SE458121B - Stabiliserad komposition samt foerfarande foer stabilisering - Google Patents
Stabiliserad komposition samt foerfarande foer stabiliseringInfo
- Publication number
- SE458121B SE458121B SE8504970A SE8504970A SE458121B SE 458121 B SE458121 B SE 458121B SE 8504970 A SE8504970 A SE 8504970A SE 8504970 A SE8504970 A SE 8504970A SE 458121 B SE458121 B SE 458121B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- inositol
- triphosphate
- myo
- group
- composition according
- Prior art date
Links
- 239000012620 biological material Substances 0.000 title description 5
- MMWCIQZXVOZEGG-HOZKJCLWSA-N [(1S,2R,3S,4S,5R,6S)-2,3,5-trihydroxy-4,6-diphosphonooxycyclohexyl] dihydrogen phosphate Chemical compound O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](O)[C@H]1OP(O)(O)=O MMWCIQZXVOZEGG-HOZKJCLWSA-N 0.000 claims abstract description 57
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 12
- -1 enzyme Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 8
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 claims abstract description 6
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 claims abstract description 6
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims abstract description 6
- YDHWWBZFRZWVHO-UHFFFAOYSA-H [oxido-[oxido(phosphonatooxy)phosphoryl]oxyphosphoryl] phosphate Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O YDHWWBZFRZWVHO-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims abstract description 5
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 229940028435 intralipid Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 4
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 4
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 claims abstract description 3
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 claims abstract description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 29
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 claims description 23
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 claims description 22
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 claims description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 10
- GKDKOMAJZATYAY-GCVPSNMTSA-N [(1r,2s,4r,5r)-2,3,4-trihydroxy-5,6-diphosphonooxycyclohexyl] dihydrogen phosphate Chemical compound OC1[C@H](O)[C@@H](OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H]1O GKDKOMAJZATYAY-GCVPSNMTSA-N 0.000 claims description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 8
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 claims description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims description 7
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 6
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 claims description 6
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 claims description 4
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims description 4
- MMWCIQZXVOZEGG-XJTPDSDZSA-N D-myo-Inositol 1,4,5-trisphosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1OP(O)(O)=O MMWCIQZXVOZEGG-XJTPDSDZSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 3
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 claims description 3
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 claims 2
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 claims 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 claims 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 abstract 1
- 230000003019 stabilising effect Effects 0.000 abstract 1
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 14
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 14
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- IMQLKJBTEOYOSI-UHFFFAOYSA-N Phytic acid Natural products OP(O)(=O)OC1C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C1OP(O)(O)=O IMQLKJBTEOYOSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 11
- IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N Inositol-hexakisphosphate Chemical compound OP(O)(=O)O[C@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H]1OP(O)(O)=O IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 10
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 10
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 10
- 229940068041 phytic acid Drugs 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 7
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 7
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 7
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 7
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- INAPMGSXUVUWAF-GCVPSNMTSA-N [(2r,3s,5r,6r)-2,3,4,5,6-pentahydroxycyclohexyl] dihydrogen phosphate Chemical compound OC1[C@H](O)[C@@H](O)C(OP(O)(O)=O)[C@H](O)[C@@H]1O INAPMGSXUVUWAF-GCVPSNMTSA-N 0.000 description 6
- FENRSEGZMITUEF-ATTCVCFYSA-E [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].OP(=O)([O-])O[C@@H]1[C@@H](OP(=O)([O-])[O-])[C@H](OP(=O)(O)[O-])[C@H](OP(=O)([O-])[O-])[C@H](OP(=O)(O)[O-])[C@H]1OP(=O)([O-])[O-] Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].OP(=O)([O-])O[C@@H]1[C@@H](OP(=O)([O-])[O-])[C@H](OP(=O)(O)[O-])[C@H](OP(=O)([O-])[O-])[C@H](OP(=O)(O)[O-])[C@H]1OP(=O)([O-])[O-] FENRSEGZMITUEF-ATTCVCFYSA-E 0.000 description 6
- 229940083982 sodium phytate Drugs 0.000 description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 5
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 5
- 108010011619 6-Phytase Proteins 0.000 description 4
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 4
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 4
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 4
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 235000012055 fruits and vegetables Nutrition 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 4
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M salicylate Chemical compound OC1=CC=CC=C1C([O-])=O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 229960001860 salicylate Drugs 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- RVBUGGBMJDPOST-UHFFFAOYSA-N 2-thiobarbituric acid Chemical compound O=C1CC(=O)NC(=S)N1 RVBUGGBMJDPOST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CTPQAXVNYGZUAJ-GCVPSNMTSA-N D-myo-inositol-1,2,3,5,6-pentaphosphate Chemical compound OC1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H]1OP(O)(O)=O CTPQAXVNYGZUAJ-GCVPSNMTSA-N 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 102000000587 Glycerolphosphate Dehydrogenase Human genes 0.000 description 3
- 108010041921 Glycerolphosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 3
- CTPQAXVNYGZUAJ-UHFFFAOYSA-N Inositol pentaphosphate Natural products OC1C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C1OP(O)(O)=O CTPQAXVNYGZUAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- RNBGYGVWRKECFJ-ZXXMMSQZSA-N alpha-D-fructofuranose 1,6-bisphosphate Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@](O)(COP(O)(O)=O)O[C@@H]1COP(O)(O)=O RNBGYGVWRKECFJ-ZXXMMSQZSA-N 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 3
- 229940025237 fructose 1,6-diphosphate Drugs 0.000 description 3
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N n-[4-(1,3-benzoxazol-2-yl)phenyl]-4-nitrobenzenesulfonamide Chemical class C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CC=C(C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C=C1 SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229950006238 nadide Drugs 0.000 description 3
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 3
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 3
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 3
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000141359 Malus pumila Species 0.000 description 2
- 240000008790 Musa x paradisiaca Species 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical group OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 2
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 2
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- PAFZNILMFXTMIY-UHFFFAOYSA-N cyclohexylamine Chemical compound NC1CCCCC1 PAFZNILMFXTMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000030609 dephosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006209 dephosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- GNGACRATGGDKBX-UHFFFAOYSA-N dihydroxyacetone phosphate Chemical compound OCC(=O)COP(O)(O)=O GNGACRATGGDKBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- SFNALCNOMXIBKG-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol monododecyl ether Chemical compound CCCCCCCCCCCCOCCO SFNALCNOMXIBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 2
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 238000005502 peroxidation Methods 0.000 description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- 229940085127 phytase Drugs 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- XRIBIDPMFSLGFS-UHFFFAOYSA-N 2-(dimethylamino)-2-methylpropan-1-ol Chemical compound CN(C)C(C)(C)CO XRIBIDPMFSLGFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LMSDCGXQALIMLM-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid;iron Chemical compound [Fe].OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O LMSDCGXQALIMLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 2-deoxy-D-ribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)CC=O ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 235000018290 Musa x paradisiaca Nutrition 0.000 description 1
- UEEJHVSXFDXPFK-UHFFFAOYSA-N N-dimethylaminoethanol Chemical compound CN(C)CCO UEEJHVSXFDXPFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-L NADH(2-) Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-L 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SLINHMUFWFWBMU-UHFFFAOYSA-N Triisopropanolamine Chemical compound CC(O)CN(CC(C)O)CC(C)O SLINHMUFWFWBMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MMWCIQZXVOZEGG-GTTIYYRPSA-N [(1R,2R,3R,4S,5R,6S)-2,3,5-trihydroxy-4,6-diphosphonooxycyclohexyl] dihydrogen phosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](O)[C@H]1OP(O)(O)=O MMWCIQZXVOZEGG-GTTIYYRPSA-N 0.000 description 1
- GKDKOMAJZATYAY-UYSNGIAKSA-N [(1s,2r,4s,5r)-2,3,4-trihydroxy-5,6-diphosphonooxycyclohexyl] dihydrogen phosphate Chemical compound OC1[C@H](O)[C@@H](OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H]1O GKDKOMAJZATYAY-UYSNGIAKSA-N 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 235000021016 apples Nutrition 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000021015 bananas Nutrition 0.000 description 1
- ITHZDDVSAWDQPZ-UHFFFAOYSA-L barium acetate Chemical compound [Ba+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O ITHZDDVSAWDQPZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 159000000009 barium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 description 1
- BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N cadmium atom Chemical compound [Cd] BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 1
- ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N diethanolamine Chemical compound OCCNCCO ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000003676 hair loss Effects 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000007970 homogeneous dispersion Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N hydroxyl Chemical compound [OH] TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 159000000014 iron salts Chemical class 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 238000010525 oxidative degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003014 phosphoric acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 235000002949 phytic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L3/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs
- A23L3/34—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals
- A23L3/3454—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
- A23L3/3463—Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
- A23L3/3553—Organic compounds containing phosphorus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23B—PRESERVING, e.g. BY CANNING, MEAT, FISH, EGGS, FRUIT, VEGETABLES, EDIBLE SEEDS; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES; THE PRESERVED, RIPENED, OR CANNED PRODUCTS
- A23B7/00—Preservation or chemical ripening of fruit or vegetables
- A23B7/14—Preserving or ripening with chemicals not covered by groups A23B7/08 or A23B7/10
- A23B7/153—Preserving or ripening with chemicals not covered by groups A23B7/08 or A23B7/10 in the form of liquids or solids
- A23B7/154—Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/66—Phosphorus compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/24—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen, halogen, nitrogen or sulfur, e.g. cyclomethicone or phospholipids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
- C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
- C07F9/09—Esters of phosphoric acids
- C07F9/117—Esters of phosphoric acids with cycloaliphatic alcohols
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Description
458 121 10 20 25 30 35 2 i ledvätskorna innan den har gett den önskade effekten. av fria radikaler Förutom den negativa effekten på stabiliteten hos läkemedel och biologiska material kan fria radika- ler även öka dessa produkters toxicitet, ligtvis är ett mycket allvarligt problem. vilket natur- Mycket intensiva forskningsansträngningar har gjorts under många âr för att finna ett effektivt och ej giftigt stabiliseringsmedel för organiska subst- ratf såsom läkemedel och biologiska material. het har detta arbete inte givit I allmän- det önskade resultatet.
I US patentskriften 2 723 938 beskrivs en annan typ av stabilisering än den enligt föreliggande upp- finning. Sålunda visas enligt denna patentskrift an- vändningen av inositolhexafosfat (IP6), särskilt nat- riumfytat för stabilisering av dispergerbarheten hos vattenhaltiga suspensioner av olöslíg penicillin även efter långvarig lagring. Användningen av detta natrium- fytat sägs säkerställa att kort manuell skakning kommer att återupprätta ett tillstànd med fullständig och homogen dispersion av penicillinet. Emellertid rappor- teras ingen effektivitet vid stabilisering mot oxida- tiv nedbrytning förorsakad av fria radikaler. förelse med IP I jäm- 3-stabiliseringsmedlen enligt föreliggande uppfinning är IP6 mindre effektiv som stabiliserings- medel mot nedbrytning av organiska substrat. Dessutom är användningen av IP6 även kraftigt begränsad på grund av påverkan på mineralbalansen hos djur inklusive människor, vilket begränsar användningen därav i kompo- sitioner som skall administreras till mänskliga värdar.
Bnligt föreliggande uppfinning har en stabiliserad komposition omfattande organiska substrat, såsom läke- Den stabili- serade kompositionen kännetecknas av att den innehåller inositoltrifosfat, IP medel och biologiska system, àstadkommits. 3, i en stabiliserande mängd.
Den lämpliga stabiliserande mängden av IP3 skall bestämmas genom rutinförsök för erhållande av optimala 10 15 20 25 30 35 458 121 3 värden. T ex kan accelererat åldringstest genomföras med ett testsubstrat på olika nivåer av IP3 och den optimala nivån bestämmas därigenom. I allmänhet ger minst 0,001 vikt% IP3 en viss gynnsam effekt. Vanligen används 0,01-2 vikt%. baserat på kompositionens vikt Stabiliseringsmedlet är huvudsakligen avsett fria radi- olika sätt, att användas mot nedbrytning förorsakad av kaler. Sådana fria radikaler kan bildas på t ex_genom metaller, såsom järn, aluminium och kadmium, och genom strålning.
Emellertid är stabiliseringsmedlet även avsett att användas mot nedbrytning förorsakad av oxidation och hydrolys. Oxidationen kan förorsakas av fria radika- ler såsom nämnts ovan. Emellertid kan oxidationen även bero på andra mekanismer. Därför täcker uppfin- ningen stabilisering mot oxidation, hydrolys eller strålning, vilken mekanism som än ligger bakom reaktio- nen.
Stabiliseringsmedlet kan användas för stabilise- ring av många olika läkemedel, varav kan nämnas insulin, vacciner, hyaluronsyra, intralipid, prostaglandin och hormoner. Även många olika biologiska material kan stabi- liseras enligt uppfinningen. Emellertid väljs det biologiska materialet företrädesvis bland DNA, rekom- binant DNA, RNA, nukleinsyror, biologisk vävnad, trans- plantat, kolväten, lipider, membran, proteiner, såsom enzymer och plasmaproteiner, kulturmedier för mikro- blodinnehàllande subst- insemi- organismer, cellkulturmedier, rat, blod för transfusion, näringssubstrat, nationsmedier, mikroorganismer, fröer, växtdelar, spèrer, frukter och livsmedel.
Enligt en lämplig metod för framställning av IP3 bryts ett material innehållande IP med fytasenzym. IP 6 ned enzymatiskt 6 kan föreligga antingen som rent material eller i form av en IP6-innehållande källa, såsom vetekli. Fytasenzym kan exempelvis återfinnas 458 121 kf! 10 15 20 25 30 35 4 i växter, fröer och mikroorganismer.
Med den enzymatiska behandlingen av IP6 äger en hydrolys rum, vilken resulterar i en blandning av olika lägre inositolfosfat, dvs inositolpentafosfat (IPS), inositoltetrafosfat (IP4), inositoltrifosfat (IP3), inositoldifosfat (IP2) och inositolmonofosfat (IPI).
Vanligen genomföres hydrolysen vid en temperatur av 2Q-70°C och ett pH-värde av 4-8. Hydrolysen avbryts lämpligen när frigöringen av ca 30-60% av den totala esterfosforn har uppnåtts. På detta stadium har en hög andel av den önskade IP3-isomeren eller -isomererna bildats genom hydrolys av det IP6-innehållande materia- let.
Den erhållna blandningen av inositolfosfat kan därefter separeras genom kromatografi för isolering av den IP3-innehållande fraktionen. Företrädesvis görs detta i en kolonn. Om IP3-fraktionen innehåller mer än en isomer separeras dessa isomerer i ett ytter- ligare kromatografiskt separationssteg.
IP3 kan erhållas som ett salt eller som en syra därav. Saltformen föredrages, eftersom det är lättare att framställa i ren och koncentrerad form än syran.
Saltformen av LP3-isomeren kan lätt erhållas från syraformen med användning av standardförfaranden.
Sålunda kan man framställa salter, såsom alkalimetall- salter och alkaliska jordartsmetallsalter, t ex av litium, natrium, kalium, kalcium eller magnesium.
Emellertid är även aluminium-, zink- och järnsalter mycket användbara såväl som NH4+- och organiska amin- salter. Exempel på aminer är trietanolamin, dietanol- amfn; triisopropanolamin, N,N-dimetyl-2-amino-2-metyl-- -l-propanol, N,N-dimetyl-etanolamin, tetrabutylamin Q _ och cyklohexylamin. Även andra salter kan användas.
Särskilt föredragna salter är de som är fysiologiskt acceptabla.
LH 10 20 25 30 35 458 121 5 Uppfinningen är inte begränsad till någon särskild isomer av IP Följaktligen inbegrips alla individuella 3. isomerer av IP3 och blandningar därav i ovanstående definition, IP3. Emellertid omfattar den stabiliserade kompositionen företrädesvis minst en av D-myo-ino- sito1~l,2,6-trifosfat, D-myo-inosítol-l,2,5-trifosfat, myo-inositol-l,2,3-trifosfat, D-myo-inositol-l,4,5- -trifosfat och L-myo-inositol-l,3,4-trifosfat. Av dessa-isomerer föredrages D-myo-inositol-l,2,6-trifos- Eat.
Vid användning av jäst, företrädesvis bagerijäst som fytaskälla erhålles endast en isomer av IP näm- ligen D-myo-inositol-l,2,6-trifosfat. Särskiltjnâr kompositionen omfattar läkemedel föredrages det i allmänhet att använda isomeren eller isomererna av IP3 i huvudsakligen ren form. Den stabiliserande kompo- nenten i kompositionen kan bestå fullständigt eller huvudsakligen av IP3.
Stabiliseringsmedlet är ogiftigt och mycket effek- tivt.
Ibland kan kompositionen även innehålla en mindre mängd andra inositolfosfat, särskilt inositoldifosfat, Ipz' 4' är särskilt fallet där fröer, växtdelar, sporer, fruk- och inositoltetrafosfat, IP förutom IP3. Detta ter och livsmedel skall stabiliseras enligt uppfin- ningen. IP2 och IP4 kan föreligga i syraform såväl som i saltform.
De ovan nämnda IP -isomererna har följande formler: 3 D-myo-inositol-l,2,6-trifosfat med formeln _. _ uvnšj '* nu UH nu 2- 2_ uPu3 3 Z n -X l GPU där X är väte, minst en envärd, tvávärd eller fler- värd katjon, eller en blandning därav, n är antalet junei oth u är laddningen för respektive jon; 458 121 6 D-myu-ínosítol-1,2,5-trifosfat med formeln ÛH OPÛ3~ 2- UH ammo n .w där X, n och z har ovanstående beLydelse; myo-inositol-1,2,3-trifosfat med formeln 10 4 urumpoš- UH 3 2 n -X1* UH nPo ' UH 3 15 där X, n och z har ovanstående betydelse; L-myn-inositol-1,3,4-trifosfat med formeln nvnz' UH 20 UH ÛH 3 n _XZ* ' Z-g :smb där X, n och z har ovanstående betydelse; och 25 D-myo-inositol-1,4,5-trifosfat med formeln . 2- 2- Bm nu u" 30 HH OPÛB ' däršxß n och z har ovanstående betydelse- I var och en av de ovanstående formlerna ligger n inom omrâdet 6~1 och z ligger inom området l-6. 35 Förenrädesvis är n inom omrâdet 3-6 och z är 3, 2 eller 1. l0 15 20 25 30 35 458 121 7 Uppfinningen kommer att förklaras närmare i detalj i samband med utföringsexemplen nedan, av vilka exemplen l-5 visar att IP hämmar eller reducerar bildningen av fria radikaleš. Exempel 6 illustrerar konservering av några frukter och grönsaker vid tillsats av IP3.
Exempel 7 visar att en tillsats av IP3 till ett enzym ger ett anmärkningsvärt bibehållande av enzymaktivi- teten vid lagring. Exemplen 8-14 visar framställning av IP3 êxemgel l _ En vattenlösning innehållande 0,3 mM FcCl3, 5,0 mM etylendiaminotetraättiksyra (EDTA), 50 mM tris(hydroxi- metyl)-aminometan (TRIS) och 1,0 M NaN? bereddes.
I lösningen bildades komplexet Fe3+ och separation därav i olika isomerer. - ÉDTA ~ N3.
Ett ljusabsorptionsmaximum vid våglängden 409 nm påvisades.
En annan vattenlösning innehållande 0,3 mM FeCl3, 50 mM EDTA och 50 mM TRIS bereddes. I lösningen bilda- 3+ - EDTA - H2 tionsmaximum vid våglängden 409 nm påvisades inte. des komplexet Fe O. Något ljusabsorp- Ovanstående resultatskillnad beror på att N3 kompetitivt ersätter en vattenmolekyl som binder till Fe3+ Fe3+-EDTA-komplexet har ett bindningsställe som är - EDTA -komplexet. Detta visar i sin tur att upptaget av en dissocierbar vattenmolekyl.
Det är vidare känt att järn katalyserar bildningen av hydroxylradikaler. För att dessa skall bildas krävs att en vattenmolekyl binds till järn.
Detta innebär att EDTA i EDTA-Fa3+-komplexet inte kan inhibera den järnkatalyserade hydroxylradikal- bildningen. 1.' Ovanstående försök upprepades med den skillnaden att EDTA utbyttes mot IP3. ' ' Något absorptionsmaximum erhölls inte vid våg- längden 409 nm.
Detta resultat innebär att Fe3+-komplexet med IP3 inte binder vatten. Därvid förhindras bildningen av frå: rañilçalør ma1 458 121 10 ;_» UI 25 30 35 Exempel 2 En reaktionsblandning bestående av 48 mmol KH PO 2 4' 2 mmol Na-askorbat, 0,1 mmol H2O2, 0,5 mmol Fe och 1,7 mmol deoxiribos inkuberades vid 37°C i 1 h. Liknande reaktionsblandningar omfattande l mmol EDTA eller l mmol inositoltrifosfat (IP3) inkuberades på liknande sätt. Det använda IP3 var D-myo-inositol~l,2,6-trifosfat.
Efter inkubationen tillsattes 1,65 ml tiobarbi- tursyra i 50 mmol NaOH och 1,65 ml 2,8% trikloroättiksyra till 2 ml av reaktionsblandningen. Blandníngen uppvärm- des till lO0°C i 20 min och absorbansen vid S32 nm mättes med vatten som nollprov.
Försöken genomfördes med järn i form av Fe2+ (Fe(NH4)SO¿) och Fe3+ (FeCl3). Resultaten var följande: Bildning av fria radikaler katalyserad av Fe2+ och Fe3+ i närvaro av IP3 eller EDTA, uttryckt som absorbans vid 532 nm.
Giw så .Fe-if Kontroll 0,76 0,79 EDTÅ 2,2 1,86 :P3 0,46 0,43 Dessa resultat visar att bildningen av fria radi- kaler i reaktionsblandningen minskades med 40% efter tillsats av IP3. Tillsatscn av EDTA hade en motsatt effekt. Denna ökade kraftigt bildningen av fria radi- kaler. Sålunda visades det att IP3 reducerar järnbe- roende bildning av fria radikaler.
Exemgel 3 Lipidperoxidering studerades i lipidmiceller.
Följande reaktionsblandning inkuberades i 2 h vid 37°C: __0,4 ml Clark-Lubs buffert pH 5,5 ; Ö,2 ml fosfolipidliposomer _ o,l ml :P3 ons-s mm eller o,l ml H20 0,1 ml Fe2+ 1 mM eller 0,1 ml H20 1 ml A13* 4 mm eller 0,1 ml H20 0,1 ml H O 2 10 15 20 25 30 458 121 9 IP3 var D-myo-inositol-1,2,6-trifosfat. Efter inkubering tillsattes 0,5 ml tiobarbitursyra + 0,5 ml 25% HC1 och blandningen uppvärmdes vid lO0°C i 15 min. 1 ml "lubrol PX" 1% (Sigma) tillsattes och lipidper- oxideringen mättes genom mätning av absorbansen vid 532 nm. Resultaten var följande: Koncentration, mM Fal-sök m2* A13* :P3 Absorbans 532 nm 1 0,1 0 0 0,36 2 0 0,4 0 0,12 3 0,1 0,4 0 0,89 4 0,1 0,4 0,5 0,36 5 0,1 0 0,5 0,30 6 0,1 0 0,4 0,26 7 0,1 0 0,2 0,29 8 0,1 0 0,1 0,28 9 0,1 0 0,05 0,27 10 0 0 0 0,13 Fe2+ förorsakade lipidperoxidering (grupp 1 gentemot 10). Al3+ i sig själv förorsakade ingen peroxidering (2 gentemot 10), medan kombinationen av Fe2+ + Al3+ förorsakade mycket kraftigare peroxidering än Fe2+ enbart (1 gentemot 3). Tillsatsen av IP hämmade full- 2+ och A13+ förorsakade IP3 en ständigt interaktionen mellan Fe (3 gent- emot 4). I system med enbart Fe2+ markant reduktion av radikalbildningen (1 gentemot S-9).
Exemgel 4 Lipidperoxidering studerades i lipidmiceller.
Följande reaktionsblandning inkuberades i 2 h vid 37°C: 0,4 ml Clark-Lubs buffert pH 5,5 ¿ _0,2 ml fosfolipidliposomer 0,1 ml IP3 10 mM eller 0,1 ml H20 ~ - 0,1 m1 Fez* 1 mm 2+ 2+ 0,1 m1 Cd 1 mM eller 1 ml Pb 1 mM eller 0,1 ml H20 0,1 ml H O 2 u. 458 121 10 15 20 25 30 35 10 3 var D-myo-inositol-l,2,6-trifosfat. Efter inkuberíng tillsattes 0.5 ml tiobarbitursyra + 0,5 ml 25% HCl och blandninqen uppvärmdes vid 100°C i 15 min. 1 ml "lubrol PX" 1% IP (Sigma) tillsattes och lipidper- oxideringen mättes genom mätning av absorbansen vid S32 nm. Resultaten var följande: Koncentration, mM _________________ försök cd2+ Pb2+ :P3 Absorbans ____ _____ ____ 532 nm 1 o o o 0,63 _ 2 o,1 ø o 1,08 3 o,1 o 1,ø 0,73 4 0 0.1 o 1,79 5 o e,1 1,0 1,32 . ._ ._ _ ,“ + Lipiuperoxioerzngcn rororsakad av Fe2 (grupp 1) ökades kraf tigt med Cd (2) och med Pb (4). Effekterna av båda dessa metaller motverkades kraftigt av IP (3 gentemot 2 och 5 gentemot 4).
Exempel 5 3 Reaktionsblandningar med följande sammansättningar inkuberades i 5 min vid 37°C: KHZPO4-buffert pH 7,4 20 mM EDTA 0,1 mM Salicylat l mM Askorbat ' . 1 mm H22; 3,3 mM Fe 0,05 mm IP3 0, 2,5, 5 eller 10 mM De produkter som bildades genom oxidation av salicylat bestämdes kvantitativt med HPLC. IP 3 var D-myo-inositol-l,2,6-trifosfat. ¿'_Systemet studerar avlägsnande av radikaler. Under dessa reaktionsbetingelser kommer all Fe3+ att bilda' " komplex med EDTA. Fe-EDTA~komplexet inducerar frira- dikalbildning och förmågan hos IP3 att förhindra oxi- dation av salicylat studeras. 10 15 20 25 30 35 458 121 ll Försöksresultaten var: Koncentrationen Relativ mängd oxiderat IP3, mM salicylat 0 100 2,5 44 5 43 10 19 Sålunda kan IP. verka som ett radikalavlägsnande 3 medel och därigenom förhindra friradikalinducerade skador på andra molekyler.
Exempel 6 Konservering av vissa frukter och grönsaker genom tillsats av IP3. 4 g färsk potatis, bananer respektive äpplen skivades i 10 bitar vardera- 5 bitar av samma frukt eller grönsak placerades i var och en av 5 olika bägare.
Tre av bägarna fylldes med 15 ml av en vattenlösning av IP3 vattenlösning av IP6, på ett sådant sätt att vardera och ytterligare tre bägare med 15 ml av en 5 bitar av frukt och grönsak exponerades antingen för rent vatten eller vatten med IP3 respektive IP6.
Halten IP 3 6 Proven fick stå i rumstemperatur i 15 h. Efter respektive IP i vattnet var 1,0 g/liter. denna period undersöktes provens färg och följande data registrerades: Potatis Banan Äpple Ingen IP3 tillsatt brun färg brun färg brun färg IP3 tillsatt mycket mycket svagt brun svagt brun svagt brun IP tillsatt 6 brun färg brun färg brun färg Resultaten visar att IP3 har en konserverande effekt på de undersökta frukterna och grönsakerna, _ medan IP6 Exempel 7 Enzymaktivitet vid tillsats av IP inte har någon sådan effekt. 3.
Aldolasaktivitet med respektive utan tillsats av IP mättes som funktion av tiden. 3 458 121 UI 10 e; KJ! 20 25 30 35 12 Aldolas bryter ned fruktos-l,6-difosfat (FDP) till dihydroxiacetonfosfat. Detta substrat reagerar vidare med a-glycerofosfatdehydrogenas (GDH) i närvaro av niktonamidadenindinnukleotíd, reducerad form (NADH), till a-glycerofosfat och nikotinamidadenindinukleotid oxiderad form (NAD). Genom att mäta minskningen av UV-absorptionen vid 340 nm för reaktionen NADH till NAD bestäms enzymets aktivitet.
Aldolas lagrades vid 25°C och aktiviteten mättes initiellt och efter 72 h med och utan tillsats av IP3 (4 g/liter). 0,5 pl aldolas ("Al893" från Sigma Chemical Co, 0,2 U/ml) blandades med 2,75 ml av en buffert, pH 7,5, bestående av 0,10 g KHZPO4, 0,74 KZHPO4, 1,96 KCH3CH2O0, 50 mg FDP och 8 mg NADH per 100 ml buffert. l,47 ul GDH tillsattes dessutom och den totala volymen utspäddes till 3,0 ml. genomfördes vid 30°C.
Bestämningen av aktiviteten Följande resultat erhölls: Lagringstid vid 25°C Ingen IP3 tillsatt IP tillsatt ' 3 0 0,12 0,2 minskning av absorbansen 72 h 0,05 0,07 - " - Resultaten visar att enzymets aktivitet förbättrades med ca 40% efter tillsats av IP3 när aktiviteten be- stämdes efter 72 h lagring vid 25°C.
Exemgel 8 Hydrolys av natriumfytat med vetefytas och frak- tionering av en blandning av inositolfosfat. 1,6 g natriumfytat (frán vete, Sigma Chemical Co){löstes i 650 ml natriumacetatbuffert, pH-värde 5,2. 2,7 g vetefytas (EC 3.l.3.26, 0,015 U/mg, från Sigma Chemical Co) tillsattes och blan des vid 3s°c. ' dningen inkubera- 10 15 20 25 30 35 458 121 13 Defosforyleringen följdes genom bestämning av frigjord oorganisk fosfor. Efter 3 h, när 50% av den oorganiska fosforn frigjorts, avbröts hydrolysen genom tillsats av 30 ml ammoniak till pH l2. En vätskebland- ning innehållande inositolfosfat erhölls. 350 ml av blandningen fick passera genom en jon- bytarkolonn ("Dowex 1", kloridform, 25 mm x 250 mm) och eluerades med en linjär gradient av klorvätesyra (0-0,7 N HCl). Lika mängder av eluerade fraktioner hydrolyserades fullständigt för att bestämma halten- fosfor och inositol. Topparna motsvarar de olika ino- sitolfosfaten, dvs en topp med förhållandet tre till ett mellan fosfor och inositol består av inositol- trifosfat etc. Två fraktioner med förhållandet tre till ett mellan fosfor och inositol erhölls.
Exempel 9 Fraktionering av inositoltrifosfat. 100 ml av den första fraktionen som erhållits i exempel 8 med ett fosfor/inositolförhållande av tre till ett neutraliserades och utfälldes som ett bariumsalt efter tillsats av l0% överskott av 0,l M bariumacetatlösning. 600 mg av det utfällda saltet löstes i 50 ml utspädd klorvätesyra. Lösningen sepa- rerades på en jonbytarkolonn ("Dowex l", kloridform, 25 mm x 2500 mm) med utspädd klorvätesyra som elnerings- medel. Lika delar av eluerade fraktioner analyserades med avseende på fosfor. Tre toppar bestående av isomerer av inositoltrifosfat kan iakttas.
Exempel 10 0 Strukturbestämning av isomerer av inositoltrifos- fat med NMR. ai-De tre topparna som erhållits i exempel 9 ana1y-- serades med H-NMR. Data visar att topparna består Q _ av myo-inositol-1,2,6-trifosfat, myo-inositol-l,2,3- -trifosfat respektive myo-inositol-1,3,4-trifosfat.
Den andra fraktionen som erhållits i exempel l8 med ett fosfor/inositolförhållande av tre till 458 121 20 25 30 35 14 ett analyserades med H-NMR. Data visar att fraktionen består av myo-inositol-1,2,5-trifosfat.
Exempel ll Bestämning av optiska isomerer av inositoltrifosfat. 20 mg av föreningarna som med NMR enligt exempel 10 bestämts till att vara myo-ínositol-1,2,6-trifosfat och myo-inositol-1,3,4-trifosfat kromatograferades vidare på en kiral kolonn baserad på acetylerad cellu~ losa (20 mm x 300 mm från Merck) med en blandning av etanol och vatten som elueríngsmedel. raktiunerna analyserades med en polarimeter. Såsom framgår består varje förening av en optisk isomer, D-myo-inositol- -l,2,6-trifosfat respektive L-myo-inositol-l,3,4-tri- fosfat.
Exempel_lå Hydrolys av natriumfytat med bageríjäst och frak- tionering av en blandning av inositolfosfat- 0,7 g natriumfytat (frân vete, Sigma Chemical Co) löstes i 600 ml natriumacetatbuffert, pH 4,5. 50 g bagerijäst från Jästbolaget, Sverige, (torrsubstans: 28%, kvävehaltz 2%; fosforhalt: 0,4%) tillsattes under omröring och inkuberingen fortsattes vid 45°C. Defos~ foryleringen följdes genom bestämning av frigjord oorganisk fosfor. Efter 7 h, när 50% oorganisk fosfor hade frigjorts, avbröts hydrolysen genom tillsats av 30 ml ammoniak till pH 12. Suspensionen centrifuge- rades och den överstáende vätskan uppsamlades. 400 ml av den överstående vätskan fick passera genom en jonbytarkolonn (“Dowex l“, kloridform, 25 mm x 250 mm) och eluerades med en linjär gradient av klorväte- syra (0-0,7 N HCI). š"Lika delar av eluerade fraktioner hydrolyserades- fullständigt för att bestämma halterna fosfor och ' _ inositol. Topparna motsvarar de olika inositolfosfaten, dvs en topp med förhållandet tre till ett mellan fosfor och inositol består av inositoltrifosfat etc. u. 458 121 Exem el l3 Strukturbestämning av isomerer av inositoltri- tosfat.
Den fraktion som erhållits i exempel 12 med ett fosfor/inositolförhàllande av tre till ett neutralise- rades och indunstades före analys med H~NMR. Data visar att toppen består av myo-inositol-1,2,6-trifos- fat.
Exempel 14 Bestämning av optiska isomerer av mye-inositol* trifosfat.
Samma metod användes som beskrivs i exempel ll med skillnaden att 10 mg av föreningen som bestämts med NMR enligt exempel 13 analyserades. Såsom framgår består föreningen av en optisk isomer, D-myo-inositol- -l,2,3-trifosfat.
För bättre förståelse av uppfinningen ges nedan formler för IPS-isomererna enligt uppfinningen. Formler ges även för IP6, IP5, IP4 och IP2.
De lägre fosfatestrarna av myo-inositol får namn beroende på var fosforsyragrupperna är belägna på inositolringen, varvid numreringen ger så låga posi- tionsnummer som möjligt- L och D betecknar medsols respektive motsols räkning och används beroende pá vilket resultat som ger det lägsta positionstalet.
Kolatomen som har en axiell fosforsyragrupp har alltid positionstalet 2. Strukturformlerna nedan är förenklade till syraformen. myo-inositol; C6H6 (OHI6 458 121 16 1,2,3,4]5,6-hexakis-(diväte- fosfat)-myo-inositcl alterna- tivt myo-inositolhexakis (fosfat) eller lP6 D-myo-inositol-1,Z,b-tritosfat alternativt D-1.2.6-IPQ D-myo-inosítol-1,2,5-trifosfat alternativt D-l,2,5-IP3 myo-inositol-1,2,3-trifosfat alternativt 1,2,3-IP3 L-myo-inositol-1,3,4-trifosfat alternativt L-l,3,4-IP3 L-myo-inositol-1,2-difosfat alternativt L-1,2-IP2 D-myo-inositol-l,2,S,6-tetra- -fosfat eller D-l,2,5,6-IP4 L-myo-ínositol-1,2,3,4,5- _ ~pentafosfat eller L-l,2,3,4,5- -IPS 458 121 17 Dessa IP3~föreningar beskrivs och framställs i vår samtidigt inlämnade patentansökan med titeln "Inositoltrifosfat" (vår beteckning nr 355 b).
Claims (14)
1. l. Stabiliserad komposition omfattande ett organiskt substrat utsatt för nedbrytning genom oxidation och/eller fria radikaler, k ä n n e t e c k n a d av att kompo- sitionen innehåller en stabiliserande mängd inositol- trifosfat (IP3).
2. Z. komposition enligt krav 1, k ä n n e t e c k - n a d av att det organiska substratct är ett läkemedel eller ett biologiskt system.
3. d komposition enligt krav 2, k ä n n e t e c k - n a av att läkemedlet är valt ur den grupp som består av insulin, vaccin, byaluronsyra, intralipid och prostaglandin.
4. n a d Komposition enligt krav 2, k ä n n e t e c k - av att det biologiska systemet är valt ur den grupp som består av nukleinsyror, kolväten, lipider och proteiner.
5. Komposition enligt krav 1, k ä n n e t e c k - n a d av att den dessutom innehåller en mindre mängd inositoltetrafosfat (IP4) och inositoldifosfat (IP2).
6. Komposition enligt krav 1, k ä n n e t e c k - av att inositoltrífosfatet innehåller minst ett av D-myo-inositol-1,ï,6-trifosfat, D-myo-inositol- -l,2,5-trifosfat, myo-inositol-l,2,3-trifosfat, D n a d _my0_ -inositol-l,4,5-trifosfat och L-myo-inositol-l,3,4- -trifosfat.
7. n a d Komposition enligt krav 6, k ä n n e t e c k - av att inositoltrifosfatet är ett salt, vars katjon är vald ur den grupp som består av alkalímetal- ler och alkaliska jordartsmetaller.
8. Förfarande för stabilisering av ett organiskt substrat utsatt för oxidativ eller friradikalnedbryt- ning, k ä n n e t e c k n a t av att man till det organiska substratet sätter en stabiliserande mängd av inositoltrifosfat. 10 15 20 25 458 121' 19
9. Förfarandc enligt krav 8, k ä n n e t e c k - n a t av att det organiska substratet är ett läkemedel eller ett biologiskt system.
10. Förfarande enligt krav 8, k ä n n e t e C k ~ n a t av att läkemedlet är valt ur den grupp som består av insulin, vaccin, hyaluronsyra, intralipid och prostaglandin.
11. ll. Förfarande enligt krav 8, k ä n n e t e c k - n a t av att det biologiska systemet väljs ur den grupp som består av DNA, RNA, nukleinsyror, biologiska' vävnader, kolväten, lipider, protein, såsom enzym, mikroorganismer, fröer, växtdelar, sporer, frukter och livsmedel.
12. Förfarande enligt krav 8, k ä n n e t e c k - n a t av att en mindre mängd inositoltetrafosfat (IP4) och inositoldifosfat (IP2) dessutom tillsättes.
13. - Förfarande enligt krav 8, k ä n n e t e c k - n a t av att inositoltrifosfatet innehåller minst ett av D-myo-inositol~l,2,6-trifosfat, D-myo-inositol- -l,2,5-trifosfat, myo-inositol-l,2,3-trifosfat, D-myo- -inositol-1,4,5-trifosfat och L-myo-inositol;l,3,4- -trifosfat. I
14. l4. Förfarande enligt krav 8, k ä n n e t e c k - n a t av att inositoltrifosfatet är ett salt, vars katjon är vald ur den grupp som består av alkalimetaller och alkaliska jordartsmetaller.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE8504970A SE458121B (sv) | 1984-10-23 | 1985-10-22 | Stabiliserad komposition samt foerfarande foer stabilisering |
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE8405295A SE465951B (sv) | 1984-10-23 | 1984-10-23 | Isomer av inositoltrifosfat foeretraedesvis i saltform foer anvaendning som terapeutiskt eller profylaktiskt medel samt kompositioner daerav |
| SE8503165A SE8503165L (sv) | 1984-10-23 | 1985-06-26 | Stabilisator ii |
| SE8503164A SE8503164L (sv) | 1984-10-23 | 1985-06-26 | Stabilisator |
| SE8504970A SE458121B (sv) | 1984-10-23 | 1985-10-22 | Stabiliserad komposition samt foerfarande foer stabilisering |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SE8504970D0 SE8504970D0 (sv) | 1985-10-22 |
| SE8504970L SE8504970L (sv) | 1986-04-24 |
| SE458121B true SE458121B (sv) | 1989-02-27 |
Family
ID=27484649
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SE8504970A SE458121B (sv) | 1984-10-23 | 1985-10-22 | Stabiliserad komposition samt foerfarande foer stabilisering |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SE (1) | SE458121B (sv) |
-
1985
- 1985-10-22 SE SE8504970A patent/SE458121B/sv not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| SE8504970L (sv) | 1986-04-24 |
| SE8504970D0 (sv) | 1985-10-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0179442B1 (en) | Stabilized composition containing inositoltriphosphate and method for stabilizing the composition | |
| JPH037233B2 (sv) | ||
| Uno et al. | Metabolism of adenosine 3′, 5′-cyclic monophosphate and induction of fruiting bodies in Coprinus macrorhizus | |
| Juneja et al. | Enzymatic method of increasing phosphatidylcholine content of lecithin | |
| CA2213151C (en) | Method of stabilizing pharmaceutical preparations comprising digestive enzyme mixtures | |
| AU779636B2 (en) | A method for preparing lysophosphatidylethanolamine | |
| Strange et al. | Specificity of choline and betaine as stimulants of Fusarium graminearum | |
| Hoelzl Wallach et al. | The hydrolysis of ATP and related nucleotides by Ehrlich ascites carcinoma cells | |
| Beare-Rogers | Liver phospholipids of rats deprived of dietary choline | |
| Munk | The Deposition and Utilization of Inorganic Pyrophosphate in Tetrahymena Pyriformis | |
| Imai et al. | Synthesis and biological activity of 5'-capped derivatives of 5'-triphosphoadenylyl (2'. fwdarw. 5') adenylyl (2'. fwdarw. 5') adenosine | |
| SE458121B (sv) | Stabiliserad komposition samt foerfarande foer stabilisering | |
| US6660504B2 (en) | Process for exchanging bases in phospholipids | |
| MacDougall et al. | Isomers of glucosaminylphosphatidylglycerol in Bacillus megaterium | |
| Pickett et al. | Lipid catabolism of relapsing fever borreliae | |
| Pierpoint et al. | The synthesis of coenzyme A by Lactobacillus arabinosus 17–5 | |
| MITSUDA et al. | Biosynthesis of Thiamine in Plants II. Biosynthetic Pathway of Thiamine Monophosphate from Pyrimidine and Thiazole Moieties | |
| Kalin et al. | Lipid activation of undecaprenol kinase from Lactobacillus plantarum | |
| Redei | Effects of the degradation products of fructose on the glycolytic pathway | |
| Chakrabarti et al. | CYCLITOLS AND PHOSPHOINOSITIDES | |
| RIBULOSE | ESTEP, MARILYN LOUISE FOGEL. | |
| 満田久輝 et al. | Biosynthesis of Thiamine in Plants | |
| Reut et al. | Isolation of myo-inositol from solutions by enzymatic biotransformation | |
| Strasdine | A study of oxidative phosphorylation in Pseudomonas aeruginosa |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| NAL | Patent in force |
Ref document number: 8504970-8 Format of ref document f/p: F |
|
| NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 8504970-8 Format of ref document f/p: F |