10.1128/mBio.01753-18.

45. Grant, W. B., Lahore, H., McDonnell, S. L., Baggerly, C. A., French, C. B., Aliano, J. L. in sodelavci. Evidence that vitamin D supplementation could reduce risk ofinfluenza and COVID-19 infections anddeaths. Nutrients. (2020) 12:988. doi: 10.3390/nul2040988.

46. Guzman, M. Cannabinoids: potential anticancer agents. Nat Rev Cancer. 2003; 3:745-755. [PubMed] [Google Scholar]

47. Hashiba, T. in sodelavci. Adenovirus-mediated transfer ofheme oxygenase-l cDNA attenuates severe lung injury induced by the influenza virus in mice. Gene Therapy, 2001. 8(19): 1499-1507.

48. Hermine, O., Mariette, X., Tharaux, P. L. in sodelavci. Effect of tocilizumab vs usual čare in adults hospitalized with COVID-19 and moderate or severe pneumonia: a randomized clinical trial. JAMA Intem Med 2020 October 20 (V elektronski obliki.)

49. Ho, Τ-Υ., Wu. S-L., Chen, J-C., Li, C-C., Hsiang, C-Y. (2007). Emodin blocks the SARS coronavirus špike protein and angiotensin-converting enzyme 2 interaction. Antiviral Res 74(2):92-101. https://doi.Org/10.1016/j.antiviral.2006.04.014

50. Hojyo, S., Uchida, M., Tanaka, K., Hasebe, R., Tanaka, Y., Murakami, M., Hirano, T. (2020-10-01). How COVID-19 induces cytokine Storm with high mortality. Inflammation and Regeneration. 40: 37.

51. Huang, C., Wang, Y., Li, X. in sodelavci. Clinical features of patients infected with 2019 novel coronavirus in Wuhan, China. Lancet 2020; 395: 497-506.

52. Huang, K-J., Su, I-J., Theron, M. in sodelavci. An interferon-gamma-related cytokine storm in SARSpatients. J Med Virol 2005;75:185-194.

53. Hui, K. P. Y., Cheung, M-C., Perera, R. A. P. M., Ng, K-C., Bui, C. H. T., Ho, J. C. W. in sodelavci. Tropism, replication competence, and innate immune responses of the coronavirus SARS-CoV-2 in human respiratory tract andconjunctiva: an analysis in ex-vivo and in-vitro cultures. Lancet Respir Med. (2020) 8:687-95. doi: 10.1016/S22132600(20)30193-4.

54. Hurlimann, D., Enseleit, F., Ruschitzka, F. Rheumatoid arthritis, inflammation, and atherosclerosis. Herz. 2004; 29:760-768. [PubMed] [Google Scholar]

55. Isacchi, B. in sodelavci. Artemisinin and artemisinin plus curcumin liposomal formulations: enhanced antimalarial efficacy against Plasmodium berghei-infected mice. European journal of pharmaceutics and biopharmaceutics. 2012. 80(3): 528-534.

56. Isacchi, B. in sodelavci. Conventional and long-circulating liposomes of artemisinin: preparation, characterization, and pharmacokinetic profile in mice. Journal of liposome research, 2011. 21(3): 237-244.

57. Jia, W., Hegde, V. L., Singh, N. P. in sodelavci. A9-tetrahydrocannabinol-induced apoptosis in Jurkat leukemia T celiš is regulated by translocation of Bad to mitochondria. Mol Cancer Res. 2006;4: 549-562. [PubMed] [Google Scholar]

58. Julien, B., Grenard, P., Teixeira-Clerc, F. in sodelavci. Antifibrogenic role ofthe cannabinoid receptor CB2 in the liver. Gastroenterology. 2005; 128:742-755. [PubMed] [Google Scholar]

59. Keller, M. J., Kitsis, E. A., Arora, S. in sodelavci. Effect of systemic glucocorticoids on mortality or mechanical ventilation in patients with COVID-19. J HospMed 2020; 15:489-493.

60. Klok, F. A., Kruip, M. J. H. A., Van der Meer, N. J. M. in sodelavci. Confirmation of the high cumulative incidence of thrombotic complications in critically ill ICUpatients with COVID-19: an updated analysis. Thromb Res 2020; 191:148-150.

61. Lauder, S. N., Jones, E., Smart, K. in sodelavci. Interleukin-6 limits influenzainduced inflammation and protects against fatal lung pathology. Eur JImmunol 2013; 43: 2613-2625.

62. Letko, M., Marži, A., Munster, V. (2020). Functional assessment of celi entry and receptor usage for SARS-CoV-2 and other lineage B betacoronaviruses. Nat Microbiol 5: 562-569. https://d0i.0rg/l 0.1038/s41564-020-0688-y

63. Ligresti, A., Bisogno, T., Matias, I. in sodelavci. Possible endocannabinoid control of colorectal cancer growth. Gastroenterology. 2003; 125: 677-687. [PubMed] [Google Scholar]

64. Lips, P., Cashman, K. D., Lamberg-Allardt, C., Bischoff-Ferrari, H. A., ObermayerPietsch, B., Bianchi, M. L. in sodelavci. Current vitamin D status in European and Middle East countries and strategies to prevent vitamin D deficiency: a position statement of the European calcified tissue society. Eur J Endocrinol. (2019) 180: 23-54. doi: 10.1530/EJE18-0736.

65. Lombard, C., Nagarkatti, M., Nagarkatti, P. S. Targeting cannabinoid receptors to treat leukemia: role of cross-talk between extrinsic and intrinsic pathways in Δ9tetrahydrocannabinol (THC)-induced apoptosis of Jurkat celiš. Leuk Res. 2005; 29: 915922. [PubMed] [Google Scholar]

66. Lu, B. W. in sodelavci. More than anti-malarial agents: therapeutic potential of artemisinins in neurodegeneration. Neural regeneration research, 2019. 14(9): 1494.

67. Lucas, C., Wong, P., Klein, J. in sodelavci. Longitudinal analyses reveal immunological misfiring in severe COVID-19. Nature 2020; 584: 463—469.

68. Luo, W. in sodelavci. Clinical pathology of critical patient with novel coronavirus pneumonia (COVID-19). Pathology in Pathobiology, 2020.2020020407.

69. Majeed, J., Ajmera, P., Goyal, R. K. (2020). Delineating clinical characteristics and comorbidities among 206 COVID-19 deceasedpatients in India: Emerging significance of renin angiotensin system derangement. Diabetes Res Ciin Pract. https://doi.org/10.1016/j .diabres.2020.108349

70. Malfait, A. M., Gallily, R., Sumariwalla, P. F. in sodelavci. The nonpsychoactive cannabis constituent cannabidiol is an oral anti-arthritic therapeutic in murine collageninduced arthritis. Proč Natl Acad Sci USA. 2000; 97: 9561-9566. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

71. Mamytbekova, A., Rezabek, K., Kacerovska, H., Grimova, J., Svobodova, J. Antimetastatic effect of flurbiprofen and other platelet aggregation inhibitors. Neoplasma. 1986; 33: 417-421. [PubMed] [Google Scholar]

72. Massa, F., Marsicano, G., Hermann, H. in sodelavci. The endogenous cannabinoid systemprotects against colonic inflammation. J Ciin Invest. 2004; 113: 1202-1209. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

73. Mathew, D., Giles, J. R., Baxter, A. E. in sodelavci. Deep immune profiling of COVID-19 patients reveals distinct immunotypes with therapeutic implications. Science 2020;369(6508): eabc851 l-eabc8511.

74. McKallip, R. J., Lombard, C., Fisher, M. in sodelavci. Targeting CB2 cannabinoid receptors as a novel therapy to treat malignant lymphoblastic disease. Blood. 2002; 100: 627-634. [PubMed] [Google Scholar]

75. Moghadamtousi, S. Z. in sodelavci. A reviev/ on antibacterial, antiviral, and antifungal activity of curcumin. BioMed Res. Int. 2014, 186864-186864 (2014).

76. Mohsin K., Alamri R., Ahmad A., Raish M., Alanazi F. K., Hussain M. D. (2016). Development of self-nanoemulsifying drug delivery systems far the enhancement ofsolubility and oral bioavailability of fenofibrate, a poorly water-soluble drug. Int. J. Nanomed. 11 2829-2838. 10.2147/IJN.S104187

77. Moore, J. B., June, C. H. Cytokine release syndrome in severe COVID-19. Science 2020; 368: 473-474.

78. Nagarkatti, P., Pandey, R., Rieder, S. A., Hegde, V. L., in Nagarkatti, M. (2009). Cannabinoids as novel anti-inflammatory drugs. Future medicinal chemistry, 1(7), 1333— 1349. https://doi.org/10.4155/fmc.09.93.

79. Naidu, K. A. Vitamin C in human health and disease is stili a mystery? An overview. in Functional Foods: The Connection Between Nutrition, Health, and Food. Science 145168 (2013). doi:10.1201/bl6307.

80. Neurath, M. F., Fuss, L, Kelsall, B. L., Stuber, E., Strober, W. Antibodies to interleukin 12 abrogate established experimental colitis in mice. J Exp Med. 1995; 182:1281—1290. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

81. Okayasu, L, Hatakeyama, S., Yamada, M., Ohkusa, T., Inagaki, Y., Nakaya, R. A novel method in the induction of reliable experimental acute and chronic ulcerative colitis in mice. Gastroenterology. 1990; 98: 694-702. [PubMed] [Google Scholar]

82. Omosa, L. K., Midiwo, J. O. in Kuete, V. Chapter 19 - Curcuma longa. in Medicinal Spices and Vegetables from Africa (ed. Kuete, V.) 425—435 (Academic Press, 2017). doi:10.1016/B978-0-12-809286-6.00019-4.

83. Osei-Hyiaman, D., DePetrillo, M., Pacher, P. in sodelavci. Endocannabinoid activation at hepatic CB1 receptors stimulates fatty acid synthesis and contributes to dietinduced obesity. J Ciin Invest. 2005; 115:1298-1305. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

84. Parker, J., Atez, F., Rossetti, R. G., Skulas, A., Patel, R., Zurier, R. B. Suppression of human macrophage interleukin-6 by a nonpsychoactive cannabinoid acid. Rheumatol Int. 2008; 28: 631-635. [PubMed] [Google Scholar]

85. Patel, B., Sharma, S., Nair, N. in sodelavci. Therapeutic opportunities of edible antiviralplants for COVID-19. Mol Celi Biochem (2021). https://doi.org/10.1007/sll010021-04084-7

86. Pertwee, R. G. Cannabinoids and the gastrointestinal tract. Gut. 2001; 48: 859-867. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

87. Pratt, A. G., Isaacs J D, Mattey, D. L. Current concepts in the pathogenesis of early rheumatoid arthritis. Best Pract Res Ciin Rheumatol. 2009; 23: 37—48. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

88. Proctor, P. Endothelium-Derived Relaxing Factor andMinoxidil: Active Mechanisms in Hair Growth. Archives of Dermatology 125(8): 1146 (1989) https://www.researchgate.net/publication/20399661_Endothelium-

Derived_Relaxing_Factor_and_Minoxidil_Active_Mechanisms_in_Hair_Growth

89. Proctor, P. Review: Free Radicals and Human Disease, “CRC Handbook of Free Radicals and Antioxidantsf št. 1, (1989), 209-221.

https ://www.researchgate.net/publication/23 5 353 860_Free_Radicals_and_Human_Disease _A_review_CRC_Handbook_of_Free_Radicals_and_Antioxidants_vol_l_1989_p209-221 90. Proctor, P. (2020). Tempol Treatment of Covid-19. Free Radical Biology and Medicine. 159. S95. 10.1016/j.freeradbiomed.2020.10.245.

91. Prompetchara, E., Ketloy, C., Palaga, T. (2020). Immune responses in COVID-19 and potential vaccines: Lessons learned from SARS and MERS epidemic. Asian Pac J Allergy Immunol 38(1):1-9. https://doi.org/10.12932/AP-200220-0772

92. Ragad, D. (16. junij 2020). The COVID-19 Cytokine Storm; What we know so far. Front. Immunol. 11: 1446.

93. Devraj, R., Williams, H. D., Dallas, B. W., Mullertz, A., Porter, C. J. H., Pouton, C. W. In vitro digestion testing of lipid-based delivery systems: Calcium ions combine with fatty acids liberated from triglyceride rich lipid Solutions to form soaps and reduce the solubilization capacity of colloidal digestion products. International Journal of Pharmaceutics, Letnik 441, Št. 1-2, 2013, 323-333, ISSN 0378-5173, https://doi.Org/10.1016/j.ijpharm.2012.ll.024.

94. Reddy, B. U., Mullick, R., Kumar, A., Sudha, G., Srinivasan, N., Das S (2014). Small molecule inhibitors of HCV replication from pomegranate. Sci Rep 4: 5411. https://doi.org/10.1038/srep05411

95. Rizk, J. G., Kalantar-Zadeh, K., Mehra, M. R., Lavie, C. J., Rizk, Y., Forthal, D. N. Pharmaco-Immunomodulatory Therapy in COVID-19. Drugs. 2020, september; 80(13): 1267-1292. doi: 10.1007/s40265-020-01367.

96. Rizzo, P., Dalla Sega, F. V., Fortini, F., Marracino, L., Rapezzi, C., Ferrari, R. (2020). COVID-19 in the heart andthe lungs: couldwe “Notch ” the inflammatory Storm? Basic Res Cardiol 115(3):31. https://doi.org/10.1007/s00395-020-0791-5

97. Rodriguez-Garcia, J. L., Sanchez-Nievas, G., Arevalo-Serrano, J., Garcia-Gomez, C., Jimenez-Vizuete, J. M., Martinez-Alfaro, E. Baricitinib improves respiratory function in patients treated with corticosteroids for SARS-CoV-2 pneumonia: an observational cohort study. Rheumatology (Oxford), 6. oktober 2020 (V elektronski obliki.).

98. Romero, M. R. in sodelavci. Antiviral effect of artemisinin from Artemisia annua against a model member of the Flaviviridae family, the bovine viral diarrhoea virus (BVDV). PlantaMed. 72, 1169-1174 (2006).

99. Rondanelli, M., Miccono, A., Lamburghini, S., Avanzato, L, Riva, A., Allegrini, P. in sodelavci. Self-care for common colds: the pivotal role of vitamin D, vitamin C, zine, and Echinacea in three main immune Interactive clusters (Physical Barriers, Innate and Adaptive Immunity) involved during an episode of common colds—practical advice on dosages and on the time to take these Nutrients/Botanicals in order to prevent or treat common colds. Evid Based Complement Altemat Med. (2018) 2018: 1-36. doi: 10.1155/2018/5813095.

100. Roschewski, M., Lionakis, M. S., Sharman, J. P. in sodelavci. Inhibition ofBruton tyrosine kinase in patients with severe COVID-19. Sci Immunol 2020;5(48): eabdOHOeabdOl10.

101. Rossi, G. A., Fanous, H., Colin, A. A. Viral strategies predisposing to respiratory bacterial superinfections. Pediatr Pulmonol. (2020) 55: 1061-73. doi: 10.1002/ppul.24699.

102. Ryter, S. W. in Choi, A. M. Targeting heme oxygenase-l and carbon monoxide for therapeutic modulation of inflammation. Translational Research, 2016. 167(1): 7-34.

103. Sallenave, J-M., Guillot, L. Innate immune signaling andproteolyticpathways in the resolution or exacerbation of SARS-CoV-2 in Covid-19: key therapeutic targetsl Front Immunol. (2020) 11:1229. doi: 10.3389/fimmu.2020.01229.

104. Sarfaraz, S., Adhami, V. M., Syed, D. N., Afaq, F., Mukhtar, H. Cannabinoids for cancer treatment: progress and promise. Cancer Res. 2008; 68: 339-342. [PubMed] [Google Scholar]

105. Schwalfenberg, G. K. A review of the critical role of vitamin D in the functioning of the immune system and the clinical implications of vitamin D deficiency. Mol Nutr Food Res. 2011 Jan;55(l): 96—108. doi: 10.1002/mnfr.201000174. V elektronski obliki. 7. september, 2010. PMID: 20824663.

106. Schweizer, S. in sodelavci. Workup-dependent formation of 5-lipoxygenase inhibitory boswellic acid analogues. J. Nat. Prod. 63, 1058-1061 (2000).

107. Scotti, N., Buonaguro, L., Tomesello, M. L., Cardi, T., Buonaguro, F. M. (2010). Plant-based anti-HIV-1 strategies: vaccine molecules and antiviral approaches. Expert Rev Vaccines 9(8): 925-936. https://doi.org/10.1586/erv.10.79

108. Shahba, Ahmad in Ahmed, A. in Kazi, Mohsin in Abdel-Rahman, S. in Alanazi, Fars. (2017). Solidification of cinnarizine self-nanoemulsifying drug delivery systems by fluidbed coating: Optimization of the process and formulation variables. Die Pharmazie. 72. 143— 151. 10.1691/ph.2017.6089.

109. Shea, M. K., Benjamin, E. J., Dupuis, J., Massaro, J. M., Jacques, P. F., D’Agostino, R. B. in sodelavci. Genetic and non-genetic correlates of vitamins K and D. Eur J Ciin Nutr. (2009) 63: 458-64. doi: 10.1038/sj.ejcn.l602959.

110. Shimizu, M., Nakagishi, Y., Yachie, A. Distinct subsets of patients with systemic juvenile idiopathic arthritis based on their cytokineprofiles. Cytokine 2013; 61: 345-348.

111. Siddiqui, M. Z. Boswellia serrata, apotential antiinflammatory agent: An overview. Indian J. Pharm. Sci. 73, 255-261 (2011).

112. Sinha, P., Matthay, M. A., Calfee, C. S. Is a “cytokine storm” relevant to COVID19? 3 ΜΛΑ Intem Med 2020; 180: 1152-1154.

113. Small, B. A., Dressel, S. A., Lawrence, C. W., Drake, D. R. III, Stoler, M. H., Enelow, R. L, Braciale, T. J. (2001). CD8+ T cell-mediated injury in vivo progresses in the absence of effector T celiš. J Exp Med 194(12): 1835—1846.

https://doi.org/10.1084/jem.194.12.1835

114. Spagnolo, P., Balestro, E., Aliberti, S., Cocconcelli, E., Biondini, D., Časa, G. D. in sodelavci. Pulmonary fibrosis secondary to COVID-19: a call to arms? Lancet Respir. Med. (2020) 8: 750-2. doi: 10.1016/S2213-2600(20)30222-8.

115. Srinivas, L., Vellichirammal, N. N., Alex, A. M. in sodelavci. Pro-inflammatory cytokines and their epistatic interactions in genetic susceptibility to schizophrenia. J Neuroinflammation 13, 105 (2016). https://doi.org/10.1186/sl2974-016-0569-8

116. Sterne, J. A. C., Murthy, S., Diaz, J. V. in sodelavci. Association between administration of systemic corticosteroids and mortality among critically Ul patients with COVID-19: a meta-analysis. JAMA 2020; 324: 1330-1341.

117. Stoermer, K. A., Morrison, T. E. Complement and viral pathogenesis. Virology. (2011)411: 362-73. doi: 10.1016/j.virol.2010.12.045.

118. Stone, J. H., Frigault, M. J., Serling-Boyd, N. J. in sodelavci. Efficacy of tocilizumab in patients hospitalized with Covid-19. N Engl J Med 2020, 21. oktober. DOI: 10.1056/NEJMoa2028836.

119. Sumariwalla, P. F., Gallily, R., Tchilibon, S., Fride, E., Mechoulam, R., Feldmann, M. A novel synthetic, nonpsychoactive cannabinoid acid (HU-320) with antiinflammatory properties in murine collagen-induced arthritis. Arthritis Rheum. 2004; 50: 985-998. [PubMed] [Google Scholar]

120. Tang, Y., Liu, J., Zhang, D., Xu, Z., Ji, J., Wen, C. (2020-07-10). Cytokine Storm in COVID-19: The Current Evidence and Treatment Strategies. Frontiers in Immunology. 11: 1708.

121. Teixeira-Clerc, F., Julien, B., Grenard, P. in sodelavci. CB1 cannabinoid receptor antagonism: a new strategy for the treatment ofliver fibrosis. Nat Med. 2006; 12: 671-676. [PubMed] [Google Scholar]

122. The RECOVERY Collaborative Group. Dexamethasone in hospitalizedpatients with Covid-19 —preliminary report. N Engl J Med. DOI: 10.1056/NEJMoa2021436.

123. Tian, S., Hu W., Niu, L., Liu, H., Xu, H., Xiao, S-Y. (2020). Pulmonary pathology of early phase 2019 novel coronavirus (COVID-19) pneumonia in two patients with lung cancer. J Thorac Oncol 15(5): 700-704. https://doi.Org/10.1016/j.jtho.2020.02.010

124. Tomar, B., Anders, H-J, Desai, J., Mulay, S. R. (2020). Neutrophils and neutrophil extracellular traps drive necroinflammation in COVID-19. Celiš 9(6): 1383. https://doi.org/10.3390/cells9061383

125. Totura, A. L., Whitmore, A., Agnihothram, S., Schafer, A., Katze, M. G., Heise, M. T. in sodelavci. Toll-like receptor 3 signaling via TRIF contributes to a protective innate immune response to severe acute respiratory syndrome Coronavirus infection. mBio. (2015) 6:e00638-15. doi: 10.1128/mBio.00638-15.

126. Tu, Y. Artemisinin—A Gift from Traditional Chinese Medicine to the World (Nobel Lecture). Angew. Chem. - Int. Ed. 55, 10210-10226 (2016).

127. Vercruysse, F., Bametche, T., Lazaro, E. in sodelavci. Adult-onset Stili's disease biological treatment strategy may depend on the phenotypic dichotomy. Arthritis ResTher 2019; 21: 53-53.

128. Wan, Y., Shang, J., Graham, R., Barič, R. S., Li, F. (2020). Receptor recognition by the novel Coronavirus from Wuhan: an analysis based on decade-long structural studies of SARS Coronavirus. J Virol 94(7):e00127-el 120. https://doi.Org/10.l 128/JVI.00127-20

129. Wang, F., Hou, H., Luo, Y., Tang, G., Wu, S., Huang, M. in sodelavci. The laboratory tests and host immunity of COVID-19 patients with different severity of illness. JCI Insight. (2020) 5:el37799. doi: 10.1172/jci.insight. 137799.

130. Wang, Y., Dong, C., Hu, Y., Li, C., Ren, Q., Zhang, X. in sodelavci. Temporal changes of CT findings in 90 patients with COVID-19 pneumonia: a longitudinal study. Radiology. (2020) 296: E55-64. doi: 10.1148/radiol.2020200843

131. Wilcox; C. S. (2010). Effects of tempol and redox-cycling nitroxides in models of oxidative stress. Pharmacology in therapeutics, 126(2), 119-145.

https://doi.Org/10.1016/j.pharmthera.2010.01.003

132. Wood, J. D., Alpers, D. H., Andrews, P. L. Fundamentals of neurogastroenterology. Gut. 1999;45(dodatek 2): II6-II16. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar] 133. www.tempol.info

134. Xiong, Y., Liu, Y., Cao, L., Wang, D., Guo, M., Jiang, A. in sodelavci. Transcriptomic characteristics of bronchoalveolar lavage fluid and peripheral blood mononuclear celiš in COVID-19 patients. Emerg Microbes Infect. (2020) 9:761-70. doi: 10.1080/22221751.2020.1747363.

135. Xu, Z., Shi, L., Wang, Y., Zhang, J., Huang, L., Zhang, C., Liu, S., Zhao, P., Liu, H., Zhu, L. (2020). Pathological findings of COVID-19 associated with acute respiratory distress syndrome. Lancet Respir Med 8(4):420^22. https://doi.org/10.1016/S22132600(20)3 0076-Χ

136. Yamada, Y., Marshall, S., Specian, R. D., Grisham, M. B. A comparative analysis of two models of colitis in rats. Gastroenterology. 1992; 102:1524-1534. [PubMed] [Google Scholar]

137. Yang, Y., Shen, C., Li, J., Yuan, J., Yang, M., Wang, F. in sodelavci. Exuberant elevation of IP-10, MCP-3 and IL-lra during SARS-CoV-2 infection is associated with disease severity and fatal outcome. Infect Dis (except HIV/AIDS). (2020). doi: 10.1101/2020.03.02.20029975. (V elektronski obliki.)

138. Ye, Q„ Wang, B., Mao, J. (2020). The pathogenesis and treatment of the cytokine storm in COVID-19. J Infect 8(6):607-613. https://doi.Org/10.1016/j.jinf.2020.03.037

139. Zhang, Q., Bastard, P., Liu, Z. in sodelavci. Inborn errors of type IIFN immunity in patients with life-threatening COVID-19. Science 2020 September 24(V elektronski obliki.) 140. Zhang, W., Zhao, Y., Zhang, F. in sodelavci. The use of anti-inflammatory drugs in the treatment ofpeople with severe coronavirus disease 2019 (COVID-19): theperspectives of clinical immunologists from China. Ciin Immunol 2020; 214:108393-108393.

141. Zhu, Z., Cai, T., Fan, L. in sodelavci. Clinical value of immune-inflammatory parameters to assess the severity of coronavirus disease 2019. Int J Infect Dis 2020; 95:332339.

142. Zurier, R. B., Rossetti, R. G., Burstein, S. H., Bidinger, B. Suppression of human monocyte interleukin-ΐβ production by ajulemic acid, a nonpsychoactive cannabinoid. Biochem Pharmacol. 2003; 65:649-655. [PubMed] [Google Scholar]

Claims (12)

1. Nova nanomicelama farmacevtska sinergijska sestava, ki vključuje kurkumin, bosvelijo, artemizinin, vitamin C in opcijsko kanabinoide in nitrokside TEMPO.

2. Nova nanomicelama farmacevtska sinergijska sestava po zahtevku 1, označena s tem, da vključujeterapevtsko učinkovito količino

a) kurkumina od 0,1-5 ut. %, bosvelije od 0,1-5 ut. %, artemizinina od 0,1-3 ut. %, vitamina C od 0,1-6 ut. % in

b) opcijsko kanabinoide od 0,1-5 ut. % in/ali nitrokside TEMPO od 0,1-2 ut. %.

3. Nova nanomicelama farmacevtska sinergijska sestava po zahtevku 1,, označena s tem, da so aktivne farmacevtske sestavine naravni proizvodi, sintetično pridobljeni proizvodi ali njihova mešanica.

4. Nova nanomicelama farmacevtska sinergijska sestava po zahtevku 1, označena s tem, da je kapsulirana v micelami farmacevtsko sprejemljivi nanonosilec sistema za dovajanje zdravil s samo-emulgimimi lastnostmi - SNEDDS.

5. Nova nanomicelama farmacevtska sinergijska sestava po zahtevku 1, označena s tem, da je v tekoči obliki kot na primer peroralno razpršilo ali kapljice za sluznico.

6. Nova nanomicelama farmacevtska sinergijska sestava po zahtevku 1, označena s tem, da je v trdni obliki, kot na primer prah, pri čemer so primerni materiali kot farmacevtsko sprejemljivi nosilci sladkorji, kot so laktoza, glukoza in saharoza; škrobi, kot sta koruzni škrob in krompirjev škrob; celuloza in njeni derivati, kot so natrijeva karboksimetil celuloza, etil celuloza in celulozni acetat; slad; želatina; smukec; kot tudi druga nestrupena kompatibilna maziva, kot sta natrijev lavril sulfat in magnezijev stearat, pa tudi barvila, sredstva za sproščanje, sredstva za prevleko, sladila, arome in parfumi.

7. Nova nanomicelama farmacevtska sinergijska sestava po zahtevku 1, označena s tem, da opcijsko vključuje konzervanse in antioksidante.

8. Nova nanomicelama farmacevtska sinergij ska sestava po zahtevku 1 z antioksidativnimi, protivnetnimi, imunskomodulirajočimi, protivirusnimi in protirakavimi lastnostmi za zdravljenje več terapevtskih indikacij.

9. Nova nanomicelama farmacevtska sinergijska sestava po zahtevku 1 za zdravljenje vnetne motnje, ki se nanaša na bolezen ali stanje, za katerega je značilno kronično vnetje, vključno z, vendar ne omejeno na, revmatoidnim artritisom, osteoartritisom, juvenilnim revmatoidnim artritisom, psoriatičnim artritisom, neodzivnim revmatoidnim artritisom, kroničnim nerevmatoidnim artritisom, osteoporozo / resorpcijo kosti, koronarno srčno boleznijo, aterosklerozo, vaskulitisom, ulceroznim kolitisom, psoriazo, Crohnovo boleznijo, sindromom dihalne stiske pri odraslih, preobčutljivostnimi motnjami kožne zakasnitve, sindromom septičnega šoka in vnetnimi črevesnimi boleznimi.

10. Nova nanomicelama farmacevtska sinergijska sestava po zahtevku 1 za imunomodulacijo z uravnavanjem cirkadianega ritma v telesu, povečanjem imunskega odziva na bakterijske, virusne, glivične in parazitske okužbe, nadomeščanje ali preoblikovanje poškodovanega tkiva s spodbujanjem rasti fibroblastov in uničevanje nekaterih tumorjev.

11. Nova nanomicelama farmacevtska sinergijska sestava po zahtevku 1 za zdravljenje hudega akutnega respiratornega sindroma koronavirusa, pridruženega koronavirusa COVID-19, težke oblike gripe, citokinsko nevihto in alopecijo po COVIDu.

12. Nova nanomicelama farmacevtska sinergijska sestava po zahtevku 1 za zdravljenje različnih oblik raka s pospeševanjem presnove številnih reaktivnih kisikovih vrst in izboljševanjem biološke uporabnosti dušikovega oksida ter ščitenjenjem normalnih celic pred sevanjem, ob hkratnem ohranjanju občutljivost tumorskih celic na sevanje.