SE426698B

SE426698B - New therapeutically active derivatives of 3,4- dehydroproline

Info

Publication number: SE426698B
Application number: SE7901316A
Authority: SE
Inventors: M A Ondetti
Original assignee: Squibb & Sons Inc
Priority date: 1976-12-22
Filing date: 1979-02-14
Publication date: 1983-02-07
Also published as: SE7901316L

Abstract

New compounds with the general formula <IMAGE> where R1 is a hydrogen atom or a lower alkanoyl group, R2 is a hydrogen atom or a lower alkyl group, and n has the value of 0 or 1, together with basic salts thereof, for use as antihypertensive agents.

Description

7901316-5 till heptyl, exempelvis metyl, etyl, propyl, isopropyl, butyl, l$0butYl, t-butyl, pentyl, isopentyl och liknande. Cl-C4-grup- perna, särskilt Cl- och C2-grupperna är lämpligast. 7901316-5 to heptyl, for example methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, 10-butyl, t-butyl, pentyl, isopentyl and the like. The C1-C4 groups, especially the C1 and C2 groups, are most suitable.

De lägre alkanoylgrupperna är de som har acylgrupper av lägre (C2-C7)-fettsyror; exempelvis acetyl, propionyl, butyryl, iso- På samma sätt är de lägre alkanoylgrupper lämpligast. butyryl och liknande. som har upp till 4 kolatomer och speciellt acetyl, Produkterna med formeln I kan framställas med olika syntesmeto- der.The lower alkanoyl groups are those having acyl groups of lower (C2-C7) fatty acids; for example, acetyl, propionyl, butyryl, iso- Similarly, the lower alkanoyl groups are most suitable. butyryl and the like. having up to 4 carbon atoms and especially acetyl. The products of formula I can be prepared by various synthetic methods.

I allmänhet kan dessa föreningar syntetiseras genom koppling av syran med formeln (ïl) R2 Rl-S-(CH2)n-CH-COOH eller dess kemiska ekvivalent till den cykliska iminosyran med formeln I §(III) H a c / š Hzc CH I 1 _ HN---ca. coon med vilken som helst metod som kan användas för bildning av amid- bindningar. Se exempelvis "Methoden der Grganischem Chemie" (Houben~Weyl), del l, p. 735 och följande, del II, p. följande (1974). Enligt en metod kopplas en syra eller ester med formeln III till en halogenalkansyra med formeln l och (IV} T X~(cH2)n-CH-coon 2 7901316-5 vari X är en halogen, företrädesvis klor eller brom, genom ett av de kända förfarandena enligt vilket syran IV är aktiverad före reaktionen med syran III,omfattande bildning av en blandad anhydrid, symmetrisk anhydrid, syraklorid, aktiv ester eller användning av Woodward-reagens K, EEDQ (N-etoxikarbonyl-2-etoxi- -l,2¿dihydrokinolin) eller liknande.In general, these compounds can be synthesized by coupling the acid of formula (II) R 2 R 1 -S- (CH 2) n -CH-COOH or its chemical equivalent to the cyclic amino acid of formula I § (III) H ac / š Hzc CH I 1 _ HN --- ca. coon by any method that can be used to form amide bonds. See, for example, "Methoden der Grganischem Chemie" (Houben ~ Weyl), Part 1, p. 735 et seq., Part II, p. The following (1974). According to one method, an acid or ester of formula III is coupled to a haloalkanoic acid of formula I and (IV} TX - (cH2) n-CH-coon wherein X is a halogen, preferably chlorine or bromine, through one of the known processes according to which acid IV is activated before the reaction with acid III, comprising the formation of a mixed anhydride, symmetrical anhydride, acid chloride, active ester or the use of Woodward reagent K, EEDQ (N-ethoxycarbonyl-2-ethoxy-1,2) (Dihydroquinoline) or similar.

Produkten av denna reaktion är en förening med formeln H (v) C \\\ H c . cn 132 21 i x-(ca ) -cn-- c -- N cn 2 II l 0 coon Denna produkt utsättes för omplaceringsreaktion med anjonen av en tiosyra med formeln (VI) R3-CO-5H vari R3 är lägre alkyl, vilket ger en produkt med formeln H WII) c / \~ c RS-CO-S- (CHZ) èfCH* C _* N som kan överföras till produkten (vin) H HS-(CH 3 u 7901316-5 genom ammonolys eller alkalisk hydrolys. När OR är en ester- grupp (exempelvis R är lägre alkyl) kan estergruppen avlägsnas på vanligt sätt. Exempelvis när R är tert-butoxi eller tert- amyloxi ger behandlingen av estern med formeln VII eller VIII med trifluorättiksyra och anisol motsvarande fria syra. När andra alkoxigrupper är närvarande ger alkalisk hydrolys av föreningen med formeln VII eller VIII den fria syran.The product of this reaction is a compound of the formula H (v) C \\\ H c. cn 132 21 i x- (ca) -cn-- c - N cn 2 II l 0 coon This product is reacted with the anion of a thioacid of formula (VI) R 3 -CO-5H wherein R 3 is lower alkyl, which gives a product of the formula H WII) c / \ ~ c RS-CO-S- (CH 2) èfCH * C _ * N which can be transferred to the product (wine) H HS- (CH 3 u 7901316-5 by ammonolysis or alkaline When OR is an ester group (for example R is lower alkyl) the ester group can be removed in the usual way, for example when R is tert-butoxy or tert-amyloxy the treatment of the ester of formula VII or VIII with trifluoroacetic acid and anisole gives the corresponding free acid When other alkoxy groups are present, alkaline hydrolysis of the compound of formula VII or VIII gives the free acid.

När en syra med formeln III användes såsom utgångsmaterial eller när den slutliga produkten erhålles såsom fri karbonsyra, "kan denna syra omvandlas till dess ester, exempelvis genom förestring med en diazoalkan, såsom diazometan, l-alkyl-3-p- tolyl-triazen, såsom l~n-butyl-3-p-tolyltriazen eller liknande.When an acid of formula III is used as starting material or when the final product is obtained as free carboxylic acid, "this acid can be converted into its ester, for example by esterification with a diazoalkane, such as diazomethane, 1-alkyl-3-p-tolyl-triazene, such as 1-n-butyl-3-p-tolyltriazen or the like.

Enligt en annan variant behandlas en ester företrädesvis metyl- eller t-butylestern med formeln III i ett vattenfritt medium såsom diklormetan, tetrahydrofuran, dioxan eller liknande, med en acyltioalkansyra med formeln R (IX) |2 R --- co- s--(CH2)n-- cH-coon 3 vari R3 är lägre alkyl, i närvaro av dicyklohexylkarbodiimid, N,N'-karbonylbisimidazoï, etoxiacetylen, difenylfosforylazid eller liknande kopplingssubstanser vid en temperatur inom inter- vallet 0-l0°C. Estergruppen kan sedan avlägsnas exempelvis genom behandling med trifluorättiksyra och anisol vid ungefär rumstemperatur varvid man erhåller den fria syran (R=H).According to another variant, an ester is preferably treated with the methyl or t-butyl ester of formula III in an anhydrous medium such as dichloromethane, tetrahydrofuran, dioxane or the like, with an acylthioalkanoic acid of formula R (IX) | 2 R --- cos- (CH 2) n - cH-coon 3 wherein R 3 is lower alkyl, in the presence of dicyclohexylcarbodiimide, N, N'-carbonylbisimidazole, ethoxyacetylene, diphenylphosphoryl azide or similar coupling substances at a temperature in the range 0-110 ° C. The ester group can then be removed, for example, by treatment with trifluoroacetic acid and anisole at about room temperature to give the free acid (R = H).

Alternativt kan en ester med formeln III (exempelvis R är lägre alkyl, särskilt t-butyl) bringas att reagera med en tiolakton, exempelvis ß-propiotiolakton, armetyl~§-propiotiolakton eller liknande i ett vattenfritt lösningsmedel, såsom tetrahydrofuran, dioxan, metylenklorid eller liknande vid ungefär OOC till unge~ fär rumstemperatur. Estergruppen kan avlägsnas med anisol och trifluorättiksyra såsom beskrivits ovan. 7901316-5 Produkterna med formeln I har en asymmetrisk kolatom och två om R2 betecknar en annan grupp än väte. Dessa kolatomer är marke- rade med en asterisk i formeln I. Föreningarna föreligger så- ledes i stereoisomera former eller racemiska blandningar därav.Alternatively, an ester of formula III (for example R is lower alkyl, especially t-butyl) may be reacted with a thiolactone, for example β-propiotiolactone, armethyl-β-propiotiolactone or the like in an anhydrous solvent such as tetrahydrofuran, dioxane, methylene chloride or similar at about 0 ° C to approximately room temperature. The ester group can be removed with anisole and trifluoroacetic acid as described above. 7901316-5 The products of formula I have an asymmetric carbon atom and two if R2 represents a group other than hydrogen. These carbon atoms are marked with an asterisk in formula I. The compounds thus exist in stereoisomeric forms or racemic mixtures thereof.

Alla dessa ligger inom ramen för uppfinningen. Den ovan beskrivna syntesen kan använda racematet eller en av enantiomererna som utgångsmaterial. När det racemiska utgângsmaterialet användes i syntetiseringsförfarandet kan stereoisomererna erhållna i pro- dukten separeras genom konventionell kromatografi eller frak- tionerad kristallisation. I allmänhet utgör L-isomeren med hän- syn till kolatomen i aminosyran den isomera formen som är att föredra.All of these are within the scope of the invention. The synthesis described above can use the racemate or one of the enantiomers as starting material. When the racemic starting material is used in the synthesis process, the stereoisomers obtained in the product can be separated by conventional chromatography or fractional crystallization. In general, with respect to the carbon atom of the amino acid, the L-isomer constitutes the preferred isomeric form.

Föreningarna enligt uppfinningen bildar basiska salter med olika oorganiska och organiska baser, vilka även ligger inom ramen för uppfinningen. Sådana salter omfattar ammoniumsalter, alkalimetall- salter, såsom natrium~ och kaliumsalter (vilka är de mest lämp- liga), alkaliska jordartsmetallsalter, såsom kalcium- och magne- siumsalter, salter med organiska baser, exempelvis dicyklohexyl~ aminsalt, bensatin, N-metyl-D-glukamin, hydrabamin, salter med aminosyror, såsom arginin, lysin och liknande. De icke-toxiska, fysiologiskt godtagbara salterna är att föredra; trots det är andra salter även användbara, exempelvis vid isolering eller rening av produkten.The compounds according to the invention form basic salts with various inorganic and organic bases, which are also within the scope of the invention. Such salts include ammonium salts, alkali metal salts such as sodium and potassium salts (which are most suitable), alkaline earth metal salts such as calcium and magnesium salts, salts with organic bases such as dicyclohexylamine salt, benzatin, N-methyl -D-glucamine, hydrabamine, salts with amino acids such as arginine, lysine and the like. The non-toxic, physiologically acceptable salts are preferred; nevertheless, other salts are also useful, for example in isolating or purifying the product.

Saiterna bildas på konventionellt sätt genom att man omsätter den fria syraformen av produkten med en eller flera ekvivalenter av åan lämpliga bas, som ger den önskade katjonen i ett lösnings- medel eller medium i vilket saltet är olösligt eller i vatten och avlägsnar vattnet genom frystorkning. Genom neutralisering av saltet med en olöslig syra, såsom ett katjonbytarharts i väteform (exempelvis polystyrensulfonsyraharts, såsom Dowex 50) eller med en vattenhaltig syra, och extraktion med ett organiskt lösningsmedel, exempelvis etylacetat, diklormetan eller liknande kan den fria syraformen erhållas och om så önskas ett annat salt bildas. 7901516-5 Ytterligare experimentella detaljer visas i exemplen, som utgör lämpliga utföringsformer och även tjänstgör som modeller för framställningen av andra enheter av gruppen.The salts are formed in a conventional manner by reacting the free acid form of the product with one or more equivalents of the appropriate base, which gives the desired cation in a solvent or medium in which the salt is insoluble or in water and removes the water by freeze-drying. By neutralizing the salt with an insoluble acid, such as a cation exchange resin in hydrogen form (for example, polystyrene sulfonic acid resin, such as Dowex 50) or with an aqueous acid, and extraction with an organic solvent, for example ethyl acetate, dichloromethane or the like, the free acid form can be obtained another salt is formed. 7901516-5 Further experimental details are shown in the examples, which constitute suitable embodiments and also serve as models for the preparation of other units of the group.

Föreningarna enligt uppfinningen är användbara såsom hypoten- siva medel. De hindrar omvandling av dekapeptidangiotensin I till angiotensin II och är därför användbara för att minska eller lindra hypertension beroende av angiotensin. Verkan av enzymet renin på angiotensinogen, ett pseudoglobulin i blod- plasma, producerar angiotensin I. Angiotensin I överföres via angiotensinomvandlande enzym (ACE) till angiotensin II.The compounds of the invention are useful as hypotensive agents. They prevent the conversion of decapeptide angiotensin I to angiotensin II and are therefore useful in reducing or alleviating hypertension due to angiotensin. The action of the enzyme renin on angiotensinogen, a pseudoglobulin in blood plasma, produces angiotensin I. Angiotensin I is converted via angiotensin converting enzyme (ACE) to angiotensin II.

Den senare är en närvarande aktiv pressorsubstans, vilken har angivits såsom det förorsakande ämnet i olika former av hyper- tension hos olika djurarter, exempelvis råttor och hundar.The latter is an active compressor substance present, which has been reported as the causative agent in various forms of hypertension in various animal species, for example rats and dogs.

Föreningarna enligt uppfinningen ingriper i angiotensinogenet -$(renin)-y angiotensin I-ä(ACE)-7 angiotensin II-serien genom att förhindra angiotensinomvandlande enzym och minskning eller eliminering av bildandet av pressorsubstansen angiotensin II.The compounds of the invention intervene in the angiotensinogen-β (renin) -γ angiotensin I-ä (ACE) -7 angiotensin II series by preventing the angiotensin converting enzyme and reducing or eliminating the formation of the pressor substance angiotensin II.

Således genom administrering av en komposition innehållande en eller en kombination av föreningar med formeln I eller fysio- logiskt godtagbara salter därav, angiotensinberoende hypertension hos de djurarter som lider därav minskas. En enstaka dos eller företrädesvis två till fyra uppdelade dagliga doser, framställda på basis av ungefär 0,1 till 100 mg/kg/dag, företrädesvis unge~ fär l-50 mg/kg/dag är lämpliga för att reducera blodtrycket såsom anges i djurmodellförsöken beskrivna av S.LÄ Engel, T.R.Thus, by administering a composition containing one or a combination of compounds of formula I or physiologically acceptable salts thereof, angiotensin-dependent hypertension in the animal species suffering therefrom is reduced. A single dose or preferably two to four divided daily doses, prepared on the basis of about 0.1 to 100 mg / kg / day, preferably about 1-50 mg / kg / day are suitable for reducing blood pressure as indicated in animal model experiments. described by S.LÄ Engel, TR

Schaeffer, M.H. Waugh och B. Rubin, Proc. Soc. Exp. Biol. Med. låå, 483 (l973). Substansen administreras företrädesvis oralt men parenteral administration, såsom subkutant, intramuskulärt, intravenöst eller intraperitonealt, kan även användas.Schaeffer, M.H. Waugh and B. Rubin, Proc. Soc. Exp. Biol. With. låå, 483 (l973). The substance is preferably administered orally, but parenteral administration, such as subcutaneous, intramuscular, intravenous or intraperitoneal, may also be used.

Föreningarna enligt uppfinningen kan användas för att uppnå reduktion av blodtrycket genom framställning av kompositioner, såsom tabletter, kapslar eller elixir för oral administration eller i sterila lösningar eller suspensioner för parenteral administration. Ungefär 10 till 500 mg av en förening eller blandning av föreningar med formeln I eller fysiologiskt godtag- 7901516-5 bara salter därav blandas med en fysiologiskt godtagbar vehikel, bärare, excipient, bindemedel, skyddsmedel, stabilisator, smak- ämnen, osv. i en enhetsdoseringsform som godtages enligt farma- ceutisk praxis. Mängden aktiv substans i dessa kompositioner eller blandningar är sådan att en lämplig dos inom området angivet ovan erhålles.The compounds of the invention may be used to achieve a reduction in blood pressure by the preparation of compositions such as tablets, capsules or elixirs for oral administration or in sterile solutions or suspensions for parenteral administration. About 10 to 500 mg of a compound or mixture of compounds of formula I or physiologically acceptable salts thereof are mixed with a physiologically acceptable vehicle, carrier, excipient, binder, preservative, stabilizer, flavoring agent, etc. in a unit dosage form which is acceptable according to the practice of the pharmaceutical industry. The amount of active substance in these compositions or mixtures is such that a suitable dose within the range indicated above is obtained.

Uppfinningen åskådliggöres närmare medelst följande exempel och utgör särskilt lämpliga utföringsformer. Temperaturerna anges i Celsius-grader.The invention is further illustrated by the following examples and constitutes particularly suitable embodiments. Temperatures are given in degrees Celsius.

Exemgel 1. l-(3-acetyltiopropanoyl)-DL-3,4-dehydroprolinmetylester 3,75 g DL-3,4-dehydroprolinmetylester löses i 40 ml diklormetan och lösningen kyles på ett isvattenbad. En lösning av 6,18 g dicyklohexylkarbodiimid i 21 ml diklormetan tillsättes och där- efter tillsättes omedelbart 4,45 g 3-acetyltiopropansyra.Example Gel 1. 1- (3-Acetylthiopropanoyl) -DL-3,4-dehydroproline methyl ester 3.75 g of DL-3,4-dehydroproline methyl ester are dissolved in 40 ml of dichloromethane and the solution is cooled on an ice-water bath. A solution of 6.18 g of dicyclohexylcarbodiimide in 21 ml of dichloromethane is added and then 4.45 g of 3-acetylthiopropanoic acid are added immediately.

Efter 15 minuters omröring på isvattenbadet och 16 timmar vid rumstemperatur avfiltreras fällningen och filtratet koncentreras till torrhet i vakuum. Återstoden löses i etylacetat och tvättas till neutral reaktion. Det organiska skiktet torkas över mag- nesiumsulfat och koncentreras till torrhet för bildning av l-(3-acetyltiopropanoyl)-DL-3,4-dehydroprolinmetylestern.After stirring for 15 minutes on the ice-water bath and 16 hours at room temperature, the precipitate is filtered off and the filtrate is concentrated to dryness in vacuo. The residue is dissolved in ethyl acetate and washed until neutral. The organic layer is dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness to give the 1- (3-acetylthiopropanoyl) -DL-3,4-dehydroproline methyl ester.

Ešemoel 2. l-(3-merkaøtopropanoyl)-DL-3,4-dehydroprolin 2,5 g l-(3-acetyltiopropanoyl)-DL-3,4-dehydroprolinmetylester löses i en blandning av 10 ml metanol och 20 ml normal natrium~ hydroxid. Blandningen omröres vid rumstemperarur under ett täcke av kväve i 2 timmar, utspädes med vatten och extraheras med etyl- acetat. Vattenskiktet surgöres och extraheras med etylacetat.Example 2. 1- (3-mercotopropanoyl) -DL-3,4-dehydroproline 2.5 g of 1- (3-acetylthiopropanoyl) -DL-3,4-dehydroproline methyl ester are dissolved in a mixture of 10 ml of methanol and 20 ml of normal sodium ~ hydroxide. The mixture is stirred at room temperature under a blanket of nitrogen for 2 hours, diluted with water and extracted with ethyl acetate. The aqueous layer is acidified and extracted with ethyl acetate.

Det organiska skiktet torkas över magnesiumsulfat och koncen- treras till torrhet för bildning av l-(3-merkaptopropanoyl)-DL- -3,4-dehydroprolin med smältpunkten 160-1630 (sintrar 1430) i form av dicyklohexylaminsalt; Rf 0,33, silikagel, etylacetat: pyridinzättiksyrazvatten (45:20:6:ll). 79013l6-5 Exemgel 3. l-(3-acetyltiopropanoyl)-DL-3,4-dehydroprolin 5 g 3-acetyltiopropanoylklorid och l5 ml ZN natriumhydroxid sättes till en lösning av 3,4 g DLr3,4-dehydroprolin i 30 ml normal natriumhydroxid, kyld i ett isvattenbad. Efter tre timmars omröring vid rumstemperatur extraheras blandningen med eter, vattenfasen surgöres och extraheras med etylacetat. Det organiska skiktet torkas över magnesiumsulfat och indunstas till torrhet för bildning av l-(3-acetyltiopropanoyl)-DL-3,4-dehydro- prolin med smältpunkten l56-1580 (sintrar 1520) i form av dicyklo- hexylaminsàlt. Rf 0,38; silikagel; etylacetat:pyridin:ättiksyra: vatten (45:20:6:ll).The organic layer is dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness to give 1- (3-mercaptopropanoyl) -DL- -3,4-dehydroproline, m.p. 160-1630 (sintering 1430) as a dicyclohexylamine salt; Rf 0.33, silica gel, ethyl acetate: pyridineacetic acid water (45: 20: 6: 11). Example 90 3. 1- (3-Acetylthiopropanoyl) -DL-3,4-dehydroproline 5 g of 3-acetylthiopropanoyl chloride and 1.5 ml of ZN sodium hydroxide are added to a solution of 3.4 g of DLr3,4-dehydroproline in 30 ml of normal sodium hydroxide , cooled in an ice water bath. After stirring for three hours at room temperature, the mixture is extracted with ether, the aqueous phase is acidified and extracted with ethyl acetate. The organic layer is dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness to give 1- (3-acetylthiopropanoyl) -DL-3,4-dehydroproline, m.p. 175-1580 (sintering 1520) as a dicyclohexylamine salt. Rf 0.38; silica gel; ethyl acetate: pyridine: acetic acid: water (45: 20: 6: 11).

Exemgeï 4. 2-etvl-3-acetylticpropansvra 6,61 g tiolättiksyra, 6,25 g etylakrylsyra och några få kri- staller 2,2'~azobis-(2-metylpropionitril) återflödesupphettas under fyra timmar och blandningen får sedan stå vid rumstempera- tur 48 timmar. Reaktionsblandningen koncentreras till torrhet och återstoden âterindunstas två gånger ur toluen för bildning av 7,88 g 2-etyl-3-acetyltiopropansyra.Example 4. 2-Ethyl-3-acetylticpropanoic acid 6.61 g of thiolacetic acid, 6.25 g of ethyl acrylic acid and a few crystals 2,2 '-azobis- (2-methylpropionitrile) are refluxed for four hours and the mixture is then allowed to stand at room temperature. - tour 48 hours. The reaction mixture is concentrated to dryness and the residue is re-evaporated twice from toluene to give 7.88 g of 2-ethyl-3-acetylthiopropanoic acid.

Exemgel 5. 2-etyl-3-acetyltiopropanoylklorid 7,88 g 2-etyl-3-acetyltiopropansyra löses i 6,14 g tionylklorid och lösningen omröres vid rumstemperatur under l8 timmar.Example Gel 5. 2-Ethyl-3-acetylthiopropanoyl chloride 7.88 g of 2-ethyl-3-acetylthiopropanoic acid are dissolved in 6.14 g of thionyl chloride and the solution is stirred at room temperature for 18 hours.

Destillation ger 2-etyl-3-acetyltiopropanoylklorid i form av en klargul olja, utbyte 4,8 g, kokpunkt 50-600 (0,04 mm Hg). _Exemgel 6. l-(3-acetvltio-2-etylnropanoyl)-L-3,4-dehydroprolin 3.4 g L-anß-aehyaroproiin löses i so m1 normal 'natriumhydroxia och lösningen kyles på ett isvattenbad. 5,84 g 3-acetyltio-2- etylpropanoylklorid och 15 ml 2N natriumhYdr0XíÖ till' sättes och lösningen omröres vid rumstemperatur under tre timmar.Distillation gives 2-ethyl-3-acetylthiopropanoyl chloride as a clear yellow oil, yield 4.8 g, b.p. 50-600 (0.04 mm Hg). Example Gel 1- 1- (3-Acetylthio-2-ethylnropanoyl) -L-3,4-dehydroproline 3.4 g of L-anis-ahyaroproline are dissolved in normal sodium hydroxy and the solution is cooled on an ice-water bath. 5.84 g of 3-acetylthio-2-ethylpropanoyl chloride and 15 ml of 2N sodium hydroxide are added and the solution is stirred at room temperature for three hours.

Blandningen extraheras med eter, surgöres och extraheras med etylacetat. Den organiska fasen torkas över magnesiumsulfat och 7901316-5 9 indunstas till torrhet för bildning av l-(3-acetyltio-2-etyl- propanoyl)-L-3,4-dehydroprolin.The mixture is extracted with ether, acidified and extracted with ethyl acetate. The organic phase is dried over magnesium sulphate and evaporated to dryness to give 1- (3-acetylthio-2-ethylpropanoyl) -L-3,4-dehydroproline.

Exemgel 1¿ l-(2-etyl-3-merkaptooropanoyl)-L-3,4-dehydroprolin 3 g 1-(3-acetyltio-2-etylpropanoyl)-L-3,4-dehydroprolin löses i en blandning av 10 ml vatten och 10 ml koncentrerad ammoniak under ett täcke av kväve. Efter 25 minuter surgöres reaktions~ blandningen och extraheras med etylacetat. Det organiska skiktet torkas över magnesiumsulfat och indunstas till torrhet för bildning av l-(2-etyl-3-merkaptopropanoyl)-L-3,4-dehydroprolin.Example 1 1- (2-ethyl-3-mercaptooropanoyl) -L-3,4-dehydroproline 3 g of 1- (3-acetylthio-2-ethylpropanoyl) -L-3,4-dehydroproline are dissolved in a mixture of 10 ml water and 10 ml of concentrated ammonia under a blanket of nitrogen. After 25 minutes, the reaction mixture is acidified and extracted with ethyl acetate. The organic layer is dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness to give 1- (2-ethyl-3-mercaptopropanoyl) -L-3,4-dehydroproline.

Exempel 8. 1-(2-acetyltiopropanoyl)-L-3,4-dehydroprolin 5,65 g L-3,4-dehydroprolin löses i 50 ml lN vattenhaltig natrium- hydroxid och lösningen kyles på ett isvattenbad under omröring. 5 ml ZN natriumhydroxid och 8,57 g 2-brompropanoylklorid till- sättes. Blandningen omröres vid rumstemperatur l timme. En blandning av 4,18 g tioättiksyra och 4,8 g kaliumkarbonat i 50 ml vatten tillsättes och blandningen omröres vid rumstemperatur 18 timmar. Efter surgöring extraheras blandningen med etylacetat.Example 8. 1- (2-Acetylthiopropanoyl) -L-3,4-dehydroproline 5.65 g of L-3,4-dehydroproline are dissolved in 50 ml of 1N aqueous sodium hydroxide and the solution is cooled on an ice-water bath with stirring. 5 ml of ZN sodium hydroxide and 8.57 g of 2-bromopropanoyl chloride are added. The mixture is stirred at room temperature for 1 hour. A mixture of 4.18 g of thioacetic acid and 4.8 g of potassium carbonate in 50 ml of water is added and the mixture is stirred at room temperature for 18 hours. After acidification, the mixture is extracted with ethyl acetate.

Det organiska skiktet torkas över magnesiumsulfat och koncen- treras till torrhet i vakuum för bildning av 1-(2-acetyltio- propanoyl)-L~3,4~dehydroprolin.The organic layer is dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness in vacuo to give 1- (2-acetylthiopropanoyl) -L-3,4-dehydroproline.

ExemEel_â. l~(2-merkaptopropanoyl)-L-3,4-dehydroorolin Genom att ersätta 1-(2-acetyltiopropanoyl)-L-3,4~dehydroprolinen med 1-(3-acetyltio~2-etylpropanoyl)-L-3,4-dehydroprolin vid förfarandet enligt exempel 7 erhåller man l-(2~merkaptopropanoyl)- -L-3,4-dehydroprolin. ïå=§@1”-*f>§l_l9..-_ 1,1'~[ditiobis-(2-metyl-3-propanoyl)]-bis-L-3,4-dehydroprolin 1 g l-(3-merkapto-2-metylpropanoyl)-L-3,4-dehydroprolin löses i vatten och pH justeras till 6,5 med lN natriumhydroxid.ExemEel_â. 1- (2-Mercaptopropanoyl) -L-3,4-dehydrooroline By replacing 1- (2-acetylthiopropanoyl) -L-3,4-dehydroproline with 1- (3-acetylthio-2-ethylpropanoyl) -L-3, 4-dehydroproline In the procedure of Example 7, 1- (2-mercaptopropanoyl) -L-3,4-dehydroproline is obtained. ïå = § @ 1 ”- * f> §l_l9 ..-_ 1,1 '~ [dithiobis- (2-methyl-3-propanoyl)] - bis-L-3,4-dehydroproline 1 g l- (3 -mercapto-2-methylpropanoyl) -L-3,4-dehydroproline is dissolved in water and the pH is adjusted to 6.5 with 1N sodium hydroxide.

En etanolhaltig lösning av jod tillsättes droppvis under upp- rätthållande av ett pH mellan 6 och 7 genom noggrann tillsats 79Û1316-5 10 av lN natriumhydroxid. När man erhåller en permanent gul tärg stopoas tillsatsen av jod och färgen avlägsnas med natriumtio- 'sulfat. Reaktionsblandningen surgöres och extraheras.med etyl- acetat. Det organiska skiktet torkas över magnesiumsulfat och indunstas till torrhet för bildning av l,l'-[ditiobis-(2-metyl- _3-pr0Panoyl)1-bis-L-3,4-dehydroprolin.An ethanolic solution of iodine is added dropwise while maintaining a pH between 6 and 7 by careful addition of 1N sodium hydroxide. When a permanent yellow tar is obtained, the addition of iodine is stopped and the paint is removed with sodium thiosulfate. The reaction mixture is acidified and extracted with ethyl acetate. The organic layer is dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness to give 1,1 '- [dithiobis- (2-methyl-3-propanoyl) -1-bis-L-3,4-dehydroproline.

Exemgel ll. 1-(3-merkapto-2-metylpropanoy1)-L-3,4-dehydroprolin Genom att ersätta L-3,4-dehydroprolin med 4,5-dehydropiperidin- -2-karbonsyra vid förfarandet enligt exempel 10 och därefter underkasta produkten förfarandet enligt exempel 7 erhåller man l-(3-merkapto;2-metylpropanoyl)-L-3,4-dehydroprolin. I Exemgel 12. l-(3-merkapto-2-metylpropanoyl)-L-3,4-dehydroprolin-natriumsalt En lösning av l-(3-merkapto-2-metylpropanoyl)-L-3,4-dehydroprolin i vatten neutraliseras med lN natriumhydroxid och vattnet av- lägsnas sedan genom frystorkning för bildning av l-(3-merkapto~ -2-metylpropanoyl)-L-3,4-dehydroprolin-natriumsalt.Exemgel ll. 1- (3-Mercapto-2-methylpropanoyl) -L-3,4-dehydroproline By replacing L-3,4-dehydroproline with 4,5-dehydropiperidine-2-carboxylic acid in the procedure of Example 10 and then subjecting the product to the procedure according to Example 7, 1- (3-mercapto; 2-methylpropanoyl) -L-3,4-dehydroproline is obtained. In Example Gel 12. 1- (3-Mercapto-2-methylpropanoyl) -L-3,4-dehydroproline sodium salt A solution of 1- (3-mercapto-2-methylpropanoyl) -L-3,4-dehydroproline in water is neutralized with 1N sodium hydroxide and the water is then removed by lyophilization to give 1- (3-mercapto--2-methylpropanoyl) -L-3,4-dehydroproline sodium salt.

Exemgel 13. l-(3-merkapto-2-metylpropanoyl)-L-3,4-dehydroprolin-dicyklo- ggåylammoniumsalt Till en lösning av l-(3-merkapto-2-metylpropanoyl)-L-3,4-dehydro- prolin i etylacetat sättes en ekvimolär mängd dicyklohexylamin.Example Gel 13. 1- (3-Mercapto-2-methylpropanoyl) -L-3,4-dehydroproline-dicyclogoylammonium salt To a solution of 1- (3-mercapto-2-methylpropanoyl) -L-3,4-dehydro- proline in ethyl acetate is added an equimolar amount of dicyclohexylamine.

Den bildade fällningen isoleras genom centrifugering för bild~ ning av 1-(3-merkapto-2-metylpropanoyl)-L-3,4-dehydroprolin- dicyklohexylammoniumsalt.The precipitate formed is isolated by centrifugation to give 1- (3-mercapto-2-methylpropanoyl) -L-3,4-dehydroproline dicyclohexylammonium salt.

Exemgel 14. 1-(3-acetyltiopropanoyl)-DL-3,4~dehydroprolin 1,02 g DL-3,4-dehydroprolin löstes i 9 ml lN vattenhaltig natriumhydroxid och kyldes på ett isbad. Till denna lösning sattes l,5 g acetyltiopropionylklorid i 3 ml eter. 4,8 ml 2N natriumhydroxid tillsattes gradvis under upprätthållande av ett pH omkring 8,0. Den vattenhaltiga lösningen extraherades 7901316-5 ll med etylacetat. Den vattenhaltiga lösningen bringas ner till ett pH av 1,5 varvid en olja utskilde sig vilken avlägsnades.Example Gel 14. 1- (3-Acetylthiopropanoyl) -DL-3,4-dehydroproline 1.02 g of DL-3,4-dehydroproline was dissolved in 9 ml of 1N aqueous sodium hydroxide and cooled on an ice bath. To this solution was added 1.5 g of acetylthiopropionyl chloride in 3 ml of ether. 4.8 ml of 2N sodium hydroxide was added gradually while maintaining a pH of about 8.0. The aqueous solution was extracted with ethyl acetate. The aqueous solution is brought down to a pH of 1.5 whereby an oil precipitates which is removed.

Den vattenhaltiga lösningen tvättades med etylacetat och 7 etylacetattvättvätskan sattes till den utskilda oljan. Lös- ningsmedlet avlägsnades och återstoden upplöstes i 7 ml aceto- nitril. 1,9 ml dicyklohexylamin (DCHA) tillsattes följt av 20 ml eter. Titelprodukten (DCHA-salt) utseparerades såsom kristaller (2,5 g), smältpunkt 156-1580.The aqueous solution was washed with ethyl acetate and the ethyl acetate wash was added to the separated oil. The solvent was removed and the residue was dissolved in 7 ml of acetonitrile. 1.9 ml of dicyclohexylamine (DCHA) was added followed by 20 ml of ether. The title product (DCHA salt) was separated as crystals (2.5 g), m.p. 156-1580.

C22H3SN2Ü4S Beräknat: c 62,38 H 3,33 N 6,61 s 7,57 Funnet: C 62,05 H 8,47 N 6,61 S 7,57 Exemgel 15. l«(3-acetyltiopronanoyl)-DL-3,4-dehydroprolin En blandning av 800 mg DL-3,4-dehydroprolin, 2,45 g acetyltio~ propionsyra~p-nitrofenylester och l,l ml trietylamin i 30 ml dimetylformamid och 8 ml vatten omrördes 72 timmar. Lösnings- medlen avlägsnades och återstoden kromatograferades på silika- gel (Baker, 200 g) med användning av lösningsmedelssystemet: etylacetat; pyridin:ättiksyra:vatten (60:20:6:ll) för bildning av 1,27 g produkten med smältpunkten 156-1580 (DCHA-salt). §§eeeel_l§i l-(3~merkaptonrQpanoyl)-DL-3,4-dehydroprolin 3,0 q l-(3ﬂacetyltiopropanoyl)-DL-3,4-dehydroprolin löstes i 15 ml 5,5N metanolhaltig ammoniak och hölls vid rumstemperatur under 45 minuter. Lösningsmedlet avlägsnades och återstoden upplöstes i vatten, fick passera genom AG-50-harts, lyofilisera~ des och kromatograferades över silikagel (50 g) med användning av lësningsmedelssystemet: bensen:ättiksyra (8:2) för bildning av 0,8 g produkt, smältpunkt l6l~l63° (sintrar 1430) i form av DCHA~salt.C22H3SN2U4S Calculated: c 62.38 H 3.33 N 6.61 s 7.57 Found: C 62.05 H 8.47 N 6.61 S 7.57 Example gel 15. 1 «(3-acetylthiopronanoyl) -DL- 3,4-dehydroproline A mixture of 800 mg of DL-3,4-dehydroproline, 2.45 g of acetylthiopropionic acid β-nitrophenyl ester and 1.1 ml of triethylamine in 30 ml of dimethylformamide and 8 ml of water was stirred for 72 hours. The solvents were removed and the residue was chromatographed on silica gel (Baker, 200 g) using the solvent system: ethyl acetate; pyridine: acetic acid: water (60: 20: 6: 11) to give 1.27 g of product, m.p. 156-1580 (DCHA salt). 1- (3-Mercaptonylpanoyl) -DL-3,4-dehydroproline 3,0- (3- Acetylthiopropanoyl) -DL-3,4-dehydroproline was dissolved in 15 ml of 5.5N methanol-containing ammonia and kept at room temperature. for 45 minutes. The solvent was removed and the residue was dissolved in water, passed through AG-50 resin, lyophilized and chromatographed on silica gel (50 g) using the solvent system: benzene: acetic acid (8: 2) to give 0.8 g of product. melting point 16l ~ l63 ° (sintering 1430) in the form of DCHA ~ salt.

W H NG S “8 ll 3 Beräknat: C 47,7ê H 5,51 N 6,96 S 15,93 Funnet: C 48,09 H 5,73 N 6,86 S 15,65 7901316-5 12 Exempel 17. 1-[D-3-(acetyltio)-2~metvlpropanoy1]-DL-3,4-dehydroprolin 3,39 g DL-3,4-dehydroprolin löstes i vattenhaltig natriumkarho- nat och kyldes på ett isbad. Därtill sattes 5,5 g D-3-acetyl-tio- -2-metylpropionylklorid i 10 ml eter i två portioner. 16 ml 4N natriumkarbonatlösning tillsattes under 15 minuter under upprätthållande av pH vid ungefär 7,5. Lösningen omrördes där- efter en timme, extraherades med etylacetat (bortkastades), surgjordes till pH 2, mättades med natriumklorid och extrahera- des med etylacetat. Etylacetatextraktet koncentrerades, sattes till en silikagelpelare (300 g) och eluerades med bensenzättik- syra (10:2) för bildning av 5,7 g produkt, [a]š5 = -69,10 (c = 2, CH30H). Rf = 0,34 (silikagel, bensen:ättiksyra 7:2).WH NG S "8 ll 3 Calculated: C 47.7ê H 5.51 N 6.96 S 15.93 Found: C 48.09 H 5.73 N 6.86 S 15.65 7901316-5 12 Example 17. 1- [D-3- (acetylthio) -2-methylpropanoyl] -DL-3,4-dehydroproline 3.39 g of DL-3,4-dehydroproline were dissolved in aqueous sodium carbonate and cooled on an ice bath. To this was added 5.5 g of D-3-acetyl-thio--2-methylpropionyl chloride in 10 ml of ether in two portions. 16 ml of 4N sodium carbonate solution was added over 15 minutes while maintaining the pH at about 7.5. The solution was then stirred for one hour, extracted with ethyl acetate (discarded), acidified to pH 2, saturated with sodium chloride and extracted with ethyl acetate. The ethyl acetate extract was concentrated, added to a silica gel column (300 g) and eluted with benzene acetic acid (10: 2) to give 5.7 g of product, [α] D 25 = -69.10 (c = 2, CH 3 OH). Rf = 0.34 (silica gel, benzene: acetic acid 7: 2).

CllHl5NO4S'H2O Beräknat: C 47,99 H 6,22 N 5,09 S 11,69 Funnet: C 48,20 H 6,29 N 4,91 S 11,34 Exempel 18. l-[D-3-(acetyltio)-2-metylpropanoyl]-L-3,4-dehydronrolin Till en omrörd lösning av 4,7 g av produkten från exempel 22 i 100 ml acetonitril sattes 4 ml dicyklohexylamin (DCHA). Lös- ningen hölls kyld över natten och det kristalliserade mate- rialet filtrerades och omkristalliserades ur acetonitril för bildning av 2,8 g produkt, i form av DCHA-salt, [d]å5 = -z22° (c = z, cnaon), smäitpunkt (ncHA-sait) 1ss-19o°. 2,7 g DCHA-salt upplöstes i 25 ml vatten och behand1ades.med AG-50 (H+)-harts (bäddvolym 90 ml) och filtrerades. Bartset tvättades noggrannt med vatten (200 ml), metanolzvatten (1:l, 100 ml) och 200 ml metanol. Tvättvätskorna kombinerades och indunstades till torrhet för bildning av 1,45 g av titelpro- dukten, Ialšs = ~326° (c = 1, CH30H). Rf = 0,36, silikagel, bensen:ättiksyra (7:2).C 11 H 15 NO 4 S · H 2 O Calculated: C 47.99 H 6.22 N 5.09 S 11.69 Found: C 48.20 H 6.29 N 4.91 S 11.34 Example 18. 1- [D-3- ( acetylthio) -2-methylpropanoyl] -L-3,4-dehydronroline To a stirred solution of 4.7 g of the product of Example 22 in 100 ml of acetonitrile was added 4 ml of dicyclohexylamine (DCHA). The solution was kept cooled overnight and the crystallized material was filtered and recrystallized from acetonitrile to give 2.8 g of product, in the form of DCHA salt, [d] α5 = -z22 ° (c = z, cnaon), melting point (ncHA side) 1ss-19o °. 2.7 g of DCHA salt were dissolved in 25 ml of water and treated with AG-50 (H +) resin (bed volume 90 ml) and filtered. The bartset was washed thoroughly with water (200 ml), methanolic water (1: 1, 100 ml) and 200 ml of methanol. The washings were combined and evaporated to dryness to give 1.45 g of the title product, Ialšs = 32326 ° (c = 1, CH 3 OH). Rf = 0.36, silica gel, benzene: acetic acid (7: 2).

CllHl5N04S: Beräknat: C 51,35 H 5,88 N 5,44 S 12,46 Funnet: C 51,30 H 6,20 N 5,43 S 12,16 - 7901316-5 13 Exemgel 19. l-(D-3~merkapto-2-metylpropanoyl)-L-3,4-dehydroprolin Ett prov av titelprodukten från exempel 23 (1,2 g) löstes i 10 ml metanol och därtill sattes (under argonatmosfär) 8 ml vattenhaltig ammoniumhydroxid (l3,5N). Lösningen hölls vid rumstemperatur 35 minuter, indunstades, upplöstes i 20 ml vatten och surgjordes till pH 1,5, och extraherades med etyl- acetat. Etylacetatextraktet indunstades för bildning av 629 mg av produkten med smältpunkten 121-1240 (sintrar ll6°), [q]â5 = -352° (C = 1,2, cH3oH).C 11 H 15 NO 4 S: Calculated: C 51.35 H 5.88 N 5.44 S 12.46 Found: C 51.30 H 6.20 N 5.43 S 12.16 - 7901316-5 13 Example 19. 1- (D -3-mercapto-2-methylpropanoyl) -L-3,4-dehydroproline A sample of the title product from Example 23 (1.2 g) was dissolved in 10 ml of methanol and to this was added (under argon atmosphere) 8 ml of aqueous ammonium hydroxide (13.5N ). The solution was kept at room temperature for 35 minutes, evaporated, dissolved in 20 ml of water and acidified to pH 1.5, and extracted with ethyl acetate. The ethyl acetate extract was evaporated to give 629 mg of the product, m.p. 121-1240 (sintering 166 °), [q] δ = -352 ° (C = 1.2, cH 30 H).

C9Hl3N03S Beräknat: C 50,22 H 6,09 N 6,51 S 14,89 FHnﬂ@t= C 49.93 H 5,84 N 6,28 s 14,87C9H13NO3S Calculated: C 50.22 H 6.09 N 6.51 S 14.89 FHn ﬂ @ t = C 49.93 H 5.84 N 6.28 s 14.87

Claims

1. 7901316-5 11+ PATENT CLAIM 1. Compound of the formula HCHC / \\ C "a 2 n FZ | [_ R -s--" H) cH-cN-ca l (k 2 n = H * å 'O OOH wherein R 1 represents hydrogen or lower alkanoyl, R 2 represents hydrogen or lower alkyl, and n is 0 or 1, and basic salts thereof.

A compound according to claim 1, characterized in that R1 represents acetyl. -

A compound according to claim 1, characterized in that R 1 represents hydrogen and n is 1,

A compound according to claim 1, characterized in that R1 represents acetyl and n is l.

A compound according to claim 1, characterized in that R 1 represents hydrogen, R 2 represents methyl and n is 1.

A compound according to claim 1, characterized in that R 1 and R 2 each represent hydrogen and n is 1. 7901316-5 Abstract New compounds of the general formula H _ c / \\ .Rz - H2? wherein R 1 represents hydrogen or lower alkanoyl, R 2 represents hydrogen or lower alkyl, and n is 0 or 1; and basic salts thereof, useful as hypotensive agents.