Claims (12)
1. Способ обнаружения мутаций дезоксирибонуклеиновых кислот (ДНК), при котором одну ДНК амплифицируют с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР), а получаемые ампликоны разрезают одной или более рестриктазами и подвергают обнаружению, причем используют две меченые затравки и метка первых затравок служит для связывания ампликонов с одним или более носителями, а метка вторых затравок служит для обнаружения, отличающийся тем, что используют носители, которые могут связывать первые затравки также и в условиях ПЦР, причем сначала связывают первые затравки с носителями и потом с помощью вторых затравок амплифицируют ДНК.1. A method for detecting mutations of deoxyribonucleic acids (DNA), in which one DNA is amplified by polymerase chain reaction (PCR), and the resulting amplicons are cut with one or more restrictase enzymes and detected, using two labeled seeds and the label of the first seeds serves to bind amplicons with one or more carriers, and the label of the second seeds serves to detect, characterized in that they use carriers that can bind the first seeds also in PCR conditions, and first bind The first seeds with carriers and then using the second seeds amplify the DNA.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что носители имеют активированную поверхность. 2. The method according to claim 1, characterized in that the carriers have an activated surface.
3. Способ по одному из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что первые затравки до проведения ПЦР частично или полностью связывают с носителями, а вторые затравки, в случае необходимости, находятся в реакционном растворе в свободном виде. 3. The method according to one of the preceding paragraphs, characterized in that the first seeds before PCR are partially or completely associated with carriers, and the second seeds, if necessary, are in the reaction solution in free form.
4. Способ по одному из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что одну или несколько рестриктаз добавляют до, во время или после связывания ампликонов с носителями. 4. The method according to one of the preceding paragraphs, characterized in that one or more restriction enzymes are added before, during or after binding of the amplicons to carriers.
5. Способ по одному из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что рестриктазы инкубируют с ампликонами. 5. The method according to one of the preceding paragraphs, characterized in that the restriction enzymes are incubated with amplicons.
6. Способ по одному из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что после расщепления рестриктазами, в случае необходимости, осуществляют промывание и обнаруживают метки вторых затравок. 6. The method according to one of the preceding paragraphs, characterized in that after cleavage with restrictase, if necessary, carry out washing and detect the labels of the second seeds.
7. Способ по одному из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что метод обнаружения выбирают в соответствии с меткой вторых затравок. 7. The method according to one of the preceding paragraphs, characterized in that the detection method is selected in accordance with the label of the second seeds.
8. Способ по одному из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что обнаружение осуществляют прямым или косвенным путем в соответствии с меткой вторых затравок. 8. The method according to one of the preceding paragraphs, characterized in that the detection is carried out directly or indirectly in accordance with the label of the second seeds.
9. Набор для проведения способа по одному из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что он включает две меченые затравки, одна из которых для связывания ампликонов связана с одним или более твердыми носителями, а вторая служит для обнаружения, причем со второй затравкой осуществляют амплификацию ДНК. 9. A kit for carrying out the method according to one of the preceding paragraphs, characterized in that it includes two labeled seeds, one of which is used to bind amplicons to one or more solid carriers, and the second serves to detect, and DNA is amplified with the second seed.
10. Набор по п.9, отличающийся тем, что он включает дополнительно свободные нуклеотиды, одну полимеразу и, по меньшей мере, одну рестриктазу. 10. The kit according to claim 9, characterized in that it further includes free nucleotides, one polymerase and at least one restrictase.
11. Набор по одному из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что он включает пригодный носитель предпочтительно с активированной поверхностью. 11. The kit according to one of the preceding paragraphs, characterized in that it includes a suitable carrier, preferably with an activated surface.
12. Применение набора по одному из пп.9-11 для обнаружения мутаций. 12. The use of the kit according to one of claims 9 to 11 for detecting mutations.