Claims (30)
1. Ксиланаза, синтезированная штаммом Bacillus и активная при рН 5-10 и 50-80oC.1. Xylanase synthesized by a strain of Bacillus and active at pH 5-10 and 50-80 o C.
2. Ксиланаза по п.1, отличающаяся тем, что синтезирована штаммом Bacillus sp. 720/1 (LMG P-14798) или его производным или мутантом этого штамма. 2. Xylanase according to claim 1, characterized in that it is synthesized by a strain of Bacillus sp. 720/1 (LMG P-14798) or a derivative or mutant of this strain.
3. Ксиланаза по пп.1 и 2, выделенная и очищенная, отличающаяся тем, что она содержит последовательность 1-221 аминокислот (SEQ 1D NO:3) или модифицированную последовательность ее производной. 3. Xylanase according to claims 1 and 2, isolated and purified, characterized in that it contains a sequence of 1-221 amino acids (SEQ 1D NO: 3) or a modified sequence of its derivative.
4. Ксиланаза по п. 3, отличающаяся тем, что она синтезирована в виде предшественника, содержащего 248 аминокислот (SEQ 1D NO:6). 4. Xylanase according to claim 3, characterized in that it is synthesized in the form of a precursor containing 248 amino acids (SEQ 1D NO: 6).
5. Ксиланаза по п.1, отличающаяся тем, что она образована единственным полипептидом, имеющим молекулярный вес примерно 25 кДа, и что она имеет изоэлектрическую точку, определенную в диапазоне примерно 9,5 и примерно 9,7. 5. Xylanase according to claim 1, characterized in that it is formed by a single polypeptide having a molecular weight of about 25 kDa, and that it has an isoelectric point defined in the range of about 9.5 and about 9.7.
6. Ксиланаза по п.1, отличающаяся тем, что она продуцирована гетерологичным путем микроорганизмами рода Bacillus. 6. Xylanase according to claim 1, characterized in that it is produced in a heterologous way by microorganisms of the genus Bacillus.
7. Выделенная и очищенная культура Bacillus sp. 720/1 (LMG P-14798), ее производное или мутант. 7. Isolated and purified culture of Bacillus sp. 720/1 (LMG P-14798), a derivative or mutant thereof.
8. Молекула ДНК, содержащая нуклеотидную последовательность (SEQ 1D NO: 1), которая кодирует зрелую ксиланазу Bacillus sp. 720/1 (LMG P-14798), или модифицированную последовательность ее производного. 8. A DNA molecule containing the nucleotide sequence (SEQ 1D NO: 1), which encodes the mature xylanase of Bacillus sp. 720/1 (LMG P-14798), or a modified sequence of its derivative.
9. Молекула ДНК по п.8, отличающаяся тем, что она включает нуклеотидную последовательность (SEQ 1D NO:4), которая кодирует предшественник ксиланазы Bacillus sp. 720/1, или модифицированную последовательность ее производного. 9. The DNA molecule of claim 8, characterized in that it includes a nucleotide sequence (SEQ 1D NO: 4), which encodes the xylanase precursor Bacillus sp. 720/1, or a modified sequence of its derivative.
10. Молекула ДНК по п.8 или 9, отличающаяся тем, что она содержит любой ген (SEQ 1D NO:10) ксиланазы Bacillus sp. 720/1. 10. The DNA molecule according to claim 8 or 9, characterized in that it contains any gene (SEQ 1D NO: 10) of Bacillus sp. Xylanase. 720/1.
11. Молекула ДНК по п.8, отличающаяся тем, что она содержит промотор (SEQ 1D NO:26), являющийся производным гена, который кодирует ксиланазу Bacillus pumilus PRL B12, предпоследовательность (SEQ 1D NO:27), которая кодирует сигнальный пептид ксиланазы Bacillus pumilus PRL B12, и последовательность нуклеотидов (SEQ 1D NO:1), которая кодирует ксиланазу Bacillus sp. 720/1. 11. The DNA molecule of claim 8, characterized in that it contains a promoter (SEQ 1D NO: 26), which is a derivative of a gene that encodes a Bacillus pumilus PRL B12 xylanase, a subsequence (SEQ 1D NO: 27), which encodes a xylanase signal peptide Bacillus pumilus PRL B12, and the nucleotide sequence (SEQ 1D NO: 1), which encodes the xylanase of Bacillus sp. 720/1.
12. Вектор экспрессии или вектор хромосомного объединения, содержащий молекулу ДНК по п.8, 9, 10 или 11. 12. An expression vector or chromosome pool vector containing the DNA molecule of claim 8, 9, 10, or 11.
13. Вектор экспрессии pu BRD - 720X11. 13. The expression vector pu BRD - 720X11.
14. Вектор экспрессии pBPXD - PRE - 720X. 14. The expression vector pBPXD - PRE - 720X.
15. Трансформированный штамм, содержащий молекулу ДНК по п.8, 9, 10 или 11. 15. The transformed strain containing the DNA molecule according to claim 8, 9, 10 or 11.
16. Трансформированный штамм по п.15, отличающийся тем, что он содержит вектор экспрессии или вектор хромосомного объединения по п.12, 13 или 14. 16. The transformed strain according to p. 15, characterized in that it contains an expression vector or a chromosome association vector according to p. 12, 13 or 14.
17. Трансформированный штамм по п.15 или 16, отличающийся тем, что он является штаммом рода Bacillus. 17. The transformed strain according to item 15 or 16, characterized in that it is a strain of the genus Bacillus.
18. Трансформированный штамм по п.17, отличающийся тем, что он является штаммом Bacillus licheniformis или штаммом Bacillus pumilus. 18. The transformed strain according to claim 17, characterized in that it is a strain of Bacillus licheniformis or a strain of Bacillus pumilus.
19. Ксиланаза по п.1, отличающаяся тем, что продуцирована трансформированным штаммом по п.15, 16, 17 или 18. 19. Xylanase according to claim 1, characterized in that it is produced by the transformed strain according to claim 15, 16, 17 or 18.
20. Способ продуцирования ксиланазы по любому из пп.1 - 6 и по п.19, отличающийся тем, что он включает культивирование штамма, способного продуцировать ксиланазу в пригодной питательной среде, содержащей источник углерода и азота и минеральной соли, в условиях аэрации, и отбор полученной таким образом ксиланазы. 20. The method of producing xylanase according to any one of claims 1 to 6 and according to claim 19, characterized in that it comprises cultivating a strain capable of producing xylanase in a suitable nutrient medium containing a source of carbon and nitrogen and a mineral salt, under aeration conditions, and selection of xylanase thus obtained.
21. Способ продуцирования ксиланазы по любому из пп.1 - 6, отличающийся тем, что он включает выделение фрагмента ДНК, кодирующего ксиланазу, связывание этого фрагмента ДНК с соответствующим вектором, введение этого вектора в соответствующего хозяина или введение этого фрагмента ДНК в хромосому соответствующего хозяина, культивирование этого хозяина, экспрессию ксиланазы и отбор ксиланазы. 21. The method of producing xylanase according to any one of claims 1 to 6, characterized in that it includes the selection of a DNA fragment encoding a xylanase, the binding of this DNA fragment to the corresponding vector, the introduction of this vector into the corresponding host, or the introduction of this DNA fragment into the chromosome of the corresponding host culturing this host, xylanase expression and xylanase selection.
22. Ксиланаза по любому из пп.1 - 6 или по п.19 для обработки бумажной массы. 22. Xylanase according to any one of claims 1 to 6 or according to claim 19 for processing paper pulp.
23. Ксиланаза по любому из пп.1 - 6 или по п.19 в качестве корма для животных. 23. Xylanase according to any one of claims 1 to 6 or according to claim 19 as animal feed.
24. Ферментная композиция, содержащая ксиланазу по любому из пп.1 - 6 или по п.19 и по меньшей мере одну добавку. 24. An enzyme composition containing xylanase according to any one of claims 1 to 6 or according to claim 19 and at least one additive.
25. Промотор (SEQ 1D NO:26), являющийся производным гена, который кодирует ксиланазу Bacillus pumilus PRL B12. 25. The promoter (SEQ 1D NO: 26), which is a derivative of the gene that encodes the xylanase of Bacillus pumilus PRL B12.
26. Предпоследовательность (SEQ 1D NO:27), которая кодирует сигнальный пептид ксиланазы Bacillus pumilus PRL B12. 26. A sequence (SEQ 1D NO: 27) that encodes a Bacillus pumilus PRL B12 xylanase signal peptide.
27. Система экспрессии, используемая для продуцирования полипептида, отличающаяся тем, что она включает последовательность промотора (SEQ 1D NO:26) - производное гена, которая кодирует ксиланазу Bacillus pumilus PRL B12, последовательность, кодирующая сигнальный пептид, и последовательность целевого полипептида. 27. An expression system used to produce a polypeptide, characterized in that it comprises a promoter sequence (SEQ 1D NO: 26), a gene derivative that encodes a Bacillus pumilus PRL B12 xylanase, a signal peptide encoding sequence, and a target polypeptide sequence.
28. Система экспрессии по п.27, используемая для продуцирования полипептида, отличающаяся тем, что она включает последовательность промотора, предпоследовательность (SEQ 1D NO:27), которая кодирует сигнальный пептид ксиланазы Bacillus pumilus PRL B12, и последовательность целевого полипептида. 28. The expression system of claim 27, used to produce the polypeptide, characterized in that it comprises a promoter sequence, a presequence (SEQ 1D NO: 27) that encodes a Bacillus pumilus PRL B12 xylanase signal peptide, and a target polypeptide sequence.
29. Система экспрессии по п.27, используемая для продуцирования полипептида, отличающаяся тем, что она содержит последовательность промотора (SEQ 1D NO: 26) - производное гена, который кодирует ксиланазу Bacillus pumilus PRL B12, предпоследовательность (SEQ 1D NO:27), которая кодирует сигнальный пептид ксиланазы Bacillus pumilus PRL B12, последовательность целевого полипептида и последовательность терминатора. 29. The expression system according to item 27, used to produce a polypeptide, characterized in that it contains a promoter sequence (SEQ 1D NO: 26) - a derivative of a gene that encodes a Bacillus pumilus PRL B12 xylanase, sequence (SEQ 1D NO: 27), which encodes a Bacillus pumilus PRL B12 xylanase signal peptide, a target polypeptide sequence, and a terminator sequence.
30. Система экспрессии по п.27, 28 или 29, отличающаяся тем, что последовательность целевого полипептида соответствует последовательности нуклеотидов (SEQ 1D NO:1), которая кодирует ксиланазу Bacillus sp. 720/1. 30. The expression system according to item 27, 28 or 29, characterized in that the sequence of the target polypeptide corresponds to the nucleotide sequence (SEQ 1D NO: 1), which encodes xylanase Bacillus sp. 720/1.