Claims (12)
1. Штамм диплоидных клеток фибропластов легких эмбриона человека LBHEL (КСТС 0127BР).1. The strain of diploid cells of pulmonary fibroblasts of the human embryo LBHEL (CCC 0127BP).
2. Способ получения вируса Varicella zoster (VZV), свободного от клеток, предусматривающий (а) культивирование штамма диплоидных клеток фибропластов легких эмбриона человека LBHEL (КСТС 0127BP) в сосуде для культивирования с целью получения культивируемых клеток LBHEL; (b) инфицирование культивируемых клеток LBHEL VZV с целью получения VZV-инфицированных клеток; (с) культивирование и сбор VZV-инфицированных клеток; (d) разрушение собранных клеток с целью получения клеточного гомогената и (е) центрифугирование клеточного гомогената с целью получения супернатанта, содержащего VZV, лишенный клеток. 2. A method of obtaining a Varicella zoster virus (VZV) free of cells, comprising (a) cultivating a diploid strain of lung fibroplasts of the human embryo LBHEL (CCC 0127BP) in a culture vessel to obtain cultured LBHEL cells; (b) infection of cultured LBHEL VZV cells to obtain VZV-infected cells; (c) culturing and collecting VZV-infected cells; (d) disrupting the harvested cells to obtain cell homogenate; and (e) centrifuging the cell homogenate to obtain a supernatant containing VZV devoid of cells.
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что штамм клеток LBHEL культивируют для получения монослоя на стадии (а) с использованием модифицированной по способу Дульбекко среды Игла, содержащей 3 - 10% (объем/объем) сыворотки плода коровы. 3. The method according to claim 2, characterized in that the LBHEL cell strain is cultured to obtain a monolayer in step (a) using the Needle medium modified by the Dulbecco method, containing 3-10% (volume / volume) of cow fetal serum.
4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что культивируемый штамм клеток LBHEL покрывает 70 - 80% поверхности сосуда для культивирования в монослойной культуре стадии (а). 4. The method according to p. 3, characterized in that the cultured strain of LBHEL cells covers 70 - 80% of the surface of the vessel for cultivation in a monolayer culture of stage (a).
5. Способ по п. 3, отличающийся тем, что дополнительно включает стадию субкультивирования культивируемых клеток LBHEL, полученных на стадии (а), при коэффициенте разведения от 1:5 до 1:10, когда 70 - 80% поверхности сосуда для культивирования покрывается культивируемыми клетками LBHEL. 5. The method according to p. 3, characterized in that it further includes the step of subculturing the cultured LBHEL cells obtained in stage (a), with a dilution factor from 1: 5 to 1:10, when 70 - 80% of the surface of the vessel for cultivation is covered with cultured LBHEL cells.
6. Способ по п.2, отличающийся тем, что множественность инфицирования VZV культивируемых клеток LBHEL на стадии (b) составляет от 1:15 до 1:20. 6. The method according to claim 2, characterized in that the multiplicity of VZV infection of cultured LBHEL cells in stage (b) is from 1:15 to 1:20.
7. Способ по п.2, отличающийся тем, что культивируемые клетки LBHEL собирают на стадии (с), когда цитопатический эффект составляет 50% или менее. 7. The method according to claim 2, characterized in that the cultured LBHEL cells are harvested in step (c) when the cytopathic effect is 50% or less.
8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что культивируемые клетки LBHEL собирают, когда цитопатический эффект составляет 30 - 45%. 8. The method according to p. 7, characterized in that the cultured LBHEL cells are harvested when the cytopathic effect is 30 - 45%.
9. Способ по п. 2, отличающийся тем, что дополнительно включает перед стадией (d) этап добавления неинфицированных клеток LBHEL к инфицированным VZV клеткам LBHEL, собранным на стадии (с). 9. The method according to p. 2, characterized in that it further includes, before step (d), the step of adding uninfected LBHEL cells to VZV infected LBHEL cells harvested in step (c).
10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что неинфицированные клетки LBHEL добавляют в количестве 20 - 60% от общего количества клеток LBHEL. 10. The method according to p. 9, characterized in that the uninfected LBHEL cells are added in an amount of 20-60% of the total number of LBHEL cells.
11. Способ по п.2, отличающийся тем, что дополнительно включает перед стадией (е) стадию добавления раствора сахарозы в концентрации 15% (вес/объем) или более к клеточному гомогенату, полученному на стадии (d). 11. The method according to claim 2, characterized in that it further includes, before step (e), the step of adding sucrose solution at a concentration of 15% (weight / volume) or more to the cell homogenate obtained in step (d).
12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что концентрация раствора сахарозы составляет 15 - 45% (вес/объем). 12. The method according to p. 11, characterized in that the concentration of sucrose solution is 15 - 45% (weight / volume).