SE445681B - Reagens och forfarande for fotometrisk bestemning av hemoglobinhalten i blod - Google Patents
Reagens och forfarande for fotometrisk bestemning av hemoglobinhalten i blodInfo
- Publication number
- SE445681B SE445681B SE8002469A SE8002469A SE445681B SE 445681 B SE445681 B SE 445681B SE 8002469 A SE8002469 A SE 8002469A SE 8002469 A SE8002469 A SE 8002469A SE 445681 B SE445681 B SE 445681B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- hemoglobin
- blood
- polyethylene glycol
- alkaline
- ether
- Prior art date
Links
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 title claims abstract description 41
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 title claims abstract description 41
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims abstract description 27
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims abstract description 26
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims abstract description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 39
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims abstract description 19
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims abstract description 5
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 33
- HLUCICHZHWJHLL-UHFFFAOYSA-N hematein Chemical compound C12=CC=C(O)C(O)=C2OCC2(O)C1=C1C=C(O)C(=O)C=C1C2 HLUCICHZHWJHLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 11
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 11
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- -1 polyethylene Polymers 0.000 claims description 5
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- HBXWUCXDUUJDRB-UHFFFAOYSA-N 1-octadecoxyoctadecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCOCCCCCCCCCCCCCCCCCC HBXWUCXDUUJDRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000003438 dodecyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- FFJCNSLCJOQHKM-CLFAGFIQSA-N (z)-1-[(z)-octadec-9-enoxy]octadec-9-ene Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC FFJCNSLCJOQHKM-CLFAGFIQSA-N 0.000 claims description 2
- AJDONJVWDSZZQF-UHFFFAOYSA-N 1-(2,4,4-trimethylpentan-2-yl)-4-[4-(2,4,4-trimethylpentan-2-yl)phenoxy]benzene Chemical compound C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OC1=CC=C(C(C)(C)CC(C)(C)C)C=C1 AJDONJVWDSZZQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N Dodecane Natural products CCCCCCCCCCCC SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- DTPCFIHYWYONMD-UHFFFAOYSA-N decaethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCO DTPCFIHYWYONMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000005375 photometry Methods 0.000 claims description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims 3
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 claims 2
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 claims 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 125000002704 decyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims 1
- 125000003187 heptyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims 1
- 125000001400 nonyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 125000002347 octyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 125000001117 oleyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C([H])\C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 125000000913 palmityl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 claims 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 claims 1
- 125000002948 undecyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 abstract description 8
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 abstract description 5
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 abstract description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 30
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 29
- BMUDPLZKKRQECS-UHFFFAOYSA-K 3-[18-(2-carboxyethyl)-8,13-bis(ethenyl)-3,7,12,17-tetramethylporphyrin-21,24-diid-2-yl]propanoic acid iron(3+) hydroxide Chemical compound [OH-].[Fe+3].[N-]1C2=C(C)C(CCC(O)=O)=C1C=C([N-]1)C(CCC(O)=O)=C(C)C1=CC(C(C)=C1C=C)=NC1=CC(C(C)=C1C=C)=NC1=C2 BMUDPLZKKRQECS-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 17
- 229940109738 hematin Drugs 0.000 description 17
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 8
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 7
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 7
- 108010003320 Carboxyhemoglobin Proteins 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 108010071981 cyanhemoglobin Proteins 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N Carbon monoxide Chemical compound [O+]#[C-] UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010044495 Fetal Hemoglobin Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000209094 Oryza Species 0.000 description 2
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 2
- 108010064719 Oxyhemoglobins Proteins 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 229940025294 hemin Drugs 0.000 description 2
- 108010036302 hemoglobin AS Proteins 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 2
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 2
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 2
- JUQCKIRPZFRCHD-UHFFFAOYSA-M (4-benzyl-2,6-dimethylheptan-4-yl)-ethoxy-methyl-phenoxyazanium chloride Chemical compound [Cl-].C(C1=CC=CC=C1)C([N+](C)(OCC)OC1=CC=CC=C1)(CC(C)C)CC(C)C JUQCKIRPZFRCHD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CMCBDXRRFKYBDG-UHFFFAOYSA-N 1-dodecoxydodecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCOCCCCCCCCCCCC CMCBDXRRFKYBDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- INGWEZCOABYORO-UHFFFAOYSA-N 2-(furan-2-yl)-7-methyl-1h-1,8-naphthyridin-4-one Chemical compound N=1C2=NC(C)=CC=C2C(O)=CC=1C1=CC=CO1 INGWEZCOABYORO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- 108010061951 Methemoglobin Proteins 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010016811 Sulfhemoglobin Proteins 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012295 chemical reaction liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000000515 cyanogenic effect Effects 0.000 description 1
- 108010002255 deoxyhemoglobin Proteins 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 1
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 1
- 210000003617 erythrocyte membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 108700026427 hemiglobincyanide Proteins 0.000 description 1
- BTIJJDXEELBZFS-UHFFFAOYSA-K hemin Chemical compound [Cl-].[Fe+3].[N-]1C(C=C2C(=C(C)C(C=C3C(=C(C)C(=C4)[N-]3)C=C)=N2)C=C)=C(C)C(CCC(O)=O)=C1C=C1C(CCC(O)=O)=C(C)C4=N1 BTIJJDXEELBZFS-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000013208 measuring procedure Methods 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- NNFCIKHAZHQZJG-UHFFFAOYSA-N potassium cyanide Chemical compound [K+].N#[C-] NNFCIKHAZHQZJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000007430 reference method Methods 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/72—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
- G01N33/721—Haemoglobin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
80Û2469~8 praktiskt taget alla laboratorier infört detta förfarande i stället för andra förfaranden under åren 1953 till 1963 (jfr.
SPAANDER, 1964; SUNDERMAN, 1965) och en cyan-hemiglobin-standard rekommenderats (CANNAN, 1958), rekommenderades detta förfarande 1962 av Deutsche Gesellschaft für innere Medizin och l967 av International Committee for Standardization in Hematology (ICSH). Sedan dess gäller detta förfarande som rutinförfarande.
I Tyskland har det funktionen av ett referensförfarande, dvs. andra förfaranden får endast användas när förhållandet mellan de därmed erhållna resultaten och resultatet av referensmetoden är känt (DIN "Vornorm“ 58 931).
Införandet av cyan-hemiglobin-förfarandet som standardförfarande har medfört att inom fackmannakretsar fördomar utvecklats mot andra metoder. "Hämiglobin-Cyanid ist das einzige bekannte stabile Hämoglobin-Derivat" (RICHTERICH, 1971); "alle übrigen Verfahren ... sind abzulehnen" (RICK, 1976); "... Cyan-Hämi- globin (exaktester Nachweis)“ (HALLMANN, l966).
Principen för cyan~hemiglobin-förfarandet består i att hemo- globinet oxideras med kalium-ferricyanid till hemiglobin och överföres med kalium-cyanid i cyan-hemiglobin. Därvid användes som reaktionslösning en modifierad s.k. Drabkin'sk lösning, som ursprungligen angivits av van KAMPEN och ZIJLSTRA (van KAMPEN och ZIJLSTRA, 1961; ZIJLSTRA och van KAMPEN, 1960).
Fördelarna med detta förfarande är följande: l. Användning av en enda reaktionslösning; 2. Alla hemoglobin~derivat i blodet omfattas (desoxi-hemoglobin, oxi~hemoglobin, karboxi-hemoglobin, hemiglobin och i stor utsträckning även sulf-hemoglobin); 3. Cyan-hemiglobñnet besitter ett brett och flackt extinktions- maximum vid 540 nm, så att även med anspråkslösa filter- fotometrar tillförlitliga resultat kan erhållas; 4. 5. 8002469-8 Lambert-Beer's lag gäller över ett brett mätomrâde; Framställning och försändning av stabila standard-lösningar för kontrolländamål är möjlig, och de kan framställas såväl ur kristallint hemoglobin som även ur tvättade erytrocyter; Cyan-hemiglobin är ett stabilt hemoglobin-derivat, så att mätning av extinktionen kan ske efter några minuter eller först efter flera dagar.
Olägenheterna med oyan-hemiglobin-förfarandet är följande (jfr. HENRY, 1964, s. 740): l.
Reaktionslösningens toxicitet erfordrar särskilda åtgärder vid hanteringen (användning av automatpipetter, noggrant avlägsnande av lösningen vid uthällning); Reaktionslösningen är inte stabil under längre tid, den är ljuskänslig och måste förvaras på motsvarande sätt (bruna flaskor och dylikt); Reaktionspartnernas koncentration måste hållas noggrant, vilket speciellt gäller för buffertmedlet, som måste säker- ställa ett definierat pH~värde; Reaktionstiderna för de olika hemoglobin-derivaten är olika och delvis alltför långa. Ursprungligen angavs för alla hemoglobin-derivat en reaktionstid av 3 minuter (van KAMPEN och ZIJLSTRA, l96l), en lära, som modifierades under de följande åren. Ü 1965 påvisar TAYLOR och MILLER att cyan-hemiglobin-bildningen är tydligt förlängd då karboxi-hemoglobin föreligger och att till följd därav avsevärda fel måste uppträda vid hemoglobin- bestämningen.
Van KAMPEN och ZIJLSTRA föreslår 1965 en reaktionstid av 90 mi- nuter, om man måste räkna med karboxi-hemoglobin i blodet som _ .>.._.-.-....-._..,__..-.__-,-v__-..._ _ .._.__ 8002469-8 skall undersökas.
RODKEY påvisar 1967 att överföringen av HbC0 i cyan-hemiglobin vid rumstemperatur erfordrar 90-120 minuter, under det att HbO2 endast kräver 10 minuter.
Denna författare kan förkorta reaktionstiden för omvandlingen av HbCO till cyan-hemiglobin till l5 minuter när koncentratio- nen av kalium-ferricyanid femfaldigas.
RICE (l967) löser detta problem genom att lösningen upphettas till 56°C. Reaktionen av HbC0 till cyan-hemiglobin avslutas då efter 3-5 minuter.
Att karboxi-hemiglobin oxideras mycket långsammare till hemi- globin än andra derivat (Hb, Hb02) utnyttjas dessutom vid det s.k. HOPPE~SEYLER'ska provet för en kvalitativ HbC0-påvisning i blodet (jfr. MASSMANN, 1954). Ytterligare felmöjligheter kunde uteslutas. Exempelvis förhindrades en utfällning av plasma-äggvita och därav orsakad grumling (jfr. t.ex. GREEN och TEAL, 1959) genom att en detergent sattes till reaktions- lösningen (van KAMPEN och ZIJLSTRA, 1961).
Till grund för uppfinningen ligger uppgiften att utveckla ett kvantitativt tillförlitligt sätt att påvisa hemoglobin, som uppvisar de omnämnda fördelarna hos det nuvarande cyan-hemi- globin-förfarandet utan att medföra de omnämnda olägenheterna.
Denna uppgift löses enligt uppfinningen med ett reagens, som består av en vattenhaltig alkalisk lösning, till vilken en vattenlöslig nonjonogen detergent tillsatts, varigenom alla (i blodet förekommande) hemoglobin-derivat och hem-derivat överföres i en enhetlig slutprodukt med ett utpräglat absorp- tionsmaximum inom det synbara spektralomrâdet. I synnerhet tillsättes sådana detergenter, som ger en slutprodukt med ett absorptionsmaximum vid ungefär 575 nm. Vidareutvecklingar och föredragna utföringsformer av uppfinningen anges i under- kraven. 8002469-8 Bestämningen av hemoglobinet som alkaliskt hematin beskrevs första gången 1922 av WU. Visserligen utmärkte sig detta för- farande genom en viss omständlighetz Hemoglobin omvandlades genom tillsats av koncentrerad saltsyra till surt hematin, som därefter alkaliserades genom tillsats av natriumhydroxid. Den erforderliga tiden för en bestämning uppgick därför till ungefär en timme. Fördelen jämfört med andra förfaranden, såsom surt hematin, methemoglobin eller cyan~hemiglobin, låg enligt WU däri att störningar genom plasmabeståndsdelar inte uppträdde.
CLEGG och KING (1942) angav ett förfarande för hemoglobin- bestämning över alkaliskt hematin, enligt vilket som reaktions- lösning användes 0,1 n natriumhydroxid, som efter tillsats av blodet upphettades 4-5 minuter i vattenbad vid l0O°C. Detta förfaringssätt ansåg författarna nödvändigt, då fetalt hemo- globin och alkaliresistent vuxen-hemoglobin visade en alltför långsam färgutveckling.
Efter l942 finns en rad författare, som redogör för tillfreds- ställande resultat med förfarandet med alkaliskt hematin (KING et al., 1948; MacFARLANE et al., 1948; DONALDSON et al., 1951; KING et al., 1951; SCAIFE, 1955). Man har även föreslagit några modifieringar, t.ex. användning av en annan våglängd (SCAIFE, 1955) eller en speciell standard (KING, 1947)- Andra författare däremot förkastade förfarandet med alkaliskt hematin på grund av alltför långa reaktionstider eller störande inverkan genom plasmabeståndsdelar (PONDER, 1942; SUNDERMAN et al., 1953). Den vid samma tid vitt utbredda metoden med cyan-hemiglobin ersatte i allt större omfattning det alkaliska hematin-förfarandet, så att man senare till och med "kunde avstå från att diskutera alkaliskt hematin“ (LEGOWSKY och BOROVICZE“¥, 1962).
Jämfört med det klassiska förfarandet på basis av alkaliskt hematin skiljer sig förfarandet enligt uppfinningen därigenom _. ._,_..._._......._..._............. 8092469-3 att ett alkaliskt hematin med speciella egenskaper beträffande - spektrum - bildningshastighet och - hållbarhet erhålles, som i det följande kort benämnes "alkaliskt hematin D - 575".
Uppfinningen uppvisar följande kännetecken och fördelar: l. Alla hem- och hemoglobin-derivat överföres kvantitativt i en enhetlig reaktionsprodukt, alkaliskt hematin D - 575, och omfattas vid fotometrisk mätning: hemoglobin, oxi- hemoglobin, karboxi-hemoglobin, hemiglobin, sulf-hemiglobin, cyan-hemiglobin, fetalt hemoglobin samt klorhemin. 2. Bildningen av alkaliskt hematin D - 575 efter tillsats av provet till reaktionslösningen är avslutad efter senast 2 minuter och reaktionsprodukten visar i flera veckor samma extinktion. Detta gäller utan undantag för alla under l. nämnda hem- och hemoglobin-derivat. 3. Den använda reaktionslösningen visar ideala egenskaper: a) Endast en reaktionslösning erfordras. b) Reaktionslösningen är obegränsat hållbar. c) Hanteringen av reaktionslösningen är nära nog ofarlig. d) Reaktionslösningen kan förvaras vid rumstemperatur i vanliga glas- eller plastkärl. e) Reaktionslösningen är ljusokänslig. f) Reaktionslösningen är enkel att framställa och billig. g) De för reaktionslösningen använda kemikalierna är utbyt- bara, dvs. man kan använda olika kemikalier med samma goda resultat.
Man kan använda NaOH eller KOH; som detergent kan exempel- vis användas: Polyetylenglykol-p-t-oktylfenoleter (speciellt polyetylenglykol-mono-[p,(l,l,3,3-tetrametylbutyl)fenyl7- eter, som föres i handeln under benämningen Triton K:šQ9l| polyetylenglykollauryleter, polyetylenglykolcetyleter, 8002469-8 polyetylenglykololeyleter och polyetylenglykolstearyleter. h) i) k) l) Koncentrationen av reaktionspartnerna NaOH och detergens är okritisk, dvs. en väsentlig avvikelse från de optimala betingelserna påverkar praktiskt taget inte förfarandets genomförbarhet. Om NaOH ändras i koncentrationsomrâdet från 0,05 till 0,5 m och koncentrationen för detergenten från l till 4 %, medför detta inte någon förändring av reaktionsproduktens spektrala egenskaper utan endast en förlängning av den för bestämningen nödvändiga reak- tionstiden från l - 2 minuter till 5 ~ 10 minuter. pH-värdet (jfr. ovan NaQH-koncentration) och temperatu- ren har inom ett vitt område ingen inverkan på förfaran- dets genomförbarhet.
I motsats till utspätt blod är reaktionsprodukten alka- liskt hematin D - 575 intensivt grönfärgad (färgintryck vid en ljusvâglängd av l - 2 cm). Reaktionsavslutningen kan sålunda åtminstone i grov skala bedömas med ögat.
Den alkaliska miljön för reaktionslösningen lämpar sig särskilt väl för en hemoglobin-påvisning (jfr. BARER och GAFFNEY, 1957): Erytrocyterna hemolyseras fullstän- digt, erytrocytmembranen upplöses och frigör det till dessa adsorberade hemoglobinet och slutligen förhindras en utfällning av plasmaproteinerna (grumling). l Reaktionsprodukten alkaliskt hematin D - 575 visar ideala egenskaper: a) C) n.. -v.--« ~w<--~>- Extinktionen är tillräckligt stor för att kunna göra en hemoglobin-bestämning med endast 10 ~ 20 mikroliter blod (vid användning av sedvanliga mängder reaktionslös- ning, nämligen 2 - 5 ml).
Lambert-Beer's lag gäller inom ett vitt område.
Reaktionsproduktens spektrum visar ett brett maximum vid ..._ _...q-~....._....---....._.T..___. . 8002469-8 575 nm (därav beteckningen alkaliskt hematin D - 575), så att tillförlitliga bestämningar kan genomföras även med anspråkslösa filterfotometrar. Spektret är oberoende av reaktionspartnernas koncentrationer i det ovannämnda omrâdet, det skiljer sig tydligt från det för alkaliskt hematin utan tillsats av en detergent. De spektrala egenskaperna för alkaliskt hematin D - 575 i jämförelse med spektret för alkaliskt hematin återges i figur l.
Båda spektra erhölls genom att en cyan-hemig1obin- standardlösning (2l2,4 mg/100 ml) utspäddes med vardera samma volym 0,l m NaOH (bildning av alkaliskt hematin) resp. 0,1 m NaOH med en tillsats av 2,5 % dekaetylen- glykol-p-t-oktylfenyleter (bildning av alkaliskt hematin D - 575). Med denna sammansättning erhåller man optimala resultat med avseende på reaktionstiden. Under det att det alkaliska hematinet i NaOH visar det i litteraturen flera gånger beskrivna spektret med en platå mellan 550 och 600 nm (jfr. t.ex. HUNTER, 1951), uppvisar det alka- liska hematinet D - 575 vid närvaro av en nonjonogen detergent ett brett maximum vid 575 nm.
Denna effekt uppkommer inte med joniska detergenter: Under det att anjoniska detergenter, såsom exempelvis natrium-dodecylsulfat, inte ger det karaktäristiska bandet vid 575 nm, uppträder vid användning av katjoniska detergenter, såsom bensyl-diisobutyl-fenoxi-etoxi-dimetyl- ammoniumklorid eller dodecyl-dioxietyl-bensyl-ammonium- klorid vid tillsats av blod en brun fällning.
Beträffande verkan av den icke joniska detergenten måste det vara fråga om en ospecifik inverkan, då den är oberoende av strukturen därav (beträffande ändringen av hemoglobin-spektret genom indifferenta lösningsmedel, jfr. HEILMEYER, 1933, s. 116). 5. Då det alkaliska hematinet D - 575 är mycket stabilt, kan standardlösningar med känd koncentration framställas ur tvättade erytrocyter, ur kristallint hemoglobin och ur ...___........_.._......__.-_.._~, 8002469-8 kristallint klor-hemin.
I synnerhet det sistnämnda förfarandet kan rekommenderas för framställning av en standardlösning, då klor-hemin är en enkel, exakt definierad substans (MG 651,97, summaformel C34H32Cl Fe N4O4), har nqcket god löslighet i den beskrivna reaktionslösningen och uppvisar entydigt de typiska spektrala egenskaperna för alkaliskt hematin D - 575, dvs. det över- föres kvantitativt i alkaliskt hematin D - 575.
En särskild fördel är att cyan-hemiglobin-standardlösning- arna med världsomfattande användning även kan användas efter utspädning med reaktionslösningen (figur l). Detta innebär att en standardisering av det nya förfarandet kan ske med redan existerande standard.
Uppfinningen åskådliggöres närmare medelst följande utförings- exempel.
En volym av 20 pl blod överföres med ett kalibrerat kapillärrör eller en s.k. Sahli-pipett fullständigt i en engångsmätkuvett, som innehåller 3 ml reaktionsvätska. Mätkuvetten består t.ex. av glasklar polystyren och har en kantlängd av l cm. Vid den övre änden befinner sig en plastavslutningskupa, som normalt är försluten och öppnas först strax före mätningsförfarandet.
Reaktionslösningen i mätkuvetten förblir stabil under flera månader, så att kuvetten kan lagras under lång tid.
Reaktionslösningen består exempelvis av 0,l m Na0H i vatten med en tillsats av 2,5 % dekaetylenqlykol~p-t~oktylfenyleter.
Denna detergent har visat sig speciellt lämpligt, då det före- ligger i flytande form och därför är enkelt att hantera. När blodprovet införts, blandas blodet genom skakning av mätkuvet- ten med reaktionslösningen. Därvid påbörjas omedelbart omvand- lingen av alla hemoglobin-derivat. Lösningen färgas genast intensivt grön. Extinktionsmätningen i fotometern vid en våg- längd av 575 nm kan ske efter l, senast 2 minuter. Då extink~ tionen är stabil under flera dagar, kan mätningen även ske 8®Û2469-B 10 senare. Som fotometer kan i handeln förekommande filterfoto- metrar användas, varvid filtret väljes så att ett smalt område släppes igenom vid 575 nm. En lämplig filterfotometer är exempelvis den som beskrives i den tyska utläggningsskriften 2 448 206.
Om blod med en normal hemoglobin-koncentration av l6 g/l00 ml användes, erhålles vid detta utspädningsförhâllande en extink- tion av ca. 0,46 vid den angivna våglängden, mätt mot en med vatten fylld kuvett med samma skiktlängd (1 cm).
En jämförelse med en standardlösning (exempelvis en 0,1 mM klor- hemin-lösning i samma reaktionslösning eller en cyan-hemiglo- bin-lösning av känd koncentration, utspädd med samma volym re- aktionslösning) ger den önskade hemoglobin-koncentrationen i g/100 ml. __...7..._.__~..._....___..._...__.. . 8üi32469~f8 ll LITTERATUR BARER, R. och GAFFNEY, F. M.: The use of dilute alkaline in haemoglobinometry.
Clin. Chim. Acta 2, 140 - l56 (1957) Beschluss der Deutschen Gesellschaft für Innere Medizin betref- fend Standardisierung der Hämoglobin-Bestimmung. Ärztl. Labor 8, l88 (1962) CANNAN, R. K.: Proposal for a certified standard for use in hemoglobinometry - second and final report.
J. Lab. Clin. rfled. 52, 471 - 476 (1958) CIEGG, J. W. och KING. E. J.: Estimation of haemoglobin by the alkaline haematin method.
Brit. Med. J. 2, 329 - 333 (1942) Tyska normer: Bestimmung des Hämoglobingehaltes im Blut.
DIN Vornorm 58 931 (1970) DONALDSON, R., SISSON, R. B, KING, E. J., WOOTTON, I. D. P., MacFARLANE, R. G.: Determination of haemoglobin.
VII. Standardized optical data for absolute estimation.
Lancet 1, 874 ~ 881 (1951) MaCFARLANE, Ä. G., KING, E. J., WOOTTON, I. D. P., GILCHRIST, M.: Determination of haemoglobin III. Reliability of clinical and other methods.
Lancet 2, 282 - 296 (1948) 8Û@2469“8 12 GREEN, P. och TEAJ., c. F. J.= _ Modification of the cyanmethemoglobin reagent for analysis of hemoglobin in order to avoid precipitation of globulins.
Am. J. Clin. Pathol. 32, 216 - 217 (1959) HALLMANN, L.: Klinische Chemie und Mikroskopie (10. Aufl.) Thieme, Stuttgart 1966 HEILMEYER, L.: Medizinische Spektrophotometrie.
Fischer, Jena 1933 HENRY, R. J.: Clinical Chemistry (lst ed.) Harper & Row, New York 1964 HENRY, R. J., CANNON, D. C., WINKELMAN, J. W.: clinical Chemistry (znd ed.) Harper & Row, New York l974 HUNTER, F. T.: The quantitation of mixtures of hemoglobin derivatives by photoolectric spectrophotometry.
Thomas, Springfield 1951 International Committee for Standardization in Haematology.
Recommendations for haemoglobinometry in human blood.
Brit. J. Haemat. 13, 71 - 75 (1967) Van KAMPEN, E.J. och ZIJLSTRA, W. G.: Standardization of hemoglobinometry.
II. The hemoglobincyanide method.
Clin. Chim. Acta 6, 538 - 544 (1961) ..._ _...._.__,..-«~»--_-.-1_--.-.-«~»......... ___. - 8002469-8 13 van KAMPEN, E. J. och ZIJLSTRA, W. G.: In: Advances in Clinical Chemistry, Vol. 8 p. l6G (Sobotka, H., Stewart, C. P., edsJ Academic Press, New York 1965 KING, 5.: Alkaline haematin method for haemoglobin determination.
Brit. Med. J. 2, 349 - 350 (1947) KING, E. J. GILCHRIST, M., WOOTTON, I. 3. P., DONALDSON, R., SISSON, R. B, MacFARLANE, R. G., JOPE, J. M., O'BRIEN, J.R. P., PETERSON, J. M., STRANGEWAYS, D. H.: Determination of haemoglobin.
V. Precision of colorimetric methods.
Lancet 2, 563 - 566 (1948) KING, E.J., BARTHOLOMEW, R. J., GEISLER, M., VENTURA, S., WOOTTON, I. D. P., MaCFARLANE, R. G., DONALDSON, R., SISSON, R. B.: Determination of haemoglobin.
VIII. Accuracy of methods applied to abnormal bloods.
Lancet 1, 1044 - 1045 (1951) LEGOWSKI, S. och V. BOROVICZENY, K. G.: Exakte Hämoglobinbestimmung in der täglichen Praxis.
Dtsch. Med. Wschr. 87, 1953 - 1960 (1962) MASSMANN, w.; Einige qualitative Kohlenoxydbestimmungen im Blut.
Dtscn. Med. Wschr. 79, 1140 - 1142 (1954) PONDER, E.: Errors effecting the acid and the alkali hematin methods of determination hemoglobin.
J. biol. Chem. 144, 339 - 342 (1942) ...u-v-.w-fq--fi .........-...-..-.._......--_....__ _ i . -.........,._.-_...._ . ßÛÛZÅ-Weß RICE, E. W.: 'Rapid determination of total hemoglobin as hemoglobin cyanide in blood containing carboxyhemoglobin.
Clin. Chim. Acta 18, 89 - 91 (1967) RICHTERICH, R.: Klinische Chemie (3. Aufl.) Karger, Basel 1971 RICK, W.: Klinische Chemie und Mikroskopie (4. Aufl.) Springer, Berlin/Heidelberg/New York l976 RODKEY, F. L.: Kinetic aspects of cyanmethemoglobin formation from carboxyhemoglobin.
Clin. Chem. 13, 2 - 5 (1967) scAIFE, J. F. = Stability of alkaline solutions of haematin.
Analyst 86, 562 - 565 (1955) SPAANDER, J.: Die Verwertung von Blutuntersuchungen Strahlenschutz i. Forschung und Praxis 4, 122 - 127 (1964) SUNDERMÅN, F. W.: Status of clinical hemoglobinometry in the United States Am. J. Clin. Pathol. 43, 9 - 15 (l965) SUNDERMAN, F. W., MaCFATE, R. P., MacFADYEN, D. A., STEVENSON, G. F., COPELAND, G. E.: Symposium on clinical hemoglobinometry.
Am. J. Clin. Pathol. 23, 519 - 598 (1953) (8002469-8 TAYLOR, J. D. Och MILLER, J. D. M.: WU, H.: A source of error in the cyanmethemoglobin method of determination of hemoglobin concentration in blood containing carbon monoxide.
Am. J. Clin. Pathol. 43, 265 - 271 (1965) Studies on hemoglobin.
I. The advantage of alkaline solutions for colorimetric determination of hemoglobin.
J. Biochem. 2, 1973 - 180 (1922) ZIJLSTRA, W. G. och van KAMPEN, E. J.: Standardization of hemoglobinometry.
I. The extinction coefficient of hemoglobincyanide _ _ 540 at-å- 940 mu .EHiCW Clin. Chim. Acta 5, 719 ~ 726 (1960)
Claims (5)
1. l. Reagens för fotometrisk bestämning av hemoglobinhalten i blod, vilket vid indosering i blodprovet ger en karaktäris- tisk färgning, k ä n n e t e c k n a t av en 0,05-0,5 molar natrium- eller kaliumhydroxidlösning, försatt med 0,5-10 vikt- procent av en vattenlöslig, nonjonogen detergent, varigenom alla (i blodet förekommande) hemoglobin-derivat och hem- derivat överföres i alkaliskt hematin med ett absorptions- maximum vid ungefär 575 nm.
2. Reagens enligt patentkravet 1, k ä n n e t e c k n a t därav, att detergenten är en polyetylenglykol-p-alkylfenyleter R, vari 7 § x < med den allmänna formeln H-(0-CH2-CH2)x-O 12 och R betecknar en alkylrest av typen metyl, etyl, propyl, butyl, pentyl, hexyl, heptyl, oktyl, nonyl, decyl, undecyl och dodecyl, eller en polyetylenglykollauryl-, -cetyl-, -oleyl- eller -stearyleter.
3. Reagens enligt patentkravet 2, k ä n n e t e c k n a t därav, att detergenten består av dekaetylenglykol-p-t-oktyl- fenyleter.
4. Förfarande för bestämning av hemoglobinhalten i ett blodprov med användning av ett reagens enligt patentkraven l-3, varvid provet hemolyseras genom tillsats av en 0,05-0,5 molar natrium- eller kaliumhydroxidlösning och det alkaliska hematinet bestämmes fotometriskt, k ä n n e t e c k n a t därav, att till natrium~ eller kaliumhydroxidlösningen sättes 0,5-10 viktprocent av en vattenlöslig, nonjonogen detergent, varigenom alla (i blodet förekommande) hemoglobin-derivat och hem-derivat överföras i alkaliskt hematin med ett absorptions- maximum vid ungefär 575 nm, vid vilket den fotometriska mät- ningen genomföras.
5. Förfarande enligt patentkravet 4, k ä n n e t e c k ~ n a t därav, att som detergent användes en polyetylenglykol- ._qg,q~. 8002469-8 \7 p~alkylféhyleter, polyetylenglykollaurylater, polyetylen- glykolcetyleter, polyetylenglykololeyleter eller polyetylen- glykolstearyleter.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE2803109A DE2803109C2 (de) | 1978-01-25 | 1978-01-25 | Verfahren und Reagenz zur Bestimmung des Hämoglobingehaltes des Blutes |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SE8002469L SE8002469L (sv) | 1980-03-31 |
| SE445681B true SE445681B (sv) | 1986-07-07 |
Family
ID=6030310
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SE8002469A SE445681B (sv) | 1978-01-25 | 1980-03-31 | Reagens och forfarande for fotometrisk bestemning av hemoglobinhalten i blod |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4341527A (sv) |
| EP (1) | EP0003340A3 (sv) |
| JP (1) | JPS54148595A (sv) |
| AT (1) | AT367204B (sv) |
| BE (1) | BE47T1 (sv) |
| CH (1) | CH646525A5 (sv) |
| DE (1) | DE2803109C2 (sv) |
| ES (1) | ES477103A1 (sv) |
| FR (1) | FR2482729B1 (sv) |
| GB (1) | GB2052056B (sv) |
| IT (1) | IT1148290B (sv) |
| NL (1) | NL7915009A (sv) |
| SE (1) | SE445681B (sv) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4880749A (en) * | 1984-06-05 | 1989-11-14 | Eastman Kodak Company | Analytical element and its use in a whole blood hemoglobin assay |
| CA1263590A (en) * | 1984-12-06 | 1989-12-05 | Jeffrey Benezra | Cyanide-free hemoglobin reagent |
| US4772561A (en) * | 1985-12-23 | 1988-09-20 | Miles Inc. | Test device and method of determining concentration of a sample component |
| US4800167A (en) * | 1987-04-10 | 1989-01-24 | Abbott Laboratories | Reagent and process for the determination of hemoglobin in blood |
| WO1988009504A1 (en) * | 1987-05-29 | 1988-12-01 | Toa Medical Electronics Co., Ltd. | Method for classifying leukocytes and reagents |
| JP2619900B2 (ja) * | 1988-01-27 | 1997-06-11 | 東亜医用電子株式会社 | 血液中の白血球およびヘモグロビンの測定用試薬および方法 |
| EP0729031A1 (en) * | 1995-02-24 | 1996-08-28 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Set of reagents determining the content of total haemoglobin |
| DE19835243A1 (de) * | 1998-08-04 | 2000-02-24 | Lmb Technologie Gmbh | Vorrichtung und Verfahren zum Bestimmen eines Hämoglobinwerts von Blut |
| DE102005060993A1 (de) * | 2005-12-20 | 2007-06-28 | Medisynthana Diagnostics Gmbh & Co. Kg | Konversionsreagenz sowie Verfahren und Kit zur Bestimmung des Hämoglobins |
| US7560283B2 (en) * | 2006-01-27 | 2009-07-14 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Storage-stable cellular whole blood composition containing elevated amounts of D-dimer |
| US9826736B2 (en) * | 2010-08-12 | 2017-11-28 | Professional Disposables International, Inc. | Quaternary ammonium caprylyl glycol disinfectant wipes |
| CN112198265B (zh) * | 2020-03-16 | 2023-07-14 | 广州金域医学检验中心有限公司 | 用于同时检测血液类样本中多种类固醇激素的预处理方法、检测方法及试剂盒 |
| CN113008880A (zh) * | 2021-02-26 | 2021-06-22 | 必为(上海)医疗器械有限公司 | 一种医疗器械残留血检测套装及其使用方法 |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR1422881A (fr) * | 1963-08-16 | 1966-01-03 | Warner Lambert Pharmaceutical | Composition auxiliaire de diagnostic utilisable pour déterminer le cholestérol |
| BE790338A (fr) * | 1971-10-20 | 1973-04-20 | Mallinckrodt Chemical Works | Compositions reactives de recherche sur des echantillons biologiques, et leurs procedes de preparation et d'utilisation |
| US3847545A (en) * | 1972-05-18 | 1974-11-12 | Baxter Laboratories Inc | Diagnostic test for sickle-cell |
| US3964865A (en) * | 1975-01-30 | 1976-06-22 | Sigma Chemical Company | Lyophilized human hemoglobin standard for colorimetric determination of total hemoglobin |
| US4011045A (en) * | 1975-02-14 | 1977-03-08 | Bonderman Dean P | Turbidity reduction in triglyceride standards |
| US4050898A (en) * | 1976-04-26 | 1977-09-27 | Eastman Kodak Company | Integral analytical element |
| DE2961321D1 (en) * | 1978-11-01 | 1982-01-14 | Contraves Ag | Method for the reduction of the disturbance of photometric measurements by light scatter in a suspension to be measured and reagent for carrying out the method |
| DE2850603A1 (de) * | 1978-11-22 | 1980-06-19 | Merck Patent Gmbh | Haemolysierloesung und verfahren zur haemolyse von blut |
-
1978
- 1978-01-25 DE DE2803109A patent/DE2803109C2/de not_active Expired
-
1979
- 1979-01-19 GB GB8004473A patent/GB2052056B/en not_active Expired
- 1979-01-19 EP EP79100171A patent/EP0003340A3/de not_active Withdrawn
- 1979-01-19 NL NL7915009A patent/NL7915009A/nl not_active Application Discontinuation
- 1979-01-19 CH CH339280A patent/CH646525A5/de not_active IP Right Cessation
- 1979-01-19 BE BEBTR47A patent/BE47T1/xx not_active IP Right Cessation
- 1979-01-22 AT AT0043279A patent/AT367204B/de not_active IP Right Cessation
- 1979-01-24 JP JP699379A patent/JPS54148595A/ja active Granted
- 1979-01-24 ES ES477103A patent/ES477103A1/es not_active Expired
-
1980
- 1980-01-03 FR FR8000188A patent/FR2482729B1/fr not_active Expired
- 1980-03-31 SE SE8002469A patent/SE445681B/sv not_active IP Right Cessation
- 1980-04-01 IT IT86226/80A patent/IT1148290B/it active
- 1980-07-21 US US06/170,575 patent/US4341527A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ATA43279A (de) | 1981-10-15 |
| FR2482729A1 (fr) | 1981-11-20 |
| IT8086226A0 (it) | 1980-04-01 |
| US4341527A (en) | 1982-07-27 |
| SE8002469L (sv) | 1980-03-31 |
| AT367204B (de) | 1982-06-11 |
| CH646525A5 (de) | 1984-11-30 |
| BE47T1 (fr) | 1980-03-21 |
| JPS54148595A (en) | 1979-11-20 |
| IT1148290B (it) | 1986-11-26 |
| FR2482729B1 (fr) | 1987-05-07 |
| NL7915009A (nl) | 1980-06-30 |
| JPS6342230B2 (sv) | 1988-08-22 |
| GB2052056B (en) | 1983-01-12 |
| GB2052056A (en) | 1981-01-21 |
| DE2803109C2 (de) | 1987-02-26 |
| EP0003340A2 (de) | 1979-08-08 |
| ES477103A1 (es) | 1979-07-01 |
| EP0003340A3 (de) | 1979-09-05 |
| DE2803109A1 (de) | 1979-07-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Van Kampen et al. | Spectrophotometry of hemoglobin and hemoglobin derivatives | |
| Van Kampen et al. | Standardization of hemoglobinometry II. The hemiglobincyanide method | |
| US4582684A (en) | Cuvette for the photo determination of chemical components in fluids | |
| Burnett et al. | Recommendations for measurement of and conventions for reporting sodium and potassium by ion-selective electrodes in undiluted serum, plasma or whole blood | |
| SE445681B (sv) | Reagens och forfarande for fotometrisk bestemning av hemoglobinhalten i blod | |
| US8304244B2 (en) | Hemoglobin based bilirubin reference material | |
| CA2169803A1 (en) | Method to prepare dye-based reference material | |
| KR20230038489A (ko) | 전혈 시료의 혈장 분획에서 분석물의 농도를 결정하는 방법 | |
| US4448889A (en) | Fluid analysis | |
| US3000836A (en) | Stabilized whole blood standard and method of making the same | |
| Sherbon | Rapid determination of protein in milk by dye binding | |
| JP2022514833A (ja) | 全血試料中のヘマトクリット値の測定方法 | |
| Lott et al. | Evaluation of an automated urine chemistry reagent‐strip analyzer | |
| Harrison et al. | Three direct spectrophotometric methods for determination of total bilirubin in neonatal and adult serum, adapted to the Technicon RA-1000 analyzer. | |
| Lema et al. | Evaluation of the alkaline haematin D-575 method for haemoglobin estimation in east Africa. | |
| Liedtke et al. | Centrifugal analysis with automated sequential reagent addition: measurement of serum calcium. | |
| Dörner et al. | Improved automated leucocyte counting and differential in newborns achieved by the haematology analyser CELL‐DYN 3500™ | |
| Hertz et al. | Molar absorption coefficients for bilirubins in adult and infant serum with determination of an isosbestic point | |
| Raymond Gambino et al. | An Automatic Instrument for the Measurement of Hemog Lobin Concentration | |
| Weiss et al. | Diazo-based assay for total bilirubin in a coated thin film evaluated. | |
| Walton | General Laboratory Medicine | |
| Finley et al. | Assay of cerebrospinal fluid protein: a rate biuret method evaluated. | |
| Coitinho et al. | Auxiliary tools in tuberculosis. The hemolysis in pleural fluids underestimate the values of adenosine deaminase activity determined by the method of Giusti | |
| Coitinho et al. | La hemólisis en los fluidos pleurales subestima los valores de actividad de adenosina desaminasa determinados por el método de Giusti | |
| Rees | Evaluation of the alkaline haematin D-575 method for haemoglobin estimation in east |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| NAL | Patent in force |
Ref document number: 8002469-8 Format of ref document f/p: F |
|
| NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 8002469-8 Format of ref document f/p: F |