RU2810890C1 - Способ прижизненного получения образца внутренней пограничной мембраны сетчатки - Google Patents
Способ прижизненного получения образца внутренней пограничной мембраны сетчатки Download PDFInfo
- Publication number
- RU2810890C1 RU2810890C1 RU2023127444A RU2023127444A RU2810890C1 RU 2810890 C1 RU2810890 C1 RU 2810890C1 RU 2023127444 A RU2023127444 A RU 2023127444A RU 2023127444 A RU2023127444 A RU 2023127444A RU 2810890 C1 RU2810890 C1 RU 2810890C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- retina
- ilm
- peeling
- endovitreal
- syringe
- Prior art date
Links
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 title claims abstract description 23
- 239000012528 membrane Substances 0.000 title claims abstract description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 15
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000012014 optical coherence tomography Methods 0.000 claims abstract description 7
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 206010033546 Pallor Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 238000010186 staining Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 3
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 description 2
- 208000001351 Epiretinal Membrane Diseases 0.000 description 2
- 208000031471 Macular fibrosis Diseases 0.000 description 2
- 206010047555 Visual field defect Diseases 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 2
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 2
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 2
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000004304 visual acuity Effects 0.000 description 2
- 206010012688 Diabetic retinal oedema Diseases 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010063341 Metamorphopsia Diseases 0.000 description 1
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 1
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000003855 balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 201000011190 diabetic macular edema Diseases 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 238000011207 functional examination Methods 0.000 description 1
- 102000005396 glutamine synthetase Human genes 0.000 description 1
- 108020002326 glutamine synthetase Proteins 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 201000007914 proliferative diabetic retinopathy Diseases 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 230000009528 severe injury Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 208000029257 vision disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии и гистологии, и может быть использовано для прижизненного получения образца внутренней пограничной мембраны сетчатки. Проводят витрэктомию, вводят в область витреоретинального интерфейса краситель. Осуществляют пилинг ВПМ эндовитреальным пинцетом в макулярной области под контролем интраоперационной оптической когерентной томографии сетчатки. При отсутствии при повторном введении эндовитреального красителя окрашивания сетчатки в зоне пилинга, наличии точечных геморрагий и бледности сетчатки в зоне пилинга, лоскут ВПМ, отделенный от сетчатки и находящийся в витреальной полости в среде BSS, подвергают экстракции вместе со средой BSS с помощью экструзионной канюли 25G, соединенной через силиконовую трубку со шприцем. Затем лоскут ВПМ извлекают из шприца и исследуют. Изобретение обеспечивает возможность получения ВПМ в результате пилинга с сохранением их структурных и микроанатомических свойств для дальнейшего исследования. 1 ил., 1 пр.
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии и гистологии, и может быть использовано для прижизненного получения образца внутренней пограничной мембраны сетчатки.
Витреоретинальные хирургические операции с проведением удаления эпимакулярной фиброзной ткани (ЭМФ) и внутренней пограничной мембраны сетчатки (ВПМ) являются рутинной процедурой при ряде заболеваний и состояний заднего отрезка глаза, в частности витреомакулярного интерфейса (ВМИ). По сообщениям ряда авторов, указанные процедуры могут приводить к развитию осложнений, таких как формирование дефектов поля зрения (Akino K et al. Risk of newly developing visual field defect and neurodegeneration after pars plana vitrectomy for idiopathic epiretinal membrane. Br J Ophthalmol. 2020 Oct 5:bjophthalmol-2020-317478) и атрофических изменений сетчатки (Romano MR et al. Macular hypotrophy after internal limiting membrane removal for diabetic macular edema. Retina. 2014 Jun; 34(6):1 182-9). Для понимания механизмов развития подобных осложнений необходимо выполнение не только функционального обследования пациентов (оценка остроты зрения, микропериметрия и т.д.), но и получение данных о структурных и микроанатомических особенностях ВМИ, в том числе ВПМ.
Известны исследования по изучению полученных интраоперационно образцов ВПМ, ЭМФ и единых многокомпонентных блоков тканей (Сдобникова С.В., Ревищин А.В., Махотин С.С, Павлова Г.В., Сдобникова Л.Е. Особенности архитектоники новообразованной сосудистой системы при диабетической ретинопатии // Медицинский вестник Башкортостана. 2018. №1 (73); Mehta, A., Rana-Rahman, R., Klaassen, I., Rees, J., & Steel, D. H. (2020). The Effect of Internal Limiting Membrane Cleaning on Epiretinal Membrane Formation after Vitrectomy for Proliferative Diabetic Retinopathy. Ophthalmologica). Однако в этих работах не описан процесс получения образца тканей заднего отрезка глаза и его структурных и анатомических свойств после извлечения из глаза.
Ближайшим аналогом предлагаемого способа является способ того же назначения, включающий витрэктомию, введение в область витреоретинального интерфейса красителя, пилинг ВПМ эндовитреальным пинцетом, извлечение и изучение ВПМ (Столяренко Г.Е., Колчин А.А., Диденко Л.В., Боровая Т.Г., Шевлягина Н.В. Пористая коралловидная структура - новое представление о морфологии внутренней пограничной мембраны сетчатки. Вестник офтальмологии. 2016; 132(6):70-77).
Задачей изобретения является дальнейшая разработка способа прижизненного получения ВПМ.
Техническим результатом способа является возможность получения ВПМ в результате пилинга с сохранением их структурных и микроанатомических свойств для дальнейшего исследования.
Технический результат достигается за счет пилинга ВПМ под контролем интраоперационной оптической когерентной томографии сетчатки и извлечении образца ВПМ при отсутствии при повторном введении эндовитреального красителя окрашивания сетчатки в зоне пилинга и наличии точечных геморрагий и бледности сетчатки в зоне пилинга, экстракции ВПМ вместе со средой BSS с помощью канюли 25G, соединенной через силиконовую трубку со шприцем.
Опытным путем на основании собственных наблюдений нами было установлено, что попытки извлечения образцов тканей через витрэктомические порты стандартных диаметров (23-27G) часто неудачны (образец не удается извлечь из глаза) либо приводят к выраженному повреждению, фрагментации и «скручиванию» образцов с утратой структурной и микроанатомической целостности. Последнее оказывает значимое негативное влияние на результаты исследования образцов.
Проведение интраоперационной оптической когерентной томографии сетчатки в сочетании с косвенными визуальными признаками - отсутствием при повторном введении красителя окрашивания сетчатки в зоне пилинга, наличии точечных геморрагии и бледности сетчатки в зоне пилинга указывают на то, что удалена именно ВПМ, а не ЭМФ. Использование канюли 25G и извлечение образца в среде BSS без контакта с внешней средой позволяют снизить риск травматического повреждения образца в процессе его извлечения.
Способ первоначально был отработан на кадаверных глазах. Приемы предложенного способа позволяют сохранить структурную целостность образца, исключить контакт со внешней средой и инородными веществами в процессе получения, а также снизить риск повреждения образца при извлечении его из глаза. Таким образом, нахождение образца в состоянии свободного плавания без контакта с иными веществами и внешней средой предохраняет его от повреждений, «скручивания» и фрагментации.
Было получено разрешение локального этического комитета на применение метода в клинической практике. По предложенному способу получено 3 образца ВПМ от пациентов, прооперированных по поводу витреоретинальных заболеваний с последующей микроскопией образцов.
Способ осуществляют следующим образом:
Проводят витрэктомию, вводят в область витреоретинального интерфейса краситель. Осуществляют пилинг ВПМ эндовитреальным пинцетом в макулярной области под контролем интраоперационной оптической когерентной томографии сетчатки. При отсутствии при повторном введении эндовитреального красителя окрашивания сетчатки в зоне пилинга, наличии точечных геморрагий и бледности сетчатки в зоне пилинга лоскут ВПМ, отделенный от сетчатки и находящийся в витреальной полости в среде BSS, подвергают экстракции вместе со средой BSS с помощью экструзионной канюли 25G, соединенной через силиконовую трубку со шприцем. Затем лоскут ВПМ извлекают из шприца и исследуют.
Клинический пример:
Пациент М. обратился в клинику с жалобами на снижение остроты зрения, метаморфопсии. По результатам осмотра и данных оптической когерентной томографии установлен диагноз - эпимакулярный фиброз правого глаза. Выполнена стандартная операция - витрэктомия правого глаза. В витреальную полость ввели ретинальный краситель с экспозицией 2 минуты, как это принято. Затем при помощи эндовитреального пинцета под контролем интраоперационной оптической когерентной томографии макулярной области сетчатки выполнено удаление ВПМ. Отделенный от сетчатки лоскут ВПМ оставили свободно плавающим в витреальной полости в среде BSS. Провели подготовку системы экстракции лоскута: экструзионную канюлю 25G с помощью гибкой силиконовой трубки соединили со шприцем объемом 2 миллилитра. Наконечник канюли приблизили к лоскуту ВПМ. В момент сближения осуществили аспирацю ВПМ с раствором BSS из витреальной полости путем тракции за поршень шприца в полость цилиндра шприца. После извлечения из витреальной полости лоскут ВПМ находился в среде BSS в цилиндре шприца. ВПМ извлекли из BSS с помощью эндовитреального пинцета и исследовали с помощью микроскопии. Образец фиксировали при помощи глутарового альдегида, выполнено окрашивание на выявление белков beta III Tubulin (для выявления нейронов), Glutamine Synthetase (на выявление глиальных клеток), а также на выявление ДНК при помощи красителя 4',6-диамидино-2-фенилиндол (DAPI). Произведена флуоресцентная микроскопия (Фиг. 1. Изображение внутренней пограничной мембраны, исследованной методом флуоресцентной микроскопии. Визуализируется целостная структура внутренней пограничной мембраны с ядрами клеток (синий цвет) на поверхности образца и участками скопления глиальных клеток (зеленый цвет), единичные включения нейрональной ткани (красный цвет).
Таким образом, подготовленный образец сохранил свою структурную целостность и микроанатомические свойства.
Claims (1)
- Способ прижизненного получения образца внутренней пограничной мембраны сетчатки (ВПМ), включающий витрэктомию, введение в область витреоретинального интерфейса красителя, пилинг ВПМ эндовитреальным пинцетом, отличающийся тем, что пилинг ВПМ проводят в макулярной области под контролем интраоперационной оптической когерентной томографии сетчатки и при отсутствии при повторном введении эндовитреального красителя окрашивания сетчатки в зоне пилинга ВПМ, наличии точечных геморрагий и бледности сетчатки в зоне пилинга, лоскут ВПМ, отделенный от сетчатки и находящийся в витреальной полости в среде BSS, подвергают экстракции вместе со средой BSS с помощью экструзионной канюли 25G, соединенной через силиконовую трубку со шприцем, затем лоскут ВПМ извлекают из шприца и исследуют.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2810890C1 true RU2810890C1 (ru) | 2023-12-29 |
Family
ID=
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2697475C1 (ru) * | 2019-05-08 | 2019-08-14 | Светлана Леонидовна Первых | Способ приготовления гистологических препаратов роговицы глаза |
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2697475C1 (ru) * | 2019-05-08 | 2019-08-14 | Светлана Леонидовна Первых | Способ приготовления гистологических препаратов роговицы глаза |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Столяренко Г.Е. и др. Пористая коралловидная структура - новое представление о морфологии внутренней пограничной мембраны сетчатки. Вестник офтальмологии. 2016; 132(6): 70-77. Колесник А.И. и др. Удаление идиопатических эпиретинальных мембран с сохранением фовеальной внутренней пограничной мембраны. Клинические случаи в офтальмологии. 2022;1: 18-23. Zhang KY, Johnson TV. The internal limiting membrane: Roles in retinal development and implications for emerging ocular therapies. Exp Eye Res. 2021 May; 206: 108545. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Lee et al. | Outcomes of idiopathic macular epiretinal membrane removal with and without internal limiting membrane peeling: a comparative study | |
| Abdelkader et al. | Internal limiting membrane peeling in vitreo-retinal surgery | |
| Weinberger et al. | Persistent indocyanine green (ICG) fluorescence 6 weeks after intraocular ICG administration for macular hole surgery | |
| Weinberger et al. | Indocyanine-green-assisted internal limiting membrane peeling in macular hole surgery–a follow-up study | |
| RU2606338C1 (ru) | Способ хирургического лечения макулярных разрывов с использованием аутологичной обогащенной тромбоцитами плазмы и способ ее получения | |
| Christensen | Value of internal limiting membrane peeling in surgery for idiopathic macular hole and the correlation between function and retinal morphology | |
| US20080206149A1 (en) | Method, dye and medicament for staining the internal limiting membrane, epiretinal membrane, the vitreous and/or the capsule of an eye | |
| RU2620929C1 (ru) | Способ хирургического лечения макулярного разрыва | |
| Calladine et al. | Optical coherence tomography of the effects of stromal hydration on clear corneal incision architecture | |
| Jackson et al. | Identification of retinal breaks using subretinal trypan blue injection | |
| Chen et al. | Morphologic, biomechanical, and compositional features of the internal limiting membrane in pathologic myopic foveoschisis | |
| Hisatomi et al. | Ultrastructural changes of the vitreoretinal interface during long-term follow-up after removal of the internal limiting membrane | |
| Diaz-Llopis et al. | Intravitreal plasmin without associated vitrectomy as a treatment for refractory diabetic macular edema | |
| Farah et al. | Current concepts of trypan blue in chromovitrectomy | |
| RU2810890C1 (ru) | Способ прижизненного получения образца внутренней пограничной мембраны сетчатки | |
| RU2389455C1 (ru) | Способ хирургического лечения макулярного разрыва | |
| Nagai et al. | Surgical effects and complications of indocyanine green‐assisted internal limiting membrane peeling for idiopathic macular hole | |
| US20180353645A1 (en) | Lens regeneration using endogenous stem/progenitor cells | |
| RU2610408C1 (ru) | Способ лечения острых бактериальных послеоперационных эндофтальмитов | |
| Haritoglou et al. | Delineation of the vitreous and posterior hyaloid using bromophenol blue | |
| RU2808112C1 (ru) | Способ интраоперационной визуализации сетчатки глаза при эндовитреальной хирургии | |
| Heath et al. | Glaucoma and Peters' anomaly: A clinicopathologic case report | |
| RU2784894C1 (ru) | Способ хирургического лечения первичного сквозного макулярного разрыва сетчатки | |
| Imai et al. | Color enhancement and achromatization to increase the visibility of indocyanine green-stained internal limiting membrane during digitally assisted vitreoretinal surgery | |
| RU2803007C1 (ru) | Способ хирургического лечения макулярного разрыва сетчатки |