Claims (41)
1. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный TIE-2-лиганд, содержащий, по меньшей мере, часть первого TIE-2-лиганда и часть второго TIE-2-лиганда, который отличается от первого, причем первый и второй TIE-2-лиганды выбраны из TIE-2-лиганда 1, TIE-2-лиганда 2, TIE-лиганда 3 и TIE-лиганда 4.1. The selected nucleic acid molecule encoding a chimeric TIE-2 ligand containing at least part of the first TIE-2 ligand and part of the second TIE-2 ligand, which is different from the first, and the first and second TIE-2- ligands selected from TIE-2 ligand 1, TIE-2 ligand 2, TIE ligand 3 and TIE ligand 4.
2. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, кодирующая химерный TIE-2-лиганд, содержащий, по меньшей мере, часть TIE-2-лиганда 1 и часть TIE-2-лиганда 2. 2. The nucleic acid molecule according to claim 1, encoding a chimeric TIE-2 ligand containing at least a portion of TIE-2 ligand 1 and a portion of TIE-2 ligand 2.
3. Молекула нуклеиновой кислоты по п.2, кодирующая химерный TIE-2-лиганд, который связывает и активирует Т1Е-2-рецептор, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую TIE-2-лиганд 1, где часть этой нуклеотидной последовательности, которая кодирует N-концевой домен TIE-2-лиганда 1, заменена нуклеотидной последовательностью, которая кодирует N-концевой домен TIE-2-лиганда 2. 3. The nucleic acid molecule according to claim 2, encoding a chimeric TIE-2 ligand that binds and activates a T1E-2 receptor containing a nucleotide sequence encoding a TIE-2 ligand 1, where the part of this nucleotide sequence that encodes N- the terminal domain of TIE-2 ligand 1 is replaced by a nucleotide sequence that encodes the N-terminal domain of TIE-2 ligand 2.
4. Молекула нуклеиновой кислоты по п.3, где часть нуклеотидной последовательности, которая кодирует спирально скрученный домен TIE-2-лиганда 1, заменена нуклеотидной последовательностью, которая кодирует спирально скрученный домен TIE-2-лиганда 2. 4. The nucleic acid molecule according to claim 3, where the part of the nucleotide sequence that encodes the helically twisted domain of TIE-2 ligand 1 is replaced by the nucleotide sequence that encodes the helically twisted domain of TIE-2 ligand 2.
5. Молекула нуклеиновой кислоты по п.3 или 4, которая модифицирована для кодирования отличающейся аминокислоты вместо остатка цистеина, кодируемого нуклеотидами 784-787, как представлено на фиг.27. 5. The nucleic acid molecule according to claim 3 or 4, which is modified to encode a different amino acid instead of the cysteine residue encoded by nucleotides 784-787, as shown in Fig.27.
6. Молекула нуклеиновой кислоты по п.5, которая модифицирована таким образом, что кодирует остаток серина вместо остатка цистеина. 6. The nucleic acid molecule according to claim 5, which is modified so that it encodes a serine residue instead of a cysteine residue.
7. Молекула нуклеиновой кислоты по п.5 или 6, которая дополнительно модифицирована для кодирования отличающейся аминокислоты вместо остатка аргинина, кодируемого нуклеотидами 199-201, как представлено на фиг.7. 7. The nucleic acid molecule according to claim 5 or 6, which is further modified to encode a different amino acid instead of the arginine residue encoded by nucleotides 199-201, as shown in Fig.7.
8. Молекула нуклеиновой кислоты по п.7, которая модифицирована таким образом, что кодирует остаток серина вместо остатка аргинина. 8. The nucleic acid molecule according to claim 7, which is modified so that it encodes a serine residue instead of an arginine residue.
9. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая модифицированный TIE-2-лиганд, который связывает и активирует TIE-2-рецептор, представляющая собой нуклеотидную последовательность, кодирующую TIE-2-лиганд 1, которая модифицирована для кодирования отличающейся аминокислоты вместо остатка цистеина в положении аминокислоты 245. 9. An isolated nucleic acid molecule encoding a modified TIE-2 ligand that binds and activates the TIE-2 receptor, which is a nucleotide sequence encoding a TIE-2 ligand 1 that is modified to encode a different amino acid instead of a cysteine residue at the amino acid position 245.
10. Молекула нуклеиновой кислоты по п.9, которая модифицирована таким образом, что кодирует остаток серина вместо остатка цистеина. 10. The nucleic acid molecule of claim 9, which is modified to encode a serine residue instead of a cysteine residue.
11. Молекула нуклеиновой кислоты по п.3, имеющая последовательность, представленную на фиг.27. 11. The nucleic acid molecule according to claim 3, having the sequence shown in Fig.27.
12. Молекула нуклеиновой кислоты по п.4 с последовательностью, представленной на фиг.25. 12. The nucleic acid molecule according to claim 4 with the sequence shown in Fig.25.
13. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая модифицированный TIE-2-лиганд, который связывает, но не активирует TIE-2-рецептор, представляющая собой нуклеотидную последовательность, кодирующую TIE-2-лиганд 1 или Т1Е-2-лиганд 2, в которой часть нуклеотидной последовательности, кодирующая N-концевой домен TIE-2-лиганда 1 или TIE-2-лиганда 2, делетирована. 13. An isolated nucleic acid molecule encoding a modified TIE-2 ligand that binds but does not activate the TIE-2 receptor, which is the nucleotide sequence encoding TIE-2 ligand 1 or T1E-2 ligand 2, in which the nucleotide sequence encoding the N-terminal domain of TIE-2 ligand 1 or TIE-2 ligand 2 is deleted.
14. Молекула нуклеиновой кислоты по п.13, в которой часть нуклеотидной последовательности, кодирующая спирально скрученный домен TIE-2-лиганда 1 или TIE-2-лиганда 2, делетирована и часть, кодирующая фибриноген-подобный домен, слита в рамке считывания с нуклеотидной последовательностью, кодирующей константную область иммуноглобулина гамма-1 человека (lgGI Fc). 14. The nucleic acid molecule of claim 13, wherein the portion of the nucleotide sequence encoding the helically twisted domain of the TIE-2 ligand 1 or TIE-2 ligand 2 is deleted and the portion encoding the fibrinogen-like domain is fused to the nucleotide reading frame a sequence encoding a constant region of the human gamma-1 immunoglobulin (IgGI Fc).
15. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая модифицированный TIE-2-лиганд, который связывает, но не активирует TIE-2-рецептор, представляющая собой нуклеотидную последовательность, кодирующую TIE-2-лиганд 1, в которой часть нуклеотидной последовательности, кодирующая фибриногенподобный домен TIE-2-лиганда 1, заменена нуклеотидной последовательностью, кодирующей фибриноген-подобный домен TIE-2-лиганда 2. 15. An isolated nucleic acid molecule encoding a modified TIE-2 ligand that binds but does not activate the TIE-2 receptor, which is the nucleotide sequence encoding the TIE-2 ligand 1, in which part of the nucleotide sequence encoding the fibrinogen-like domain of TIE -2 ligand 1, replaced by a nucleotide sequence encoding the fibrinogen-like domain of TIE-2 ligand 2.
16. Молекула нуклеиновой кислоты по п.15, в которой часть нуклеотидной последовательности, кодирующая спирально скрученный домен TIE-2-лиганда 1, заменена нуклеотидной последовательностью, кодирующей спирально скрученный домен TIE-2-лиганда 2. 16. The nucleic acid molecule according to clause 15, in which part of the nucleotide sequence encoding the helically twisted domain of TIE-2 ligand 1 is replaced by a nucleotide sequence encoding the helically twisted domain of TIE-2 ligand 2.
17. Молекула нуклеиновой кислоты по п.15 с последовательностью, представленной на фиг.24. 17. The nucleic acid molecule according to clause 15 with the sequence shown in Fig.24.
18. Молекула нуклеиновой кислоты по п.16 с последовательностью, представленной на фиг.26. 18. The nucleic acid molecule according to clause 16 with the sequence shown in Fig.26.
19. Химерный или модифицированный TIE-2-лиганд, кодируемый молекулой нуклеиновой кислоты по одному из предыдущих пунктов. 19. Chimeric or modified TIE-2 ligand encoded by a nucleic acid molecule according to one of the preceding paragraphs.
20. Химерный TIE-лиганд по п.19 с последовательностью, представленной на фиг.24, 25, 26 или 27. 20. The chimeric TIE ligand according to claim 19 with the sequence shown in Fig.24, 25, 26 or 27.
21. Химерный TIE-лиганд по п.19 с последовательностью, представленной на фиг.27, модифицированной таким образом, чтобы иметь отличающуюся аминокислоту вместо остатка цистеина, кодируемого нуклеотидами 784-787. 21. The chimeric TIE ligand according to claim 19 with the sequence shown in Fig. 27, modified to have a different amino acid instead of the cysteine residue encoded by nucleotides 784-787.
22. Вектор, который содержит молекулу нуклеиновой кислоты по любому из предыдущих п.1-18. 22. A vector that contains a nucleic acid molecule according to any one of the preceding claims 1-18.
23. Вектор по п.22, в котором молекула нуклеиновой кислоты оперативно связана с регуляторной последовательностью, контролирующей экспрессию указанной последовательности в клетке-хозяине. 23. The vector according to item 22, in which the nucleic acid molecule is operatively linked to a regulatory sequence that controls the expression of the specified sequence in the host cell.
24. Вектор по п.22 или 23, который является плазмидой. 24. The vector according to item 22 or 23, which is a plasmid.
25. Система вектор-хозяин для получения химерного или модифицированного лиганда по любому из пп.19, 20 или 21, которая содержит вектор по любому из пп.22, 23 или 24. 25. The vector host system for producing a chimeric or modified ligand according to any one of claims 19, 20 or 21, which contains a vector according to any one of claims 22, 23 or 24.
26. Система вектор-хозяин по п.25, в которой клетка-хозяин является клетками бактерий, дрожжей, насекомых или млекопитающих. 26. The host vector system of claim 25, wherein the host cell is bacteria, yeast, insect or mammalian cells.
27. Способ получения лиганда, определенного в любом из пп.19, 20 или 21, который предусматривает выращивание клеток системы вектор-хозяин по п.25 или 26 в условиях, позволяющих продуцирование лиганда, и выделение полученного таким образом лиганда. 27. A method of producing a ligand as defined in any one of claims 19, 20 or 21, which comprises growing the cells of the vector-host system according to claim 25 or 26 under conditions allowing the production of a ligand and isolating the ligand thus obtained.
28. Антитело, которое специфически связывается с лигандом по любому из пп.19, 20 или 21. 28. An antibody that specifically binds to a ligand according to any one of claims 19, 20 or 21.
29. Антитело по п.28, которое является моноклональным антителом. 29. The antibody of claim 28, which is a monoclonal antibody.
30. Рецептортело, которое специфически связывается с лигандом по пп.19, 20 или 21. 30. A receptor body that specifically binds to a ligand according to claims 19, 20 or 21.
31. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая рецептортело по п.30. 31. The selected nucleic acid molecule encoding the receptor body of claim 30.
32. Вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п.31. 32. A vector containing the nucleic acid molecule of claim 31.
33. Вектор по п.32, который является плазмидой. 33. The vector according to p, which is a plasmid.
34. Конъюгат, представляющий собой лиганд по любому из пп.19, 20 или 21, конъюгированныи с цитотоксическим агентом. 34. The conjugate, which is a ligand according to any one of paragraphs.19, 20 or 21, conjugated with a cytotoxic agent.
35. Конъюгат по п.34, где цитотоксический агент является радиоактивным изотопом или токсином. 35. The conjugate according to clause 34, where the cytotoxic agent is a radioactive isotope or toxin.
36. Фармацевтическая композиция, содержащая химерный или модифицированный лиганд по любому из пп.19, 20 или 21 и фармацевтически приемлемый носитель. 36. A pharmaceutical composition comprising a chimeric or modified ligand according to any one of claims 19, 20 or 21 and a pharmaceutically acceptable carrier.
37. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело по п.28 или 29 и фармацевтически приемлемый носитель. 37. A pharmaceutical composition comprising the antibody of claim 28 or 29 and a pharmaceutically acceptable carrier.
38. Фармацевтическая композиция, содержащая рецептортело по п.30 и фармацевтически приемлемый носитель. 38. A pharmaceutical composition comprising the receptor body of claim 30 and a pharmaceutically acceptable carrier.
39. Фармацевтическая композиция, содержащая конъюгат по п.34 или 35 и фармацевтически приемлемый носитель. 39. A pharmaceutical composition comprising the conjugate of claim 34 or 35 and a pharmaceutically acceptable carrier.
40. Лиганд по любому из пп.19, 20 или 21, антитело по п.28 или 29, рецептортело по п.30 и конъюгат по п.34 или 35 для применения в способе лечения организма человека или животного или в способе диагностики. 40. The ligand according to any one of claims 19, 20 or 21, the antibody according to claim 28 or 29, the receptor body according to claim 30 and the conjugate according to claim 34 or 35 for use in a method for treating a human or animal organism or in a diagnostic method.
41. Лиганд, получаемый по способу п.27. 41. The ligand obtained by the method of clause 27.