SA519401187B1 - معلق خلية لاستخدامه في معالجة مرض الشريان المحيطي للطرف السفلي - Google Patents
معلق خلية لاستخدامه في معالجة مرض الشريان المحيطي للطرف السفلي Download PDFInfo
- Publication number
- SA519401187B1 SA519401187B1 SA519401187A SA519401187A SA519401187B1 SA 519401187 B1 SA519401187 B1 SA 519401187B1 SA 519401187 A SA519401187 A SA 519401187A SA 519401187 A SA519401187 A SA 519401187A SA 519401187 B1 SA519401187 B1 SA 519401187B1
- Authority
- SA
- Saudi Arabia
- Prior art keywords
- cell suspension
- cells
- eee
- cell
- white blood
- Prior art date
Links
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 title claims abstract description 127
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 45
- 208000030613 peripheral artery disease Diseases 0.000 title claims abstract description 37
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 title abstract description 21
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims abstract description 92
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 82
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 claims abstract description 77
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 claims abstract description 32
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 18
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 122
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 claims description 50
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims description 30
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims description 30
- 206010034576 Peripheral ischaemia Diseases 0.000 claims description 22
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 22
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 22
- 102100031650 C-X-C chemokine receptor type 4 Human genes 0.000 claims description 21
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 claims description 17
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims description 17
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 claims description 15
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 15
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 15
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 14
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 claims description 14
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 claims description 8
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 claims description 6
- 102000009484 Vascular Endothelial Growth Factor Receptors Human genes 0.000 claims description 6
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 claims description 6
- 208000032064 Chronic Limb-Threatening Ischemia Diseases 0.000 claims description 5
- 102000016549 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2 Human genes 0.000 claims description 5
- 108010053099 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2 Proteins 0.000 claims description 4
- 239000012891 Ringer solution Substances 0.000 claims description 3
- 229940071643 prefilled syringe Drugs 0.000 claims description 3
- 102000009410 Chemokine receptor Human genes 0.000 claims description 2
- 108050000299 Chemokine receptor Proteins 0.000 claims description 2
- 101000922348 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 4 Proteins 0.000 claims 2
- NHUFMXNVSAWNTO-OJUPNBFJSA-N (3r,4s,5s,6r)-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4,5-tetrol Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O.OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O NHUFMXNVSAWNTO-OJUPNBFJSA-N 0.000 claims 1
- 102100031658 C-X-C chemokine receptor type 5 Human genes 0.000 claims 1
- 101710082516 C-X-C chemokine receptor type 5 Proteins 0.000 claims 1
- 108050006947 CXC Chemokine Proteins 0.000 claims 1
- 102000019388 CXC chemokine Human genes 0.000 claims 1
- 101150066398 CXCR4 gene Proteins 0.000 claims 1
- 241000511343 Chondrostoma nasus Species 0.000 claims 1
- 241000573484 Copsychus Species 0.000 claims 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims 1
- 239000004783 Serene Substances 0.000 claims 1
- 206010041235 Snoring Diseases 0.000 claims 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N serine Chemical compound OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229940124676 vascular endothelial growth factor receptor Drugs 0.000 claims 1
- 239000011800 void material Substances 0.000 claims 1
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 abstract description 9
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 abstract description 9
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 210000003692 ilium Anatomy 0.000 abstract description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 53
- 238000000034 method Methods 0.000 description 44
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 39
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 32
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 32
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 28
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 27
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 22
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 22
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 21
- 230000008569 process Effects 0.000 description 20
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 20
- 101710082513 C-X-C chemokine receptor type 4 Proteins 0.000 description 19
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 19
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 18
- 238000002266 amputation Methods 0.000 description 17
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 17
- 230000008859 change Effects 0.000 description 17
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 16
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 16
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 15
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 15
- 210000003423 ankle Anatomy 0.000 description 13
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 13
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 12
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 12
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 11
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 11
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 11
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 11
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 11
- 230000000250 revascularization Effects 0.000 description 11
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 10
- 230000034994 death Effects 0.000 description 10
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 10
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 10
- 230000004044 response Effects 0.000 description 10
- 102000006573 Chemokine CXCL12 Human genes 0.000 description 9
- 108010008951 Chemokine CXCL12 Proteins 0.000 description 9
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 9
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 9
- 206010017711 Gangrene Diseases 0.000 description 9
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 9
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 9
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- 208000035901 Ischaemic ulcer Diseases 0.000 description 8
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 8
- 238000011038 discontinuous diafiltration by volume reduction Methods 0.000 description 8
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 7
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 7
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 7
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 7
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 7
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 7
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 7
- 230000036269 ulceration Effects 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 206010022562 Intermittent claudication Diseases 0.000 description 6
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 6
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 6
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 6
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 6
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 6
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 6
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 6
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 6
- 108091008928 CXC chemokine receptors Proteins 0.000 description 5
- 102000054900 CXCR Receptors Human genes 0.000 description 5
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 5
- 230000001364 causal effect Effects 0.000 description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 5
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 210000002503 granulosa cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 5
- 208000021156 intermittent vascular claudication Diseases 0.000 description 5
- 238000002690 local anesthesia Methods 0.000 description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- IJRKANNOPXMZSG-SSPAHAAFSA-N 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;(2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O IJRKANNOPXMZSG-SSPAHAAFSA-N 0.000 description 4
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 4
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 4
- 239000012595 freezing medium Substances 0.000 description 4
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 4
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 4
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 4
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 4
- 210000002414 leg Anatomy 0.000 description 4
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 4
- 210000003137 popliteal artery Anatomy 0.000 description 4
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 4
- CVKJXWOUXWRRJT-UHFFFAOYSA-N technetium dioxide Chemical compound O=[Tc]=O CVKJXWOUXWRRJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 102100031585 ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Human genes 0.000 description 3
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 3
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 3
- 200000000007 Arterial disease Diseases 0.000 description 3
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 3
- 101000777636 Homo sapiens ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Proteins 0.000 description 3
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- 240000000233 Melia azedarach Species 0.000 description 3
- 208000030831 Peripheral arterial occlusive disease Diseases 0.000 description 3
- 108010074506 Transfer Factor Proteins 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 239000002870 angiogenesis inducing agent Substances 0.000 description 3
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 3
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 3
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 3
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 3
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 3
- 239000013020 final formulation Substances 0.000 description 3
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 3
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 3
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 3
- 210000001872 metatarsal bone Anatomy 0.000 description 3
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 3
- 208000037821 progressive disease Diseases 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 238000005549 size reduction Methods 0.000 description 3
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000035488 systolic blood pressure Effects 0.000 description 3
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 3
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 3
- 235000021419 vinegar Nutrition 0.000 description 3
- 239000000052 vinegar Substances 0.000 description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 2
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 2
- 101000800116 Homo sapiens Thy-1 membrane glycoprotein Proteins 0.000 description 2
- 208000004404 Intractable Pain Diseases 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 208000005764 Peripheral Arterial Disease Diseases 0.000 description 2
- 102100033523 Thy-1 membrane glycoprotein Human genes 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 210000004504 adult stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002399 angioplasty Methods 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 210000002565 arteriole Anatomy 0.000 description 2
- 208000028922 artery disease Diseases 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 2
- 238000009583 bone marrow aspiration Methods 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 2
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 2
- 238000011970 concomitant therapy Methods 0.000 description 2
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 210000001105 femoral artery Anatomy 0.000 description 2
- 238000002695 general anesthesia Methods 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 2
- 229940001447 lactate Drugs 0.000 description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 2
- 201000002818 limb ischemia Diseases 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 231100001079 no serious adverse effect Toxicity 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 210000003371 toe Anatomy 0.000 description 2
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 2
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 2
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 2
- 231100000216 vascular lesion Toxicity 0.000 description 2
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 2
- CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 4-(4-fluorophenyl)oxane-4-carboxylic acid Chemical compound C=1C=C(F)C=CC=1C1(C(=O)O)CCOCC1 CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100022464 5'-nucleotidase Human genes 0.000 description 1
- 102100024643 ATP-binding cassette sub-family D member 1 Human genes 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 208000019838 Blood disease Diseases 0.000 description 1
- 108091008926 C chemokine receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000238366 Cephalopoda Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 108010037462 Cyclooxygenase 2 Proteins 0.000 description 1
- 206010051055 Deep vein thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 206010049927 Dry gangrene Diseases 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 101000678236 Homo sapiens 5'-nucleotidase Proteins 0.000 description 1
- 206010020565 Hyperaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 240000008415 Lactuca sativa Species 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001446467 Mama Species 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 108010024777 Mating Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000010428 Muscle Weakness Diseases 0.000 description 1
- 206010028372 Muscular weakness Diseases 0.000 description 1
- 206010053156 Musculoskeletal discomfort Diseases 0.000 description 1
- 208000000112 Myalgia Diseases 0.000 description 1
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000014767 Myeloproliferative disease Diseases 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- CBENHWCORLVGEQ-HJOGWXRNSA-N Phe-Phe-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CBENHWCORLVGEQ-HJOGWXRNSA-N 0.000 description 1
- 102100038280 Prostaglandin G/H synthase 2 Human genes 0.000 description 1
- 206010038934 Retinopathy proliferative Diseases 0.000 description 1
- 239000008156 Ringer's lactate solution Substances 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000001435 Thromboembolism Diseases 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 206010053648 Vascular occlusion Diseases 0.000 description 1
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 201000007930 alcohol dependence Diseases 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003143 atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000002459 blastocyst Anatomy 0.000 description 1
- 210000001109 blastomere Anatomy 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 238000009530 blood pressure measurement Methods 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002302 brachial artery Anatomy 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- LLSDKQJKOVVTOJ-UHFFFAOYSA-L calcium chloride dihydrate Chemical compound O.O.[Cl-].[Cl-].[Ca+2] LLSDKQJKOVVTOJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940052299 calcium chloride dihydrate Drugs 0.000 description 1
- BPKIGYQJPYCAOW-FFJTTWKXSA-I calcium;potassium;disodium;(2s)-2-hydroxypropanoate;dichloride;dihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[Na+].[Na+].[Cl-].[Cl-].[K+].[Ca+2].C[C@H](O)C([O-])=O BPKIGYQJPYCAOW-FFJTTWKXSA-I 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 208000024980 claudication Diseases 0.000 description 1
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 230000009850 completed effect Effects 0.000 description 1
- 229940124301 concurrent medication Drugs 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 description 1
- 239000003433 contraceptive agent Substances 0.000 description 1
- 230000002254 contraceptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 1
- 230000002435 cytoreductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000013480 data collection Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 230000009266 disease activity Effects 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 108091007231 endothelial receptors Proteins 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 239000012997 ficoll-paque Substances 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 210000004744 fore-foot Anatomy 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 231100001261 hazardous Toxicity 0.000 description 1
- 238000005534 hematocrit Methods 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000018706 hematopoietic system disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002758 humerus Anatomy 0.000 description 1
- 238000002639 hyperbaric oxygen therapy Methods 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000002697 interventional radiology Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 230000007654 ischemic lesion Effects 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 1
- 231100001022 leukopenia Toxicity 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 238000011430 maximum method Methods 0.000 description 1
- 229940127554 medical product Drugs 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 210000003593 megakaryocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000031864 metaphase Effects 0.000 description 1
- 230000004089 microcirculation Effects 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 208000013465 muscle pain Diseases 0.000 description 1
- 210000002346 musculoskeletal system Anatomy 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011457 non-pharmacological treatment Methods 0.000 description 1
- 230000009972 noncorrosive effect Effects 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000000414 obstructive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002496 oximetry Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 108010065135 phenylalanyl-phenylalanyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000009597 pregnancy test Methods 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 230000000541 pulsatile effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 1
- 235000012045 salad Nutrition 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 229940125723 sedative agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000932 sedative agent Substances 0.000 description 1
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 239000001540 sodium lactate Substances 0.000 description 1
- 229940005581 sodium lactate Drugs 0.000 description 1
- 235000011088 sodium lactate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 1
- 230000008023 solidification Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 238000013517 stratification Methods 0.000 description 1
- XLNZEKHULJKQBA-UHFFFAOYSA-N terbufos Chemical compound CCOP(=S)(OCC)SCSC(C)(C)C XLNZEKHULJKQBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 230000009424 thromboembolic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 102000014898 transaminase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 230000006492 vascular dysfunction Effects 0.000 description 1
- 208000021331 vascular occlusion disease Diseases 0.000 description 1
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 description 1
- 230000004862 vasculogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000002227 vasoactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000002747 voluntary effect Effects 0.000 description 1
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/17—Lymphocytes; B-cells; T-cells; Natural killer cells; Interferon-activated or cytokine-activated lymphocytes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0645—Macrophages, e.g. Kuepfer cells in the liver; Monocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/15—Cells of the myeloid line, e.g. granulocytes, basophils, eosinophils, neutrophils, leucocytes, monocytes, macrophages or mast cells; Myeloid precursor cells; Antigen-presenting cells, e.g. dendritic cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4614—Monocytes; Macrophages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0647—Haematopoietic stem cells; Uncommitted or multipotent progenitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K2035/124—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells the cells being hematopoietic, bone marrow derived or blood cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2121/00—Preparations for use in therapy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/31—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterized by the route of administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/38—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Virology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Media Introduction/Drainage Providing Device (AREA)
- External Artificial Organs (AREA)
Abstract
يتعلق الاختراع بمعلق خلية cell suspension من خلايا كُرية دم بيضاء white blood cells (WBCs) مشتقة من نخاع العظم bone marrow-derived عند البالغين ذاتية أو خيفية ويُفضل ذاتية، ويُفضل اشتقاق تلك الخلية من عُرف الحُرقُفة ilium (العرف الحرقفي iliac crest) أو المخصب لخلايا وحيدة النواة mononuclear cells (MNC) ويعني ذلك أن هناك أكثر من 25٪ من خلايا الدم البيضاء الموجودة في معلق الخلية هي عبارة عن خلايا وحيدة النواة وتشتمل على: أ-خلايا وحدية النواة مختارة من قائمة تشتمل على: 1.مجموعة من الخلايا اللمفاوية Lymphocytes؛ 2. مجموعة من الخلايا وحيدة النواة Monocytes؛ و 3. مجموعة من الخلايا الجذعية المكونة للدم Hematopoietic stem cells التي تعبر عن كتلة تمايز 34 cluster of differentiation 34 (CD34)؛ وحيث أن معلق الخلية يشتمل أيضاً على: ب-الخلايا المُحببة Granulocytes لاستخدامها في معالجة أو تخفيف مرض الشريان المحيطي peripheral artery disease للطرف السفلي lower extremity. شكل1
Description
معلق خلية لاستخدامه في معالجة مرض الشريان المحيطي للطرف السفلي
CELL SUSPENSION FOR USE IN THE TREATMENT OF LOWER
EXTREMITY PERIPHERAL ARTERY DISEASE
الوصف الكامل خلفية الاختراع يتعلق الاختراع الحالي بمعلق خلية cell suspension من di Ge WIA من نخاع العظم bone (BM) marrow في البالغين والذي يمكن استخدامه لمعالجة أو تخفيف مرض الشريان المحيطي (PAD) peripheral artery disease السفلي وبفضل في معالجة نقص التروية الطرفية الحرجة «critical ischemia limb 5 يشتمل مرض الشريان المحيطي للطرف السفلي على مدى واسع من الأمراض الوعائية vascular thromboembolic والانتصمام الخثاري atherosclerotic يسببها التصلب العصيدي All diseases والعمليات الالتهابية inflammatory processes التي تغير هيكل ووظيفة الشرايين الطرفية السفلية lower limb arteries وعلى الرغم من ذلك فإن السبب الرئيسي لمرض الشريان المحيطي هو 0 تصلب الشرايين العصيدي. تنتج الأعراض الخاصة بمرض مرض الشريان المحيطي للأطراف السفلية من تدفق الدم غير المناسب الذي يؤدي إلى الإمداد غير الكافي للأكسجين oxygen يرتبط مرض الشريان المحيطي مع التخثر العصيدي للبطانات الوعائية vascular beds الأخرى؛ بما في ذلك أجهزة القلب والأوعية الدموية cardiovascular والأوعية الدموية للمخ cerebrovascular إن وجود مرض السكري (DM) diabetes mellitus 5 يزيد بشكل كبير من مخاطر مرض الشريان المحيطي؛ ويزيد من المرض ويجعل مرضى السكر أكثر عُرضة لحالات الإقفار وخلل الوظائف الوعائية وزيادة معدلات .(QoL) (Thiruvoipati et al, 2015) Quality of Life الاعتلال والوفاة ونوعية الحياة غير الجيدة وبالفعل فإن مرضى مرض الشريان المحيطي يتم اعتبارهم بأنه مجموعة غير متجانسة تتراوح من المرضى الذين ليس بهم أعراض ولديهم عرج متقطع (IC) Intermittent Claudication والمرضى 0 المصابين بالإقفار الطرفي الحرج (CLI) critical limb ischemia يشير الإقفار الطرفي الحرج إلى حالة من اختلال كفاءة الشريان والذي تقلل من ضغط التروية البعيدة distal perfusion da uly) بدوران الدم الدقيق وتدفق الدم في aa SU إلى المدى الذي يتم فيه الإخلال pressure tissues والتغذية. يمكن أن توجد الصدمات الطفيفة والتقرح ulceration والعدوى infection بصورة
مشتركة مما يزيد من الحاجات الأيضية الخاصة بالنسيج المصاب والذي يؤدي في الغالب إلى التقرحات غير الملتثئمة non-healing ulcers أو التقرحات المزمنة. ويكون Ble عن مرض متطور يتميز بأنه مرض متعدد المستويات ويه حمل عال من الاعتلال المشترك ومدى حياة منخفض. وعلى الرغم من أن مؤشر الكاحل العمضد (ABI) ankle brachial index يتم استخدامه في تشخيص مرض الشريان المحيطي وهو مؤشر لشدة مرض الشريان المحيطي فإنه لا يرتبط بصورة كاملة بالشدة الكيميائية الخاصة بالمرض. هناك مدى واسع من الأعراض الإكلينيكية التي يتم استخدامها بالتالي لكي يتم تصنيف الشدة الخاصة بمرض الشريان المحيطي مع اثنين من أنظمة التصنيف الروتينية المستخدمة مع الممارسة الإكلينيكية وهما نظامي: Rutherford و Fontaine (Hirsch AT, 2006) إن الشدة الإكلينيكية لمرض الشربان المحيطي تتراوح من عدم وجود 0 الأعراض للغرغرينا gangrene إلى الإقفار الطرفي ischemia 1000 الذي يتطلب البتر amputation يكون مرض الشربان المحيطي Ble عن مرض متطور مع شدة خاصة بالتهيئة المتزايدة على مدى الوقت. يكون تطور المرض أسرع في المرضى المصابين بمرض السكري. إن وضع درجات لأعراض مرض الشريان المحيطي والآفات التشريحية الخاصة بها تكون مسئولة عن الأعراض التي توفر مقياس موضوعي يتم من خلاله متابعة المرضى بصورة إكلينيكية وبصورة 5 مهمة فإنه يوفر تجانس عند المقارنة الطبيعة واستراتيجيات المعالجة الخاصة بالتدخل في الدراسات الإكلينيكية. يتم استخدام تصنيف Rutherford بصورة شائعة في نظام المراحل الإكلينيكية clinical staging system الخاصة بوصف مرض الشريان المحيطي وهو مشابه لتصنيف Fontaine ولكنه يوجد بصورة أكثر شيوعاً في نشرات جديدة في مجال طب الأوعية الدموية Vascular Medicine يتم 0 تقسيم مرض الانسداد الشرياني المحيطي بصفة شائعة في درجات على مقياس silly Fontaine تم تقديمها بواسطة René Fontaine في عام 1954 من المرحلة 1 (عدم وجود أعراض) إلى المرحلة 7 (التقرح ulceration أو الغرغرينا). تتكون التصنيفات التي تم إدخالها بواسطة Rutherford في عام 1986 وتمت مراجعتها في عام 1997 من أربعة درجات وسبعة فئات تتراوح من الفئة 0 (عدم وجود أعراض) حتى الفئة 6 (تقرحات إقفاريه شديدة أو غرغرينا) (الجدول رقم 1). 5 الجدول 1 تصنيف Fontaine و182011:6:10:0 لمرض الشريان المحيطي
تصنيف Fontaine تصنيف Rutherford درجة التشخيص dap فئة التشخيص معايير Fontaine | لإكليني> . Rutherford Rutherford | لإكليني> . موضوعية غياب غياب جهاز المني 1 ع 0 0 ع 0 الأعراض الأعراض - العادي أو عدم وجود اختبار فرط مرض مسد الدم التفاعلي الناحية الديناميكية الدوائية العرج تمرين جهاز لأ المتة : كامل؛ لمتقطع 1 1 ١ zd .. 3 مسي بعد أكثر ضغط الكاحل من 200 Ankle pressure ad! التمرين < 50 بدون ألم مللي متر 55 ولكته يكون
Cn المتقطع | 3 المعتدل من 1و3 بعد اقل من 200 متر من ٍ 3 العرض الا يمكن إكمال الشديد تمرين جهاز المشي القياسي
Ls . أو الكاحل بعد التمرين عند >50 مم زثيق.
لا mama 400 0 سني تنمس بالراحة <40 مم زتبقء مستية بها كاحل نابض بصورة ضعيفة أو مشط القدم النبضة pulse volume recording
¢(PVR) ضغط إصبع الضعيف - الخاصسة > 60 > التقرح أو [[* تقرح غير بالراحة Iv الغرغرينة ملتدتم؛ مم زثبق؛ من غرغرينة بؤرية الكاحل أو مشط القدم Lad بها قدمي انتشاري لتسجيل حجم dann) المسطح أو النابض بصورة
0 الأساسي- كما هو في all الممتد الفئة 5 أعلى عبر مشط القدم مستوي trans- metatarsal ally (TM) الوظيفية التي لا تكون قابلة للإئقاذ بعد . *إن الدرجات IT و11 والفئات 4 و5 و6 تكون خاصة بالإقفار الحرج المزمن. T خمسة دقائق عند 2 mph على 712 من الارتفاع. تكون =AP ضغط الكاحل؛ و0118 = تسجيل حجم النبضة؛ TP = ضغط إصبع القدم؛ TM = عبر مشط القدم.
ويكون EY الطرفي الحرج Ble عن مرض متطور يتميز بأنه مرض متعدد المستويات ويه حمل عالي من الاعتلال المشترك ومدى فترة حياة محدودة. وقد أوصت وثيقة Trans-Atlantic dial Inter-Society Consensus ((TASC المتعلقة بالتحكم في المرض الشرياني المحيطي 2007 ]1 (TASCIL 2007) بأن مصطلح الإقفار الطرفي الحرج يجب أن يتم استخدامه لكل الخاضعين المصابين بألم الراحة الإقفاري ischemic rest pain والتقرحات ulcers أو الغرغرينا التي ترجع
0 بصورة تم التثبت الموضوعي مها لمرض التقرح الشرياني. إن التعريف الحالي للإقفار الطرفي الحرج يشتمل على الخاضعين الذين بهم ألم في الراحة الطرفية السفلى أو التقرحات أو الغرغرينا الثانوية إلى الشديدة التي تم توضيحها في تدفق الدم في الأطراف والتي تستمر لأكثر من أسبوعين. ويشتمل التعريف أيضاً على فئات روثرفورد من 6-4 (ألم الراحة الخاص بالإقفار مع الفقد النسيجي tissue loss الضئيل والفقد النسيجي الأساسي على الترتيب) أو الدرجة على مقياس فونتين 5 وهي 17 و 17.
تكون المعالجة الوحيدة للمرض الكامن في الإقفار الطرفي الحرج هي إعادة تكوين الأوعية «0د2ه01مد»2. eg الرغم من ذلك فإن النسبة الهامة من المجموعة (التي تم تقديرها بين 0 و790 من المجموعة) لا تكون مناسبة لعمليات إعادة التوعية اليدوية (التحويل الجراحي surgical bypass أو الإجراء داخل الأوعية (endovascular procedure » وذل نتيجة لغياب أوعية الدم blood vessels القابلة للنمو وفشل إجراء إعادة التوعي اليدوي السابق أو الأمراض المتزامنة. يكون للعديد من مرضى الإقفار الطرفي الحرج حلات متعددة والتي يمكن أن تمنعهم من تحمل إعادة التوعية اليدوية. وفي النهاية؛ فإن البتر يكون هو الخيار الوحيد لمتبقي لنسبة كبيرة من المرضى حيث يكون الهدف هو التحكم في الألم المستعصي ومنع تطور lug pall أو مكافحة العدوىي. وبالتالي فهناك حاجة ماسة لعلاجات جديدة.
0 وحالياً فإن معالجة المرضى المصابين بالإقفار الطرفي الحرج تتكون نمطياً من تقييم الطرف المصاب (المؤشر) فيما يتعلق بقابلية معالجته solely التوعي إما باستخدام الالتفاف الجراحي أو باستخدام طرق المعالجة الوعائية الداخلية methods 6000788©0187. سوف تتم معالجة كل المرضى فيما يتعلق بالأعراض الموجودة للمرض»؛ وبصورة خاصة الألم والتقرحات وأنواع العدوى. وعلى الرغم من ذلك فإن مكافحة الألم يكون غير فعال في الغالب حيث أن التقرحات الإقفارية
ischemic ulcers 5 نادراً ما تلتثم وتُركز عملية مداواة الجروح بصورة طبيعية على التحكم في العدوى ومنع التدهور وإنقاذ الطرف. تشتمل أهداف المعالجة الإجمالية للإقفار الطرفي الحرج على:
* التحكم في الألم .Pain control
Wound healing التثام الجروح ٠
.Limb salvage الطرف dz) »*
٠ 20 تحسين الحياة غير الجيدة؛ بما في ذلك الحفاظ على حالة قابلية التجول.
* تقليل المخاطر القلبية الإجمالية.
إن معلق الخلية الخاص بالاختراع الحالي قد تم توضيحه بشكل خاص بأنه خاص بمرضى الإقفار الطرفي الحرج؛ وبصورة خاصة بمرضى الإقفار الطرفي الحرج المصابين بمرض السكري والذين ليس لديهم خيار خاص بإعادة المعالجة الوعائية بامستخدام التحويل الجراحي أو طرق المعالجة
5 الوعائية الداخلية. وبالنسبة لهؤلاء المرضى فإن الحاجة التي لم يتم الوفاء بها هي عدم وجود خيارات علاجية للمرض الأساسي عند حالته العليا. إن أي معالجة يتم استخدامها مع هؤلاء
المرضى تكون معالجة لها أعراض مثل: لعناية بالجروح cwound care ومكافحة العدوى infection 01 وإدارة ١ لألم management 0ندم. بالنسبة لهؤلاء المرضى الذين لا تصلح معهم عملية إعادة التوعي اليدوية؛ حيث قد تم تقدم المرض فإن خيار المعالجة السريري الوحيد هو البتر إم في استجابة لتطور الغرغربنا أو العدوي التي لا يمكن التحكم فيها أو الآلام المستعصية. ومن مرضى مرض الشريان المحيطي الذين تم لديهم تطور الإقفار الطرفي الحرج؛ هناك تقريباً 725 من الوفيات في مدة سنة واحدة )2012 (NICE: وبالاعتماد على شدة الإقفار الطرفي الحرج؛ فإن معدلات البتر الابتدائي لمدة سنة واحدة تتراوح من 75 إلى 740 مع المعدلات الأعلى في المرضى غير المناسيين لعملية إعادة التوعي والذين يعانون من الضعف العصبي neurologically impaired أو عدم القدرة على المشي -non-ambulatory 0 الوصف العام للاختراع تنطوي المشكلة التي يقوم الاختراع الحالي بحلها على توفير بديل علاجي مُحسن للمرضى الذين يعانون من مرض الشريان المحيطي الطرفي السفلي ويفضل مرضى الإقفار الطرفي الحرج والأكثر تفضيلاً مرضى الإقفار الطرفي الحرج المصابين بمرض السكري والذين ليس خيارات للمعالجة باستثناء عملية sale) التوعي باستخدام التحويل الجانبي الجراحي أو طرق المعالجة الوعائية 5 الداخلية. إن البديل العلاجي المحسن المذكور الذي تم توفيره بواسطة الاختراع الحالي يكون في صورة معلق خلية من خلايا مشتقة من نخاع العظم لبالع بشري ذاتية أو خيفية ويفضل النماذج التي تمت الإشارة إليها أدناه. وبالتالي تشير سمة أولى من الاختراع الحالي إلى معلقم خلية (الذي تتم الإشارة إليه هنا بأنه Glad خلية من الاختراع ("all ويفضل خلايا كريات دم بيضاء (WBCs) white blood cells مشتقة 0 من نخاع العظم عند البالغين ذاتية أو خيفية Jali اشتقاق تلك الخلية من غرف الخرففة ilium (العرف الحرقفي (iliac crest أو المخصب لخلايا وحيدة النواة (MNC) mononuclear cells ويعني ذلك أن هناك أكثر من 725 من خلايا الدم sland) الموجودة في معلق الخلية هي عبارة عن خلايا وحيدة النواة وتشتمل على: أ-خلايا وحيدة النواة مختارة من قائمة تشتمل على: ١ 5 مجموعة من الخلايا اللمفاوية ¢(LYMPH) Lymphocytes Hii مجموعة من WAN الأحادية ¢{(MONO) Monocytes و
Wii مجموعة من LIAN الجذعية المكونة للدم (HSCs) Hematopoietic stem cells التي تعبر عن مجموعة من التمايز 34 ¢(CD34) 34cluster of differentiation وحيث أن معلق الخلية يشتمل أيضاً على: ب-الخلايا المُحببة Granulocytes 5 ا لاستخدامها في معالجة أو تخفيف مرض الشريان المحيطي للطرف السفلي. تمت ملاحظة أن المصطلحات العامة ومجموعات الخلية أ) وب) بدورها Jai على مجموعة خلية والتي تعبر عن مستقبل كيموكين C-X-C من النيوع 4 4 C-X-C chemokine receptor type ((CXCR4) أو مستقبل خاص عالم انتقال من عامل مشتق من الخلية السدوية 1 stromal cell- derived factor 1 (50171) من المجموعة وبالتالي فمن الضرورية أن يتم توضيح وجود المجموعة 10 الفرعية من الخلايا الجذعية المكونة للدم التي تعبر عن مجموعة من التمايز 34 ومستقبل كيموكين CXC من النوع 4. بالإضافة إلى ذلك» فإن مجموعة الخلية أ) وب) بدورها تشتمل أيضاً على مجموعة خلية والتي تعبر عن مستقبل عامل التمو البطاني الوعاتي 2 Vascular endothelial (VEGFR2) growth factor receptor 2 ومستقبل خاص بعامل تكوين الأوعية الدموية angiogenesis factor عامل النمو البطاني Vascular endothelial growth factor Ale sll (VEGF) 5 الذي يتم تضمينه في التوليد الوعائي وتكوين الأوعية. وفي النهاية فإن مجموعة الخلية أ. (jis بدورها Jan على مجموعة الخلية التي لا تعبر عن مجموعة من التمايز 38 38cluster of differentiation (6038) والتي هي من أوائل الخلايا الجذعية المنتجة للدم haematopoietic stem cells غير المرتبطة. تمت ملاحظة أن الخلايا أحادية النواة (MNCs) mononuclear cells قد تم اعتبارها بأنها المكون 0 الفعال الرئيسي من معلق الخلية من الاختراع. diay خاصة فإن المكونات الفعالة أو التكوينات من معلق الخلية من الاختراع الحالي تكون عبارة عن الخلايا أحادية النواة تم اختيارها من قائمة تتكون من الخلايا اللمفاوية؛ والخلايا وحيدة النواة LDA الجذعية المكونة للدم والتي تعبر عن مجموعة من التمايز 34 وبصورة خاصة أكثر المجموعات الفرعية من الخلايا الجذعية المكونة للدم غير المرتبطة بصورة مبكرة والتي تعبر عن مجموعة من التمايز 34 ولا تعبر عن مجموعة من اتتمايز 38 وأيضاً خلايا الدم البيضاء القادرة على الانتقال الذي يتوسطه عامل مشتق من الخلية السدوية 1 والذي يعبر عن مستقبل كيموكين CXC من النوع 4 والخلايا الجذعية القادرة على
الانتقال الذي يتوسطه عامل مشتق من الخلية السدوية 1 والتي تعبر عن مجموعة من التمايز 34 و مستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4 وخلايا لادم البيضاء القادرة على التكوين الوعائي والتي تعبر عن مستقبل عامل النمو البطاني الوعائي 2. تكون كل تلك الخلايا أحادية النواة عبارة عن خلايا مشتقة من نخاع العظم ويفضل أن تكون مشتقة من غرف الخرقفة (العرف الحرقفي).
بالإضافة إلى ذلك فقد تمت أيضاً ملاحظة أن معلق خلية الدم البيضاء من الاختراع يشتمل أيضاً على حبيبات بيضاء والتي تكون عبارة عن عدلات (NEU) neutrophils أو يوزينات eosinophils (EOS) و/أو قعدات (BAS) basophils وفي هذا الصدد؛ من المهم أن تتم ملاحظة أن منتج معلق الخلية النهائي من الاختراع كما هو موضح في الأمثلة قد تم تحضيره في جرعات بالاعتماد على خلايا مشتقة من نخاع العظم من خلايا الدم البيضاء القابلة للنمو والتي تشتمل ليس فقط على
0 جزء خلية الدم البيبضاء الخلية أحادية النواة (الخلايا اللمفاوية والخلايا الأحادية والخلايا الجذعية (stem cells ولكن أيضاً الخلايا الحبيبية. في نموذج مفضل من السمة الأولى من الاختراع؛ فإن معلق الخلية من الاختراع؛ في الصيغة النهائية والذي تم تخصيبه من خلايا وحيدة النواة يعني أن به أكثر من 725 من الأعداد الإجمالية LIAN الدم الببضاء الموجودة في معلق الخلية والذي يكون عبارة عن خلايا وحيدة النواة والتي
5 تشتمل على حوالي x4 10 " إلى حوالي 2 X 10 *من WA مشتقة من نخاع العظم من خلايا الدم البيضاء ويفضل مشتقة من عُرف الحرقفة (أو العرف الحرقفي) حيث يكون العدد الإجمالي م حوالي x4 10 * إلى حوالي 2 x 10 * من خلايا الدم البيضاء؛ وبها os .1 720 إلى حوالي 751 والذي يكون عبارة عن خلايا لمفاوية» وحوالي 73.9 إلى حوالي 3 عبارة عن خلايا أحادية النواة؛
0 2. حوالي 71.4 إلى حوالي 7210 من الخلايا الجذعية المكونة للدم والتي تعبر عن مجموعة من التمايز 34؛ 3-حوالي 725.3 إلى حوالي 83.3 7# ويفضل من حوالي 732.3 إلى حوالي 780.0 من العدد الإجمالي لخلايا الدم البيضاء والذي يكون عبارة عن خلايا أحادية النواة ووفضل أن يتم اختيارها من قائمة تتكون من الخلايا اللمفاوية؛ والخلايا أحادية النواة وخلايا مجموعة من التمايز 34؛
5 4. حوالي 716.7 إلى حوالي 774.7 ويفضل حوالي 720.0 إلى حوالي 767.7 عبارة عن خلايا حبيبية؛
5-ومن العدد الإجمالي هناك خلايا جذعية مكونة للدم والتي تعبر عن مجموعة من التمايز 34؛
بنسبة حوالي 7.7 7 إلى حوالي 755.5 والتي تكون عبارة عن خلايا Leda مكونة للدم غير
مرتبطة مبكرة والتي لا تعبر عن مجموعة من التمايز 38؛
iss »6 75.4 إلى حوالي 738.8 من LDA الدم البيضاء التي تعبر عن مستقبل كيموكين C-
X-C 5 من النوع 4؛
7 -ومن العدد الإجمالي هناك خلايا جذعية مكونة للدم والتي تعبر عن مجموعة من التمايز 34؛
بنسبة حوالي 70.7 إلى حوالي 710.3 والتي تكون عبارة عن خلايا جذعية التي تعبر عن مستقبل
كيموكين C-X-C من النوع 4؛
8. حوالي 70.07 إلى حوالي 724.7 من خلايا الدم البيضاء التي تعبر عن مستقبل عامل النمو 0 البطاني الوعائي 2؛ و
9. تكون النسبة عند الحد الأقصى لها من خلايا الدم الحمراء إلى WIA الكريات البيضاء هي 6.7
ونسبة عند الحد الأقصى لها من الصفائح الدموية لخلايا كريات الدم البيضاء هي 32.
في نموذج مفضل آخر من السمة الأولى من الاختراع فإن معلق الخلايا من الاختراع يكون في
الصيغة النهائية؛ كما تم تحديده في الفقرة السابقة ويشتمل على ما بين حوالي 4 xX 10 ؟ إلى حوالي 1.2 x 10 7 من خلايا الدم البيبضاء؛ وبفضل أكثر من حوالي 5 x 10 " إلى حوالي 2
0 من خلايا الدم البيضاء وبه أيضاً 2 * 10 من خلايا الدم البيضاء بوه أيضاً وبصورة
مفضلة من حوالي 5 X 10 إلى X 1.2 Joa 10 7 من WA الدم البيضاء وكانت كل قيم
الجرعات بين كل من القيم المذكورة أعلاه.
يمكن اختيار النماذج المحددة في شكل أمداء فرعية من القيم المذكورة أعلاه من خلايا الدم البيضاء 0 في الصيغة النهائية. على سبيل المثال؛ يمكن أن يتم اختيار نموذج محدد في شكل محتوي خلية
الدم البيضاء في صيغة نهائية من أكبر من 8 x 10 " إلى حوالي 1.2 x 10 من خلايا الدم
البيضاء. ينطوي مثال آخر عن كيفية أن مدى يمكن اختياره في النموذج في الاختيار من محتوي
من حوالي 9 x 10 * إلى حوالي 1.1 x 10 "من خلايا الدم البيضاء. يمكن اختيار Jie ثالث
من الأمداء لنموذج محدد من الاختيار الذي يكون بين حوالي 9.5 X 10 7 من خلايا الدم 5 البيضاء. يمكن اختيار مثال رابع من الأمداء لنموذج محدد من الاختيار الذي يكون بين حوالي
x 9.8 10 إلى حوالي 1.02 x 10 “من خلايا الدم البيضاء.
أوضدت أمثلة أخرى كيفية أن مدى من أحد النماذج من المحتوي أو الجرعة يمكن اختياره والذي
قد يشتمل على المدى السابق من 6 X 10 " إلى حوالي 2 x 10 *ويفضل إلى حوالي 1.2 x
0 من خلايا الدم البيضاء ويضم المدى كل قيم الجرعة الموجودة بين القيمتين. ينطوي مثال
آخر على الاختيار من gall من أعلى من 7 x 10 " إلى حوالي 2 x 10 "ويفضل إلى حوالي
x 1.2 5 10 7 من خلايا الدم البيضاء ويضم المدى كل قيم الجرعة الموجودة بين القيمتين. ينطوي
مثال AT على الاختيار من المدى من el من 8 x 10 إلى حوالي 2 ding” 10 x إلى
حوالي 1.2 x 10 * من خلايا الدم البيضاء ويضم المدى كل قيم الجرعة الموجودة بين القيمتين.
ينطوي مثال آخر على الاختيار من المدى من el من 8.5 x 10 * إلى حوالي 2 x 10 7*
ويفضل إلى حوالي 1.2 X 10 * من خلايا الدم البيضاء ويضم المدى كل قيم الجرعة الموجودة 0 بين القيمتين. ينطوي مثال آخر على الاختيار من المدى من أعلى من 9 x 10 * إلى حوالي x2
0 وبفضل إلى حوالي 1.2 x 10 "من WIA الدم الببضاء ويضم المدى كل قيم الجرعة
الموجودة بين القيمتين. ينطوي مثال آخر على الاختيار من المدى من el من 9.5 x 10 إلى
حوالي 2 x 10 * ويفضل إلى حوالي 1.2 * 10 * من WIA الدم البيضاء وبضم المدى كل قيم
الجرعة الموجودة بين القيمتين. وبالتالي فإن كل أمداء الجرعات يمكن اختيارها من القيم المذكورة هنا ويمكن أن يتم فهمها من خلال ذوي المهارة العادية في المجال ويتم تضمينها بواسطة الاختراع
الحالي.
تم توضيح طرق قياس كل مجموعة خلة أعلاه وتم ذكرها بصورة واضحة بالتفصيل من الاختراع
الحالي.
تمت ملاحظة أن كل معلقات الخلة Jai على مواد حاملة مقبولة صيدلانياً و/أو سواغات .excipients 0
في نموذج مفض AT من السمة الأولى من الاختراع الحالي أو أي من النماذج المفضةة له فإن
مرض الشريان المحيطي الطرفي السفلي يكون عبارة عن إقفار طرفي حرج.
في نموذج مفضل آخر من السمة الأولى من الاختراع أو من أي من النماذج المفضلة يتم تعليق
الخلايا في حجم من 5 إلى 30 مل من محلول معالج بالهيبارين cheparinized saline solution أو 5 محلول ربنجر لاكتات Jag lactated Ringer solution أن يشتمل على حوالي 1 من ألبومين
. glucose 3sSslall وحوالي 5 من (HSA) human serum albumin المصل البشري
تشير سمة ثانية من الاختراع الحالي إلى معلق خلة كما تم تحديده في السمة الأولى من الاختراع
أو أي من النماذج المفضلة؛ لاستخدامها في طريقة dallas مرض الشريان الطرفي السفلي ويفضل
إقفار الطرف الحرج وذلك من خلال الإعطاء الشريان حيث يصل ضغط تدفق الدم المنخفض إلى
4 جوي ويتم الحصول عليه من خلال تثبيت بالون قابل للنفخ بالقرب من آفة الانسداد الوعائي occlusive vascular 5 عند الفخذ البعيد distal femoral أو الشريان المأبضي popliteal artery
وتسريب معلق الخلية المذكور بداخل الشربان.
تشير سمة ثالثة من الاختراع الحالي إلى محقنة واحدة أو العديد من المحاقن المملوءة بشكل مسبق/
dla all على معلق الخلية كما تم تحديده في السمة الأولى من الاختراع أو أي من النماذج
المفضلة.
0 تشير سمة رابعة من الاختراع إلى محقنة (محقنة مسبقة الملء) كما تم تحديدها في السمة الثالثة من الاختراع» لاستخدامها في معالجة أو تخفيف مرض الشريان الطرفي السفلي وبفضل إقفار الطرف السفلي الحرج. تمت ملاحظة أن المحاقن مسبقة الملء يمكن استخدامها لكل مريض. تشير سمة خامسة من الاختراع إلى محقنة (محقنة مسبقة الملء) كما تم تعريفها في السمة الثالثة من الاختراع لاستخدامها في طريقة معالجة مرض الشريان الطرفي السفلي ويفضل إقفار الطرف
5 الحرج وذلك من خلال الإعطاء الشريان حيث يصل ضغط تدفق الدم المنخفض إلى 4 جوي وبتم الحصول عليه من خلال تثبيت بالون قابل للنفخ بالقرب من آفة الانسداد الوعائي عند الفخذ البعيد أو الشريان المأبضي وتسربب معلق الخلية المذكور بداخل الشريان. في نموذج مفضل من السمة الأولى وحتى السمة الخامة من الاختراع فإن معلق الخلية أو المحاقن يتم توفيرها في شكل جرعة منفردة.
0 في نموذج مفضل من السمة الثانية والسمة الخامسة من الاختراع؛ يتم إنتاج الحث منخفض الضغط في مدى بين 1 و6 دقائق ويتم تسربب معلق الخلية المذكور في مدى بين 2 و10 دقائق. تشير سمة سادسة من الاختراع إلى عملية تصنيع من معلق الخلية من الاختراع كما تم تعريفه في السمة الأولى من الاختراع أو في أي نماذج مفضلة طرفية والتي تشتمل على:
1. يتم إجراء تجميع نخاع العظم بواسطة عمليات السفط of) Sill ويفضل من القمة الحرقفية
5 الخلفية للخاضع تحت عملية تخدير anesthesia موضعي أو عام. يتم بعد ذلك تجميع نواتج سفط
نخاع العظم وبفضل في كيس ناقل يشتمل على محلول مضاد للتخثر anticoagulant solution ويفضل أكثر محلول سترات ديكستيروز أ .(ACD-A) citrate dextrose solution A 2. يتم ترشيح نخاع العظم ويفضل بمساعدة الجاذبية لكي تتم إزالة أي شظايا bone alae fragments صغيرة (Sly يتم منع التخثر أثناء الخطوات التالية.
3. يتم تقليل حجم نخاع العظم الأولي ويفضل من حوالي 100-50 مل ويفضل باستخدام برنامج SmartRedux على جهاز 2.0 Sepax والذي يرتبط مع الإزالة عن طريق طقم SmartRedux (CS- 1 ) إن تلك الخطوة التي تشضتمل على إزالة البلازما plasma وخلية الدم الحمراء red blood (RBC) cell أن ينتج عنها حوالي 100-50 مل من منتج التغليف المزغب وأيضاً التي تتكون من ola الخاص بالمنتج النهائي.
0 4. وبشكل اختياري» فإن خطوة اختزال الحجم يتم إجراؤها في اثنين من الدورات وذلك اعتماداً على حجم مادة البدء المراد معالجتها. تمت معالجة عينات نخاع العظم بأحجام تصل إلى حوالي 220 مل في دورة منفردة وتمت معالجة عينات من العديد من 220 مل في اثنين من الدورات باستخدام نفس الطقم. يفضل أن يكون كل من اختزال الحجم في الدورة المنفردة والمزدوجة والحجم النهائي قد تم ضبطه عند حوالي 100-50 مل.
5 5. إن كيس العينة المتوسط المعقم sterile intermediate sample bag المشتمل على نخاع العظم تم اختزال حجمه كما هو موضح في الخطوة رقم 3 أو 4 يخفضع لعملية Dh مركزي centrifugation متدرجة آلية ig ذلك مرتين من الغسل لمعلق الخلية أحادية النواة بامستخدام محلول الغسل ويفضل المكون من 74-2 من ألبومين المصل البشري في المحلول الملحي المنظم (كل منها في درجة صيدلانية. يتم تجميع حوالي 45 مل من منتج خلية أحادية النواة مشتقة من
0 تخاغ العظام (BM-MNC) Bone marrow-derived mononuclear cell في كيس الإخراج وتتم إزالة المكونات الأخرى في كيس النفايات. يفضل أن يخضع كيس العينة المتوسط المعقم المشتمل على نخاع العظم تم اختزال حجمه لعملية طرد مركزي بالكثافة من ig NeatCell ذلك مرتين من الغسل لمعلق الخلية أحادية النواة باستخدام محلول الغسل ويفضل المكون من 74-2 من ألبومين المصل البشري في المحلول الملحي المنظم (كل منها في درجة صيدلانية. يتم تجميع حوالي 45
5 مل من منتج خلية أحادية di Se soil) من ذخاغ العظام في كيس الإخراج وتتم إزالة المكونات الأخرى في كيس النفايات.
6.» يتم تجميع خلية أحادية النواة مشتقة من نخاغ العظام من كيس المنتج ويفضل باستخدام محقنة 0 مل وبتم الترشيح ويفضل أن يتم من خلال مرشح 50 ميكرو مترء ويفضل في أنبوب فالكون معقم falcon tube 500:116. يتم سفط كيس المنتج باستخدام محلول الغسل وبتم الترشيح لكي يتم تحسين استخلاص الخلية أحادية النواة. يتم ضبط الحجم النهائي لمادة عقار خلية أحادية النواة مشتقة من نخاغ العظام عند 60-40 مل.
يتم الطرد المركزي salad العقار ويتم إعادة تعقيم الحُبيبات في خليط صيغة نهائية ويفضل في محلول ملحي مع الهيبارين heparin محلول رينجر ويفضل أن يكون 71 من ألبومين المصل
البشري ويفضل أن يكون 72.5 من الجلوكوز في حجم يفضل أن يكون من 30-5 مل. وكما تم ذكره بالفعل أعلاه»؛ فجب أن تتم ملاحظة أن منتج معلق الخلية النهائي الذي تم الححول
0 عليه من السمة السادة من الاختراع يتم وضعه في جرعة بالاعتماد على خلايا الدم البيضاء القابلة للنمو والت تشتمل؛ ليس فقط على جزءٍ الخلية أحادية النواة ولكن أيضاً الخلايا الحُبيبية. ويسبب أن الخلايا أحادية النواة عبارة عن مكون فعال فإن النسبة المئوية WAL أحادية النواة في المنتج النهائي يتم أخذها في الاعتبار بأنها سمة متعلقة بالجودة. تشير سمة سابعة من الاختراع إلى منتج معلق خلية أو حاوية منتج ويفضل واحدة أو عدة محاقن
5 والتي يتم الحصول عليها أو التي تكون قابلة للحصول عليها بواسطة طريقة من السمة السادسة من الاختراع. تمت ملاحظة أن منتج المعلق أو حاوية المنتج يمكن استخدامها طبقاً لأي من السمات من الأولى وحتى الخامسة من الاختراع. شرح مختصر للرسومات الشكل 1 عبارة عن: مخطط تدفق لتصنيع معلق الخلية طبقاً للاختراع.
0 الشكل 2 عبارة عن: تصنيف روثرفورد عند الشهر 3 و6 و9 و12 بعد إعطاء معلق الخلية الخاص بالاختراع وعينة المقارنة في مقابل تطبيق الملاحظة الأخيرة last observation carried forward (LOCE) التي تمت معالجتها Ly) في ذلك عمليات البتر والوفيات). الشكل 3 عبارة عن: تصنيف روثرفورد عند الشهر 3 و6 و9 و12 بعد إعطاء معلق الخلية الخاص بالاختراع وعينة المقارنة في مقابل تطبيق الملاحظة الأخيرة التي تمت معالجتها (بما في ذلك
5 عمليات البتر والوفيات).
الشكل 4 عبارة عن: تحسينات على تصنيف روثرفورد (النسبة المئوية للخاضعين) عند 3؛ 6 و9 و12 Det فيما يتعلق بمجموعة التحكم والثلاث مجموعات من (الجرعات) من معلق الخلية من الاختراع. الشكل 5 عبارة عن: عبارة عن نسبة خاصة بالخاضعين الذين تم تصنيفهم والذين يعاونون من عدد من التقرحات في الطرف المصاب عند 3 و6 و9 و12 شهراً (اللوحة اليسرى: مجموعة المقارنة؛ اللوحة اليمنى معلق الخلية من مجموعة الاختراع). الشكل 6 عبارة عن: عرض صور التصوير الوعائي من ثلاثة من 24 Alls من حالات التكوين الوعائي vasculogenesis والذي يمكن أن يحدث والذي يتم عرضه بالنسبة للقيمة الأساسية في الشكل رقم 6: مع النمو الطولي للشرايين arteries (الشكل رقم 6أ)؛ المظهر الخاص بالأوعية 0 الجديدة (الشكل رقم 6ب) والنمو العرضي الخاص hall الجانبي الذي يستهدف الجلد (الشكل رقم (z6 الشكل 7 Hle عن: عبارة عن مخطط التدفق الخاص بمعلق بعملية تصنيع منتج الاختراع. الوصف التفصيلي: التعريفات 5 وكما تم استخدامه هناء فإن "IY يجب أن يتم فهمه ash يشير إلى مستحضر الخلية حيث يكون المائح والمتلقي هو نفس الشخص. LS تم استخدامه هناء فإن "خيفي" يجب أن يتم فهمه ah يشير إلى مستحضر الخلية حيث يكون المائح والمتلقي ليس هو نفس الشخص. LS تم استخدامه هناء يتم فهم "خلايا مشضتقة من نخاع العظم من بالغ adult bone marrow "derived cells 0 بأنه مستحضر يشتمل على Alls WA لا تكون جنينية embryonic وبتم اشتقاقها من نخاع العظم ويتم الحصول عليها من mile بشري human donor LS, تم استخدامه هناء يتم فهم 'معلق خلية” إلى مستحضر من الخلايا التي تم تعليقها في الوسط السائل. WS تم استخدامه هناء يتم فهم " معلقة خلية من AB de WIA من نخاع العظم من بالغ" بأنه 5 مستحضر يشتمل على خلايا والتي لا تكون جنينية ويتم اشتقاقها من نخاع العظم الذي تم الحصول عليه من مائح بشري تم تعليقه في وسط سائل.
وكما تم استخدامه هنا يتم فهم "خلايا جذعية مكونة للدم Hematopoietic stem cells التي تعبر عن مجموعة من التمايز 34 " بانها WIA جذعية تقوم بالتعبير عن مرقم سطحي surface marker لمجموعة من التمايز 34 وتم تحديدها بأنها موجبة مجموعة من التمايز 34 بواسطة تبقيع الجسم المضاد antibody staining ومن خلال قياس التدفق flow cytometry gla) وكما تم استخدامه هناء يتم فهم " خلايا جذعية مكونة للدم غير مرتبطة بصورة مبكرة والتي تعبر عن مجموعة من التمايز 34 ولا تعبر عن مجموعة من التمايز 38" بأنها عبارة عن eds WIA مكونة للدم والتي تعبر عن مرقم مجموعة من التمايز 34 على السطح وتم تحديده في شكل مجموعة من التمايز 34 موجب بواسطة تبقيع الجسم المضاد لمجموعة من التمايز 34 والقياس الخلوي الخاص بالتدفق ولكنه تم تحديد أنه سالبي بالنسبة لمرقم السطح مجموعة من التمايز 38 0 بواسطة تبقيع الجسم المضاد مجموعة من التمايز 38 وقياس التدفق الخلوي. وكما تم استخدامه في ما يلي؛ يتم فهم مصطلح "خلايا دم بيضاء تعبر عن مستقبل كيموكين C- X-C من النوع 4 " بأنه خاص بخلايا تعبر عن المرقم المسطحي مجموعة من التمايز 45 cluster differentiation 4508 (0045) ومستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4 وتم تحديده في شكل صورة موجبة من مجموعة من التمايز 45 ومستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4 بواسطة تبقيع 5 الجسم المضاد ل مجموعة من التمايز 45 ومستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4 وقياس التدفق الخلوي. يكون مستقبل كيموكين CXC من النوع 4 عبارة عن مستقبل لعامل الانتقال عامل مشتق من الخلية السدوية 1. وكما تم استخدامه هنا يتم فهم مصطلح "خلايا جذعية تعبر عن مجموعة من التمايز 34 و مستقبل كيموكين 0-6-0 من النوع 4 " بأنه خاص بخلايا تعبر عن المرقم ada ull مجموعة من التمايز 0 45 ومجموعة من التمايز 34 ومستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4 والذي تم تحديده في شكل مجموعة من التمايز 45 ومجموعة من التمايز 34 ومستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4 وتم تحديده في شكل صورة موجبة من مجموعة من التمايز 45 ومجموعة من التمايز 34 ومستقبل كيموكين CXC من النوع 4 من تبقيع الجسم المضاد وقياس التدفق الخلوي. يكون مستقبل كيموكين CXC من النوع 4 عبارة عن مستقبل لعامل الانتقال عامل مشتق من الخلية السدوية 1. 5 وكما تم استخدامه هنا يتم فهم مصطلح "خلايا دم بيضاء تعبر عن مستقبل عامل النمو البطاني الوعائي 2 " بأنه خاص بخلايا تعبر عن المرقم السطحي مجموعة من التمايز 45 ومستقبل عامل
النمو البطاني الوعائي 2 وتم تحديده في شكل صورة موجبة من مجموعة من التمايز 45 ومستقبل عامل النمو البطاني الوعائي 2 بواسطة تبقيع الجسم المضاد لمجموعة من التمايز 45 ومستقبل عامل النمو البطاني الوعائي 2 وقياس التدفق الخلوي. يكون مستقبل عامل النمو البطاني الوعائي 2 عبارة عن مستقبل لعامل النمو البطاني الوعائي والذي يكون خاص بتولد الأوعية والتكوين الوعائي.
LS تم استخدامه هناء يتم فهم مصطلح "خلايا وحيدات النواة” بأنها أي خلايا دم أو خلية دم بيضاء من نخاع العظم ll) يطلق عليها كريات الدم البيضاء ills (LEU) leukocytes لها نواة
مستديرة وبالتالي يتم استبعاد الخلايا الحُبيبية. LS تم استخدامه هنا يتم فهم المصطلح " مرض شريان محيطي طرفي سفلي" بأنه تضيْق في
0 الشرايين خلاف تلك التي تقوم بإمداد القلب heart والمخ brain يقوم مرض الشريان المحيطي بصورة عامل بالتأثير على الأرجل ولكن يمكن تضمين شرايين أخرى أيضاً. وكما تم استخدامه هناء يتم فهم مصطلح SUE طرفي حرج al الانقسام الفرعي الخاص بمرض الشريان الطرفي حيث أن الحالة تتميز بأنها ألم خرقفي إقفاري مزمن» أو تقرحات أو غرغرينا في واحدة أو JS من القدمين المتعرضة لمرض انسداد الشريان.
5 إن المصطلح "حوالي" عند استخدامه مع الإشارة إلى dad رقمية فإنه يعني +/-720 من القيمة الرقمية. إن المصطلح "حوالي" عند استخدامه مع الإشارة إلى قيمة رقمية فإنه يعني +/-710 من القيمة الرقمية. إن المصطلح "حوالي" عند استخدامه مع الإشارة إلى قيمة رقمية فإنه يعني +/-75 من القيمة الرقمية. إن المصطلح "حوالي" عند استخدامه مع الإشارة إلى dad رقمية فإنه يعني +/- 1 من القيمة الرقمية.
0 إن المصطلحات "يشتمل على و 'مشتملاً على" كما تم استخدامها بمعنى شامل أو بمعنى مفتوح فإنها تعني أنه يمكن تضمين عناصر إضافية. إن المصطلح 'يشتمل على" يمكن أن يتم تضمينه أو يتم استخدامه بصورة تبادلية مع المصطلح 'يتكون من" والمصطلح 'يتكون بشكل أساسي من". LS تم استخدامه هنا فإن المصطلح "بالغ" يعني أن الخلايا الجذعية عبارة عن WIA غير جنينية. في أحد النماذج فإن "بالغ" تعني بد مرحلة "الجنين" أو "بعد مرحلة الولادة". وبالنسبة للخلايا
5 الجذعية من الاختراع الحالي فإن المصطلح "خلية جذعية من بالغ "adult stem cell تعني أن الخلية الجذعية يتم عزلها من نسيج أو من عضو من حيوان عند مرحلة نمو بعد المرحلة الجنينية
embryonic stage لا تكون الخلايا الجذعية من البالغ مشضابهة للخلايا الجذعية الجينية
embryonic stem cells والتي يتم تحديدها من خلال أصلها ومن الكتلة الخلوية الداخلية الخاصة
بأكياس الأرومة -blastocyst يمكن Jie الخلايا الجذعية طبقاً للاختراع من أي من النسيج غير
الجنيني ويمكن أن تشتمل على WA من خاضعين حديثي الولادة والأطفال والمراهقين والبالغين. وبصفة عامة فإن الخلية الجذعية من الاختراع الحالي يمكن عزلها من ثديي غير جنيني وعلى
سبيل المثلان من أحد البشر غير حديث الولادة. يفضل أن تكون الخلايا الجذعية من الاختراع
الحالي قد تم عزلها من أحد البشر.
يوضح المصطلح 'معزولة" أن الخلية أو المجموعة التي يتم التداخل معها لا تكون في الوسط
الطبيعي الخاص بها. يتم فصل الخلية أو المجموعة إلى حد كبير من النسيج المحيط بها.
0 إن مخطط المرقم الخاص بمنتج معلق الخلية تتم slay) إليه في الاختراع الحالي ويمكن أن يتم تحديده من خلال وجود و/أو غياب المرقمات الإضافية أو من خلال المخطط المحدد لتوليفة من مرقمات الاختراع الحالي. وفي كل حالة فإن النموذج المحدد من المرقمات يمكن أن يكون موجوداً في شكل خصائص معينة بداخل المجموعة من الخلايا و/أو مخططات معينة من المرقمات في الخلايا الفردية بداخل المجموعة.
5 يضم المصطلح Taye كما تم استخدامه هنا أي جزيء بيولوجي والذي يكون وجود أو تركيزه أو نشاطه أو حالة المعالجة بالفسفوربل phosphorylation state له قد تم اكتشافها وقد تم استخدامها لكي يتم توضيح النمط الظاهري من الخلية. وبعد ذلك فإن الخلايا من الاختراع تكون موجبة فيما يتعلق بالمرقمات الخاصة بالنمط الظاهري وتكون سالبة بالنسبة للأنظمة الأخرى. وعن طريق السمة 'موجب" فإن ذلك يعني أن هذا المرقم يتم
0 التعبير عنه بداخل الخلية. ولكي يتم اعتباره بأنه يمكن التعبير عنه فإن المرقم يجب أن يكون موجوداً عند مستوي يمكن اكتشافه. dead من مصطلح (grind قابل للاكتشاف" بأن المرقم يمكن اكتشافه باستخدام واحدة أو أكثر من الطرق المعملية القياسية Jie تفاعل سلسةة البوليميراز (PCR) Polymerase chain reaction ؛ أو التبقيع blotting أو تحليل قياس التدفق الخلوي flow cytometry analysis كما هو موضح.
25 يتم استخدام المصطلح " تم التعبير عنه" لكي يتم وصفه وجود مرقم على سطح أو بداخل خلية. ولكي يتم اعتباره بأنه يمكن التعبير عنه فإن المرقم يجب أن يكون موجوداً عند مستوي يمكن
اكتشافه. deal من مصطلح "مستوي WE للاكتشاف" بأن المرقم يمكن اكتشافه باستخدام واحدة أو أكثر من الطرق المعملية القياسية Jie تفاعل سلسلة البوليميراز؛ أو التبقيع أو تحليل التألق المناعي immunofluorescence أو تحليل إختبار ماص مناعي مرتبط بالإتزيم enzyme-linked (ELISA) immunosorbent assay أو تحليل فرز الخلايا dda zal بالتألق Fluorescence- cell sorting (FACS) 5 86078160. يمكن أن يشير "تم التعبير عنه" إلى» على سيبيل المثال لا all 4 الوجود القابل للاكتشاف الخاص ببروتين protein أو حالة إدخال الفسفوريل phosphorylation state لبروتين أو حمض النووي الريبوزي المرسال ribonucleic messenger (MRNA) acid مشفر للبروتين. يتم اعتبار الجين بأنه يتم التعبير die من خلال خلية من الاختراع أو خلية من المجموعة من الاختراع إذا كان التعبير قد تم اكتشافه بصورة منطقية بعد 30 دورة 0 تفاعل سلسلة البوليميراز» ويفضل بعد 37 دورة تفاعل سلسلة البوليميراز والتي تكون مستجيبة لمستوي التعبير في الخلية من حوالي 100 نسخة لكل خلية. تكون المصطلحات "mad sad لها معاني مشابهة. يتم الأخذ في الاعتبار لمستوي التعبير الأقل من القيمة الحدية ويتم أخذ المرقم في الاعتبار الذي لم يتم التعبير عنه. وصف مفصل منتج معلق الخلية يكون معلق الخلية طبقاً للاختراع الحالي عبارة عن منتج مناسب لمعالجة أو تخفيف مرض الشريان الطرفي المحيطي السفلي وبصورةٍ خاصة لمعالجة الإقفار الطرفي الحرج؛ وبصورة خاصة لمعالجة الإقفار الطرفي الحرج في المرضى المصابين بمرض السكري والذين ليس لديهم أي خيار خاص بعملية إعادة التوعي باستخدام التحويل الجراحي أو الطرق الوعائية الداخلية في شكل بدي مفيد 0 علاجي محسن. في هذا الصدد؛ كان من المدهش الوصول إلى أن معلق الخلية طبقاً للاختراع الحالي عند استخدامه في معالجة أو تخفيف مرض الشريان المحيطي الطرفي السفلي يؤدي إلى العديد من التحسينات الإكلينيكية ذات الصلة مثل التغيير في تصنيف fig) فورد من الدرجة I (الفئة 4) أو 117 (الفئة 5) إلى الدرجة 1 (الفئة 3-1) أو الدرجة 0 (الفئة 0)؛ وتحسناً أيضاً في عملية الالتئام ليس فقط في التقرحات ولكن أيضاً في عملية البتر amputations الرئيسية وزيادة في 5 التتمدد الوعائي vascular extension و/أو الكثافة الوعائية density 27ا0©ف8». يمكن الحصول على
كل السمات السابقة حتى بمن خلال إعطاء منفرد لمعلقة الخلية والذي تم توضيحه بصورة واضحة في المثال رقم 2. وبصفة عامة فإن معلق الخالية من الاختراع يشير إلى معلقة من خلايا مشتقة من نخاع العظم الذاتية المشتقة من نخاع عظم بالغ ويفضل المشتقة من عُرف الحرقفة (أو العرف الحرقفي) والذي يشتمل على: أ-خلايا وحيدة النواة مختارة من قائمة تشتمل على: 1-مجموعة من الخلايا اللمفاوية؛ de gana .2 من الخلايا وحيدة النواة؛ و 3. مجموعة من الخلايا الجذعية المكونة للدم التي تعبر عن مجموعة من التمايز 34؛ 0 وحيث أن معلق الخلية يشتمل أيضاً على: ب-الخلايا المُحببة تمت ملاحظة أن مجموعات الخلية أ) وب) بدورها Joi على de gene خلية والتي تعبر عن مستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4؛ أو مستقبل خاص عالم انتقال من عامل مشتق من الخلية السدوية 1 من المجموعة وبالتالي فمن الضرورية أن يتم توضيح وجود المجموعة الفرعية من 5 الخلايا الجذعية المكونة للدم التي تعبر عن مجموعة من التمايز 34 ومستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4. بالإضافة إلى cally فإن مجموعة الخلية أ) وب) بدورها تشتمل على مجموعة خلية والتي تعبر عن مستقبل عامل النمو البطاني الوعائي 2 ومستقبل خاص بعامل تكوين الأوعية الدموية عامل النمو البطاني الوعائي الذي يتم تضمينه في التوليد الوعائي وتكوين الأوعية. وفي النهاية فإن مجموعة الخلية أ. و3) بدورها تشتمل على مجموعة الخلية التي لا تعبر عن 0 مجموعة من التمايز 38 والتي هي من أوائل الخلايا الجذعية المنتجة للدم غير المرتبطة. وبالتالي وبصورة خاصة فإن المعلق طبقاً للاختراع Mall يكون Ble عن معلق خلية من خلايا مشتقة من نخاع العظم من بالغ ذاتية أو خيفية وبشفضل ذاتية تشتمل على؛ 1) WA تعبر عن مجموعة من التمايز 54؛ و2) خلايا جذعية مكونة للدم غير مرتبطة بصورة مبكرة والتي تعبر عن مجموعة من التمايز 34 ولا تعبر عن مجموعة من التمايز 38 ؛ و3) WA دم بيضاء التي تعبر 5 عن مستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4؛ (Ally تكون عبارة عن مستقبل ald بعامل انتقال عامل مشتق من الخلية السدوية 1؛ و 4 ) خلايا جذعية مكونة للدم التي تعبر عن مجموعة من
التمايز 34 ومستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4 (Ally تكون Ble عن مستقبل لعامل الانتقال عامل مشتق من الخلية السدوية 1؛ و5) خلايا دم بيضاء التي تعبر عن مستقبل عامل النمو البطاني الوعائي 2؛ Ally تكون مستقبل ل sail) dale) البطاني الوعائي) و6) وخلايا أحادية وخلايا حبيبية وخلايا لمفاوية. من المهم أن تتم ملاحظة أن منتج معلق الخلية النهائي من الاختراع قد تم تحضيره في جرعات بالاعتماد على خلايا مشتقة من نخاع العظم من خلايا الدم البيضاء القابلة للنمو والتي تشتمل ليس فقط على جزء خلية الدم البيضاء أحادية النواة (الخلايا اللمفاوية والخلايا الأحادية والخلايا الجذعية) ولكن أيضاً الخلايا الحبيبية. ونتيجة لذلك فإن معلق الخلية من الاختراع يشير إلى معلق خلية من خلايا ذاتية أو خيفية مشتقة 0 من plan العظم من بالغ ويفضل WA ذاتية تشتمل على؛ 1) WIA تعبر عن مجموعة من التمايز 4؛ 25( LOA جذعية مكونة للدم غير مرتبطة بصورة مبكرة والتي تعبر عن مجموعة من التمايز 4 لا تعبر عن مجموعة من التمايز 38 ؛ و) خلايا دم بيضاء التي تعبر عن مستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4 Ally تكون عبارة عن مستقبل ald بعامل انتقال migration factor عامل مشتق من الخلية السدوية 1؛ أي؛ 4 ) خلايا جذعية مكونة للدم التي تعبر عن مجموعة من التمايز 5 34 ومستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4 والتي تكون عبارة عن مستقبل لعامل الانتقال عامل مشتق من الخلية السدوية 1؛ و5) خلايا دم بيضاء التي تعبر عن مستقبل عامل النمو البطاني الوعائي 2 والذي يكون عبارة عن مستقبل عامل النمو البطاني الوعائي و6) وخلايا أحادية وخلايا حبيبية وخلايا لمفاوية. في نموذج مفضل فإن معلق الخلية من الاختراع؛ في الصيغة النهائية والذي تم تخصيبه من خلايا 0 وحيدة النواة يعني أن به أكثر من 725 من خلايا الدم البيضاء الموجودة في معلق الخلية والذي يكون عبارة عن WIS وحيدة النواة lly تشتمل على حوالي AP 10 x4 حوالي 2 x 10 “من خلايا مشتقة من نخاع العظم من LDA الدم البيضاء ويفضل مشتقة من عُرف الحرقفة (أو العرف الحرقفي) حيث يكون العدد الإجمالي م حوالي 4* 10 * إلى حوالي 2 x 10 * من خلايا الدم البيضاء؛ leg 5 1- حوالي 720 إلى حوالي 751 والذي يكون عبارة عن خلايا sled وحوالي 73.9 إلى حوالي 3 عبارة عن خلايا أحادية النواة؛
71.42 إلى 710 من الخلايا الجذعية المكونة للدم والتي تعبر عن مجموعة من التمايز 34؛ 3- حوالي 725.3 إلى حوالي 783.3 من العدد الإجمالي من خلايا الدم الببضاء lly تكون عبارة عن خلايا وحيدة النواة؛ 16.7-4 7 إلى 774.7 عبارة عن Cand WA 5- حوالي 75.4 إلى حوالي 738.8 من العدد الإجمالي من خلايا الدم البيضاء تعبر عن مستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4؛ 6حوالي 70.07 إلى حوالي 724.7 من العدد الإجمالي من WA الدم البيضاء تعبر عن مستقبل عامل النمو البطاني الوعائي 2؛ 7-ومن العدد الإجمالي هناك خلايا جذعية مكونة للدم والتي تعبير عن مجموعة من التمايز 34؛
0 بنسبة حوالي 7.7 7 إلى حوالي 755.5 والتي تكون عبارة عن LIA جذعية مكونة للدم غير مرتبطة lly لا تعبر عن مجموعة من التمايز 38 وبها من حوالي 0.7 7 إلى حوالي 710.3 من الخلايا الجذعية التي تعبر عن مجموعة من التمايز 34 ومستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4؛ و 8-تكون النسبة عند الحد الأقصى لها من WA الدم الحمراء إلى خلايا الكريات البيضاء هي 6.7 ونسبة عند الحد الأقصى لها من الصفائح الدموية لخلايا كريات الدم البيضاء هي 32.
5 وفي نموذج مفضل؛ فإن العدد الإجمالي من خلايا الدم البيضاء هو 732.3 إلى 780.0 والذي يكون عبارة ع خلايا أحادية النواة مختارة من قائمة تتكون من الخلايا اللمفاوية والخلايا أحادية النواة والخلايا الجذعية المكونة اللدم Ally تبعر عن خلايا مجموعة من التمايز 34 و20.0 7 إلى 7 وتكون عبارة عن خلايا خبيبية. في نموذج مفضل آخر فإن معلق الخلايا من الاختراع يكون في الصيغة النهائية؛ كما تم تحديده
0 في الفقرة السابقة ويشتمل على ما بين x 4 Joa 10 * إلى حوالي 1.2 x 10 من خلايا الدم البيضاء؛ ويفضل أكثر من حوالي 5 X 10 إلى حوالي 2 10 "من خلايا الدم البيضاء وبه أيضاً 2 10 507( خلايا الدم البيضاء بوه أيضاً وبصورة مفضلة من حوالي 5 x 10 إلى حوالي 2 10 من WIA الدم البيضاء وكانت كل قيم الجرعات بين كل من القيم المذكورة أعلاه. يمكن اختيار النماذج المحددة في شكل أمداء فرعية من القيم المذكورة أعلاه من خلايا الدم البيضاء
5 في الصيغة النهائية. على سبيل المثال؛ يمكن أن يتم اختيار نموذج محدد في شكل محتوي خلية الدم البيضاء من أكبر من 8 x 10 * إلى حوالي 1.2 x 10 7 من WIA الدم البيضاء. ينطوي
مثال آخر عن كيفية أن مدى (Sa اختياره في النموذج في الاختيار من محتوي من حوالي 9 x 0 * إلى حوالي 1.1 X 10 "من خلايا الدم الببضاء. يمكن اختيار مثال ثالث من الأمداء لنموذج محدد من الاختيار الذي يكون بين حوالي 9.5 * 10 من خلايا الدم البيبضاء. يمكن اختيار مثال رابع من الأمداء لنموذج محدد من الاختيار الذي يكون بين حوالي 9.8 x 10 * إلى حوالي 1.02 X 10 * من WA الدم البيضاء .
أوضحت أمثلة (gal كيفية أن مدى من أحد النماذج من المحتوي أو التركيز يمكن اختياره والذي قد يشتمل على المدى السابق من 6 X 10 " إلى حوالي 2 x 10 *ويفضل إلى حوالي 1.2 x 0 من LIA الدم البليضاء ويضم المدى كل قيم الجرعة الموجودة بين القيمتين. ينطوي مثال آخر على الاختيار من المدى من أعلى من 7 x 10 إلى حوالي 2 x 10 "ويفضل إلى حوالي x 1.2 0 10 2 من خلايا الدم البيضاء ويضم المدى كل قيم الجرعة الموجودة بين القيمتين. ينطوي مثال AT على الاختيار من المدى من el من 8 x 10 إلى حوالي 2 ding” 10 x إلى حوالي 1.2 x 10 * من WIA الدم البيضاء ويضم المدى كل قيم الجرعة الموجودة بين القيمتين. ينطوي مثال آخر على الاختيار من المدى من el من 8.5 x 10 * إلى حوالي 2 x 10 7* ويفضل إلى حوالي 1.2 X 10 * من خلايا الدم البيضاء ويضم المدى كل قيم الجرعة الموجودة 5 بين القيمتين. ينطوي مثال آخر على الاختيار من المدى من أعلى من 9 x 10 * إلى حوالي x2 0 وبفضل إلى حوالي 1.2 x 10 "من WIA الدم الببضاء ويضم المدى كل قيم الجرعة الموجودة بين القيمتين. ينطوي مثال آخر على الاختيار من المدى من el من 9.5 x 10 إلى حوالي 2 x 10 * ويفضل إلى حوالي 1.2 * 10 * من WIA الدم البيضاء وبضم المدى كل قيم الجرعة الموجودة بين القيمتين. وبالتالي فإن كل أمداء الجرعات يمكن اختيارها من القيم المذكورة 0 هنا ويمكن أن يتم فهمها من خلال ذوي المهارة العادية في المجال ويتم تضمينها بواسطة الاختراع
الحالي. تم توضيح طرق قياس كل مجموعة خلة أعلاه وتم ذكرها بصورة واضحة بالتفصيل من الاختراع الحالي. وهبصفة خاصة» يتم إجراء طرق قياس كل من الخلايا اللمفاوية والخلايا وحيدة النواة والخلايا الحبيبية والصفائح الدموية و LA الدم الحمراء (RBCs) red blood cells باستخدام أعداد 5 خلية متمايزة وإجمالية باستخدام جهاز حساب خلايا الدم بصورة آلية automated hematology (ABx Pentra 60, Horiba Medical) cell counter تم تحديد النسب المثوية للخلايا السليفة؛
والنسب المثئوية للخلايا المعبرة عن مستقبل عامل النمو البطاني الوعائي 2 والنسب المئوية للخلايا المعبرة عن مستقبل عامل النمو البطاني الوعائي 2 باستخدام وسيلة قياس التدفق flow (gall (MAC S Quant Analyzer 10, Miltenyi Biotec) cytometer . تمت ملاحظة أن كل معلقات الخلية تشتمل على مواد حاملة مقبولة صيدلانياً و/أو سواغات.
في نموذج مفضل آخرء يتم تعليق الخلايا في معلق الخلايا من الاختراع حجم من 5 إلى 30 مل من محلول ملحي معالج بالهيبارين؛ أو محلول رينجر لاكتات ويفضل أن يشتمل على حوالي 71 من ألبومين المصل البشري وحوالي 72.5 من الجلوكوز. يوفر الاختراع أيضاً تركيبة تشتمل على معلق خلية من الاختراع كما تم تعريفه أعلاه وبشكل اختياري sale حاملة مقبولة صيدلانياً. يمكن أن تشتمل المادة الحاملة المقبولة صيدلانياً على وسط
0 والذي يعمل على دعم قابلية نمو الخلية والوظائف الخاصة بها. يمكن أن يكون الوسط المذكورة عبارة عن وسط خالي من المصل لكي يتم تجنب استثارة الاستجابة المناعية immune response في المتلقي. سوف تكون المادة الحاملة عبارة عن محلول منظم أو مادة خالية من الحمى .pyrogen وتشمل المواد الحاملة المقبولة صيدلانياً والمخففات المقبولة صيدلانيا على المحاليل الملحية
5 والمحاليل المائية والمذيبات و / أو أوساط التشتيت dispersion media إن استخدام هذه الناقلات والمواد المخففة diluents معروف جيدا في هذا المجال. يكون المحلول عبارة عن محلول معقم ويبكون له لزوجة منخفضة بشكل كافي للسماح باستخدام محقنة للإعطاء . تكون أمثلة المواد والمحاليل التي يمكن استخدامها في شكل مواد حاملة مقبولة صيدلانياً معروفة أيضاً في المجال.
0 وقد تمت في نموذج مفضل ملاحظة أ الصيغة الصيدلانية النهائية من منتج معلق الخلية كما هو موضح في الأمثلة من المواصفة الحالية اقد تم تشكيله من محلول ملحي من الهيبارين (انظر الجدول رقم 4) ٠ يمكن أن يتم استخدام محلول رينجر معاتج باتلاكتات Lactated Ringer solution )2.7 مجم/ 100 مل من كلوريد الكالسيوم ثنائي الهيدرات «calcium chloride dihydrate 320 مجم/ 100 مل من لاكتات الصوديوم sodium lactate و40 مجم/ 100 مل من كلوريد بوتاسيوم
potassium chloride ~~ 25 و600 [ane 100 مل من كلوريد الصوديوم (sodium chloride مع إضافة 5 من الجلوكوز و71 من ألبومين المصل البشري (انظر الجدول رقم 2(
— 7 2 — تم تحضير وسط الصيغة النهائي كما هو موضح في الأمثلة من الاختراع بصورة جديدة لكل دفعة وفي يوم المعالجة؛ وفي الفئة A BSC بواسطة إضافة 10 مل من الجلوكوز (2.5 #) و1 مل من ألبومين المصل البشري (720) إلى 9 مل من محلول jai معالج باللاكتات. الجدول 2 المحلول المنظم للصيغة * المكون التركيز الدرجة مَخُلولٌ ay دستور الأدوية الأوروبي European Pharmacopeia (EP) دستور الأدوية لأمريكي للتسريبب United States Pharmacopeia (USP) الجلوكوز 5م دستور الأدوية الأوروبي؛ دستور الأدوية الأمريكي َلْبُومِينٌ بَشَرِيُ Human 21 دستور الأدوية الأوروبي؛ albumin دستور ١ لأدوية | لأمريكى المحلول الملحي ( 70.9 20 وحدة/مل للتسريب (NaCl ل دستور J لأدوية J لأوروبي ¢ هيبارين Co 7 دستور الأدوية الأمريكي دستور J لأدوية J لأوروبي دستور الأدوية الأمريكي الاختصارات: EP = دستور الأدوية الأوروبي؛ USP = دستور الأدوية في الولايات المتحدة الأمريكية. * انظر أيضا الجدول
ويالتالي تكون السواغات المفضلة بصورة خاصة عبارة عن محلول ربنجر معالج باللاكتات ويفضل
بإضافة الجلوكوز وألبومين المصل البشري.
في نموذج مفضل آخرء فإن المعلق من الاختراع أو التركيبة الصيدلانية من الاختراع يمكن أن يتم
تجميدها في وسط التجميد freezing medium إن أي وسط يعمل على حفظ قابلية النمو من
الخلايا عند درجات حرارة بين -135 م و-190 درجة مئوية يكون عبارة عن وسط تجميد مناسب.
على سبيل المثال؛ فإن وسط التجميد يمكن أن يشتمل على ما بين 72.5 إلى 710 من ثنائي
ميثيل السلفوكسيد Dimethylsulfoxide (01450). وبصورة أكثر تحديداً؛ فإن وسط التجميد يمكن
أن يشتمل على 5 -710 من ثنائي ميثيل السلفوكسيد.
يمكن أن يكون وسط التجميد معتمداً على وسط الزراعة culture medium أو وسط التمدد expansion medium 0 كما تم وصفه هنا والذي يشمل أيضاً على مصل بشري أو أي بروتين أو
خليط من البروتينات القادرة على الحفاظ على الخلية بصورة متكاملة بعد إذابة الخلايا.
ويعد الإذابة فإن الخلايا من الاختراع يمكن أن يتم غسلها لإزالة ثنائي ميثيل السلفوكسيد أو مكونات
وسط التجميد الأخرى قبل إعطاء أو إعادة التعليق في محلول الإعطاء. يمكن أن يكون محلول
الإعطاء عبارة عن أي محلول قابل للحقن في المرضى بدون سمية. يمكن أن dai محلول 5 الإعطاء على 715-1 من البروتين Jie ألبومين المصل البشري.
يمكن استخدام التركيبات الصيدلانية من الاختراع في أي طرق خاصة بالمعالجة أو أي استخدامات
علاجية تم وصفها هنا.
وكما تم ذكره بالفعل فإن معلق الخلية من الاختراع يعمل على زيادة سرعة (إعادة) التجديد من
الأوعية الدموية الموجودة وتحسين تدفق الدم بداخل الأوعية الموجودة كما هو موضح في المثال 0 رقم 2. وبالتالي فإن معلق الخلية من الاختراع يكون مفيداً بصفة خاصة في معالجة مرض الشريان
المحيطي الطرفي السفلي؛ ويفضل مرض الشريان المحيطي؛ ويفضل أكثر الإقفار الطرفي الحرج
باستخدام مرض السكري في المرضى الذين ليس لديهم hla خاصة بإعادة المعالجة الوعائية
باستخدام التحول الجراحي أو الطرق بداخل الأوعية. تم إجراء المثال رقم 2 من خلال استخدام
منتج معلق خلية عقار محدد يقع في مجال تعريف معلق الخلية من الاختراع الحالي كما تم تحديده 5 في السمة الأولى من الاختراع. تم تحضير منتج معلق الخلية الخاص بالعاقر من مادة عقار خلية
أحادية النواة مشتقة من نخاغ العظام التي تمت صياغتها في محلول ملحي معالج بالهيبارين من
30-0 مل. تم استخدام منتج معلق خلية العقار المذكورة في جرعات مختلفة ويفضل أن تكون تلك الجرعات من حوالي 5 X 10 " إلى حوالي 1 x 10 9. كانت الحاوية النهائية هي 3-1 من الإعطاءات في المحقنة. تم تجميع البيانات عن منتج تعليق الخلية المذكور في الطور ]1 uh) (CMMOo/ICPD/2008 ل 32 خاضعاً في الدفعة. يلخص الجدول رقم 2 فما يلي بيانات وسيلة حساب الخلايا لكل خاضع فردي بما في ذلك خلية الدم البيضاء (WBC) White blood cell وأعداد LAY المختلفة (الخلايا اللمفاوية ووحيدة النواة). تم توضيح الملوثات المتعلقة بالمنتج أيضاً لكل خاضع بما في ذلك خلية الدم الحمراء والتركيزات الخاصة بالصفائح والنسب المثوية الخاصة بالخلايا الخبيبية. تم أيضاً توضيح تحليل النمط الظاهري من نفس المنتجات في الجدول رقم 3 والذي يشتمل على 0 تتحليل أنواع الخلية التالية: مجموعة من التمايز 34+ الخلايا الجذعية المكونة للدم مجموعة من التمايز 34+مجموعة من التمايز 38- الخلايا الجذعية المكونة للدم غير المرتبطة بصورة مبكرة مجموعة من التمايز 133 133cluster of differentiation (00133) + مستحضر الخلية Jai Gall على وسلة إنذار بطانية وعائية Endothelial progenitor مجموعة من التمايز 90 +(CD90) 90cluster of differentiation الخلايا الجذعية المكونة للدم بصورة مبكرة مستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4+ الخلايا المعبرة عن مستقبل عامل مشتق من الخلية السدوية 1 +VEGFR2 الخلايا المعبرة عن مستقبل عامل نمو بطاني وعائي 2 —CD31+CD146+CD133 LIA بطانية ناضجة Mature endothelial cells
+CD34+VEGFR2+CD133 خلايا نذير بطاني لعامل outgrowth endothelial gall progenitor cells المتأخر CD34-CD105+CD90+CD73+ 5 الخلايا الجذعية المتوسطية Mesenchymal stem (MSCs) cells تم توضيح البيانات التي تم تجمعيها من مادة العقار في الجدول رقم 2 وفي الجدول رقم 3 الجدول 2 عدد الخلايا الذاتية التمايز الخاص بمادة العقار 0110/1001/2008. تم توضيح البيانات الخاصة بالجعرة المتوسطة (5 X 10 خلايا كريات الدم البيضاء أو خلايا الدم البيضاء) 0 والجرعة العالية )1.0 WAY 10 x كريات الدم البيضاء أو خلايا الدم البيضاء). Sada d خلية or لِمْ أحا مجم | الخ | العد اليوز قعدا | الخل المريض ايا الدم x) ف دية وعةالاياالات ينات ت ١ايا لكر الحم 2(|10) )1( منأأحا|() SI) يات راء ) Loa | Lal بيبية البي )1% يز ا النوا )7( ضاء 0 34+ |5 ود "ا 0 0 3 BD اوسي وس و او وس بي | الخ | وسي وسيلة وس ١ المج يقة: A) يلة سياسي يلة اتش AJA) حس foo dd حس حس لةالة ح إي pa |W اب حسا اب اب ح اح س 5 ديةااب عدد ب عدد عدد س اس اب النوا | عدد الخلية Ae الخل الخ اب ol] عد ة | الخل الآلية الخ dd dA عداعد د ية لية
اد الخ الآل الآل a الآل الآل ية ية الخاالخ لية ية ية oad] ad auto mat لية Yow ed al au cell ~ | يِه cou nter (AC )C 55. 33 45 غير 6. 4825 0.0 19.| 1 0 4 5.1 9 5 9 3.0 1 متاح 54. 33.145. 14 12 4260 0.1 19.| FO3 811.2 1 91 2 4 22 5.1 3 1 43 31. 57.168. 3.7 7. 24169 0.0 20.| Fo4 413.1 0.1 71 6 7 2 1. 4 59 26. 62+73. 72 6. 20| 56 0.0 16.| 5 6125 1 4 3 4 q. 4 87 > > غير 12 2 2 5 5 FO7 3.1 4 متاح OF 43. 42.156. 3.6 7. 3631 00 21.| FO8 912.7 0 6| 1 9 5 4.1 0 6 94 42. 47.157. 43 5. 3732 00 43.| 09 814.1 0 21 2 4 4 4.1 9 6 29 67. 25.132. 25 22 4527 00 8.7| 60 3123 0.1 31 7 4 1. 1.1 7 4 5 35. 5464.1 10. 7. 28 38 0.0 17.| 1 2149 0.1 8 05 0 1. 2 28 57. 27.142. 42 10 47) 23 00 30.| 4 917.1 0 31 1 0 5. 4.| 2 7 4 58. 30.141. 65 11 4728 0.0 23.| 5 3142 0.1 4 7 0 1. 1.1 0 6 12 37. 51.162. 47 11 26|15 0.0 14.١ 6 7146 1 21 3 5 6.1 3 4 9
42. 49157.1 36 6. 36|23 00 25. | F17 9123 0 1] 8 7 قاد 6 1 38. 48.161. 3.0 8 30|19 00 22.| 8 4133 0 9] 6] 0 2 H | 1 7 89 62. 21.137. 0 11 5122 00 16.| F20 3 8| 7 7. 1.1 9 6 46 41 0 متاح 57. 32.142.122 9. 4815 00 31.| F21 8/29 02 5] 2] 0 4 5 | 3 5 55 59. 31.140.| 1.6 17 42]15 00 10.| F22 5034 01 1| 5] 7 4. o.| 7 5 46 46. 42.153. 33 6. 40] 14 00 18. | F23 5029 01 9] 5] 0 2 5, | 4 3 36 42. 51.157. 33 6. 36123 00 27.| 5 5164 0 7] 5] 0 0 s5.| 9 6 86 57. 28.142. 42 14 4333 00 25. | F26 3/128 0 4| 7| 8 ام و 7 8 83 45. 39.154. 20 7. 3853 00 23.| 7 132 0 9] 9 6 0 1.| 8 6 8 52. 33.147.] 36 5. 4693 00 19. | 8 3122 0 5 70 7 9 4 4 6 53. 31.146.] 21 7. 45024 0.0 20.| F30 1141 0 70 91 9 7 4.1 6 9 4 56. 32.143.] 46 14 4123 00 15.| 1 3148 01 2 7] 8 4 اي 0 6 67 67. 17.132. 54 16 50| 48 0.1 26.| F32 7145 02 5 3] 0 و | 9 5 34 44, 44.155. 35 3. 0 40137 0.1 35. | F33 6147 0 7| 4] 9 9 7.2١ 0 3 32. 56.167.] 27 5. 2639 0.1 56.١ F34 2151 0 1| 8 3 7 s5| 8 1 97 32. 60.167. 92 6. 25010 0.0 28. | 5 20132 02 5| 8] 4 4 | 7 5 4 37, 51.162.1 39 10 2620 00 19.| 7 5036 01 2] 5] 2 4. 4 1 4 1 50. 39.149.] 41 20 30|50 0.0 29. | F38 9127 01 5| 1| 2 g o| 4 7 4
— 3 3 — F39 |.26 00 31|17 22 44 | .40.145 .54 7.2١4 3 03 ,3 4 9 |6 0.1 113.6 0 |.24 0.0 30 غى 9 3.1 |80 48.1 .20 2 7 4 0 8 9 0 J مهم 0.1 27 الحدا8.7 0.0 2038 .3 14 .17.32 0 2 .20 S51 2 .1 9 4 3 51 0 الأدن ى الحدا.56 0.1 5160 22 .62.80.10 04 67.7.1 1.2١ 3 5 97 و3 05 0 0+6 7 الاق = الطرق المستخدمة: ACC = تركيبة مادة العقار drug substance composition التي تم اختبارها باستخدام عداد الخلايا ¢(ABx Pentra 60) automated cell counter SY ١ و PHE = تحليل التمط الظاهري phenotypic analysis من مادة العقار dh wg) drug substance تحليل MACS MINC ¢(Quant 10¢ Miltenyi Biotec = تم حسابه في شكل نسبة مثوية من خلايا الدم البيضاء غير خلاف الحبيبات SUM ‘granulocytes = التي تم حسابها من عدات الخلية المتشكلة .constitute cell counts الاختصارات: WIA = LEU الكريات البيضاء؛ RBC = خلية الدم الحمراء؛ 5 PLT = صفيحة الدم LYMPH platelet = الخلايا اللمفاوية؛ MONO = الخلية الأحادية؛ +CD34 = الخلايا المعبرة عن مجموعة من التمايز 34؛ LIAN = MNCs أحادية النواة؛ 5 NEU = العدلات؛ و1388 = 0 الخلايا الحمضية؛ EOS = اليوزينات؛ GRA = الخلايا الحبيبية؛ N/A = غير متاح not =N/M tavailable غير مهم -not meaningful الجدول 3 تحليل النمط الظاهري من معادة عقار CMMo/ICPD/2008 تجميع البيانات في الطور ]1 (دراسة (CMMo/ICPD/2008 ل 32 خاضعاً
-4 3 _— دفعة مجموعة مجموعة من مستقبل مجموعة من مستقبل Gand من التمايز كيموكين التمايز عامل النمو التمايز 34/بمجموعة 0-606 من 34/بمستقبل البطاني 4+ من التمايز_النوع 4+ كيموكين C-X- الوعائي 0 38- 0 © من النوع 4 2+ 70 0 0 PHE PHE PHE 5 1 تن ft, TOT FO3 1.44 18.05 15.10 0.69 24.73 FO4 3.77 26.25 5.38 1.06 2.23 FO5 7.23 7.74 18.63 1.10 0.30 Fo7 غير متاح غير متاح غير متاح غير متاح غير متاح FOS 3.69 14.9 22.59 9.48 0.25 F0O9 4.34 22.11 31.93 9.44 0.19 F10 2.54 20.47 32.00 2.75 0.25 F11 10.05 25.77 31.56 4.87 0.40 1014 4.20 18.33 20.27 6.66 0.30 F15 6.50 41.84 21.93 0.92 0.3 F16 4.75 22.1 38.79 4.00 0.28 F17 3.68 28.53 25.62 543 0.76 F18 3.00 34 21.10 3.33 0.07 120 غير متاح غير متاح غير متاح غير متاح غير متاح F21 2.20 55.45 11.20 6.81 0.3 F22 1.67 19.16 16.00 3.59 0.64 F23 3.30 10.00 27.10 10.3 0.47 F25 3.30 18.48 20.05 3.33 0.36 F26 4.28 21.26 26.66 5.84 0.65 F27 2.06 17.47 23.79 1.45 0.21 F28 3.67 18.52 14.55 5.17 0.56 F30 2.19 23.74 29.44 10.04 0.33 F31 4.68 42.73 32.06 9.61 0.66 F32 5.40 24.07 22.88 5.37 0.45
F34 2.73 34.43 7.69 1.83 0.46 F35 9.24 20.23 21.53 2.59 1.07 F37 3.92 33.92 35.21 4.84 0.65 F38 4.12 35.92 30.42 2.66 1.78 F39 4.44 18.01 27.51 1.80 0.99 F40 3.18 30.50 15.88 2.83 1.37 144 7.74 5.38 0.69 0.07 الأدنى . 10.05 55.45 38.8 10.3 24.7 الأقصى الطريقة المستخدم: PHE = تحليل النمط الظاهري sald العقار (وسيلة تحليل (MACS Quant10 من 310166 (Miltenyi ¢ الاختصارات: =+CD34 الخلايا الجذعية المكونة للدم المعبرة عن مجموعة من التمايز 34؛ و0038/+034©-<- نسبة الخلايا الجذعية المكونة للدم المعبرة عن مجموعة من التمايز 34 التي لا تعبر عن مجموعة من التمايز 38؛ 5 +CD45+HCXCRA = نسبة LIA الدم البيضاء والتي تعبر عن مجموعة من التمايز 45 وأيضاً التي تعبر عن مستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4؛ CD34+/CxCR4 = نسبة الخلايا الجذعية المكونة اللدم المعبرة عن مجموعة من التمايز 34 والتي تعبر أيضاً عن مستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4؛ 5 +CD45+ /VEGF = النسبة المئوية لخلايا الدم البيضاء التي تعبر عن عامل النمو البطاني الوعائي؛ و7/8<- غير المتاحة. تم أيضاً التعبير عن كل الخلايا لمجموعة من التمايز 45. وبالاعتماد على النتائج التي تم تجميعها في الطور ]1 (دراسة (CMMo/ICPD/2008 تم توضيح الدفعات ل 32 خاضع في الجدول رقم 2 ورقم 3 أعلاه؛ وقد قمنا بتوفير الخصائص الخاصة بمنتج معلق الخلية من الاختراع الحالي. 5 تمت ملاحظة أن الاختراع الحالي يشتمل أيضاً على 3-1 من المحاقن (مسبقة الملء) التي تشتمل على معلق خلية الاختراع. بالإضافة إلى ذلك» وإذا كان ذلك مطلوباً فإن الخلايا من معلقة الخلية من الاختراع يمكن أن يتم تعديلها بصورة جينية من خلال استخدام الطرق التقليدية والتي تشتمل على؛ على سبيل المثال لا
الحصرء عملات خاصة بالتكوين الجيني وعمليات الحذف وعمليات الإدراج في الجينوم «genome إلخ. - عمليات التصنيع الخاصة بمنتج معلق الخلية.
يمكن أن يتم تصنيع منتج معلق الخلية من الاختراع في عدد من الطرق؛ وعلى الرغم من ذلك؛ يفضل أن يتم تصنيعها كما هو موضح بالتفصيل في المثال رقم 1 بحيث أن معلق الخلية من
الاختراع يمكن أن يتم أخذه في الاعتبار بأنه قد تمت معالجته عند الحد الأدنى له من منتج خلية
أحادية النواة مشتقة من نخاغ العظام ؛ بسبب أن عملية التصنيع تتكون فقط من كثافة حجم الجسيم
وخطوات الفصل بالاعتماد على الجاذبية المقصود منها أن يتم تخصيب gall في أسبارتات؛
بواسطة إزالة البلازما والصفائح الدموية platelets وخلايا الدم الحمراء والخلايا الحبيبية.
0 تكون عملية الصنيع كما تم وصفه هنا في المثال رقم 1 قد تم تلخيصها بصورة مختصرة كما يلي: - الخطوة 0 يتم إجراء تجميع نخاع العظم بواسطة عمليات السفط المتكررة؛ وبفضل من القمة الحرقفية الخلفية للخاضع تحت عملية تخدير موضعي. يتم بعد ذلك تجميع نواتج سفط نخاع العظم ويفضل في كيس ناقل يشتمل على سترات مضادة للتخثر من محلول ديكستيروز أ. الخطوة 1: الترشيح-يتم ترشيح نخاع العظم ويفضل بواسطة الجاذبية لكي تتم إزالة أي شظايا
5 عظام صغيرة ولكي يتم منع التخثر أثناء الخطوات التالية. الخطوة 2: اختزال الحجم من SmartRedux - يتم تقليل حجم نخاع العظم الأولي من حوالي 100-50 مل ويفضل باستخدام برنامج SmartRedux على جهاز 2.0 Sepax والذي يرتبط مع الإزالة عن طريق طقم (05-490.1) SmartRedux وذلك بإتباع تعليمات المصنع. إن تلك الخطوة التي تشضتمل على إزالة البلازما وخلية andl الحمراء ينتج عنها حوالي 100-50 مل من منتج
0 التتغليف المزغب وأيضاً تسهم في النقاء الخاص بالمنتج النهائي. إن خطوة اختزال الحجم يتم إجراؤها مرة واحدة أو مرتين وذلك اعتماداً على حجم مادة البدء المراد معالجتها. تمت معالجة عينات نخاع العظم بأحجام تصل إلى حوالي 220 مل في دورة منفردة وتمت معالجة عينات من العديد من 220 مل في اثنين من الدورات باستخدام نفس الطقم. بالنسبة لكل من اختزال الحجم في الدورة المنفردة والمزدوجة والحجم النهائي قد تم ضبطه عند
5 حوالي 100-50 مل.
الخطوتين 3 -4: تدريج الكثافة من NeatCell -يفضل أن يخضع كيس العينة المتوسط المعقم المشتمل على حجم مختزل من نخاع العظم لعملية طرد مركزي متدرج الكثافة من ig ذلك مرتين من الغسل لمعلق الخلية أحادية النواة باستخدام محلول الغسل ويفضل المكون من 74-2 من ألبومين المصل البشري في المحلول الملحي المنظم (كل منها في درجة صيدلانية). يتم تجميع حوالي 45 مل من منتج خلية أحادية النواة di Ge من نخاغ العظام في كيس الإخراج وتتم إزالة المكونات الأخرى في كيس النفايات bag ع77851. الخطوة 5: ترشيح خلية أحادية النواة مشتقة من نخاغ العظام- يتم تجميع خلية أحادية النواة مشتقة من نخاغ العظام من كيس المنتج باستخدام محقنة 50 مل وبتم الترشيح ويفضل أن يتم من خلال مرشح 50 ميكرو متر في أنبوب فالكون معقم. يتم سفط كيس المنتج باستخدام محلول الغسل ويتم 0 الترشيح لكي يتم تحسين استخلاص الخلية أحادية النواة. يتم ضبط الحجم النهائي لمادة عقار خلية أحادية النواة مشتقة من نخاغ العظام عند 60-40 مل. تتكون الخلية النهائية (الخطوة 6) على المستحضر من منتج معلق الخلية النهائي من الاختراع. تم وضع المنتج النهائي المذكور في جرعات على WIA الدم البشرية؛ بما في ذلك ليس فقط gia الخلية أحادية النواة ولكن أيضاً الخلايا الحبيبية. وسبب أن الخلايا أحادية النواة عبارة عن مكون 5 فعال فإن النسبة المئوية ل WAY أحادية النواة في المنتج النهائي يتم أخذها في الاعتبار بأنها سمة متعلقة بالجودة. في هذا الصدد؛ هناك بعض متغيرات العملية التي يمكن أن تؤثر على النوعية التي تسهم في المنتج النهائي. في هذا الصدد؛ تم توضيح الخطوات التي تؤثر على النسب المئوية من الخلايا أحادية النواة في المنتج النهائي والتي تعتبر مهمة في عملية تصنيع المنتج في الجدول رقم 5. 0 الجدول 5 الخطوات والمتغيرات المرتبطة مع عملية التصنيع الخطوة المتغير مدى الأهمية
— 8 3 — ترشيح الحجم يمكن أن يتداخل وجود قطع العظام مع فعالية التنقية ويمكن أن يتداخل مع إجراء الإعطاء. is yh الطرد المركزي : icy ull يمكن أن تسهم خطوة SmartRedux والمدة Al ل المعتمدة على الجاذبية بصورة مباشرة في نقاء المنتج النهائي. وبالتالي فإن إعدادات المتغير تتطلب إنشاء عملية فصل هامة. NeatCell حجمم الفيكول تمت تثقيتها. كانت الكثافة المستخدمة هي 1.077 جرام/المللىو تأثيرات استخلاص الخلية أحادية النواة sass dey الطرد المركزي تأثيرات استخلاص الخلية أحادية للفيكول النواة sass dey الطرد المركزي تأثيرات استخلاص الخلية أحادية والغسل النواة الاختصارات: 1,170 = خلايا وحيدة النواة
خطوة SmartRedux - يقصد من تلك الخطوة أن تقوم باختزال حجم نخاع العظم إلى حجم صغير بصورة كافية للمعالجة في إجراء Neatcell (يكون ل NeatCell حجم مدخلات من 120 مل). بالإضافة إلى ذلك فإن خطوة SmartRedux تشضتمل على التجزئة إلى خلايا الدم الحمراء ومنتج البلازما ومنتج طلاء مزغب والذي يسمه في النقاء الخاص بمنتج NeatCell 5 تكون المتغيرات المهمة الخاصة بتلك الخطوة Sle عن سرعة الطرد المركزي والمدة Lady المتغيرات التي يتم التأثير عليها بصورة هامة واستخلاصها من الخلايا أحادية النواة من أسبيرات aspirate نخاع العظم. خطوة (-NeatCell طريقة تخصيب الخلية أحادية النواة الآلية قد تم تصميمها وتم جعلها في صورة قياسية من خلال هيئة التصنيع وئقصد منها أن تقوم بتخصيب أسبارتات نخاع العظم 0 للتخلايا أحادية النواة وبالتالي فهي هامة. تكون هيماتوكربت (Het) Hematocrit من sale البدء ل NeatCell عبارة عن سمة هامة للمادة بسبب أنها تؤثر على فعالية تنقية الخلية أحادية النواة. تم تثبيت متغيرات العملية الهامة في برنامج NeatCell بما في ذلك سرعة الطرد المركزي والمدة وكثافة الفيكول والحجم. وفي سياق جزء الخلية أحادية النواة فإن مجموعات الخلايا المتعددة يعتقد أنها تلعب أدوراً مهمة في طريقة التأثير على المنتج النهائي. وبالتالي فإن الوجود والفعالية الخاصة بالخلايا المذكورة تأخذ في اعتبارها خصائص النوعية considered quality attributes (عذو0). يكون gal الخلية أحادية النواة الذي تم الحصول عليه بعد تدريج الكثافة المشتمل على تلك الخلايا له كثافة منخفضة بالمقارنة مع الفيكول وبالتالي فإنه ليس له كثافة كافية لكي يم اختراقه بداخل طبقة الفيكول أثناء الطرد المركزي. ونتيجة لذلك؛ فإن كثافة الفيكول المستخدمة في العملية تتأثر 0 بصورة مباشرة بالتركيبة الخاصة بمجموعة الخلية أحادية النواة وبالتالي فإنه يتم أخذها في الاعتبار بأنها متغير عملية هام. كانت الكثافة المستخدمة هي 1.077 جرام/المللي. إن عملية التصنيع هي عملية متصلة ولا تتضمن أي خطوات تنشيط أو معالجات زائدة للخلايا والتي يمكن أن تؤثر في وظائف مجموعات الخلايا بداخل جزءٍ الخلية أحادية النواة. يمكن أن تؤثر مدة العملية على الوظيفة الخاصة ب الخلايا Jilly لا يكون هناك أزمة إيقاف تم تضمينها في 5 العملية إكمال العملية بكاملها في مدى من 5-4 ساعات في وسط غرفة نقية. يمكن أن يتم التأثير على الوظائف بواسطة حالة المرض الخاصة بالمريض وقابلية التغيير الفسيولوجية العامة للمريض.
واستناداً لما سبق؛ تشير سمة إضافية من الاختراع إلى عملية تصنيع خاصة بمعلق الخلية من
الاختراع والتي تشتمل على:
1. يتم إجراء تجميع نخاع العظم بواسطة عمليات السفط المتكررة؛ وبيفضل من Gall الحرقفي
الخلفي للخاضع تحت عملية تخدير موضعي أو عام. يتم بعد ذلك تجميع نواتج سفط نخاع العظم
ويفضل في كيس ناقل يشتمل على محلول مضاد للتخثر ويفضل أكثر محلول سترات ديكستيروز
.
2. يتم ترشيح نخاع العظم ويفضل بمساعدة الجاذبية لكي تتم إزالة أي شظايا عظام صغيرة ولكي
يتم منع التخثر أثناء الخطوات التالية.
3. يتم تقليل حجم نخاع العظم الأولي ويفضل من حوالي 100-50 مل ويفضل باستخدام برنامج SmartRedux 0 على جهاز 2.0 Sepax والذي يرتبط مع الإزالة عن طريق طقم SmartRedux (CS-
71 ). إن تلك الخطوة التي Jasin على إزالة البلازما وخلية الدم الحمراء أن ينتج عنها حوالي
100-50 مل من منتج التغليف المزغب وأيضاً التي تتكون من النقاء الخاص بالمنتج النهائي.
4 وبشكل اختياري؛ فإن خطوة اختزال الحجم يتم إجراؤها في اثنين من الدورات وذلك اعتماداً على
حجم مادة البدء المراد معالجتها. تمت معالجة عينات نخاع العظم بأحجام تصل إلى حوالي 220 5 مل في دورة منفردة وتمت معالجة عينات من العديد من 220 مل في اثنين من الدورات باستخدام
نفس الطقم. يفضل أن يكون كل من اختزال الحجم في الدورة المنفردة والمزدوجة والحجم النهائي قد
تم ضبطه عند حوالي 100-50 مل.
5. إن كيس العينة المتوسط المعقم المشتمل على نخاع العظم تم اختزال حجمه كما هو موضح في
الخطوة رقم 3 أو 4 ويخضع لعملية طرد مركزي متدرجة وبلي ذلك مرتين من الغسل لمعلق الخلية 0 أحادية النواة باستخدام محلول الغسل ويفضل المكون من 74-2 من ألبومين المصل البشري في
المحلول الملحي المنظم (كل منها في درجة صيدلانية. يتم تجميع حوالي 45 مل من منتج خلية
أحادية النواة die من نخاغ العظام في كيس الإخراج وتتم إزالة المكونات الأخرى في كيس
النفايات. ويفضل أكثر أن يخضع كيس العينة المتوسط المعقم dai dial) على نخاع العظم تم
اختزال حجمه لعملية طرد مركزي بالكثافة من NeatCell ويلي ذلك مرتين من الغسل لمعلق الخلية 5 أحادية النواة باستخدام محلول الغسل ويفضل المكون من 74-2 من ألبومين المصل البشري في
المحلول الملحي المنظم (كل منها في درجة صيدلانية. يتم تجميع حوالي 45 مل من منتج خلية
أحادية النواة die من نخاغ العظام في كيس الإخراج وتتم إزالة المكونات الأخرى في كيس
النفايات.
6.» يتم تجميع خلية أحادية النواة مشتقة من نخاغ العظام من كيس المنتج ويفضل باستخدام محقنة
0 مل وبتم الترشيح وبفضل أن يتم من خلال مرشح 50 ميكرو مترء؛ في أنبوب فالكون معقم. يتم سفط كيس المنتج باستخدام محلول الغسل وبتم الترشيح لكي يتم تحسين استخلاص الخلية أحادية
النواة. يتم ضبط الحجم النهائي لمادة عقار خلية أحادية النواة مشتقة من نخاغ العظام عند 60-40
مل.
من المهم أيضاً أن تتم ملاحظة أن تصنيع معلق الخلية من الاختراع يفضل أن يكون في عملية
متصلة تم تضمينها في عملية تخصيب الخلايا حيث أن العملية لا تشتمل على خيار المعالجة.
0 ويعد الإعداد الخاص بمادة العقار فإن الطرد (Gal ل الخلايا أحادية النواة يفضل أن يتم إجراؤه عند 760 X العجلة لمدة 10 دقائق عند درجة حرارة الغرفة. يتم إعادة تعليق الخلايا في الصيغة النهائية (ويفضل في محلول ملحي منظم من الهيبارين أو محلول رينجرز تمت تزويده ب 72.5 من الجلوكوز و71 من ألبومين المصل البشري وتم تحويله إلى محقنة(محاقن) غير بلاستيكية مولدة للاحترار تحت الظروف المعقمة).
5 ومن المنتج النهائي؛ يمكن أن يتم نقل 3-2 مل إلى زجاجة لاختبار مراقبة الجودة quality control (QC) ويفضل أن يتم نقل من 8 إلى 12 مل بداخل كل محقنة بلاستيكية غير مسببة hall معقمة تحت ظروف معقمة. يتم بعد ذلك تغليف المحقنة التي لها قبة مغلقة لكي يتم منع التلوث aang ذلك يتم التغليف في صورة منفردة معقمة باستخدام كيس بلاستيكي مزود بسحاب وكيس نقل للنقل إلى وحدة الأشعة التداخلية الخاصة بالإعطاء إلى الخاضع.
0 تم توضيح صورة عاملة لعملية التصنيع في الأشكال. قابلية تصنيع منتج معلق الخلية تم توضيح النتائج بصورة جيدة في المثال رقم 2 والذي تم توضيحه في ال 12 شهراً الأول يلي ذلك إعطاء معلقة الخلية من الاختراع ويقوم الخاضعين بتحقيق الاستجابة الإكلينيكية ذات الصلة كما هو موضح من خلال تقليل التصنيف الخاص بفئة رذرفورد من 3-1 (الدرجة 1 (29) )£64( من
5 الخاضعين) (Ally تمت مقارنتها بصورة جيدة مع مجموعة die المقارنة والتي يكون بها فقط 2 )713( من الخاضعين قد تم استجابتهم).
وعند الزيارة الأساسية؛ فقد عرض 25 )756( من الخاضعين في مجموعة المعالجة الذين تلقوا تسريب من معلق الخلية من الاختراع وجود تقرحات إقفاريه غير قابلة للالتثام non-healing ischemic ulcers ولكن وبعد الإعطاء لمدة 12 شهر بعد زيارات المتابعة فإن 18 خاضعاً (775) قد عرضو عدم وجود تقرحات (مع بتر رئيسي major amputation واحد) في 4 خاضعاً 7060( من الخاضعين قد أوضحوا زيادة في ضغط الأكسجين Transcutaneous oxygen all je (TcPO2) pressure > مم زثبق والتي تكون عبارة عن تنب يمكن الاعتماد عليه في الالتثام. تم اختبار تكون الأوعية عند الشهر 6 بعد إعطاء معلق الخلية من الاختراع الحالي. وفي الخاضعين الذين تمت معالجتهم بمعلق الخلية من الاختراع فتم تم عرض التكون الوعائي 78800108606515 في 6 إ) خاضعاً: 7 8 و9 من الخاضعين في مجموعات منخفضة ومتوسطة وعالية الجرعة؛ 0 على الترتيب. لم يتعرض أي مريض إلى تفاعلات جانبية خطيرة غير متوقعة Suspected Unexpected Serious (SUSAR) Adverse Reaction أثناء المعالجة وأثناء المتابعة. تم الأخذ في الاعتبار ADE من التأثيرات الجانبية (AEs) Adverse events بحيث ترتبط مع مسار الإعطاء وكان بهم تفاعلات موضعية ضيعيفة للحقن. لم يوجد أي من الخاضعين قد أوقف التجرية قبل انتهائها نتيجة وجود 5 التأثير الجانبي (AE) Adverse event ولم يتعرض أي من الخاضعين للتأثير الجانبي في معلق الخلية الخاص بالاختراع. لم يحدث أي التأثيرات الجانبية الخطيرة serious adverse event (SAEs) قبل إعطاء ريكسيميلوسيل Rexmyelocel-T T— وليس هنا أي التأثير الجانبي الخطير قد حدث أثناء 24 ساعة بعد الإعطاء الخاص بريكسيميلوسيل-7. هناك إجمالي من 41 التأثيرات الجانبية الخطيرة قد تم تسجيله من خلال 23 خاضع أثناء فترة المتابعة )12 شخص)؛ و17 0 التأثيرات الجانبية الخطيرة (تسعة من الخاضعين) في مجموعة عينة المقارنة و24 التأثيرات الجانبية الخطيرة )14 خاضع) في مجموعات dallas من ربكسيميلوسيل -1: مع جرعة منخفضة 1 x 0: مع جرعة منخفضة من 1 X 10 3 خلايا أحادية النواة مشتقة من نخاع العظام: لأربعة خاضعين؛ وعند أعلى جرعة من 1 WILY 10 X أحادية النواة مشتقة من نخاع العظام من ستة خاضعين. وقد مات اثنين من الخاضعين من المرض القلبي الوعائي .cardiovascular disease Jilly 5 فمن الواضح بالتالي أن معلق الخلية من الاختراع يكون مفيداً بصفة خاصة في معالجة مرض الشريان المحيطي الطرفي السفلي؛ ويفضل مرض الشريان المحيطي؛ ويفضل أكثر الإقفار
الطرفي الحرج باستخدام مرض السكري في المرضى الذين ليس لديهم خيارات خاصة بإعادة المعالجة الوعائية باستخدام التحول الجراحي أو الطرق بداخل الأوعية.
وبالتالي» تشير سمة إضافية من الاختراع الحالي إلى معلق خلية ومحقنة مسبقة الملء أو تركيبة صيدلانية كما تم وصف ذلك في جزءِ 'منتج معلق "AAD ويتم استخدام المعلق في معالجة أو
تخفيف مرض الشريان المحيطي الطرفي المنخفض ويفضل في خاضع بشري.
يفضل أن يكون مرض الشريان المحيطي الطرفي السفلي عبارة عن إقفار أطراف حرج.
يفضل أكثر أن يكون معلق الخلية؛ والمحقنة مسبقة الملء أو التركيبة الصيدلانية التي تم تعريفها في جزء md) معلق الخلية') قد تم استخدامه في طريقة معالجة مرض الشريان المحيطي للطرف السفلي ويفضل في مرض إقفار الطرف الحرج وذلك من خلال الإعطاء بداخل الشريان حيث يصل
ضغط تدفق الدم المنخفض إلى 4 جوي وبتم الحصول عليه من خلال تثبيت بالون قابل للنفخ بالقرب من آفة الانسداد الوعائي عند الفخذ البعيد أو الشريان المأبضي وتسريب معلق الخلية المذكور بداخل الشريان. الأمثلة المثال رقم 1: المواد والطرق
5 1. معلق الخلية وطريقة إنتاجه. ولكي يتم توضح الاختراع الحالي؛ فقد تم استخدام معلق الخلية طبقاً للاختراع الحالي في الأمثلة التالية وقد تم تحضيره من معلق خلية ذاتي من خلايا أحادية النواة مشتقة من نخاع العظام مكون من العديد من أنواع الخلايا الناضجة وأيضاً الخلايا المكونة للدم الأصلية. كانت صيغة المنتج النهائي معتمدة على عدد من خلايا الدم البيضاء القابلة للنمو الموجودة.
تم توضيح خصائص Glas الخلية من الاختراع باستخدام عدات الخلايا الإجمالية وعدات Wal التفاضلية باستخدام وسيلة عد الخلايا من الدم Horiba Medical) ,60 26018 «23). تم تحديد النسب dial للخلايا السليفة خلايا الدم البيضاء WIA) مجموعة من التمايز 45+) والتي تم العبير عنها في مستقبل عامل الانتقال من عامل مشتق من الخلية السدوية 1 من مستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4 أو العامل المكون للأوعية الدموية خلايا الدم sland) من المستقبل 2 من
5 عامل النمو البطاني الوعائي والذي تم تحديدها بامستخدام وسيقة قياس تدفق الخلية ) MACS -(Quant Analyzer 10, Miltenyi Biotec
إن تركيز LDA الدم البيبضاء»؛ ونسبة الخلايا اللمفاوية والخلايا وحيدات النواة والخلايا الحبيبية وخلايا الإنذار وخلايا الدم البيضاء الإجمالية المعبرة عن مستقبل كيموكين C-X-C من النوع 4 أو مستقبل عامل النمو البطاني الوعائي 2 من 32 دفعة إكلينيكية قد تم توضيحها في الجدول رقم 6. الجدول 6 تركيبة الخلية من 32 دفعة إكلينيكية من CMMOo/ICPD/2008 نوع الخلية الطريقة/ مرقم سطح Lal عدد الخلايا/ النسبة الكريات البيضاء (خلايا الدم وسيلة حساب عد الخلية x1 - 10% x1 البيضاء) الآلية 10° أخلاما لتم am en jam 7 و يت ال fb a, Arr in i oa a a Ce mi ow الآلية 5.6 10x 8 annem رنسلة حصا عد القية 24 0 الآلية x5.1 10% لاله لاد علس Ce الآلية x2.0 10 ou 7 7 يلاحب me 7 70 الآلية x71 710 ea om م 2 الآلية x7.1 710 iowa ماد تس ع2 7 2 الآلية x6.1 10"
mam mmm pa لقلا To is الحبيبية 8 510 ee pa . قيار a لعل 14 + 70 2 لمجموعة من التمايز 34+ x54 710 لقا Eee قر التق a لصيل 4 I CXC من النوع 4 والتي تكون كيموكين CXC من النوع 103.2" عبارة عن مرقم انتقال عامل Ede 4+ من الخلية السدوية 1. ا ed الج جد مال قار التاق I 10 Ta كيموكين C-X-C من النوع 4 والتي +CD34+/CxCR4 1 » 10" تكون عبارة عن مرقم انتقال عامل مشتق من الخلية السدوية 1. a التي كبر عن حل كيان 3 i لسع 70 10 مستقبل عامل النمو البطاني الوعائي عامل النمو البطاني الوعائي 2.5* 10 7 2 لعامل التكوين الوعائي عامل 2 sail البطاني الوعائي الاختصارات: ACC = وسيلة حساب عدد الخلية الآلية؛ WBC = خلايا الدم البيضاء. تم توضيح البيانات في شكل العدد الأدنى إلى العدد الأعلى. تم تصنيع معلق الخلايا من الاختراع تحت ظروف جي إم بي 0140. تم إجراء كل خطوات العملية في الفئة ب من الغرفة النظيمة حيث يكون هناك عمليات معالجة شبه مقفلة (ارتباط متصاعد أو سمات ربط بالقفل) ومعالجات مفتوحة تم إجراؤها في الفئة ABSC وبصورة مختصرة» فإن نخاع العظم قد تم ترشيحه بصورة مطهرة لكي تتم إزالة أجزاء النخاع يلي ذلك خطوة تقليل الحجم الآلي للحصول على حجم صغير بصورة كافية للمعالجة الإضافية.
وبعد ells فإن الخلايا تخضع للطرد المركزي بتدريج الكثافة من الفيكول آلي بما في ذلك خطوات
الغسل. تم ترشيح المنتج مما ينتج عنه 50 مل من WIS ha أحادية النواة مشتقة من نخاع العظام
والذي يكون عبارة عن مادة عقار.
تم إغلاق عملية التصنيع الخاصة بالمادة باستثناء الروابط المتصاعدة وروابط قفل «ع10. تم إجراء خطوات فصل الخلية Cell separation steps في نظام آلي automated system لضمان المعالجة
القياسية الخاصة بالعملية.
تم توفير مخطط تدفق خاص بعملية التصنيع من معلق الخلية من الاختراع في الشكل رقم 1.
بالإضافة إلى ذلك فإن عملية التصنع يتم وصفها بالتفصيل فيما يلي:
- الخطوة 0 يتم إجراء تجميع نخاع العظم بواسطة عمليات السفط المتكررة؛ من القمة الحرقفية
0 الخلفية للخاضع تحت عملية تخدير موضعي وباستخدام محاقن سعة 5 مل مقترنة مع وسيلة سفط نخاع العظم. تم تجميع نواتج السفط نخاع العظم في 600 مل من الكيس الخاص بالناقل من محلول ديكستيروز سيتيارات مضاد للتخثر أ A) anticoagulant citrate dextrose solution A (ACD-A وحتى حجم يصل إلى 350-250 مل. يتم تعبئة كيس النقل نخاع العظم طبقاً للتعليمات ويتم تحضيره للشضحن. يتم شضحن نخاع العظم عند درجة حرارة الغرفة (210-15 درجة مثوية)
5 بالنسبة ل 86060 Rex في الشحن الخاص بالمعالجة الفورية. - الخطوة 1 الترشيح-يتم ترشيح نخاع العظم ويفضل بواسطة الجاذبية خلال مرشح حطي سعة 0 ميكرو لتر لكي تتم A) أي شظايا عظام صغيرة (Sly يتم aie التخثر أثناء الخطوات التالية: وبعد الترشيح؛ تم تجميع العينة في اختبارات العملية وتم وزن كيس التجميع مع الكتلة التي تم تحويلها إلى الحجم والتي توفر حجم مدخل في الإعدادات الخاصة بالمعالجة الخلوية.
0 - الخطوة 2 اختزال الحجم من SmartRedux - يتم اختزال حجم نخاع العظم الأولي من حوالي 0 مل إلى 50 مل باستخدام برنامج SmartRedux على جهاز 2.0 Sepax والذي يرتبط مع الإزالة المعقمة عن طريق طقم (05-490.1) SmartRedux وذلك بإتباع تعليمات المصنع. إن تلك الخطوة التي تشفتمل على إزالة البلازما وخلية الدم الحمراء ينتج عنها 50 مل من منتج التغليف المزغب وأيضاً تسهم في النقاء الخاص بالمنتج النهائي. إن خطوة اختزال الحجم يتم إجراؤها مرة
5 واحدة أو مرتين وذلك اعتماداً على حجم مادة البدء المراد معالجتها. تمت معالجة عينات نخاع العظم بأحجام تصل إلى حوالي 220 مل في دورة منفردة وتمت معالجة عينات من العديد من
0 مل في اثنين من الدورات باستخدام نفس الطقم. بالنسبة لكل من اختزال الحجم في الدورة
المنفردة والمزدوجة والحجم النهائي قد تم ضبطه عند 50 مل.
- الخطوتين 3 -4: تدريج كثافة [لم16810-تم ربط كيس العينة الداخلية المعقم المنتمل على
نخاع العظم تم تقليل حجمه مع طقم Neatcell (05-900.2) وتمت المعالجة بامستخدام برنامج NeatCell 5 على جهاز 2.0 <0م56؛ يلي ذلك تعليمات التصنيع. تتكون تلك الخطوات من الطرد
المركزي الخاص بالكثافة على فيكول 1077 يلي ذلك اثنين من مرات الغسل من معلق خلية أحادية
النواة باستخدام محلول الغسل المكون من 72.5 أو 74 من ألبومين المصل البشري في المحلول
الملحي (لكل من الدرجة الصيدلانية). يتم تجميع 45 مل من منتج خلية أحادية النواة مشتقة من
نخاغ العظام في كيس الإخراج وتتم إزالة المكونات الأخرى في كيس النفايات.
0 - الخطوة 5 ترشيح خلية أحادية النواة مشتقة من نخاغ العظام-يتم تجميع خلية أحادية النواة مشتقة من نخاغ العظام من كيس المنتج باستخدام محقنة 50 مل وبتم الترشيح ويفضل أن يتم من خلال مرشح 50 ميكرو متر في أنبوب فالكون معقم. يتم سفط كيس المنتج باستخدام محلول الغسل ويتم الترشيح لكي يتم تحسين استخلاص الخلية أحادية النواة. يتم ضبط الحجم النهائي لمادة عقار خلية أحادية النواة مشتقة من نخاغ العظام عند 50 مل.
2. اختيار مجموعة الدراسة تم تسجيل عدد إجمالي من 60 bald لهم الإقفار الطرفي الحرج روثرفورد بدرجة ]]( الفئة 5) ومرض السكري وغير قادرين على التعرض لعملية sale) المعالجة الوعائية الجراحية أو عملية إعادة التوعي للأوعية الداخلية endovascular revascularization (50 ذكر (783) و 10 إناث (717)) مع متوسط عمر من 64.3 (+ 9.5 ) ( في مدى : 80-46 سنة) وتم تحديدهم بصورة
0 عشوائية في نسب من 1: 1: 1 :1 لكي يتم استقبال إعطاء منفرد من خلية المعلقة للاختراع (عند واحدة من ثلاثة مستويات من الجرعة؛ 1 x 10 8؛ 5 x 10 8 أو 1 x 10 من خلايا أحادية النواة die من نخاع العظام ؛ و15 حاج لكل مجموعة معالجة) بالإضافة إلى مقياس العناية الخاص بواحدة أو كثر من الذين تمت معالجتهم طبقاً لمقياس الرعاية بمفرده. (15 خاضع). تم إعطاء Glas الخلية من الاختراع من خلال الشريان في تسريب منفرد. وبالنسبة لتلك التجرية؛ فإن
5 التقسيم العشوائي الطبقي يتم وضعه وبتم إنشاء طبقات خاصة بتصنيف روترفورد الإقفار الطرفي الحرج من الدرجة IT و11 (الفئات 4 و5) مع عدم وجود خيارات خاصة بالتوعي الداخلي أو إعادة
Transatlantic Inter-Society Consensus Document on Management ل lula التوعي الجراحي
Peripheral Arterial Disease 08. في حالة الإقفار الطرفي الحرج التي تكون معروضة في كلا
الرجلين» يتم الإعطاء بالتسريب إلى الرجل التي تم تحديدها بواسطة عملية الفحص للمرض المتقدم/
المرض الشديد بشط أن تكون الرجل لم يتم تعرضها لعملية بتر جراحي بالفعل في أصابع القدم أو
5 أعلى من ذلك. يتم تقييم الخاضعين الداخلية في التجرية عند الزيارة الأساسية (الزيارة رقم 1) ولمدة
4 ساعة والأشهر التالية من 1 3 6؛ و9 و12 بعد إعطاء ريكسميولوسيل-1 (الزيارات 3 4؛
5 ؛ 7 و8 على الترتيب). لا يكون من المطلوب من الخاضعين الذين تم تحديدهم لمجموعة
المقارنة أن يتم عرضهم لما يزيد عن زيارتين و3.
3. معايير الإدراج 0 يكون الخاضعين مؤهلين للإدراج في التجرية إذا انطبقت عليهم معايير الإدراج التالية:
1 خاضعين من كل من الجنسين بعمر >18 و <80 عاماً.
2. المرضى الذين استقبلوا معالجة لمرض السكري من النوع 1 أو النوع ]1.
3. الإقفار الطرفي الحرج من الدرجة IT و11 (الفئة 4 و5) طبقاً لروثرفورد.
4 عدم القدرة على dalled) الوعائية الجراحية أو المعالجة بإعادة التوعي داخل الأوعية كما تمت التوصية Sih بواسطة .Trans-Atlantic Inter-Society Consensus II
5. فترة الحياة المتوقعة > عامان
6. لا يكون هناك توقع بتر كبير في الطرف المارد معالجة في مدة 12 شضهاً بعد الإدراج في
الدراسة.
7. وجود متغيرات كيميائية طبيعية يتم تحديدها بواسطة كربات الدم البيضاء > 3000 Jef 0 والعدلات > 1500 /مل؛ الصفائح الدموية > 100000/ مم3 ABU أمين الأسبارتات aspartate
X alanine aminotransferase (ALT) > 2.5 ناقلة أمين الألانين | (AST) aminotransferase
المدى القياسي؛ مع كرياتينين creatinine > 2.5 مجم/الديسي لتر.
8. يقوم الخاضعين بتوفير موافقة خطية خاصة بالمشاركة في التجرية.
9. يجب أن يكون للنساء اللواتي لديهم احتمالية للحمل نتائج سلبية في اختبار الحمل بعد 5 الإجراءات القياسية لكل واحدة المستشفى وبتم إجراء ذلك عند وقت تضمينهم في التجرية ig
توجيههم بالتزام وسيلة ate الحمل الطبيعية أثناء فترة التجرية.
4 معايير الإدراج يتم استثناء الخاضعين من المشاركة في التجرية لم تنطبق عليهم أي من معايير الإدراج التالية: lal 1. إذا كان لديهم تاريخ من مرض ورمي أو مرض دموي (أمراض نخاعية تكائرية myeloproliferative disease 5 أو سرطان الدم leukemia أو متلازمة خلل التنسج التخاعي (myelodysplastic syndrome . 2. الخاضعين الذين لديهم ارتفاع في ضغط الدم hypertension غير المنتظم (والذي يتم تحديده بأنه ضغط دم > 180 مم زثبق / 110 مم زثبق في أكثر م مناسبة). 3 أنواع Jia القلب heart failure المتعددة .(New York Heart Association Stage IV) 0 4. المرضى الذين لديهم عدم انتظام في ضريات الدم الخبيثة malignant ventricular arrhythmias أو الذبحة الصدرية غير المستقرة .unstable angina 5. المرضى الذين تم تشخيص بأن بهم جلطة الأوردة العميقة deep vein thrombosis في مدة ثلاثة أشهر قبل الفحص. 6.». العدوى الفعالة أو الغرغرينا gangrene التي توجد في نفس اليوم من الإعطاء الخاص بركساميلوسيل-7 الذي تم التخطيط للإعطاء فيه. 7. العلاجات المصاحبة بما في ذلك العلاج بالأكسجي تحت الضغط hyperbaric oxygen therapy والمواد الفعالة للأوعية vasoactive substances ومتبطات سيكلوأوك#سيجيناز-2 .(Cox-1I) cyclooxygenase-2 8. مؤشر كتلة الجسم 40 > Body Mass Index (BMI) كجم 2. 9. المرضى الذين تم بهم تشخيص إدمان الكحول alcoholism في زمن الإدراج. Proliferative retinopathy (AE LEN (Put .0 1. المرض المصاحب الذي يؤدي إلى نقص توقع الحياة إلى > عام واحد. 2. والتهاب الكبد الوبائي Hepatitis 3 B أو التهاب الكبد الويائي Hepatitis © C 3. الأشخاص الذين كانوا غير راغبين أو غير قادرين على الالتزام بكافة جوانب البروتوكول. 5 14. فشل القلب أو جزء الطرد ل > 730.
5. السكتة الدماغية Stroke أو احتشاء عضلة القلب myocardial infarction في الأشهر الثلاثة التي تسبق HL الفحص. 6. فقر الدم Anemia (الهيموجلويين hemoglobin >10 جم / ديسي لتر). 7. نقص الكريات البيضاء Leukopenia 5 18. قلة الصفائح الدموية Thrombocytopenia
9. المرأة الحامل أو المرأة في سن الإنجاب والتي لا تستخدم وسائل منع حمل كافية. 0. الخاضعين الذين يشاركون في التجربة الإكلينيكية في مدى ثلاثة أشهر قبل الفحص للتجربة المذكورة. 5. المرضى الذين تتم إزالتهم من الدراسة
0 يمكن إزالة الخاضعين من dual لأي من الأسباب التالية: ٠ الففل في تحقيق التركيز النهائي الخاص بمعلق الخلية بالاعتماد على النتائج عند التوزيع العشوائي. في تلك الحالة فإن بي آى PI يجب أن يقرر ما إذا كانت المنتج قد تم إعطاؤه. » وجود تأثيرات جانبية مصلية بين فترة الموافقة الخطية على تاريخ الإعطاء الذي تم التخطيط له. ٠ الإخلال الكبير بالبروتوكول. التوزيع العشوائي التالي للخاضعين الذين فشلوا في الوفاء بمعايير
الدخول في البروتوكول أو الذين لم يلتزموا بمتطلبات البروتكول والذين استمروا في المشاركة والذين لديهم خطوة غير مقبولة بالنسبة لصحة المرضى. ٠ الخاضع الذي تعرض لتأثير جانبي أو حالة المعالجة المسبقة التي تتطلب الإنهاء المبكر بسبب أن الاستمرار في التجربة يفرض مخاطرة غير مقبولة على صحة المريض أو أن الخاضع ليس لديه النية في الاستمرار بسبب التأثير الجانبي أو حالة معالجة مسبقة.
٠ 0 الانسحاب الطوعي. عند رغبة الخاضع (أو الخاضع المقبول من الناحية القانونية) في الانسحاب من الدراسة. ٠ تم فقده أثناء المتابعة المريض الذي لا يعود إلى العيادة الإكلينيكية وقد فشلت محاولات الاتصال به. ويتم توثيق محاولات الاتصال anally إذا انسحب المربض من Dall فإن كل الإجراءات التي تم وضعها خاصة بزيارة الإنهاء المبكرة يتم إجراؤهاء إذا أمكن.
5 وطبقاً للممارسة الإكلينيكية الجيدة فإن كل الخاضعين الذين انسحبوا من التجرية يتم التوصية لهم بمعالجة بديلة. إذا كان الانسحاب نتيجة حدوث تأثيرات جانبية كبيرة فإن الخاضعين يمكن أن تتم
مراقبتهم بواسطة الفاحص أو لكي يتم الإكمال؛ أي؛ حتى يتم حل تأثير جانبي أو حتى يتم تحديد الحالة المستمرة. يتم تسجيل السبب الرئيسي للتوقف عند التجرية في نموذج تقرير الحالة Case .(CRF) Report Form 6. المعالجات التي يتم إعطاؤها منتج الفحص
وتحت التخدير الموضعي., والمهدئات يكون حجم نخاع العظم (من 420-90 مل) وتم تجميعه بواسطة عمليات سفط تتابعية من العرف الحرقفي. تم تجميع نخاع العظم في كيس ناقل transfer bag يشتمل على محلول محلول سترات ديكستيروز أ في شكل مضاد التخثر في نسبة حجمية من 1 (انظر النقطة 1 أعلاه).
0 تم الحصول على معلق من WA أحادية النواة مشتقة من نخاع العظام بواسطة الطرد المركزي المتدرج الكثافة density gradient centrifugation بدون تعديلات أو بإضافة أي منتج مشابه لكي يتم التأثير على الوظائف البيولوجية. يتم إعطاء معلق الخلية عند جرعة منفردة من WDA 10 ٠ أحادية النواة مشتقة من نخاع العظام.
x5 * 5 10 " خلايا أحادية النواة مشتقة من نخاع العظام. 107 »1 خلايا أحادية النواة مشتقة من نخاع العظام. يتم إعطاء معلق الخلية باستخدام قثطرة شريانية داخلية. تمت المعالجة بالكانيولا للشرايين intra- arterial catheter الخاصة بالطرف المستهدف من خلال المسار عبر الفخذ وباستخدام قثطرة سلكية ببالون wire catheter balloon (تمت تهيئتها بالنسبة للقطر المأبضي (popliteal diameter
0 ولتي يتم تقديمها بصورة بعيدة ما أمكن في الحالات أسفل الركبة knee وبتم تثبيتها بالقرب من lay الوعائية الانسدادية occlusive vascular lesions وبصورة طبيعية عند الجزءٍ الفخذي البعيد distal femoral أو المأبضي من الشريان popliteal artery وعند تلك النقطة؛ فإن البالون يتم نفخه لكي تتم إعاقة الدم من التدفق ويتم تسريب معلق الخلية من الاختراع ببطء لمدة ثلاثة دقائق (dR) وبعد الإعطاء؛ فإن البالون يتم تفريغ النخف الخاص به وتم استعادة تدفق الدم تدريجياً.
5 .تم إجراء الإعطاء الخاص بمعلق الخلية من الاختراع بين ثلاثة خمسة ساعات بعد تجميع نخاع العظم بواسطة مختص الأوعية (مختص Za ay التداخلية interventional radiologist أو جراح
الأوعية (vascular surgeon ويتم توصيلها بصورة مباشرة إلى وحدة العلاج الخلوي cell therapy -unit
تمت معالجة كل الخاضعين بإتباع معايير الرعاية القياسية الخاصة بأمراض الأوعية الدموية الشديدة والتصلب كما تم وصف ذلك بواسطة Trans-Atlantic Inter-Society Consensus II
.treatment guidelines 5
7. التغيير في تصنيف رذرفورد
يشتمل إقفار الطرف الحرج على المرضى الذي بهم ألم في الراحة الطرفية السفلى أو التقرحات المتعلقة بالإقفار أو الغرغربنا الثانوية إلى الشديدة التي تم توضيحها في تدفق الدم في الأطراف sd والتي تستمر لأكثر من أسبوعين. تم إجراء التصنيف الخاص بمرض الشريان المحيطي
0 للخاضيعين من خلال التجربة ومن خلال مختصي الأوعية باستخدام درجات روثرفورد خلاف الفئات وذلك بسبب أن اختبار تمرين جهاز المشي لا تنفيذه وبالتالي من غير الممكن أن يتم التمييز بصورة جيدة بين العرج المتقطع المتوسط والمعتدل والشديد. تم تعريف عرج متقطع (الدرجة J الفئات 3-1) في شكل ألم عضلي شديد extremity muscle pain أو عدم راحة أو ضعف والذي يتم حثه بواسطة التمارين (يتم إنتاجه من خلال نشاط المشي
أو النشاط العضلي) وبتم تركه بصورة مؤقتة بواسطة توقف الحركة على عكس الألم عند الراحة والذي يستمر في المرضى المصابين بالإقفار الطرفي الحرج. تم استخدام درجة رذرفورد عند صفر لكي يتم تحديد الخاضعين الذين ليس لديهم أية أعراض أو بالكاد لديهم إحساس بالبرودة أو لديهم علامات إكلينيكية أو أمراض انسدادية أو تناقض نبض متواضع.
0 يتم تضمين القرحة الإقفارية غير القابلة للعلاج والتي يكون بها تسريب شرياني غير كافي في الطرف السفلي لكي يتم دعم الاستجابة الالتهابية inflammatory response المطلوية لتضميد الجرح. وفي ارتباط مع ذلك»؛ هناك دائماً ألفة في الراحة وهناك دليل هام خاص بالإقفار التبادلي المشتت diffuse pedal ischemia (الإقفار الطرفي الحرج روثرفورد الدرجة (I-IV فئات 6-5). أوضح ألم الراحة الإقفاري Ischemic rest pain وجود إقفار تبادلي مشتت (الدرجة 1-17 الفئات
5 6-4) والتي لا يمكن التحكم فيها بواسطة التخدير. يكون الألم موضييهاً في مقدمة القدم وفي لأسابيع أو بالقرب من الآفات الإقفارية البؤرية focal ischemic lesions يتم جعل المرض في
صورته feud) من خلال رفع الطرف. ويرتبط نقص التروية المنتشر عند الضغط على القدم مع ألم
البطانية الإقفاري مع ضغط الكاحل >40 مم )525( ومؤشر الكاحل العضد <0.8.
يتم تصنيف المريض بالاعتماد على وجود ألم الراحة الإقفاري (مع أو بدون تقرحات إقفاريه غير
قابلة للالتئام)؛ ally إقفاري في dl all بما في ذلك AY) الناتج عن التمارين أو المرض الذي ليس
له أعراض. وليك يتم تصنيف الخاضعين فإن الأعراض الإكلينيكية يتم دمجها مع دلائل خاصة
بالأعراض الخاصة بإقفار القدم عند الضغط عليها خلال قياس مؤشر الكاحل العضد (إذا تم
الاختبار المعتمد عليه لذلك).
تم تقييم التغيير في تصنيف رذرفورد من القيمة الأساسية حتى الأشهر 1؛ 3 و6 و9 و12.
تم تحديد التجرية الإكلينيكية في شكل التحسين في درجة روثرفورد الفردية (الفئة) من القيمة 0 الأساسية. تم تحديد التحسن ذي الصلة الإكلينيكية ف شكل التغير في تصنيف رذرفورد للإقفار
الطرفي الحرج في الفئة 4 أو 5 للفئة عرج متقطع أو أقل vey 3 أو 6 أو 9 أو 12 شهاً بعد
إعطاء ركسيميلوسيل-1.
8. التغيير في عدد التقرحات وحجم القرحة.
كان حجم القرحة الأكبر في الطرف السفلي المستهدف وأيضاً العدد الإجمالي من التقرحات في كل 5 رجل قد تم تسجيله في نموذج تقرير الحالة. تم اختبار التئام التقرحات والتغييرات في حجم القرحة
من القيمة الأساسية حتى الأشهر 1 3 و6 و9و12.
9. تَكَوْن الأوعيّة
تم اختبار تكون الأوعية عند الشهر 6 بعد إعطاء معلقة الخلية من الاختراع من خلال تقييم اللجنة
المشكلة بواسطة اثنين من أخصائي الأشعة التداخلية الذين يقومون بإجراء تقييم مستقل ومجهول 0 من خلال مقارنة المخطط الوعائي عند القيمة الأساسية الذي تم إجراؤه قبل المعالجة مع المخطط
الوعائي الذي يتم بعد 6 أشهر من إعطاء ربكسيميلوسيل T=
يتم الأخذ في الاعتبار لتكوين الأوعية إذا ang النمو الطولي في الشرايين من قبل ووجد النمو
العرضي في الشرايين القبلية الذي قد تمت زيادته في عدد الأوعية الدموية الجانبية مع الزيادة في
عدد الأوعية الدموية الجانبية وزيادة في الحجم و/أو الكثافة الخاصة بالأوعية الدموية الجانبية مع 5 الزيادة في الحجم و/أو الكثافة EON EG بالأوعية المأبضية الداخلية infra-popliteal vessels
الأساسية.
0. عمليات البتر الرئيسية Major amputations (الطرف المستهدف). يتم الأخذ في الاعتبار لعملية البتر الرئيسية في شكل عملية بتر خاصة بالطرف المنخفض أعلاه الخاص بالكاحل .ankle 1. التغيير في مؤشر الكاحل العضد يتم تعريف مؤشر الكاحل العضد بأنه نسبة ضغط الدم الانقباضي المقاس عند الكاحل إلى ذلك المقاس في الشريان العضدي. يتم توجيه الخاضع بأن يستريح في وضع الاستلقاء لمدة 5 إلى 10 دقائق» مع الراحة ووضع القدم والكعبين على دعامة في الغرفة وعند درجة حرارة من 19 درجة مثوية -22 درجة مثوية. تم اختيار الضغط عند الكفة المناسبة للدم بحيث يتم قياس ضغط الدم في كل من الكاحل والذراع. وبالنسبة لكل من الكاحل والذراع فإن الكفة يتم وضعها حول الطرف 0 باستخدام طريقة اللف على التوالي. تم استخدام مسبار Doppler probe [lisa من 8 إلى 10 ميجا هيرتز وتم وضع هلام الدويلر Doppler gel على المستشعر «sensor تم أيضاً استخدام مسبار الدويلر لكي يتم اكتشاف تدفق الدم العمضدي brachial blood flow أثناء قياس ضغط الذراع arm ©08501. يتم قياس ضغوط الدم الانقباضية brachial systolic pressures في العمضد لكل من لأذرع وفي عظام الساق الخلفية posterior tibial وعظام الساق الأمامية anterior tibial بالنسبة للضغط الانقباضي من الطرف محل الاهتمام. إن التغيير في مؤشر الكاحل العضد من خط القاعدة إلى الأشهر من 1 و3 و9 و12 قد تم تسجيله في الخاضعين والذين يمكن أن يتم لديهم اختبار ضغط الكاحل. all .2 في ضغط الأكسجين عبر الجلد إن التأكسج عبر الجلد وضغط الأكسجين عبر الجلد يكون عبارة عن مقياس غير شامل موضعي 0 خاص بعكس مقدار الأكسجين الذي به تشتيت من المستشعرات خلال البشرة. تم قياس ضغط الأكسجين عبر الجلد باستخدام .(Radiometer Medical ApS, Copenhagen, Denmark)TCM3 تم تقييم التغيير في ضغط الأكسجين عبر الجلد من القيمة الأساسية إلى الأشهر 9565351 و12. 3. تعريفات التأثيرات الجانبية 5 .تم تعريف التأثيرات الجانبية في شكل أي تعبير غير مطلوب يحدث للخاضع أثناء التجرية سواء أكان هناك مرتبطاً أو غير مرتبط بالمنتج الخاص بالفحص. يمكن أن يكون التأثير الجانبي بالفعل
— 5 5 — عبارة عن علامة غير Sua وغير مقصودة (بما في ذلك al any ١ المعملي غير الطبيعي) 3 مع الأعرض أو مع المرض المرتبط بصورة مؤقتة مع استخدام المنتج الطبي (الخاص بالتفشخيص) سواء أكان ذلك أو لم يكن مرتبطا مع المنتج الطبي (القابل للفحص). وبشمل ذلك تفاقم الحالات الموجودة مسبقاً أو داخل المرض الحالى أو التفاعل أو البطء الكبير الخاص بالتوضيحات تحت عمليات الفحص والتي لا يتم تسجيلها في مكان AT في نموذج تقرر الحالة تحت تقييمات الفالية الخاصة. إن التأرجحات المتوقعة فيما يتعلق بالحالات الموجودة مسبقاً والتي تشتمل على أن المرض تحت الدراسة لا يمثل تفاقماً إكلينيكياً كبيراً أو تطور الحالة للأسواً والذي لا يتم اعتباره بأنه التأثيرات الجانبية. تم توثيق البيانات التالية لكل التأثير الجانبي: ٠ 0 وصف حالة الأعراض . النتصيف "خطير" أو "غير خطير". ٠ الشدة: معتدل ( التأثير الجانبي والذي يتم تحمله بصورة أسهل بواسطة الخاضعين وعدم الراحة عند الحد الأدنى لها). ولا يتداخل مع الأنشطة اليومية)؛ مع عدم الفعالة المتوسط (يكون بالتأثير الجانبي بصورة كافية 5 غير ربح للتداخل مع الأنشطة اليومية؛ ويمكن أن يكون التداخل مطلوباً)؛ الشديد ga) التأثير الجانبي الذي يمنع القيام بالأنشطة اليومية؛ مع المعالجة أو التداخلات الأخرى والتي تكون مطلوية بصورة طبيعية). ٠ تاريخ الحدوث والزمن الخاص بالتباين (إذا كان ذلك مطبقاً). » الإجراء المتخذ: أي إجراء أو عدم الانتظام المستمر عن علاج التجرية أو الأخذ الخاص بدواء 0 مصاحب أو التحكم في المعالجة غير الدوائية الخاصة بالمعالجة في المستشفى / الاحتجاز الطويل في المستشفى (التأثير الجانبي الخطير). » العلاقة السببية. تم تشغيل كل جهاز بواسطة الفاحص لكي يتم اختبار العلاقة الخاصة بالتأثير الجانبى؛ إذا وجدت مع ربيكسميلوسيل-1. يتم تقييم السببية باستخدام فئات المتابعة. - وعلى نحو غير مشابه إذا كان هناك دليلاً صغيراً يتعلق باقتراح علاقة سببية (على سبيل 5 المثال» علاقة حدثت ولا لم تحدث في الفترة الزمنية المعتادة بعد إعطاء ررك.ميلوسيل-7 أو إذا كان هناك تفسير مناسب آخر خاصاً بالحالة (على سبيل (JU) الحالة الإكلينيكية الخاصة
بالخاضع أو المعالجات المصاحبة). وإذا كان ذلك ممكناً وقد وجد دليل يقترح احتمالية وجود علاقة سببية le) سبيل المثال؛ بسبب الحالة التي تحدث في زمن معين بعد الإعطاء الخاص بريكسميلوسيل-7» وعلى الرغم من ذلك فإنه (Sa أن تسهم ظروف أخرى في تلك الحالة (على سبيل المثال» الحالة الإكلينيكية للخاضع أو العلاجات المصاحبة الأخرى. وبصورة محتملة إذا كان هناك دليلاً يقترح وجود علاقة سببية فيكون التأثير الخاص بالعوامل الأخرى غير مؤكد أيضاً. -وعلى نحو مؤد إذا كان هناك دليلاً واضحاً باقتراح علاقة سببية فإن الإسهام المحتمل الخاص بالعوامل الأخرى يمكن استبعاده. - غير قابل للقراءة» إذا كان هناك عدم إمكانية أو وجود دليل غير كامل لإجراء القياس الإكلينيكي على العلاقة السببية. ٠ 0 النتيجة الخاصة بالحالة (غير المعروفة وغير المستخلصة والتي لم تتم استعادتها بعد تعافي العقابيل» الوفاة (مع التاريخ والسبب الذي تم (os 4. تعريف التأثيرات الجانبية الشديدة تم تعريف التأثير الجانبي الخطير ash التأثير الجانبي الذي يفي بواحدة أو أكثر من معايير 5 النتيجة الخطيرة التالية: - ينتج عنها الموت - مهددة للحياة. - تتطلب المكوث بداخل المستشفى أو المدة الطويلة للمكوث بداخل المستشفى في المستشفيات الموجودة. 0 - ينتج عنها إعاقة دائمة أو شديدة أو العجز. - وجود تشوهات خلقية أو عيوب مولود بها. - أن يكون هناك حالة طبية هامة والتي بالاعتماد على القياس العلمي والطبي يمكن أن تؤدي لإتلاف التدخل المطلوب للخاضع لمنع واحدة أو أكثر من النتائج المذكورة أعلاه. يتم اعتبار التأثير الجانبي بأنه مهدد للحياة إذا كان الخاضع يتعرض لخطورة الموت عند زمن 5 تك الحالة. لا يتم اعتباره بأنه حالة نظرية ويمكن اسن يتم استخدامها والتي يمكن أن تسبب الموت إذا كانت أكثر شدة.
Jal رقم 2: النتائج 1. التغيير في تصنيف رذرفورد يكون التغيير في فئة رذرفورد لمرض الشريان المحيطي في الخاضعين في عينة المقارنة والخاضعين الذين تمت معالجتهم بمعلق الخلية من الاختراع عند القيمة الأساسية وذلك بعد 3 و6 و9 و12 شهر وقد تم عرض ذلك في الجدول رقم 7 التالي. وعند الزيارة الأساسية؛ فإن الخاضعين في معلق الخلية من الاختراع تمت معالجتهم تم تصنيفهم بأن بهم فئة روثرفورد رقم 4 (الدرجة (IT أو فئة روثرفورد رقم 5 (الدرجة (II )(447) 20 والخاضعين ويهم 25 (756) من الخاضعين على الترتيب. أوضحت النتائج أنه وفي مدة ال 12 es الأولى فإن معظم الخاضعين تمت معالجتهم بمعلق الخلية من الاختراع وقد حققوا استجابة 0 ذات صلة كما هو موضح من خلال التحسين»؛ أي تم تقليل التصنيف الخاص بفئات رذرفورد من 3-0 (الدرجة 1 و1) في 28 )768( من الخاضعين. الجدول 7 تصنيف روترفورد عند القيمة الأساسية وعند الشهر 3؛ 6؛ 9 و12 شهراً بعد إعطاء ريكسيميلوسيل-1 5 | المقار | الأكثر المتوسطة الأعلى الخاضعين
انة x5 * 10 x5 Laas] 710 الذين تمت
x | | 103 خلها PS معالجتهم
LD 2 | أحادية النواة أحادية النواة
| 2 | أحادية النواة مشضتقةمن مشتقةمن en) 7(
as | تفاع نما
| | نخاع العظام العظام
(% <n) (7 <n) العظام (tn) القيمة الأساسية ض ض oo 8] 9 5 0 3-1 1 0 0 0 0 0
4 0" اط 71ت 7ت امم اصتريم - مم0 ذ
(56 )25 | (60)9 (53)8 (53)8 | 9 | 10 5 acd
الإجمالي 15 15 15 15 | 45
(33)15| (40)6 (do) (20)3 Of I 01
2010 | (7)1 (20)3 6 | 7 | 1 4 ذ 00
44 0 | (53)8 (40)6 (40)6 | )6 | ل 5 0 0 0 ol ررم 6
الإجمالي 14 15 15 15 | 45
)44 0 | 477 (40)6 7 | (8)1 | I 3-1
(18)8 | (0)0 (20 )3 (33)5 | )7 | 1 4 ذ os]
(36)16 | (53)8 (33)5 (20)3 | )3 | 1 5 ذ os
0 0 0 0 ازريم Vv 6
الإجمالي )12 15 15 15 45
(69)9 | (81 | 3d 57)8( 77م | 24) 57( (14)2 2 | 7 | I 4 13)2( | 6) 14( 6s (15)2 | )3 | m 5 )29( )40 | 29)12( es) gy| 6 0 0 0 ]0 Oo [0 وس pl (64)9 (77)10 | 2 | 3d 50)7( | 26) 63( as] (14)2 0| )s | 1 4 36)5( | 17)7( as) ض 11 | 4 | 23)3( 7)1( 2) 14( | 15)6( )66 الإجمالي 11 )13 14 14 41 الاختصارات: LIA = BMNCs وحيدة النواة مستقة من نخاع العظم Bone marrow-derived mononuclear cells 5 ويبعد الإعطاء بثلاثة أشضهر فقد أوضح 733)15( من الخاضعين الذين تمت معالجتهم بمعلق الخلية من الاختراع و12 (740) من الخاضعين في المجموعات ذات الجرعة المتوسطة والعالية أنهم لم يعودوا يعانون من مرض الراحة أو فقد النسيج وقد تم تصنيفهم في درجات روثرفورد الفئة 0 -3 (الدرجة 0 و1) وقد تمت زيادتهم إلى 21 (746) من الخاضعين و24 )£57( و28 )768( عند معدلات الإعطاء من 6< 9 و12 شهراً بعد الإعطاء على الترتيب. بالنسبة للخاضعين في
المجموعات المتوسطة وعالية الجرعة هناك 13 (743)؛ و15 (750) و18 (764) يكونون عند معدلات إعطاء من 9 و12 شهراً بعد الإعطاء؛ على الترتيب. تمت مقارنة ذلك بصورة جيدة مع مجموعة المقارنة والتي كان بها 0 (70)» 1 (78) و1 (78)؛ و2 (718) من الخاضيين قد تحسنت لديهم فئة روثرفورد من 3-1 (الدرجة (I بعد 3« 6» 9 و12 شهراً على الترتيب.
وقد قام أحد الخاضعين المسجلين في مجموعة عينة المقارنة بسبح الموافقة المكتوية بعد التقسيم العضوائية ومات AT نتيجة مرض قلبي وعائي قبل 6 أشهر من زيارة المتابعة؛ وقد خضع أحد المرضى لعملية بتر كبيرة قبل 6 أشهر من زيارة المتابعة وتم فقد أحد الخاضعين في المتابعة قبل الزيارة المحددة في الشهر رقم 12. وقد خضع اثنين من المرضى في مجموعة الجرعة المنخفضة من ربكسيميسوسيل T إلى البتر الرئيسي بعد ستة أشهر من الإعطاء في الطرف المستهدف.
0 ولالتالي فقد أوضح عدد Maa] من 28 خاضعاً من 45 (762) من الخاضعين في معلق الخلية من الاختراع من مجموعة المعالجة عند 12 شهاً بعد الإعطاء ومنهم 18 مريضاً )763( في مجموعة الجرعة المتوسطة ومجموعة الجرعة العالية لم يعرضوا ألم إقفاري عند gall المتبقي أو مع تقرحات إقفاريه بالمقارنة مع مجموعات عينة المقارنة 9 من 11 (782) من الخاضعين الذين تم تسجيل أن لديهم ألم في الراحة أو وجود تقرحات إقفاريه غير ملتثئمة 4 (736) من الخاضعين).
5 وعندما يتم تطبيق الملاحظة الأخيرة (باستثناء الخاضعين المصابين ببتر طرفي؛ فإن هؤلاء الخاضعين يتم اعتبارهم بأنهم غير مستجيبين)؛ مما ينتج die توضيح أنه خلال 12 شهراً بعد إعطاء معلق الخلية الخاص بالاختراع فإن الاستجابة ذات الصلة الإكلينيكية قد تم تحقيقها كما هو موضح من خلال التقليل في التصنيف الخاص بروثرفورد. الفئة من 3-0 (الدرجة 0 والدرجة (I في 28 )764( من كل الخاضعين الذين تمت معالجتهم و18 (763) في مجموعات الجرعة
0 المتوسطة والجرعة العالية (انظر الجدول رقم 8 والشكل رقم 2 والشكل رقم 3). وبعد الإعطاء بثلاثة أشهر من إعطاء ريكسيميلوسيل (T= فقد أوضح 15 خاضعاً (733) تم إعطاؤهم ريكسيميلوسيل T= منهم 12 (740) في مجموعة الجرعة المتوسطة ومجموعة الجرعة العالية أنهم لم يعودوا يعانون من ألم في الراحة أو فقد في النسيج وقد تم تصنيفهم بأنهم من الفئات 3-0 (الدرجة 0 والدرجة 1) وقد تمت زيادتهم إلى 21 )746( من الخاضعين و24 (753 من
5 الخاضعين بعد الإعطاء من 6 و9 أشهر على الترتيب لكل من المرضى الذين تمت معالجتهم. في مجموعات الجرعات المتوسطة والعالية 14 (9747 و15 )750( فقد تم pein ai بأنهم فئة
روثرفورد من 3-0 عند الشهر 6 و9 على الترتيب. تمت مقارنة ذلك بصورة جيدة مع مجموعة المقارنة والتي كان بها 0 )£0( وواحد (78) و1 (77)؛ واثنين (713) من الخاضعين قد تحسنت لديهم فئة روثرفورد من 3-1 (الدرجة 1( بعد 3 6» 9 و12 شهراً على الترتيب. الجدول 8
تصنيف روثرفورد عند القيمة الأساسية وعند الشهر 3؛ 46 9 و12 بعد إعطاء ريكسيميلوسيل-7 Ly) في ذلك مرات البتر والوفيات) -تطبيق الملاحظة الأخيرة الفئة pad عينة الجرعة الجرعة الجرعة كل 5 | المقار | المنخفضة المتوسطة العالية | الخاضعين نة x5 P10 x5 10 xl 10 7 للذين تمت خلايا خلايا خلا | OT n) | | أحادية النواة أحادية النواة أحادية النواة | a) 7( )1( |مشتقةمن مشتقة من مشتقة من العظام | العظام - العظام Ce) (tw) (a) a I 3 0 0 0 0 0 4 1 | 6) | )471( 47.7 40)6( | 20) 44( 40( (33)8 (53)8 | 9 | i 5 60)9( | 25) 56( ©( بتر 0 of 0 0 ]0 تمت | 0 | 0 0 0 | 0
| 15 15 150 15) الإجمالى (33 5 | 40)6 84016 3 | 0 3d (22)10 | 00 (20)3 6 | 7 | 1 4
Ce (44 0 | (53)8 (40)6 (40)6 | 7 | ال 5 0 | 0 0 0 | 6)1 | v 6 ثكمت | 0 | 0 0 0 | 0 وفاته | | ض (40)6 7 | (7)1 | 3 477 | 440 4 1 | 7 | 5) 33( 20)3 0 | 18)8(
Cw (36 )16 | (53)8 (33)5 (20)3 | 2 | = 5 7] 0 | 0 0 0 | (7) | v 6 ه١ ١ one وفاته | | ض
(53 )24 | 4707 (53)8 (60)9 | (7)1 | I 3-1 (18)8 | (13)2 (20)3 0) | 7 | 1 4
Cw) (29 )13 | 40)6 (27)4 (20 )2 | )4 | mn 5 000 aly ve a ا ادا هص ا yi] eas 0 0 0 0 وفاته | | ض عدي ريصي و مب ' 0 هه وص 7-7 > (58 )26 | (50)7 (60)9 (67)10 | )2 | I 3-1 ض 003 4 ل مر اقفرم (0)3 6)5( ترق 40( @p3| | mS ترم (4p رثع ed ol of Vv 6 0 0 0 ap wpe a 21 (7)1 0 0| تمت 01م وفاته عدي ريصي و مب وحيدة النواة مشتقة من نخاع العظم LIA = BMNCs الاختصارات:
أوضح الشكل رقم 4 والجدول رقم 9 أن الاستجابة الإكلينيكية ذات الصلة في معظم الخاضعين في مجموعات المعالجة من معلق الخلية من الاختراع قد تمت مقارنتهم مع مجموعة عينة المقارنة عند الإعطاء التالي وعند زيارات المتابعة. وقبل 12 شهراً بعد الإعطاء لريكسيميلوسيل T= فإن معظم الخاضعين في مجموعات ربكسيميلوسيل T= قد أوضحوا استجابة إكلينيكية بالمقارنة مجموعة عينة المقارنة: من 34 (76 7) من الخاضعين و (10؛ 13 و11 خاضعاً في مجموعات ربكسيميلوسيل T= عند الجرعة المنخفضة والمتوسطة والعالية؛ على الترتيب) في مقابل 2 )713( من الخاضعين. الجدول 9 تصنيف روثرفورد عند 3 و9 و12 شهراً بعد إعطاء ريكسيميلوسيل-7 من تطبيق الملاحظة الأخيرة عينة الجرعة الجرعة الجرعة كل المقارنة الأكثر المتوسطة الأعلى الخاضعين انخفاضاً x5 * 10 x5 710 الذين تمت a 10 ة خلايا خلايا معالجتهم en) 7( خلايا أحادية النواة أحادية النواة أحادية النواة مشتقة Oe مشتقةمن (Zn) edd da نخاع نخاع نخاع العظام العظام العظام ل 7) «n) 7) <n) 7) Taos aos 7 es (١ sew (60)9 (53)8 (67)10 3 icy a 60)27( الصيانة 87( عدم وجود 7)1( 0 0 0 0 استجابة EBB BB aay ae —
Taos 7 © en 37 ae جرعة 1 (33)5 4707) 4707 42)19 الصيانة 73( عدم وجود | 13)2( 0 0 7)1( 12( استجابة EB BBB aay ممت تب شل لل لم تت — ee 7[ رط © 00 Tem جرعة 1 (27)4 4006 5ر33 (33)I5 الصيانة 73( عدم وجود 13(2) 0 0 )7( ا استجابة EB BBB aay ae 37 7010م Gn تار 7 - جرعة 12) (20)3 (13)2 (33)5 027 الصيانة 80( عدم وجود 7)1( 0 0 0 0 استجابة EB BB aay الاختصارات: LIA = BMNCs وحيدة النواة مشتقة من نخاع العظم 2. التغيّر في عدد التقرحات في الطرف المصاب إن التغير في عدد التقرحات في الطرف المصاب قد تم عرضه في الجدول رقم 10 وفي الشكل رقم 5. وعند الزيارة الأساسية فقد تم تصنيف 25 خاضعاً (756) في مجموعات المعالجة بمعلق الخلية من الاختراع وتم وضع 9 خاضعين (760) في مجموعة die المقارنة وذل طبقاً لتصنيف روثفورد
والتي تم تقديمها مع التقرحات الخاصة بالإقفار الذي لا يلتثم. يكون لمعظم الخاضعين قرحة واحدة JL لا يكون هناك أي اختلافات رئيسية بين مجموعات المعالجة وبين مجموعات المقارنة )5< 7 و6 خاضعين في مجموعات الجرعة المنخفضة والمتوسطة والعالية من معلق الخلية الخاص بالاختراع على الترتيب وفي 6 خاضعين في مجموعة المقارنة). إن أربعة من الخاضعين 5 في مجموعة المعالجة بمعلق الخلية بالجرعة المنخفضة؛ والمتوسطة والعليا من الاختراع (1 و2 من الخاضعين على الترتيب) وخاضع واحد في مجموعة عينة المقارنة يكون بهم > 3 من التقرحات. على الرغم من أن الحجم المتوسط للقرحة عند القيمة الأساسية ف الخاضعين في مجموعة المعالجة بمعلقة الخلية من الاختراع الحالي كان أكبر من الحجم الموجود في الخاضعين في مجموعة عينة المقارنة )39.9 +23.0 مم في مقابل 26.3 + 23.5 مم في المجموعات المعالجة ومجموعات 0 عينة المقارنة من الخاضعين على الترتيب) فإن النتائج قد أظهرت أن الخاضعين الذين بهم تقرحات لم تلتثم؛ قد تم تناقص حجمها (29.7 + 13.5 (ae بينما كان حجم التقرحات المتوسط قد زاد في مجموعة die المقارنة )43.8 29.3% (ae (الجدول رقم 11). الجدول 10 التغيّر في عدد التقرحات في الطرف المصاب عينة الجرعة الجرعة الجرعة كل المقارنة الأكثر المتوسطة الأعلى الخاضعي nay 5« 107 5« 10 ” آن الذين of 10 3 خلايا أحادية خلايا أحادية نمت WDA (# en) أحادية النواة مشتقة النواة مشضتقة معالجتهم النواة مشتقة من نخاع من نخاع من نخاع _العظام العظام <n) 7( العظام <n) %( (0 ( n) ) القيمة الأساسية 1380 (63)5 6 ak 1 48807 67)6 18) 72(
— 6 7 —
2 َزْحَة 2) 5)2@ 0 1) 11( 3) 12( ك3 11)1( (12)1 (12)1 0272 4) 16( as ys 80 aay بعد ثلاثة أشهر من إعطاء ريكساميلوسيل -7
(25)2 (13)1 423% 0 25)2@ 010 5) 20( (50)4 (50 )4 aa 1 63)5( ريم 3 52( da 2 )12( 0 0 3) 33( 3) 12( > قَرْحَة 25)2( 25)2( a2) )11 4) 16( T9888 ay بعد ستة أشهر من إعطاء ريكساميلوسيل -7
(38 )9 0272 (38)3 (57)4 (33)2 423% 0 (46 )11 67)6 (50)4 (14) (67 )4 aa 1 (8 )2 0 0 )ح9 2 0 َزْحَة 2
> قَرْحَة 0 0 )12( )11 2) 8( se aay وا وه بعد تسعة أشهر من إعطاء ريكساميلوسيل T= os (0 mao "© 7 2270 (29)2 (67 )4 aa 1 38)3( ريم 9) 38( 4232 0 0 0 11)1( 4)1( > قَرْحَة 0 0 a2) 0 4)1( ل بعد اثني عشر شهراً من إعطاء ريكساميلوسيل -7
(75 )18 087 (88)7 (57)4 (33)2 423% 0 21)5 (22 )2 0 43)3 (66)4 da 1
0 0 0 0 0 Ax
— 8 6 — > قَرْحَة 0 0 2( 0 41 wv 876 aay الجدول 11 حجم القرحة في الطرف المصاب (القطر الأكبر) عينة المقارنة حجم القرحة في الطرف المصاب )1 القطر الأكبر) عينة الجرعة الجرعة الجرعة كل ald الأكثر المتوسطة الأعلى الخاضعين انخفاضاً x5 10 x5 710 الذين تمت x 1 0 1 8 خلايا خلايا معالجتهم =n) 5 1 ( خلايا أحادية أحادية أحادية النواة مشتقة النواة مشتقة (45=n) النواة مشتقة من نخاع من نخاع من نخاع العظام العظام العظام (15=n) (15=n) (15=n) خط الأساس yw 0 المتوسط+ 26.3+ 41.5+ 31.4+ 45.6+ 79+ 23.5 29.1 19.7 19.2 23.0 معياري standard deviation (SD) 3 شهور es W —
— 9 6 — المتوسط+ 21.8+ 51.7+ 23.7+ 279+ 1+ 9 397 19.5 12.9 27.4 معياري 6 أشهر ٠ ا ل المتوسط+ 7 | 42.5 240ه 4243 288+ 15.3 43.5 19.8 13.7 25.0 معياري 9 أشهر N 3 2 4 5 11 المتوسط+ 26.7+ 27.5+ 5+ 23.0+ 20.0+ 5.8 17.7 6.5 14.8 13.0 معياري 2 أشهر N 4 3 1 2 6 المتوسط+ 438+ 31.7+ 0 15* 0. 34+ 29.7+ 29.3 17.6 35.7 13.5 معياري * عند 12 شهراً يعرض أحد الخاضعين في مجموعة المعالجة بالجرعة المتوسطة قرحة على الطرف المصاب. وقد تم عرض الحجم الفعلي الخاص بالقرحة. 3. التغير في ضغط الأكسجين عبر الجلد تم عرض التغيير في ضغط الأكسجين عبر الجلد في الجدول رقم 12. وعند القيمة الأساسية فإن هناك 35 (779) من الخاضعين في مجموعات المعالجة من الاختراع بمعلق الخلايا بها مضغط الأكسجين عبر الجلد <40 مم زثبق )¢12 12 و11 خاضع في مجموعات الجرعة الثلاث (المنخفضة؛ المتوسطة؛ المرتفعة؛ على الترتيب) بالمقارنة ب 6 )743( من الخاضعين في مجموعة عينة المقارنة.
أظهرت النتائج أن هناك زيارة متابعة قبل 12 شهر وقد زادت مستويات ضغط الأكسجين عبر الجلد إلى > مم زثبق. في معظم الخاضعين الذين تمت معالجتهم بريكسيميلوسيل-)607) 24) 7 من الخاضعين الذين تمت مقارنتهم ب 5 (46 1( من الخاضعين في مجموعة عينة المقارنة. الجدول 12 التغير في ضغط الأكسجين عبر الجلد عينة المقارنة التغير في ضغط الأكسجين عبر الجلد عينة الجرعة الأكثر الجرعة الجرعة كل المقارنة انخفاضاً المتوسطة الأعلى الخاضعي x5 10 »5 * 10 x] 10" آن الذين wa : أحادية خلايا خلايا أحادية مت en) #( النواة مشتقة أحادية النواة مشتقة معالجتهم من نخاع النواة مشتقة من نخاع العظام من نخاع العظام <n) 7( cn) 7( العظام ( 7) wn) 1( القيمة الأساسية 2 405 57)8( 14)2( 20)3( 274 21)9 مم زثبق (73)11 (80)12 2 43)6 40 >TcO2 79)35( مم زثبق 86( الإجمالى 14 14 15 15 44 TT i Tl a Em (53)8 (43)6 (43)6 (64)7 4065 2 47020 مم زثبق
>TcO2 40 4) 36( 8 57)8( 4707 53)23( مم GL) BW WT ay — ا تتتتسسللنسمك-سااظطض 30١8 395 7 (55)6 40 2 4720 مم زثبق (61)8 8 )45(5 40 >TcO2 4707 5323) مم زثبق ا ااا ااا ااا تت 2 4065 كرمع 69)9( (57)8 (54)7 24م) مم GL) (46)6 (31)4 (54)6 40 >TcO2 43016 40)16( مم GL) Wm mT %— 4. تَكَوْن الأوعيّة تم اختبار تكون الأوعية عند الشهر 6 بعد إعطاء معلق الخلية من الاختراع الحالي. وفي الخاضعين الذين تمت معالجتهم بمعلق الخلية من الاختراع فتم تم عرض التكون الوعائي في 26 )162( خاضعاً: 7( 8 و9 من الخاضعين في مجموعات منخفضة ومتوسطة وعالية؛ على الترتيب (انظر الجدول رقم 13). الجدول 13 تَكَوْن الأوعيّة تَكَوْن الأوعيّة الجرعة الجرعة الجرعة كل الأكثر المتوسطة الأعلى الخاضعي palo "10 x5 # 10 #5 (a خلايا خلايا
on a "10 "" خلايا النواة مشتفة مشتقة من معالجتهم أحادية النواة من نخاع نخاع مشتقة من Fem) yay (La) (Len) CIES (to) بعد ستة أشهر من إعطاء ريكسميلوسيل -7 َكَوْن الأوعيّة 7 (64)9 (62)8 62)24( عدم تكوّن الأوعية 5( 42( 5 )) 36)5( 38)15( aan -< وص يهم تم عرض صور التصوير الوعائي من ثلاثة من 24 حالة من حالات التكوين الوعائي والذي يمكن أن يحدث والذي يتم عرضه بالنسبة للقيمة الأساسية في الشكل رقم 6: مع النمو الطولي للشرايين (الشكل رقم 6أ)؛ والمظهر الخاص بالأوعية الجديدة (الشكل رقم 6ب) والنمو العرضي الخاص eal الجانبي الذي يستهدف الجلد (الشكل رقم 6ج). قائمة التتابع J ! jr لمواد "ب" الاعدادات sad shall "J IPC "a" 10 "J حجم BM "J مجموعة اعطاء الدم من نوع Terumo 2 200 ميكرومتر Biosafe SmartRedux ath 'L' 5 &' جهاز 2.0 SmartRedux Sepax Ficoll-Paque "&'
"(J طقم الخلية من نوع Biosafe NeatCell "a جهاز 2.0 NeatCell Sepax ld Joa SHAS a 74 "اس" المحقنة "ع مرشح خاص بالمحنة ف" ميكرومتر BM "= 'ق"' 368 (غلاف مزغب) DS: BM-MNC's "yy E10 ملار slay ed ث" تم بتره أ" القيمة الاساسية "y المرى 7 od 15 عينة مقارنة أ[ تمت معالجة الكل 'ب 1" جرعة متوسطة lz" جرعة منخفضة 10" جرعة Ae "1a" 20 زيارة المتابعة (بالشهور) 'و1" عينة مقارنة (n=15) tens On tia ion 15 )019 'ح1 " جرعة منخفضة من رد بكسيميبسيل-] (n=15) 'ط1" جرعة عالية من ربكسيميبسيل-) (15ح0) 5 ي1" قرح ك1" من القرح
"1d قرحة "م1" اشهر 'ن1' CMMo/ICPD/2008 "س1" 6ب: deg) جديدة في المنطقة "ع1" 6 من شرايين النمو الطوية 'ف1” انبوب الفالكون؟ "ص1" العجلة؛ 10 دقائق 'ق1' "5720م1] 5ئممن الجلوكوز محلول ربنجر "wae 'ر 1" "10 مل من محلول ربنجر +2.5/الجلوكوز +57/1م711 BM-MNCs:DP "I 5 1 ترشيح BM 2 | اختزال حجم BM 3 تخصيب MNC x2 4 مرة غسل 5 الترشيح 0 6 الطرد المركزي 7 مستحضر السواغ 8 الصيغة 9 الملء/الانهاء
Claims (1)
- عناصر الحماية 1 معلق خلية cell suspension يشتمل على ما بين 4 x 10 إلى 1.2 x 210 من خلايا الدم من الكريات البيضاء white blood cells من نخاع العظم bone marrow من الخاضع البشري حيث أن العدد الإجمالي يمكن أن يكون من 4 x 10 ؟ إلى 1.2 x 10 * من خلايا الدم البيضاء white blood cells 1) 20 إلى 751 والذي يكون عبارة عن LIA لمفاوية dymphocytes 5 73.9 إلى 722.3 عبارة عن WIA أحادية النواة ¢monocytes 2( 4 إلى 710 من الخلايا الجذعية المكونة للدم hematopoietic stem cells والتي تعبر عن مجموعة من التمايز 34 34 ¢(CD34) cluster of differentiation 3 3 إلى 783.3 من العدد الإجمالي من خلايا الدم البيضاء white blood cells والتي 0 تكون عبارة عن WIA وحيدة النواة ‘mononuclear cells 4( 7 7 إلى 274.7 من العدد الإجمالي لخلايا الدم البيضاء white blood cells عبارة عن.granulocytes dna WA 5) 75.4 إلى 738.8 من العدد الإجمالي من LOA الدم البيضاء white blood cells تعبر عن مستقبل كيموكين 0-7-0 من النوع 4 4 ¢(CXCR4) C-X-C chemokine receptor type 5 6) 70.07 إلى 724.7 من العدد الإجمالي من LIA الدم البيضاء white blood cells تعبر عن مستقبل عامل النمو البطاني الوعائي 2 2 Vascular endothelial growth factor receptor معمعم؛ 7( من العدد الإجمالي هناك خلايا جذعية مكونة للدم hematopoietic stem cells والتي تعبير عن عن مجموعة من التمايز 34 34 (CD34) cluster of differentiation نسبة 7.7 7 إلى 0 755.5 والتي تكون عبارة عن خلايا جذعية مكونة للدم hematopoietic stem cells غير مرتبطة والتي لا تعبر عن مجموعة من التمايز 38 38 (CD38) cluster of differentiation ويها من 0.7 إلى 710.3 من الخلايا الجذعية stem cells التي تعبر عن مستقبل كيموكين 0-1-0 من النوع 4 4 $(CXCR4) C-X-C chemokine receptor type و 8( تكون النسبة عند الحد الأقصى لها من خلايا الدم الحمراء red blood cells إلى خلايا الكريات 5 البيضاء leucocyte cells هي 7 ونسبة عند الحد الأقصى لها من الصفائح الدموية platelets لخلايا كريات الدم البيضاء leucocyte cells هي 32؛حيث يكون معلق الخلية cell suspension للاستخدام في معالجة أو تخفيف مرض الشربان المحيطي ¢peripheral artery disease وحيث يتم اشتقاق معلق الخلية cell suspension من نفس الهدف الذي يهدف إلى استقبال معلق الخلية cell suspension أو يتم اشتقاقه من هدف مختلف يهدف إلى استقبال معلق الخلية .cell suspension2. معلق الخلية cell suspension طبقاً لعنصر الحماية 1 حيث أن العدد الإجمالي من خلايا الدم البيضاء blood cells عانط»» 732.3 إلى 780.0 والذي يكون عبارة عن خلايا أحادية النواة mononuclear cells مختارة من قائمة تتكون من الخلايا اللمفاوية 1:1001:02185 والخلايا أحادية النواة monocytes والخلايا الجذعية المكونة اللدم Alls hematopoietic stem cells تعبر عن 0 مجموعة من التمايز 34 34 (CD34) cluster of differentiation و20.0 7# إلى 767.7 وتكون عبارة عن WIA حُبيبية .granulocytes3. معلق الخلية cell suspension طبقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث أن glee الخلية cell suspension يشتمل على 5 x 10 ؟ إلى 1.2 LIS 710 x الدم البيضاء white blood cells 5 المستمدة من نخاع bone marrow abe بشري. 4 معلق الخلية cell suspension طبقاً لعنصر الحماية 1 حيث أن معلق الخلية cell suspension يشتمل على 8 x 10 ؟ إلى 1.2 LIS 710 x الدم البيضاء white blood cells المستمدة من نخاع bone marrow abe بشري.5. معلق الخلية cell suspension لاستخدامه طبقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث أن معلق الخلية cell suspension يشتمل على 9 x 10 ؟ إلى 1.1 LIS 710 x الدم البيضاء white blood cells المستمدة من نخاع bone marrow abe بشري.5 6. معلق الخلية cell suspension طبقاً لعنصر الحماية 1 حيث أن معلق الخلية cell suspension يشتمل على 9.5 x 10 ؟ إلى 1.05 x 710 خلايا الدم البيضاء white blood cells المستمدة من نخاع bone marrow abe بشري.— 7 7 —7. معلق الخلية cell suspension طبقاً لعنصر الحماية 1 حيث أن معلق الخلية cell suspension يشتمل على 9.8 x 10 ؟ إلى 1.02 x 710 خلايا الدم البيضاء white blood cells المستمدة من نخاع bone marrow abe بشري.8. معلق الخلية cell suspension طبقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث أن مرض الشريان المحيطي الطرفي extremity peripheral artery disease يكون عبارة عن إقفار طرفي حرج critical limb.ischemia9. معلق الخلية cell suspension طبقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث يتم تعليق الخلايا في معلق 0 الخلايا cell suspension من الاختراع حجم من 5 إلى 30 مل من محلول ملحي معالج بالهيبارين cheparinized saline solution أو محلول ربنجر لاكتات lactated Ringer solution وبشتمل على حوالي 1 من ألبومين المصل البشري (HSA) human serum albumin وحوالي 72.5 من الجلوكوز .glucose 5 10. واحد أو عدة محقنة/ محاقن مملوءة مسبقًا تشتمل على معلق خلية cell suspension كما تحدد فى عنصر الحماية 1.1. المحقنة/ المحاقن طبقاً لعنصر الحماية 10( حيث أن المعلق يتم توفيره في شكل جرعة منفردة.: تب 4 11 tf E £6 71 جِ قم 2 z م ب 4 Rs 3 \ spss ® 3 @ oan 1 اا $a Epi 8 4 Y ام i ب sn إْ 1 2 “= B37 8 aa go Wn ¥ i Rio — 4 ال ا ل و8 ويا اا ل : Sona 3 ¢ ee Ys J EEE i 1: bE] SRI Sa . Ol se en “ ¥ A 3 ! © 522 2 > ال+:ااهها ١ شكل« "0٠٠١ مب ps pe ض ووو Yah I. . . “ BE BE BE BEB لس RR». ER RRB Gor ib bi del GM Tw RS a iy i tk 9063 الات دجب .»> »“ ب ede Yoh - م ا ٠ ا 0 ا 0 ب اا ا + 0 ال اا الا ال ا الول Tn TR اكه كه ري ' سن اص تين رعس ان امد w * "رض Y Ji— 8 0 — (rex ME Croxe NT SHY re سج يخ حي احج ams ams %hYes mm 8 0 0 ل > 7 1 =. = a NE Ea 8 : 5 Le % L . ب ا a a we = 0 0 0 2 EEE ONE READE اق ل لابج« BET a oe re as ال willl ولج لعو ل “ BY Ho ا ا اا أ a ال ا ا am a الح لا mg ا Ss oh « ل ah, ae J 0 i apt os oo iy شّّ MU لش" لاش" اش “اش ؟ ا «om Hon يعي أت اوضر يح WR ١ م صن (Pye xy) “yy” ؟ !ا م ل د ل ا ل م ل wg. nT LPS . WL We هن يس امن لاهن toa ST a "يت شكل ؟—_ 8 1 —_ Of 4 6 ؟ + : SEAN : : i Yeh | SLY A 4 يي اتيت مط ا 1 نا و * : CHEV اب 6 2> een SE Ye V : anna IE و مسو الس م ليلا ote ا TY ee Yo Gre ل oper of yy oy SNe 3 SR sie EY af couriers Of HE 3% To Tas en 7 > 7 * الس اا ا ا اال ورتسا + و فول 1 4 1 Y “© 3 ry » 6 بلدا 3 1 : Vi coin سج وو أن L » مات re 3 - ا بن عي شكل ؛ لاخ ال sy أ صل yi 70٠٠١ mmm mam mmm oon saw BE am a OLAS ااا لا ل 0" ال ا ا 8 ا الا تدج لاخ ٍْ : NN Sia Ea aa win DN NR qa a ا ~~ ~~ dha Ema ٍْ = ال ب د 1 اا am الا ال اا maa : fo SEE ome On SHEE maw ال ال ال : EN A aa Ea a Ea ow 0 : ote ا 2 BR BB Bel 2 BB 3 Os i ا ا me 7 3ج “ur wn % * 5" war ve el بد 5 « 4 ل 3 "ش“ ¥ شن ل ا am كي شكل ه vw : 1 5 ا له 1 : 3 و ccc Reno nnn i Th Was م م 0 7 تاب SN NN 1 8 تن جا لمي RE : 2 ERI Ro 0 SE سحي“ :اممو متا RE 3 " Ean Fig SE finale NR AR Sa PE Na a HR ا 3 0 RARE Sm 0 NEE 1 SETA aR SNE SEN Nn Ne Co SE EEE ae Saha 0 م Nr EEE AR 1 SH Na RE Saini ay FEES WN Ne 0 ا aE Sanaa EEN RRR xX EEE REE REEE SE oe SER Ns EER RRR SEE Coa EEE SEN SEEN an rn 3 AEN an dm 8 0 ل HRA SEE NER RRR EERE RN EEE HEE REE 0 Ee a EER NN SER 1 aR EE Sie NE EEE Nay VE NR Ne EEE 8 aN SEE EEN RR SEEN SE Nh : م 0 2 : A Sh EN Sy nN SA Sa LN IR NRE NN aaa Sa SSE Ea TER \ io SON 0 ا aa EERE Ng RN Sm 1 EEN 3 NS SER SEIN SR FEY RR VS 3 لخ 8 RE EE SRE SERENE SN Sn NE Naa Z% NN ENE REE Tuan i SERRE X SE aE RN NY SRS Tr.EE EEE Ta Riana: 1 SE 5 0 SHEAR REN REE SIREN RRS CR SERRE RNR ZEEE NR Tae REG EEE ER 9 لأا ا Ea AR 5 SE A 0 0 EEE Ra ل SERRE EE aia REE RENEE Sm RR 1 ل 0 0 EE ES SEEN Rud SEINE ERR FEETRNR BE EEE Din SE RS SESE RN a SHEEN RN 3 Sm EE RN SEER RE EEE Ne ENE EE AREY 0 ا Toa EERE oR LN a ER 0 x ILI Eien 0 ا bn 0 ORs 0 ا RRR Se EE FE EERE ل ااا ARNE aE Eile aay لاد a Sn 0 0 SRN SER مم EEE nu Coa ena ENR NORE Tae EIR SEC 0 0 2 RS EN San Sn ToT CEU ERE Ng mana Tae Eh Toe Si Na RNY SEER ل Sr SEE aay RETR SSRN Ea ERE a EEE CEE ِ z 3 0 ا SEE Ear NER Noa i SR HEINE 1 0 mmm T 0 1 N Es RRR Raa on ny NER ae NEE 0 0 0 Et densa 1 Ne RE SERRE SSN ل ار دا = EEE ERR nnn 3 Pe : ال 0 A TUE سسا ل i “& و aE 3 » : cl —— Ne 1 1 2 سس سا ا 8 اد ل ا ا ا : Bs ee ا 1 0 : ا + SEEN RN ل : 0 0 : nn, ا nee: nn THE = SERRE SE 0 CERERERER ل {EE SSE : ا 0 0: Sa 3 : Doe {EEE Cobia 3 SNORE Rant SEEAR he ; ل GEER SEN EEE SE EERE EEE : EERE eRe PERE EE 5 EERE 0 : EINE ass i Shae EEE 0 : REN NR ER TEETER 0 0 ا لاد EEE HE و : A Sa 3 : EERE 1 : HARE 1 1 : Toma TAN SEEN 0 ا : SRA SER 1 : ل ¥ TON + ا ا — 1 ل 0 i SEs VEE SEN 3 ل i Shas : i Shama § EEE am 3 CRE EERE EE x 0 aR 0 ا ل ا i ml ¥ Toma 4 ل ا : 0 0 ل i Ep i CEN i ENE TaN i sia 5 ps SRR NE : ا : اا i Doom : Eas Sa | ااا i : ER 1 : ل i EE aaa 5 0 0 ا i Dome 3 Shas : 0 : ل 8 و : CEE : ا : : i Ea : Eons } r— محع عم عع عع لعل 3 Ta = 8 wd Lhd 4 بي gxLIRR oan 3 wy a" 8 J Nw ل ا ; « o wy ,م 5 ا Yost sve \ م i i ETT \ | si ربكب ب a Bed ٠ق ا مً سن سين 8 ال Hy ow i AL BE J : للحتت 0: i cps, \ ا 7 الخ i LH RRR { i ranNae. ! " ع Vv شكلالحاضهة الهيلة السعودية الملضية الفكرية Swed Authority for intallentual Property pW RE .¥ + \ ا 0 § ام 5 + < Ne ge ”بن اج > عي كي الج دا لي ايام TEE ببح ةا Nase eg + Ed - 2 - 3 .++ .* وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها of سقوطها لمخالفتها ع لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف ع النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية. »> صادرة عن + ب ب ٠. ب الهيئة السعودية للملكية الفكرية > > > ”+ ص ب 101١ .| لريا 1*١ uo ؛ المملكة | لعربية | لسعودية SAIP@SAIP.GOV.SA
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP16382405 | 2016-08-26 | ||
| PCT/EP2017/071580 WO2018037134A1 (en) | 2016-08-26 | 2017-08-28 | Cell suspension for use in the treatment of lower extremity peripheral artery disease |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SA519401187B1 true SA519401187B1 (ar) | 2023-01-09 |
Family
ID=56842774
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SA519401187A SA519401187B1 (ar) | 2016-08-26 | 2019-02-25 | معلق خلية لاستخدامه في معالجة مرض الشريان المحيطي للطرف السفلي |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US10869886B2 (ar) |
| EP (1) | EP3504322A1 (ar) |
| JP (2) | JP7260878B2 (ar) |
| KR (1) | KR20190053198A (ar) |
| CN (1) | CN110168077B (ar) |
| AU (1) | AU2017315174B2 (ar) |
| BR (1) | BR112019003543A2 (ar) |
| CA (1) | CA3035076A1 (ar) |
| EA (1) | EA201990583A1 (ar) |
| IL (1) | IL265025B1 (ar) |
| MX (1) | MX2019002288A (ar) |
| SA (1) | SA519401187B1 (ar) |
| SG (1) | SG11201901594RA (ar) |
| WO (1) | WO2018037134A1 (ar) |
| ZA (1) | ZA201901826B (ar) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9402707B2 (en) | 2008-07-22 | 2016-08-02 | Neuravi Limited | Clot capture systems and associated methods |
| EP2629684B1 (en) | 2010-10-22 | 2018-07-25 | Neuravi Limited | Clot engagement and removal system |
| US11253278B2 (en) | 2014-11-26 | 2022-02-22 | Neuravi Limited | Clot retrieval system for removing occlusive clot from a blood vessel |
| EP3504322A1 (en) * | 2016-08-26 | 2019-07-03 | Rexgenero Biosciences S.L. | Cell suspension for use in the treatment of lower extremity peripheral artery disease |
| US10842498B2 (en) * | 2018-09-13 | 2020-11-24 | Neuravi Limited | Systems and methods of restoring perfusion to a vessel |
| US11406416B2 (en) | 2018-10-02 | 2022-08-09 | Neuravi Limited | Joint assembly for vasculature obstruction capture device |
| US11871946B2 (en) | 2020-04-17 | 2024-01-16 | Neuravi Limited | Clot retrieval device for removing clot from a blood vessel |
| US11937836B2 (en) | 2020-06-22 | 2024-03-26 | Neuravi Limited | Clot retrieval system with expandable clot engaging framework |
| US11395669B2 (en) | 2020-06-23 | 2022-07-26 | Neuravi Limited | Clot retrieval device with flexible collapsible frame |
| US11439418B2 (en) | 2020-06-23 | 2022-09-13 | Neuravi Limited | Clot retrieval device for removing clot from a blood vessel |
| CN114561352A (zh) * | 2022-03-24 | 2022-05-31 | 青岛市中心血站 | 从无偿献血全血采集装置中分离单个核细胞的方法 |
| WO2024099865A1 (en) * | 2022-11-08 | 2024-05-16 | Servicio Andaluz De Salud | Cell suspension for use in the treatment of stroke patients |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20110076255A1 (en) * | 2005-11-07 | 2011-03-31 | Pecora Andrew L | Compositions and methods for treating progressive myocardial injury due to a vascular insufficiency |
| CN107595889A (zh) * | 2008-09-12 | 2018-01-19 | 克里奥普拉斯低温生物有限公司 | 缺血性组织的细胞疗法 |
| US20150157663A1 (en) * | 2012-01-19 | 2015-06-11 | Snu R&Db Foundation | Pharmaceutical Composition Comprising Human-Blood-Derived-Cell Mass |
| JP2015508101A (ja) * | 2012-02-21 | 2015-03-16 | バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッドＢａｘｔｅｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃｏｒｐ０Ｒａｔｅｄ | Ｃｄ３４＋細胞を含む薬学的組成物 |
| EP3504322A1 (en) * | 2016-08-26 | 2019-07-03 | Rexgenero Biosciences S.L. | Cell suspension for use in the treatment of lower extremity peripheral artery disease |
-
2017
- 2017-08-28 EP EP17755544.8A patent/EP3504322A1/en active Pending
- 2017-08-28 CA CA3035076A patent/CA3035076A1/en active Pending
- 2017-08-28 AU AU2017315174A patent/AU2017315174B2/en active Active
- 2017-08-28 WO PCT/EP2017/071580 patent/WO2018037134A1/en active Application Filing
- 2017-08-28 EA EA201990583A patent/EA201990583A1/ru unknown
- 2017-08-28 IL IL265025A patent/IL265025B1/en unknown
- 2017-08-28 SG SG11201901594RA patent/SG11201901594RA/en unknown
- 2017-08-28 JP JP2019532186A patent/JP7260878B2/ja active Active
- 2017-08-28 BR BR112019003543-5A patent/BR112019003543A2/pt unknown
- 2017-08-28 KR KR1020197008738A patent/KR20190053198A/ko not_active Application Discontinuation
- 2017-08-28 CN CN201780066959.7A patent/CN110168077B/zh active Active
- 2017-08-28 US US15/688,555 patent/US10869886B2/en active Active
- 2017-08-28 MX MX2019002288A patent/MX2019002288A/es unknown
-
2019
- 2019-02-25 SA SA519401187A patent/SA519401187B1/ar unknown
- 2019-03-25 ZA ZA2019/01826A patent/ZA201901826B/en unknown
-
2020
- 2020-11-23 US US17/102,362 patent/US20210161960A1/en not_active Abandoned
-
2022
- 2022-08-19 JP JP2022131226A patent/JP2022166251A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2022166251A (ja) | 2022-11-01 |
| AU2017315174B2 (en) | 2023-11-09 |
| IL265025A (ar) | 2019-04-30 |
| US20180055884A1 (en) | 2018-03-01 |
| CN110168077B (zh) | 2024-06-14 |
| CA3035076A1 (en) | 2018-03-01 |
| JP7260878B2 (ja) | 2023-04-19 |
| US10869886B2 (en) | 2020-12-22 |
| JP2019528325A (ja) | 2019-10-10 |
| US20210161960A1 (en) | 2021-06-03 |
| ZA201901826B (en) | 2019-12-18 |
| KR20190053198A (ko) | 2019-05-17 |
| IL265025B1 (en) | 2024-10-01 |
| SG11201901594RA (en) | 2019-03-28 |
| BR112019003543A2 (pt) | 2019-05-21 |
| MX2019002288A (es) | 2019-09-18 |
| WO2018037134A1 (en) | 2018-03-01 |
| CN110168077A (zh) | 2019-08-23 |
| AU2017315174A1 (en) | 2019-04-18 |
| EP3504322A1 (en) | 2019-07-03 |
| EA201990583A1 (ru) | 2019-08-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SA519401187B1 (ar) | معلق خلية لاستخدامه في معالجة مرض الشريان المحيطي للطرف السفلي | |
| Sola-Visner et al. | Neonatal thrombocytopenia: what we do and don't know | |
| Engelbart et al. | Safety and effectiveness of Factor Eight Inhibitor Bypassing Activity for direct oral anticoagulant-related hemorrhage reversal | |
| Mc Lean et al. | Effects of postpartum uterine curettage in the recovery from Preeclampsia/Eclampsia. A randomized, controlled trial | |
| Moiz et al. | Appropriate and inappropriate use of fresh frozen plasma | |
| Colvin | Management of disseminated intravascular coagulation. | |
| Wang et al. | Quality validation of platelets obtained from the Haemonetics and Trima Accel automated blood-collection systems | |
| Winkler | Red Blood Cell Transfusion | |
| NZ791839A (en) | Cell suspension for use in the treatment of lower extremity peripheral artery disease | |
| US20220331370A1 (en) | Treatment of cardiovascular diseases | |
| Saxonhouse et al. | Current issues in the pathogenesis, diagnosis, and treatment of neonatal thrombocytopenia | |
| Cui et al. | Macular hemorrhages associated with neonatal polycythemia and thrombocytopenia: A case report | |
| Ibrahim et al. | Evaluation of Risk Factors and Treatment of Peri-Partum Anemia | |
| Machida et al. | Acute myeloid leukemia with myelodysplasia-related changes mimicking acute promyelocytic leukemia | |
| Takano et al. | An extensive basal ganglia hemorrhage in a preexisting neonatal asphyxiated lesion after mRNA-based SARS-CoV-2 vaccination: A fatal adult case of cerebral palsy | |
| Smit Sibinga et al. | Neonatology and Blood Transfusion: Proceedings of the Twenty-Eighth International Symposium on Blood Transfusion, Groningen, NL Organized by the Sanquin Division Blood Bank Noord Nederland | |
| Chowdhury | Repairing the brain with Mesenchymal stem cells for stroke recovery | |
| Hassan | Determination of Platelet Count and Mean Platelet Volume among Hypertensive Patients Living in Khartoum State | |
| Post et al. | PLATELET TRANSFUSION IS ASSOCIATED WITH POOR CLINICAL OUTCOME IN ANEURYSMAL SUBARACHNOID HEMORRHAGE | |
| Park et al. | Trend towards reduction of transfusion reactions using prestorage leukocyte-reduced and pooled whole blood–derived platelets and cost savings compared with poststorage whole blood–derived random platelets as evidenced by real-time hemovigilance | |
| Rek-Pacześ et al. | Diagnostic and therapeutic difficulties in patient with cerebral venous thrombosis–a case report | |
| Pfeil et al. | Major Clinical Trials in ROP | |
| Walther-Wenke | G. Walther-Wenke (Munster, D): What is a premature infant? Can you give us a clear definition of the risk group? N. Luban (Washington DC, USA): Prematurity is classically described as less than 34 weeks. We tend to use an arbitrary cut off not of weeks gestation, but rather of birth weight. The weight cut off that we use is 1500 grams. | |
| Kannan | Aetiological Profile, Clinical Course, Immediate Outcome And A Short Term Follow Up Study Of Babies With Neonatal Thrombocytopenia | |
| US20180271908A1 (en) | Intramuscular administraton of autologous bone marrow for treatment |