RU94036174A

RU94036174A - Способ диагностики пузырчатки

Info

Publication number: RU94036174A
Application number: RU94036174/14A
Authority: RU
Inventors: Н.В. Махнева; Л.В. Белецкая
Original assignee: Московский областной научно-исследовательский клинический институт
Priority date: 1994-09-27
Filing date: 1994-09-27
Publication date: 1996-08-20
Also published as: RU2097768C1

Abstract

Предложен способ диагностики пузырчатки. Срезы из нефиксированной ткани толщиной 5 мкм готовят в криостате (-20С), обрабатывают 40-60-ной водной смесью этанола, промывают в физиологическом растворе, рН 7,0-7,4, 10 мин с целью удаления не связанных с тканями белков, обрабатывают люминесцирующей сывороткой против иммуноглобулина G 30 мин, промывают 10 мин и заключают в 60% нейтральный глицерин. При обработке срезов в течение 1-3 мин 40-60-ной водной смесью этанола установлено, что такое мягкоденатурирующее средство стабилизирует связь между антителами и тканевым антигеном, препятствуя их вымыванию из межклеточной склеивающей субстанции. Выраженной коагуляции растворимых белков при этом не происходит, что удается проконтролировать с помощью обработки срезов 96% этанолом. В последнем случае выявляется иммуноглобулин класса G плазмы крови и экссудативной жидкости. Параметрические значения реализации способа: использовали 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 96% водной смеси этанола и выявлено, что оптимальным для проявления реакции является 50%-ная водная смесь этанола, но возможно использовать раствор в параметрах от 40 до 60%. Использовать менее концентрированную водную смесь не следует вследствие слабого стабилизирующего эффекта. Более высокая концентрация (60-96%) приводит к коагуляции растворимых белков тканевых жидкостей. Целью изобретения является повышение точности диагностики пузырчатки. Изобретение может быть использовано в дерматологии для диагностики пузырчатки.

Claims

Предложен способ диагностики пузырчатки. Срезы из нефиксированной ткани толщиной 5 мкм готовят в криостате (-20^oС), обрабатывают 40-60-ной водной смесью этанола, промывают в физиологическом растворе, рН 7,0-7,4, 10 мин с целью удаления не связанных с тканями белков, обрабатывают люминесцирующей сывороткой против иммуноглобулина G 30 мин, промывают 10 мин и заключают в 60% нейтральный глицерин. При обработке срезов в течение 1-3 мин 40-60-ной водной смесью этанола установлено, что такое мягкоденатурирующее средство стабилизирует связь между антителами и тканевым антигеном, препятствуя их вымыванию из межклеточной склеивающей субстанции. Выраженной коагуляции растворимых белков при этом не происходит, что удается проконтролировать с помощью обработки срезов 96% этанолом. В последнем случае выявляется иммуноглобулин класса G плазмы крови и экссудативной жидкости. Параметрические значения реализации способа: использовали 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 96% водной смеси этанола и выявлено, что оптимальным для проявления реакции является 50%-ная водная смесь этанола, но возможно использовать раствор в параметрах от 40 до 60%. Использовать менее концентрированную водную смесь не следует вследствие слабого стабилизирующего эффекта. Более высокая концентрация (60-96%) приводит к коагуляции растворимых белков тканевых жидкостей. Целью изобретения является повышение точности диагностики пузырчатки. Изобретение может быть использовано в дерматологии для диагностики пузырчатки.