Claims (45)
1. Мутеин человеческого IL-4, пронумерованный в соответствии с IL-4 дикого типа, обладающий активирующей Т-клетки активностью, но обладающий пониженной активирующей эндотелиальные клетки активностью.1. The mutein of human IL-4, numbered in accordance with wild-type IL-4, having T-cell activating activity, but having reduced endothelial cell activating activity.
2. Мутеин человеческого IL-4 по п. 1, где поверхностные остатки D-спирали указанного IL-4 дикого типа мутированы, посредством чего полученный мутеин вызывает пролиферацию Т-клеток и вызывает пониженную секрецию IL-6 ЭКПВЧ по сравнению с IL-4 дикого типа. 2. The mutein of human IL-4 according to claim 1, where the surface residues of the D-helix of said wild-type IL-4 are mutated, whereby the obtained mutein causes T-cell proliferation and causes a decreased secretion of UHF-IL-6 compared to wild-type IL-4 type.
3. Мутеин человеческого IL-4 по п. 2, где положение 121 замещено по сравнению с IL-4 дикого типа. 3. The mutein of human IL-4 according to claim 2, wherein position 121 is substituted in comparison with wild-type IL-4.
4. Мутеин человеческого IL-4 по п. 3, где указанное положение замещено аланином. 4. The mutein of human IL-4 according to claim 3, wherein said position is replaced by alanine.
5. Мутеин человеческого IL-4 по п. 3, где указанное положение замещено аспарагиновой кислотой. 5. The mutein of human IL-4 according to claim 3, wherein said position is substituted with aspartic acid.
6. Мутеин человеческого IL-4 по п. 3, где указанное положение замещено глютаминовой кислотой. 6. The mutein of human IL-4 according to claim 3, wherein said position is replaced by glutamic acid.
7. Мутеин человеческого IL-4 по п. 3, где указанное положение замещено фенилаланином. 7. The mutein of human IL-4 according to claim 3, wherein said position is substituted with phenylalanine.
8. Мутеин человеческого IL-4 по п. 3, где указанное положение замещено гистидином. 8. The mutein of human IL-4 according to claim 3, wherein said position is replaced by histidine.
9. Мутеин человеческого IL-4 по п. 3, где указанное положение замещено изолейцином. 9. The mutein of human IL-4 according to claim 3, wherein said position is replaced by isoleucine.
10. Мутеин человеческого IL-4 по п. 3, где указанное положение замещено лизином. 10. The mutein of human IL-4 according to claim 3, wherein said position is replaced by lysine.
11. Мутеин человеческого IL-4 по п. 3, где указанное положение замещено аспарагином. 11. The mutein of human IL-4 according to claim 3, wherein said position is replaced by asparagine.
12. Мутеин человеческого IL-4 по п. 3, где указанное положение замещено пролином. 12. The mutein of human IL-4 according to claim 3, wherein said position is replaced by proline.
13. Мутеин человеческого IL-4 по п. 3, где указанное положение замещено треонином. 13. The mutein of human IL-4 according to claim 3, wherein said position is replaced by threonine.
14. Мутеин человеческого IL-4 по п. 3, где указанное положение замещено триптофаном. 14. The mutein of human IL-4 according to claim 3, wherein said position is replaced by tryptophan.
15. Мутеин человеческого IL-4 по п. 2, где положение 124 замещено по сравнению с IL-4 дикого типа. 15. The mutein of human IL-4 according to claim 2, wherein position 124 is substituted in comparison with wild-type IL-4.
16. Мутеин человеческого IL-4 по п. 15, где указанное положение замещено аланином. 16. The mutein of human IL-4 according to claim 15, wherein said position is replaced by alanine.
17. Мутеин человеческого IL-4 по п. 15, где указанное положение замещено глютамином. 17. The mutein of human IL-4 according to claim 15, wherein said position is replaced by glutamine.
18. Мутеин человеческого IL-4 по п. 15, где указанное положение замещено аргинином. 18. The mutein of human IL-4 according to claim 15, wherein said position is replaced by arginine.
19. Мутеин человеческого IL-4 по п. 15, где указанное положение замещено серином. 19. The mutein of human IL-4 according to claim 15, wherein said position is replaced by serine.
20. Мутеин человеческого IL-4 по п. 15, где указанное положение замещено треонином. 20. The mutein of human IL-4 according to claim 15, wherein said position is replaced by threonine.
21. Мутеин человеческого IL-4 по п. 2, где положения 124 и 125 замещены по сравнению с IL-4 дикого типа. 21. The mutein of human IL-4 according to claim 2, wherein positions 124 and 125 are substituted as compared to wild-type IL-4.
22. Мутеин человеческого IL-4 по п. 21, где оба положения 124 и 125 замещены аланином. 22. The mutein of human IL-4 according to claim 21, where both positions 124 and 125 are replaced by alanine.
23. Мутеин человеческого IL-4 по п. 2, где положения 121, 122 и 124 замещены по сравнению с IL-4 дикого типа. 23. The mutein of human IL-4 according to claim 2, wherein positions 121, 122 and 124 are substituted in comparison with wild-type IL-4.
24. Мутеин человеческого IL-4 по п. 23, где положение 121 замещено треонином, положение 122 замещено фенилаланином, а положение 124 замещено глютамином. 24. The human IL-4 mutein of claim 23, wherein position 121 is substituted with threonine, position 122 is substituted with phenylalanine, and position 124 is replaced with glutamine.
25. Мутеин человеческого IL-4 по п. 1, где указанный мутеин содержит в дополнение, по крайней мере, одну аминокислотную замену в связывающей поверхности А- или С-альфа спиралях указанного IL-4 дикого типа, посредством чего указанный мутеин связывается с рецептором IL-4Rα по крайней мере, с большей афинностью, чем нативный IL-4. 25. The human IL-4 mutein according to claim 1, wherein said mutein further comprises at least one amino acid substitution in the binding surface of the A- or C-alpha helices of said wild-type IL-4, whereby said mutein binds to the receptor IL-4Rα with at least greater affinity than native IL-4.
26. Мутеин человеческого IL-4 по п. 25, где положение 13 замещено аспарагиновой кислотой, а положение 121 замещено глютаминовой кислотой. 26. The human IL-4 mutein of claim 25, wherein position 13 is substituted with aspartic acid and position 121 is replaced with glutamic acid.
27. Фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество мутеина человеческого IL-4, пронумерованного в соответствии с IL-4 дикого типа, обладающего активирующей Т-клетки активностью, но обладающего пониженной активирующей эндотелиальные клетки активностью, в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем. 27. A pharmaceutical composition containing an effective amount of a mutein of human IL-4, numbered in accordance with wild-type IL-4, having T cell activating activity but having reduced endothelial cell activating activity, in combination with a pharmaceutically acceptable carrier.
28. Полинуклеотидная молекула, кодирующая мутеин человеческого IL-4 по п. 1, и ее вырожденные варианты. 28. Polynucleotide molecule encoding a mutein of human IL-4 according to claim 1, and its degenerate variants.
29. Клетка-хозяин, трансформированная полинуклеотидом по п. 28. 29. A host cell transformed with a polynucleotide according to claim 28.
30. Вектор, содержащий полинуклеотид по п. 28, направляющий экспрессию мутеина человеческого IL-4, обладающего активирующей Т-клетки активностью, но обладающего пониженной активирующей эндотелиальные клетки активностью, причем вектор способен обеспечить трансфекцию организма-мишени и последующую экспрессию in vivo указанного мутеина человеческого IL-4, кодируемого указанным полинуклеотидом. 30. A vector containing the polynucleotide according to claim 28, directing the expression of a human IL-4 mutein having T cell activating activity but having reduced endothelial cell activating activity, the vector being able to provide transfection of the target organism and subsequent in vivo expression of said human mutein IL-4 encoded by the indicated polynucleotide.
31. Способ выбора мутеина человеческого 1L-4, пронумероаванного в соответствии с IL-4 дикого типа, обладающего активирующей Т-клетки активностью, но обладающий пониженной активирующей эндотелиальные клетки активностью, где поверхностные остатки D-спирали указанного IL-4 дикого типа мутированы, посредством чего полученный мутеин вызывает пролиферацию Т-клеток и вызывает пониженную секрецию IL-6 ЭКПВЧ по сравнению с IL-4 дикого типа. 31. A method of selecting a human 1L-4 mutein numbered according to wild type IL-4 having T cell activating activity but having reduced endothelial cell activating activity, where surface D-helices of said wild type IL-4 are mutated by whereby the obtained mutein causes T-cell proliferation and causes a decreased secretion of IL-6 EHEC compared to wild-type IL-4.
32. Способ лечения пациента, страдающего состоянием, поддающимся лечению IL-4, путем введения терапевтически эффективного количества мутеина человеческого IL-4, пронумерованного в соответствии с IL-4 дикого типа, обладающего активирующей Т-клетки активностью, но обладающего пониженной активирующей эндотелиальные клетки активностью. 32. A method of treating a patient suffering from a condition that can be treated with IL-4 by administering a therapeutically effective amount of a mutein of human IL-4, numbered in accordance with wild-type IL-4, having T cell activating activity, but having reduced endothelial cell activating activity .
33. Способ по п. 32, где указанное состояние, поддающееся лечению IL-4, представляет собой аутоиммунное заболевание. 33. The method according to p. 32, where the specified condition, treatable by IL-4, is an autoimmune disease.
34. Способ по п. 33, где указанное аутоиммунное заболевание представляет собой рассеянный склероз. 34. The method of claim 33, wherein said autoimmune disease is multiple sclerosis.
35. Способ по п. 33, где указанное аутоиммунное заболевание представляет собой ревматоидный артрит. 35. The method of claim 33, wherein said autoimmune disease is rheumatoid arthritis.
36. Способ по п. 33, где указанное аутоиммунное заболевание представляет собой инсулин-зависимый сахарный диабет. 36. The method of claim 33, wherein said autoimmune disease is insulin-dependent diabetes mellitus.
37. Способ по п. 33, где указанное аутоиммунное заболевание представляет собой системную красную волчанку. 37. The method of claim 33, wherein said autoimmune disease is systemic lupus erythematosus.
38. Способ по п. 32, где указанное состояние, поддающееся лечению IL-4, представляет собой инфекционное заболевание. 38. The method according to p. 32, where the specified condition, treatable by IL-4, is an infectious disease.
39. Способ по п. 38, где указанное инфекционное заболевание представляет собой болезнь Lyme. 39. The method of claim 38, wherein said infectious disease is Lyme disease.
40. Способ по п. 32, где указанное состояние, поддающееся лечению IL-4, представляет собой Th1-поляризованное заболевание. 40. The method according to p. 32, where the specified condition, treatable by IL-4, is a Th1-polarized disease.
41. Способ по п. 40, где указанное Th1-поляризованное заболевание представляет собой псориаз. 41. The method of claim 40, wherein said Th1-polarized disease is psoriasis.
42. Способ по п. 32, где указанное состояние, поддающееся лечению IL-4, представляет собой злокачественную опухоль. 42. The method according to p. 32, where the specified condition, treatable by IL-4, is a malignant tumor.
43. Способ по п. 42, где указанную злокачественную опухоль выбирают из группы, состоящей из острого лимфобластного лейкоза и неходжкинской лимфомы. 43. The method according to p. 42, where the specified malignant tumor is selected from the group consisting of acute lymphoblastic leukemia and non-Hodgkin's lymphoma.
44. Способ по п. 32, где указанное состояние, поддающееся лечению IL-4, представляет собой заболевание хряща. 44. The method of claim 32, wherein said treatable IL-4 condition is cartilage disease.
45. Способ по п. 44, где указанное заболевание хряща представляет собой остеоартрит. 45. The method of claim 44, wherein said cartilage disease is osteoarthritis.