RU97111163A - FACTION OF KERATAN SULPHATOLIGOSACCHARIDES AND ITS PHARMACEUTICAL PRODUCT - Google Patents

FACTION OF KERATAN SULPHATOLIGOSACCHARIDES AND ITS PHARMACEUTICAL PRODUCT

Info

Publication number
RU97111163A
RU97111163A RU97111163/14A RU97111163A RU97111163A RU 97111163 A RU97111163 A RU 97111163A RU 97111163/14 A RU97111163/14 A RU 97111163/14A RU 97111163 A RU97111163 A RU 97111163A RU 97111163 A RU97111163 A RU 97111163A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
keratan sulfate
4g1cnac
oligosaccharide
sulfated
acetyl
Prior art date
Application number
RU97111163/14A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2173154C2 (en
Inventor
Маруяма Хироси
Морикава Кийоси
Тавада Акира
Мияути Сатоси
Йосида Кейити
Асари Акира
Original Assignee
Сейкагаку Корпорейшн
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Сейкагаку Корпорейшн filed Critical Сейкагаку Корпорейшн
Publication of RU97111163A publication Critical patent/RU97111163A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2173154C2 publication Critical patent/RU2173154C2/en

Links

Claims (33)

1. Фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество кератансульфатолигосахарида и/или его фармацевтически приемлемой соли в качестве активного ингредиента и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.1. A pharmaceutical composition comprising an effective amount of keratan sulfate oligosaccharide and / or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient and a pharmaceutically acceptable carrier or diluent. 2. Фармацевтическая композиция по п.1, являющаяся противовоспалительным средством. 2. The pharmaceutical composition according to claim 1, which is an anti-inflammatory agent. 3. Противовоспалительное средство по п.2, где указанный кератансульфатолигосахарид содержит сульфатированное N-ацетиллактозаминное звено, необязательно содержащее сиаловую кислоту и/или фукозу. 3. The anti-inflammatory agent of claim 2, wherein said keratan sulfate oligosaccharide contains a sulfated N-acetylactosamine unit, optionally containing sialic acid and / or fucose. 4. Противовоспалительное средство по п.2 или 3, где указанный кератансульфатолигосахарид включает олигосахарид с 2-5 сахаридными звеньями и содержит сульфатированный N-ацетилглюкозамин на своем редуцирующем конце, и по меньшей мере две гидроксильные группы в молекуле кератансульфатолигосахарида сульфатированы. 4. The anti-inflammatory agent according to claim 2 or 3, wherein said keratan sulfate oligosaccharide comprises an oligosaccharide with 2-5 saccharide units and contains sulfated N-acetyl glucosamine at its reducing end, and at least two hydroxyl groups in the keratan sulfate oligosaccharide molecule are sulfated. 5. Противовоспалительное средство по любому из пп.2-4, где указанный кератансульфатолигосахарид содержит в качестве составного ингредиента по меньшей мере дисахарид формулы
Ga1 (6S)-G1cNAc (6S),
где Ga1 представляет галактозу;
G1cN представляет глюкозамин;
Ас представляет ацетильную группу;
6S представляет 6-О-сульфатный эфир.5. The anti-inflammatory agent according to any one of claims 2 to 4, wherein said keratan sulfate oligosaccharide contains at least a disaccharide of the formula as a constituent ingredient
Ga1 (6S) -G1cNAc (6S),
where Ga1 represents galactose;
G1cN is glucosamine;
Ac represents an acetyl group;
6S is 6-O-sulfate ester. 6. Противовоспалительное средство по п.5, где указанный кератансульфатолигосахарид выбран из группы, включающей тетрасульфатированный N-ацетиллактозаминотетрасахарид, представленный формулой I, трисульфатированный N-ацетиллактозаминопентасахарид, представленный формулой II, дисульфатированный N-ацетиллактозаминодисахарид, представленный формулой III:
Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S)β1-3Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (I)
NeuAc~Ga1β1-4G1cNAc(6S)β1-3Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (II)
Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (III),
где Gal представляет галактозу;
G1cN представляет глюкозамин;
Neu представляет нейраминовую кислоту;
Ас представляет ацетильную группу;
6S представляет 6-О-сульфатный эфир;
~ обозначает связь α2,3 или связь α2,6.6. The anti-inflammatory agent according to claim 5, wherein said keratan sulfate oligosaccharide is selected from the group consisting of tetrasulfated N-acetylactosaminotetrasaccharide represented by formula I, trisulfated N-acetyl lactosaminopentasaccharide represented by formula II, disulfated N-acetyl lactosulodisamine:
Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) β1-3Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (I)
NeuAc ~ Ga1β1-4G1cNAc (6S) β1-3Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (II)
Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (III),
where Gal represents galactose;
G1cN is glucosamine;
Neu is neuraminic acid;
Ac represents an acetyl group;
6S is 6-O-sulfate ester;
~ denotes a bond α2,3 or a bond α2,6. 7. Фармацевтическая композиция по п.1, являющаяся противоаллергическим средством. 7. The pharmaceutical composition according to claim 1, which is an antiallergic agent. 8. Противоаллергическое средство по п.7, где указанный кератансульфатолигосахарид содержит сульфатированное N-ацетиллактозаминное звено, необязательно содержащее сиаловую кислоту и/или фукозу. 8. The antiallergic agent according to claim 7, wherein said keratan sulfate oligosaccharide contains a sulfated N-acetylactosamine unit, optionally containing sialic acid and / or fucose. 9. Противоаллергическое средство по п.7 или 8, где указанный кератансульфатолигосахарид включает олигосахарид с 2-5 сахаридными звеньями и содержит сульфатированный N-ацетилглюкозамин на своем редуцирующем конце, и по меньшей мере две гидроксильные группы в молекуле кератансульфатолигосахарида сульфатированы. 9. The antiallergic agent according to claim 7 or 8, wherein said keratan sulfate oligosaccharide comprises an oligosaccharide with 2-5 saccharide units and contains sulfated N-acetyl glucosamine at its reducing end, and at least two hydroxyl groups in the keratan sulfate oligosaccharide molecule are sulfated. 10. Противоаллергическое средство по любому из пп.7-9, где указанный кератансульфатолигосахарид содержит в качестве составного ингредиента по меньшей мере дисахарид формулы
Ga1 (6S)-G1cNAc (6S),
где Ga1 представляет галактозу;
G1cN представляет глюкозамин;
Ас представляет ацетильную группу;
6S представляет 6-О-сульфатный эфир.10. The antiallergic agent according to any one of claims 7 to 9, wherein said keratan sulfate oligosaccharide contains at least a disaccharide of the formula as a constituent ingredient
Ga1 (6S) -G1cNAc (6S),
where Ga1 represents galactose;
G1cN is glucosamine;
Ac represents an acetyl group;
6S is 6-O-sulfate ester. 11. Противоаллергическое средство по п.10, где указанный кератансульфатолигосахарид выбран из группы, включающей тетрасульфатированный N-ацетиллактозаминотетрасахарид, представленный формулой I, трисульфатированный N-ацетиллактозаминопентасахарид, представленный формулой II, и дисульфатированный N-ацетиллактозаминодисахарид, представленный формулой III:
Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S)β1-3Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (I)
NeuAc~Ga1β1-4G1cNAc(6S)β1-3Ga1(6S)β1-4G1cNAcNAc(6S) (II)
Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (III),
где Ga1 представляет гадактозу;
G1cN представляет глюкозамин;
Neu представляет нейраминовую кислоту;
Ас представляет ацетильную грцппу;
6S представляет 6-О-сульфатный эфир;
~ обозначает связь α 2,3 или связь α 2,6.11. The antiallergic agent of claim 10, wherein said keratan sulfate oligosaccharide is selected from the group consisting of tetrasulfated N-acetylactosaminotetrasaccharide represented by Formula I, trisulfated N-acetyl lactosaminopentasaccharide represented by Formula II, and disulfated N-acetyl sulactosamine:
Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) β1-3Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (I)
NeuAc ~ Ga1β1-4G1cNAc (6S) β1-3Ga1 (6S) β1-4G1cNAcNAc (6S) (II)
Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (III),
where Ga1 is gadactose;
G1cN is glucosamine;
Neu is neuraminic acid;
Ac is an acetyl group;
6S is 6-O-sulfate ester;
~ denotes a bond α 2,3 or a bond α 2,6. 12. Фармацевтическая композиция по п.1, являющаяся иммуномодулятором. 12. The pharmaceutical composition according to claim 1, which is an immunomodulator. 13. Иммуномодулятор по п.12, где указанный кератансульфатолигосахарид содержит сульфатированное N-ацетиллактозаминное звено, необязательно содержащее сиаловую кислоту и/или фукозу. 13. The immunomodulator according to claim 12, wherein said keratan sulfate oligosaccharide contains a sulfated N-acetylactosamine unit, optionally containing sialic acid and / or fucose. 14. Иммуномодулятор по п.12 или 13, где указанный кератансульфатолигосахарид включает олигосахарид с 2-5 сахаридными звеньями и содержит сульфатированный N-ацетилглюкозамин на своем редуцирующем конце, и по меньшей мере две гидроксильные группы в молекуле кератансульфатолигосахарида сульфатированы. 14. The immunomodulator according to claim 12 or 13, wherein said keratan sulfate oligosaccharide comprises an oligosaccharide with 2-5 saccharide units and contains sulfated N-acetyl glucosamine at its reducing end, and at least two hydroxyl groups in the keratan sulfate oligosaccharide molecule are sulfated. 15. Иммуномодулятор по любому из пп.12-14, где указанный кератансульфатолигосахарид содержит в качестве составного ингредиента по меньшей мере дисахарид формулы
Ga1 (6S)-G1cNAc(6S),
где Ga1 представляет галактозу;
G1cN представляет глюкозамин;
Ас представляет ацетильную группу;
6S представляет 6-О-сульфатный эфир.15. The immunomodulator according to any one of claims 12-14, wherein said keratan sulfate oligosaccharide contains at least a disaccharide of the formula as a constituent ingredient
Ga1 (6S) -G1cNAc (6S),
where Ga1 represents galactose;
G1cN is glucosamine;
Ac represents an acetyl group;
6S is 6-O-sulfate ester. 16. Иммуномодулятор по п.15, где указанный кератансульфатолигосахарид выбран из группы, включающей тетрасульфатированный N-ацетиллактозаминотетрасахарид, представленный формулой I, трисульфатированный N-ацетиллактозаминопентасахарид, представленный формулой II, и дисульфатированный N-ацетиллактозаминодисахарид, представленный формулой III:
Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S)β1-3Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (I)
NeuAc~Ga1β1-4G1cNAc(6S)β1-3Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (II)
Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (III),
где Ga1 представляет галактозу;
G1cN представляет глюкозамин;
Neu представляет нейраминовую кислоту;
Ас представляет ацетильную группу;
6S представляет 6-О-сульфатный эфир;
~ обозначает связь α2,3 или связь α2,6.16. The immunomodulator according to clause 15, wherein said keratan sulfate oligosaccharide is selected from the group consisting of tetrasulfated N-acetylactosaminotetrasaccharide represented by Formula I, trisulfated N-acetyl lactosaminopentasaccharide represented by Formula II, and disulfated N-acetyl lactosodisamine:
Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) β1-3Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (I)
NeuAc ~ Ga1β1-4G1cNAc (6S) β1-3Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (II)
Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (III),
where Ga1 represents galactose;
G1cN is glucosamine;
Neu is neuraminic acid;
Ac represents an acetyl group;
6S is 6-O-sulfate ester;
~ denotes a bond α2,3 or a bond α2,6. 17. Фармацевтическая композиция по п.1, являющаяся индуктором клеточной дифференцировки. 17. The pharmaceutical composition according to claim 1, which is an inducer of cell differentiation. 18. Индуктор клеточной дифференцировки по п.17, где указанный кератансульфатолигосахарид содержит сульфатированное N-ацетиллактозаминное звено, необязательно содержащее сиаловую кислоту и/или фукозу. 18. The cell differentiation inducer of claim 17, wherein said keratan sulfate oligosaccharide contains a sulfated N-acetylactosamine unit, optionally containing sialic acid and / or fucose. 19. Индуктор клеточной дифференцировки по п.17 или 18, где указанный кератансульфатолигосахарид включает олигосахарид с 2-5 сахаридными звеньями и содержит сульфатированный N-ацетилглюкозамин на своем редуцирующем конце, и по меньшей мере две гидроксильные группы в молекуле кератансульфатолигосахарида сульфатированы. 19. The cell differentiation inducer according to claim 17 or 18, wherein said keratan sulfate oligosaccharide comprises an oligosaccharide with 2-5 saccharide units and contains sulfated N-acetylglucosamine at its reducing end, and at least two hydroxyl groups in the keratan sulfate oligosaccharide molecule are sulfated. 20. Индуктор клеточной дифференцировки по любому из пп.17-19, где указанный кератансульфатолигосахарид содержит в качестве составного ингредиента по меньшей мере дисахарид формулы
Ga1 (6S)-G1cNAc (6S),
где Ga1 представляет галактозу;
G1cN представляет глюкозамин;
Ас представляет ацетильную группу;
6S представляет 6-О-сульфатный эфир.20. The inducer of cell differentiation according to any one of paragraphs.17-19, where the specified keratan sulfate oligosaccharide contains as a component ingredient at least a disaccharide of the formula
Ga1 (6S) -G1cNAc (6S),
where Ga1 represents galactose;
G1cN is glucosamine;
Ac represents an acetyl group;
6S is 6-O-sulfate ester. 21. Индуктор клеточной дифференцировки по п.20, где указанный кератансульфатолигосахарид выбран из группы, включающей тетрасульфатированный N-ацетиллактозаминотетрасахарид, представленный формулой I, трисульфатированный N-ацетиллактозаминопентасахарид, представленный формулой II, и дисульфатированный N-ацетиллактозаминодисахарид, представленный формулой III:
Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S)β1-3Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (I)
NeuAc~Ga1β1-4G1cNAc(6S)β1-3Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (II)
Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (III),
где Ga1 представляет галактозу;
G1cN представляет глюкозамин;
Neu представляет нейраминовую кислоту;
Ас представляет ацетильную группу;
6S представляет 6-О-сульфатный эфир;
~ обозначает связь α2,3 или связь α2,6.21. The cell differentiation inducer of claim 20, wherein said keratan sulfate oligosaccharide is selected from the group consisting of tetrasulfated N-acetylactosaminotetrasaccharide represented by formula I, trisulfated N-acetyl lactosaminopentasaccharide represented by formula II, and disulfated N-acetyl saccharide:
Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) β1-3Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (I)
NeuAc ~ Ga1β1-4G1cNAc (6S) β1-3Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (II)
Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (III),
where Ga1 represents galactose;
G1cN is glucosamine;
Neu is neuraminic acid;
Ac represents an acetyl group;
6S is 6-O-sulfate ester;
~ denotes a bond α2,3 or a bond α2,6. 22. Фармацевтическая композиция по п.1, являющаяся индуктором апоптоза. 22. The pharmaceutical composition according to claim 1, which is an inducer of apoptosis. 23. Индуктор апоптоза по п.22, где указанный кератансульфатолигосахарид содержит сульфатированное N-ацетиллактозаминное звено, необязательно содержащее сиаловую кислоту и/или фукозу. 23. The apoptosis inducer of claim 22, wherein said keratan sulfate oligosaccharide contains a sulfated N-acetylactosamine unit, optionally containing sialic acid and / or fucose. 24. Индуктор апоптоза по п.22 или 23, где указанный кератансульфатолигосахарид включает олигосахарид с 2-5 сахаридными звеньями и содержит сульфатированный N-ацетилглюкозамин на своем редуцирующем конце, и по меньшей мере две гидроксильные группы в молекуле кератансульфатолигосахарида сульфатированы. 24. The apoptosis inducer according to claim 22 or 23, wherein said keratan sulfate oligosaccharide comprises an oligosaccharide with 2-5 saccharide units and contains sulfated N-acetylglucosamine at its reducing end, and at least two hydroxyl groups in the keratan sulfate oligosaccharide molecule are sulfated. 25. Индуктор апоптоза по любому из пп.22-24, где указанный кератансульфатолигосахарид содержит в качестве составного ингредиента по меньшей мере дисахарид формулы
Ga1 (6S)-G1cNAc (6S),
где Ga1 представляет галактозу;
G1cN представляет глюкозамин;
Ас представляет ацетильную группу;
6S представляет 6-О-сульфатный эфир.25. The apoptosis inducer according to any one of claims 22-24, wherein said keratan sulfate oligosaccharide contains at least a disaccharide of the formula as a constituent ingredient
Ga1 (6S) -G1cNAc (6S),
where Ga1 represents galactose;
G1cN is glucosamine;
Ac represents an acetyl group;
6S is 6-O-sulfate ester. 26. Индуктор апоптоза по п.25, где указанный кератансульфатолигосахарид выбран из группы, включающей тетрасульфатированный N-ацетиллактозаминотетрасахарид, представленный формулой I, трисульфатированный N-ацетиллактозаминопентасахарид, представленный формулой II, и дисульфатированный N-ацетиллактозаминодисахарид, представленный формулой III:
Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S)β1-3Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (I)
NeuAc~Ga1β1-4G1cNAc(6S)β1-3Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (II)
Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (III),
где Ga1 представляет галактозу;
G1cN представляет глюкозамин;
Neu представляет нейраминовую кислоту;
Ас представляет ацетильную группу;
6S представляет 6-О-сульфатный эфир;
~ обозначает связь α2,3 или связь α2,6.26. The apoptosis inducer of claim 25, wherein said keratan sulfate oligosaccharide is selected from the group consisting of tetrasulfated N-acetylactosaminotetrasaccharide represented by Formula I, trisulfated N-acetyl lactosaminopentasaccharide represented by Formula II, and disulfated N-acetyl saccharide:
Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) β1-3Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (I)
NeuAc ~ Ga1β1-4G1cNAc (6S) β1-3Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (II)
Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (III),
where Ga1 represents galactose;
G1cN is glucosamine;
Neu is neuraminic acid;
Ac represents an acetyl group;
6S is 6-O-sulfate ester;
~ denotes a bond α2,3 or a bond α2,6. 27. Кератансульфатолигосахаридная фракция, содержащая не менее 99% кератансульфатолигосахарида, который включает олигосахарид с 2-5 сахаридными звеньями и содержит сульфатированный N-ацетилглюкозамин на своем редуцирующем конце, и в молекуле которого по меньшей мере две гидроксильные группы сульфатированы, и обладающая следующими свойствами: фракция не содержит, по существу, эндотоксин, а содержание нуклеиновых кислот, белка и протеазы во фракции, соответственно, меньше пределов их обнаружения, и фракция не содержит, по существу, гиалуроновую кислоту, хондроитинсульфат, дерматансульфат, гепарансульфат и кератансульфат. 27. A keratan sulfate oligosaccharide fraction containing not less than 99% keratan sulfate oligosaccharide, which contains an oligosaccharide with 2-5 saccharide units and contains sulfated N-acetylglucosamine at its reducing end, and in the molecule of which at least two hydroxyl groups are sulfated: and having essentially does not contain endotoxin, and the content of nucleic acids, protein and protease in the fraction, respectively, is less than the limits of their detection, and the fraction does not contain essentially hyaluron -hand acid, chondroitin sulfate, dermatan sulfate, heparan sulfate and keratan sulfate. 28. Кератансульфатолигосахаридная фракция по п.27, где указанный кератансульфатолигосахарид содержит в качестве составного ингредиента по меньшей мере дисахарид формулы
Ga1 (6S)-G1cNAc (6S),
где Ga1 представляет галактозу;
G1cN представляет глюкозамин;
Ас представляет ацетильную группу;
6S представляет 6-О-сульфатный эфир.28. The keratan sulfate oligosaccharide fraction according to claim 27, wherein said keratan sulfate oligosaccharide contains at least a disaccharide of the formula
Ga1 (6S) -G1cNAc (6S),
where Ga1 represents galactose;
G1cN is glucosamine;
Ac represents an acetyl group;
6S is 6-O-sulfate ester. 29. Кератансульфатолигосахаридная фракция по п.27 или 28, где указанный кератансульфатолигосахарид выбран из группы, включающей тетрасульфатированный N-ацетиллактозаминотетрасахарид, представленный формулой I, трисульфатированный N-ацетиллактозаминопентасахарид, представленный формулой II, и дисульфатированный N-ацетиллактозаминодисахарид, представленный формулой III:
Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S)β1-3Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (I)
NeuAc-Ga1β1-4G1cNAc(6S)β1-3Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (II)
Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (III),
где Ga1 представляет галактозу;
G1cN представляет глюкозамин;
Neu представляет нейраминовую кислоту;
Ас представляет ацетильную группу;
6S представляет 6-О-сульфатный эфир;
~ обозначает связь α2,3 или связь α2,6.29. The keratan sulfate oligosaccharide fraction according to claim 27 or 28, wherein said keratan sulfate oligosaccharide is selected from the group consisting of tetrasulfated N-acetylactosaminotetrasaccharide represented by Formula I, trisulfated N-acetyl lactosaminopentasaccharide represented by Formula II, Formula II and
Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) β1-3Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (I)
NeuAc-Ga1β1-4G1cNAc (6S) β1-3Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (II)
Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (III),
where Ga1 represents galactose;
G1cN is glucosamine;
Neu is neuraminic acid;
Ac represents an acetyl group;
6S is 6-O-sulfate ester;
~ denotes a bond α2,3 or a bond α2,6. 30. Кератансульфатолигосахаридная фракция по любому из пп.27-29, полученная путем расщепления высокосульфатированного кератансульфата, выделенного из хрящевых рыб расщепляющим кератансульфат ферментом типа эндо-β-N-ацетилглюкозаминидазы и последующим фракционированием продуктов расщепления. 30. The keratan sulfate oligosaccharide fraction according to any one of claims 27 to 29, obtained by splitting a highly sulfated keratan sulfate isolated from cartilage fish with a keratan sulfate digesting enzyme of the type endo-β-N-acetylglucosaminidase and subsequent fractionation of the cleavage products. 31. Способ получения кератансульфатолигосахаридной фракции, включающий стадии расщепления кератансульфата расщепляющим кератансульфат ферментом, обладающим следующими физическими и химическими свойствами: (1) действие: расщепляющий кератансульфат фермент воздействует на кератансульфат и гидролизует его N-ацетилглюкозаминидную связь; и (2) специфичность и субстрату: расщепляющий кератансульфат фермент воздействует на кератансульфат I, кератансульфат II и кератанполисульфат и продуцирует сульфатированный кератансульфатдисахарид и сульфатированный кератансульфаттетрасахарид в качестве основных продуктов расщепления; и фракционирования из продуктов расщепления кератансульфатолигосахаридной фракции, обладающей следующими свойствами: (А) фракция содержит в качестве основного ингредиента кератансульфатолигосахарид, который содержит сульфатированный N-ацетиллактозамин в качестве основной составляющей структуры; (Б) фракция не содержит, по существу, эндотоксина, а содержание нуклеиновых кислот, белка и протеазы во фракции, соответственно, меньше пределов их обнаружения; и (В) фракция не содержит, по существу, гиалуроновую кислоту, хондроитинсульфат, дерматансульфат, гепарансульфат и кератансульфат. 31. A method for producing a keratan sulfate oligosaccharide fraction, comprising the steps of keratan sulfate digestion by a keratan sulfate digesting enzyme having the following physical and chemical properties: (1) action: keratan sulfate digesting enzyme acts on the keratan sulfate and hydrolyzes its N-acetylglucosamide bond; and (2) specificity and substrate: the keratan sulfate digesting enzyme acts on keratan sulfate I, keratan sulfate II and keratan polysulfate and produces sulfated keratan sulfate disaccharide and sulfated keratan sulfate tetrasaccharide as major cleavage products; and fractionation from the cleavage products of the keratan sulfate oligosaccharide fraction having the following properties: (A) the fraction contains keratan sulfate oligosaccharide as the main ingredient, which contains sulfated N-acetylactosamine as the main component of the structure; (B) the fraction does not contain essentially endotoxin, and the content of nucleic acids, protein and protease in the fraction, respectively, is less than the limits of their detection; and (B) the fraction does not substantially contain hyaluronic acid, chondroitin sulfate, dermatan sulfate, heparan sulfate and keratan sulfate. 32. Способ получения кератансульфатолигосахаридной фракции по п.31, где на стадии расщепления с указанным расщепляющим кератансульфат ферментом расщепляющий кератансульфат фермент, помимо свойств, описанных в п.31, обладает следующими физическими и химическими свойствами:
(1) оптимальный рН реакции: расщепляющий фермент имеет оптимальный рН реакции 4,5 - 6 в 0,1М ацетатном буфере или в 10 мМ трис-ацетатном буфере при 37oC;
(2) рН стабильность: расщепляющий фермент обладает рН стабильностью 6 - 7, когда расщепляющий фермент остается в 0,1М ацетатном буфере или в 10 мМ трис-ацетатном буфере при 37oC в течение 1 ч;
(3) оптимальная температура реакции: расщепляющий фермент имеет оптимальную температуру реакции 50 - 60oC, когда расщепляющий фермент реагирует в 0,1М ацетатном буфере, рН 6,0, в течение 10 мин; и
(4) термоустойчивость: расщепляющий фермент устойчив, по меньшей мере, при 45oC или ниже, когда расщепляющий фермент остается в 0,1М ацетатном буфере, рН 6,0, в течение 1 ч.32. The method for producing the keratan sulfate oligosaccharide fraction according to Claim 31, wherein, in the cleavage step with said keratan sulfate cleaving enzyme, the keratan sulfate cleaving enzyme, in addition to the properties described in clause 31, has the following physical and chemical properties:
(1) optimal reaction pH: the cleavage enzyme has an optimal reaction pH of 4.5-6 in 0.1 M acetate buffer or in 10 mM Tris acetate buffer at 37 ° C;
(2) pH stability: the cleavage enzyme has a pH stability of 6-7 when the cleavage enzyme remains in 0.1 M acetate buffer or in 10 mM Tris acetate buffer at 37 ° C. for 1 hour;
(3) the optimum reaction temperature: the cleavage enzyme has an optimum reaction temperature of 50-60 ° C when the cleavage enzyme is reacted in 0.1 M acetate buffer, pH 6.0, for 10 minutes; and
(4) thermal stability: the degrading enzyme is stable at least at 45 ° C. or lower when the degrading enzyme remains in 0.1 M acetate buffer, pH 6.0, for 1 hour. 33. Способ получения кератансульфатолигосахаридной фракции по п.31 или 32, где указанный кератансульфат является высокосульфатированным кератансульфатом, а кератансульфатолигосахарид выбран из группы, включающей тетрасульфатированный N-ацетиллактозаминотетрасахарид, представленный формулой I, трисульфатированный N-ацетиллактозаминопентасахарид, представленный формулой II, и дисульфатированный N-ацетиллактозаминодисахарид, представленный формулой III:
Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S)β1-3Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (I)
NeuAc-Ga1β1-4G1cNAc(6S)β1-3Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (II)
Ga1(6S)β1-4G1cNAc(6S) (III),
где Ga1 представляет галактозу;
G1cN представляет глюкозамин;
Neu представляет нейраминовую кислоту;
Ас представляет ацетильную группу;
6S представляет 6-О-сульфатный эфир;
~ обозначает связь α2,3 или связь α2,6.33. The method of producing the keratan sulfate oligosaccharide fraction according to claim 31 or 32, wherein said keratan sulfate is a highly sulfated keratan sulfate and the keratan sulfate oligosaccharide is selected from the group consisting of tetrasulfated N-acetyl lactosaminotetrasaccharides-disulfonated sulphonated sulphonated represented by formula III:
Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) β1-3Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (I)
NeuAc-Ga1β1-4G1cNAc (6S) β1-3Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (II)
Ga1 (6S) β1-4G1cNAc (6S) (III),
where Ga1 represents galactose;
G1cN is glucosamine;
Neu is neuraminic acid;
Ac represents an acetyl group;
6S is 6-O-sulfate ester;
~ denotes a bond α2,3 or a bond α2,6.
RU97111163A 1994-12-01 1995-11-22 Fraction of keratansulfate oligosaccharides and pharmaceutical preparation containing thereof RU2173154C2 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP6/298298 1994-12-01

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU97111163A true RU97111163A (en) 1999-06-10
RU2173154C2 RU2173154C2 (en) 2001-09-10

Family

ID=

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Meyer 11 Hyaluronidases
Ernst et al. Enzymatic degradation of glycosaminogIycans
Jansson et al. Structure of the extracellular polysaccharide from Xanthomonas campestris
Karst et al. Recent chemical and enzymatic approaches to the synthesis of glycosaminoglycan oligosaccharides
Shi et al. Chondroitin sulfate: Extraction, purification, microbial and chemical synthesis
EP2123663B1 (en) Method for production of sugar oxazoline derivative
Helting et al. Occurrence and biosynthesis of β-glucuronidic linkages in heparin
HU214986B (en) Process for producing preparation containing n,o-sulfated heparosanes
Safaiyan et al. Selective reduction of 6‐O‐sulfation in heparan sulfate from transformed mammary epithelial cells
Silbert Structure and metabolism of proteoglycans and glycosaminoglycans
Pejler et al. Basement-membrane heparan sulphate with high affinity for antithrombin synthesized by normal and transformed mouse mammary epithelial cells
US6545136B1 (en) Process for producing desulfated polysaccharide, and desulfated heparin
Rapport et al. The hydrolysis of hyaluronic acid by pneumococcal hyaluronidase
Molist et al. Changes in glycosaminoglycan structure and composition of the main heparan sulphate proteoglycan from human colon carcinoma cells (perlecan) during cell differentiation
Kubo et al. Depolymerization of hyaluronan by sonication
Sutherland et al. The exopolysaccharide of Klebsiella aerogenes A 3 (Sl)(type 54). The isolation of O-acetylated octasaccharide, tetrasaccharide and trisaccharide
Endo et al. Synthesis of neoproteoglycans using the transglycosylation reaction as a reverse reaction of endo-glycosidases
RU97111163A (en) FACTION OF KERATAN SULPHATOLIGOSACCHARIDES AND ITS PHARMACEUTICAL PRODUCT
Linker et al. The enzymatic degradation of heparitin sulfate: II. Isolation and characterization of non-sulfated oligosaccharides
JP3650409B2 (en) Process for producing low molecular weight branched β-1,3-glucan and branched laminary oligosaccharide
Garg et al. Increase in the growth inhibition of bovine pulmonary artery smooth muscle cells by an O-hexanoyl low-molecular-weight heparin derivative
Tamura Recent aspects of proteoglycan syntheses
JP3522775B2 (en) Heparin unsaturated tetrasaccharide and method for producing the same
JPH09263595A (en) Production of sulfated lactosamine oligosaccharide
Linker The uronidic linkages in heparitin sulfate