RU2817016C2 - Long-acting naltrexone microparticle injectable compositions - Google Patents
Long-acting naltrexone microparticle injectable compositions Download PDFInfo
- Publication number
- RU2817016C2 RU2817016C2 RU2021112027A RU2021112027A RU2817016C2 RU 2817016 C2 RU2817016 C2 RU 2817016C2 RU 2021112027 A RU2021112027 A RU 2021112027A RU 2021112027 A RU2021112027 A RU 2021112027A RU 2817016 C2 RU2817016 C2 RU 2817016C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- naltrexone
- microparticles
- lactide
- free base
- phase
- Prior art date
Links
- DQCKKXVULJGBQN-XFWGSAIBSA-N naltrexone Chemical compound N1([C@@H]2CC3=CC=C(C=4O[C@@H]5[C@](C3=4)([C@]2(CCC5=O)O)CC1)O)CC1CC1 DQCKKXVULJGBQN-XFWGSAIBSA-N 0.000 title claims abstract description 140
- 229960003086 naltrexone Drugs 0.000 title claims abstract description 136
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 title claims description 148
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 title 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 claims abstract description 17
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 claims abstract description 17
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims abstract description 10
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims abstract description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 6
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 225
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 219
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 100
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 claims description 75
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 68
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 claims description 61
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 54
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 53
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 52
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 51
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 48
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 30
- 239000012458 free base Substances 0.000 claims description 26
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 22
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 22
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 claims description 19
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 19
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 11
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 claims description 10
- 201000007930 alcohol dependence Diseases 0.000 claims description 9
- 208000012488 Opiate Overdose Diseases 0.000 claims description 8
- 208000026251 Opioid-Related disease Diseases 0.000 claims description 8
- RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 1,4-dioxane-2,5-dione Chemical compound O=C1COC(=O)CO1 RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 206010013654 Drug abuse Diseases 0.000 claims description 7
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 claims description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 7
- JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N lactide Chemical compound CC1OC(=O)C(C)OC1=O JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 201000000988 opioid abuse Diseases 0.000 claims description 7
- 230000036407 pain Effects 0.000 claims description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 6
- 229920001606 poly(lactic acid-co-glycolic acid) Polymers 0.000 claims description 6
- 239000012453 solvate Substances 0.000 claims description 6
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 claims description 4
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 claims description 4
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 claims description 4
- 229940005483 opioid analgesics Drugs 0.000 claims description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 3
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 claims description 3
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 claims description 2
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 claims description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 2
- 201000009032 substance abuse Diseases 0.000 claims description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 51
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 19
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 abstract description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 78
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 49
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 34
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 28
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 22
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 16
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 16
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 14
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 13
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 13
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 13
- 239000013557 residual solvent Substances 0.000 description 13
- 102220053182 rs371140684 Human genes 0.000 description 13
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 13
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 12
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 12
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 10
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 10
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 10
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 10
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 8
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 7
- GVGLGOZIDCSQPN-PVHGPHFFSA-N Heroin Chemical compound O([C@H]1[C@H](C=C[C@H]23)OC(C)=O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4OC(C)=O GVGLGOZIDCSQPN-PVHGPHFFSA-N 0.000 description 6
- 229960002069 diamorphine Drugs 0.000 description 6
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 6
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 6
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 5
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920000229 biodegradable polyester Polymers 0.000 description 4
- 239000004622 biodegradable polyester Substances 0.000 description 4
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 3
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 3
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 3
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 3
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 3
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 3
- -1 LDN Chemical compound 0.000 description 2
- 229920001244 Poly(D,L-lactide) Polymers 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 239000008135 aqueous vehicle Substances 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 238000002481 ethanol extraction Methods 0.000 description 2
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 2
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 2
- BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N morphine Chemical compound O([C@H]1[C@H](C=C[C@H]23)O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4O BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N 0.000 description 2
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 2
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- 229940057739 vivitrol Drugs 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- XASWYPVFCVEQSU-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid;potassium Chemical compound [K].OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O XASWYPVFCVEQSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JLVNEHKORQFVQJ-PYIJOLGTSA-N 6alpha-Naltrexol Chemical compound C([C@]12[C@H]3OC=4C(O)=CC=C(C2=4)C[C@@H]2[C@]1(O)CC[C@H]3O)CN2CC1CC1 JLVNEHKORQFVQJ-PYIJOLGTSA-N 0.000 description 1
- 208000023890 Complex Regional Pain Syndromes Diseases 0.000 description 1
- 208000034656 Contusions Diseases 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 208000001640 Fibromyalgia Diseases 0.000 description 1
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Polymers OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000209035 Ilex Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 208000004550 Postoperative Pain Diseases 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019486 Sunflower oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 206010001584 alcohol abuse Diseases 0.000 description 1
- 208000025746 alcohol use disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001668 ameliorated effect Effects 0.000 description 1
- 230000036592 analgesia Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002902 bimodal effect Effects 0.000 description 1
- 229920000249 biocompatible polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 210000001217 buttock Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical group OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005354 coacervation Methods 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000003722 extracellular fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002518 glial effect Effects 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000007925 in vitro drug release testing Methods 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 229960005181 morphine Drugs 0.000 description 1
- 238000000569 multi-angle light scattering Methods 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 229940124636 opioid drug Drugs 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 1
- 239000004810 polytetrafluoroethylene Substances 0.000 description 1
- 229920001343 polytetrafluoroethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 description 1
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 1
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000012910 preclinical development Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000010378 sodium ascorbate Nutrition 0.000 description 1
- PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M sodium ascorbate Substances [Na+].OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M 0.000 description 1
- 229960005055 sodium ascorbate Drugs 0.000 description 1
- PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M sodium-L-ascorbate Chemical compound [Na+].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M 0.000 description 1
- 238000000935 solvent evaporation Methods 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 239000002951 street drug Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 231100000736 substance abuse Toxicity 0.000 description 1
- 208000011117 substance-related disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002600 sunflower oil Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 229920001897 terpolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000001550 time effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
Images
Abstract
Description
Область техникиField of technology
Настоящей заявке испрашивается приоритет согласно 35 U.S.C §119(e) по заявке США № 62/745805, поданной 15 октября 2018 года, которая включена в настоящее описание в качестве ссылки.This application claims priority under 35 U.S.C. §119(e) to U.S. Application No. 62/745,805, filed October 15, 2018, which is incorporated herein by reference.
Настоящее изобретение относится к системам доставки налтрексона с замедленным высвобождением в форме микрочастиц для лечения заболеваний, которые облегчаются налтрексоном. Инъекционная система доставки в форме микрочастиц включает налтрексон, инкапсулированный в биодеградируемые микрочастицы, вводимые в фармацевтически приемлемом носителе.The present invention relates to sustained-release naltrexone delivery systems in microparticulate form for the treatment of diseases that are ameliorated by naltrexone. The injectable microparticulate delivery system comprises naltrexone encapsulated in biodegradable microparticulates administered in a pharmaceutically acceptable carrier.
Уровень техникиState of the art
Злоупотребление психоактивными веществами представляет собой заболевание, которое остается распространенным в обществе. Cчитавшийся в основном внутригородской проблемой, как это было в ходе героиновой эпидемии 1960-х и 1970-х, вопрос злоупотребления опиоидов стал более острым за пределами городов, распространяясь от городов в села. Число лиц, злоупотребляющих психоактивными веществами, значительно возросло за последние несколько десятилетий, в частности, в отношении опиоидных наркотикотических средств, как в форме фармацевтических составов, так и в виде запрещенных уличных наркотиков.Substance abuse is a disease that remains prevalent in society. Considered primarily an inner-city problem, as was the case during the heroin epidemic of the 1960s and 1970s, the issue of opioid abuse has become more acute outside the cities, spreading from cities to rural areas. The number of substance abusers has increased significantly over the past few decades, particularly with respect to opioid drugs, both in the form of pharmaceutical formulations and illicit street drugs.
Хотя пероральное суточное введения налтрексона является эффективным, его основной проблемой является очень низкое соблюдение или не соблюдение пациентом режима лечения. Было показано, что необходимость в введении каждый месяц имеет высокие показатели выбывания (25-36%) через 60 суток после начала лечения [Garbutt et al., Efficacy and tolerability of long-acting injectable naltrexone for alcohol dependence; a randomized controlled trial. JAMA. 293(13): 1617-1625, 2005; Hulse Improving clinical outcomes for naltrexone as a management of problem спирт use. Br. J. Clin. Pharmacol. 76(5) 632-641, 2013.] Таким образом, ожидается, что состав налтрексона более длительного действия улучшит соблюдение пациентом режима лечения, снизит вероятность рецидива и обеспечит более стабильные исходы для пациентов с течением времени.Although daily oral naltrexone is effective, its main problem is very low patient compliance or non-compliance with treatment. The need for monthly administration has been shown to have high dropout rates (25-36%) 60 days after initiation of treatment [Garbutt et al., Efficacy and tolerance of long-acting injectable naltrexone for alcohol dependence; a randomized controlled trial. JAMA. 293(13): 1617-1625, 2005; Hulse Improving clinical outcomes for naltrexone as a management of problem alcohol use. Br. J. Clin. Pharmacol. 76(5) 632-641, 2013.] Thus, a longer-acting formulation of naltrexone is expected to improve patient compliance, reduce the likelihood of relapse, and provide more consistent patient outcomes over time.
Были охарактеризованы различные нагруженные налтрексоном микрочастицы с замедленным высвобождением. В Ehrich (US 7919499, Naltrexone long acting formulation and methods of use) и Brittain et al. (US 7279579 B2, Polymorphic forms of naltrexone) описаны составы налтрексона длительного действия в сополимере лактида и гликолида (PLGA), имеющие высвобождение налтрексона от приблизительно 310 мг до приблизительно 480 мг в течение приблизительно четырех недель. В Tice et al. (US 6306425 B1, Injectable naltrexone microsphere compositions and their use in reducing consumption of heroin and alcohol) описаны составы налтрексона замедленного высвобождения в матриксе из поли(D, L-лактида) (PDLL), высвобождающие приблизительно 10-40% в неделю от первоначального количества налтрексона в течение периода 4 недель. В Nuwayser (US 7157102 B1, Multi-layered microcapsules and method of preparing same) описаны многослойные мультикапсулы с высокой нагрузкой налтрексоном (>40% масс./масс.) для доставки в течение одного месяца. Все из описанных составов микрочастиц на основе налтрексона продемонстрировали максимальные профили высвобождения, составляющие приблизительно 4 недели или месяц. Таким образом, в данной области существует потребность в получении составов микрочастиц длительного действия для доставки в течение более чем 4 недель или месяца.Various naltrexone-loaded sustained-release microparticles have been characterized. In Ehrich (US 7919499, Naltrexone long acting formulation and methods of use) and Brittain et al. (US 7279579 B2, Polymorphic forms of naltrexone) describes long-acting lactide-glycolide (PLGA) formulations of naltrexone having a naltrexone release of from about 310 mg to about 480 mg over about four weeks. In Tice et al. (US 6306425 B1, Injectable naltrexone microsphere compositions and their use in reducing consumption of heroin and alcohol) describes sustained-release naltrexone formulations in a poly(D, L-lactide) (PDLL) matrix, releasing approximately 10-40% per week of the original amounts of naltrexone over a 4-week period. Nuwayser (US 7157102 B1, Multi-layered microcapsules and method of preparing the same) describes multi-layered multicapsules with a high naltrexone load (>40% w/w) for delivery within one month. All of the reported naltrexone-based microparticle formulations demonstrated maximum release profiles of approximately 4 weeks to a month. Thus, there is a need in the art to provide long-acting microparticle formulations for delivery over more than 4 weeks or a month.
Были разработаны системы доставки налтрексона на основе имплантата с замедленным высвобождением длительного действия, которые осуществляют доставку в течение более чем 4 недель или одного месяца. Во всех из Kuo and Kuzma (US 8343528, Long term drug delivery devices with polyurethane based polymers and their manufacture), Saxena and Saxena (WO/2017/033208, Implantable naltrexone tablets) и O'Neil and Liu (US 7914804, Slow release pharmaceutical preparation and method of administering the same) описаны системы доставки налтрексона на основе имплантатов длительного действия. Эти составы на основе имплантатов, как правило, требуют амбулаторной хирургической процедуры для установки имплантата. В то время как эти системы в некоторых случаях могут демонстрировать более длительные профили высвобождения, чем составы налтрексона на основе микрочастиц, необходимость в хирургической процедуре и риски самоустранения пациента могут перевесить пользу.Long-acting sustained-release implant-based naltrexone delivery systems have been developed that deliver over 4 weeks to one month. In all of Kuo and Kuzma (US 8343528, Long term drug delivery devices with polyurethane based polymers and their manufacture), Saxena and Saxena (WO/2017/033208, Implantable naltrexone tablets) and O'Neil and Liu (US 7914804, Slow release pharmaceutical preparation and method of administering the same) describe naltrexone delivery systems based on long-acting implants. These implant-based formulations typically require an outpatient surgical procedure to place the implant. While these systems may in some cases exhibit longer release profiles than microparticulate naltrexone formulations, the need for a surgical procedure and the risks of patient self-absorption may outweigh the benefits.
Vivitrol® (Alkermes, Inc.) в настоящее время назначается для предупреждения рецидива опиоидной зависимости после опиоидной детоксикации в течение приблизительно 7-10 дней. Рекомендованная доза составляет 380 мг, доставляемые внутримышечно каждые 4 недели или один раз в месяц. Инъекция состоит из полимерных микрочастиц, суспендированных в разбавителе (водный носитель), инъецируемым посредством иглы калибра 20 (G). Игла 20 G требуется вследствие проведения инъекции внутримышечно в ягодичную область, количества микрочастиц и разбавителя, и, наконец, размера микрочастиц и распределения размеров. Было описано, что микрочастицы имеют d50,volume 108,49 мкм и d50,population 58,46 мкм (Andhariya et al., Accelerated in vitro release testing methods of naltrexone loaded PLGA microspheres Int. J. Pharm. 520 (1-2) 79-85, 2017), где d50,volume представляет собой величину, при которой 50% частиц по объему имеют диаметр более 108,49 мкм и 50% частиц по объему имеют диаметр менее 108,49 мкм. Величина d50,population 58,46 указывает на то, что 50% количества частиц имеют диаметр более 58,46 мкм и 50% количества частиц имеют диаметр менее 58,46 мкм. Таким образом, в данной области существует потребность в получении нагруженных налтрексоном микрочастиц с меньшим размером микрочастиц в попытках обеспечить пациентам более низкий диаметр или более высокий калибр иглы для целей введения.Vivitrol ® (Alkermes, Inc.) is currently prescribed to prevent relapse to opioid addiction after opioid detoxification for approximately 7-10 days. The recommended dose is 380 mg, delivered intramuscularly every 4 weeks or once a month. The injection consists of polymer microparticles suspended in a diluent (aqueous vehicle) injected through a 20 gauge (G) needle. A 20 G needle is required due to the intramuscular injection into the gluteal region, the amount of microparticles and diluent, and finally the size of the microparticles and size distribution. The microparticles have been described to have d 50, volume 108.49 µm and d 50, population 58.46 µm (Andhariya et al., Accelerated in vitro release testing methods of naltrexone loaded PLGA microspheres Int. J. Pharm. 520 (1- 2) 79-85, 2017), where d 50,volume is the value at which 50% of particles by volume have a diameter of more than 108.49 μm and 50% of particles by volume have a diameter of less than 108.49 μm. A d 50,population value of 58.46 indicates that 50% of the number of particles have a diameter greater than 58.46 μm and 50% of the number of particles have a diameter less than 58.46 μm. Thus, there is a need in the art to provide naltrexone-loaded microparticles with a smaller microparticle size in an attempt to provide patients with a lower diameter or higher gauge needle for administration purposes.
Было показано, что сывороточные уровни налтрексона 2,8 нг/мл были достаточными для блокированиия доз чистого диаморфина вплоть до 500 мг у двух пациентов (C. Brewer. Serum naltrexone and 6-beta-naltrexol levels from naltrexone implants can block very large amounts of heroin: a report of two cases. Addict. Biol., 7:321-323, 2002), 2,4 нг/мл полностью противодействовали 25 мг героина (Verebey et al., Naltrexone: Disposition, metabolism, and effects after acute and chronic dosing. Clin. Pharmacol. Ther., 20:315-328, 1976), и было установлено, что уровни 1-2 нг/мл являются достаточными для обеспечения защиты от летальной передозировки опиоидами (Hulse et al., Reducing hospital presentations for opioid overdose in patients treated with sustained release naltrexone implants. Drug Alcohol Depend., 79:351-357, 2005 и Comer et al. Depot naltrexone: Long-lasting antagonism of the effects of heroin in human. Psychopharmacology, 159:351-360, 2002). В пилотном испытании Vivitrex® перед второй инъекцией средняя минимальная концентрация налтрексона в плазме составляла 1,23 нг/мл (±0,83 нг/мл), и она оставалась относительно постоянной на протяжении остальной части испытания; средний минимальный уровень налтрексона составлял 1,33 нг/мл (±1,74 нг/мл) (Johnson et al., A pilot evaluation of the safety and tolerability of repeat dose administration of long-acting injectable naltrexone (Vivitrex®) in patients with alcohol dependence. Alcohol Clin Exp Res. 28:1356-1361, 2004). В модели на крысах было показано, что концентрация налтрексона в плазме ~1-2 нг/мл является эффективной в "испытании индуцируемой морфином аналгезии на горячей пластине" (The preclinical development of Medisorb Naltrexone, a once a month long-acting injection for the treatment of alcohol dependence. Frontiers in Bioscience 10: 643-655, 2005). Таким образом, в данной области существует потребность в достижении быстрых терапевтических уровней налтрексона с минимальным первоначальным скачковым высвобождением, с минимизированной максимальной концентрацией, тем самым обеспечивая более стабильные терапевтические уровни налтрексона в течение более чем одного месяца, и посредством дозированной формы в инъекционном формате.Serum naltrexone levels of 2.8 ng/mL were shown to be sufficient to block doses of pure diamorphine up to 500 mg in two patients (C. Brewer. Serum naltrexone and 6-beta-naltrexol levels from naltrexone implants can block very large amounts of heroin: a report of two cases. Addict. Biol., 7:321–323, 2002), 2.4 ng/ml was completely counteracted by 25 mg heroin (Verebey et al., Naltrexone: Disposition, metabolism, and effects after acute and chronic dosing. Clin. Pharmacol. Ther., 20:315-328, 1976), and levels of 1-2 ng/ml were found to be sufficient to provide protection against lethal opioid overdose (Hulse et al., Reducing hospital presentations for opioid overdose in patients treated with sustained release naltrexone implants. Drug Alcohol Depend., 79:351-357, 2005 and Comer et al. Depot naltrexone: Long-lasting antagonism of the effects of heroin in humans. Psychopharmacology, 159:351-360 , 2002). In the pilot trial of Vivitrex ® before the second injection, the mean trough plasma concentration of naltrexone was 1.23 ng/mL (±0.83 ng/mL) and remained relatively constant throughout the remainder of the trial; the mean naltrexone trough level was 1.33 ng/mL (±1.74 ng/mL) (Johnson et al., A pilot evaluation of the safety and tolerability of repeat dose administration of long-acting injectable naltrexone (Vivitrex ® ) in patients with alcohol dependence. Alcohol Clin Exp Res. 28:1356-1361, 2004). In a rat model, plasma naltrexone concentrations of ~1-2 ng/mL have been shown to be effective in the "hot plate morphine-induced analgesia test" (The preclinical development of Medisorb Naltrexone, a once a month long-acting injection for the treatment of alcohol dependence. Frontiers in Bioscience 10: 643-655, 2005). Thus, there is a need in the art to achieve rapid therapeutic levels of naltrexone with minimal initial burst release, with minimized peak concentration, thereby providing more stable therapeutic levels of naltrexone over more than one month, and through a dosage form in an injectable format.
Более низкие уровни налтрексона, называемые налтрексоном в низкой дозе (LDN) (от 1 до 5 мг перорально каждые сутки), налтрексоном в очень низкой дозе (VLDN) (от 1 мг до 1 мг) и налтрексоном в сверхнизкой дозе (ULDN) (менее 1 мг) продемонстрировали фармакодинамические ответы, отличные от ответов классически назначаемой дозы 50 мг каждые сутки перорально (Toljan and Vrooman, Low-dose naltrexone (LDN) - Review of therapeutic utilization, Med Sci. 6, 82, 2018). LDN выступает в качестве глиального модулятора, обеспечивая потенциальную пользу при таких состояниях, как фибромиалгия, болезнь Крона, рассеянный склероз, комплексный регионарный болевой синдром и злокачественная опухоль. Механизм ULDN, по-видимому, связан с бимодальным клеточным ответом на опиоиды, где их используют в послеоперационном контроле обезболивания, уменьшая общее количество опиоидов. Таким образом, в данной области существует потребность в достижении стабильных терапевтических концентраций для низких уровней доз налтрексона (таких как LDN, VLDN, ULDN и т.д.).Lower levels of naltrexone called low dose naltrexone (LDN) (1 to 5 mg orally every day), very low dose naltrexone (VLDN) (1 mg to 1 mg), and ultra-low dose naltrexone (ULDN) (less 1 mg) demonstrated pharmacodynamic responses different from those of the classically prescribed dose of 50 mg orally every day (Toljan and Vrooman, Low-dose naltrexone (LDN) - Review of therapeutic utilization, Med Sci. 6, 82, 2018). LDN acts as a glial modulator, providing potential benefits in conditions such as fibromyalgia, Crohn's disease, multiple sclerosis, complex regional pain syndrome and malignancy. The mechanism of ULDN appears to be related to the bimodal cellular response to opioids, where they are used in postoperative pain control by reducing the total amount of opioids. Thus, there is a need in the art to achieve stable therapeutic concentrations for low dose levels of naltrexone (such as LDN, VLDN, ULDN, etc.).
Для составов, имеющих желаемые свойства, имеется множество ограничений: высвобождение лекарственного средства должно происходить в течение пролонгированного периода времени, нагрузка лекарственным средством должна быть достаточной, полимерный матрикс должен быть биодеградируемым и биосовместимым, остаточные химические вещества и растворители должны быть на уровне ниже максимального приемлемого уровня и микросферы должны быть достаточно мелкими и способными проходить через удобные для пациентов иглы, среди прочих. Физико-химические свойства микрочастиц зависят от свойств лекарственного средства, свойств полимерного матрикса, свойств модификаторов высвобождения, а также стадий переработки, посредством которых получают микрочастицы.For formulations to have the desired properties, there are many limitations: drug release must occur over a prolonged period of time, drug loading must be sufficient, the polymer matrix must be biodegradable and biocompatible, residual chemicals and solvents must be below the maximum acceptable level and the microspheres must be small enough to pass through patient-friendly needles, among others. The physicochemical properties of microparticles depend on the properties of the drug, the properties of the polymer matrix, the properties of release modifiers, and the processing steps through which the microparticles are obtained.
Были описаны различные способы инкапсулирования соединений в форме микрочастиц. В этих способах лекарственное средство или другие активные соединения, как правило, растворяют, диспергируют или эмульгируют с использованием мешалок, гомогенизаторов или других элементов динамического перемешивания в растворителе, обычно органическом растворителе, с получением раствора, содержащего материал матрикса. Затем органический растворитель удаляют из материала лекарственное средство-матрикс в ходе экстракции и/или дополнительных стадий промывания, и после этого получают продукт в форме микрочастиц. Многие параметры, используемые для получения микрочастиц, влияют на свойства полученных микрочастиц.Various methods have been described for encapsulating compounds in microparticulate form. In these methods, the drug or other active compounds are typically dissolved, dispersed or emulsified using stirrers, homogenizers or other dynamic mixing elements in a solvent, typically an organic solvent, to produce a solution containing the matrix material. The organic solvent is then removed from the drug-matrix material through extraction and/or additional washing steps to produce a microparticulate product. Many parameters used to produce microparticles affect the properties of the resulting microparticles.
В данной области существует потребность в получении микрочастиц, которые могут высвобождать налтрексон в течение более чем одного месяца. Настоящее изобретение, описание которого полностью приводится ниже, удовлетворяет потребность в составах, обеспечивающих высвобождение налтрексона в течение более чем одного месяца.There is a need in the art to provide microparticles that can release naltrexone for more than one month. The present invention, which is described in full below, addresses the need for formulations that provide naltrexone release over a period of more than one month.
Описание чертежейDescription of drawings
На фиг. 1 представлена блок-схема, иллюстрирующая один из вариантов осуществления способа получения микрочастиц.In fig. 1 is a flow diagram illustrating one embodiment of a method for producing microparticles.
На фиг. 2. проиллюстрирован профиль высвобождения in vitro (фиг. 2A) и профили фармакокинетики in vivo (фиг. 2B) составов примера 1.In fig. 2. illustrates the in vitro release profile (Fig. 2A) and in vivo pharmacokinetic profiles (Fig. 2B) of the formulations of Example 1.
На фиг. 3. проиллюстрировано высвобождение in vitro налтрексона из составов с нагрузкой лекарственным средством в диапазоне 37~40% (масс./масс.) из примера 5.In fig. 3. Illustrates the in vitro release of naltrexone from drug loading formulations in the 37~40% (w/w) range of Example 5.
На фиг. 4. проиллюстрированы профили фармакокинетики in vivo составов 12-3 (фиг. 4A), 12-4 (фиг. 4B), 12-5 (фиг. 4C) и 12-7 (фиг. 4D), приведенных в таблице 10 примера 12.In fig. 4. Illustrates the in vivo pharmacokinetic profiles of formulations 12-3 (Figure 4A), 12-4 (Figure 4B), 12-5 (Figure 4C) and 12-7 (Figure 4D) shown in Table 10 of Example 12 .
Способ осуществления изобретенияMethod for carrying out the invention
Настоящее изобретение относится к инъекционным составам налтрексона в форме частиц с контролируемым высвобождением (или с замедленным высвобождением), содержащим налтрексон и биодеградируемый полимер, такой как сополимер лактида и гликолида, также известный как сополимер молочной и гликолевой кислоты (PLGA), в течение более чем одного месяца. Микрочастицы (микросферы) можно без труда инъецировать подкожно или внутримышечно. Более конкретно, настоящее изобретение относится к способу получения инъекционных микрочастиц, имеющих уникальные профили высвобождения налтрексона в течение более чем 4 недель, предпочтительно от приблизительно 8 недель до приблизительно 12 недель, более предпочтительно в течение вплоть до 100 дней. Микрочастицы получают посредством экстракции растворителем/упаривания эмульсии типа "масло в воде", причем дисперсная масляная фаза представляет собой растворы, полученные с использованием органического растворителя, включающие в основном налтрексон и биодеградируемый биосовместимый полимер.The present invention relates to injectable controlled release (or sustained release) particulate formulations of naltrexone containing naltrexone and a biodegradable polymer, such as a lactide-glycolide copolymer, also known as a copolymer of lactic-glycolic acid (PLGA), over more than one month. Microparticles (microspheres) can be easily injected subcutaneously or intramuscularly. More specifically, the present invention relates to a method for producing injectable microparticles having unique naltrexone release profiles over a period of greater than 4 weeks, preferably from about 8 weeks to about 12 weeks, more preferably for up to 100 days. The microparticles are prepared by solvent extraction/evaporation of an oil-in-water emulsion, the dispersed oil phase being organic solvent solutions comprising primarily naltrexone and a biodegradable biocompatible polymer.
Варианты осуществления изобретения описаны подробно, включая определенные предпочтительные и необязательные варианты, так чтобы различные аспекты изобретения могли бить полностью понятны и восприняты. В настоящем описании описаны инъекционнные составы микрочастиц налтрексона, которые обеспечивают контролируемое высвобождение активного вещества в течение более чем 4 недель, в частности, в течение от приблизительно 8 недель до приблизительно 12 недель (или 100 дней).Embodiments of the invention are described in detail, including certain preferred and optional embodiments, so that the various aspects of the invention can be fully understood and appreciated. Disclosed herein are injectable naltrexone microparticulate formulations that provide controlled release of the active agent over more than 4 weeks, particularly over about 8 weeks to about 12 weeks (or 100 days).
Составы длительного действия можно получать посредством распылительной сушки, способов на основе эмульсий, экструзии, способов на основе микрообработки, коацервации и других способов изготовления полимерных микрочастиц с лекарственным средством, которые обладают свойствами контролируемого высвобождения.Long-acting formulations can be prepared by spray drying, emulsion-based methods, extrusion, microfabrication-based methods, coacervation and other methods for making polymeric drug microparticles that have controlled release properties.
В одном варианте осуществления предусматривается способ формирования микрочастиц для применения в качестве средств доставки с контролируемым высвобождением. Способ получения инъекционного состава микрочастиц включает: (a) смешение первой фазы, включающей поливиниловый спирт (PVA) и первый растворитель, и второй фазы, включающей биодеградируемый полимер, налтрексон и второй растворитель, с получением смеси; и (b) проведение процесса экстракции смеси с водой или водным раствором с получением микрочастиц. Предпочтительно, способ включает процесс сушки микрочастиц после процесса экстракции. В другом варианте осуществления способ необязательно включает (c) проведение дополнительного процесса экстракции микрочастиц с водным раствором этанола после (b) проведения процесса экстракции. Когда способ включает дополнительный процесс экстракцит, процесс сушки микрочастиц проводят до и/или после дополнительного процесса экстракции. Например, сушку частиц проводят после (b) проведения процесса экстракции, после (c) проведения дополнительного процесса экстракции, или после каждого из (b) и (c).In one embodiment, a method is provided for forming microparticles for use as controlled release delivery vehicles. A method for preparing an injectable microparticle formulation includes: (a) mixing a first phase comprising polyvinyl alcohol (PVA) and a first solvent and a second phase comprising a biodegradable polymer, naltrexone and a second solvent to produce a mixture; and (b) carrying out an extraction process of the mixture with water or an aqueous solution to obtain microparticles. Preferably, the method includes a process of drying the microparticles after the extraction process. In another embodiment, the method optionally includes (c) performing an additional microparticle extraction process with an aqueous ethanol solution after (b) performing the extraction process. When the method includes an additional extraction process, the microparticle drying process is carried out before and/or after the additional extraction process. For example, drying of the particles is carried out after (b) carrying out an extraction process, after (c) carrying out an additional extraction process, or after each of (b) and (c).
Способы согласно вариантам осуществления настоящего изобретения описаны подробно с отсылкой на фиг. 1. В настоящем описании использование термина "первый" или "второй" предназначено только для более удобного объяснения настоящего изобретения, однако эти термины не отражают или не подразумевают, что существует конкретный порядок или степень важности между ними. Кроме того, форма единственного числа для выражения на протяжении настоящего описания включает значение множественного числа, если контекст явно не указывает на то, что существует различие.Methods according to embodiments of the present invention are described in detail with reference to FIGS. 1. In this specification, the use of the term “first” or “second” is intended only to more conveniently explain the present invention, but these terms do not reflect or imply that there is a particular order or degree of importance between them. In addition, the singular form of expression throughout this specification includes the plural unless the context clearly indicates that a difference exists.
Смешение первой фазы и второй фазы проводят в любом порядке. В одном аспекте, но не ограничиваясь ими, первую фазу можно добавлять сверху на вторую фазу, а затем смешивать их с получением смеси. Этот процесс может представлять собой эмульгирование, и смесь представляет собой эмульсию типа "масло-в-воде" из полимера, налтрексона и одного или нескольких растворителей. Масляные частицы в смеси (эмульсии) становятся микрочастицами посредством последующих процессов в рамках настоящего изобретения. Смешение может представлять собой процесс для формирования микрочастиц желаемого диапазона размеров, который может зависеть от условий смешения, таких как скорость вращения, мощность и т.п.Mixing of the first phase and the second phase is carried out in any order. In one aspect, but not limited to, the first phase can be added on top of the second phase and then mixed to form a mixture. The process may be emulsification, and the mixture is an oil-in-water emulsion of polymer, naltrexone and one or more solvents. The oil particles in the mixture (emulsion) become microparticles through subsequent processes within the scope of the present invention. Mixing may be a process for forming microparticles of a desired size range, which may depend on mixing conditions such as rotational speed, power, and the like.
Первая фаза также может быть названа непрерывной фазой в настоящем описании. Первая фаза содержит поливиниловый спирт и первый растворитель, где первый растворитель включает по меньшей мере один компонент, выбранный из группы, состоящей из воды, дихлорметана (DCM), бензилового спирта (BA) и этилацетата (EA). В одном аспекте первый растворитель должен содержать воду. Например, первый растворитель может представлять собой воду и первая фаза может быть образована посредством добавления PVA в воду.The first phase may also be referred to as the continuous phase in the present specification. The first phase contains polyvinyl alcohol and a first solvent, where the first solvent includes at least one component selected from the group consisting of water, dichloromethane (DCM), benzyl alcohol (BA) and ethyl acetate (EA). In one aspect, the first solvent must contain water. For example, the first solvent may be water and the first phase may be formed by adding PVA to water.
В другом аспекте первый растворитель может дополнительно включать органический растворитель, который представляет собой по меньшей мере один растворитель, выбранный из группы, состоящей из дихлорметана, бензилового спирта и этилацетата. Когда первый растворитель содержит воду и один или несколько органических растворителей, органический растворитель можно смешивать с поливиниловым спиртом и водой при получении первой фазы. В других аспектах, когда первый растворитель включает воду и один или несколько органических растворителей органический растворитель можно смешивать с раствором, включающим поливиниловый спирт и воду, непосредственно после смешения поливинилового спирта и воды при получении первой фазы. В другом аспекте, когда первый растворитель содержит воду и один или несколько органических растворителей, органический растворитель можно смешивать с раствором, содержащим поливиниловый спирт и воду, непосредственно перед смешением первой фазы со второй фазой. Предпочтительно, один или несколько органических растворителей можно смешивать с раствором, содержащим поливиниловый спирт и воду, непосредственно перед смешением со второй фазой.In another aspect, the first solvent may further include an organic solvent that is at least one selected from the group consisting of dichloromethane, benzyl alcohol and ethyl acetate. When the first solvent contains water and one or more organic solvents, the organic solvent can be mixed with polyvinyl alcohol and water to form the first phase. In other aspects, when the first solvent includes water and one or more organic solvents, the organic solvent can be mixed with a solution comprising polyvinyl alcohol and water immediately after mixing the polyvinyl alcohol and water to form the first phase. In another aspect, when the first solvent contains water and one or more organic solvents, the organic solvent can be mixed with a solution containing polyvinyl alcohol and water immediately before mixing the first phase with the second phase. Preferably, one or more organic solvents may be mixed with the solution containing polyvinyl alcohol and water immediately before mixing with the second phase.
В одном аспекте непрерывная фаза (первая фаза) содержит приблизительно 0,1~5% (масс./об.) поливинилового спирта (PVA) в воде. В другом аспекте непрерывная фаза, кроме того, может содержать от 0 до 1,8% (масс./об.) дихлорметана (DCM) и/или от 0 до 3,3% (масс./об.) бензилового спирта.In one aspect, the continuous phase (first phase) contains approximately 0.1~5% (w/v) polyvinyl alcohol (PVA) in water. In another aspect, the continuous phase may further contain from 0 to 1.8% (w/v) dichloromethane (DCM) and/or from 0 to 3.3% (w/v) benzyl alcohol.
Вторая фаза также может быть названа органической фазой в настоящем описании. Вторая фаза включает биодеградируемый полимер, налтрексон и второй растворитель, где второй растворитель включает по меньшей мере один компонент, выбранный из группы, состоящей из дихлорметана, бензилового спирта и этилацетата. В одном аспекте второй растворитель включает дихлорметан и бензиловый спирт, этилацетат или их комбинацию. В другом аспекте для получения микрочастиц вторая фаза включает приблизительно 1~40% (масс./масс.) биодеградируемого полимера, растворенного в органическом растворителе, таком как дихлорметан (DCM), также известный как метиленхлорид, и 1~50% (масс./масс.) налтрексона, растворенного в другом органическом растворителе, таком как бензиловый спирт. Налтрексон можно использовать в способе в форме свободного основания, соли, сольвата, сокристалла или их комбинаций.The second phase may also be referred to as the organic phase in the present specification. The second phase includes a biodegradable polymer, naltrexone and a second solvent, where the second solvent includes at least one component selected from the group consisting of dichloromethane, benzyl alcohol and ethyl acetate. In one aspect, the second solvent includes dichloromethane and benzyl alcohol, ethyl acetate, or a combination thereof. In another aspect, to produce microparticles, the second phase comprises about 1~40% (w/w) biodegradable polymer dissolved in an organic solvent such as dichloromethane (DCM), also known as methylene chloride, and 1~50% (w/w) wt.) naltrexone dissolved in another organic solvent such as benzyl alcohol. Naltrexone can be used in the method in the form of a free base, salt, solvate, co-crystal, or combinations thereof.
Биосовместимый биодеградируемый полимер может представлять собой гомополимер, сополимер или терполимер, или повторяющиеся мономерные элементы, связанные группами, такими как сложноэфирные группы. Полимер может представлять собой полиэфир, который может состоять из элементов, представляющих собой один или несколько остатков гидроксикарбоновой кислоты, где распределение элементов может быть случайным, блокированным, парным или последовательным. Когда биодеградируемый полимер представляет собой полиэфир, полиэфиры включают полилактид, полигликолид и PLGA. В одном аспекте биодеградируемый полимер представляет собой полилактид, PLGA или их комбинации. Предпочтительно подходящий биодеградируемый полиэфир имеет (молярное) соотношение лактид:гликолид (L:G) от 50:50 до 100:0, предпочтительно от 65:35 до 90:10, более предпочтительно от 75:25 до 85:15. Предпочтительно подходящий биодеградируемый полиэфир представляет собой PLGA от 60:40 до 95:5. Более предпочтительно подходящий биодеградируемый представляет собой PLGA от 70:30 до 90:10. Еще более предпочтительно биодеградируемый полиэфир представляет собой PLGA от 75: 25 до 85:15. Наиболее предпочтительно биодеградируемый полиэфир представляет собой PLGA 85:15. В одном аспекте биодеградируемый полимер имеет среднюю молекулярную массу от 50000 до 150000 Дальтон.The biocompatible biodegradable polymer may be a homopolymer, copolymer or terpolymer, or repeating monomer units linked by groups such as ester groups. The polymer may be a polyester, which may be composed of elements that are one or more hydroxycarboxylic acid units, where the distribution of elements may be random, blocked, paired or sequential. When the biodegradable polymer is a polyester, the polyesters include polylactide, polyglycolide and PLGA. In one aspect, the biodegradable polymer is polylactide, PLGA, or combinations thereof. Preferably, a suitable biodegradable polyester has a lactide:glycolide (L:G) (molar) ratio of 50:50 to 100:0, preferably 65:35 to 90:10, more preferably 75:25 to 85:15. Preferably, a suitable biodegradable polyester is 60:40 to 95:5 PLGA. More preferably, a suitable biodegradable is 70:30 to 90:10 PLGA. Even more preferably, the biodegradable polyester is 75:25 to 85:15 PLGA. Most preferably, the biodegradable polyester is PLGA 85:15. In one aspect, the biodegradable polymer has an average molecular weight of 50,000 to 150,000 Daltons.
Смесь (эмульсию) подвергают подходящему процессу экстракции растворителем с получением микрочастиц, в конечном итоге снижая уровни растворителя до приемлемого уровня. Термины "экстракт", "проведение экстракции" и "экстракция" в настоящем описании относятся к приведению смеси или эмульсии, содержащей поливиниловый спирт, биодеградируемый полимер, налтрексон и один или несколько растворителей, в контакт с экстракционной фазой. Один или несколько органических растворителей удаляют из смесей масляных частиц (эмульсии) в ходе процесса экстракции растворителем, а затем получают микрочастицы, содержащие полимер и налтрексон.The mixture (emulsion) is subjected to a suitable solvent extraction process to produce microparticles, ultimately reducing the solvent levels to an acceptable level. The terms "extract", "extraction" and "extraction" as used herein refer to bringing a mixture or emulsion containing polyvinyl alcohol, a biodegradable polymer, naltrexone and one or more solvents into contact with an extraction phase. One or more organic solvents are removed from oil particle mixtures (emulsions) through a solvent extraction process to produce microparticles containing the polymer and naltrexone.
Процесс экстракции растворителем включает по меньшей мере один процесс экстракции. Процесс экстракции (сначала) проводят для смеси (эмульсии) с экстракционной фазой с получением микрочастиц, где экстракционная фаза представляет собой воду или водный раствор. Водный раствор может включать по меньшей мере один компонент, выбранный из группы, состоящей из поливинилового спирта, дихлорметана, бензилового спирта и этилацетата. Предпочтительно, экстракционная фаза может представлять собой воду с 0-3% (масс./об.) по меньшей мере одним из компонентов, выбранным из группы, состоящей из поливинилового спирта, дихлорметана, бензилового спирта и этилацетата. Более предпочтительно, экстракционная фаза может представлять собой воду с 0~2% (масс./об.) поливинилового спирта, 0~1,8% (масс./об.) дихлорметана, 0~2% (масс./об.) бензилового спирта или 0~3% (масс./об.) этилацетата.The solvent extraction process includes at least one extraction process. The extraction process is (first) carried out on a mixture (emulsion) with the extraction phase to produce microparticles, where the extraction phase is water or an aqueous solution. The aqueous solution may include at least one component selected from the group consisting of polyvinyl alcohol, dichloromethane, benzyl alcohol and ethyl acetate. Preferably, the extraction phase may be water with 0-3% (w/v) of at least one component selected from the group consisting of polyvinyl alcohol, dichloromethane, benzyl alcohol and ethyl acetate. More preferably, the extraction phase may be water with 0~2% (w/v) polyvinyl alcohol, 0~1.8% (w/v) dichloromethane, 0~2% (w/v) benzyl alcohol or 0~3% (w/v) ethyl acetate.
Когда процесс экстракции растворителем включает два процесса экстракции, дополнительный (второй) экстракционный процесс можно проводить для микрочастиц с водным раствором этанола (его также называют этанольной экстракционной фазой или раствором этанола в настоящем описании). Этанольная экстракционная фаза представляет собой водный раствор приблизительно 1~50% (об./об.) этанола.When the solvent extraction process includes two extraction processes, an additional (second) extraction process can be performed on the microparticles with an aqueous ethanol solution (also referred to as an ethanol extraction phase or ethanol solution herein). The ethanol extraction phase is an aqueous solution of approximately 1~50% (v/v) ethanol.
Температуры каждого процесса экстракции могут находиться в диапазоне приблизительно 4~30°C. Предпочтительно первый процесс (водной) экстракции можно проводить в диапазоне температур приблизительно от 4 до 10°C. Предпочтительно, второй процесс (этанольной) экстракции можно проводить в диапазоне температур приблизительно от 20 до 30°C. Время экстракции может находиться в диапазоне приблизительно от 2 до 8 часов.The temperatures of each extraction process may be in the range of approximately 4~30°C. Preferably, the first (aqueous) extraction process can be carried out in a temperature range of about 4 to 10°C. Preferably, the second (ethanol) extraction process can be carried out in a temperature range of approximately 20 to 30°C. The extraction time may range from approximately 2 to 8 hours.
В одном аспекте после проведения процесса экстракции растворителем необязательно проводят сушку микрочастиц. Сушка может проводиться в вакууме при температуре в диапазоне приблизительно 4~30°C или посредством других процессов сушки, таких как лиофилизация. Когда процесс экстракции растворителем включает два процесса экстракции, между двумя процессами экстракции можно необязательно проводить дополнительный процесс сушки. Промежуточную сушку можно проводить в вакууме в диапазоне температур приблизительно 4~30°C.In one aspect, the microparticles are optionally dried after the solvent extraction process. Drying can be carried out under vacuum at a temperature in the range of approximately 4~30°C or through other drying processes such as lyophilization. When the solvent extraction process includes two extraction processes, an additional drying process may optionally be carried out between the two extraction processes. Intermediate drying can be carried out under vacuum in a temperature range of approximately 4~30°C.
Перед каждым процессом сушки способ включает процесс сбора микрочастиц из смеси (эмульсии), раствора, дисперсии и т.д. Процесс сбора проводят с использованием сит, имеющих различные размеры пор. Размеры пор сит находятся в диапазоне 10-200 мкм.Before each drying process, the method includes the process of collecting microparticles from a mixture (emulsion), solution, dispersion, etc. The collection process is carried out using sieves having different pore sizes. The pore sizes of the sieves are in the range of 10-200 microns.
Способ также необязательно может включать процесс ополаскивания после процесса экстракции растворителем. Когда способ включает процесс сбора, процесс ополаскивания можно проводить после сбора, но до сушки. Процесс ополаскивания может представлять собой процесс удаления остатков, таких как растворители, не вступившие в реакцию вещества и т.д., в рамках настоящего изобретения.The method may also optionally include a rinsing process after the solvent extraction process. When the method includes a collection process, the rinsing process can be carried out after collection but before drying. The rinsing process may be a process for removing residues such as solvents, unreacted substances, etc., within the scope of the present invention.
В одном варианте осуществления предусматривается инъекционный состав микрочастиц. В одном аспекте инъекционный состав микрочастиц получают способом по настоящему изобретению.In one embodiment, an injectable microparticle formulation is provided. In one aspect, an injectable microparticle formulation is prepared by the method of the present invention.
Инъекционный состав микрочастиц по настоящему изобретению содержит микрочастицы, включающие налтрексон и биодеградируемый полимер. Микрочастицы имеют профиль замедленного высвобождения налтрексона. В одном аспекте замедленное высвобождение налтрексона происходит в течение более чем 4 недель и вплоть до 100 дней. В другом аспекте замеленное высвобождение налтрексона происходит в течение от приблизительно 8 недель до приблизительно 12 недель. Микрочастица содержит приблизительно 20-40% (масс./масс.) налтрексона. Налтрексон может иметь форму свободного основания, соли, сольвата, сокристалла или их комбинаций.The injectable microparticle formulation of the present invention contains microparticles comprising naltrexone and a biodegradable polymer. The microparticles have a sustained release profile for naltrexone. In one aspect, sustained release of naltrexone occurs over a period of more than 4 weeks and up to 100 days. In another aspect, the sustained release of naltrexone occurs over a period of about 8 weeks to about 12 weeks. The microparticle contains approximately 20-40% (w/w) naltrexone. Naltrexone may be in the form of a free base, a salt, a solvate, a cocrystal, or combinations thereof.
Биодеградируемый полимер содержит полилактид, сополимер лактида и гликолида или их комбинации. Предпочтительно соотношение (молярное) лактид: гликолид (L:G) для биодеградируемого полимера может составлять от 50:50 до 100:0, предпочтительно от 65:35 до 90:10, более предпочтительно от 75:25 до 85:15. Молекулярная масса биодеградируемого полимера может составлять от 50000 Дальтон до 150000 Дальтон.The biodegradable polymer contains polylactide, a copolymer of lactide and glycolide, or combinations thereof. Preferably, the lactide:glycolide (L:G) ratio (molar) for the biodegradable polymer may be from 50:50 to 100:0, preferably from 65:35 to 90:10, more preferably from 75:25 to 85:15. The molecular weight of the biodegradable polymer can range from 50,000 Dalton to 150,000 Dalton.
В предпочтительном варианте осуществления инъекционные микрочастицы налтрексона содержат налтрексон в PLGA 85:15 с молекулярной массой по меньшей мере 50000 Дальтон, такие как микрочастицы, описанные ниже в примерах. Предпочтительно молекулярная масса PLGA составляет от 50000 Дальтон до 150000 Дальтон.In a preferred embodiment, the injectable naltrexone microparticles contain naltrexone in PLGA 85:15 with a molecular weight of at least 50,000 Daltons, such as the microparticles described below in the examples. Preferably, the molecular weight of PLGA is from 50,000 Dalton to 150,000 Dalton.
В одном предпочтительном варианте осуществления налтрексон присутствует в составе длительного действия в количестве по меньшей мере приблизительно 20% по массе, предпочтительно по меньшей мере приблизительно 30% по массе, более предпочтительно по меньшей мере приблизительно 35% по массе, как например, приблизительно 40% по массе налтрексона в расчете на общую массу состава. В одном аспекте налтрексон присутствует в составе длительного действия в количестве приблизительно 20-40% (масс./масс.).In one preferred embodiment, naltrexone is present in the long-acting formulation in an amount of at least about 20% by weight, preferably at least about 30% by weight, more preferably at least about 35% by weight, such as about 40% by weight weight of naltrexone based on the total weight of the composition. In one aspect, naltrexone is present in the long-acting formulation in an amount of approximately 20-40% (w/w).
Микрочастицы можно получать в диапазоне распределения размеров для подкожной и/или внутримышечной инъекции с использованием игл тоньше 20 G. Диаметр, форму, морфологию и пористость частиц можно модифицировать так, чтобы контролировать характеристики высвобождения и позволить прохождение через шприц и иглу. Нагруженные налтрексоном микрочастицы могут иметь распределение размера частиц в диапазоне от 1 до 200 мкм. Более предпочтительно, распределение размера частиц может иметь диапазон приблизительно 10~125 мкм. Еще более предпочтительно распределение размера частиц может иметь диапазон приблизительно 25~100 мкм. В одном аспекте микрочастицы имеют средний размер частиц в диапазоне от 25 до 125 мкм.Microparticles can be produced in a range of size distributions for subcutaneous and/or intramuscular injection using needles finer than 20 G. The diameter, shape, morphology and porosity of the particles can be modified to control the release characteristics and allow passage through the syringe and needle. Naltrexone-loaded microparticles can have a particle size distribution ranging from 1 to 200 μm. More preferably, the particle size distribution may have a range of approximately 10~125 μm. Even more preferably, the particle size distribution may have a range of approximately 25~100 μm. In one aspect, the microparticles have an average particle size in the range of 25 to 125 microns.
В одном варианте осуществления предусматривается способ инъекции биодеградируемых микрочастиц. Способ включает инъекцию текучей композиции, содержащей биодеградируемые микрочастицы в приемлемом (биосовместимом) носителе. Приемлемый (биосовместимый) носитель включает носитель на водной основе, носитель на масляной основе или их комбинацию. Предпочтительно, приемлемым носителем является система на водной основе. Эта система на водной основе содержит модифицирующее тоничность средство, такое как хлорид натрия, усиливающее вязкость вещество, такое как натрий карбоксиметилцеллюлоза, смачивающее вещество, такое как полисорбат, или их комбинации. В одном аспекте система на водной основе может состоять из смачивающих веществ, таких как полисорбат 20, и усиливающих вязкость веществ, таких как натрий карбоксиметилцеллюлоза, гиалуроновая кислота и т.п. Другим приемлемым носителем может быть носитель на масляной основе, который также может выступать в качестве ограничителя скорости поглощения воды и/или диффузионного барьера, таким образом, изменяя скорость высвобождения либо путем ограничения первоначального высвобождения, либо путем снижения скорости стационарного состояния. Биосовместимый масляный носитель включает арахисовое масло, касторовое масло, кунжутное масло, подсолнечное масло, соевое масло, кукурузное масло, хлопковое масло или любую их комбинацию. В одном аспекте подходящий приемлемый носитель может представлять собой комбинацию носителя на водной основе и носителя на масляной основе. Микрочастицы можно вводить подкожно или внутримышечно.In one embodiment, a method of injecting biodegradable microparticles is provided. The method involves injecting a fluid composition containing biodegradable microparticles in an acceptable (biocompatible) carrier. An acceptable (biocompatible) carrier includes a water-based carrier, an oil-based carrier, or a combination thereof. Preferably, a suitable carrier is an aqueous based system. This water-based system contains a tonicity modifying agent such as sodium chloride, a viscosity enhancer such as sodium carboxymethylcellulose, a wetting agent such as polysorbate, or combinations thereof. In one aspect, the water-based system may consist of wetting agents such as
В одном варианте осуществления состав с контролируемым высвобождением обеспечивает терапевтически полезные количества налтрексона у индивидуума в течение периода, составляющего по меньшей мере 4 недели, предпочтительно по меньшей мере 6 недель, более предпочтительно по меньшей мере 8 или более недель.In one embodiment, the controlled release formulation provides therapeutically beneficial amounts of naltrexone to an individual over a period of at least 4 weeks, preferably at least 6 weeks, more preferably at least 8 or more weeks.
В одном предпочтительном варианте осуществления длительность действия налтрексона при использовании той же дозы (380 мг налтрексона), что и в Vivitrol, обеспечивает терапевтически полезные количества налтрексона в течение более чем 4 недель, предпочтительно в течение 6 недель, более предпочтительно в течение 8 недель, и еще более предпочтительно в течение 12 недель.In one preferred embodiment, the duration of action of naltrexone, using the same dose (380 mg of naltrexone) as in Vivitrol, provides therapeutically useful amounts of naltrexone for more than 4 weeks, preferably for 6 weeks, more preferably for 8 weeks, and even more preferably within 12 weeks.
В одном варианте осуществления предусматривается способ лечения или предупреждения заболеваний, связанных со злоупотреблением или передозировкой опиоидами, алкогольной зависимостью или болью, посредством налтрексона или метаболита. Способ включает введение пациенту (индивидууму), нуждающемуся в таком лечении или предупреждении, эффективного количества микрочастиц, содержащих налтрексон, состава микрочастиц, содержащего микрочастицы, или композиции, содержащей микрочастицы или состав микрочастиц.In one embodiment, a method is provided for treating or preventing diseases associated with opioid abuse or overdose, alcohol dependence, or pain through naltrexone or a metabolite. The method includes administering to a patient in need of such treatment or prevention an effective amount of microparticles containing naltrexone, a microparticle composition containing microparticles, or a composition containing microparticles or a microparticle composition.
В другом варианте осуществления предусматривается композиция, содержащая инъекционный состав микрочастиц. Композиция может содержать биосовместимый носитель, где биосовместимый носитель включает носитель на водной основе, носитель на масляной основе или оба из них. В одном аспекте композицию составляют для инъекции(й).In another embodiment, a composition is provided comprising an injectable microparticle formulation. The composition may contain a biocompatible carrier, where the biocompatible carrier includes a water-based carrier, an oil-based carrier, or both. In one aspect, the composition is formulated for injection(s).
В одном варианте осуществления предусматривается композиция, содержащая инъекционный состав микрочастиц для применения для лечения или предупреждения заболеваний, связанных со злоупотреблением или передозировкой опиоидами, алкогольной зависимостью или болью. Композиция может содержать биосовместимый носитель, где биосовместимый носитель включает носитель на водной основе, носитель на масляной основе или оба из них. В одном аспекте композицию составляют для инъекции(й).In one embodiment, a composition is provided comprising an injectable microparticle formulation for use in the treatment or prevention of diseases associated with opioid abuse or overdose, alcohol dependence, or pain. The composition may contain a biocompatible carrier, where the biocompatible carrier includes a water-based carrier, an oil-based carrier, or both. In one aspect, the composition is formulated for injection(s).
В других вариантах осуществления предусматривается применение инъекционного состава микрочастиц для лечения или предупреждения заболеваний, связанных со злоупотреблением или передозировками опиоидами, злоупотреблением алкоголем или болью.In other embodiments, an injectable microparticle formulation is used to treat or prevent diseases associated with opioid abuse or overdose, alcohol abuse, or pain.
В другом варианте осуществления предусматривается применение инъекционного состава микрочастиц для получения лекарственного средства для лечения или предупреждения заболеваний, связанных со злоупотреблением или передозировками опиоидами, алкогольной зависимостью или болью.In another embodiment, an injectable microparticle formulation is used to produce a medicament for the treatment or prevention of diseases associated with opioid abuse or overdose, alcohol dependence, or pain.
Профиль высвобождения может варьироваться в зависимости от соотношения L:G, молекулярной массы, концевой группы и полидисперсности биодеградируемого биосовместимого полимера PLGA, остаточного содержания растворителя, способа производства, а также других факторов. Во-вторых, профиль высвобождения может варьироваться между условиями in vitro и in vivo вследствие таких факторов, как температурные различия между экспериментами in vitro и in vivo, различия между средой высвобождения и интерстициальной жидкостью, и/или носитель, используемый для введения.The release profile may vary depending on the L:G ratio, molecular weight, end group and polydispersity of the biodegradable biocompatible PLGA polymer, residual solvent content, production method, and other factors. Second, the release profile may vary between in vitro and in vivo conditions due to factors such as temperature differences between in vitro and in vivo experiments, differences between the release environment and interstitial fluid, and/or the vehicle used for administration.
Вследствие предоставления микрочастиц, которые имеют способность к высвобождению в течение более чем 4 недель, в частности, приблизительно от 8 до 12 недель (или 100 суток), индивидуумам будет проводиться меньше инъекций и будет требоваться меньшей посещений кабинета врача. Микрочастицы по настоящему изобретению демонстрируют образцовое замедленное высвобождение налтрексона в условиях как in vivo, так и in vitro. Для обеспечения лучшего соблюдения пациентом режима лечения можно модифицировать размер микрочастиц и/или количество налтрексона.By providing microparticles that have the ability to be released over more than 4 weeks, particularly about 8 to 12 weeks (or 100 days), individuals will receive fewer injections and require fewer visits to the physician's office. The microparticles of the present invention demonstrate exemplary sustained release of naltrexone under both in vivo and in vitro conditions. The microparticle size and/or amount of naltrexone can be modified to improve patient compliance.
Следующие примеры приведены в качестве иллюстрации и не должны истолковываться как ограничение.The following examples are provided for illustrative purposes only and should not be construed as limitations.
ПРИМЕРЫEXAMPLES
Пример 1Example 1
Эффект переработки PLGA 75:25Effect of PLGA 75:25 recycling
Непрерывную фазу получали путем отвешивания 40 г поливинилового спирта (PVA) (Mowiol 40-88, Sigma Aldrich, St. Louis, MO) и смешения с 4 л деионизированной воды. Органическая фаза состояла из 500 мг PLGA 75:25 (Resomer RG756S) и 267 мг свободного основания налтрексона (Tecoland Corporation, Irvine, CA), растворенного в 1,333 г дихлорметана (DCM) (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ), и 623 мг бензилового спирта (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) в сцинтилляционном флаконе объемом 20 мл, или 500 мг PLGA 75:25 (Resomer RG756S) и 294 мг свободного основания налтрексона (Tecoland Corporation, Irvine, CA), растворенного в 1,333 г дихлорметана (DCM) (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ), и 623 мг бензилового спирта (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) в сцинтилляцонном флаконе объемом 20 мл. 10 мл непрерывной фазы добавляли на органическую фазу и гомогенизировали при 7000 об/мин в течение 60 с с использованием гомогенизатора IKA T25 с генератором S25N - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). Затем смесь переносили в экстракционную фазу, которая представляла собой 380 мл 1% (масс./об.) PVA в воде, и перемешивали при 4°C в течение 8 ч. Затем микрочастицы собирали с использованием 25-мкм сита. Продукт, удержанный на сите, обезвоживали в течение 15 мин при 22°C и подвергали вакуумной сушке в течение приблизительно 16 ч. Затем микрочастицы суспендировали и промывали 200 мл 25% (об./об.) раствора этанола в течение 8 ч при 22°C для удаления эмульгатора (PVA) и каких-либо остаточных растворителей из микрочастиц. Затем промытые микрочастицы собирали на 25-мкм сито и подвергали вакуумной сушке в течение 48 ч.The continuous phase was prepared by weighing out 40 g of polyvinyl alcohol (PVA) (Mowiol 40-88, Sigma Aldrich, St. Louis, MO) and mixing with 4 L of deionized water. The organic phase consisted of 500 mg PLGA 75:25 (Resomer RG756S) and 267 mg naltrexone free base (Tecoland Corporation, Irvine, CA) dissolved in 1.333 g dichloromethane (DCM) (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ), and 623 mg benzyl alcohol (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) in a 20 mL scintillation vial, or 500 mg PLGA 75:25 (Resomer RG756S) and 294 mg naltrexone free base (Tecoland Corporation, Irvine, CA) dissolved in 1.333 g dichloromethane ( DCM) (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ), and 623 mg benzyl alcohol (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) in a 20 ml scintillation vial. 10 mL of the continuous phase was added to the organic phase and homogenized at 7000 rpm for 60 s using an IKA T25 homogenizer with an S25N - 10G generator (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). The mixture was then transferred to the extraction phase, which was 380 ml of 1% (w/v) PVA in water, and stirred at 4°C for 8 hours. The microparticles were then collected using a 25 μm sieve. The product retained on the sieve was dehydrated for 15 min at 22°C and vacuum dried for approximately 16 h. The microparticles were then suspended and washed with 200 ml of 25% (v/v) ethanol solution for 8 h at 22°C. C to remove emulsifier (PVA) and any residual solvents from the microparticles. The washed microparticles were then collected on a 25-μm sieve and vacuum dried for 48 h.
Эти два состава оценивали в фармакокинетических испытаниях на крысах Sprague-Dawley в дозе 38 мг/кг.These two formulations were evaluated in pharmacokinetic studies in Sprague-Dawley rats at a dose of 38 mg/kg.
Конечная нагрузка лекарственным средством и остаточное содержание бензилового спирта представлены в таблице 1. Оба состава обеспечили эффективность инкапсулирования приблизительно 90%, но с высвобождением только приблизительно в течение 4-5 недель, причем более высокая нагрузка лекарственным средством приводила к более быстрой кинетике. Уровень корреляции in vitro-in vivo указан на фиг. 2 для F.1-1, в то время как тест in vitro прогнозирует более быстрый ответ in vivo, чем ответ, наблюдаемый для F.1-2.The final drug loading and residual benzyl alcohol content are presented in Table 1. Both formulations provided approximately 90% encapsulation efficiency, but with release only occurring over approximately 4-5 weeks, with higher drug loading resulting in faster kinetics. The level of in vitro-in vivo correlation is indicated in FIG. 2 for F.1-1, while the in vitro test predicts a faster in vivo response than the response observed for F.1-2.
Таблица 1. Обобщение составления для примера 1Table 1. Compilation summary for Example 1
Нагрузка лекарственным средством (% масс./масс.) указывает на количество налтрексона, содержащееся в микрочастицах, и EE (%) указывает на конечное количество оставшегося налтрексона по сравнению с начальным количеством налтрексона при получении микрочастиц.Drug load (% w/w) indicates the amount of naltrexone contained in the microparticles, and EE (%) indicates the final amount of naltrexone remaining compared to the initial amount of naltrexone when receiving the microparticles.
Пример 2Example 2
Эффект молекулярной массы и поставщика PLGA 75:25Effect of molecular weight and supplier PLGA 75:25
Непрерывную фазу получали путем отвешивания 40 г поливинилового спирта (PVA) (Mowiol 40-88, Sigma Aldrich, St. Louis, MO) и смешения с 4 л деионизированной воды. Органическая фаза состояла из 500 мг PLGA 75:25 (Resomer RG756S) и 267 мг свободного основания налтрексона (Tecoland Corporation, Irvine, CA), растворенного в 1,333 г дихлорметана (DCM) (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ), и 623 мг бензилового спирта (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) в сцинтилляционном флаконе объемом 20 мл. 10 мл непрерывной фазы добавляли на органическую фазу и гомогенизировали при 7000 об/мин в течение 60 с с использованием гомогенизатора IKA T25 с генератором S25N - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). Затем смесь переносили в экстракционную фазу, которая представляла собой 380 мл деионизированной воды и перемешивали при 4°C в течение 8 ч. Затем микрочастицы собирали с использованием 25-мкм сита. Продукт, удержанный на сите, обезвоживали в течение 15 мин при 22°C и подвергали вакуумной сушке в течение приблизительно 16 ч. Затем микрочастицы суспендировали и промывали 200 мл 25% (об./об.) раствора этанола в течение 8 ч при 22°C для удаления эмульгатора (PVA) и каких-либо остаточных растворителей из микрочастиц. Затем промытые микрочастицы собирали на 25-мкм сито и подвергали вакуумной сушке в течение 48 ч.The continuous phase was prepared by weighing out 40 g of polyvinyl alcohol (PVA) (Mowiol 40-88, Sigma Aldrich, St. Louis, MO) and mixing with 4 L of deionized water. The organic phase consisted of 500 mg PLGA 75:25 (Resomer RG756S) and 267 mg naltrexone free base (Tecoland Corporation, Irvine, CA) dissolved in 1.333 g dichloromethane (DCM) (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ), and 623 mg benzyl alcohol (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) in a 20-ml scintillation vial. 10 mL of the continuous phase was added to the organic phase and homogenized at 7000 rpm for 60 s using an IKA T25 homogenizer with an S25N - 10G generator (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). The mixture was then transferred to the extraction phase, which was 380 ml of deionized water and stirred at 4°C for 8 hours. The microparticles were then collected using a 25 μm sieve. The product retained on the sieve was dehydrated for 15 min at 22°C and vacuum dried for approximately 16 h. The microparticles were then suspended and washed with 200 ml of 25% (v/v) ethanol solution for 8 h at 22°C. C to remove emulsifier (PVA) and any residual solvents from the microparticles. The washed microparticles were then collected on a 25-μm sieve and vacuum dried for 48 h.
Конечная нагрузка лекарственным средством и остаточное содержание бензилового спирта представлены в таблице 2.The final drug load and residual benzyl alcohol content are presented in Table 2.
Resomer RG 750 и 756 приводили к сходной нагрузке лекарственным средством и профилям высвобождения, вероятно вследствие сходной присущей вязкости, причем RG 750 имел более широкий диапазон. Resomer RG 755 и Lactel B6007-1, с практически сходными присущими характеристиками вязкости также приводили сходной нагрузке лекарственным средством и профилям высвобождения. Хотя и вызывая сходную нагрузку лекарственным средством с другими протестированными PLGA, Lactel B6007-2 приводил к профилю высвобождения со значительно более быстрой кинетикой. Составы с F.2-1 по F.2-5 обеспечивали профили высвобождения лекарственного средства в течение приблизительно 30-35 суток.Resomer RG 750 and 756 resulted in similar drug loading and release profiles, likely due to similar inherent viscosity, with RG 750 having a broader range. Resomer RG 755 and Lactel B6007-1, with substantially similar inherent viscosity characteristics, also resulted in similar drug loading and release profiles. Although producing similar drug loading to other PLGAs tested, Lactel B6007-2 resulted in a release profile with significantly faster kinetics. Formulations F.2-1 to F.2-5 provided drug release profiles for approximately 30-35 days.
Таблица 2. Обобщение составления для составов, изготовленных с 75:25 PLGATable 2. Formulation Summary for Formulations Made with 75:25 PLGA
Пример 3Example 3
Получение микрочастиц налтрексона: состав 3Preparation of naltrexone microparticles: composition 3
Непрерывную фазу получали путем отвешивания 40 г поливинилового спирта (PVA) (Mowiol 40-88, Sigma Aldrich, St. Louis, MO) и смешения с 4 л деионизированной воды. Органическая фаза состояла из 500 мг PLGA 85:15 (Resomer RG 858S Evonik Cyro, Parsippany, NJ) и 294 мг свободного основания налтрексона (Tecoland Corporation, Irvine, CA), растворенного в 2,0 г дихлорметана (DCM) (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ), и 467 мг бензилового спирта (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) в сцинтилляционном флаконе объемом 20 мл. Непрерывную фазу далее смешивали с DCM и 10 мл непрерывной фазы с 1,8% (масс./об.) DCM добавляли на органическую фазу и гомогенизировали при 7000 об/мин в течение 60 с с использованием гомогенизатора IKA T25 с генератором S25N - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). Затем смесь переносили в экстракционную фазу, которая представляла собой 380 мл деионизированной воды с 0,5% масс./об. DCM и перемешивали при 4°C в течение 8 ч. Затем микрочастицы собирали с использованием 25-мкм сита. Продукт, удержанный на сите, обезвоживали в течение 15 мин при 22°C и подвергали вакуумной сушке в течение приблизительно 16 ч. Затем микрочастицы суспендировали и промывали 200 мл 25% (об./об.) раствора этанола в течение 8 ч при 22°C для удаления эмульгатора (PVA) и каких-либо остаточных растворителей из микрочастиц. Затем промытые микрочастицы собирали на 25-мкм сито и подвергали вакуумной сушке в течение 48 ч.The continuous phase was prepared by weighing out 40 g of polyvinyl alcohol (PVA) (Mowiol 40-88, Sigma Aldrich, St. Louis, MO) and mixing with 4 L of deionized water. The organic phase consisted of 500 mg PLGA 85:15 (Resomer RG 858S Evonik Cyro, Parsippany, NJ) and 294 mg naltrexone free base (Tecoland Corporation, Irvine, CA) dissolved in 2.0 g dichloromethane (DCM) (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ), and 467 mg benzyl alcohol (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) in a 20 mL scintillation vial. The continuous phase was further mixed with DCM and 10 ml of continuous phase with 1.8% (w/v) DCM was added to the organic phase and homogenized at 7000 rpm for 60 s using an IKA T25 homogenizer with an S25N - 10G generator ( IKA Works, Inc. Wilmington, NC). The mixture was then transferred to the extraction phase, which was 380 ml of deionized water with 0.5% w/v. DCM and stirred at 4°C for 8 hours. The microparticles were then collected using a 25 μm sieve. The product retained on the sieve was dehydrated for 15 min at 22°C and vacuum dried for approximately 16 h. The microparticles were then suspended and washed with 200 ml of 25% (v/v) ethanol solution for 8 h at 22°C. C to remove emulsifier (PVA) and any residual solvents from the microparticles. The washed microparticles were then collected on a 25-μm sieve and vacuum dried for 48 h.
Конечная нагрузка лекарственным средством составляла 28,1% (75,9% EE) и остаточное количество бензилового спирта составляло 0,55%. Профиль высвобождения лекарственного средства in vitro практически нулевую кинетику высвобождения в течение приблизительно 50 суток.The final drug load was 28.1% (75.9% EE) and the residual benzyl alcohol was 0.55%. The drug release profile in vitro has virtually zero release kinetics for approximately 50 days.
Пример 4Example 4
Получение микрочастиц налтрексона: состав 4Preparation of naltrexone microparticles: composition 4
Непрерывную фазу получали путем отвешивания 40 г PVA и смешения с 4 л деионизированной воды. Органическая фаза состояла из 500 мг PLGA 85:15 (Resomer RG 858S Evonik Cyro, Parsippany, NJ) и 294 мг свободного основания налтрексона (Tecoland Corporation, Irvine, CA), растворенного в 2,0 г дихлорметана (DCM) (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ), и 623 мг бензилового спирта (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) в сцинтилляционном флаконе объемом 20 мл. Непрерывную фазу далее смешивали с DCM и 10 мл непрерывной фазы с 1,8% (масс./об.) DCM добавляли на органическую фазу и гомогенизировали при 7000 об/мин в течение 60 с с использованием гомогенизатора IKA T25 с генератором S25N - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). Затем смесь переносили в экстракционную фазу, которая представляла собой 380 мл деионизированной воды с 0,66% масс./об. DCM, при 4°C. Затем микрочастицам позволяли перемешаться в течение 8 ч, а затем собирали с использованием 23-мкм сита. Затем микрочастицы собирали с использованием 25-мкм сита. Продукт, удержанный на сите, обезвоживали в течение 15 мин при 22°C и подвергали вакуумной сушке в течение приблизительно 16 ч. Затем микрочастицы суспендировали и промывали 200 мл 25% (об./об.) раствора этанола в течение 8 ч при 22°C для удаления эмульгатора (PVA) и каких-либо остаточных растворителей из микрочастиц. Затем промытые микрочастицы пропускали через 125-мкм сито, собирали на 23-мкм сито и подвергали вакуумной сушке в течение 48 ч.The continuous phase was prepared by weighing out 40 g of PVA and mixing with 4 L of deionized water. The organic phase consisted of 500 mg PLGA 85:15 (Resomer RG 858S Evonik Cyro, Parsippany, NJ) and 294 mg naltrexone free base (Tecoland Corporation, Irvine, CA) dissolved in 2.0 g dichloromethane (DCM) (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ), and 623 mg benzyl alcohol (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) in a 20 mL scintillation vial. The continuous phase was further mixed with DCM and 10 ml of continuous phase with 1.8% (w/v) DCM was added to the organic phase and homogenized at 7000 rpm for 60 s using an IKA T25 homogenizer with an S25N - 10G generator ( IKA Works, Inc. Wilmington, NC). The mixture was then transferred to the extraction phase, which was 380 ml of deionized water with 0.66% w/v. DCM, at 4°C. The microparticles were then allowed to mix for 8 h and then collected using a 23 μm sieve. The microparticles were then collected using a 25-μm sieve. The product retained on the sieve was dehydrated for 15 min at 22°C and vacuum dried for approximately 16 h. The microparticles were then suspended and washed with 200 ml of 25% (v/v) ethanol solution for 8 h at 22°C. C to remove emulsifier (PVA) and any residual solvents from the microparticles. The washed microparticles were then passed through a 125-μm sieve, collected on a 23-μm sieve, and vacuum dried for 48 h.
Конечная нагрузка лекарственным средством составляла 21,7% (58,6% EE) и остаточное количество бензилового спирта составляло 0,83%. Более высокое количество (0,66% (масс./об.) DCM в экстракционной фазе и более высокое исходное содержание бензилового спирта в органической фазе значительно снижало нагрузку лекарственным средством в составе. Профиль высвобождения лекарственного средства in vitro приводил к кинетике высвобождения практически нулевого порядка в течение приблизительно 60 суток.The final drug load was 21.7% (58.6% EE) and the residual benzyl alcohol was 0.83%. The higher amount (0.66% (w/v)) of DCM in the extraction phase and the higher initial benzyl alcohol content in the organic phase significantly reduced the drug loading of the formulation. The in vitro drug release profile resulted in nearly zero-order release kinetics for approximately 60 days.
Пример 5Example 5
Получение микрочастиц налтрексона: эффект растворителя в эмульгирующей средеPreparation of naltrexone microparticles: solvent effect in an emulsifying medium
Непрерывную фазу получали путем отвешивания 40 г PVA и смешения с 4 л деионизированной воды. Органическая фаза состояла из 1,0 г PLGA 85:15 (Resomer RG 858S) и 818 мг свободного основания налтрексона (SpecGx, LLC), растворенного в 4,0 г DCM и 1,908 г бензилового спирта, в сцинтилляционном флаконе объемом 20 мл, или 1,0 г PLGA 85:15 (Resomer RG 858S) и 818 мг свободного основания налтрексона (SpecGx, LLC), растворенного в 4,0 г DCM и 1,04 г бензилового спирта, в сцинтилляционном флаконе объемом 20 мл. 15 мл непрерывной фазы далее смешивали с DCM или бензиловым спиртом (ВА) (описано в таблице 3) и непрерывную фазу добавляли на органическую фазу и гомогенизировали при 7000 об/мин в течение 60 с с использованием гомогенизатора IKA Т25 с генератором S25N - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). Затем смесь переносили в 7 60 мл экстракционной фазы (описанной в таблице 3) и перемешивали при 4°С в течение 4 ч. Затем микрочастицы собирали с использованием 25-мкм сита. Продукт, удержанный на сите, обезвоживали в течение 15 мин при 22°С и подвергали вакуумной сушке в течение приблизительно 16 ч. Затем микрочастицы суспендировали и промывали 400 мл 25% (об./об.) раствора этанола в течение 8 ч при 22°С для удаления эмульгатора (PVA) и каких-либо остаточных растворителей из микрочастиц. Затем промытые микрочастицы пропускали через 125- мкм сито, собирали на 23-мкм сито и подвергали вакуумной сушке в течение 48 ч.The continuous phase was prepared by weighing out 40 g of PVA and mixing with 4 L of deionized water. The organic phase consisted of 1.0 g PLGA 85:15 (Resomer RG 858S) and 818 mg naltrexone free base (SpecGx, LLC) dissolved in 4.0 g DCM and 1.908 g benzyl alcohol in a 20 mL scintillation vial, or 1.0 g PLGA 85:15 (Resomer RG 858S) and 818 mg naltrexone free base (SpecGx, LLC) dissolved in 4.0 g DCM and 1.04 g benzyl alcohol in a 20 mL scintillation vial. 15 ml of the continuous phase was further mixed with DCM or benzyl alcohol (BA) (described in Table 3) and the continuous phase was added to the organic phase and homogenized at 7000 rpm for 60 s using an IKA T25 homogenizer with an S25N - 10G generator (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). The mixture was then transferred to 7 60 ml of extraction phase (described in Table 3) and stirred at 4°C for 4 hours. The microparticles were then collected using a 25 μm sieve. The product retained on the sieve was dehydrated for 15 min at 22°C and vacuum dried for approximately 16 h. The microparticles were then suspended and washed with 400 ml of 25% (v/v) ethanol solution for 8 h at 22°C. C to remove emulsifier (PVA) and any residual solvents from microparticles. The washed microparticles were then passed through a 125-μm sieve, collected on a 23-μm sieve, and vacuum dried for 48 hours.
Конечная нагрузка лекарственным средством и остаточное содержание бензилового спирта могут быть найдены в таблице 3. Повышение остаточного содержания бензилового спирта наблюдают в случае большего исходного количества бензилового спирта. Может быть достигнута эффективность инкапсулирования 80-90%.The final drug loading and residual benzyl alcohol content can be found in Table 3. An increase in residual benzyl alcohol content is observed in case of a larger initial amount of benzyl alcohol. An encapsulation efficiency of 80-90% can be achieved.
Дихлорметан в экстракционной среде приводит к более низкому остаточному содержанию бензилового спирта для этого примера, хотя налтрексон также утрачивается в ходе этого процесса. Как оказалось, кривые высвобождения лекарственного средства не демонстрируют отличий в высвобождении между 3,3% ВА (бензиловый спирт) в 1% PVA против 1% PVA отдельно. 1,8% DCM в 1% PVA первоначально демонстрировал несколько более низкую скорость высвобождения вследствие более низкой нагрузки лекарственным средством.Dichloromethane in the extraction medium results in a lower residual benzyl alcohol content for this example, although naltrexone is also lost during this process. The drug release curves were found to show no difference in release between 3.3% VA (benzyl alcohol) in 1% PVA versus 1% PVA alone. 1.8% DCM in 1% PVA initially showed a slightly lower release rate due to the lower drug load.
Таблица 3. Эффекты композиций непрерывной фазы и экстракционной фазы на конечную нагрузку лекарственным средством, остаточное содержание бензилового спирта (ВА) и эффективность инкапсулирования (ЕЕ).Table 3. Effects of continuous phase and extraction phase formulations on final drug loading, residual benzyl alcohol (BA) and encapsulation efficiency (EE).
Пример 6Example 6
Получение микрочастиц налтрексона: эффект соотношения масло/водаPreparation of Naltrexone Microparticles: Effect of Oil/Water Ratio
Непрерывную фазу получали путем отвешивания 40 г PVA и смешения с 4 л деионизированной воды. Органическая фаза состояла из 0, 630 г PLGA 85:15 (Resomer RG 858S) и 370 мг свободного основания налтрексона (SpecGx, LLC), растворенного в 3,15 г этилацетата (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) и 1,17 г бензилового спирта, в сцинтилляционном флаконе объемом 20 мл. Непрерывную фазу далее смешивали с этилацетатом, и 20 мл непрерывной органической фазы с 6,525% (масс./об.) этилацетата эмульгировали с органической фазой при 4000 или 7000 об/мин в течение 30 с с использованием гомогенизатора IKA T25 с генератором S25N - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). Затем смесь переносили в экстракционную фазу, которая представляла собой 250 мл 2,5% (масс./об.) этилацетата в воде и перемешивали при 4°C в течение 2 или 4 ч. Затем микрочастицы собирали с помощью 10-мкм сита и сушили при 4°C в вакууме в течение приблизительно 16 ч. Затем микрочастицы суспендировали и промывали 150 мл a 25% раствора (об./об.) этанола в течение 8 ч при 22°C для удаления эмульгатора (PVA) и каких-либо остаточных растворителей из микрочастиц. Затем промытые микрочастицы пропускали через 150-мкм и собирали на 10-мкм сито и подвергали вакуумной сушке в течение 48 ч.The continuous phase was prepared by weighing out 40 g of PVA and mixing with 4 L of deionized water. The organic phase consisted of 0.630 g PLGA 85:15 (Resomer RG 858S) and 370 mg naltrexone free base (SpecGx, LLC) dissolved in 3.15 g ethyl acetate (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) and 1.17 g benzyl alcohol, in a 20 ml scintillation vial. The continuous phase was further mixed with ethyl acetate, and 20 ml of the continuous organic phase with 6.525% (w/v) ethyl acetate was emulsified with the organic phase at 4000 or 7000 rpm for 30 s using an IKA T25 homogenizer with an S25N - 10G generator ( IKA Works, Inc. Wilmington, NC). The mixture was then transferred to the extraction phase, which was 250 ml of 2.5% (w/v) ethyl acetate in water and stirred at 4°C for 2 or 4 hours. The microparticles were then collected using a 10 μm sieve and dried at 4°C under vacuum for approximately 16 hours. The microparticles were then suspended and washed with 150 ml of 25% (v/v) ethanol for 8 hours at 22°C to remove the emulsifier (PVA) and any residual microparticle solvents. The washed microparticles were then passed through a 150-μm sieve and collected on a 10-μm sieve and vacuum dried for 48 h.
Конечная нагрузка лекарственным средством и остаточное содержание бензилового спирта могут быть найдены в таблице 4.The final drug loading and residual benzyl alcohol content can be found in Table 4.
Эффективность инкапсулирования оказалась более низкой, чем в составах, полученных в сходных условиях с дихлорметаном. Минимальные отличия наблюдают в профилях высвобождения in vitro для трех составов, причем все составы имели длительность действия немного более чем приблизительно 55 суток.The encapsulation efficiency was lower than in formulations obtained under similar conditions with dichloromethane. Minimal differences were observed in the in vitro release profiles of the three formulations, with all formulations having a duration of action of slightly more than approximately 55 days.
Таблица 4. Эффекты соотношения O/W, скорости гомогенизации и времени экстракции растворителем на конечную нагрузку лекарственным средством, остаточное содержание бензилового спирта (BA) и эффективность инкапсулирования (EE).Table 4. Effects of O/W ratio, homogenization rate, and solvent extraction time on final drug loading, residual benzyl alcohol (BA), and encapsulation efficiency (EE).
Пример 7.Example 7.
Определение молекулярной массы PLGA с использованием четырехкомпонентного детектора гель-фильтрацииDetermination of the molecular weight of PLGA using a four-component gel filtration detector
Образцы Resomer RG 858S и Lactel B6006-2P растворяли в ацетоне до концентрации приблизительно 2,5 мг/мл, фильтровали через 0,22-мкм фильтр из PTFE и собирали в емкость автоматического пробоотборника ВЭЖХ для инжектирования. Образцы анализировали с использованием GPC-4D. Система GPC-4D состояла из Agilent 1260 Infinity II HPLC, подсоединенной к Dawn Heleos II (MALLS), соединенный с Dynapro Nanostar DLS через оптический кабель, Optilab T-rEX (детектор RI) и вискозиметром Viscostar III, работающим с использованием программного обеспечения Astra 7. Анализ GPC проводили путем инжектирования 50,0 мкл раствора полимера. Разделение проводили с использованием колонки с линейным градиентом (Tosoh Bioscience LLC, TSKgel GMHHR-L, 7,8 мм × 30 см) при скорости потока ацетона 0,6 мл/мин с временем пробега 60 минут. Молекулярная масса образцов полимеров представлена в таблице 5.Samples of Resomer RG 858S and Lactel B6006-2P were dissolved in acetone to a concentration of approximately 2.5 mg/mL, filtered through a 0.22-μm PTFE filter, and collected into an HPLC autosampler bottle for injection. Samples were analyzed using GPC-4D. The GPC-4D system consisted of an Agilent 1260 Infinity II HPLC connected to a Dawn Heleos II (MALLS), connected to a Dynapro Nanostar DLS via optical cable, an Optilab T-rEX (RI detector) and a Viscostar III viscometer running using Astra 7 software The GPC assay was performed by injecting 50.0 μL of polymer solution. Separation was performed using a linear gradient column (Tosoh Bioscience LLC, TSKgel GMHHR-L, 7.8 mm × 30 cm) at an acetone flow rate of 0.6 mL/min with a run time of 60 min. The molecular weight of the polymer samples is presented in Table 5.
Таблица 5. Mn (среднечисловая молекулярная масса), Mw (средневзвешенная молекулярная масса), Mz (верхняя средняя молекулярная масса), Mavg (средняя молекулярная масса) и полидисперсностьTable 5. M n (number average molecular weight), M w (weight average molecular weight), M z (upper average molecular weight), M avg (average molecular weight) and polydispersity
(MW/MN)Polydispersity
( MW / MN )
Пример 8Example 8
Получение микрочастиц налтрексона: эффект молекулярной массы и времени экстракции для 85:15Preparation of Naltrexone Microparticles: Effect of Molecular Weight and Extraction Time for 85:15
Непрерывную фазу получали путем отвешивания 40 г PVA и смешения с 4 л деионизированной воды. Органическая фаза состояла из 500 мг PLGA 85:15 (Resomer RG 858S (IV 1,3-1,7 дл/г, партия номер D161000568, Evonik Cyro, Parsippany, NJ) или Lactel B6006-2P (IV 0,76-0,85 дл/г, партия номер A17-068, Durect, Cupertino, CA)) и 267 мг свободного основания налтрексона (SpecGx, LLC), растворенного в 2,0 г DCM и 623 мг бензилового спирта, в сцинтилляционном флаконе объемом 20 мл. Непрерывную фазу далее смешивали с DCM, и 10 мл непрерывной фазы, содержавшей 1,8% (масс./об.) DCM, добавляли к органической фазе и эмульгировали при 7000 об/мин в течение 60 с с использованием гомогенизатора IKA T25 с генератором S25N - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). Затем смесь переносили в экстракционную фазу (380 мл 0,5% (масс./об.) дихлорметан в воде) и перемешивали при 4°C в течение 2, 4 или 7 ч. Затем микрочастицы собирали с помощью 25-мкм сита и сушили при 4°C в вакууме в течение приблизительно 16 ч. Затем микрочастицы суспендировали и промывали 200 мл 25% (об./об.) раствора этанола в течение 8 ч при 22°C для удаления PVA и каких-либо остаточных растворителей из микрочастиц. Затем промытые микрочастицы пропускали через 125-мкм сито и собирали на 25-мкм сито и подвергали вакуумной сушке в течение 48 ч.The continuous phase was prepared by weighing out 40 g of PVA and mixing with 4 L of deionized water. The organic phase consisted of 500 mg PLGA 85:15 (Resomer RG 858S (IV 1.3-1.7 dl/g, lot number D161000568, Evonik Cyro, Parsippany, NJ) or Lactel B6006-2P (IV 0.76-0 .85 dL/g, lot number A17-068, Durect, Cupertino, CA)) and 267 mg naltrexone free base (SpecGx, LLC) dissolved in 2.0 g DCM and 623 mg benzyl alcohol in a 20 mL scintillation vial . The continuous phase was further mixed with DCM, and 10 ml of the continuous phase containing 1.8% (w/v) DCM was added to the organic phase and emulsified at 7000 rpm for 60 s using an IKA T25 homogenizer with an S25N generator - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). The mixture was then transferred to the extraction phase (380 ml of 0.5% (w/v) dichloromethane in water) and stirred at 4°C for 2, 4 or 7 hours. The microparticles were then collected using a 25-μm sieve and dried at 4°C under vacuum for approximately 16 hours. The microparticles were then suspended and washed with 200 ml of 25% (v/v) ethanol solution for 8 hours at 22°C to remove PVA and any residual solvents from the microparticles. The washed microparticles were then passed through a 125-μm sieve and collected on a 25-μm sieve and vacuum dried for 48 h.
Конечная нагрузка лекарственным средством, остаточное содержание бензилового спирта и эффективность инкапсулирования могут быть найдены в таблице 6. Минимальные эффекты времени экстракции были отмечены между двумя типами PLGA и их соответствующей нагрузкой лекарственным средством. Остаточное содержание бензилового спирта оказалось несколько более высоким для партий Lactel против партий Resomer. Как оказалось, время экстракции не имеет эффекта на скорость высвобождения, в то время как различия в профилях высвобождения между двумя полимерами очевидны. Оказалось, что партии Resomer имеют более короткую lag-фазу относительно партий Lactel, что приводит к более устойчивому высвобождению в течение 60 суток in vitro по сравнению с партиями Lactel.The final drug loading, residual benzyl alcohol content and encapsulation efficiency can be found in Table 6. Minimal extraction time effects were noted between the two types of PLGA and their respective drug loading. Residual benzyl alcohol content was found to be slightly higher for Lactel batches versus Resomer batches. Extraction time was found to have no effect on the release rate, while differences in release profiles between the two polymers were evident. Resomer batches were found to have a shorter lag phase relative to Lactel batches, resulting in a more sustained release over 60 days in vitro compared to Lactel batches.
Таблица 6. Эффекты PLGA и времени экстракции на конечную нагрузку лекарственным средством, остаточное содержание бензилового спирта (BA) и эффективность инкапсулирования (EE).Table 6. Effects of PLGA and extraction time on final drug loading, residual benzyl alcohol (BA) and encapsulation efficiency (EE).
Пример 9Example 9
Получение микрочастиц налтрексона: эффект отсутствия промывания этанолом против промывания 25% этаноломPreparation of naltrexone microparticles: effect of no ethanol wash versus 25% ethanol wash
Непрерывную фазу получали путем отвешивания 40 г PVA и смешения с 4 л деионизированной воды. Органическая фаза состояла из 500 мг PLGA 85:15 (Resomer RG 858S) и 267 мг свободного основания налтрексона (SpecGx, LLC), растворенного в 2,0 г of DCM и 623 мг бензилового спирта, в сцинтилляционном флаконе объемом 20 мл. Непрерывную фазу далее смешивали с DCM, и 10 мл непрерывной фазы, содержавшей 1,8% (масс./об.) DCM, добавляли к органической фазе и эмульгировали при 7000 об/мин в течение 60 с с использованием гомогенизатора IKA T25 с генератором S25N - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). Затем смесь переносили в экстракционную фазу (380 мл 0,5% (масс./об.) DCM в воде) и перемешивали при 4°C в течение 2 ч. Затем микрочастицы собирали с использованием 25-мкм сита и сушили при 4°C в вакууме в течение приблизительно 16 ч. Затем микрочастицы суспендировали и промывали в 200 мл 25% (об./об.) раствора этанола в течение 8 ч при 22°C для удаления PVA и каких-либо остаточных растворителей из микрочастиц или пропускали через 125-мкм сито и подвергали вакуумной сушке в течение 48 ч. Затем промытые микрочастицы пропускали через 125-мкм сито и собирали на 25-мкм сите и подвергали вакуумной сушке в течение 48 ч.The continuous phase was prepared by weighing out 40 g of PVA and mixing with 4 L of deionized water. The organic phase consisted of 500 mg PLGA 85:15 (Resomer RG 858S) and 267 mg naltrexone free base (SpecGx, LLC) dissolved in 2.0 g of DCM and 623 mg benzyl alcohol in a 20 mL scintillation vial. The continuous phase was further mixed with DCM, and 10 ml of the continuous phase containing 1.8% (w/v) DCM was added to the organic phase and emulsified at 7000 rpm for 60 s using an IKA T25 homogenizer with an S25N generator - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). The mixture was then transferred to the extraction phase (380 ml of 0.5% (w/v) DCM in water) and stirred at 4°C for 2 hours. The microparticles were then collected using a 25 μm sieve and dried at 4°C under vacuum for approximately 16 hours. The microparticles were then suspended and washed in 200 ml of 25% (v/v) ethanol solution for 8 hours at 22°C to remove PVA and any residual solvents from the microparticles or passed through 125 -μm sieve and vacuum dried for 48 hours. The washed microparticles were then passed through a 125 μm sieve and collected on a 25 μm sieve and vacuum dried for 48 hours.
Конечная нагрузка лекарственным средством, остаточное содержание бензилового спирта и эффективность инкапсулиирования могут быть найдены в таблице 7. Промывание этанолом приводило к микрочастицам, которые имели более низкое остаточное содержание бензилового спирта и более высокую нагрузку лекарственным средством - вероятно вследствие экстракции бензиловым спиртом. Первоначальные 10 суток промывания являются сходными между промытыми и не промытыми частицами, однако после 10 суток скорость была более высокой для непромытых частиц против промытых частиц.The final drug loading, residual benzyl alcohol content and encapsulation efficiency can be found in Table 7. Ethanol washing resulted in microparticles that had lower residual benzyl alcohol content and higher drug loading - likely due to benzyl alcohol extraction. The initial 10 days of washing are similar between washed and non-washed particles, however after 10 days the rate was higher for non-washed particles versus washed particles.
Таблица 7. Эффекты PLGA и времени экстракции на конечную нагрузку лекарственным средством, остаточное содержание бензилового спирта (BA) и эффективность инкапсулирования (EE).Table 7. Effects of PLGA and extraction time on final drug loading, residual benzyl alcohol (BA) and encapsulation efficiency (EE).
Пример 10Example 10
Получение микрочастиц налтрексона: эффект концентрации этанола для промыванияPreparation of naltrexone microparticles: effect of ethanol concentration for rinsing
Непрерывную фазу получали путем отвешивания 40 г PVA и смешения с 4 л деионизированной воды. Органическая фаза состояла из 500 мг PLGA 85:15 (Resomer RG 858S) и 305 мг свободного основания налтрексона (SpecGx, LLC) растворенного в 2,0 г of DCM и 467 мг бензилового спирта, в сцинтилляционном флаконе объемом 20 мл. Непрерывную фазу далее смешивали с DCM, и 10 мл непрерывной органической фазы с 1,8% (масс./об.) DCM добавляли к органической фазе и эмульгировали при 7000 об/мин в течение 60 с с использованием гомогенизатора IKA T25 с генератором S25N - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). Затем смесь переносили в экстракционную фазу (380 мл с 0,33% (масс./об.) DCM в воде) и перемешивали при 4°C в течение 8 ч. Затем микрочастицы собирали с помощью 25-мкм сита и сушили при 4°C в вакууме в течение приблизительно 16 ч. Затем микрочастицы суспендировали и промывали 200 мл 6,25, 12,5, 25 или 50% (об./об.) раствора этанола в течение 8 ч при 22°C для удаления PVA и каких-либо остаточных растворителей из микрочастиц. Затем промытые микрочастицы пропускали через 125-мкм сито и собирали на 25-мкм сите и подвергали вакуумной сушке в течение 48 ч.The continuous phase was prepared by weighing out 40 g of PVA and mixing with 4 L of deionized water. The organic phase consisted of 500 mg PLGA 85:15 (Resomer RG 858S) and 305 mg naltrexone free base (SpecGx, LLC) dissolved in 2.0 g of DCM and 467 mg benzyl alcohol, in a 20 mL scintillation vial. The continuous phase was further mixed with DCM and 10 ml of continuous organic phase with 1.8% (w/v) DCM was added to the organic phase and emulsified at 7000 rpm for 60 s using an IKA T25 homogenizer with S25N generator - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). The mixture was then transferred to the extraction phase (380 ml with 0.33% (w/v) DCM in water) and stirred at 4°C for 8 hours. The microparticles were then collected using a 25 μm sieve and dried at 4°C C under vacuum for approximately 16 hours. The microparticles were then suspended and washed with 200 ml of 6.25, 12.5, 25 or 50% (v/v) ethanol solution for 8 hours at 22°C to remove PVA and any - or residual solvents from microparticles. The washed microparticles were then passed through a 125-μm sieve and collected on a 25-μm sieve and vacuum dried for 48 h.
Конечная нагрузка лекарственным средством, остаточное содержание бензилового спирта и эффективность иннкапсулирования представлены в таблице 8. Нагрузка лекарственным средством для 6,25, 12,5 и 25% (об./об.) не приводила как каким-либо значимым отличиям или тенденции. Остаточное содержание бензилового спирта снижается при повышении концентрации этанола для промывания для этих условий. При 50% (об./об.) значительное количество налтрексона утрачивается в ходе промывания, и высвобождение налтрексона является значительно более быстрым относительно условий 6,25, 12,5 и 25%.The final drug loading, residual benzyl alcohol content and encapsulation efficiency are presented in Table 8. Drug loading for 6.25, 12.5 and 25% (v/v) did not result in any significant differences or trends. The residual benzyl alcohol content decreased with increasing ethanol wash concentration for these conditions. At 50% (v/v), a significant amount of naltrexone is lost during flushing, and the release of naltrexone is significantly faster relative to the 6.25, 12.5 and 25% conditions.
Таблица 8. Эффекты концентрации этанола для промывания на конечную нагрузку лекарственным средством, остаточное содержание бензилового спирта (BA) и эффективность инкапсулирования (EE).Table 8. Effects of ethanol wash concentration on final drug loading, residual benzyl alcohol (BA), and encapsulation efficiency (EE).
Пример 11.Example 11.
Получение микрочастиц налтрексона: эффект температуры промывания этаноломPreparation of Naltrexone Microparticles: Effect of Ethanol Rinse Temperature
Непрерывную фазу получали путем отвешивания 40 г PVA и смешения с 4 л деионизированной воды. Органическая фаза состояла из 500 мг PLGA 85:15 (Resomer RG 858S) и 294 мг свободного основания налтрексона (SpecGx, LLC) растворенного в 2,0 г of DCM и 467 мг бензилового спирта (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) в сцинтилляционном флаконе объемом 20 мл. Непрерывную фазу далее смешивали с дихлорметаном, и 10 мл непрерывной органической фазы с 1,8% (масс./об.) дихлорметаном добавляли к органической фазе и эмульгировали при 7000 об/мин в течение 60 с с использованием гомогенизатора IKA T25 с генератором S25N - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). Затем смесь переносили в экстракционную фазу (380 мл 1% (масс./об.) PVA в воде) и перемешивали при 4°C в течение 8 ч. Микрочастицы собирали с использованием 25-мкм сита и сушили при 4°C в вакууме в течение приблизительно 16 ч. Затем микрочастицы суспендировали и промывали 200 мл 25% (об./об.) раствора этанола в течение 8 ч при 4°C или 22°C для удаления эмульгатора (PVA) и каких-либо остаточных растворителей из микрочастиц. Затем промытые микрочастицы пропускали через 125-мкм сито и собирали на 25-мкм сито и подвергали вакуумной сушке в течение 48 ч. Конечная нагрузка лекарственным средством, остаточное содержание бензилового спирта и эффективность инкапсулирования могут быть найдены в таблице 9.The continuous phase was prepared by weighing out 40 g of PVA and mixing with 4 L of deionized water. The organic phase consisted of 500 mg PLGA 85:15 (Resomer RG 858S) and 294 mg naltrexone free base (SpecGx, LLC) dissolved in 2.0 g of DCM and 467 mg benzyl alcohol (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) in scintillation. bottle of 20 ml. The continuous phase was further mixed with dichloromethane and 10 ml of continuous organic phase with 1.8% (w/v) dichloromethane was added to the organic phase and emulsified at 7000 rpm for 60 s using an IKA T25 homogenizer with S25N generator - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). The mixture was then transferred to the extraction phase (380 ml of 1% (w/v) PVA in water) and stirred at 4°C for 8 hours. The microparticles were collected using a 25-μm sieve and dried at 4°C in vacuum in for approximately 16 hours. The microparticles were then suspended and washed with 200 ml of 25% (v/v) ethanol solution for 8 hours at 4°C or 22°C to remove the emulsifier (PVA) and any residual solvents from the microparticles. The washed microparticles were then passed through a 125 µm sieve and collected on a 25 µm sieve and vacuum dried for 48 hours. The final drug loading, residual benzyl alcohol content and encapsulation efficiency can be found in Table 9.
Промывание этанолом при 22°C приводило к микрочастицам, которые имели более низкое остаточное содержание бензилового спирта и более высокую нагрузку лекарственным средством, вероятно вследствие экстракции бензиловым спиртом. Высвобождение налтрексона из микрочастиц, промытых при 22°C, приводило к более быстрой скорости высвобождения до 10 суток. Высвобождение налтрексона из микрочастиц при 4°C приводило к более быстрой скорости высвобождения после первоначальных 10 суток и длилось только приблизительно 35 суток in vitro, в то время как промытые при 22°C частицы обеспечивали высвобождение налтрексона в течение приблизительно 50 суток.Ethanol washing at 22°C resulted in microparticles that had lower residual benzyl alcohol content and higher drug loading, likely due to benzyl alcohol extraction. Release of naltrexone from microparticles washed at 22°C resulted in a faster release rate up to 10 days. Release of naltrexone from microparticles at 4°C resulted in a faster release rate after an initial 10 days and lasted only approximately 35 days in vitro, while particles washed at 22°C provided naltrexone release for approximately 50 days.
Таблица 9. Эффекты концентрации этанола для промывания на конечную нагрузку лекарственным средством, остаточное содержание бензилового спирта (BA) и эффективность инкапсулирования (EE)Table 9. Effects of Ethanol Wash Concentration on Final Drug Load, Residual Benzyl Alcohol (BA) and Encapsulation Efficiency (EE)
Пример 12.Example 12.
Составы для ответа in vivoCompounds for in vivo response
Семь составов с нагрузкой налтрексоном (свободное основание) от ~20% до ~40% оценивали в фармакокинетических испытаниях с крысами Sprague-Dawley. Среди семи составов каждый из F.12-1, F.12-2, F.12-4 и F.12-6 получали аналогично тому, как и F.3-5, F.4-1, F.8-6 и F.5-4, в то время как F.12-3, F.12-5 и F.12-7 получали, как описано ниже.Seven formulations with naltrexone loading (free base) ranging from ~20% to ~40% were evaluated in pharmacokinetic studies in Sprague-Dawley rats. Among the seven compositions, each of F.12-1, F.12-2, F.12-4 and F.12-6 was obtained in the same way as F.3-5, F.4-1, F.8- 6 and F.5-4, while F.12-3, F.12-5 and F.12-7 were prepared as described below.
F.12-3F.12-3
Непрерывную фазу получали путем отвешивания 40 г поливинилового спирта (PVA) (Mowiol 40-88, Sigma Aldrich, St. Louis, MO) и смешения с 4 л деионизированной воды. Органическая фаза состояла из 500 мг PLGA 85:15 (Resomer RG858S) и 294 мг свободного основания налтрексона (Tecoland Corporation, Irvine, CA) растворенного в 2,0 г дихлорметана (DCM) (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) и 467 мг бензилового спирта (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ). 10 мл непрерывной фазы добавляли на органическую фазу и гомогенизировали при 7000 об/мин в течение 60 с с использованием гомогенизатора IKA T25 с генератором S25N - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). Затем смесь переносили в экстракционную фазу, которая представляла собой 380 мл 1% (масс./об.) PVA в воде и перемешивали при 4°C в течение 8 ч. Затем микрочастицы собирали с использованием 25-мкм сита. Продукт, удерживаемый на сите, обезвоживали в течение 15 мин при 22°C и подвергали вакуумной сушке в течение приблизительно 16 ч. Затем микрочастицы суспендировали и промывали в 200 мл 25% (об./об.) раствора этанола в течение 8 ч при 22°C для удаления эмульгатора (PVA) и каких-либо остаточных растворителей из микрочастиц. Затем промытые микрочастицы собирали на 25-мкм сито и подвергали вакуумной сушке в течение 48 ч.The continuous phase was prepared by weighing out 40 g of polyvinyl alcohol (PVA) (Mowiol 40-88, Sigma Aldrich, St. Louis, MO) and mixing with 4 L of deionized water. The organic phase consisted of 500 mg PLGA 85:15 (Resomer RG858S) and 294 mg naltrexone free base (Tecoland Corporation, Irvine, CA) dissolved in 2.0 g dichloromethane (DCM) (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) and 467 mg benzyl alcohol (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ). 10 mL of the continuous phase was added to the organic phase and homogenized at 7000 rpm for 60 s using an IKA T25 homogenizer with an S25N - 10G generator (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). The mixture was then transferred to the extraction phase, which was 380 ml of 1% (w/v) PVA in water and stirred at 4°C for 8 hours. The microparticles were then collected using a 25 μm sieve. The product retained on the sieve was dehydrated for 15 min at 22°C and vacuum dried for approximately 16 h. The microparticles were then suspended and washed in 200 ml of 25% (v/v) ethanol solution for 8 h at 22 °C to remove emulsifier (PVA) and any residual solvents from the microparticles. The washed microparticles were then collected on a 25-μm sieve and vacuum dried for 48 h.
F.12-5F.12-5
Непрерывную фазу получали путем отвешивания 40 г of поли(винил спирт) (PVA) (Mowiol 40-88, Sigma Aldrich, St. Louis, MO) и смешения с 4 л деионизированной воды. Органическая фаза состояла из 500 мг PLGA 85:15 (Resomer RG858S) и 409 мг свободного основания налтрексона (Tecoland Corporation, Irvine, CA), растворенного в 2,0 г дихлорметана (DCM) (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) и 623 мг бензилового спирта (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ), в сцинтилляционном флаконе объемом 20 мл. Непрерывную фазу далее смешивали с дихлорметаном, и 10 мл непрерывной органической фазы с 1,8% (масс./об.) DCM добавляли к на органическую фазу и гомогенизировали при 7000 об/мин в течение 60 с с использованием гомогенизатора IKA T25 с генератором S25N - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). Затем смесь переносили в экстракционную фазу, которая представляла собой 380 мл 0,5% (масс./об.) DCM в воде и перемешивали при 4°C в течение 4 ч. Затем микрочастицы собирали с использованием 25-мкм сита. Продукт, удерживаемый на сите, обезвоживали в течение 15 мин при 22°C и подвергали вакуумной сушке в течение приблизительно 16 ч. Затем микрочастицы суспендировали и промывали в 200 мл 25% (об./об.) раствора этанола в течение 8 ч при 22°C для удаления эмульгатора (PVA) и каких-либо остаточных растворителей из микрочастиц. Затем промытые микрочастицы собирали на 25-мкм сито и подвергали вакуумной сушке в течение 48 ч.The continuous phase was prepared by weighing out 40 g of poly(vinyl alcohol) (PVA) (Mowiol 40-88, Sigma Aldrich, St. Louis, MO) and mixing with 4 L of deionized water. The organic phase consisted of 500 mg PLGA 85:15 (Resomer RG858S) and 409 mg naltrexone free base (Tecoland Corporation, Irvine, CA) dissolved in 2.0 g dichloromethane (DCM) (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) and 623 mg benzyl alcohol (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ), in a 20-ml scintillation vial. The continuous phase was further mixed with dichloromethane and 10 ml of continuous organic phase with 1.8% (w/v) DCM was added to the organic phase and homogenized at 7000 rpm for 60 s using an IKA T25 homogenizer with an S25N generator - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). The mixture was then transferred to the extraction phase, which was 380 ml of 0.5% (w/v) DCM in water and stirred at 4°C for 4 hours. The microparticles were then collected using a 25 μm sieve. The product retained on the sieve was dehydrated for 15 min at 22°C and vacuum dried for approximately 16 h. The microparticles were then suspended and washed in 200 ml of 25% (v/v) ethanol solution for 8 h at 22 °C to remove emulsifier (PVA) and any residual solvents from the microparticles. The washed microparticles were then collected on a 25-μm sieve and vacuum dried for 48 h.
F.12-7F.12-7
Непрерывную фазу получали путем отвешивания 40 г поливинилового спирта (PVA) (Mowiol 40-88, Sigma Aldrich, St. Louis, MO) и смешения с 4 л деионизированной воды. Органическая фаза состояла из 500 мг PLGA 85:15 (Resomer RG858S) и 267 мг свободного основания налтрексона (Tecoland Corporation, Irvine, CA), растворенного в 2,0 г дихлорметана (DCM) (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) и 623 мг бензилового спирта (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ), в сцинтилляционном флаконе объемом 20 мл. Непрерывную фазу далее смешивали с дихлорметаном, и 10 мл непрерывной органической фазы с 1,8% (масс./об.) DCM добавляли на органическую фазу и гомогенизировали при 7000 об/мин в течение 60 с с использованием гомогенизатора IKA T25 с генератором S25N - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). Затем смесь переносили в экстракционную фазу, которая представляла собой 380 мл 0,5% (масс./об.) DCM в воде и перемешивали при 4°C в течение 7 ч. Затем микрочастицы собирали с использованием 25-мкм сита. Продукт, удерживаемый на сите, обезвоживали в течение 15 мин при 22°C и подвергали вакуумной сушке в течение приблизительно 16 ч. Затем микрочастицы суспендировали и промывали в 200 мл 25% (об./об.) раствора этанола в течение 8 ч при 22°C для удаления эмульгатора (PVA) и каких-либо остаточных растворителей из микрочастиц. Затем промытые микрочастицы собирали на 25-мкм сите и подвергали вакуумной сушке в течение 48 ч.The continuous phase was prepared by weighing out 40 g of polyvinyl alcohol (PVA) (Mowiol 40-88, Sigma Aldrich, St. Louis, MO) and mixing with 4 L of deionized water. The organic phase consisted of 500 mg PLGA 85:15 (Resomer RG858S) and 267 mg naltrexone free base (Tecoland Corporation, Irvine, CA) dissolved in 2.0 g dichloromethane (DCM) (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) and 623 mg benzyl alcohol (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ), in a 20-ml scintillation vial. The continuous phase was further mixed with dichloromethane and 10 ml of continuous organic phase with 1.8% (w/v) DCM was added to the organic phase and homogenized at 7000 rpm for 60 s using an IKA T25 homogenizer with an S25N generator - 10G (IKA Works, Inc. Wilmington, NC). The mixture was then transferred to the extraction phase, which was 380 ml of 0.5% (w/v) DCM in water and stirred at 4°C for 7 hours. The microparticles were then collected using a 25 μm sieve. The product retained on the sieve was dehydrated for 15 min at 22°C and vacuum dried for approximately 16 h. The microparticles were then suspended and washed in 200 ml of 25% (v/v) ethanol solution for 8 h at 22 °C to remove emulsifier (PVA) and any residual solvents from the microparticles. The washed microparticles were then collected on a 25-μm sieve and vacuum dried for 48 h.
Проводили оценку эффекта нагрузки лекарственным средством, системы растворителей и концентрации растворителей на высвобождение налтрексона. Оказалось, что образец с наиболее низкой нагрузкой лекарственным средством (F.12-2) приводил к наибольшему скачковому высвобождению относительно составов с устойчивым высвобождением. Поскольку нагрузка лекарственным средством возрастала приблизительно от 28% до 38%, наблюдались более высокие концентрации приблизительно с 2 по 20 сутки, однако для составов наблюдались сходные стационарные концентрации в плазме после 20 суток, составляющие приблизительно от 1,5 до 4 нг/мл приблизительно до 60 суток. Концентрация налтрексона 0,5 нг/мл сохранялась в течение приблизительно 100 суток.The effect of drug loading, solvent system, and solvent concentration on naltrexone release was assessed. It was found that the sample with the lowest drug loading (F.12-2) resulted in the greatest burst release relative to the sustained release formulations. As drug loading increased from approximately 28% to 38%, higher concentrations were observed from approximately
Таблица 10. Обобщение составления для составов, охарактеризованных in vivoTable 10. Formulation Summary for Formulations Characterized in Vivo
Нагрузка лекарственным средством (% масс./масс.) основана на массе микрочастиц.Drug loading (% w/w) is based on microparticle mass.
МЕТОДИКИ ТЕСТИРОВАНИЯTESTING METHODS
Высвобождение налтрексона in vitro из тестируемых составовIn vitro release of naltrexone from test formulations
Среду, 20 мл pH 7,4 фосфатно-солевого буфера с 0,05% Tween 20 (Sigma Aldrich, St. Louis, MO) и 0,0625% (масс./об.) аскорбата натрия (Sigma Aldrich, St. Louis, MO) и приблизительно 5 мг тестируемого образца помещали 50-мл колбу Erlenmeyer с пробкой и помещали на водяную баню при 37°C при 100 об/мин. Образцы отбирали в различные моменты времени и заменяли свежей средой для высвобождения. Содержание налтрексона в буфере определяли посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).Medium, 20 ml pH 7.4 phosphate buffered saline with 0.05% Tween 20 (Sigma Aldrich, St. Louis, MO) and 0.0625% (w/v) sodium ascorbate (Sigma Aldrich, St. Louis , MO) and approximately 5 mg of the test sample were placed in a 50 ml Erlenmeyer flask with a stopper and placed in a water bath at 37°C at 100 rpm. Samples were collected at various time points and replaced with fresh release medium. The content of naltrexone in the buffer was determined by high performance liquid chromatography (HPLC).
Обращенно-фазовая ВЭЖХ для количественного определения налтрексонаReversed-phase HPLC for quantitative determination of naltrexone
Условия ВЭЖХ были следующими: подвижная фаза: 65:35 метанол:калий-фосфатный буфер, pH 6,6; скорость потока: 1,0 мл/мин; температура автоматического пробоотборника: комнатная температура; температура колонки: 30°C; детекция: 210 нм (УФ); общее время прогона: 7 мин; инжектируемый объем: 10 мкл; колонка: Zorbax SB-C18 150×4,6 мм, 5 мкм; приблизительное время удержания налтрексона: 4,8 мин.HPLC conditions were as follows: mobile phase: 65:35 methanol:potassium phosphate buffer, pH 6.6; flow rate: 1.0 ml/min; autosampler temperature: room temperature; column temperature: 30°C; detection: 210 nm (UV); total run time: 7 min; injected volume: 10 µl; column: Zorbax SB-C18 150×4.6 mm, 5 µm; Approximate retention time of naltrexone: 4.8 minutes.
Испытания фармакокинетики in vivoIn vivo pharmacokinetic tests
Все доклинические испытания на крысах проводили на крысах Sprague-Dawley. Крысам в количестве от трех до пяти на тестируемый состав инъецировали подкожно в загривок шеи или в лопаточную область дозировку налтрексона в диапазоне от 50 мг/кг до 100 мг/кг в 1 мл носителя на водной основе, состоящего из 0,9% хлорида натрия, 0,02% Tween 20, и 0,5% натрий карбоксиметилцеллюлозы.All preclinical rat testing was performed on Sprague-Dawley rats. Three to five rats per test formulation were injected subcutaneously into the nape of the neck or into the scapular region with a dosage of naltrexone ranging from 50 mg/kg to 100 mg/kg in 1 ml of an aqueous vehicle consisting of 0.9% sodium chloride, 0.02
В ходе испытания животных наблюдали в отношении выраженной токсичности и каких-либо существующих аномалий области тестирования, включая покраснение, опухание, кровотечение, выделения и кровоподтеки в области инъекции. Кроме того, массу тела определяли и регистрировали при введении и при завершении исследования.Animals were monitored throughout the test for significant toxicity and any existing test site abnormalities, including redness, swelling, bleeding, discharge, and bruising at the injection site. In addition, body weight was determined and recorded at administration and completion of the study.
В выбранные моменты времени крыс подвергали анестезии и взятию крови (приблизительно 250 мкл) через хвостовую или поднижнечелюстную вену. Взятие крови проводили в маркированные пробирки с калий этилендиаминтетрауксусной кислотой. Кровь центрифугировали в течение 10 мин при 4000 об/мин при 4°C. Фракцию плазмы переносили в маркированные 1-мл пластмассовые пробирки и хранили при -80°C перед анализом.At selected time points, rats were anesthetized and blood was drawn (approximately 250 μl) via the caudal or submandibular vein. Blood was drawn into labeled tubes containing potassium ethylenediaminetetraacetic acid. The blood was centrifuged for 10 min at 4000 rpm at 4°C. The plasma fraction was transferred into labeled 1-ml plastic tubes and stored at -80°C until analysis.
Claims (20)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US62/745,805 | 2018-10-15 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2021112027A RU2021112027A (en) | 2022-11-17 |
| RU2817016C2 true RU2817016C2 (en) | 2024-04-09 |
Family
ID=
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1415294A (en) * | 2002-11-07 | 2003-05-07 | 上海医药工业研究院 | Long acting injection microsphere combination of naltrexone, its preparation method and application |
| US7799345B2 (en) * | 2000-05-25 | 2010-09-21 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. | Preparation of injectable suspensions having improved injectability |
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7799345B2 (en) * | 2000-05-25 | 2010-09-21 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. | Preparation of injectable suspensions having improved injectability |
| CN1415294A (en) * | 2002-11-07 | 2003-05-07 | 上海医药工业研究院 | Long acting injection microsphere combination of naltrexone, its preparation method and application |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Кедик С.А. и др. Полимеры для систем доставки лекарственных веществ пролонгированного действия (обзор). Перспективные синтетические и природные полимеры. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2013, 3 (4), стр. 22-35. Петрова Елизавета Александровна, Разработка состава и технологии получения инъекционной лекарственной формы налтрексона с модифицированным высвобождением, автореферат диссертации, 2014, Москва. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100730440B1 (en) | Injectable buprenorphine microparticle compositions and their use | |
| US20210244818A1 (en) | Naltrexone Long Acting Formulations and Methods of Use | |
| AU2012259657B2 (en) | Method for preparing microparticles with reduced initial burst and microparticles prepared thereby | |
| EP2787979B1 (en) | Microspheres for controlled- or sustained-release delivery of therapeutics | |
| GB2363986A (en) | Sustained release microparticle and method for preparing the same | |
| KR20180131077A (en) | Method of preparing sustained release drug microparticles with ease of release control | |
| Sinha et al. | Biodegradable microspheres for parenteral delivery | |
| CA2571583C (en) | Sustained-release composition, process for producing the same and use of the same | |
| JP2009506100A (en) | Formulation | |
| Akala et al. | Studies on in vitro availability, degradation, and thermal properties of naltrexone-loaded biodegradable microspheres | |
| US11000479B2 (en) | Injectable long-acting naltrexone microparticle compositions | |
| RU2817016C2 (en) | Long-acting naltrexone microparticle injectable compositions |