SE431487B - Particle analysis apparatus - Google Patents
Particle analysis apparatusInfo
- Publication number
- SE431487B SE431487B SE8301630A SE8301630A SE431487B SE 431487 B SE431487 B SE 431487B SE 8301630 A SE8301630 A SE 8301630A SE 8301630 A SE8301630 A SE 8301630A SE 431487 B SE431487 B SE 431487B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- particle
- liquid
- particles
- opening
- downstream
- Prior art date
Links
- 239000002245 particle Substances 0.000 title claims description 61
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title claims description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 29
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 7
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 6
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 claims description 5
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 claims 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 11
- 238000005253 cladding Methods 0.000 description 8
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 6
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000009652 hydrodynamic focusing Methods 0.000 description 2
- 238000002847 impedance measurement Methods 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- PIGCSKVALLVWKU-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoacridone Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C3=CC(N)=CC=C3NC2=C1 PIGCSKVALLVWKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000637792 Homo sapiens Solute carrier family 35 member G5 Proteins 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102100032019 Solute carrier family 35 member G5 Human genes 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000004020 conductor Substances 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 1
- 239000011435 rock Substances 0.000 description 1
- 238000012883 sequential measurement Methods 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
- G01N15/1404—Handling flow, e.g. hydrodynamic focusing
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N15/1031—Investigating individual particles by measuring electrical or magnetic effects
- G01N15/12—Investigating individual particles by measuring electrical or magnetic effects by observing changes in resistance or impedance across apertures when traversed by individual particles, e.g. by using the Coulter principle
- G01N15/13—Details pertaining to apertures
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
- G01N15/149—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry specially adapted for sorting particles, e.g. by their size or optical properties
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N2015/1019—Associating Coulter-counter and optical flow cytometer [OFC]
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N2015/1028—Sorting particles
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
- G01N15/1404—Handling flow, e.g. hydrodynamic focusing
- G01N2015/1413—Hydrodynamic focussing
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Optical Measuring Cells (AREA)
Description
azalean-3 mätningarna, och detta gör det nödvändigt att korrelera de två mätnings- typerna. Detta korrelerationsproblem är icke signifikant vid låga parti- kelflödeshastigheter, men vid höga partikelflödeshastigheter är det möj- ligt att de detekterade signalerna förvrängas genom sådana bildningar som cellaggregat som faller isär sedan de gått genom en volymavkännings- öppning för att separata gå till den optiska avkänningszonen, liksom förefintlighet av icke-fluorescerande partiklar, och möjligheten att två intilliggande celler byter lägen i flödet. Detta erfordrar ytterlig- are användning av speciella kretsanordningar för att kompensera tidsför- dröjningen mellan de optiska och elektroniska signalerna för en given par- tikel. the azalean-3 measurements, and this makes it necessary to correlate the two measurement types. This correlation problem is not significant at low particle flow rates, but at high particle flow rates it is possible that the detected signals are distorted by such formations as cell aggregates which fall apart after passing through a volume sensing aperture to separately go to the optical sensing zone. as well as the presence of non-fluorescent particles, and the possibility of two adjacent cells switching positions in the flow. This further requires the use of special circuit devices to compensate for the time delay between the optical and electronic signals for a given particle.
Då sortering icke användes, har det utvecklats en kombinerad elektro- optisk partikelanalysator i vilken alla mätningar sker samtidigt, och härigenom elimineras det invecklade och osäkra i att korrelera data er- hållna från följdmätningar. Denna elektrooptiska partikelanalysator har beskrivits i en artikel med titeln "Combined Optical and Electronic Analysis of Cells with AMAC Transducers", av Thomas et al., publicerad i The Journal of Histochemistry and Cytochemistry", vol. 25, nr. 7, (l977), s. 827-835. Denna multiparameter-partikelanalysator använder en kvadratisk avkänningsöppning där samtliga parametrar mätas samtidigt. Den kvadratíska öppningen är innesluten i en kub utbildad genom att fyra pyramider hållas Sâiiliilâfl .When sorting is not used, a combined electro-optical particle analyzer has been developed in which all measurements take place simultaneously, thereby eliminating the complexity and uncertainty of correlating data obtained from sequential measurements. This electro-optical particle analyzer has been described in an article entitled "Combined Optical and Electronic Analysis of Cells with AMAC Transducers", by Thomas et al., Published in The Journal of Histochemistry and Cytochemistry ", Vol. 25, No. 7, (1977). This multi-parameter particle analyzer uses a quadratic sensing aperture where all parameters are measured simultaneously.The quadratic aperture is enclosed in a cube formed by holding four pyramids Sâiiliilâfl.
Den föreliggande uppfinningen riktar sig mot en partikelanalyserings- apparat för studium av partiklar i suspension, med apparaten inkluderan- de en flödescell med en partikelavkänningsöppning genom vilken en ström av partiklar i suspension går, med flödescellen försedd med en uppströms- kanal och en nedströmskanal, med den nämnda partíkelavkänningsöppningen belägen däremellan och utgörande den enda mediumförbindelsen mellan de nämnda kanalerna, och utloppsorgan belägna i närheten av den nämnda ned- strömskanalen. Uppfinningen utmärkes av att ett vätskeinföringsorgan är uppbyggt och lägesplacerat nedströms den nämnda nedströmskanalens nedströms- ände och verksamt att införa vätska som strömmar in i såväl nämnda utlopps- organ som mot den uppströms belägna partikelavkänningsöppningen för att hydrodynamiskt fokusera partikelströmmen när den strömmar nedströms från den nämnda partikelavkänningsöppningen in i nämnda utloppsorgan.The present invention is directed to a particle analysis apparatus for studying particles in suspension, the apparatus including a flow cell having a particle sensing aperture through which a stream of particles in suspension passes, the flow cell provided with an upstream channel and a downstream channel, with the said particle sensing opening located therebetween and constituting the only medium connection between said channels, and outlet means located in the vicinity of said downstream channel. The invention is characterized in that a liquid introduction means is constructed and positioned downstream of the downstream end of said downstream channel and operatively introducing liquid flowing into both said outlet means and towards the upstream particle sensing opening to into said outlet means.
Hittills har sortering av droppar aldrig ingått i en elektrooptisk apparat i vilken elektriska impedansmätningar och optiska mätningar 8301630-3 skett samtidigt. Det har emellertid visat sig att trots flödeskamma- rens ringa volym kunde en hydrodynamisk fokusering av partikelströmmen medelst en vätskebeklädnad ske genom införandet av en beklädnadsvätska i botten på nedströmsöppningen och därigenom icke störa den optiska ut- rustningen.Until now, droplet sorting has never been included in an electro-optical apparatus in which electrical impedance measurements and optical measurements 8301630-3 took place simultaneously. However, it has been found that despite the small volume of the flow chamber, a hydrodynamic focusing of the particle stream by means of a liquid cladding could take place by introducing a cladding liquid at the bottom of the downstream opening and thereby not disturb the optical equipment.
Såsom uteslutande belysande utföringsformer av uppfinningen kommer dyli- ka att beskrivas under hänvisning till de bifogade ritningarna, där: Fig. l är dels en sektionsvy och dels ett blockschema för en apparat för partikelanalysering och sortering enligt uppfinningen, och Fig. 2 är en förstorad sektionsvy av avkänningsöppningsregionen hos flödescellen i fig. l.As exclusively illustrative embodiments of the invention, such will be described with reference to the accompanying drawings, in which: Fig. 1 is partly a sectional view and partly a block diagram of an apparatus for particle analysis and sorting according to the invention, and Fig. 2 is an enlarged sectional view of the sensing aperture region of the flow cell of Fig. 1.
Fig. l visar en genomströmníngsapparat l0 för partikelanalysering och sortering med ett sampelinföringsrör l2, ett beklädnadsrör lä anbragt i omgivande koaxiellt samband med röret 12, och en optiskt transparent flödescell l6 belägen vid rörets l2 ände. Flödescellen 16 har utbildats med ett par motstående urborrningar eller kanaler l8 och 20 och en mik- roskopisk avkänningsöppning 22, som bildar en mediumgenomgång mellan kanalernas ändar. öppningen 22 anger en partikelavkänningszon som kom- mer att beskrivas längre fram. En vätskeström med individuella suspen- derade partiklar, som härstammar från en tryckbehållare 23A, går genom röret l2. En salthaltig laminär vätskebeklâdnad, som härstammar från en annan tryckbehållare 23B, går genom röret ih för att omge partikelström- men. När vätskepartikelströmmen går ut från röret l2 och går in i den första kanalen l8, kommer ett hydrodynamiskt tryck att minska partikel- störmmens diameter när strömmen uppnår vätskebeklädnadens hastighet.Fig. 1 shows a flow-through apparatus 10 for particle analysis and sorting with a sample insertion tube 12, a casing tube 1 arranged in surrounding coaxial relationship with the tube 12, and an optically transparent flow cell 16 located at the end of the tube 12. The flow cell 16 is formed with a pair of opposing bores or channels 18 and 20 and a microscopic sensing opening 22, which forms a medium passage between the ends of the channels. the opening 22 indicates a particle sensing zone which will be described later. A liquid stream with individual suspended particles, originating from a pressure vessel 23A, passes through the tube 12. A saline laminar liquid coating, originating from another pressure vessel 23B, passes through the tube ih to surround the particle stream. When the liquid particle stream exits the tube 12 and enters the first channel 18, a hydrodynamic pressure will reduce the diameter of the particle stream when the stream reaches the velocity of the liquid coating.
Vätskebeklädnaden är även verksam att centrera partikelströmmen så att partiklarna går genom öppningen 22. Sedan de lämnat öppningen 22 går partiklarna in i den andra kanalen 20 i flödescellen l6.The liquid coating is also effective to center the particle stream so that the particles pass through the opening 22. After leaving the opening 22, the particles enter the second channel 20 in the flow cell 16.
Skilda systemkomponenter uppbäras av ett cylindriskt stativ 25. Ett munstycke Zh, med en utloppsöppning 26 utbildad däri, är anbragt vid flödescellens l6 ände så att munstycket 2ü och den andra kanalen 20 avgränsar en vätskefylld flödeskammare 28. Ett rör 29 är kopplat till stativet 25 medelst en röranslutning 30. En andra beklädnadsvätska matas via röret 29 till en vätskehålighet 3l, som står i mediumförbind- else med tre ïnloppsöppningar 32, som är utbildade i flödescellens l6 vägg. På grund av det tryckfall som hör samman med öppningen 22 är det 8301630-3 nödvändigt att införa en andra beklädnadsvätska i flödeskammaren 28 för att alstra en andra beklädnad som uppvisar tillräckliga hydrodyna- miska tryck för att föra partiklarna genom flödeskammaren 28 och ut genom utloppsöppningen 26. i motsats mot tidigare konstruktioner har den andra vätskebeklädnaden införts i flödeskammarens 28 nedre del och detta medför fördelar ifråga om optisk belysning och insamling, såsom kommer att beskrivas längre fram. Särskilt går bekiädnadsvätskan in i den andra kanalen 20 genom de till ett flertal uppgående inloppsöppningarna 32, som är belägna på ställen som ligger på ett avsevärt avstånd nedanför och nedströms avkänningsöppningen 22. Vidare införas den andra beklädnadsvätskan på ett icke koncentriskt sätt i förhållande till den partikelström som går ut från avkänningsöppningen 22 och insprutas i den andra kanalens 20 inre volym. Trots den andra kanalens 20 ringa volym och det icke koncentriska införandet av den andra vätskebeklädnaden vid den andra kanalens 20 botten har det visat sig att en del av den andra vätske- beklädnaden går "uppför" för att infånga den partikelström som går ut från avkänningsöppningen 22 medan en del av den andra beklädnadsvätskan går direkt till utloppsöppningen 26 och alla mellanliggande punkter. På detta sätt erhålles en god hydrodynamisk fokusering av partikelströmmen genom flödeskammaren 28 och strömmen tiilåtes därigenom att gå ut genom utloppsöppningen 26. Vid det föredragna utförandet visas tre inloppsöpp- ningar 32. Det är dock tydligt att antalet öppningar 32 är en konstruk- tíonsfråga och att det räcker med en, men att det, i beroende av deras diameter, är lämpligt att ha mera än en för att tillåta rengöring och spolning av flödeskammaren 28.Different system components are supported by a cylindrical frame 25. A nozzle Zh, with an outlet opening 26 formed therein, is arranged at the end of the flow cell 16 so that the nozzle 2u and the second channel 20 define a liquid-filled flow chamber 28. A tube 29 is connected to the frame 25 a pipe connection 30. A second cladding liquid is fed via the pipe 29 to a liquid cavity 31, which is in medium communication with three inlet openings 32, which are formed in the wall of the flow cell 16. Due to the pressure drop associated with the opening 22, it is necessary to introduce a second cladding fluid into the flow chamber 28 to produce a second cladding which exhibits sufficient hydrodynamic pressure to pass the particles through the flow chamber 28 and out through the outlet opening 26. In contrast to previous constructions, the second liquid coating has been inserted into the lower part of the flow chamber 28 and this entails advantages in terms of optical illumination and collection, as will be described later. In particular, the cladding liquid enters the second channel 20 through the plurality of ascending inlet openings 32, which are located at places which are at a considerable distance below and downstream of the sensing opening 22. Furthermore, the second cladding liquid is introduced in a non-concentric manner relative to the particle flow. which exits the sensing opening 22 and is injected into the inner volume of the second channel 20. Despite the small volume of the second channel 20 and the non-concentric insertion of the second liquid coating at the bottom of the second channel 20, it has been found that a part of the second liquid coating goes "up" to capture the particle stream exiting the sensing opening 22. while some of the second cladding fluid goes directly to the outlet opening 26 and all intermediate points. In this way a good hydrodynamic focusing of the particle flow through the flow chamber 28 is obtained and the flow is thereby allowed to go out through the outlet opening 26. In the preferred embodiment, three inlet openings 32 are shown. one is sufficient, but that, depending on their diameter, it is convenient to have more than one to allow cleaning and flushing of the flow chamber 28.
De systemkomponenter som visats i blockform är sådana som normalt före- finns i vanliga partikelanalyserings- och sorteringssystem, vilka ibland brukar betecknas som cytometriska flödessorteringssystem. Det har endast visats de komponenter i partikelanalyserings~ och sorteringsapparaten l0 som är nödvändiga för att förklara den föreliggande uppfinningens arbets- sätt.The system components shown in block form are those that are normally present in ordinary particle analysis and sorting systems, which are sometimes referred to as cytometric flow sorting systems. Only those components of the particle analysis and sorting apparatus 10 which are necessary to explain the operation of the present invention have been shown.
På vanligt sätt har vibrationsenergi pålagts på vätskestrålen 3#, som går ut från utloppsöppningen 26, genom ett vibrationsorgan 36. Såsom en möjlig- het kan vibrationsorganet 36 omfatta en piezoelektrisk kristall. Flödes- cellen i6 är anbragt på och uppbäres av en piezoelektrisk kristall, som sätter flödesceilen 16 i vibration med en hög frekvens. Den exakta fre- 8301630-3 kvens som cellen l6 vibrerar med beror på den diameter som valts för utloppsöppningen 26. Dessa vibrationer åstadkommer små störningar, nor- malt vågrörelser, på strålens 3ü yta, och dessa växer på grund av väl kända ytspänningsverkningar och klipper slutligen av strålen vid en av- brytningspunkt 38 till väl utbildade små droppar ÅÛ. Utloppsöppningens 26 diameter, vätskestrålens 3Å hastighet och partikelsuspensionens ut- spädning är samtliga förutbestämda och normalt finns det icke mera än en cell i en given droppe #0.In the usual manner, vibrational energy has been applied to the liquid jet 3 #, which exits the outlet opening 26, through a vibrating member 36. As a possibility, the vibrating member 36 may comprise a piezoelectric crystal. The flow cell 16 is mounted on and supported by a piezoelectric crystal which vibrates the flow cell 16 at a high frequency. The exact frequency with which the cell 16 vibrates depends on the diameter selected for the outlet opening 26. These vibrations cause small disturbances, normally wave motions, on the surface 3ü of the beam, and these grow due to well-known surface tension effects and rocks. finally by the beam at a break point 38 to well-formed droplets ÅÛ. The diameter of the outlet opening 26, the velocity of the liquid jet 3Å and the dilution of the particle suspension are all predetermined and normally there is no more than one cell in a given drop # 0.
Medelst en vanlig sorteringsanordning 60 laddas de valda dropparna #0 medelst exempelvis en laddningskrage med en pâlagd spänning. Andra drop- par laddas icke. Sorteringsanordníngen 60 inkluderar även ett par avböj- ningsplattor mellan vilka en elektrisk potentialskillnad åstadkommits.By means of a standard sorting device 60, the selected droplets # 0 are charged by means of, for example, a charging collar with an applied voltage. Other drops are not charged. The sorting device 60 also includes a pair of deflection plates between which an electrical potential difference is made.
När dropparna går mellan plattorna, kommer de laddade dropparna att av- böjas i det elektriska fältet, och därigenom kan de laddade dropparna avskiljas från de oladdade dropparna. Beslutet att ladda en given droppe grundar sig på de redan beskrivna optiska och impedansmätningar som skett ifråga om den partikel som förefinns inuti den nämnda droppen. Den nyss gjorda beskrivningen av utbildandet och sorterandet av droppar har hållits kortfattad eftersom denna del av apparaten l0 är väl känd för fackmannen.When the droplets pass between the plates, the charged droplets will be deflected in the electric field, and thereby the charged droplets can be separated from the uncharged droplets. The decision to charge a given drop is based on the already described optical and impedance measurements that have taken place with respect to the particle present inside the said drop. The recent description of the training and sorting of droplets has been kept brief because this part of the apparatus 10 is well known to those skilled in the art.
I flödescellen 16 belyses partikelsuspensionen på vanligt sätt under det att den går genom avkänningsöppningen 22, och detta sker medelst ett ljus- strålknippe âstadkommet av en belysningskälla 42, exempelvis en laser.In the flow cell 16, the particle suspension is illuminated in the usual manner as it passes through the sensing opening 22, and this takes place by means of a light beam provided by an illumination source 42, for example a laser.
Den i sampelsuspensionen befintliga partikelns gensvar på belysningen, i typiska fall ljusspridning, fluorescens eller absorbans, detekteras med- elst ett optiskt detektorsystem hk. Såsom är väl känt för fackmannen finns det talrika belysnings- och ljusuppsamlingsarrangemang som kan användas tillsammans med flödescellen 16. Genom att placera inloppsöppningen 32 nedströms öppningen 22 i enlighet med uppfinningen stör öppningarna 32 icke belysningen och ljusuppsamlingen och därför är större rymdvinklar ifråga om belysningen och uppsamlingen möjliga.The response of the particle present in the sample suspension to the illumination, typically light scattering, fluorescence or absorbance, is detected by means of an optical detector system hp. As is well known to those skilled in the art, there are numerous illumination and light collection arrangements that can be used with the flow cell 16. By placing the inlet opening 32 downstream of the opening 22 in accordance with the invention, the openings 32 do not interfere with lighting and light collection and therefore are larger space angles. possible.
Avkänningsöppningen 22 tjänar icke endast som en optisk avkänningszon på redan beskrivet sätt utan tjänar även som en zon för elektronisk volymavkänning i enlighet med den av Wallace Coulter angivna principen, såsom kommer att beskrivas i det följande. En uppströmselektrod #6 är företrädesvis anbragt inuti beklädnadsröret lå. En nedströmselektrod Å8 är företrädesvis anordnad i en på avstånd belägen kammare 50, som 8301 630-13 står i mediumförbindelse med flödeskammaren 28 via röret 29. En källa 52 för lågfrekvent ström, inkluderande likström, eller en högfrekvent ström eller båda är elektriskt kopplad till elektroderna 46 och H8 medelst elektriska ledare SÅ resp. 56. När partiklarna går genom öpp- ningen 22, modulerar de den elektriska strömmen för att åstadkomma partikelpulser som detekteras av en vanlig detektorkretsanordning 58.The sensing aperture 22 not only serves as an optical sensing zone as already described but also serves as an electronic volume sensing zone in accordance with the principle set forth by Wallace Coulter, as will be described in the following. An upstream electrode # 6 is preferably located inside the casing. A downstream electrode Å8 is preferably arranged in a remote chamber 50, which 8301 630-13 is in medium communication with the flow chamber 28 via the tube 29. A source 52 for low frequency current, including direct current, or a high frequency current or both are electrically connected to the electrodes. 46 and H8 by means of electrical conductors SO resp. 56. As the particles pass through the aperture 22, they modulate the electric current to produce particle pulses detected by a conventional detector circuitry 58.
Den nämnda strömkällan 52 och detektorkretsanordningen 58 har angivits i de amerikanska patentenfl 3,7l0,933; 3,502,97Ä och 3,502,973.The said power source 52 and the detector circuitry 58 are disclosed in U.S. Patents fl 3,710,933; 3,502,97Ä and 3,502,973.
Företrädesvis men icke nödvändigtvis har kanalerna 18 och 20 en cirku- lär tvärsektion med måttet l,27 mm och flödescellens l6 totala längd är 6,35 mm. Flödescellen l6 är utbildad av ett monolitiskt kvartsstycke och därigenom kan flödescellen l6 vara ganska liten. Ju mindre flödes- cellens l6 storlek är desto bättre är densammas optiska egenskaper gen- om att flödescellen närmar sig en punktkälla för de optiska signalerna.Preferably but not necessarily, the channels 18 and 20 have a circular cross-section measuring 1.27 mm and the total length of the flow cell 16 is 6.35 mm. The flow cell 16 is formed by a monolithic quartz piece and thereby the flow cell 16 can be quite small. The smaller the size of the flow cell 16, the better its optical properties in that the flow cell approaches a point source of the optical signals.
Företrädesvis approximerar partikelavkänningsöppningens 22 tvärsektion en kvadrat. Såsom framgår av förstoringen i fig. 2 är kanalernas l8 och 20 ändar utbildade med sfäriska ytor 62 och 64, som båda avbrytas genom öppningen 22. Genom att åstadkomma rundade ändar hos urborrningarna be- höver öppningen 22 icke vara precist placerad. Utsidorna är flata och parallella med öppningens 22 väggar. I ett typiskt fall har öppningen 22 väggar med längder av 50 till l00)§n. Företrädesvis ligger utlopps- öppningen 26 och kanalerna l8 och 20 koaxiellt i linje med varandra.Preferably, the cross section of the particle sensing aperture 22 approximates one square. As can be seen from the magnification in Fig. 2, the ends of the channels 18 and 20 are formed with spherical surfaces 62 and 64, both of which are interrupted through the opening 22. By providing rounded ends of the bores, the opening 22 need not be precisely located. The exteriors are flat and parallel to the walls of the opening 22. In a typical case, the opening has 22 walls with lengths of 50 to l00) §n. Preferably, the outlet opening 26 and the channels 18 and 20 are coaxially aligned with each other.
De nu i detta stycke beskrivna dimensionerna och konfigurationerna är en- dast belysande och andra former och storlekar kan användas.The dimensions and configurations now described in this paragraph are illustrative only and other shapes and sizes may be used.
Ehuru apparaten i första hand användes för cellstudier kan den likaväl tillämpas för andra slags partiklar.Although the device was primarily used for cell studies, it can still be applied to other types of particles.
Ehuru särskilda utföringsformer av uppfinningen har visats och beskrivits är avsikten icke att härigenom begränsa uppfinningen till detaljerna i dessa utföringsformer. Istället omfattar uppfinningen alla modifikation- er, utföringsformer , användningar och ekvivalenter av den föreliggande uppfinningen som faller inom idén och omfånget för uppfinningen, be- skrivningen och de bifogade patentkraven.Although particular embodiments of the invention have been shown and described, it is not intended to limit the invention to the details of these embodiments. Instead, the invention encompasses all modifications, embodiments, uses, and equivalents of the present invention that fall within the spirit and scope of the invention, the description, and the appended claims.
Claims (6)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB08308181A GB2137352B (en) | 1983-03-24 | 1983-03-24 | Particle analyzing and sorting apparatus |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SE8301630D0 SE8301630D0 (en) | 1983-03-24 |
| SE8301630L SE8301630L (en) | 1984-02-06 |
| SE431487B true SE431487B (en) | 1984-02-06 |
Family
ID=10540165
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SE8301630A SE431487B (en) | 1983-03-24 | 1983-03-24 | Particle analysis apparatus |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| AU (1) | AU1279083A (en) |
| CH (1) | CH651930A5 (en) |
| DE (1) | DE3310551C2 (en) |
| FR (1) | FR2543298B1 (en) |
| GB (1) | GB2137352B (en) |
| NL (1) | NL8301045A (en) |
| SE (1) | SE431487B (en) |
Families Citing this family (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2653885B1 (en) * | 1989-10-27 | 1994-01-14 | Abx | APPARATUS FOR COUNTING AND DETERMINING AT LEAST ONE LEUKOCYTAIC SUB-POPULATION. |
| DE19520298A1 (en) * | 1995-06-02 | 1996-12-05 | Bayer Ag | Sorting device for biological cells or viruses |
| JP4323571B2 (en) | 1997-01-31 | 2009-09-02 | エックスワイ， インコーポレイテッド | Optical device |
| US6149867A (en) | 1997-12-31 | 2000-11-21 | Xy, Inc. | Sheath fluids and collection systems for sex-specific cytometer sorting of sperm |
| US6228652B1 (en) * | 1999-02-16 | 2001-05-08 | Coulter International Corp. | Method and apparatus for analyzing cells in a whole blood sample |
| US7208265B1 (en) | 1999-11-24 | 2007-04-24 | Xy, Inc. | Method of cryopreserving selected sperm cells |
| US7713687B2 (en) | 2000-11-29 | 2010-05-11 | Xy, Inc. | System to separate frozen-thawed spermatozoa into x-chromosome bearing and y-chromosome bearing populations |
| CA2822983C (en) | 2000-11-29 | 2017-05-09 | Xy, Llc | System to separate frozen-thawed spermatozoa into x-chromosome bearing and y-chromosome bearing populations |
| WO2002075284A2 (en) * | 2001-03-20 | 2002-09-26 | Abb Bomem Inc. | Flow-through cell |
| US8486618B2 (en) | 2002-08-01 | 2013-07-16 | Xy, Llc | Heterogeneous inseminate system |
| JP4595067B2 (en) | 2002-08-01 | 2010-12-08 | エックスワイ，エルエルシー | Low-pressure sperm cell separation system |
| CN100570360C (en) | 2002-08-15 | 2009-12-16 | Xy公司 | A kind of flow cytometer and flow cytometry method |
| US7169548B2 (en) | 2002-09-13 | 2007-01-30 | Xy, Inc. | Sperm cell processing and preservation systems |
| DK2305171T3 (en) | 2003-03-28 | 2022-03-21 | Inguran Llc | Apparatus and methods for providing sexed animal semen |
| ES2541121T3 (en) | 2003-05-15 | 2015-07-16 | Xy, Llc | Efficient classification of haploid cells by flow cytometry systems |
| US7892725B2 (en) | 2004-03-29 | 2011-02-22 | Inguran, Llc | Process for storing a sperm dispersion |
| AU2005266930B2 (en) | 2004-07-22 | 2010-09-16 | Inguran, Llc | Process for enriching a population of sperm cells |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| BE793185A (en) * | 1971-12-23 | 1973-04-16 | Atomic Energy Commission | APPARATUS FOR QUICKLY ANALYZING AND SORTING PARTICLES SUCH AS BIOLOGICAL CELLS |
| US3826364A (en) * | 1972-05-22 | 1974-07-30 | Univ Leland Stanford Junior | Particle sorting method and apparatus |
| DE2632962C3 (en) * | 1976-07-22 | 1980-08-21 | Max-Planck-Gesellschaft Zur Foerderung Der Wissenschaften E.V., 3400 Goettingen | Particle separator |
| DE2712360A1 (en) * | 1977-03-22 | 1978-09-28 | Zoeld Tibor Dr Phys | Counter and sizing appts. for suspended particles - has narrow aperture outlet and electrodes positioned outside flow path |
| DE2750447C2 (en) * | 1977-11-11 | 1986-04-17 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V., 3400 Göttingen | Device for measuring certain properties of particles suspended in a particle suspension |
| DE2943116C2 (en) * | 1979-10-25 | 1986-06-19 | Gesellschaft für Strahlen- und Umweltforschung mbH, 8000 München | Device for flow cytometric reaction and / or diffusion measurement |
-
1983
- 1983-03-22 CH CH1549/83A patent/CH651930A5/en not_active IP Right Cessation
- 1983-03-23 DE DE3310551A patent/DE3310551C2/en not_active Expired - Fee Related
- 1983-03-24 FR FR8304872A patent/FR2543298B1/en not_active Expired
- 1983-03-24 AU AU12790/83A patent/AU1279083A/en not_active Abandoned
- 1983-03-24 SE SE8301630A patent/SE431487B/en not_active IP Right Cessation
- 1983-03-24 GB GB08308181A patent/GB2137352B/en not_active Expired
- 1983-03-24 NL NL8301045A patent/NL8301045A/en not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CH651930A5 (en) | 1985-10-15 |
| GB8308181D0 (en) | 1983-05-05 |
| GB2137352A (en) | 1984-10-03 |
| GB2137352B (en) | 1986-10-15 |
| DE3310551C2 (en) | 1994-07-28 |
| DE3310551A1 (en) | 1984-09-27 |
| SE8301630L (en) | 1984-02-06 |
| AU1279083A (en) | 1984-09-27 |
| FR2543298B1 (en) | 1985-08-09 |
| FR2543298A1 (en) | 1984-09-28 |
| SE8301630D0 (en) | 1983-03-24 |
| NL8301045A (en) | 1984-10-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SE431487B (en) | Particle analysis apparatus | |
| US4361400A (en) | Fluidic assembly for an ultra-high-speed chromosome flow sorter | |
| US4515274A (en) | Particle analyzing and sorting apparatus | |
| US5030002A (en) | Method and apparatus for sorting particles with a moving catcher tube | |
| US5569367A (en) | Apparatus for separating a mixture | |
| US4395676A (en) | Focused aperture module | |
| US5275787A (en) | Apparatus for separating or measuring particles to be examined in a sample fluid | |
| Mullaney et al. | Cell sizing: a light scattering photometer for rapid volume determination | |
| US7392908B2 (en) | Methods and apparatus for sorting particles hydraulically | |
| CA1256825A (en) | Method and apparatus for sorting particles | |
| US4673288A (en) | Flow cytometry | |
| US4818103A (en) | Flow cytometry | |
| US4325483A (en) | Method for detecting and controlling flow rates of the droplet forming stream of an electrostatic particle sorting apparatus | |
| JP4964752B2 (en) | Method and apparatus for sorting particles | |
| US7880108B2 (en) | Deflection plate | |
| US4710021A (en) | Particulate matter analyzing apparatus and method | |
| WO2001002836A1 (en) | Apparatus and method for verifying drop delay in a flow cytometer | |
| JPH0355781B2 (en) | ||
| US4484134A (en) | Elongate particle sensing aperture | |
| EP0421406B1 (en) | Apparatus and method for separating or measuring particles to be examined in a sample fluid | |
| Stovel | The influence of particles on jet breakoff. | |
| JP2749906B2 (en) | Particle measurement device | |
| CN103954537B (en) | A kind of dry type grain graininess measuring method | |
| JP3291580B2 (en) | Apparatus for measuring electric charge of particles in liquid, blood cell measuring method and electric charge detecting method | |
| CA1200400A (en) | Particle analyzing and sorting apparatus |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 8301630-3 Effective date: 19910117 Format of ref document f/p: F |