RU2810002C2 - Single-domain antibodies against intracellular antigens - Google Patents
Single-domain antibodies against intracellular antigens Download PDFInfo
- Publication number
- RU2810002C2 RU2810002C2 RU2019101598A RU2019101598A RU2810002C2 RU 2810002 C2 RU2810002 C2 RU 2810002C2 RU 2019101598 A RU2019101598 A RU 2019101598A RU 2019101598 A RU2019101598 A RU 2019101598A RU 2810002 C2 RU2810002 C2 RU 2810002C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- gly
- ser
- ala
- thr
- val
- Prior art date
Links
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 title claims abstract description 23
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 title claims description 25
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title description 40
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title description 40
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title description 40
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 67
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 64
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 63
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 63
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 62
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 54
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 53
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims abstract description 16
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 10
- 102000004495 STAT3 Transcription Factor Human genes 0.000 claims abstract 13
- 108010017324 STAT3 Transcription Factor Proteins 0.000 claims abstract 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 55
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 49
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 41
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 35
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 35
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 claims description 17
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 claims description 17
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 16
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 16
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 16
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 14
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 13
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 13
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 11
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 10
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 8
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 7
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 claims description 7
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 claims description 6
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 claims description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 6
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 2
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 2
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 claims description 2
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 claims description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims description 2
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 claims description 2
- 229940097496 nasal spray Drugs 0.000 claims description 2
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 claims description 2
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 claims description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 claims description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 2
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 claims description 2
- 239000002687 nonaqueous vehicle Substances 0.000 claims 1
- 208000017497 prostate disease Diseases 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 120
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 114
- PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N L-Arginyl-L-glutamin-acetat Natural products NC(=N)NCCCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 65
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 65
- ZLCLYFGMKFCDCN-XPUUQOCRSA-N Gly-Ser-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN)C(O)=O ZLCLYFGMKFCDCN-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 63
- AIMGJYMCTAABEN-GVXVVHGQSA-N Leu-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AIMGJYMCTAABEN-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 63
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Natural products NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 63
- YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N Ser-Gly-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 62
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 62
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 55
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 54
- KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 53
- 108010090333 leucyl-lysyl-proline Proteins 0.000 description 51
- HHWQMFIGMMOVFK-WDSKDSINSA-N Gln-Ala-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O HHWQMFIGMMOVFK-WDSKDSINSA-N 0.000 description 49
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 47
- AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 47
- SLOYNOMYOAOUCX-BVSLBCMMSA-N Trp-Phe-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O SLOYNOMYOAOUCX-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 47
- PBSOQGZLPFVXPU-YUMQZZPRSA-N Arg-Glu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O PBSOQGZLPFVXPU-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 45
- 108010037850 glycylvaline Proteins 0.000 description 45
- GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N Gly-Lys-Glu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N 0.000 description 44
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 44
- HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N Val-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 43
- 108010076324 alanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 43
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 42
- 101000584612 Homo sapiens GTPase KRas Proteins 0.000 description 40
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 40
- 102100030708 GTPase KRas Human genes 0.000 description 38
- OYTPNWYZORARHL-XHNCKOQMSA-N Gln-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N OYTPNWYZORARHL-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 36
- 108010069020 alanyl-prolyl-glycine Proteins 0.000 description 36
- CQMFNTVQVLQRLT-JHEQGTHGSA-N Gly-Thr-Gln Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O CQMFNTVQVLQRLT-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 35
- CNGOEHJCLVCJHN-SRVKXCTJSA-N Lys-Pro-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O CNGOEHJCLVCJHN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 35
- QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N Ser-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 34
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 32
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 32
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 30
- KVGPYKUIHZJWGA-BQBZGAKWSA-N Cys-Met-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(O)=O KVGPYKUIHZJWGA-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 29
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 27
- NKUGCYDFQKFVOJ-JYJNAYRXSA-N Tyr-Leu-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 NKUGCYDFQKFVOJ-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 27
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 27
- 108010009962 valyltyrosine Proteins 0.000 description 27
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 26
- 108010063718 gamma-glutamylaspartic acid Proteins 0.000 description 26
- AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N Leu-Gln-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 25
- ANHVRCNNGJMJNG-BZSNNMDCSA-N Tyr-Tyr-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O ANHVRCNNGJMJNG-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 25
- FGWUALWGCZJQDJ-URLPEUOOSA-N Phe-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O FGWUALWGCZJQDJ-URLPEUOOSA-N 0.000 description 24
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 24
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 23
- MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N Asn-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 23
- ZFBBMCKQSNJZSN-AUTRQRHGSA-N Gln-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O ZFBBMCKQSNJZSN-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 23
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- PESQCPHRXOFIPX-UHFFFAOYSA-N N-L-methionyl-L-tyrosine Natural products CSCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PESQCPHRXOFIPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 23
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 23
- ZZWUYQXMIFTIIY-WEDXCCLWSA-N Gly-Thr-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ZZWUYQXMIFTIIY-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 22
- GHQFLTYXGUETFD-UFYCRDLUSA-N Met-Tyr-Tyr Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)N GHQFLTYXGUETFD-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 22
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 22
- MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N Asp-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 21
- WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N Gly-Phe-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)CN)O WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N 0.000 description 20
- GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N Lys-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 20
- YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ala-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 19
- JXFLPKSDLDEOQK-JHEQGTHGSA-N Gln-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O JXFLPKSDLDEOQK-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 19
- ULVMNZOKDBHKKI-ACZMJKKPSA-N Ser-Gln-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O ULVMNZOKDBHKKI-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 19
- DWYAUVCQDTZIJI-VZFHVOOUSA-N Thr-Ala-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DWYAUVCQDTZIJI-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 19
- PZTZYZUTCPZWJH-FXQIFTODSA-N Val-Ser-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N PZTZYZUTCPZWJH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 19
- BUDNAJYVCUHLSV-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asp-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BUDNAJYVCUHLSV-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 18
- SAKCBXNPWDRWPE-BQBZGAKWSA-N Asp-Met-Gly Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N SAKCBXNPWDRWPE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 18
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 18
- SCWYHUQOOFRVHP-MBLNEYKQSA-N Gly-Ile-Thr Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O SCWYHUQOOFRVHP-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 18
- CYZBFPYMSJGBRL-DRZSPHRISA-N Phe-Ala-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O CYZBFPYMSJGBRL-DRZSPHRISA-N 0.000 description 18
- VBMOVTMNHWPZJR-SUSMZKCASA-N Thr-Thr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VBMOVTMNHWPZJR-SUSMZKCASA-N 0.000 description 18
- YOPQYBJJNSIQGZ-JNPHEJMOSA-N Thr-Tyr-Tyr Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 YOPQYBJJNSIQGZ-JNPHEJMOSA-N 0.000 description 18
- UIDJDMVRDUANDL-BVSLBCMMSA-N Trp-Tyr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O UIDJDMVRDUANDL-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 18
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 18
- 108010003137 tyrosyltyrosine Proteins 0.000 description 18
- HHGYNJRJIINWAK-FXQIFTODSA-N Ala-Ala-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N HHGYNJRJIINWAK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 17
- BCADFFUQHIMQAA-KKHAAJSZSA-N Asn-Thr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O BCADFFUQHIMQAA-KKHAAJSZSA-N 0.000 description 17
- MFDPBZAFCRKYEY-LAEOZQHASA-N Asp-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O MFDPBZAFCRKYEY-LAEOZQHASA-N 0.000 description 17
- KABHAOSDMIYXTR-GUBZILKMSA-N Cys-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N KABHAOSDMIYXTR-GUBZILKMSA-N 0.000 description 17
- SBCYJMOOHUDWDA-NUMRIWBASA-N Glu-Asp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O SBCYJMOOHUDWDA-NUMRIWBASA-N 0.000 description 17
- SMIDBHKWSYUBRZ-ACZMJKKPSA-N Ser-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SMIDBHKWSYUBRZ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 17
- IOVHBRCQOGWAQH-ZKWXMUAHSA-N Ser-Gly-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O IOVHBRCQOGWAQH-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 17
- OLKICIBQRVSQMA-SRVKXCTJSA-N Ser-Ser-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O OLKICIBQRVSQMA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 17
- FLMYSKVSDVHLEW-SVSWQMSJSA-N Ser-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O FLMYSKVSDVHLEW-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 17
- AMXMBCAXAZUCFA-RHYQMDGZSA-N Thr-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O AMXMBCAXAZUCFA-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 17
- 108010029020 prolylglycine Proteins 0.000 description 17
- KTXKIYXZQFWJKB-VZFHVOOUSA-N Ala-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O KTXKIYXZQFWJKB-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 16
- QRIYOHQJRDHFKF-UWJYBYFXSA-N Ala-Tyr-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CC1=CC=C(O)C=C1 QRIYOHQJRDHFKF-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 16
- FKQITMVNILRUCQ-IHRRRGAJSA-N Arg-Phe-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FKQITMVNILRUCQ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 16
- PBFXCUOEGVJTMV-QXEWZRGKSA-N Asn-Met-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O PBFXCUOEGVJTMV-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 16
- JBDLMLZNDRLDIX-HJGDQZAQSA-N Asn-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O JBDLMLZNDRLDIX-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 16
- GGRSYTUJHAZTFN-IHRRRGAJSA-N Asp-Pro-Tyr Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)O)N)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O GGRSYTUJHAZTFN-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 16
- PKNIZMPLMSKROD-BIIVOSGPSA-N Cys-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N PKNIZMPLMSKROD-BIIVOSGPSA-N 0.000 description 16
- MJOYUXLETJMQGG-IHRRRGAJSA-N Cys-Tyr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O MJOYUXLETJMQGG-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 16
- VYOILACOFPPNQH-UMNHJUIQSA-N Gln-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N VYOILACOFPPNQH-UMNHJUIQSA-N 0.000 description 16
- BRFJMRSRMOMIMU-WHFBIAKZSA-N Gly-Ala-Asn Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BRFJMRSRMOMIMU-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 16
- HQRHFUYMGCHHJS-LURJTMIESA-N Gly-Gly-Arg Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N HQRHFUYMGCHHJS-LURJTMIESA-N 0.000 description 16
- ORXZVPZCPMKHNR-IUCAKERBSA-N Gly-His-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CNC=N1 ORXZVPZCPMKHNR-IUCAKERBSA-N 0.000 description 16
- LRQXRHGQEVWGPV-NHCYSSNCSA-N Gly-Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CN LRQXRHGQEVWGPV-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 16
- IMRNSEPSPFQNHF-STQMWFEESA-N Gly-Ser-Trp Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C12)C(=O)O IMRNSEPSPFQNHF-STQMWFEESA-N 0.000 description 16
- RTIRBWJPYJYTLO-MELADBBJSA-N Leu-Lys-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N RTIRBWJPYJYTLO-MELADBBJSA-N 0.000 description 16
- CAODKDAPYGUMLK-FXQIFTODSA-N Met-Asn-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CAODKDAPYGUMLK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 16
- RMLWDZINJUDMEB-IHRRRGAJSA-N Met-Tyr-Asn Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N RMLWDZINJUDMEB-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 16
- HXSUFWQYLPKEHF-IHRRRGAJSA-N Phe-Asn-Arg Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N HXSUFWQYLPKEHF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 16
- QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N Ser-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 16
- PURRNJBBXDDWLX-ZDLURKLDSA-N Ser-Thr-Gly Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)O PURRNJBBXDDWLX-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 16
- BCAVNDNYOGTQMQ-AAEUAGOBSA-N Ser-Trp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)NCC(O)=O BCAVNDNYOGTQMQ-AAEUAGOBSA-N 0.000 description 16
- CYCGARJWIQWPQM-YJRXYDGGSA-N Thr-Tyr-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C([O-])=O)CC1=CC=C(O)C=C1 CYCGARJWIQWPQM-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 16
- WFZYXGSAPWKTHR-XEGUGMAKSA-N Trp-Ala-Gln Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N WFZYXGSAPWKTHR-XEGUGMAKSA-N 0.000 description 16
- OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N Val-Tyr-Tyr Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)N OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 16
- 108010069926 arginyl-glycyl-serine Proteins 0.000 description 16
- 108010062266 glycyl-glycyl-argininal Proteins 0.000 description 16
- PUUPMDXIHCOPJU-HJGDQZAQSA-N Asn-Thr-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O PUUPMDXIHCOPJU-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 15
- FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N Thr-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 15
- 230000034994 death Effects 0.000 description 15
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 15
- VNFSAYFQLXPHPY-CIQUZCHMSA-N Ala-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O VNFSAYFQLXPHPY-CIQUZCHMSA-N 0.000 description 14
- SVGAWGVHFIYAEE-JSGCOSHPSA-N Trp-Gly-Gln Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 SVGAWGVHFIYAEE-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 14
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 14
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 14
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 14
- JSHWXQIZOCVWIA-ZKWXMUAHSA-N Asp-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O JSHWXQIZOCVWIA-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 13
- MSHXWFKYXJTLEZ-CIUDSAMLSA-N Gln-Met-Asn Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N MSHXWFKYXJTLEZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 13
- KRRMJKMGWWXWDW-STQMWFEESA-N Gly-Arg-Phe Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KRRMJKMGWWXWDW-STQMWFEESA-N 0.000 description 13
- WSXNWASHQNSMRX-GVXVVHGQSA-N His-Val-Gln Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N WSXNWASHQNSMRX-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 13
- -1 STAT3 Proteins 0.000 description 13
- AZSHAZJLOZQYAY-FXQIFTODSA-N Val-Ala-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O AZSHAZJLOZQYAY-FXQIFTODSA-N 0.000 description 13
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 13
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 13
- PBAMJJXWDQXOJA-FXQIFTODSA-N Ala-Asp-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N PBAMJJXWDQXOJA-FXQIFTODSA-N 0.000 description 12
- AJBVYEYZVYPFCF-CIUDSAMLSA-N Ala-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O AJBVYEYZVYPFCF-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 12
- XAXMJQUMRJAFCH-CQDKDKBSSA-N Ala-Tyr-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CC1=CC=C(O)C=C1 XAXMJQUMRJAFCH-CQDKDKBSSA-N 0.000 description 12
- PQWTZSNVWSOFFK-FXQIFTODSA-N Arg-Asp-Asn Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N)CN=C(N)N PQWTZSNVWSOFFK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 12
- YNSGXDWWPCGGQS-YUMQZZPRSA-N Arg-Gly-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YNSGXDWWPCGGQS-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 12
- ICAYWNTWHRRAQP-FXQIFTODSA-N Asp-Arg-Cys Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)CN=C(N)N ICAYWNTWHRRAQP-FXQIFTODSA-N 0.000 description 12
- TZOZNVLBTAFJRW-UGYAYLCHSA-N Asp-Ile-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N TZOZNVLBTAFJRW-UGYAYLCHSA-N 0.000 description 12
- CJUKAWUWBZCTDQ-SRVKXCTJSA-N Asp-Leu-Lys Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O CJUKAWUWBZCTDQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 12
- REJJNXODKSHOKA-ACZMJKKPSA-N Gln-Ala-Asp Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N REJJNXODKSHOKA-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 12
- YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N Glu-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 12
- VNNRLUNBJSWZPF-ZKWXMUAHSA-N Gly-Ser-Ile Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O VNNRLUNBJSWZPF-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 12
- MGDFPGCFVJFITQ-CIUDSAMLSA-N Pro-Glu-Asp Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O MGDFPGCFVJFITQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 12
- GFDUZZACIWNMPE-KZVJFYERSA-N Thr-Ala-Met Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O GFDUZZACIWNMPE-KZVJFYERSA-N 0.000 description 12
- SIMKLINEDYOTKL-MBLNEYKQSA-N Thr-His-Ala Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)N)O SIMKLINEDYOTKL-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 12
- YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N Thr-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N 0.000 description 12
- WTRQBSSQBKRNKV-MNSWYVGCSA-N Trp-Thr-Tyr Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)[C@H](O)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 WTRQBSSQBKRNKV-MNSWYVGCSA-N 0.000 description 12
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 12
- 108010016616 cysteinylglycine Proteins 0.000 description 12
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 12
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 12
- VBDMWOKJZDCFJM-FXQIFTODSA-N Ala-Ala-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)N VBDMWOKJZDCFJM-FXQIFTODSA-N 0.000 description 11
- QEYJFBMTSMLPKZ-ZKWXMUAHSA-N Asn-Ala-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O QEYJFBMTSMLPKZ-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 11
- UTKUTMJSWKKHEM-WDSKDSINSA-N Glu-Ala-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O UTKUTMJSWKKHEM-WDSKDSINSA-N 0.000 description 11
- ZZIFPJZQHRJERU-WDSKDSINSA-N Glu-Cys-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O ZZIFPJZQHRJERU-WDSKDSINSA-N 0.000 description 11
- GGJOGFJIPPGNRK-JSGCOSHPSA-N Glu-Gly-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)N)C(O)=O)=CNC2=C1 GGJOGFJIPPGNRK-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 11
- QVXWAFZDWRLXTI-NWLDYVSISA-N Glu-Thr-Trp Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)O QVXWAFZDWRLXTI-NWLDYVSISA-N 0.000 description 11
- IANBSEOVTQNGBZ-BQBZGAKWSA-N Gly-Cys-Met Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O IANBSEOVTQNGBZ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 11
- YNIMVVJTPWCUJH-KBPBESRZSA-N Gly-His-Tyr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O YNIMVVJTPWCUJH-KBPBESRZSA-N 0.000 description 11
- WMGHDYWNHNLGBV-ONGXEEELSA-N Gly-Phe-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=CC=C1 WMGHDYWNHNLGBV-ONGXEEELSA-N 0.000 description 11
- DEMIXZCKUXVEBO-BWAGICSOSA-N His-Thr-Tyr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N)O DEMIXZCKUXVEBO-BWAGICSOSA-N 0.000 description 11
- YKNBJXOJTURHCU-DCAQKATOSA-N Leu-Asp-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N YKNBJXOJTURHCU-DCAQKATOSA-N 0.000 description 11
- JXQVYPWVGUOIDV-MXAVVETBSA-N Phe-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O JXQVYPWVGUOIDV-MXAVVETBSA-N 0.000 description 11
- KQNDIKOYWZTZIX-FXQIFTODSA-N Ser-Ser-Arg Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N KQNDIKOYWZTZIX-FXQIFTODSA-N 0.000 description 11
- TYVAWPFQYFPSBR-BFHQHQDPSA-N Thr-Ala-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O TYVAWPFQYFPSBR-BFHQHQDPSA-N 0.000 description 11
- OHAJHDJOCKKJLV-LKXGYXEUSA-N Thr-Asp-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O OHAJHDJOCKKJLV-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 11
- LVRFMARKDGGZMX-IZPVPAKOSA-N Thr-Tyr-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 LVRFMARKDGGZMX-IZPVPAKOSA-N 0.000 description 11
- UMXSDHPSMROQRB-YJRXYDGGSA-N Tyr-Cys-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N)O UMXSDHPSMROQRB-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 11
- GOPQNCQSXBJAII-ULQDDVLXSA-N Tyr-Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N GOPQNCQSXBJAII-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 11
- DIOSYUIWOQCXNR-ONGXEEELSA-N Val-Lys-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O DIOSYUIWOQCXNR-ONGXEEELSA-N 0.000 description 11
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 11
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 11
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 11
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 11
- 108010005942 methionylglycine Proteins 0.000 description 11
- 102200006539 rs121913529 Human genes 0.000 description 11
- 108010080629 tryptophan-leucine Proteins 0.000 description 11
- 101000984753 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase B-raf Proteins 0.000 description 10
- QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N Leu-Val-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 10
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 10
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 10
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 10
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 10
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 10
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 10
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 description 10
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 10
- SLKLLQWZQHXYSV-CIUDSAMLSA-N Asn-Ala-Lys Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O SLKLLQWZQHXYSV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 9
- HNAUFGBKJLTWQE-IFFSRLJSSA-N Gln-Val-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O HNAUFGBKJLTWQE-IFFSRLJSSA-N 0.000 description 9
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 9
- 102100027103 Serine/threonine-protein kinase B-raf Human genes 0.000 description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 9
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 8
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 description 8
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 description 8
- NPSWCZIRBAYNSB-JHEQGTHGSA-N Gly-Gln-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O NPSWCZIRBAYNSB-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 7
- WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N N-L-alanyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)C)C(O)=O)=CNC2=C1 WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 7
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 6
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 6
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 6
- 102000001712 STAT5 Transcription Factor Human genes 0.000 description 6
- 108010029477 STAT5 Transcription Factor Proteins 0.000 description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 6
- 230000006870 function Effects 0.000 description 6
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 6
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 6
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 6
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 5
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 5
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 5
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 5
- PELIQFPESHBTMA-WLTAIBSBSA-N Thr-Tyr-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PELIQFPESHBTMA-WLTAIBSBSA-N 0.000 description 5
- ZAGPDPNPWYPEIR-SRVKXCTJSA-N Tyr-Cys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ZAGPDPNPWYPEIR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 5
- 102000016914 ras Proteins Human genes 0.000 description 5
- 108010014186 ras Proteins Proteins 0.000 description 5
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 5
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 5
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 4
- WMLFFCRUSPNENW-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ser-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WMLFFCRUSPNENW-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 4
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 4
- LHYJCVCQPWRMKZ-WEDXCCLWSA-N Gly-Leu-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LHYJCVCQPWRMKZ-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 4
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 4
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 4
- JGUWRQWULDWNCM-FXQIFTODSA-N Ser-Val-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O JGUWRQWULDWNCM-FXQIFTODSA-N 0.000 description 4
- MBGFDZDWMDLXHQ-GUBZILKMSA-N Val-Met-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](C(C)C)N MBGFDZDWMDLXHQ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 4
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 4
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 4
- 239000000306 component Substances 0.000 description 4
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 4
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 4
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 4
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 4
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 4
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 4
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- ZQFRDAZBTSFGGW-SRVKXCTJSA-N Asp-Ser-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O ZQFRDAZBTSFGGW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 description 3
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 3
- IBYOLNARKHMLBG-WHOFXGATSA-N Gly-Phe-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=CC=C1 IBYOLNARKHMLBG-WHOFXGATSA-N 0.000 description 3
- PNUFMLXHOLFRLD-KBPBESRZSA-N Gly-Tyr-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=C(O)C=C1 PNUFMLXHOLFRLD-KBPBESRZSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- 206010061309 Neoplasm progression Diseases 0.000 description 3
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 3
- 108091000054 Prion Proteins 0.000 description 3
- 102000029797 Prion Human genes 0.000 description 3
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 3
- 102100033479 RAF proto-oncogene serine/threonine-protein kinase Human genes 0.000 description 3
- 108010044012 STAT1 Transcription Factor Proteins 0.000 description 3
- 108010081691 STAT2 Transcription Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000004265 STAT2 Transcription Factor Human genes 0.000 description 3
- 108010019992 STAT4 Transcription Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000005886 STAT4 Transcription Factor Human genes 0.000 description 3
- 108010011005 STAT6 Transcription Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000013968 STAT6 Transcription Factor Human genes 0.000 description 3
- NERYDXBVARJIQS-JYBASQMISA-N Ser-Trp-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CO)N)O NERYDXBVARJIQS-JYBASQMISA-N 0.000 description 3
- 102100029904 Signal transducer and activator of transcription 1-alpha/beta Human genes 0.000 description 3
- KZSYAEWQMJEGRZ-RHYQMDGZSA-N Thr-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O KZSYAEWQMJEGRZ-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 3
- MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N Thr-Val-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 3
- 208000003721 Triple Negative Breast Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 102000057041 human TNF Human genes 0.000 description 3
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 3
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 231100000682 maximum tolerated dose Toxicity 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 3
- 238000003359 percent control normalization Methods 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 3
- 235000004400 serine Nutrition 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 3
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 3
- 230000005751 tumor progression Effects 0.000 description 3
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 3
- ZAWXOCUFQSQDJS-VIFPVBQESA-N (3s)-8-hydroxy-3-methyl-3,4-dihydro-2h-benzo[a]anthracene-1,7,12-trione Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC=C2C(=O)C2=C1C=CC1=C2C(=O)C[C@@H](C)C1 ZAWXOCUFQSQDJS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 1,4-benzoquinone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C=C1 AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- ZPZDIFSPRVHGIF-UHFFFAOYSA-N 3-aminopropylsilicon Chemical compound NCCC[Si] ZPZDIFSPRVHGIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GSGMKINCHGAOPK-UHFFFAOYSA-N 5,8-dioxo-6-(pyridin-3-ylamino)naphthalene-1-sulfonamide Chemical compound C=1C(=O)C=2C(S(=O)(=O)N)=CC=CC=2C(=O)C=1NC1=CC=CN=C1 GSGMKINCHGAOPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KUDREHRZRIVKHS-UWJYBYFXSA-N Ala-Asp-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O KUDREHRZRIVKHS-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 2
- IFTVANMRTIHKML-WDSKDSINSA-N Ala-Gln-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O IFTVANMRTIHKML-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- FQNILRVJOJBFFC-FXQIFTODSA-N Ala-Pro-Asp Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N FQNILRVJOJBFFC-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- REWSWYIDQIELBE-FXQIFTODSA-N Ala-Val-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O REWSWYIDQIELBE-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- 206010073478 Anaplastic large-cell lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 2
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 2
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 2
- GVKKJJOMQCNPGB-JTQLQIEISA-N Cryptotanshinone Chemical compound O=C1C(=O)C2=C3CCCC(C)(C)C3=CC=C2C2=C1[C@@H](C)CO2 GVKKJJOMQCNPGB-JTQLQIEISA-N 0.000 description 2
- GVKKJJOMQCNPGB-UHFFFAOYSA-N Cryptotanshinone Natural products O=C1C(=O)C2=C3CCCC(C)(C)C3=CC=C2C2=C1C(C)CO2 GVKKJJOMQCNPGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FANFRJOFTYCNRG-JYBASQMISA-N Cys-Thr-Trp Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N)O FANFRJOFTYCNRG-JYBASQMISA-N 0.000 description 2
- 101100239628 Danio rerio myca gene Proteins 0.000 description 2
- 241001115402 Ebolavirus Species 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 2
- BMWFDYIYBAFROD-WPRPVWTQSA-N Gly-Pro-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CN BMWFDYIYBAFROD-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 2
- FFJQHWKSGAWSTJ-BFHQHQDPSA-N Gly-Thr-Ala Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O FFJQHWKSGAWSTJ-BFHQHQDPSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 101000826373 Homo sapiens Signal transducer and activator of transcription 3 Proteins 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 2
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 2
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 2
- 102000042838 JAK family Human genes 0.000 description 2
- 108091082332 JAK family Proteins 0.000 description 2
- 208000032004 Large-Cell Anaplastic Lymphoma Diseases 0.000 description 2
- WNGVUZWBXZKQES-YUMQZZPRSA-N Leu-Ala-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O WNGVUZWBXZKQES-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- KLSUAWUZBMAZCL-RHYQMDGZSA-N Leu-Thr-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O KLSUAWUZBMAZCL-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 2
- FLCMXEFCTLXBTL-DCAQKATOSA-N Lys-Asp-Arg Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N FLCMXEFCTLXBTL-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 2
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 2
- 101150039798 MYC gene Proteins 0.000 description 2
- PVSPJQWHEIQTEH-JYJNAYRXSA-N Met-Val-Tyr Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PVSPJQWHEIQTEH-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 2
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 2
- 108010021466 Mutant Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000008300 Mutant Proteins Human genes 0.000 description 2
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 206010067572 Oestrogenic effect Diseases 0.000 description 2
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 2
- DLZBBDSPTJBOOD-BPNCWPANSA-N Pro-Tyr-Ala Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O DLZBBDSPTJBOOD-BPNCWPANSA-N 0.000 description 2
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 2
- 102000009516 Protein Serine-Threonine Kinases Human genes 0.000 description 2
- 108010009341 Protein Serine-Threonine Kinases Proteins 0.000 description 2
- 101710141955 RAF proto-oncogene serine/threonine-protein kinase Proteins 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 208000035977 Rare disease Diseases 0.000 description 2
- HWNUSGNZBAISFM-UHFFFAOYSA-N S3I-201 Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)OCC(=O)NC1=CC=C(C(O)=O)C(O)=C1 HWNUSGNZBAISFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 2
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 2
- WXUBSIDKNMFAGS-IHRRRGAJSA-N Ser-Arg-Tyr Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 WXUBSIDKNMFAGS-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- HEQPKICPPDOSIN-SRVKXCTJSA-N Ser-Asp-Tyr Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 HEQPKICPPDOSIN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UHBPFYOQQPFKQR-JHEQGTHGSA-N Thr-Gln-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O UHBPFYOQQPFKQR-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 2
- AZGZDDNKFFUDEH-QWRGUYRKSA-N Tyr-Gly-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 AZGZDDNKFFUDEH-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- SBLZVFCEOCWRLS-BPNCWPANSA-N Tyr-Met-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N SBLZVFCEOCWRLS-BPNCWPANSA-N 0.000 description 2
- LUMQYLVYUIRHHU-YJRXYDGGSA-N Tyr-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LUMQYLVYUIRHHU-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 2
- NUQZCPSZHGIYTA-HKUYNNGSSA-N Tyr-Trp-Gly Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC3=CC=C(C=C3)O)N NUQZCPSZHGIYTA-HKUYNNGSSA-N 0.000 description 2
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 2
- COYSIHFOCOMGCF-UHFFFAOYSA-N Val-Arg-Gly Natural products CC(C)C(N)C(=O)NC(C(=O)NCC(O)=O)CCCN=C(N)N COYSIHFOCOMGCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- 101100459258 Xenopus laevis myc-a gene Proteins 0.000 description 2
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 2
- 108010093581 aspartyl-proline Proteins 0.000 description 2
- 238000011717 athymic nude mouse Methods 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 2
- CCGSUNCLSOWKJO-UHFFFAOYSA-N cimetidine Chemical compound N#CNC(=N/C)\NCCSCC1=NC=N[C]1C CCGSUNCLSOWKJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001380 cimetidine Drugs 0.000 description 2
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N curcumin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(\C=C\C(=O)CC(=O)\C=C\C=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 2
- HKSZLNNOFSGOKW-UHFFFAOYSA-N ent-staurosporine Natural products C12=C3N4C5=CC=CC=C5C3=C3CNC(=O)C3=C2C2=CC=CC=C2N1C1CC(NC)C(OC)C4(C)O1 HKSZLNNOFSGOKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001076 estrogenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 235000003869 genetically modified organism Nutrition 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 102000049555 human KRAS Human genes 0.000 description 2
- 102000051841 human STAT3 Human genes 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 208000002780 macular degeneration Diseases 0.000 description 2
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 2
- XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N metformin Chemical compound CN(C)C(=N)NC(N)=N XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003105 metformin Drugs 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 201000005962 mycosis fungoides Diseases 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 2
- 208000038009 orphan disease Diseases 0.000 description 2
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 108010031719 prolyl-serine Proteins 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- PUZPDOWCWNUUKD-UHFFFAOYSA-M sodium fluoride Chemical compound [F-].[Na+] PUZPDOWCWNUUKD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- HKSZLNNOFSGOKW-FYTWVXJKSA-N staurosporine Chemical compound C12=C3N4C5=CC=CC=C5C3=C3CNC(=O)C3=C2C2=CC=CC=C2N1[C@H]1C[C@@H](NC)[C@@H](OC)[C@]4(C)O1 HKSZLNNOFSGOKW-FYTWVXJKSA-N 0.000 description 2
- CGPUWJWCVCFERF-UHFFFAOYSA-N staurosporine Natural products C12=C3N4C5=CC=CC=C5C3=C3CNC(=O)C3=C2C2=CC=CC=C2N1C1CC(NC)C(OC)C4(OC)O1 CGPUWJWCVCFERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 208000022679 triple-negative breast carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- QNOCRUSVMMAKSC-CCEZHUSRSA-N (3e)-1-methyl-3-(2-oxo-1h-indol-3-ylidene)indol-2-one Chemical compound C12=CC=CC=C2N(C)C(=O)\C1=C\1C2=CC=CC=C2NC/1=O QNOCRUSVMMAKSC-CCEZHUSRSA-N 0.000 description 1
- CRDNMYFJWFXOCH-YPKPFQOOSA-N (3z)-3-(3-oxo-1h-indol-2-ylidene)-1h-indol-2-one Chemical class N/1C2=CC=CC=C2C(=O)C\1=C1/C2=CC=CC=C2NC1=O CRDNMYFJWFXOCH-YPKPFQOOSA-N 0.000 description 1
- VFUAJMPDXIRPKO-LQELWAHVSA-N (e)-3-(6-bromopyridin-2-yl)-2-cyano-n-[(1s)-1-phenylethyl]prop-2-enamide Chemical compound N([C@@H](C)C=1C=CC=CC=1)C(=O)C(\C#N)=C\C1=CC=CC(Br)=N1 VFUAJMPDXIRPKO-LQELWAHVSA-N 0.000 description 1
- PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 16-Epiaffinine Natural products C1C(C2=CC=CC=C2N2)=C2C(=O)CC2C(=CC)CN(C)C1C2CO PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZJMHQDKLWUWPDR-UHFFFAOYSA-N 5-[(4-cyclohexylphenyl)methyl-(4-phenoxybenzoyl)amino]-2-hydroxybenzoic acid Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(N(CC=2C=CC(=CC=2)C2CCCCC2)C(=O)C=2C=CC(OC=3C=CC=CC=3)=CC=2)=C1 ZJMHQDKLWUWPDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CQBHSRLUQDYPBU-UHFFFAOYSA-N 5-hydroxy-9,10-dioxoanthracene-1-sulfonamide Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC=C2C(=O)C2=C1C=CC=C2S(=O)(=O)N CQBHSRLUQDYPBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 208000026872 Addison Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000010507 Adenocarcinoma of Lung Diseases 0.000 description 1
- ZIWWTZWAKYBUOB-CIUDSAMLSA-N Ala-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ZIWWTZWAKYBUOB-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- QQACQIHVWCVBBR-GVARAGBVSA-N Ala-Ile-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O QQACQIHVWCVBBR-GVARAGBVSA-N 0.000 description 1
- DYXOFPBJBAHWFY-JBDRJPRFSA-N Ala-Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](C)N DYXOFPBJBAHWFY-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- IYKVSFNGSWTTNZ-GUBZILKMSA-N Ala-Val-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N IYKVSFNGSWTTNZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N Amphotericin-B Natural products O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1C=CC=CC=CC=CC=CC=CC=C[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N 0.000 description 1
- 102000009091 Amyloidogenic Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010048112 Amyloidogenic Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 1
- 235000002198 Annona diversifolia Nutrition 0.000 description 1
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 1
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 1
- 102000011730 Arachidonate 12-Lipoxygenase Human genes 0.000 description 1
- 108010076676 Arachidonate 12-lipoxygenase Proteins 0.000 description 1
- 102000009515 Arachidonate 15-Lipoxygenase Human genes 0.000 description 1
- 108010048907 Arachidonate 15-lipoxygenase Proteins 0.000 description 1
- KWKQGHSSNHPGOW-BQBZGAKWSA-N Arg-Ala-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O KWKQGHSSNHPGOW-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- HKRXJBBCQBAGIM-FXQIFTODSA-N Arg-Asp-Ser Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N)CN=C(N)N HKRXJBBCQBAGIM-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- HPKSHFSEXICTLI-CIUDSAMLSA-N Arg-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HPKSHFSEXICTLI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- QAODJPUKWNNNRP-DCAQKATOSA-N Arg-Glu-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O QAODJPUKWNNNRP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- HQIZDMIGUJOSNI-IUCAKERBSA-N Arg-Gly-Arg Chemical compound N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O HQIZDMIGUJOSNI-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- CVXXSWQORBZAAA-SRVKXCTJSA-N Arg-Lys-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N CVXXSWQORBZAAA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- PRLPSDIHSRITSF-UNQGMJICSA-N Arg-Phe-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PRLPSDIHSRITSF-UNQGMJICSA-N 0.000 description 1
- XYOVHPDDWCEUDY-CIUDSAMLSA-N Asn-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O XYOVHPDDWCEUDY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- DDPXDCKYWDGZAL-BQBZGAKWSA-N Asn-Gly-Arg Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N DDPXDCKYWDGZAL-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- UDSVWSUXKYXSTR-QWRGUYRKSA-N Asn-Gly-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O UDSVWSUXKYXSTR-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- QYRMBFWDSFGSFC-OLHMAJIHSA-N Asn-Thr-Asn Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O QYRMBFWDSFGSFC-OLHMAJIHSA-N 0.000 description 1
- VPSHHQXIWLGVDD-ZLUOBGJFSA-N Asp-Asp-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O VPSHHQXIWLGVDD-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- XYPJXLLXNSAWHZ-SRVKXCTJSA-N Asp-Ser-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O XYPJXLLXNSAWHZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- HTSSXFASOUSJQG-IHPCNDPISA-N Asp-Tyr-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O HTSSXFASOUSJQG-IHPCNDPISA-N 0.000 description 1
- 206010003571 Astrocytoma Diseases 0.000 description 1
- XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N Atorvastatin Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N 0.000 description 1
- XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N Atorvastatin Natural products C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003827 Autoimmune hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000012935 Averaging Methods 0.000 description 1
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 1
- 238000011729 BALB/c nude mouse Methods 0.000 description 1
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 208000023328 Basedow disease Diseases 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- QAGYKUNXZHXKMR-UHFFFAOYSA-N CPD000469186 Natural products CC1=C(O)C=CC=C1C(=O)NC(C(O)CN1C(CC2CCCCC2C1)C(=O)NC(C)(C)C)CSC1=CC=CC=C1 QAGYKUNXZHXKMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010041952 Calmodulin Proteins 0.000 description 1
- 102000000584 Calmodulin Human genes 0.000 description 1
- 206010007572 Cardiac hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 208000006029 Cardiomegaly Diseases 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 1
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 1
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 208000032544 Cicatrix Diseases 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- IHTCCHVMPGDDSL-ZJNDIJRCSA-N Cucurbitacin A Natural products O=C([C@@](O)(C)[C@H]1[C@@H](O)C[C@]2(C)[C@]1(C)CC(=O)[C@]1(CO)[C@H]2CC=C2C(C)(C)C(=O)[C@H](O)C[C@@H]12)/C=C/C(OC(=O)C)(C)C IHTCCHVMPGDDSL-ZJNDIJRCSA-N 0.000 description 1
- IHTCCHVMPGDDSL-IVNGUWCNSA-N Cucurbitacin A Chemical compound C([C@H]1[C@]2(C)C[C@@H](O)[C@@H]([C@]2(CC(=O)[C@]11CO)C)[C@@](C)(O)C(=O)/C=C/C(C)(C)OC(=O)C)C=C2[C@H]1C[C@H](O)C(=O)C2(C)C IHTCCHVMPGDDSL-IVNGUWCNSA-N 0.000 description 1
- 101710095468 Cyclase Proteins 0.000 description 1
- 102100024457 Cyclin-dependent kinase 9 Human genes 0.000 description 1
- BZKFMUIJRXWWQK-UHFFFAOYSA-N Cyclopentenone Chemical class O=C1CCC=C1 BZKFMUIJRXWWQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100077740 Cyprinus carpio map2k2 gene Proteins 0.000 description 1
- XZKJEOMFLDVXJG-KATARQTJSA-N Cys-Leu-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)N)O XZKJEOMFLDVXJG-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- AFYGNOJUTMXQIG-FXQIFTODSA-N Cys-Met-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)N AFYGNOJUTMXQIG-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- VIOQRFNAZDMVLO-NRPADANISA-N Cys-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VIOQRFNAZDMVLO-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- 102000052510 DNA-Binding Proteins Human genes 0.000 description 1
- 101710096438 DNA-binding protein Proteins 0.000 description 1
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 1
- 101000606317 Drosophila melanogaster Protein patched Proteins 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 208000031637 Erythroblastic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000036566 Erythroleukaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006168 Ewing Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 108091006027 G proteins Proteins 0.000 description 1
- 108090000045 G-Protein-Coupled Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000003688 G-Protein-Coupled Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102000013446 GTP Phosphohydrolases Human genes 0.000 description 1
- 102000030782 GTP binding Human genes 0.000 description 1
- 108091000058 GTP-Binding Proteins 0.000 description 1
- 102100029974 GTPase HRas Human genes 0.000 description 1
- 102100039788 GTPase NRas Human genes 0.000 description 1
- 108091006109 GTPases Proteins 0.000 description 1
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- LKUWAWGNJYJODH-KBIXCLLPSA-N Gln-Ala-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O LKUWAWGNJYJODH-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- ININBLZFFVOQIO-JHEQGTHGSA-N Gln-Thr-Gly Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O ININBLZFFVOQIO-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 1
- VLOLPWWCNKWRNB-LOKLDPHHSA-N Gln-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O VLOLPWWCNKWRNB-LOKLDPHHSA-N 0.000 description 1
- QGWXAMDECCKGRU-XVKPBYJWSA-N Gln-Val-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O QGWXAMDECCKGRU-XVKPBYJWSA-N 0.000 description 1
- GZUKEVBTYNNUQF-WDSKDSINSA-N Gly-Ala-Gln Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O GZUKEVBTYNNUQF-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- YMUFWNJHVPQNQD-ZKWXMUAHSA-N Gly-Ala-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN YMUFWNJHVPQNQD-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- VSVZIEVNUYDAFR-YUMQZZPRSA-N Gly-Ala-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN VSVZIEVNUYDAFR-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- BGVYNAQWHSTTSP-BYULHYEWSA-N Gly-Asn-Ile Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O BGVYNAQWHSTTSP-BYULHYEWSA-N 0.000 description 1
- PMNHJLASAAWELO-FOHZUACHSA-N Gly-Asp-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PMNHJLASAAWELO-FOHZUACHSA-N 0.000 description 1
- BYYNJRSNDARRBX-YFKPBYRVSA-N Gly-Gln-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O BYYNJRSNDARRBX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ALOBJFDJTMQQPW-ONGXEEELSA-N Gly-His-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)CN ALOBJFDJTMQQPW-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- PAWIVEIWWYGBAM-YUMQZZPRSA-N Gly-Leu-Ala Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PAWIVEIWWYGBAM-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- ULZCYBYDTUMHNF-IUCAKERBSA-N Gly-Leu-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ULZCYBYDTUMHNF-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- VEPBEGNDJYANCF-QWRGUYRKSA-N Gly-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCCN VEPBEGNDJYANCF-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- OQQKUTVULYLCDG-ONGXEEELSA-N Gly-Lys-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)CN)C(O)=O OQQKUTVULYLCDG-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- WCORRBXVISTKQL-WHFBIAKZSA-N Gly-Ser-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WCORRBXVISTKQL-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- GBYYQVBXFVDJPJ-WLTAIBSBSA-N Gly-Tyr-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)CN)O GBYYQVBXFVDJPJ-WLTAIBSBSA-N 0.000 description 1
- DUAWRXXTOQOECJ-JSGCOSHPSA-N Gly-Tyr-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O DUAWRXXTOQOECJ-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 1
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100039619 Granulocyte colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 1
- 208000012766 Growth delay Diseases 0.000 description 1
- 102100039939 Growth/differentiation factor 8 Human genes 0.000 description 1
- 208000035895 Guillain-Barré syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 101150054472 HER2 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010078851 HIV Reverse Transcriptase Proteins 0.000 description 1
- 208000001204 Hashimoto Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 101000933320 Homo sapiens Breakpoint cluster region protein Proteins 0.000 description 1
- 101000721661 Homo sapiens Cellular tumor antigen p53 Proteins 0.000 description 1
- 101000980930 Homo sapiens Cyclin-dependent kinase 9 Proteins 0.000 description 1
- 101000584633 Homo sapiens GTPase HRas Proteins 0.000 description 1
- 101000744505 Homo sapiens GTPase NRas Proteins 0.000 description 1
- 101000950669 Homo sapiens Mitogen-activated protein kinase 9 Proteins 0.000 description 1
- 101001005602 Homo sapiens Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 11 Proteins 0.000 description 1
- 101000973623 Homo sapiens Neuronal growth regulator 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 1
- 101100043112 Homo sapiens SERPINB3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 1
- 241000714260 Human T-lymphotropic virus 1 Species 0.000 description 1
- 208000023105 Huntington disease Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- IIWQTXMUALXGOV-PCBIJLKTSA-N Ile-Phe-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N IIWQTXMUALXGOV-PCBIJLKTSA-N 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 108010055717 JNK Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000019145 JUN kinase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000007766 Kaposi sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 208000002260 Keloid Diseases 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 241000282838 Lama Species 0.000 description 1
- 208000006404 Large Granular Lymphocytic Leukemia Diseases 0.000 description 1
- OMHLATXVNQSALM-FQUUOJAGSA-N Leu-Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N OMHLATXVNQSALM-FQUUOJAGSA-N 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N Leupeptin Natural products CC(C)CC(NC(C)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010024612 Lipoma Diseases 0.000 description 1
- 102000003820 Lipoxygenases Human genes 0.000 description 1
- 108090000128 Lipoxygenases Proteins 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 102000004083 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 1
- KKFVKBWCXXLKIK-AVGNSLFASA-N Lys-His-Glu Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N KKFVKBWCXXLKIK-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- 102000001291 MAP Kinase Kinase Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108060006687 MAP kinase kinase kinase Proteins 0.000 description 1
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 1
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 1
- 208000007466 Male Infertility Diseases 0.000 description 1
- 101150010110 Map3k8 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010049567 Miller Fisher syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102100023482 Mitogen-activated protein kinase 14 Human genes 0.000 description 1
- 102100037809 Mitogen-activated protein kinase 9 Human genes 0.000 description 1
- 102100025207 Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 11 Human genes 0.000 description 1
- 102100025180 Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 12 Human genes 0.000 description 1
- 102100026907 Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 8 Human genes 0.000 description 1
- 101001009089 Mus musculus Tyrosine-protein kinase HCK Proteins 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- 102000003505 Myosin Human genes 0.000 description 1
- 108060008487 Myosin Proteins 0.000 description 1
- 108010056852 Myostatin Proteins 0.000 description 1
- 108010047562 NGR peptide Proteins 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 102100022223 Neuronal growth regulator 1 Human genes 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 108091092724 Noncoding DNA Proteins 0.000 description 1
- 108010070047 Notch Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005650 Notch Receptors Human genes 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 102000043276 Oncogene Human genes 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 208000010191 Osteitis Deformans Diseases 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 1
- 102000038030 PI3Ks Human genes 0.000 description 1
- 208000027868 Paget disease Diseases 0.000 description 1
- 208000008900 Pancreatic Ductal Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000030852 Parasitic disease Diseases 0.000 description 1
- 206010034038 Parotitis Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 241000721454 Pemphigus Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- LGBVMDMZZFYSFW-HJWJTTGWSA-N Phe-Arg-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N LGBVMDMZZFYSFW-HJWJTTGWSA-N 0.000 description 1
- 102000045595 Phosphoprotein Phosphatases Human genes 0.000 description 1
- 108700019535 Phosphoprotein Phosphatases Proteins 0.000 description 1
- 108010089430 Phosphoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007982 Phosphoproteins Human genes 0.000 description 1
- 102000004861 Phosphoric Diester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090001050 Phosphoric Diester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- ZCXQTRXYZOSGJR-FXQIFTODSA-N Pro-Asp-Ser Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ZCXQTRXYZOSGJR-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- LEIKGVHQTKHOLM-IUCAKERBSA-N Pro-Pro-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 LEIKGVHQTKHOLM-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- IMNVAOPEMFDAQD-NHCYSSNCSA-N Pro-Val-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IMNVAOPEMFDAQD-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- 101710098940 Pro-epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 102000004005 Prostaglandin-endoperoxide synthases Human genes 0.000 description 1
- 108090000459 Prostaglandin-endoperoxide synthases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 102000042888 RAF family Human genes 0.000 description 1
- 108091082327 RAF family Proteins 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N Resveratrol Natural products OC1=CC=CC(C=CC=2C=C(O)C(O)=CC=2)=C1 QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000007737 Retinal degeneration Diseases 0.000 description 1
- NCDNCNXCDXHOMX-UHFFFAOYSA-N Ritonavir Natural products C=1C=CC=CC=1CC(NC(=O)OCC=1SC=NC=1)C(O)CC(CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)N(C)CC1=CSC(C(C)C)=N1 NCDNCNXCDXHOMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150001535 SRC gene Proteins 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- HQTKVSCNCDLXSX-BQBZGAKWSA-N Ser-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O HQTKVSCNCDLXSX-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- YMEXHZTVKDAKIY-GHCJXIJMSA-N Ser-Asn-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO)C(O)=O YMEXHZTVKDAKIY-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 1
- YRBGKVIWMNEVCZ-WDSKDSINSA-N Ser-Glu-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O YRBGKVIWMNEVCZ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- GZFAWAQTEYDKII-YUMQZZPRSA-N Ser-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CO GZFAWAQTEYDKII-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- MUJQWSAWLLRJCE-KATARQTJSA-N Ser-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O MUJQWSAWLLRJCE-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- FPCGZYMRFFIYIH-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FPCGZYMRFFIYIH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- XKFJENWJGHMDLI-QWRGUYRKSA-N Ser-Phe-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(O)=O XKFJENWJGHMDLI-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N Ser-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- PMTWIUBUQRGCSB-FXQIFTODSA-N Ser-Val-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PMTWIUBUQRGCSB-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 102100036383 Serpin B3 Human genes 0.000 description 1
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006045 Spondylarthropathies Diseases 0.000 description 1
- 108010085012 Steroid Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000007451 Steroid Receptors Human genes 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 208000031673 T-Cell Cutaneous Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- YDWLCDQXLCILCZ-BWAGICSOSA-N Thr-His-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O YDWLCDQXLCILCZ-BWAGICSOSA-N 0.000 description 1
- IJVNLNRVDUTWDD-MEYUZBJRSA-N Thr-Leu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O IJVNLNRVDUTWDD-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- FBQHKSPOIAFUEI-OWLDWWDNSA-N Thr-Trp-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O FBQHKSPOIAFUEI-OWLDWWDNSA-N 0.000 description 1
- XGFYGMKZKFRGAI-RCWTZXSCSA-N Thr-Val-Arg Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N XGFYGMKZKFRGAI-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 1
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 1
- LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N Trans-resveratrol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1\C=C\C1=CC(O)=CC(O)=C1 LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000887 Transcription factor STAT Human genes 0.000 description 1
- 108050007918 Transcription factor STAT Proteins 0.000 description 1
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 208000030886 Traumatic Brain injury Diseases 0.000 description 1
- UTQBQJNSNXJNIH-IHPCNDPISA-N Trp-Asn-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)N UTQBQJNSNXJNIH-IHPCNDPISA-N 0.000 description 1
- YXONONCLMLHWJX-SZMVWBNQSA-N Trp-Glu-Leu Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 YXONONCLMLHWJX-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- HQJOVVWAPQPYDS-ZFWWWQNUSA-N Trp-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O HQJOVVWAPQPYDS-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 1
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 1
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- AKFLVKKWVZMFOT-IHRRRGAJSA-N Tyr-Arg-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O AKFLVKKWVZMFOT-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- HTHCZRWCFXMENJ-KKUMJFAQSA-N Tyr-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HTHCZRWCFXMENJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- AKXBNSZMYAOGLS-STQMWFEESA-N Tyr-Arg-Gly Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 AKXBNSZMYAOGLS-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- SMLCYZYQFRTLCO-UWJYBYFXSA-N Tyr-Cys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SMLCYZYQFRTLCO-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- JWGXUKHIKXZWNG-RYUDHWBXSA-N Tyr-Gly-Gln Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N)O JWGXUKHIKXZWNG-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- HIINQLBHPIQYHN-JTQLQIEISA-N Tyr-Gly-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 HIINQLBHPIQYHN-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- QFXVAFIHVWXXBJ-AVGNSLFASA-N Tyr-Ser-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O QFXVAFIHVWXXBJ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- ITDWWLTTWRRLCC-KJEVXHAQSA-N Tyr-Thr-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@H](O)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 ITDWWLTTWRRLCC-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 1
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 1
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 description 1
- 101150010086 VP24 gene Proteins 0.000 description 1
- COYSIHFOCOMGCF-WPRPVWTQSA-N Val-Arg-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CCCN=C(N)N COYSIHFOCOMGCF-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 1
- XXWBHOWRARMUOC-NHCYSSNCSA-N Val-Lys-Asn Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N XXWBHOWRARMUOC-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- NLNCNKIVJPEFBC-DLOVCJGASA-N Val-Val-Glu Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O NLNCNKIVJPEFBC-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 208000008383 Wilms tumor Diseases 0.000 description 1
- 102000006757 Wnt Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010047118 Wnt Receptors Proteins 0.000 description 1
- INAPMGSXUVUWAF-GCVPSNMTSA-N [(2r,3s,5r,6r)-2,3,4,5,6-pentahydroxycyclohexyl] dihydrogen phosphate Chemical class OC1[C@H](O)[C@@H](O)C(OP(O)(O)=O)[C@H](O)[C@@H]1O INAPMGSXUVUWAF-GCVPSNMTSA-N 0.000 description 1
- NUEVMWXZKGBDPT-UHFFFAOYSA-N [4-[[4-(hexylcarbamoyl)-2-naphthalen-1-yl-1,3-oxazol-5-yl]methyl]phenyl] dihydrogen phosphate Chemical compound CCCCCCNC(=O)C=1N=C(C=2C3=CC=CC=C3C=CC=2)OC=1CC1=CC=C(OP(O)(O)=O)C=C1 NUEVMWXZKGBDPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000230 acceptable toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 208000009621 actinic keratosis Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 208000021841 acute erythroid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 108010024078 alanyl-glycyl-serine Proteins 0.000 description 1
- 208000004631 alopecia areata Diseases 0.000 description 1
- 108010050025 alpha-glutamyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- BIIVYFLTOXDAOV-YVEFUNNKSA-N alvocidib Chemical compound O[C@@H]1CN(C)CC[C@@H]1C1=C(O)C=C(O)C2=C1OC(C=1C(=CC=CC=1)Cl)=CC2=O BIIVYFLTOXDAOV-YVEFUNNKSA-N 0.000 description 1
- 229950010817 alvocidib Drugs 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- IYIKLHRQXLHMJQ-UHFFFAOYSA-N amiodarone Chemical compound CCCCC=1OC2=CC=CC=C2C=1C(=O)C1=CC(I)=C(OCCN(CC)CC)C(I)=C1 IYIKLHRQXLHMJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 description 1
- 229960003942 amphotericin b Drugs 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 1
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 1
- 230000007416 antiviral immune response Effects 0.000 description 1
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 108010001271 arginyl-glutamyl-arginine Proteins 0.000 description 1
- 108010038850 arginyl-isoleucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- 206010003230 arteritis Diseases 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 229950003462 atiprimod Drugs 0.000 description 1
- SERHTTSLBVGRBY-UHFFFAOYSA-N atiprimod Chemical compound C1CC(CCC)(CCC)CCC11CN(CCCN(CC)CC)CC1 SERHTTSLBVGRBY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 229960005370 atorvastatin Drugs 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 210000000013 bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 101150048834 braF gene Proteins 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 description 1
- RZEKVGVHFLEQIL-UHFFFAOYSA-N celecoxib Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C1=CC(C(F)(F)F)=NN1C1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 RZEKVGVHFLEQIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000590 celecoxib Drugs 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003570 cell viability assay Methods 0.000 description 1
- 230000033077 cellular process Effects 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960005395 cetuximab Drugs 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 208000025302 chronic primary adrenal insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 201000010989 colorectal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 230000002079 cooperative effect Effects 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- NISPVUDLMHQFRQ-ILFSFOJUSA-N cucurbitacin I Natural products CC(C)(O)C=CC(=O)[C@](C)(O)[C@H]1[C@H](O)C[C@@]2(C)[C@@H]3CC=C4[C@@H](C=C(O)C(=O)C4(C)C)[C@]3(C)C(=O)C[C@]12C NISPVUDLMHQFRQ-ILFSFOJUSA-N 0.000 description 1
- NISPVUDLMHQFRQ-MKIKIEMVSA-N cucurbitacin I Chemical compound C([C@H]1[C@]2(C)C[C@@H](O)[C@@H]([C@]2(CC(=O)[C@]11C)C)[C@@](C)(O)C(=O)/C=C/C(C)(O)C)C=C2[C@H]1C=C(O)C(=O)C2(C)C NISPVUDLMHQFRQ-MKIKIEMVSA-N 0.000 description 1
- 229940109262 curcumin Drugs 0.000 description 1
- 235000012754 curcumin Nutrition 0.000 description 1
- 239000004148 curcumin Substances 0.000 description 1
- 201000007241 cutaneous T cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N diferuloylmethane Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C=CC(=O)CC(=O)C=CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- MQHNKCZKNAJROC-UHFFFAOYSA-N dipropyl phthalate Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=CC=C1C(=O)OCCC MQHNKCZKNAJROC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 230000007783 downstream signaling Effects 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009088 enzymatic function Effects 0.000 description 1
- 201000010063 epididymitis Diseases 0.000 description 1
- 206010015037 epilepsy Diseases 0.000 description 1
- 108700020302 erbB-2 Genes Proteins 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 description 1
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000017188 evasion or tolerance of host immune response Effects 0.000 description 1
- 238000013265 extended release Methods 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 108010006664 gamma-glutamyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 150000002333 glycines Chemical class 0.000 description 1
- 108010090037 glycyl-alanyl-isoleucine Proteins 0.000 description 1
- 108010010147 glycylglutamine Proteins 0.000 description 1
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 1
- RQFCJASXJCIDSX-UUOKFMHZSA-N guanosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O RQFCJASXJCIDSX-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 1
- 208000007475 hemolytic anemia Diseases 0.000 description 1
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000005734 heterodimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 208000002557 hidradenitis Diseases 0.000 description 1
- 201000007162 hidradenitis suppurativa Diseases 0.000 description 1
- 239000004030 hiv protease inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 102000050152 human BRAF Human genes 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001969 hypertrophic effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 229960001936 indinavir Drugs 0.000 description 1
- CBVCZFGXHXORBI-PXQQMZJSSA-N indinavir Chemical compound C([C@H](N(CC1)C[C@@H](O)C[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H]2C3=CC=CC=C3C[C@H]2O)C(=O)NC(C)(C)C)N1CC1=CC=CN=C1 CBVCZFGXHXORBI-PXQQMZJSSA-N 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000035990 intercellular signaling Effects 0.000 description 1
- 210000004020 intracellular membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000004068 intracellular signaling Effects 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 108010044374 isoleucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- 210000001117 keloid Anatomy 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 208000037393 large granular lymphocyte leukemia Diseases 0.000 description 1
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 108010073472 leucyl-prolyl-proline Proteins 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N leupeptin Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(C)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- 108010052968 leupeptin Proteins 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 201000005249 lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000027202 mammary Paget disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 208000037819 metastatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000011575 metastatic malignant neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- XTYDRDGSHBFNRY-IRXDYDNUSA-N methyl (2S)-2-[[(2S)-2-[[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]carbamoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(1-methylimidazol-4-yl)propanoate Chemical compound COC(=O)[C@H](Cc1cn(C)cn1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)Nc2cc(cc(c2)C(F)(F)F)C(F)(F)F)C(C)C XTYDRDGSHBFNRY-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 108090001035 mitogen-activated protein kinase kinase kinase 12 Proteins 0.000 description 1
- 101150069859 mos gene Proteins 0.000 description 1
- 208000004707 mucinous cystadenoma Diseases 0.000 description 1
- 201000000585 muscular atrophy Diseases 0.000 description 1
- 201000006938 muscular dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- MNPXTRXFUMGQLK-UHFFFAOYSA-N n-[5-(furan-2-yl)-1,3,4-oxadiazol-2-yl]-2-phenylquinoline-4-carboxamide Chemical compound C=1C(C=2C=CC=CC=2)=NC2=CC=CC=C2C=1C(=O)NC(O1)=NN=C1C1=CC=CO1 MNPXTRXFUMGQLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 229960000884 nelfinavir Drugs 0.000 description 1
- QAGYKUNXZHXKMR-HKWSIXNMSA-N nelfinavir Chemical compound CC1=C(O)C=CC=C1C(=O)N[C@H]([C@H](O)CN1[C@@H](C[C@@H]2CCCC[C@@H]2C1)C(=O)NC(C)(C)C)CSC1=CC=CC=C1 QAGYKUNXZHXKMR-HKWSIXNMSA-N 0.000 description 1
- 201000008026 nephroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- RJMUSRYZPJIFPJ-UHFFFAOYSA-N niclosamide Chemical compound OC1=CC=C(Cl)C=C1C(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1Cl RJMUSRYZPJIFPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001920 niclosamide Drugs 0.000 description 1
- YCWSUKQGVSGXJO-NTUHNPAUSA-N nifuroxazide Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C(=O)N\N=C\C1=CC=C([N+]([O-])=O)O1 YCWSUKQGVSGXJO-NTUHNPAUSA-N 0.000 description 1
- 229960003888 nifuroxazide Drugs 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 238000001668 nucleic acid synthesis Methods 0.000 description 1
- 210000004287 null lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 1
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 108010068338 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 1
- 201000008129 pancreatic ductal adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960001972 panitumumab Drugs 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- DCWXELXMIBXGTH-UHFFFAOYSA-N phosphotyrosine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(OP(O)(O)=O)C=C1 DCWXELXMIBXGTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 208000030761 polycystic kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 208000025638 primary cutaneous T-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 1
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 208000002815 pulmonary hypertension Diseases 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- WKSAUQYGYAYLPV-UHFFFAOYSA-N pyrimethamine Chemical compound CCC1=NC(N)=NC(N)=C1C1=CC=C(Cl)C=C1 WKSAUQYGYAYLPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000611 pyrimethamine Drugs 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 108700042226 ras Genes Proteins 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000026267 regulation of growth Effects 0.000 description 1
- 229940016667 resveratrol Drugs 0.000 description 1
- 235000021283 resveratrol Nutrition 0.000 description 1
- 239000003340 retarding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004258 retinal degeneration Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 201000003068 rheumatic fever Diseases 0.000 description 1
- 229960000311 ritonavir Drugs 0.000 description 1
- NCDNCNXCDXHOMX-XGKFQTDJSA-N ritonavir Chemical compound N([C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C[C@H](O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1SC=NC=1)CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N(C)CC1=CSC(C(C)C)=N1 NCDNCNXCDXHOMX-XGKFQTDJSA-N 0.000 description 1
- 229960002539 ruxolitinib phosphate Drugs 0.000 description 1
- JFMWPOCYMYGEDM-XFULWGLBSA-N ruxolitinib phosphate Chemical compound OP(O)(O)=O.C1([C@@H](CC#N)N2N=CC(=C2)C=2C=3C=CNC=3N=CN=2)CCCC1 JFMWPOCYMYGEDM-XFULWGLBSA-N 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229960001852 saquinavir Drugs 0.000 description 1
- QWAXKHKRTORLEM-UGJKXSETSA-N saquinavir Chemical compound C([C@@H]([C@H](O)CN1C[C@H]2CCCC[C@H]2C[C@H]1C(=O)NC(C)(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)C=1N=C2C=CC=CC2=CC=1)C1=CC=CC=C1 QWAXKHKRTORLEM-UGJKXSETSA-N 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 230000037387 scars Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 150000003355 serines Chemical class 0.000 description 1
- 208000020352 skin basal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 235000013024 sodium fluoride Nutrition 0.000 description 1
- 239000011775 sodium fluoride Substances 0.000 description 1
- CMZUMMUJMWNLFH-UHFFFAOYSA-N sodium metavanadate Chemical compound [Na+].[O-][V](=O)=O CMZUMMUJMWNLFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 208000020431 spinal cord injury Diseases 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 108010005652 splenotritin Proteins 0.000 description 1
- 201000005671 spondyloarthropathy Diseases 0.000 description 1
- ZRRGOUHITGRLBA-UHFFFAOYSA-N stattic Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C2C=CS(=O)(=O)C2=C1 ZRRGOUHITGRLBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 108010072986 threonyl-seryl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 206010043778 thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 1
- 108010038745 tryptophylglycine Proteins 0.000 description 1
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108010017949 tyrosyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000017613 viral reproduction Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 1
- 238000012447 xenograft mouse model Methods 0.000 description 1
- 229910000166 zirconium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
Abstract
Description
ПЕРЕКРЕСТНЫЕ ССЫЛКИ НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИCROSS-REFERENCES TO RELATED APPLICATIONS
[0001] В данной международной заявке на патент заявляется приоритет по предварительной заявке на патент США № 62/067908, поданной 23 октября 2014 года, предварительной заявке на патент США № 62/148656, поданной 16 апреля 2015 года, предварительной заявке на патент США № 62/188353, поданной 2 июля 2015 года, а также предварительной заявке на патент США № 62/210795, поданной 27 августа 2015 года, содержание которых включено в данный документ посредством ссылки в полном объеме.[0001] This international patent application claims priority to U.S. Provisional Patent Application No. 62/067908, filed Oct. 23, 2014, U.S. Provisional Patent Application No. 62/148656, filed April 16, 2015, U.S. Provisional Patent Application No. 62/188353, filed July 2, 2015, and US Provisional Patent Application No. 62/210795, filed August 27, 2015, the contents of which are incorporated herein by reference in their entirety.
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙLIST OF SEQUENCES
[0002] Настоящая заявка подается вместе с Перечнем последовательностей в электронном формате. Перечень последовательностей предоставляется в виде файла под названием "Sequence_Listing_STP25.txt", созданного 30 сентября 2015 года, с последним изменением 22 октября 2015 года, размер которого составляет 83000 байт. Информация в электронном формате Перечня последовательностей включена в данный документ посредством ссылки в полном объеме.[0002] This application is filed together with a Sequence Listing in electronic format. The sequence listing is provided as a file called "Sequence_Listing_STP25.txt", created on September 30, 2015, last modified on October 22, 2015, which is 83,000 bytes in size. Information in the electronic format of the Sequence Listing is incorporated herein by reference in its entirety.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИBACKGROUND OF THE ART
[0003] Использование однодоменных антител (ОдАт) в качестве отдельных антигенсвязывающих белков или в качестве антигенсвязывающего домена в большем белке или полипептиде предоставляет ряд существенных преимуществ по сравнению с использованием обычных антител или фрагментов антител. Преимущества ОдАт включают: только один домен необходим для связывания антигена с высокой аффинностью и с высокой селективностью; ОдАт могут экспрессироваться из одного гена и не требуют посттрансляционной модификации; ОдАт обладают высокой устойчивостью к теплу, рН, протеазам и другим денатурирующим средствам или условиям; получение ОдАт является недорогим; и ОдАт могут достигать мишени и эпитопов, недоступных для обычных антител.[0003] The use of single domain antibodies (SDAbs) as individual antigen binding proteins or as an antigen binding domain in a larger protein or polypeptide provides a number of significant advantages over the use of conventional antibodies or antibody fragments. Advantages of OdAbs include: only one domain is required to bind antigen with high affinity and selectivity; sdAbs can be expressed from a single gene and do not require post-translational modification; OdAbs are highly resistant to heat, pH, proteases, and other denaturing agents or conditions; obtaining ODAT is inexpensive; and OdAbs can reach targets and epitopes that are inaccessible to conventional antibodies.
[0004] Существует ряд заболеваний или патологических состояний, таких как рак, которые вызваны аберрантными внутриклеточными или трансмембранными компонентами, такими как нуклеотиды и белки. Устранение аберрантных компонентов может использоваться для профилактики или лечения данных заболеваний или патологических состояний. Существует ряд фармакологических соединений, доступных для лечения, но эти соединения могут быть неэффективными, не иметь возможности быть доставленными или быть токсичными для непораженных заболеванием клеток.[0004] There are a number of diseases or pathological conditions, such as cancer, that are caused by aberrant intracellular or transmembrane components such as nucleotides and proteins. Elimination of aberrant components can be used to prevent or treat these diseases or pathological conditions. There are a number of pharmacological compounds available for treatment, but these compounds may be ineffective, unable to be delivered, or toxic to unaffected cells.
[0005] Другие способы лечения включают использование терапевтических белков или средств, которые содержат экзогенную последовательность-мишень, чтобы терапевтическое средство могло распознаваться рецепторами в клеточной мембране, позволяя терапевтическому средству проходить через клеточную мембрану и проникать в клетку. После того, как терапевтическое средство попадает внутрь клетки, данное терапевтическое средство может взаимодействовать с компонентом-мишенью, для лечения данного заболевания. Тем не менее, использование экзогенной последовательности-мишени может ограничивать тип клеток, который подвергается воздействию терапевтического средства, и увеличивает стоимость получения данного терапевтического средства.[0005] Other methods of treatment include the use of therapeutic proteins or agents that contain an exogenous target sequence so that the therapeutic agent can be recognized by receptors in the cell membrane, allowing the therapeutic agent to pass through the cell membrane and enter the cell. Once the therapeutic agent enters the cell, the therapeutic agent can interact with the target component to treat the disease. However, the use of an exogenous target sequence may limit the type of cells that are exposed to the therapeutic and increases the cost of obtaining the therapeutic.
[0006] По указанным выше причинам, существует потребность в композициях и способах лечения или профилактики заболевания, которые не полагаются на экзогенные последовательности-мишени или химические композиции для проникновения в клетку, и которые являются эффективными в направленном воздействии только на пораженные клетки в организме.[0006] For the above reasons, there is a need for compositions and methods for treating or preventing disease that do not rely on exogenous target sequences or chemical compositions for cell entry, and that are effective in targeting only affected cells in the body.
[0007] Настоящее изобретение относится к однодоменным антителам (ОдАт), белкам и полипептидам, содержащим данные ОдАт. Данные ОдАт направлены против внутриклеточных компонентов, которые вызывают патологическое состояние или заболевание. Данное изобретение также включает нуклеиновые кислоты, кодирующие ОдАт, белки и полипептиды, а также композиции, содержащие ОдАт. Данное изобретение включает использование композиций, ОдАт, белков или полипептидов для профилактических, терапевтических или диагностических целей. Данное изобретение также включает использование моноклональных антител, направленных на ОдАт по данному изобретению.[0007] The present invention relates to single domain antibodies (SdAbs), proteins and polypeptides containing these SdAbs. These OdAbs are directed against intracellular components that cause a pathological condition or disease. This invention also includes nucleic acids encoding OdAb, proteins and polypeptides, as well as compositions containing OdAb. This invention includes the use of compositions, OdAbs, proteins or polypeptides for prophylactic, therapeutic or diagnostic purposes. The present invention also includes the use of monoclonal antibodies directed to the OdAb of the present invention.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯSUMMARY OF THE INVENTION
[0008] Один вариант реализации данного изобретения представляет собой однодоменное антитело (ОдАт), направленное против внутриклеточного компонента. Внутриклеточным компонентом может являться, например, белок, нуклеиновая кислота, липид, углевод, STAT1, STAT2, STAT3, STAT4, STAT5a, STAT5b, STAT6, ФНО-альфа и KRAS.[0008] One embodiment of the present invention is a single domain antibody (SdAb) directed against an intracellular component. The intracellular component may be, for example, a protein, nucleic acid, lipid, carbohydrate, STAT1, STAT2, STAT3, STAT4, STAT5a, STAT5b, STAT6, TNF-alpha and KRAS.
[0009] В другом варианте реализации настоящее изобретение направлено на ОдАт к STAT3. Необязательно, ОдАт к STAT3 содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 3 или SEQ ID №: 4.[0009] In another embodiment, the present invention is directed to an anti-STAT3 sdAb. Optionally, the STAT3 sdAb contains the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 3 or SEQ ID No.: 4.
[0010] В другом варианте реализации данное изобретение направлено на выделенный полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, кодирующую ОдАт к STAT, такой как, например, полипептид, приведенный в SEQ ID №: 3 или SEQ ID №: 4.[0010] In another embodiment, the present invention is directed to an isolated polypeptide comprising an amino acid sequence encoding an anti-STAT sAb, such as, for example, the polypeptide set forth in SEQ ID No.: 3 or SEQ ID No.: 4.
[0011] В еще одном варианте реализации данное изобретение направлено на клетку- хозяина, и данная клетка-хозяин экспрессирует аминокислотную последовательность ОдАт, такую как, например, аминокислотная последовательность, приведенная в SEQ ID №: 3 или SEQ ID №: 4.[0011] In yet another embodiment, the present invention is directed to a host cell, and the host cell expresses an OdAb amino acid sequence, such as, for example, the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 3 or SEQ ID No.: 4.
[0012] Один из вариантов реализации данного изобретения представляет собой фармацевтическую композицию, содержащую ОдАт или полипептид, а также фармацевтически приемлемый носитель. Необязательно, ОдАт включает ОдАт к STAT3, содержащее аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 3 или SEQ ID №: 4, и полипептид включает выделенный полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 3 или SEQ ID №: 4.[0012] One embodiment of the present invention is a pharmaceutical composition comprising an OdAb or polypeptide, as well as a pharmaceutically acceptable carrier. Optionally, the sAb includes an anti-STAT3 sdAb containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 3 or SEQ ID No.: 4, and the polypeptide includes an isolated polypeptide containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 3 or SEQ ID No.: 4.
[0013] Другим вариантом реализации данного изобретения является способ диагностирования заболевания, опосредованного STAT3 у субъекта, при этом данный способ включает этапы, в которых: а) биологический образец приводят в контакт с ОдАт или полипептидом; б) определяют количество STAT3 в биологическом образце; и в) сравнивают количество, определенное на этапе (б), с эталонным, при этом разница в количестве указывает на наличие расстройства.[0013] Another embodiment of the present invention is a method of diagnosing a STAT3-mediated disease in a subject, the method comprising the steps of: a) contacting a biological sample with a sdAb or polypeptide; b) determining the amount of STAT3 in the biological sample; and c) compare the amount determined in step (b) with the reference amount, with the difference in amount indicating the presence of a disorder.
[0014] Другим вариантом реализации данного изобретения является способ профилактики или лечения заболевания или расстройства, или профилактики рецидива заболевания, опосредованного STAT3, или для применения в лечении рака или заболеваний, вызванных аномальной клеточной пролиферацией, включающий введение ОдАт к STAT3 или полипептида субъекту, нуждающемуся в этом. Необязательно, ОдАт включает ОдАт к STAT3, содержащее аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 3 или SEQ ID №: 4, и полипептид включает выделенный полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 3 или SEQ ID №: 4.[0014] Another embodiment of the present invention is a method for preventing or treating a disease or disorder, or preventing recurrence of a disease, mediated by STAT3, or for use in treating cancer or diseases caused by abnormal cell proliferation, comprising administering an anti-STAT3 sdAb or polypeptide to a subject in need of this. Optionally, the sAb includes an anti-STAT3 sdAb containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 3 or SEQ ID No.: 4, and the polypeptide includes an isolated polypeptide containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 3 or SEQ ID No.: 4.
[0015] Один вариант реализации данного изобретения представляет собой ОдАт к ФНО-альфа. Необязательно, ОдАт к ФНО-альфа содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 5, SEQ ID №: 6 или SEQ ID №: 7. Данное изобретение также относится к выделенному полипептиду, содержащему аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 5, SEQ ID №: 6 или SEQ ID №: 7.[0015] One embodiment of the present invention is an anti-TNF-alpha sdb. Optionally, the TNF-alpha sdAb contains the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 5, SEQ ID No.: 6, or SEQ ID No.: 7. The invention also provides an isolated polypeptide containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 5 , SEQ ID No.: 6 or SEQ ID No.: 7.
[0016] Другим вариантом реализации данного изобретения является клетка-хозяин, экспрессирующая аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 5, SEQ ID №: 6 или SEQ ID №: 7.[0016] Another embodiment of the present invention is a host cell expressing the amino acid sequence set forth in SEQ ID No: 5, SEQ ID No: 6 or SEQ ID No: 7.
[0017] В другом варианте реализации данное изобретение также представляет собой фармацевтическую композицию, содержащую ОдАт или полипептид, а также фармацевтически приемлемый носитель. Необязательно, ОдАт включает ОдАт к ФНО- альфа, содержащее аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 5, SEQ ID №: 6 или SEQ ID №: 7, и полипептид включает выделенный полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 5, SEQ ID №: 6 или SEQ ID №: 7.[0017] In another embodiment, the present invention also provides a pharmaceutical composition comprising an OdAb or polypeptide, as well as a pharmaceutically acceptable carrier. Optionally, the sAb includes an anti-TNF-alpha sdAb containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 5, SEQ ID No.: 6, or SEQ ID No.: 7, and the polypeptide includes an isolated polypeptide containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 5, SEQ ID No.: 6 or SEQ ID No.: 7.
[0018] Другим вариантом реализации данного изобретения является способ диагностирования расстройства, опосредованного ФНО-альфа у субъекта, при этом данный способ включает этапы, в которых: а) биологический образец приводят в контакт с ОдАт или полипептидом; б) определяют количество ФНО-альфа в биологическом образце; и в) сравнивают количество, определенное на этапе (б), с эталонным, при этом разница в количестве указывает на наличие заболевания.[0018] Another embodiment of the present invention is a method of diagnosing a TNF-alpha mediated disorder in a subject, the method comprising the steps of: a) contacting a biological sample with a sdAb or polypeptide; b) determine the amount of TNF-alpha in the biological sample; and c) compare the amount determined in step (b) with the reference one, with the difference in amount indicating the presence of the disease.
[0019] В одном варианте реализации данное изобретение описывает способ профилактики или лечения заболевания или расстройства, или рецидива заболевания или расстройства, опосредованного ФНО-альфа, или для применения в лечении рака или заболеваний, вызванных аномальной клеточной пролиферацией, включающий введение ОдАт к ФНО-альфа или полипептида млекопитающему, нуждающемуся в этом. Необязательно, ОдАт к ФНО-альфа содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 5, SEQ ID №: 6 или SEQ ID №: 7, и полипептид включает выделенный полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 5, SEQ ID №: 6 или SEQ ID №: 7.[0019] In one embodiment, the present invention describes a method for preventing or treating a disease or disorder, or relapse of a disease or disorder, mediated by TNF-alpha, or for use in the treatment of cancer or diseases caused by abnormal cell proliferation, comprising administering an anti-TNF-alpha sdAb or polypeptide to a mammal in need thereof. Optionally, the anti-TNF-alpha sdAb comprises the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 5, SEQ ID No.: 6 or SEQ ID No.: 7, and the polypeptide includes an isolated polypeptide containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 5, SEQ ID No.: 6 or SEQ ID No.: 7.
[0020] Один вариант реализации данного изобретения представляет собой ОдАт к KRAS. Необязательно, ОдАт к KRAS содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 2. В одном аспекте данное изобретение относится к выделенному полипептиду, при этом данный выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 2. В другом аспекте данное изобретение относится к клетке-хозяину, экспрессирующей аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 2.[0020] One embodiment of the present invention is a KRAS CDAb. Optionally, the KRAS sdAb contains the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 2. In one aspect, the present invention provides an isolated polypeptide, wherein the isolated polypeptide comprises the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 2. In another aspect, the invention provides to a host cell expressing the amino acid sequence shown in SEQ ID No: 2.
[0021] Другой вариант реализации данного изобретения представляет собой фармацевтическую композицию, содержащую ОдАт или полипептид, а также фармацевтически приемлемый носитель. Необязательно, ОдАт включает ОдАт к KRAS, содержащее аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 2, и полипептид включает выделенный полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 2.[0021] Another embodiment of the present invention is a pharmaceutical composition comprising an OdAb or polypeptide, as well as a pharmaceutically acceptable carrier. Optionally, the sAb includes an anti-KRAS sdAb containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 2, and the polypeptide includes an isolated polypeptide containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 2.
[0022] Дополнительным вариантом реализации данного изобретения является способ диагностирования расстройства, опосредованного KRAS у субъекта, при этом данный способ включает этапы, в которых: а) биологический образец приводят в контакт с ОдАт или полипептидом; б) определяют количество KRAS в указанном биологическом образце; и в) сравнивают количество, определенное на этапе (б), с эталонным, при этом разница в количестве указывает на наличие расстройства. Необязательно, ОдАт включает ОдАт к KRAS, содержащее аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 2, и полипептид включает выделенный полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 2.[0022] An additional embodiment of the present invention is a method of diagnosing a KRAS-mediated disorder in a subject, the method comprising the steps of: a) contacting a biological sample with a sdAb or polypeptide; b) determine the amount of KRAS in the specified biological sample; and c) compare the amount determined in step (b) with the reference amount, with the difference in amount indicating the presence of a disorder. Optionally, the sAb includes an anti-KRAS sdAb containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 2, and the polypeptide includes an isolated polypeptide containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 2.
[0023] Данное изобретение также относится к способу лечения заболевания с использованием ОдАт к KRAS, при этом данный способ включает введение эффективного количества ОдАт к KRAS субъекту, нуждающемуся в этом.[0023] This invention also provides a method of treating a disease using an anti-KRAS sdAb, the method comprising administering an effective amount of an anti-KRAS sdAb to a subject in need thereof.
[0024] В одном варианте реализации данное изобретение описывает способ профилактики или лечения заболевания или расстройства, или рецидива заболевания или расстройства, опосредованного KRAS, или для применения в лечении рака или заболеваний, вызванных аномальной клеточной пролиферацией, включающий введение ОдАт к KRAS или полипептида млекопитающему, нуждающемуся в этом. Необязательно, ОдАт к KRAS содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 2, и полипептид включает выделенный полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID №: 2.[0024] In one embodiment, the present invention describes a method for preventing or treating a disease or disorder, or relapse of a disease or disorder, mediated by KRAS, or for use in treating cancer or diseases caused by abnormal cell proliferation, comprising administering an anti-KRAS sdAb or polypeptide to a mammal, who needs it. Optionally, the KRAS sAb contains the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 2, and the polypeptide includes an isolated polypeptide containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID No.: 2.
[0025] В одном варианте реализации данное изобретение описывает способ введения ОдАт по данному изобретению, при этом данный способ включает внутривенное введение, внутримышечное введение, пероральное введение, ректальное введение, внутриглазное введение, энтеральное введение, парентеральное введение, подкожное введение, чрескожное введение, введение в виде глазных капель, введение в виде назального спрея, введение посредством ингаляции или небулайзера, местное введение и введение в виде имплантируемого лекарственного средства.[0025] In one embodiment, the present invention describes a method of administering the OdAb of the present invention, which method includes intravenous administration, intramuscular administration, oral administration, rectal administration, intraocular administration, enteral administration, parenteral administration, subcutaneous administration, transdermal administration, administration as eye drops, administration as a nasal spray, administration by inhalation or nebulizer, topical administration and administration as an implantable drug.
[0026] В другом варианте реализации данное изобретение описывает способ лечения заболевания, профилактики заболевания или профилактики рецидива заболевания с использованием ОдАт по данному изобретению в комбинации с одним или более соединениями. Необязательно, одно или более соединений представляют собой ингибитор транскрипции.[0026] In another embodiment, the present invention describes a method of treating a disease, preventing a disease, or preventing the relapse of a disease using the OdAb of the present invention in combination with one or more compounds. Optionally, one or more compounds are a transcription inhibitor.
[0027] В другом варианте реализации данное изобретение описывает способ измерения уровней ОдАт, при этом данный способ включает этапы, в которых: а) создают моноклональное антитело мыши, направленное против одного или более доменов ОдАт; б) проводят иммунологический анализ для определения количества ОдАт у субъекта; и в) выполняют количественный анализ ОдАт у субъекта.[0027] In another embodiment, the present invention describes a method for measuring levels of OdAb, the method comprising the steps of: a) generating a mouse monoclonal antibody directed against one or more domains of OdAb; b) perform an immunological analysis to determine the number of OdAbs in the subject; and c) perform a quantitative analysis of the DAT in the subject.
ГРАФИЧЕСКИЕ МАТЕРИАЛЫGRAPHIC MATERIALS
[0028] Эти и другие признаки, аспекты и преимущества настоящего изобретения станут более понятными с учетом следующего описания, прилагаемой формулы изобретения и прилагаемых графических материалов, в которых:[0028] These and other features, aspects and advantages of the present invention will become better understood in view of the following description, the accompanying claims and the accompanying drawings, in which:
На Фиг. 1 проиллюстрирована схематическая карта экспрессионного вектора pTT21-stt VHH13 VHH13-ОдАт к STAT3;In FIG. 1 illustrates a schematic map of the expression vector pTT21-stt VHH13 VHH13-ODAb to STAT3;
На Фиг. 2 проиллюстрирована схематическая карта экспрессионного вектора pTT21-stt VHH14 VHH14-ОдАт к STAT3;In FIG. Figure 2 illustrates a schematic map of the expression vector pTT21-stt VHH14 VHH14-ODAb to STAT3;
На Фиг. 3 проиллюстрированы результаты анализа иммунопреципитации с использованием полученного в бактерии VHH13 (SEQ ID №: 3) к STAT3 и полученного в бактерии VHH14 (SEQ ID №: 4) к STAT3;In FIG. 3 illustrates the results of an immunoprecipitation assay using bacteria-derived VHH13 (SEQ ID No: 3) to STAT3 and bacteria-derived VHH14 (SEQ ID No: 4) to STAT3;
На Фиг. 4 проиллюстрированы результаты анализа иммунопреципитации с использованием полученного в бактерии VHH13 (SEQ ID №: 3) к STAT3;In FIG. 4 illustrates the results of an immunoprecipitation assay using bacterially derived VHH13 (SEQ ID No: 3) to STAT3;
На Фиг. 5 проиллюстрировано ингибирование роста полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 в ксенотрансплантатной модели MDA-MB-231 при дозе, составляющей 0,5 мг/кг/день;In FIG. 5 illustrates growth inhibition of bacterially derived VHH13-OdAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 in the MDA-MB-231 xenograft model at a dose of 0.5 mg/kg/day;
На Фиг. 6 проиллюстрировано ингибирование роста полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID № 3) к STAT3 в ксенотрансплантатной модели MDA-MB-231 при дозах, находящихся в пределах от 1 мг/кг дважды в день до 2 мг/кг дважды в день или 2 мг/кг/день;In FIG. 6 illustrates growth inhibition of bacterially derived VHH13-OdAb (SEQ ID No. 3) to STAT3 in the MDA-MB-231 xenograft model at doses ranging from 1 mg/kg twice daily to 2 mg/kg twice daily or 2 mg/kg/day;
На Фиг. 7 проиллюстрировано ингибирование роста полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 в ксенотрансплантатной модели MDA-MB-231 при дозе, составляющей 5 мг/кг/дважды в день;In FIG. 7 illustrates growth inhibition of bacterially derived VHH13-OdAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 in the MDA-MB-231 xenograft model at a dose of 5 mg/kg/twice daily;
На Фиг. 8 проиллюстрировано ингибирование роста полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 в ксенотрансплантатной модели DU145 при дозе, составляющей 5 мг/кг/дважды в день;In FIG. 8 illustrates the growth inhibition of bacterially derived VHH13-OdAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 in the DU145 xenograft model at a dose of 5 mg/kg/twice daily;
На Фиг. 9 проиллюстрировано ингибирование роста полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 в ксенотрансплантатной модели PANC-1 при дозе, составляющей 5 мг/кг/дважды в день;In FIG. 9 illustrates growth inhibition of bacterially derived VHH13-OdAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 in a PANC-1 xenograft model at a dose of 5 mg/kg/twice daily;
На Фиг. 10 проиллюстрировано ингибирование роста полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 в ксенотрансплантатной модели MCF-7 при дозе, составляющей 1 мг/кг/трижды в день;In FIG. 10 illustrates growth inhibition of bacterially derived VHH13-OdAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 in the MCF-7 xenograft model at a dose of 1 mg/kg/trid;
На Фиг. 11 проиллюстрировано ингибирование роста полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 в ксенотрансплантатной модели BT-474 при дозе, составляющей 1 мг/кг/трижды в день;In FIG. 11 illustrates growth inhibition of bacterially derived VHH13-OdAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 in the BT-474 xenograft model at a dose of 1 mg/kg/trid;
На Фиг. 12 проиллюстрирована цитотоксичность ФНО-альфа в клетках U937;In FIG. 12 illustrates the cytotoxicity of TNF-alpha in U937 cells;
На Фиг. 13 проиллюстрирована цитотоксичность стауроспорина в клетках U937; иIn FIG. 13 illustrates the cytotoxicity of staurosporine in U937 cells; And
На Фиг. 14 проиллюстрировано ингибирование цитотоксичности ФНО-альфа с помощью ОдАт к ФНО-альфа.In FIG. 14 illustrates the inhibition of TNF-alpha cytotoxicity by TNF-alpha OdAb.
ОПИСАНИЕDESCRIPTION
[0029] При использовании по тексту данного документа, следующие термины и их варианты имеют значения, указанные ниже, если контекстом, в котором используется этот термин, явно не подразумевается иное значение.[0029] When used throughout this document, the following terms and variations thereof have the meanings set forth below unless a different meaning is clearly implied by the context in which the term is used.
[0030] Термины в единственном числе и аналогичные референты, используемые в данном документе, следует толковать как охватывающие как единственное, так и множественное число, если их использование в контексте не указывает на иное.[0030] Terms in the singular and similar referents used herein are to be construed to include both the singular and plural unless their use in the context indicates otherwise.
[0031] Термин "антигенная детерминанта" означает эпитоп на антигене, распознаваемый антигенсвязывающей молекулой (такой как ОдАт или полипептид по данному изобретению), и более конкретно - антигенсвязывающим участком антигенсвязывающей молекулы. Термины "антигенная детерминанта" и "эпитоп" также могут использоваться взаимозаменяемо. Считается, что аминокислотная последовательность, которая может связываться с конкретной антигенной детерминантой, эпитопом, антигеном или белком, обладает аффинностью и/или специфичностью к ним, "против" или "направлена против" антигенной детерминанты, эпитопа, антигена или белка.[0031] The term “antigenic determinant” means an epitope on an antigen recognized by an antigen-binding molecule (such as an OdAb or a polypeptide of the present invention), and more particularly by the antigen-binding region of an antigen-binding molecule. The terms "antigenic determinant" and "epitope" can also be used interchangeably. An amino acid sequence that can bind to, has affinity and/or specificity for, against, or directed against a particular antigenic determinant, epitope, antigen, or protein is believed to have affinity and/or specificity for the antigenic determinant, epitope, antigen, or protein.
[0032] При использовании по тексту данного документа, термин "включать" и варианты данного термина, такие как "включающий" и "включает", не предназначены для исключения других добавок, компонентов, целых чисел или этапов.[0032] When used throughout this document, the term “include” and variations of this term such as “including” and “includes” are not intended to exclude other additives, components, integers, or steps.
[0033] Предполагается, что ОдАт, полипептиды и белки, описанные в данном документе, могут содержать так называемые "консервативные" аминокислотные замены, которые могут быть в целом описаны как аминокислотные замены, в которых аминокислотный остаток заменен другим аминокислотным остатком с аналогичной химической структурой, и которые имеют незначительное или, по сути, не имеют никакого влияния на функцию, активность или другие биологические свойства полипептида. Консервативные аминокислотные замены хорошо известны в данной области техники. Консервативные замены представляют собой замены, в которых одна аминокислота в следующих группах (а)-(д) заменена другой аминокислотой в пределах той же группы: (а) малые алифатические, неполярные или слегка полярные остатки: Ala, Ser, Thr, Pro и Gly; (б) полярные, отрицательно заряженные остатки и их (незаряженные) амиды: Asp, Asn, Glu и Gln; (в) полярные, положительно заряженные остатки: His, Arg и Lys; (г) большие алифатические, неполярные остатки: Met, Leu, Ile, Val и Cys; и (д) ароматические остатки: Phe, Tyr и Trp. Другие консервативные замены включают: Ala на Gly или на Ser; Arg на Lys; Asn на Gln или на His; Asp на Glu; Cys на Ser; Gln на Asn; Glu на Asp; Gly на Ala или на Pro; His на Asn или на Gln; Ile на Leu или на Val; Leu на Ile или на Val; Lys на Arg, на Gln или на Glu; Met на Leu, на Tyr или на Ile; Phe на Met, на Leu или на Tyr; Ser на Thr; Thr на Ser; Trp на Tyr; Tyr на Trp; и/или Phe на Val, на Ile или на Leu.[0033] It is contemplated that the OdAbs, polypeptides and proteins described herein may contain so-called "conservative" amino acid substitutions, which can be generally described as amino acid substitutions in which an amino acid residue is replaced by another amino acid residue with a similar chemical structure, and which have little or no effect on the function, activity or other biological properties of the polypeptide. Conservative amino acid substitutions are well known in the art. Conservative substitutions are substitutions in which one amino acid in the following groups (a)-(e) is replaced by another amino acid within the same group: (a) small aliphatic, non-polar or slightly polar residues: Ala, Ser, Thr, Pro and Gly ; (b) polar, negatively charged residues and their (uncharged) amides: Asp, Asn, Glu and Gln; (c) polar, positively charged residues: His, Arg and Lys; (d) large aliphatic, non-polar residues: Met, Leu, Ile, Val and Cys; and (e) aromatic residues: Phe, Tyr and Trp. Other conservative substitutions include: Ala to Gly or to Ser; Arg to Lys; Asn to Gln or to His; Asp to Glu; Cys to Ser; Gln to Asn; Glu to Asp; Gly on Ala or on Pro; His to Asn or to Gln; Ile to Leu or to Val; Leu on Ile or on Val; Lys to Arg, to Gln or to Glu; Met on Leu, on Tyr or on Ile; Phe to Met, to Leu or to Tyr; Ser to Thr; Thr to Ser; Trp to Tyr; Tyr to Trp; and/or Phe to Val, to Ile or to Leu.
[0034] Термин "домен", при использовании по тексту данного документа, как правило, означает глобулярную область цепи антитела и, в частности, глобулярную область тяжелой цепи антитела, или полипептид, который, по сути, состоит из такой глобулярной области.[0034] The term “domain,” as used herein, generally means a globular region of an antibody chain, and in particular a globular region of an antibody heavy chain, or a polypeptide that is substantially composed of such a globular region.
[0035] Аминокислотная последовательность и структура ОдАт, как правило, состоит из четырех каркасных областей или "FR", которые называют "каркасной областью 1" или "FR1"; "каркасной областью 2" или "FR2"; "каркасной областью 3" или "FR3"; и "каркасной областью 4" или "FR4", соответственно. Каркасные области прерываются тремя определяющими комплементарность областями или "CDR", которые называют "определяющей комплементарность областью 1" или "CDR1"; "определяющей комплементарность областью 2" или "CDR2"; и "определяющей комплементарность областью 3" или "CDR3", соответственно.[0035] The amino acid sequence and structure of an OdAb typically consists of four framework regions or “FRs,” which are referred to as “framework region 1” or “FR1”; "framework region 2" or "FR2"; "framework region 3" or "FR3"; and "framework region 4" or "FR4", respectively. The framework regions are interrupted by three complementarity determining regions or "CDRs", which are called "complementarity determining region 1" or "CDR1"; “complementarity determining region 2” or “CDR2”; and "complementarity determining region 3" or "CDR3", respectively.
[0036] При использовании по тексту данного документа, термин "гуманизированное ОдАт" означает ОдАт, в котором один или более аминокислотных остатков в аминокислотной последовательности природной последовательности VHH были заменены одним или более аминокислотными остатками, которые встречаются в соответствующем положении в домене VH из обычного 4-цепочечного антитела человека. Это может быть осуществлено с помощью способов, которые хорошо известны в данной области техники. Например, FR ОдАт могут быть заменены вариабельными FR человека.[0036] As used herein, the term “humanized sdAb” means a sdAb in which one or more amino acid residues in the amino acid sequence of the native VHH sequence have been replaced by one or more amino acid residues that occur at the corresponding position in the VH domain of the common 4 - human chain antibody. This can be accomplished using methods that are well known in the art. For example, the OdAb FRs may be replaced by human variable FRs.
[0037] При использовании по тексту данного документа, "выделенная" нуклеиновая кислота или аминокислота была отделена по меньшей мере от одного другого компонента, с которым она обычно связана, такого как ее источник или среда, другая нуклеиновая кислота, другой белок/полипептид, другой биологический компонент или макромолекула, или контаминант, примесь или второстепенный компонент.[0037] As used herein, an "isolated" nucleic acid or amino acid has been separated from at least one other component with which it is normally associated, such as its source or medium, another nucleic acid, another protein/polypeptide, another biological component or macromolecule, or contaminant, impurity or minor component.
[0038] Термин "млекопитающее" означает особь, принадлежащую к классу млекопитающих, и включает, не ограничиваясь ими, людей, домашних и сельскохозяйственных животных, а также зоопарковых, спортивных и домашних животных, таких как коровы, лошади, овцы, собаки и кошки.[0038] The term “mammal” means an individual belonging to the class Mammals and includes, but is not limited to, humans, domestic and farm animals, as well as zoo, sporting and companion animals such as cows, horses, sheep, dogs and cats.
[0039] При использовании по тексту данного документа, предполагается, что термин "фармацевтически приемлемый носитель" включает любые растворители, дисперсионные среды, покрытия, антибактериальные и противогрибковые средства, изотонические и замедляющие абсорбцию средства, и т.п., совместимые с фармацевтическим введением. Подходящие носители описаны в последнем издании Remington's Pharmaceutical Sciences, стандартном справочнике в данной области. Предпочтительные примеры таких носителей или разбавителей включают, не ограничиваясь ими, воду, солевой раствор, растворы Рингера, раствор декстрозы, ФСБ (фосфатно-солевой буферный раствор) и 5% сывороточный альбумин человека. Также могут использоваться липосомы, катионные липиды и неводные носители, такие как нелетучие масла. Применение таких сред и средств для фармацевтически активных веществ хорошо известно в данной области техники. Их использование в композиции по данному изобретению предполагается за исключением тех случаев, когда обычная среда или средство являются несовместимыми с терапевтическим средством, описанным выше.[0039] As used herein, the term “pharmaceutically acceptable carrier” is intended to include any solvents, dispersion media, coatings, antibacterial and antifungal agents, isotonic and absorption retarding agents, and the like compatible with pharmaceutical administration. Suitable carriers are described in the latest edition of Remington's Pharmaceutical Sciences, the standard reference in the field. Preferred examples of such carriers or diluents include, but are not limited to, water, saline, Ringer's solutions, dextrose solution, PBS (phosphate buffered saline), and 5% human serum albumin. Liposomes, cationic lipids and non-aqueous carriers such as fixed oils can also be used. The use of such media and means for pharmaceutically active substances is well known in the art. Their use in the composition of this invention is contemplated unless the conventional medium or agent is incompatible with the therapeutic agent described above.
[0040] Термин "количественный иммунологический анализ" означает любые средства измерения количества антигена, присутствующего в образце, с использованием антитела. Методы выполнения количественных иммунологических анализов включают, не ограничиваясь ими, твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA), анализ посредством специфического мечения анализируемого вещества с повторным захватом (SALRA), жидкостную хроматографию, масс-спектрометрию, сортировку клеток с активированной флуоресценцией и тому подобное.[0040] The term "quantitative immunoassay" means any means of measuring the amount of antigen present in a sample using an antibody. Methods for performing quantitative immunoassays include, but are not limited to, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), specific analyte labeling repeat capture assay (SALRA), liquid chromatography, mass spectrometry, fluorescence activated cell sorting, and the like.
[0041] Термин "раствор" означает композицию, содержащую растворитель и растворенное вещество, и включает истинные растворы и суспензии. Примеры растворов включают твердые, жидкие или газообразные вещества, растворенные в жидкости, и твердые частицы или мицеллы, взвешенные в жидкости.[0041] The term "solution" means a composition containing a solvent and a solute, and includes true solutions and suspensions. Examples of solutions include solid, liquid or gaseous substances dissolved in a liquid, and solid particles or micelles suspended in a liquid.
[0042] Термин "специфичность" включает ряд различных видов антигенов или антигенных детерминант, с которыми конкретная антигенсвязывающая молекула или антигенсвязывающая белковая молекула могут связываться. Специфичность антигенсвязывающего белка можно определить на основе аффинности и/или авидности. Аффинность, выраженная константой равновесия при диссоциации антигена и антигенсвязывающего белка (KD), является показателем силы связывания между антигенной детерминантой и антигенсвязывающим участком на антигенсвязывающем белке: чем меньше значение KD, тем сильнее сила связывания между антигенной детерминантой и антигенсвязывающей молекулой (в альтернативном варианте, аффинность также может быть выражена в виде аффинной константы (KA), которая представляет собой 1/KD). Как будет понятно специалистам в данной области техники, аффинность можно определить в зависимости от конкретного рассматриваемого антигена. Авидность является показателем силы связывания между антигенсвязывающей молекулой и антигеном. Авидность относится как к аффинности между антигенной детерминантой и ее антигенсвязывающим участком на антигенсвязывающей молекуле, так и к количеству соответствующих участков связывания, присутствующих на антигенсвязывающей молекуле. Специфическое связывание антигенсвязывающего белка с антигеном или антигенной детерминантой можно определить с помощью любых известных методов, таких как, например, анализ Скэтчарда и/или анализы конкурентного связывания, такие как радиоиммунологические анализы (РИА), иммуноферментные анализы (ИФА) и конкурентные сэндвич-анализы.[0042] The term "specificity" includes a number of different types of antigens or antigenic determinants to which a particular antigen-binding molecule or antigen-binding protein molecule can bind. The specificity of an antigen binding protein can be determined based on affinity and/or avidity. Affinity, expressed as the equilibrium constant for the dissociation of antigen and antigen-binding protein (KD), is an indicator of the strength of binding between the antigenic determinant and the antigen-binding site on the antigen-binding protein: the lower the KD value, the stronger the strength of binding between the antigenic determinant and the antigen-binding molecule (alternatively, affinity can also be expressed as an affine constant (KA), which is 1/KD). As will be appreciated by those skilled in the art, affinity can be determined depending on the particular antigen in question. Avidity is a measure of the strength of binding between an antigen-binding molecule and an antigen. Avidity refers to both the affinity between an antigenic determinant and its antigen-binding site on the antigen-binding molecule and the number of corresponding binding sites present on the antigen-binding molecule. The specific binding of an antigen binding protein to an antigen or antigenic determinant can be determined using any known methods such as, for example, the Scatchard assay and/or competitive binding assays such as radioimmunoassays (RIAs), enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs) and competitive sandwich assays.
[0043] При использовании по тексту данного документа, термин "рекомбинантный" относится к применению методов генной инженерии (например, клонирования и амплификации), применяемых для получения ОдАт по данному изобретению.[0043] As used throughout this document, the term “recombinant” refers to the use of genetic engineering techniques (eg, cloning and amplification) used to produce the OdAb of this invention.
[0044] Термин "однодоменное антитело", "ОдАт" или "VHH" может, как правило, означать полипептид или белок, содержащий аминокислотную последовательность, которая состоит из четырех каркасных областей, прерываемых тремя определяющими комплементарность областями. Это представлено в виде FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3- CDR3-FR4. ОдАт по данному изобретению также включает полипептид или белок, который содержит аминокислотную последовательность ОдАт. Как правило, ОдАт продуцируются у представителей семейства верблюдовых, таких как ламы, но также могут быть синтезированы с помощью методов, которые хорошо известны в данной области техники. При использовании по тексту данного документа, вариабельные домены, присутствующие в природных антителах, содержащих тяжелые цепи, также называются "доменами VHH", чтобы их можно было отличить от вариабельных доменов тяжелой цепи, которые присутствуют в обычных 4-цепочечных антителах, называемых "доменами VH", и от вариабельных доменов легкой цепи, которые присутствуют в обычных 4-цепочечных антителах, называемых "доменами VL". Термины "VHH" и "ОдАт" используются в данном документе взаимозаменяемо. Нумерация аминокислотных остатков ОдАт или полипептида осуществляется в соответствии с общей нумерацией для доменов VH, изложенной Kabat et al. ("Sequence of proteins of immunological interest", Министерство здравоохранения США, NIH Бетесда, штат Мэриленд, публикация № 91). В соответствии с этой нумерацией, FR1 ОдАт содержит аминокислотные остатки в положениях 1-30, CDR1 ОдАт содержит аминокислотные остатки в положениях 31-36, FR2 ОдАт содержит аминокислоты в положениях 36-49, CDR2 ОдАт содержит аминокислотные остатки в положениях 50-65, FR3 ОдАт содержит аминокислотные остатки в положениях 66-94, CDR3 ОдАт содержит аминокислотные остатки в положениях 95-102 и FR4 ОдАт содержит аминокислотные остатки в положениях 103-113.[0044] The term "single domain antibody", "sdAb" or "VHH" can generally mean a polypeptide or protein containing an amino acid sequence that consists of four framework regions interrupted by three complementarity determining regions. This is represented as FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4. The OdAb of the present invention also includes a polypeptide or protein that contains the amino acid sequence of the OdAb. Typically, OdAbs are produced in camelids such as llamas, but can also be synthesized using methods that are well known in the art. When used throughout this document, the variable domains present in natural heavy chain antibodies are also referred to as “VHH domains” to distinguish them from the heavy chain variable domains that are present in conventional 4-chain antibodies, referred to as “VH domains.” ", and from the light chain variable domains that are present in conventional 4-chain antibodies, called "VL domains". The terms "VHH" and "OdAt" are used interchangeably in this document. The numbering of the amino acid residues of the OdAb or polypeptide follows the general numbering for VH domains set forth by Kabat et al. (“Sequence of proteins of immunological interest”, US Department of Health, NIH Bethesda, Maryland, publication No. 91). In accordance with this numbering, FR1 OdAb contains amino acid residues in positions 1-30, CDR1 OdAb contains amino acid residues in positions 31-36, FR2 OdAb contains amino acids in positions 36-49, CDR2 OdAb contains amino acid residues in positions 50-65, FR3 OdAb contains amino acid residues at positions 66-94, CDR3 OdAb contains amino acid residues at positions 95-102, and FR4 OdAb contains amino acid residues at positions 103-113.
[0045] Термин "синтетический" означает продуцирование посредством химического или ферментативного синтеза in vitro. [0045] The term "synthetic" means produced by chemical or enzymatic synthesis in vitro.
[0046] Термин "мишень", при использовании по тексту данного документа, означает любой компонент, антиген или фрагмент, который распознается ОдАт. Термин "внутриклеточная мишень" означает любой компонент, антиген или фрагмент, присутствующий внутри клетки. "Трансмембранная мишень" представляет собой компонент, антиген или фрагмент, который расположен внутри клеточной мембраны. "Внеклеточная мишень" означает компонент, антиген или фрагмент, который находится вне клетки.[0046] The term “target,” as used herein, means any component, antigen, or fragment that is recognized by the SdAb. The term "intracellular target" means any component, antigen or fragment present within a cell. A "transmembrane target" is a component, antigen, or fragment that is located within the cell membrane. "Extracellular target" means a component, antigen or fragment that is outside the cell.
[0047] Термин "терапевтическая композиция", при использовании по тексту данного документа, означает вещество, которое предполагает наличие терапевтического эффекта, такое как фармацевтические композиции, генетические материалы, биопрепараты и другие вещества. Генетические материалы включают вещества, предполагающие наличие прямого или косвенного генетического терапевтического эффекта, такие как генетические векторы, генетические регуляторные элементы, генетические структурные элементы, ДНК, РНК и тому подобное. Биопрепараты включают вещества, которые представляют собой живую материю, или полученные из живой материи, предполагающей наличие терапевтического эффекта.[0047] The term “therapeutic composition,” as used herein, means a substance that is expected to have a therapeutic effect, such as pharmaceutical compositions, genetic materials, biologicals, and other substances. Genetic materials include substances intended to have a direct or indirect genetic therapeutic effect, such as genetic vectors, genetic regulatory elements, genetic building blocks, DNA, RNA and the like. Biologics include substances that are living matter, or derived from living matter, that are intended to have a therapeutic effect.
[0048] При использовании по тексту данного документа, словосочетания "терапевтически эффективное количество" и "профилактически эффективное количество" означают количество, которое обеспечивает терапевтический эффект в лечении, профилактике или ведении заболевания или выраженного симптома заболевания. Терапевтически эффективное количество может лечить заболевание или патологическое состояние, симптом заболевания или предрасположенность к заболеванию, с целью вылечить, исцелить, ослабить, облегчить, изменить, устранить, улучшить, нормализовать или повлиять на заболевание, симптомы заболевания или предрасположенность к заболеванию. Конкретное количество, которое является терапевтически эффективным, может быть легко определено обычным практикующим врачом, и может варьироваться в зависимости от факторов, известных в данной области техники, таких как, например, вид заболевания, анамнез и возраст пациента, стадия заболевания и введение других терапевтических средств.[0048] As used herein, the phrases “therapeutically effective amount” and “prophylactically effective amount” mean an amount that provides a therapeutic effect in the treatment, prevention or management of a disease or significant disease symptom. A therapeutically effective amount may treat a disease or pathological condition, a symptom of a disease, or a predisposition to a disease, with the purpose of treating, healing, ameliorating, ameliorating, modifying, eliminating, improving, normalizing, or influencing the disease, symptoms of a disease, or predisposition to a disease. The specific amount that is therapeutically effective can be readily determined by a person of ordinary skill in the art, and may vary depending on factors known in the art, such as, for example, the type of disease, history and age of the patient, stage of the disease, and administration of other therapeutic agents. .
[0049] Настоящее изобретение относится к однодоменным антителам (ОдАт), которые направлены против внутриклеточных компонентов, а также к белкам и полипептидам, содержащим ОдАт и нуклеотиды, кодирующие данные белки и полипептиды. Данное изобретение также может относиться к ОдАт, которые направлены против межклеточных, трансклеточных и внеклеточных мишеней или антигенов. Данное изобретение также включает нуклеиновые кислоты, кодирующие ОдАт, белки и полипептиды, а также композиции, содержащие ОдАт. Данное изобретение включает использование композиций, ОдАт, белков или полипептидов для профилактических, терапевтических или диагностических целей.[0049] The present invention relates to single domain antibodies (SdAbs) that are directed against intracellular components, as well as proteins and polypeptides containing SdAbs and nucleotides encoding these proteins and polypeptides. This invention may also relate to OdAbs that are directed against intercellular, transcellular and extracellular targets or antigens. This invention also includes nucleic acids encoding OdAb, proteins and polypeptides, as well as compositions containing OdAb. This invention includes the use of compositions, OdAbs, proteins or polypeptides for prophylactic, therapeutic or diagnostic purposes.
[0050] ОдАт имеют ряд уникальных структурных характеристик и функциональных свойств, которые делают ОдАт весьма целесообразными для использования в качестве функциональных антигенсвязывающих доменов или белков. ОдАт функционально связываются с антигеном при отсутствии вариабельного домена легкой цепи, и могут выполнять функцию отдельной, относительно малой, функциональной антигенсвязывающей структурной единицы, домена или белка. Это отличает ОдАт от доменов обычных антител, которые сами по себе не выполняют функцию антигенсвязывающего белка или домена, но должны объединяться с обычными фрагментами антител, такими как фрагменты Fab или фрагмент ScFv, чтобы связывать антиген.[0050] OdAbs have a number of unique structural characteristics and functional properties that make OdAbs highly suitable for use as functional antigen binding domains or proteins. sdAbs functionally bind to antigen in the absence of a light chain variable domain, and can function as a separate, relatively small, functional antigen-binding structural unit, domain, or protein. This distinguishes sdAbs from conventional antibody domains, which do not themselves function as an antigen-binding protein or domain, but must combine with conventional antibody fragments, such as Fab fragments or a ScFv fragment, to bind antigen.
[0051] ОдАт могут быть получены с помощью способов, которые хорошо известны в данной области техники. Например, один из способов получения ОдАт включает (а) иммунизацию верблюдовых одним или более антигенами, (б) выделение периферических лимфоцитов из иммунизированных верблюдовых, получение тотальной РНК и синтез соответствующих кДНК, (в) создание библиотеки фрагментов кДНК, кодирующих домены VHH, (г) транскрибирование кодирующих домен VHH кДНК, полученных на этапе (в), с мРНК с помощью ПЦР, преобразование мРНК в формат рибосомного дисплея и выбор домена VHH с помощью рибосомного дисплея, и (д) экспрессирование домена VHH в подходящий вектор и, необязательно, очистка экспрессированного домена VHH.[0051] OdAbs can be prepared using methods that are well known in the art. For example, one method for obtaining OdAb involves (a) immunizing camelids with one or more antigens, (b) isolating peripheral lymphocytes from immunized camelids, obtaining total RNA and synthesizing the corresponding cDNAs, (c) creating a library of cDNA fragments encoding VHH domains, (d ) transcribing the VHH domain-encoding cDNAs obtained in step (c) from mRNA using PCR, converting the mRNA into ribosomal display format and selecting the VHH domain using ribosomal display, and (e) expressing the VHH domain into a suitable vector and, optionally, purification expressed VHH domain.
[0052] Другой способ получения ОдАт по данному изобретению осуществляется посредством приготовления нуклеиновой кислоты, кодирующей ОдАт, с помощью методов синтеза нуклеиновых кислот, с последующей экспрессией нуклеиновой кислоты in vivo или in vitro. Кроме того, ОдАт, полипептиды и белки по данному изобретению могут быть получены с помощью методов синтеза или полусинтеза для получения белков, полипептидов или других аминокислотных последовательностей.[0052] Another method for producing the OdAb of this invention is by preparing the nucleic acid encoding the OdAb using nucleic acid synthesis methods, followed by expression of the nucleic acid in vivo or in vitro . In addition, the OdAbs, polypeptides and proteins of this invention can be produced using synthetic or semi-synthetic methods to produce proteins, polypeptides or other amino acid sequences.
[0053] ОдАт по данному изобретению, как правило, будут связываться со всеми природными или синтетическими аналогами, вариантами, мутантами, аллелями, частями и фрагментами мишени или по меньшей мере с теми аналогами, вариантами, мутантами, аллелями, частями и фрагментами мишени, которые содержат одну или более антигенных детерминант или эпитопов, которые по сути являются такими же, как антигенная детерминанта или эпитоп, с которыми ОдАт по данному изобретению связываются в мишени дикого типа. ОдАт по данному изобретению могут связываться с такими аналогами, вариантами, мутантами, аллелями, частями и фрагментами с аффинностью и/или специфичностью, которая является такой же, или которая выше или ниже, чем аффинность и специфичность, с которой ОдАт по данному изобретению связываются с мишенью дикого типа. Также в пределах объема данного изобретения предполагается, что ОдАт по данному изобретению связываются с некоторыми аналогами, вариантами, мутантами, аллелями, частями и фрагментами мишени, но не связываются с другими. Кроме того, ОдАт по данному изобретению может быть гуманизированным, и может быть одновалентным или поливалентным, и/или мультиспецифическим. Кроме того, ОдАт по данному изобретению могут связываться с фосфорилированной формой белка-мишени, а также с нефосфорилированной формой белка-мишени. ОдАт могут быть связаны с другими молекулами, такими как альбумин или другие макромолекулы.[0053] The sdAbs of this invention will generally bind to all natural or synthetic analogs, variants, mutants, alleles, portions and fragments of the target, or at least those analogs, variants, mutants, alleles, portions and fragments of the target that contain one or more antigenic determinants or epitopes that are substantially the same as the antigenic determinant or epitope to which the OdAb of the present invention binds in a wild-type target. The sdAbs of the present invention can bind to such analogs, variants, mutants, alleles, parts and fragments with an affinity and/or specificity that is the same as, or which is higher or lower than the affinity and specificity with which the sdAbs of the present invention bind to wild type target. It is also within the scope of the present invention that the OdAbs of the present invention bind to certain analogs, variants, mutants, alleles, portions and fragments of the target, but do not bind to others. In addition, the OdAb of the present invention may be humanized, and may be monovalent or polyvalent, and/or multispecific. In addition, the OdAbs of the present invention can bind to the phosphorylated form of the target protein as well as to the non-phosphorylated form of the target protein. OdAb may be associated with other molecules such as albumin or other macromolecules.
[0054] Кроме того, в пределы объема данного изобретения входит то, что ОдАт являются поливалентными, то есть ОдАт может иметь два или более белков или полипептидов, которые направлены против двух или более различных эпитопов мишени. В таком поливалентном ОдАт белок или полипептид могут быть направлены, например, против таких же эпитопов, по сути, эквивалентных эпитопов или разных эпитопов. Разные эпитопы могут располагаться на одной мишени или они могут находиться на двух или более разных мишенях.[0054] It is also within the scope of this invention that the OdAbs are multivalent, that is, the OdAbs may have two or more proteins or polypeptides that are directed against two or more different epitopes of the target. In such a multivalent OdAb, the protein or polypeptide may be directed, for example, against the same epitopes, substantially equivalent epitopes, or different epitopes. Different epitopes may be located on the same target, or they may be located on two or more different targets.
[0055] Также предполагается, что последовательность одного или более ОдАт по данному изобретению может быть соединена или связана с одной или более линкерными последовательностями. Линкер может представлять собой, например, последовательность белка, содержащую комбинацию серинов, глицинов и аланинов.[0055] It is also contemplated that the sequence of one or more OdAbs of this invention may be linked or linked to one or more linker sequences. The linker may be, for example, a protein sequence containing a combination of serines, glycines and alanines.
[0056] Кроме того, в пределы объема данного изобретения входит использование частей, фрагментов, аналогов, мутантов, вариантов, аллелей и/или производных ОдАт по данному изобретению, при условии, что они являются пригодными для описанных применений.[0056] It is also within the scope of this invention to use parts, fragments, analogs, mutants, variants, alleles and/or derivatives of the OdAb of this invention, provided they are suitable for the applications described.
[0057] Поскольку ОдАт по данному изобретению главным образом предназначены для терапевтического и/или диагностического применения, они направлены против мишеней млекопитающих, предпочтительно человека. Тем не менее, возможно, что ОдАт, описанные в данном документе, вступают в перекрестную реакцию с мишенями других видов, например, с мишенями из одного или более других видов приматов или других животных (например, мыши, крысы, кролика, свиньи или собаки) и, в частности, в моделях на животных для заболеваний и расстройств, обусловленных заболеванием, связанным с данными мишенями.[0057] Since the OdAbs of this invention are primarily intended for therapeutic and/or diagnostic use, they are directed against mammalian, preferably human, targets. However, it is possible that the OdAbs described herein cross-react with targets from other species, for example, with targets from one or more other primate species or other animals (e.g., mouse, rat, rabbit, pig, or dog) and, in particular, in animal models for diseases and disorders associated with disease associated with these targets.
[0058] В другом своем аспекте данное изобретение относится к нуклеиновой кислоте, которая кодирует ОдАт по данному изобретению. Такая нуклеиновая кислота может находиться, например, в виде генетической конструкции.[0058] In another aspect, the present invention relates to a nucleic acid that encodes the OdAb of the present invention. Such a nucleic acid may be present, for example, in the form of a genetic construct.
[0059] В другом аспекте данное изобретение относится к хозяину или клетке- хозяину, которая экспрессирует или может экспрессировать ОдАт по данному изобретению и/или которая содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую ОдАт по данному изобретению. Последовательности ОдАт могут использоваться для инсерции в геном любого организма с созданием генетически модифицированного организма (ГМО). Примеры включают, не ограничиваясь ими, растения, бактерии, вирусы и животных.[0059] In another aspect, the present invention relates to a host or host cell that expresses or can express the OdAb of the present invention and/or which contains a nucleic acid encoding the OdAb of the present invention. OdAb sequences can be used for insertion into the genome of any organism to create a genetically modified organism (GMO). Examples include, but are not limited to, plants, bacteria, viruses and animals.
[0060] Данное изобретение дополнительно относится к способам получения или создания ОдАт, нуклеиновых кислот, кодирующих ОдАт, клеток-хозяев, экспрессирующих или способных экспрессировать такие ОдАт, продуктов и композиций, содержащих ОдАт по данному изобретению.[0060] This invention further relates to methods for producing or creating OdAbs, nucleic acids encoding OdAbs, host cells expressing or capable of expressing such OdAbs, products and compositions containing the OdAbs of the present invention.
[0061] Кроме того, данное изобретение относится к способам применения и использованию ОдАт, нуклеиновых кислот, кодирующих ОдАт, клеток-хозяев, продуктов и композиций, описанных в данном документе. Такой продукт или композиция может, например, представлять собой фармацевтическую композицию для лечения или профилактики заболевания, или представлять собой продукт или композицию, предназначенную для диагностики. ОдАт могут использоваться в различных анализах, например, анализах ELISA и анализах масс-спектрометрии для измерения уровней ОдАт в сыворотке крови и тканях.[0061] In addition, this invention relates to methods of application and use of OdAb, nucleic acids encoding OdAb, host cells, products and compositions described herein. Such a product or composition may, for example, be a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of a disease, or be a product or composition intended for diagnosis. OdAb can be used in a variety of assays, such as ELISA assays and mass spectrometry assays to measure OdAb levels in serum and tissue.
[0062] В другом аспекте нуклеиновая кислота, кодирующая одно или более ОдАт по данному изобретению, может быть вставлена в геном организма для лечения или профилактики заболеваний.[0062] In another aspect, a nucleic acid encoding one or more SdAbs of the present invention can be inserted into the genome of an organism to treat or prevent diseases.
[0063] Данное изобретение, как правило, относится к ОдАт, а также к белкам или полипептидам, содержащим или, по сути, состоящим из одного или более таких ОдАт, которые могут использоваться для профилактических, терапевтических и/или диагностических целей.[0063] This invention generally relates to sdAbs, as well as proteins or polypeptides containing or essentially consisting of one or more such sdAbs, which can be used for prophylactic, therapeutic and/or diagnostic purposes.
[0064] Способы и композиции, описанные в данном изобретении, могут применяться для лечения заболевания, описанного в данном документе, и могут применяться в любой дозировке и/или препарате, описанных в данном документе или известных по иным причинам, а также с любым способом введения, описанным в данном документе или по иным причинам известным специалисту в данной области техники.[0064] The methods and compositions described in this invention can be used to treat the disease described herein and can be used in any dosage and/or formulation described herein or otherwise known, as well as with any route of administration described herein or otherwise known to one skilled in the art.
[0065] ОдАт по данному изобретению, в частности, VHH к STAT3, VHH к KRAS и VHH к ФНО-альфа по данному изобретению, могут использоваться для лечения и профилактики злокачественных заболеваний, в том числе, не ограничиваясь ими: множественной миеломы, лейкозов (HTLV-1-зависимого, эритролейкоза, острого миелогенного лейкоза (ОМЛ), хронического миелогенного лейкоза (ХМЛ) и лейкоза из больших гранулярных лимфоцитов (ЛБГЛ)), лимфом (ВЭБ-ассоциированной/Беркитта, фунгоидного микоза, Т-клеточной лимфомы кожи, неходжкинской лимфомы (НХЛ), анапластической крупноклеточной лимфомы (АККЛ)), рака молочной железы, трижды негативного рака молочной железы, рака головы и шеи, меланомы, рака яичников, рака легкого, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, сарком, остеосаркомы, саркомы Капоши, саркомы Юинга, гепатоцеллюлярного рака, глиомы, нейробластомы, астроцитомы, рака ободочной и прямой кишки, опухолей Вильмса, рака почки, рака мочевого пузыря, рака эндометрия, рака шейки матки, рака пищевода, плоскоклеточного рака кожи, базальноклеточного рака и любых метастатических раковых заболеваний. ОдАт могут использоваться у больных раком, чтобы помочь предотвратить или уменьшить потерю веса или кахексию, обусловленные раком.[0065] The OdAbs of this invention, in particular, VHH to STAT3, VHH to KRAS and VHH to TNF-alpha according to this invention, can be used for the treatment and prevention of malignant diseases, including, but not limited to: multiple myeloma, leukemia ( HTLV-1-dependent, erythroleukemia, acute myelogenous leukemia (AML), chronic myelogenous leukemia (CML) and large granular lymphocyte leukemia (LBGL)), lymphomas (EBV-associated/Burkitt, mycosis fungoides, cutaneous T-cell lymphoma, non-Hodgkin's lymphoma (NHL), anaplastic large cell lymphoma (ALCL)), breast cancer, triple negative breast cancer, head and neck cancer, melanoma, ovarian cancer, lung cancer, pancreatic cancer, prostate cancer, sarcoma, osteosarcoma, Kaposi's sarcoma , Ewing's sarcoma, hepatocellular cancer, glioma, neuroblastoma, astrocytoma, colorectal cancer, Wilms tumors, kidney cancer, bladder cancer, endometrial cancer, cervical cancer, esophageal cancer, squamous cell skin cancer, basal cell cancer and any metastatic cancers . OdAbs may be used in cancer patients to help prevent or reduce cancer-related weight loss or cachexia.
[0066] ОдАт, в частности, ОдАт к STAT3 и к ФНО-альфа по данному изобретению, также могут использоваться для лечения и профилактики заболеваний, таких как, не ограничиваясь ими: аутоиммунные заболевания (например, ревматоидный артрит, язвенный колит, болезнь Крона, бактериальный колит, астма, склеродермия, волчанка, энцефаломиелит, артериит, васкулит, гломерулонефрит, увеит, увеоретинит, рассеянный склероз), поликистоз почек, дерматологические заболевания (например, псориаз, очаговая алопеция, атопический дерматит, келоидные/гипертрофические рубцы, липома, болезнь Педжета и актинический кератоз), гнойный гидраденит, трансплантация (например, паренхиматозных органов, костного мозга, руки, лица, конечностей, любой части тела), мышечная дистрофия и мышечная атрофия, обусловленные раковыми заболеваниями и старением, эндометриоз, макулярная дегенерация, дегенерация сетчатки, инсульт, эпилепсия, черепно-мозговые травмы и повреждения спинного мозга, гипертензия, гипертрофия сердца, болезнь Альцгеймера, гипертензия легочной артерии, сахарный диабет 2 типа и анкилозирующий спондилит. Кроме того, ОдАт могут оказывать воздействие на орфанные заболевания. Примеры таких редких орфанных заболеваний включают, не ограничиваясь ими, трижды негативные раковые заболевания молочной железы, раковые заболевания поджелудочной железы, ОМЛ (острый миелоидный лейкоз), раковые заболевания головы и шеи, множественную миелому и химиоустойчивые раковые заболевания.[0066] The sdAbs, in particular the anti-STAT3 and anti-TNF-alpha sdAbs of this invention, may also be used for the treatment and prevention of diseases such as, but not limited to: autoimmune diseases (e.g., rheumatoid arthritis, ulcerative colitis, Crohn's disease, bacterial colitis, asthma, scleroderma, lupus, encephalomyelitis, arteritis, vasculitis, glomerulonephritis, uveitis, uveoretinitis, multiple sclerosis), polycystic kidney disease, dermatological diseases (eg, psoriasis, alopecia areata, atopic dermatitis, keloids/hypertrophic scars, lipoma, Paget's disease and actinic keratosis), hidradenitis suppurativa, transplantation (eg, solid organ, bone marrow, hand, face, limb, any part of the body), muscular dystrophy and muscular atrophy due to cancer and aging, endometriosis, macular degeneration, retinal degeneration, stroke , epilepsy, traumatic brain and spinal cord injuries, hypertension, cardiac hypertrophy, Alzheimer's disease, pulmonary hypertension, type 2 diabetes mellitus and ankylosing spondylitis. In addition, OdAbs may have an impact on orphan diseases. Examples of such rare orphan diseases include, but are not limited to, triple-negative breast cancers, pancreatic cancers, AML (acute myeloid leukemia), head and neck cancers, multiple myeloma and chemoresistant cancers.
[0067] Вирусные инфекции можно лечить посредством направленного воздействия на внутриклеточные вирусные белки в инфицированных клетках. Вирусные белки, такие как обратная транскриптаза ВИЧ, могут блокировать жизненный цикл вируса. ОдАт по данному изобретению может также оказывать направленное воздействие на внутриклеточные вирусные белки, такие как VP24 вируса Эбола, и тем самым блокирует способность вируса Эбола останавливать противовирусный иммунный ответ хозяина. ОдАт по данному изобретению могут использоваться для воздействия на заболевания, при которых наблюдается сверхэкспрессия внутриклеточной молекулы. С помощью ОдАт можно лечить болезнь Хантингтона.[0067] Viral infections can be treated by targeting intracellular viral proteins in infected cells. Viral proteins, such as HIV reverse transcriptase, can block the viral life cycle. The OdAb of this invention can also target intracellular viral proteins, such as VP24 of the Ebola virus, and thereby block the ability of the Ebola virus to stop the host's antiviral immune response. The OdAbs of this invention can be used to target diseases in which the intracellular molecule is overexpressed. Huntington's disease can be treated with OdAb.
[0068] ОдАт по данному изобретению можно использовать с одним или более соединениями. Например, ОдАт по данному изобретению можно использовать с ингибиторами JAK/STAT, такими как, например, куркумин, ресвератрол, кукурбитацин A, B, E, I, Q, флавопиридол, дезокситетрангомицин, производные циклопентенона, N- ацил-гомосерин лактон, производные индирубина, меизоиндиго, тирфостин, содержащие платину соединения (например, IS3-295), пептидомиметики, антисмысловые олигонуклеотиды, S3I-201, производные фосфотирозин трипептида, ингибиторы протеазы ВИЧ (например, нелфинавир, индинавир, саквинавир и ритонавир), JSI-124, XpYL, Ac-pYLPQTV-NH2, ISS 610, CJ-1383, пириметамин, метформин, атипримод, S3I- M2001, STX-0119; производное N-[2-(1,3,4-оксадиазолил)]-4 хинолинкарбоксамида, S3I-1757, LY5; 5,8-диоксо-6(пиридин-3-иламино)-5,8-дигидро-нафталин-1-сульфонамид, витацинстин, статтик, STA-21, LLL-3, LLL12, XZH-5, SF-1066, SF-1087, 17o, криптотаншинон, FLL32, FLL62, C188-9, BP-1108 и BP-1075, галиеллалактон, JQ1, 5, 15 DPP, WP1066, никлозамид, SD1008, нифуроксазид, криптотаншинон, BBI хинон и руксолитиниба фосфат. Одно или более соединений могут увеличивать терапевтический эффект и увеличивать эффективность ОдАт по данному изобретению. Кроме того, эффективность ОдАт можно увеличить посредством объединения его с пептидами, пептидомиметиками и другими лекарственными средствами, такими как, например, не ограничиваясь ими, циметидин, аторвастатин, целекоксиб, метформин и циметидин. Кроме того, что касается лучевой терапии, ОдАт к STAT3 могут превращать радиорезистентные раковые заболевания в радиочувствительные раковые заболевания.[0068] The ODAT of this invention can be used with one or more compounds. For example, the OdAb of this invention can be used with JAK/STAT inhibitors, such as, for example, curcumin, resveratrol, cucurbitacin A, B, E, I, Q, flavopiridol, deoxytetrangomycin, cyclopentenone derivatives, N-acyl-homoserine lactone, indirubin derivatives , meisoindigo, tyrphostin, platinum-containing compounds (eg, IS3-295), peptidomimetics, antisense oligonucleotides, S3I-201, phosphotyrosine tripeptide derivatives, HIV protease inhibitors (eg, nelfinavir, indinavir, saquinavir and ritonavir), JSI-124, XpYL, Ac-pYLPQTV-NH2, ISS 610, CJ-1383, pyrimethamine, metformin, atiprimod, S3I-M2001, STX-0119; N-[2-(1,3,4-oxadiazolyl)]-4 quinoline carboxamide derivative, S3I-1757, LY5; 5,8-dioxo-6(pyridin-3-ylamino)-5,8-dihydro-naphthalene-1-sulfonamide, vitaminstin, stattic, STA-21, LLL-3, LLL12, XZH-5, SF-1066, SF -1087, 17o, cryptotanshinone, FLL32, FLL62, C188-9, BP-1108 and BP-1075, galliellalactone, JQ1, 5, 15 DPP, WP1066, niclosamide, SD1008, nifuroxazide, cryptotanshinone, BBI quinone and ruxolitinib phosphate. One or more compounds may enhance the therapeutic effect and enhance the effectiveness of the OdAb of the present invention. In addition, the effectiveness of OdAb can be increased by combining it with peptides, peptidomimetics and other drugs, such as, for example, but not limited to, cimetidine, atorvastatin, celecoxib, metformin and cimetidine. Additionally, regarding radiotherapy, STAT3 sdAbs can convert radioresistant cancers into radiosensitive cancers.
[0069] Также предполагается, что одно или более ОдАт по данному изобретению можно объединять или ОдАт по данному изобретению можно объединять с другими ОдАт.[0069] It is also contemplated that one or more SdAbs of the present invention may be combined, or that SdAbs of the present invention can be combined with other SdAbs.
[0070] Предполагается, что некоторые ОдАт по данному изобретению могут проходить через клеточную мембрану и проникать в клетку без дополнительного оказания направленного воздействия последовательностей белка на ОдАт и без экзогенных соединений, которые направляют ОдАт связываться с рецепторами клеточной поверхности и проходить через клеточную мембрану.[0070] It is contemplated that some of the OdAbs of this invention can cross the cell membrane and enter the cell without additional targeting of the OdAb by protein sequences and without exogenous compounds that direct the OdAb to bind to cell surface receptors and pass through the cell membrane.
[0071] После прохождения через клеточную мембрану эти ОдАт могут оказывать направленное воздействие на трансмембранные или внутриклеточные молекулы или антигены. Эти внутриклеточные или трансмембранные мишени могут представлять собой, например, белки, углеводы, липиды, нуклеиновые кислоты, мутантные белки, вирусные белки и прионы. Мишени ОдАт могут выполнять функцию ферментов, структурных белков клетки, внутриклеточных участков молекул клеточных мембран, молекул в мембранах органелл, любого типа молекулы РНК, любых областей ДНК или хромосомы, метилированных или неметилированных нуклеиновых кислот, частично собранных молекул в рамках механизма синтеза клетки, молекул вторичных посредников и молекул в механизмах клеточной сигнализации. Мишени могут включать все молекулы в цитоплазме, ядре, органеллах и клеточной мембране. Направленное воздействие на молекулы, предназначенные для секреции или размещения в клеточной мембране, может быть осуществлено в цитоплазме до выхода из клетки.[0071] After passing through the cell membrane, these OdAbs can target transmembrane or intracellular molecules or antigens. These intracellular or transmembrane targets can be, for example, proteins, carbohydrates, lipids, nucleic acids, mutant proteins, viral proteins and prions. OdAb targets can perform the function of enzymes, structural proteins of the cell, intracellular regions of cell membrane molecules, molecules in organelle membranes, any type of RNA molecule, any regions of DNA or chromosome, methylated or unmethylated nucleic acids, partially assembled molecules within the cell's synthesis mechanism, secondary molecules intermediaries and molecules in cellular signaling mechanisms. Targets may include all molecules in the cytoplasm, nucleus, organelles, and cell membrane. Targeting molecules intended for secretion or placement in the cell membrane can be carried out in the cytoplasm before exiting the cell.
[0072] Мишени ОдАт могут быть у людей, животных, растений, грибов, паразитов, простейших, бактерий, вирусов, прионов, прокариотических клеток и эукариотических клеток. Некоторыми примерами меж- и внутриклеточных сигнальных молекул и белковых групп, которые могут быть мишенями ОдАт по данному изобретению, являются: продукты онкогена, гормоны, цитокины, факторы роста, нейромедиаторы, киназы (в том числе тирозинкиназа, серинкиназа и треонинкиназа), фосфатазы, убиквитин, циклические нуклеотиды, циклазы (аденилат и гуанилат), G-белки, фосфодиэстеразы, суперсемейство ГТФаз, иммуноглобулины (антитела, фрагменты Fab, связующие вещества, ОдАт), суперсемейство иммуноглобулинов, инозитолфосфатные липиды, стероидные рецепторы, кальмодулин, группа CD (например, CD4, CD8, CD28 и т.д.), факторы транскрипции, ФНО-бета, ФНО-альфа и бета, суперсемейство лигандов ФНО, сигнальные молекулы рецепторов Notch, сигнальные молекулы рецепторов Hedgehog, сигнальные молекулы рецепторов Wnt, сигнальные молекулы толл-подобных рецепторов, каспазы, актин, миозин, миостатин, 12-липоксигеназа, 15-липоксигеназа, суперсемейство липоксигеназ, обратная транскриптаза, вирусы и их белки, амилоидные белки, коллаген, сопряженный с G-белком рецептор, мутантные нормальные белки, прионы, Ras, Raf, Myc, Src, BCR/ABL, MEK, Erk, Mos, Tpl2, MLK3, TAK, DLK, MKK, p38, MAPK, MEKK, ASK, SAPK, JNK, BMK, MAP, JAK, PI3K, циклооксигеназа, STAT1, STAT2, STAT3, STAT4, STAT5a, STAT5b, STAT6, Myc, p53, BRAF, NRAS, KRAS, HRAS и хемокины.[0072] OdAb targets can be in humans, animals, plants, fungi, parasites, protozoa, bacteria, viruses, prions, prokaryotic cells and eukaryotic cells. Some examples of inter- and intracellular signaling molecules and protein groups that may be targets of the OdAbs of this invention are: oncogene products, hormones, cytokines, growth factors, neurotransmitters, kinases (including tyrosine kinase, serine kinase and threonine kinase), phosphatases, ubiquitin , cyclic nucleotides, cyclases (adenylate and guanylate), G proteins, phosphodiesterases, GTPase superfamily, immunoglobulins (antibodies, Fab fragments, binders, OdAbs), immunoglobulin superfamily, inositol phosphate lipids, steroid receptors, calmodulin, CD group (e.g. CD4 , CD8, CD28, etc.), transcription factors, TNF-beta, TNF-alpha and beta, TNF ligand superfamily, Notch receptor signaling molecules, Hedgehog receptor signaling molecules, Wnt receptor signaling molecules, Toll-like receptor signaling molecules, caspases, actin, myosin, myostatin, 12-lipoxygenase, 15-lipoxygenase, lipoxygenase superfamily, reverse transcriptase, viruses and their proteins, amyloid proteins, collagen, G-protein coupled receptor, mutant normal proteins, prions, Ras, Raf, Myc , Src, BCR/ABL, MEK, Erk, Mos, Tpl2, MLK3, TAK, DLK, MKK, p38, MAPK, MEKK, ASK, SAPK, JNK, BMK, MAP, JAK, PI3K, cyclooxygenase, STAT1, STAT2, STAT3 , STAT4, STAT5a, STAT5b, STAT6, Myc, p53, BRAF, NRAS, KRAS, HRAS and chemokines.
[0073] KRAS представляет собой гомолог онкогена Ras Кирстена из генов семейства Ras млекопитающих. KRAS кодирует белок, который является представителем небольшого суперсемейства ГТФ. Данный белок причастен к различным злокачественным опухолям, в том числе к аденокарциноме легкого, муцинозной аденоме, протоковой карциноме поджелудочной железы и карциноме толстой и прямой кишки. В нормальных условиях, представители семейства Ras влияют на клеточный рост и события дифференцировки в системе сигнализации на основе компартментализации внутриклеточной мембраны. Тем не менее, онкогенный Ras может дерегулировать процессы, которые регулируют пролиферацию клеток и апоптоз.[0073] KRAS is a homolog of the Kirsten Ras oncogene of the mammalian Ras family of genes. KRAS encodes a protein that is a member of the small GTP superfamily. This protein has been implicated in a variety of malignancies, including lung adenocarcinoma, mucinous adenoma, pancreatic ductal carcinoma, and colorectal carcinoma. Under normal conditions, members of the Ras family influence cell growth and differentiation events through a signaling system based on compartmentalization of the intracellular membrane. However, oncogenic Ras can deregulate processes that regulate cell proliferation and apoptosis.
[0074] ОдАт к KRAS были разработаны для направленного воздействия на KRAS дикого типа и мутантный KRAS (G12D), чтобы блокировать его роль в злокачественных клетках, таких как, например, клетки, связанные с раком ободочной и прямой кишки, раком поджелудочной железы, раком желчных протоков, раком легких, лейкозами и другими метастатическими злокачественными опухолями. Не будучи связанными конкретным механизмом, полагают, что ОдАт к KRAS связывает KRAS и блокирует нисходящие сигналы KRAS в злокачественных клетках. Кроме того, ОдАт к KRAS может успешно лечить злокачественные опухоли, которые являются устойчивыми к анти-EGFR биопрепаратам (например, цетуксимабу и панитумумабу).[0074] KRAS sdAbs have been designed to target wild-type KRAS and mutant KRAS (G12D) to block its role in malignant cells, such as, for example, cells associated with colorectal cancer, pancreatic cancer, cancer bile ducts, lung cancer, leukemia and other metastatic malignant tumors. While not bound by a specific mechanism, it is believed that the KRAS sdAb binds KRAS and blocks KRAS downstream signaling in malignant cells. In addition, KRAS sdAb can successfully treat cancers that are resistant to anti-EGFR biologics (eg, cetuximab and panitumumab).
[0075] С помощью методов, которые хорошо известны в данной области, рекомбинантный мутантный белок KRAS (G12D) человека использовали для создания ОдАт, которые направлены против или могут связываться с эпитопом KRAS или мутантного KRAS (G12D), или других мутантов KRAS. Кроме того, ОдАт могут создаваться для других мутантов KRAS. Для создания ОдАт к KRAS, рекомбинантный полноразмерный KRAS (ID гена: 3845) человека экспрессировали в Escherichia coli.[0075] Using methods that are well known in the art, recombinant human KRAS (G12D) mutant protein has been used to generate SdAbs that are directed against or can bind to an epitope of KRAS or mutant KRAS (G12D) or other KRAS mutants. In addition, OdAbs can be generated for other KRAS mutants. To generate the KRAS sAb, recombinant full-length human KRAS (Gene ID: 3845) was expressed in Escherichia coli .
[0076] Получали и скринировали несколько ОдАт. Последовательность ДНК одного ОдАт к KRAS (G12D), именуемая KRAS_13 (SEQ ID №: 1), показана ниже:[0076] Several OdAbs were obtained and screened. The DNA sequence of one KRAS sAb (G12D), referred to as KRAS_13 (SEQ ID No: 1), is shown below:
5'Gaggtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcagactggagggtctctgagactctcctgtgcagtttctggaaatatcggc agcagctactgcatgggctggttccgccaggctccagggaagaagcgcgaggcggtcgcacgtattgtacgtgatggtgccactggcta cgcagactacgtgaagggccgattcaccatctcccgagacagcgccaagaacactctgtatctgcaaatgaacaggctgatacctgagg acactgccatctactactgtgcggcagacctgcccccaggttgtttgactcaggcgatttggaattttggttatcggggccagggaaccctg gtcaccgtctcctca-3'5'Gaggtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcagactggagggtctctgagactctcctgtgcagtttctggaaatatcggc agcagctactgcatgggctggttccgccaggctccagggaagaagcgcgaggcggtcgcacgtattgtacgtgatggtgccactggcta cgcagactacgtgaagggcc gattcaccatctcccgagacagcgccaagaacactctgtatctgcaaatgaacaggctgatacctgagg acactgccatctactactgtgcggcagacctgcccccaggttgtttgactcaggcgatttggaattttggttatcggggccagggaaccctg gtcaccgtctcctca-3'
[0077] Аминокислотная последовательность ОдАт (SEQ ID № 2) к KRAS (G12D), KRAS_13, показана ниже, с подчеркнутыми CDR:[0077] The amino acid sequence of the OdAb (SEQ ID No. 2) to KRAS (G12D), KRAS_13, is shown below, with the CDRs underlined:
EVQLVESGGGSVQTGGSLRLSCAVSGNIGSSYCMGWFRQAPGKKREAVAEVQLVESGGGSVQTGGSLRLSCAVSGNIGS SYCMG WFRQAPGKKREAVA
RIVRDGATGYADYVKGRFTISRDSAKNTLYLQMNRLIPEDTAIYYCAA RIVRDGATGYADYVKGRFT ISRDSAKNTLYLQMNRLIPEDTAIYYCAA
DLPPGCLTQAIWNFGYRGQGTLVTVSS DLPPGCLTQAIWNFGY RGQGTLVTVSS
[0078] Кроме того, настоящее изобретение включает одно или более мышиных моноклональных антител, которые направлены против одного или более доменов ОдАт к KRAS по данному изобретению. Мышиное моноклональное антитело можно создать с помощью методов, которые известны специалистам в данной области техники, например, мышиное моноклональное антитело можно получить с помощью мышиной гибридомы. Мышиное моноклональное антитело можно использовать в диагностических анализах, например, антитело можно использовать в иммунологическом анализе, таком как ELISA или масс-спектрометрический анализ, с целью измерения количества ОдАт к KRAS в сыворотке крови пациента. Цитотоксичность ОдАт KRAS (G12D) испытывали на клетках рака поджелудочной железы человека PANC-1, как описано ниже.[0078] In addition, the present invention includes one or more murine monoclonal antibodies that are directed against one or more domains of the KRAS sdAb of the present invention. A mouse monoclonal antibody can be generated using methods known to those skilled in the art, for example, a mouse monoclonal antibody can be generated using a mouse hybridoma. The mouse monoclonal antibody can be used in diagnostic assays, for example, the antibody can be used in an immunoassay, such as an ELISA or a mass spectrometry assay, to measure the amount of KRAS sdAb in a patient's blood serum. The cytotoxicity of the KRAS sdAb (G12D) was tested on PANC-1 human pancreatic cancer cells as described below.
[0079] STAT3 является представителем семейства белков-переносчиков сигнала и активаторов транскрипции (STAT), которые осуществляют как сигнальную трансдукцию, так и активацию транскрипционных функций. STAT3 широко экспрессируется и активируется через фосфорилирование по тирозину и/или серину в качестве связывающего ДНК белка в ответ на различные цитокины и факторы роста, такие как ЭФР, ИЛ-6, ТФР, ИЛ-2 и Г-КСФ. Фосфопротеин STAT3 образует гомодимеры и гетеродимеры с другими представителями семейства STAT и транслоцируется в ядро с целью модуляции транскрипции различных генов, и в результате играет ключевую роль во многих клеточных процессах, таких как клеточный рост, апоптоз, ангиогенез, ускользание от иммунологического надзора и выживаемость.[0079] STAT3 is a member of the signal transporter and activator of transcription (STAT) family of proteins that mediate both signal transduction and activation of transcriptional functions. STAT3 is widely expressed and activated through tyrosine and/or serine phosphorylation as a DNA binding protein in response to various cytokines and growth factors such as EGF, IL-6, TGF, IL-2, and G-CSF. STAT3 phosphoprotein forms homodimers and heterodimers with other members of the STAT family and translocates into the nucleus to modulate the transcription of various genes, and as a result plays a key role in many cellular processes such as cell growth, apoptosis, angiogenesis, immune escape and survival.
[0080] ОдАт к STAT3 можно давать пациентам и другим организмам для лечения заболеваний, вызванных фосфорилированным и нефосфорилированным STAT3, а также для профилактики развития заболевания или рецидива заболевания. Например, пациенты, перенесшие трансплантацию органов и трансплантацию костного мозга, подвержены более высокому риску в отношении SCCA и BCCA кожи из-за иммуносупрессивных препаратов, которые они принимают. Введение ОдАт к STAT3 может уменьшать или устранять этот риск. На пациентов, получавших лечение от злокачественной опухоли, которые подвержены риску рецидива, лечение ОдАт к STAT3 окажет благоприятное действие. На основании семейного анамнеза и HLA-типа, некоторые индивидуумы будут подвергаться повышенному риску в отношении некоторых видов аутоиммунных заболеваний и могут получить пользу от лечения с использованием ОдАт со снижением риска развития этого аутоиммунного заболевания. Риск рака молочной железы можно уменьшить за счет ведения анти-STAT3 препаратов, таких как GLG-302, как показано в недавнем исследовании NCI.[0080] Anti-STAT3 sdAbs can be given to patients and other organisms to treat diseases caused by phosphorylated and non-phosphorylated STAT3, as well as to prevent the development of disease or relapse of disease. For example, patients who have had organ transplants and bone marrow transplants are at higher risk for SCCAs and BCCAs of the skin due to the immunosuppressive medications they are taking. Administration of an anti-STAT3 sdAb may reduce or eliminate this risk. Patients treated for cancer who are at risk of relapse will benefit from treatment with a STAT3 sdAb. Based on family history and HLA type, some individuals will be at increased risk for certain types of autoimmune diseases and may benefit from treatment with an OdAb with a reduced risk of developing that autoimmune disease. The risk of breast cancer can be reduced by administration of anti-STAT3 drugs such as GLG-302, as shown in a recent NCI study.
[0081] Помимо ингибирования STAT3, ОдАт к STAT3 также может ингибировать STAT1, STAT2, STAT4, STAT5a, STAT5b и STAT6 благодаря высокой степени гомологии между этими молекулами.[0081] In addition to inhibiting STAT3, the STAT3 sdAb can also inhibit STAT1, STAT2, STAT4, STAT5a, STAT5b and STAT6 due to the high degree of homology between these molecules.
[0082] Рекомбинантный белок STAT3 человека использовали для получения ОдАт к STAT, которые были направлены против или могли связываться с эпитопом STAT3. Для создания ОдАт к STAT3, рекомбинантный полноразмерный STAT3 (ID гена: 6774) человека экспрессировали бакуловирусом в клетках насекомых Sf9. ОдАт к STAT клонировали в векторы, которые могут экспрессироваться как в клетках бактерий, так и млекопитающих, как показано на Фиг. 1 и 2.[0082] Recombinant human STAT3 protein was used to generate anti-STAT sdAbs that were directed against or could bind to an epitope of STAT3. To create the STAT3 sdAb, recombinant full-length human STAT3 (Gene ID: 6774) was expressed by baculovirus in Sf9 insect cells. The STAT sAbs have been cloned into vectors that can be expressed in both bacterial and mammalian cells, as shown in FIG. 1 and 2.
[0083] ОдАт к STAT3 по данному изобретению может использоваться для направленного воздействия на STAT3 и все другие молекулы STAT внутри клетки с целью ингибирования роста клеток, такого как, например, подавление роста раковых клеток. Кроме того, ОдАт к STAT3 может ингибировать рост клеток в других пролиферативных заболеваниях, таких как псориаз и макулярная дегенерация, через ФРЭС.[0083] The anti-STAT3 sdAb of the present invention can be used to target STAT3 and all other STAT molecules within a cell to inhibit cell growth, such as, for example, inhibiting the growth of cancer cells. Additionally, STAT3 sdAb can inhibit cell growth in other proliferative diseases such as psoriasis and macular degeneration via VEGF.
[0084] Не ограничиваясь конкретным механизмом действия, полагают, что ОдАт к STAT3 может устранять индуцированную раком супрессию иммунного ответа за счет снижения уровней STAT3 в антигенпрезентирующих клетках, таких, как, например, дендритные клетки хозяина. Ингибирование STAT3 способствует противораковому ответу врожденной и приобретенной иммунной системой пациента (т.е. дендритными клетками, макрофагами, нейтрофилами, Т-клетками, NK-клетками и В-клетками).[0084] Without being limited to a specific mechanism of action, it is believed that a STAT3 sdAb may reverse cancer-induced suppression of the immune response by reducing STAT3 levels in antigen presenting cells, such as host dendritic cells. Inhibition of STAT3 promotes the anticancer response by the patient's innate and acquired immune system (i.e., dendritic cells, macrophages, neutrophils, T cells, NK cells, and B cells).
[0085] С помощью методов, которые хорошо известны в данной области техники, несколько ОдАт к STAT получали и подвергали скринингу на способность подавлять рост раковых клеток и индуцировать апоптоз в клеточных линиях рака, как описано ниже. Испытывали цитотоксичность и антипролиферативные активности ОдАт к STAT3. Кроме того, испытывали переносимость ОдАт к STAT3 in vitro и in vivo. Получение мышиных моноклональных антител, направленных против одного или более доменов ОдАт к STAT, описано ниже.[0085] Using methods that are well known in the art, several STAT sAbs were prepared and screened for the ability to inhibit cancer cell growth and induce apoptosis in cancer cell lines, as described below. The cytotoxicity and antiproliferative activities of OdAb to STAT3 were tested. In addition, the tolerance of OdAbs to STAT3 was tested in vitro and in vivo. The generation of murine monoclonal antibodies directed against one or more domains of the anti-STAT sAb is described below.
[0086] Аминокислотная последовательность одного ОдАт к STAT3, именуемого VHH13 (SEQ ID № 3), показана ниже:[0086] The amino acid sequence of one anti-STAT3 sAb called VHH13 (SEQ ID No. 3) is shown below:
HVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSGISTGGLI HVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGG RSCMG WFRQVPGKEREGVS GISTGGLI
TYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSRFDCYRGSWFNRYM TYYADSVKGRFT ISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCAT SRFDCYRGSWFNRYM
YNSWGQGTQVTVSS YNS WGQGTQVTVSS
Три CDR подчеркнуты.Three CDRs are underlined.
[0087] Аминокислотная последовательность второго ОдАт к STAT3, именуемого VHH14 (SEQ ID № 4), показана ниже:[0087] The amino acid sequence of the second STAT3 Ab, referred to as VHH14 (SEQ ID No. 4), is shown below:
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAALSSRGFAGH QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTY TGCMG WFRQAPGKEREGVA ALSSRGFAGH
YTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAAREGWECGETWLDRTAG YTDSVKGRFS ISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAA REGWECGETWLDRTAG
GHTYWGQGTLVTVSS GHTY WGQGTLVTVSS
[0088] И снова, три CDR подчеркнуты. Белковые последовательности других ОдАт к STAT3, которые были получены, являются такими, как показано ниже:[0088] Again, three CDRs are underlined. The protein sequences of other STAT3 sAbs that have been obtained are as shown below:
STAT3_10 (SEQ ID № 5):STAT3_10 (SEQ ID #5):
(1) DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA(1) DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA
(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE
(98) GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTQVTVSS STAT3_34 (SEQ ID № 6):(98) GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTQVTVSS STAT3_34 (SEQ ID No. 6):
(1) DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA(1) DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA
(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE
(98) GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTQVTVSS(98)GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTQVTVSS
STAT3_19 (SEQ ID № 7):STAT3_19 (SEQ ID No. 7):
(1) HVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA(1) HVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA
(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE
(98) GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTQVTVSS(98)GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTQVTVSS
STAT3_14 (SEQ ID № 8):STAT3_14 (SEQ ID No. 8):
(1) QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA(1)QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA
(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE
(98) GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTLVTVSS(98)GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTLVTVSS
STAT3_35 (SEQ ID № 9):STAT3_35 (SEQ ID No. 9):
(1) QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA(1)QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA
(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE
(98) GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTLVTVSS(98)GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTLVTVSS
STAT3_9 (SEQ ID № 10):STAT3_9 (SEQ ID No. 10):
(1) QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA(1)QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA
(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE
(98) GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTLVTVSS(98)GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTLVTVSS
STAT3_30 (SEQ ID № 11):STAT3_30 (SEQ ID No. 11):
(1) QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA(1)QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA
(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE
(98) GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTLVTVSS(98)GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTLVTVSS
STAT3_23 (SEQ ID № 12):STAT3_23 (SEQ ID No. 12):
(1) QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA(1)QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA
(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE
(98) GWECGETWLDRTAGSHTYWGQGTLVTVSS(98)GWECGETWLDRTAGSHTYWGQGTLVTVSS
STAT3_24 (SEQ ID № 13):STAT3_24 (SEQ ID No. 13):
(1) EVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA(1) EVQLVESGGGGSVQAGGSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA
(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE
(98) GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTLVTVSS(98)GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTLVTVSS
STAT3_36 (SEQ ID № 14):STAT3_36 (SEQ ID No. 14):
(1) DVQLVESGGGSVQAGDSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA(1) DVQLVESGGGSVQAGDSLRLSCVASTYTGCMGWFRQAPGKEREGVAA
(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE(48) LSSRGFAGHYTDSVKGRFSISRDYVKNAVYLQMNTVKPEDAAMYYCAARE
(98) GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTLVTVSS(98)GWECGETWLDRTAGGHTYWGQGTLVTVSS
STAT3_12 (SEQ ID № 15):STAT3_12 (SEQ ID No. 15):
(1) QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG(1)QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG
(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR
(101) FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTLVTVSS(101)FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTLVTVSS
STAT3_16 (SEQ ID № 16):STAT3_16 (SEQ ID No. 16):
(1) QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG(1)QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG
(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTNNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTNNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR
(101) FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTLVTVSS(101)FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTLVTVSS
STAT3_11 (SEQ ID № 17):STAT3_11 (SEQ ID No. 17):
(1) EVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG(1) EVQLVESGGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG
(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR
(101) FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTLVTVSS(101)FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTLVTVSS
STAT3_20 (SEQ ID № 18):STAT3_20 (SEQ ID No. 18):
(1) DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG(1) DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG
(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR
(101) FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTLVTVSS(101)FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTLVTVSS
STAT3_2 (SEQ ID № 19):STAT3_2 (SEQ ID No. 19):
(1) DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG(1) DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG
(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR
(101) FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTLVTVSS(101)FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTLVTVSS
STAT3_15 (SEQ ID № 20):STAT3_15 (SEQ ID No. 20):
(1) DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG(1) DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG
(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR
(101) FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTLVTVSS(101)FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTLVTVSS
STAT3_6 (SEQ ID № 21):STAT3_6 (SEQ ID No. 21):
(1) HVQLVESEGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG(1) HVQLVESEGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG
(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR
(101) FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTLVTVSS(101)FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTLVTVSS
STAT3_33 (SEQ ID № 22):STAT3_33 (SEQ ID No. 22):
(1) QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG(1)QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG
(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR
(101) FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTQVTVSS(101)FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTQVTVSS
STAT3_17 (SEQ ID № 23):STAT3_17 (SEQ ID No. 23):
(1) QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG(1)QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG
(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR
(101) FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTQVTVSS(101)FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTQVTVSS
STAT3_25 (SEQ ID № 24):STAT3_25 (SEQ ID No. 24):
(1) EVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG(1) EVQLVESGGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG
(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMSSLKPEDTAMYYCATSR(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMSSLKPEDTAMYYCATSR
(101) FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTQVTVSS(101)FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTQVTVSS
STAT3_32 (SEQ ID № 25):STAT3_32 (SEQ ID #25):
(1) DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG(1) DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG
(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR
(101) FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTQVTVSS(101)FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTQVTVSS
STAT3_13 (SEQ ID № 26):STAT3_13 (SEQ ID No. 26):
(1) HVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG(1) HVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG
(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR
(101) FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTQVTVSS(101)FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTQVTVSS
STAT3_39 (SEQ ID № 27):STAT3_39 (SEQ ID No. 27):
(1) HVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG(1) HVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG
(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR
(101) FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTQVTVSS(101)FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTQVTVSS
STAT3_4 (SEQ ID № 28):STAT3_4 (SEQ ID No. 28):
(1) HVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG(1) HVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG
(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR
(101) FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTQVTVSS(101)FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTQVTVSS
STAT3_29 (SEQ ID № 29):STAT3_29 (SEQ ID No. 29):
(1) HVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG(1) HVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGANGGRSCMGWFRQVPGKEREGVSG
(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR(51) ISTGGLITYYADSVKGRFTISQDNTKNTLYLQMNSLKPEDTAMYYCATSR
(101) FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTQVTVSS(101)FDCYRGSWFNRYMYNSWGQGTQVTVSS
[0089] Соответствующие последовательности ДНК ОдАт к STAT3 являются такими, как показано ниже:[0089] The corresponding DNA sequences of the STAT3 sAb are as follows:
Stat3_VHH-10 (SEQ ID № 30): Stat3_VHH-10 (SEQ ID No. 30):
5'-gatgtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggaggctctctgagactctcctgtgtagcctctacatacaccggc tgcatgggctggttccgccaggctcctggaaaggagcgcgagggagtcgcagctcttagtagccgtggttttgccgggcactataccgactccgtg aagggccgattctccatctcccgagactacgtcaagaatgcggtgtatctgcaaatgaacactgtgaaacctgaggacgctgccatgtactactgtgc agcacgggagggatgggagtgcggtgagacctggttggaccggaccgccgggggccatacctactggggccaggggacccaggtcaccgtct cctca-3'5'-gatgtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggaggctctgagactctcctgtgtagcctctacatacaccggc tgcatgggctggttccgccaggctcctggaaaggagcgcgagggagtcgcagctcttagtagccgtggttttgccgggcactataccgactccgtg aagggccgattctccat ctcccgagactacgtcaagaatgcggtgtatctgcaaatgaacactgtgaaacctgaggacgctgccatgtactactgtgc agcacgggagggatgggagtgcggtgagacctggttggaccggaccgccgggggccatacctactggggccaggggacccaggtcaccgtct cctca-3'
Stat3_VHH-14 (SEQ ID № 31): Stat3_VHH-14 (SEQ ID No. 31):
5'-caggtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggaggctctctgagactctcctgtgtagcctctacatacaccggc tgcatgggctggttccgccaggctcctggaaaggagcgcgagggagtcgcagctcttagtagccgtggttttgccgggcactataccgactccgtg aagggccgattctccatctcccgagactacgtcaagaatgcggtgtatctgcaaatgaacactgtgaaacctgaggacgctgccatgtactactgtgc agcacgggagggatgggagtgcggtgagacctggttggaccggaccgccgggggccatacctactggggccaggggaccctggtcaccgtctc ctca-3'5'-caggtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggaggctctctgagactctctcctgtgtagcctctacatacaccggc tgcatgggctggttccgccaggctcctggaaaggagcgcgagggagtcgcagctcttagtagccgtggttttgccgggcactataccgactccgtg aagggccgattctccatct cccgagactacgtcaagaatgcggtgtatctgcaaatgaacactgtgaaacctgaggacgctgccatgtactactgtgc agcacgggagggatgggagtgcggtgagacctggttggaccggaccgccgggggccatacctactggggccaggggaccctggtcaccgtctc ctca-3'
Stat3_VHH-12 (SEQ ID № 32): Stat3_VHH-12 (SEQ ID No. 32):
5'-caggtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctcctgtgcagcctctggagccaatgg tggtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgcgagggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgccg actccgtgaagggccgattcaccatctcccaagacaacaccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacactgccatgt actactgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggaccctggtcaccgtctcct ca-3'5'-caggtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctctcctgtgcagcctctggagccaatgg tggtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgcgagggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgccg actccgtgaagggccgattcacca tctcccaagacaacaccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacactgccatgt actactgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggaccctggtcaccgtctcct ca-3'
Stat3_VHH-13 (SEQ ID № 33): Stat3_VHH-13 (SEQ ID No. 33):
5'-catgtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctcctgtgcagcctctggagccaacgg tggtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgcgagggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgccg actccgtgaagggccgattcaccatctcccaagacaacaccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacactgccatgt actactgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggacccaggtcactgtctcct ca-3'5'-catgtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctctcctgtgcagcctctggagccaacgg tggtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgcgagggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgccg actccgtgaagggccgattcacca tctcccaagacaacaccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacactgccatgt actactgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggacccaggtcactgtctcct ca-3'
Stat3_VHH-20 (SEQ ID № 34): Stat3_VHH-20 (SEQ ID No. 34):
5'-gatgtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctcctgtgcagcctctggagccaatgg tggtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgcgagggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgccg actccgtgaagggccgattcaccatctcccaagacaacaccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacactgccatgt actactgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggaccctggtcaccgtctcct ca-3'5'-gatgtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctctcctgtgcagcctctggagccaatgg tggtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgcgaggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgccg actccgtgaagggccgattca ccatctcccaagacaacaccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacactgccatgt actactgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggaccctggtcaccgtctcct ca-3'
Stat3_VHH-23 (SEQ ID № 35): Stat3_VHH-23 (SEQ ID No. 35):
5'-caggtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggaggctctctgagactctcctgtgtagcctctacatacaccggc tgcatgggctggttccgccaggctcctggaaaggagcgcgagggagtcgcagctcttagcagccgtggttttgccgggcactataccgactccgtg aagggccgattctccatctcccgagactacgtcaagaatgcggtgtatctgcaaatgaacactgtgaaacctgaggacgctgccatgtactactgtgc agcacgggagggatgggagtgcggtgagacctggttggaccggaccgccgggagccatacctactggggccaggggaccctggtcaccgtctc ctca-3'5'-caggtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggaggctctctgagactctcctgtgtagcctctacatacaccggc tgcatgggctggttccgccaggctcctggaaaggagcgcgagggagtcgcagctcttagcagccgtggttttgccgggcactataccgactccgtg aagggccgattctccat ctcccgagactacgtcaagaatgcggtgtatctgcaaatgaacactgtgaaacctgaggacgctgccatgtactactgtgc agcacgggagggatgggagtgcggtgagacctggttggaccggaccgccgggagccatacctactggggccaggggaccctggtcaccgtctc ctca-3'
Stat3_VHH-24 (SEQ ID № 36): Stat3_VHH-24 (SEQ ID No. 36):
5'-gaggtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggaggctctctgagactctcctgtgtagcctctacatacaccgg ctgcatgggctggttccgccaggctcctggaaaggagcgcgagggagtcgcagctcttagtagccgtggttttgccgggcactataccgactccgt gaagggccgattctccatctcccgagactacgtcaagaatgcggtgtatctgcaaatgaacactgtgaaacctgaggacgctgccatgtactactgtg cagcacgggagggatgggagtgcggtgagacctggttggaccgaaccgccgggggccatacctactggggccaggggaccctggtcaccgtct cctca-3'5'-gaggtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggaggctctctgagactctctcctgtgtagcctctacatacaccgg ctgcatgggctggttccgccaggctcctggaaaggagcgcgagggagtcgcagctcttagtagccgtggttttgccgggcactataccgactccgt gaagggccgattctccatct cccgagactacgtcaagaatgcggtgtatctgcaaatgaacactgtgaaacctgaggacgctgccatgtactactgtg cagcacgggagggatgggagtgcggtgagacctggttggaccgaaccgccgggggccatacctactggggccaggggaccctggtcaccgtct cctca-3'
Stat3_VHH-25 (SEQ ID № 37): Stat3_VHH-25 (SEQ ID No. 37):
5'-gaggtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctcctgtgcagcctctggagccaatg gtggtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgcgagggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgcc gactccgtgaagggtcgattcaccatctcccaagacaacaccaagaacacgctgtatctgcaaatgagcagcctgaaacctgaggacactgccatg tactactgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggacccaggtcaccgtctcc tca-3'5'-gaggtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctctcctgtgcagcctctggagccaatg gtggtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgcgaggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgcc gactccgtgaagggtcgatt caccatctcccaagacaacaccaagaacacgctgtatctgcaaatgagcagcctgaaacctgaggacactgccatg tactactgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggacccaggtcaccgtctcc tca-3'
Stat3_VHH-19 (SEQ ID № 38): Stat3_VHH-19 (SEQ ID No. 38):
5'-catgtgcagctggtggagtctggggggggctcggtgcaggctggaggctctctgagactctcctgtgtagcctctacatacaccggc tgcatgggctggttccgccaggctcctggaaaggagcgcgagggagtcgcagctcttagtagccgtggttttgccgggcactataccgactccgtg aagggccgattctccatctcccgagactacgtcaagaatgcggtgtatctgcaaatgaacactgtgaaacctgaggacgctgccatgtactactgtgc agcacgggagggatgggagtgcggtgagacctggttggaccggaccgccgggggccatacctactggggccaggggacccaggtcaccgtct cctca-3'5'-catgtgcagctggtggagtctggggggggctcggtgcaggctggaggctctctgagactctctcctgtgtagcctctacatacaccggc tgcatgggctggttccgccaggctcctggaaaggagcgcgagggagtcgcagctcttagtagccgtggttttgccgggcactataccgactccgtg aagggccgattctccatct cccgagactacgtcaagaatgcggtgtatctgcaaatgaacactgtgaaacctgaggacgctgccatgtactactgtgc agcacgggagggatgggagtgcggtgagacctggttggaccggaccgccgggggccatacctactggggccaggggacccaggtcaccgtct cctca-3'
Stat3_VHH-32 (SEQ ID № 39): Stat3_VHH-32 (SEQ ID No. 39):
5'-gatgtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctcctgtgcagcctctggagccaatg gtggtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgcgagggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgcc gactccgtgaagggccgattcaccatctcccaagacaacaccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacactgccatg tactactgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggacccaggtcaccgtctcc tca-3'5'-gatgtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctctcctgtgcagcctctggagccaatg gtggtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgcgaggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgcc gactccgtgaagggccgatt caccatctcccaagacaacaccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacactgccatg tactactgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggacccaggtcaccgtctcc tca-3'
Stat3_VHH-33 (SEQ ID № 40): Stat3_VHH-33 (SEQ ID No. 40):
5'-caggtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctcctgtgcagcctctggagccaatg gtggtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgcgagggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgcc gactccgtgaagggccgattcaccatctcccaagacaacaccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacactgccatg tactactgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggacccaggtcaccgtctcc tca-3'5'-caggtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctctcctgtgcagcctctggagccaatg gtggtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgcgaggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgcc gactccgtgaagggccgattca ccatctcccaagacaacaccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacactgccatg tactactgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggacccaggtcaccgtctcc tca-3'
Stat3_VHH-36 (SEQ ID № 41): Stat3_VHH-36 (SEQ ID No. 41):
5'-gatgtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagactctctgagactctcctgtgtagcctctacatacaccggc tgcatgggctggttccgccaggctcctggaaaggagcgcgagggagtcgcagctcttagtagccgtggttttgccgggcactataccgactccgtg aagggccgattctccatctcccgagactacgtcaagaatgcggtgtatctgcaaatgaacactgtgaaacctgaggacgctgccatgtactactgtgc agcacgggagggatgggagtgcggtgagacctggttggaccggaccgccgggggccatacctactggggccaggggaccctggtcactgtctc ctca-3'5'-gatgtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagactctctgagactctctcctgtgtagcctctacatacaccggc tgcatgggctggttccgccaggctcctggaaaggagcgcgagggagtcgcagctcttagtagccgtggttttgccgggcactataccgactccgtg aagggccgattctccatct cccgagactacgtcaagaatgcggtgtatctgcaaatgaacactgtgaaacctgaggacgctgccatgtactactgtgc agcacgggagggatgggagtgcggtgagacctggttggaccggaccgccgggggccatacctactggggccaggggaccctggtcactgtctc ctca-3'
Stat3_VHH-11 (SEQ ID № 42): Stat3_VHH-11 (SEQ ID No. 42):
5'-gtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctcctgtgcagcctctggagccaatggtg gtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgtgagggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgccgac tccgtgaagggccgattcaccatctcccaagacaacaccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacactgccatgtact actgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggaccctggtcactgtctcctca-3'5'-gtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctcctgtgcagcctctggagccaatggtg gtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgtgagggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgccgac tccgtgaagggccgattca ccatctcccaagacaacaccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacactgccatgtact actgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggaccctggtcactgtctcctca-3'
Stat3_VHH-6 (SEQ ID № 43): Stat3_VHH-6 (SEQ ID No. 43):
5'-gtgcagctggtggagtctgagggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctcctgtgcagcctctggagccaatggtg gtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgcgagggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgccgac tccgtgaagggccgattcaccatctcccaagacaacaccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacactgccatgtact actgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggaccctggtcaccgtctcctca-3'5'-gtgcagctggtggagtctgagggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctcctgtgcagcctctggagccaatggtg gtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgcgaggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgccgac tccgtgaagggccgattca ccatctcccaagacaacaccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacactgccatgtact actgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggaccctggtcaccgtctcctca-3'
Stat3_VHH-1 (SEQ ID № 44): Stat3_VHH-1 (SEQ ID No. 44):
5'-gtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctcctgtgcagcctctggagccaatggtg gtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgcgagggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgccgac tccgtgaagggccgattcaccatctcccaagacaacaccaataacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacactgccatgtact actgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggaccctggtcactgtctcctca-3'5'-gtgcagctggtggagtctgggggaggctcggtgcaggctggagggtctctgagactctcctgtgcagcctctggagccaatggtg gtcggagctgcatgggctggttccgccaggttccagggaaggagcgcgaggggtttctggtatttcaaccggtggtcttattacatactatgccgac tccgtgaagggccgattca ccatctcccaagacaacaccaataacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacactgccatgtact actgtgcgacgagtcggtttgactgctatagaggctcttggttcaaccgatatatgtataacagttggggccaggggaccctggtcactgtctcctca-3'
[0090] Кроме того, настоящее изобретение включает одно или более мышиных моноклональных антител, которые направлены против одного или более доменов ОдАт к STAT3 по данному изобретению. Мышиное моноклональное антитело можно создать с помощью методов, которые известны специалистам в данной области техники, например, мышиное моноклональное антитело можно получить с помощью мышиной гибридомы. Мышиное моноклональное антитело можно использовать в диагностических анализах, например, антитело можно использовать в иммунологическом анализе, таком как ELISA, с целью измерения количества ОдАт к STAT3 в сыворотке крови пациента. Следует понимать, что данный способ не ограничивается ОдАт к STAT3, и может использоваться для получения мышиного антитела, направленного на любое из ОдАт по данному изобретению.[0090] In addition, the present invention includes one or more murine monoclonal antibodies that are directed against one or more domains of the STAT3 sdAb of the present invention. A mouse monoclonal antibody can be generated using methods known to those skilled in the art, for example, a mouse monoclonal antibody can be generated using a mouse hybridoma. The mouse monoclonal antibody can be used in diagnostic assays, for example, the antibody can be used in an immunoassay, such as an ELISA, to measure the amount of STAT3 sdAb in a patient's blood serum. It should be understood that this method is not limited to STAT3 sdAbs, and can be used to produce murine antibodies directed to any of the sdAbs of the present invention.
[0091] Ген ФНО-альфа кодирует многофункциональный провоспалительный цитокин, который принадлежит суперсемейству фактора некроза опухоли (ФНО). Этот цитокин в основном секретируется макрофагами. Данный цитокин участвует в регуляции широкого спектра биологических процессов, в том числе регуляции роста, дифференцировке, воспалении, вирусной репликации, онкогенезе, а также аутоиммунных заболеваниях; и в вирусных, бактериальных, грибковых и паразитарных инфекциях. К тому же было установлено, что индуцируя геморрагический некроз опухолей, ФНО участвует в онкогенезе, опухолевых метастазах, вирусной репликации, септическом шоке, лихорадке, воспалении, кахексии и аутоиммунных заболеваниях, включая болезнь Крона и ревматоидный артрит, а также реакцию "трансплантат против хозяина".[0091] The TNF-alpha gene encodes a multifunctional proinflammatory cytokine that belongs to the tumor necrosis factor (TNF) superfamily. This cytokine is mainly secreted by macrophages. This cytokine is involved in the regulation of a wide range of biological processes, including growth regulation, differentiation, inflammation, viral replication, oncogenesis, and autoimmune diseases; and in viral, bacterial, fungal and parasitic infections. In addition, by inducing hemorrhagic necrosis of tumors, TNF has been found to be involved in oncogenesis, tumor metastasis, viral replication, septic shock, fever, inflammation, cachexia and autoimmune diseases, including Crohn's disease and rheumatoid arthritis, as well as graft-versus-host disease. .
[0092] Настоящее изобретение относится к ОдАт, белкам и полипептидам, которые направлены против ФНО-альфа, в частности, против ФНО-альфа человека внутри клетки или клеточной мембраны так, чтобы предотвратить секрецию ФНО-альфа клетками.[0092] The present invention relates to sdAbs, proteins and polypeptides that are directed against TNF-alpha, in particular against human TNF-alpha, within a cell or cell membrane so as to prevent the cells from secreting TNF-alpha.
[0093] Предполагается, что ОдАт к ФНО-альфа и полипептиды по данному изобретению можно использовать для профилактики и/или лечения заболеваний и расстройств, связанных с ФНО-альфа и/или опосредованных им, таких как воспаление, ревматоидный артрит, болезнь Крона, язвенный колит, синдром воспаленного кишечника, рассеянный склероз, болезнь Аддисона, аутоиммунный гепатит, аутоиммунный паротит, сахарный диабет 1 типа, эпидидимит, гломерулонефрит, болезнь Грейвса, синдром Гийена-Барре, болезнь Хашимото, гемолитическая анемия, системная красная волчанка, мужское бесплодие, рассеянный склероз, тяжелая миастения, пузырчатка, псориаз, ревматическая лихорадка, ревматоидный артрит, саркоидоз, склеродермия, синдром Шегрена, спондилоартропатии, тиреоидит, васкулит и потеря веса из-за рака и кахексии.[0093] It is contemplated that the anti-TNF-alpha sdAb and polypeptides of this invention may be used for the prevention and/or treatment of diseases and disorders associated with and/or mediated by TNF-alpha, such as inflammation, rheumatoid arthritis, Crohn's disease, ulcerative colitis, inflammatory bowel syndrome, multiple sclerosis, Addison's disease, autoimmune hepatitis, autoimmune parotitis, type 1 diabetes mellitus, epididymitis, glomerulonephritis, Graves' disease, Guillain-Barre syndrome, Hashimoto's disease, hemolytic anemia, systemic lupus erythematosus, male infertility, multiple sclerosis , myasthenia gravis, pemphigus, psoriasis, rheumatic fever, rheumatoid arthritis, sarcoidosis, scleroderma, Sjogren's syndrome, spondyloarthropathy, thyroiditis, vasculitis and weight loss due to cancer and cachexia.
[0094] ФНО-альфа существует в различных формах; есть мономерные и мультимерные формы, в том числе тримерная форма. В пределы объема данного изобретения входит то, что ОдАт, белки и полипептиды по данному изобретению связываются с ФНО-альфа в его различных формах, т.е. мономерной форме или мультимерных формах. Таким образом, если ОдАт, белки и полипептиды по данному изобретению направлены на ФНО-альфа, следует понимать, что это также включает ОдАт, белки и полипептиды, направленные против ФНО-альфа в его тримерной форме.[0094] TNF-alpha exists in various forms; there are monomeric and multimeric forms, including a trimeric form. It is within the scope of this invention that the OdAbs, proteins and polypeptides of this invention bind to TNF-alpha in its various forms, i.e. monomeric form or multimeric forms. Thus, while the sdAbs, proteins and polypeptides of the present invention are directed against TNF-alpha, it should be understood that this also includes sdAbs, proteins and polypeptides directed against TNF-alpha in its trimeric form.
[0095] Известно, что сигнальная трансдукция с помощью ФНО включает сшивание рецепторов ФНО тримером молекул ФНО, который содержит три участка связывания рецептора (см., например, Peppel et al., J. Exp. Med., 174 (1991), 1483-1489).[0095] It is known that signal transduction by TNF involves the cross-linking of TNF receptors by a trimer of TNF molecules that contains three receptor binding sites (see, for example, Peppel et al., J. Exp. Med., 174 (1991), 1483- 1489).
[0096] Рекомбинантный белок ФНО-альфа человека использовали для создания ОдАт, которые направлены против или могут связываться с эпитопом ФНО-альфа. Для создания ОдАт к ФНО-альфа, рекомбинантный полноразмерный ФНО-альфа (ID гена: 7124) человека экспрессировали в Escherichia coli и использовали в качестве антигена-мишени.[0096] Recombinant human TNF-alpha protein has been used to create OdAbs that are directed against or can bind to an epitope of TNF-alpha. To generate the TNF-alpha sdAb, recombinant full-length human TNF-alpha (Gene ID: 7124) was expressed in Escherichia coli and used as the target antigen.
[0097] Было получено тридцать пять ОдАт к белку ФНО-альфа. Эти антитела к ФНО-альфа разделяли на три группы, основываясь на гомологии последовательностей.[0097] Thirty-five sdAbs to the TNF-alpha protein were obtained. These anti-TNF-alpha antibodies were divided into three groups based on sequence homology.
[0098] Аминокислотная последовательность первого ОдАт к ФНО-альфа, именуемого VHH66-ОдАт (SEQ ID № 45) к ФНО-альфа, показана ниже:[0098] The amino acid sequence of the first TNF-alpha sdAb, referred to as VHH66-TNF-alpha sdAb (SEQ ID No. 45), is shown below:
HVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYAAYCMGWFRQADGKEREGVATIDIDGLT THADSVKGRFTISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAADRDRCGSIWTYAYKYRG-QGTLVTVSSHVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYA AYCMG WFRQADGKEREGVA TIDIDGLT THADSVKGRFT ISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAA DRDRCGSIWTYAYKY RG-QGTLVTVSS
Три CDR подчеркнуты.Three CDRs are underlined.
[0099] Аминокислотная последовательность второго ОдАт к ФНО-альфа, именуемого VHH69-ОдАт (SEQ ID № 46) к ФНО-альфа, показана ниже:[0099] The amino acid sequence of the second TNF-alpha sdAb, referred to as VHH69-TNF-alpha sdAb (SEQ ID No. 46), is shown below:
EVQLVESGGGSVLAGGSLRLSCVASGFTSRYNYMAWFRQAPGKEREGVATIGTASGS ADYYGSVKDRFTISQDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAMYYCAARTYGTISLTPSDYRYWGQGT LVTVSSEVQLVESGGGSVLAGGSLRLSCVASGFTSR YNYMA WFRQAPGKEREGVA TIGTASGS ADYYGSVKDRFT ISQDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAMYYCAA RTYGTISLTPSDYRY WGQGT LVTVSS
Три CDR подчеркнуты.Three CDRs are underlined.
[0100] Аминокислотная последовательность третьего ОдАт к ФНО-альфа, именуемого VHH62-ОдАт (SEQ ID № 47) к ФНО-альфа, показана ниже:[0100] The amino acid sequence of the third anti-TNF-alpha sdAb, referred to as VHH62-sdAb (SEQ ID No. 47) against TNF-alpha, is shown below:
QVQLVESGGGPVQAGETLRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGHECELVSTITTEGITS EASSYYADSVRGRFTISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAPDPYAYSTYSDYCSWAQG TQGTLVTVSSQVQLVESGGGPVQAGETLRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGHECELVS TITTEGITS EASSYYADSVRGRFT ISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAP DPYAYSTYSDYCS WAQG TQGTLVTVSS
[0101] Три CDR подчеркнуты. Другие ОдАт к ФНО-альфа, которые были обнаружены, включают приведенные ниже последовательности, и снова CDR подчеркнуты:[0101] Three CDRs are underlined. Other TNF-alpha sdAbs that have been discovered include the sequences below, and again the CDRs are underlined:
ФНО_2 (SEQ ID № 48):TNF_2 (SEQ ID No. 48):
QVQLVESGGGSVEAGRSLRLSCAASGFRYAAYCMGWFRQADGKEREGVATIDIDGQT THADSVKGRFTISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAADRDRCGSIWTYAYKYRGQGTQ VTVSSQVQLVESGGGSVEAGRSLRLSCAASGFRYA AYCMGW FRQADGKEREGVA TIDIDGQT THADSVKGRFT ISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAADRDRCGSIWTYAYKYRGQGTQ VTVSS
ФНО_46 (SEQ ID № 49):TNF_46 (SEQ ID No. 49):
QVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYAAYCMGWFRQADGKEREGVATIDIDGQT THADSVKGRFTISRDNVKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAADRDRCGSIWTYAYKYRGQGTQ VTVSSQVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYA AYCMGW FRQADGKEREGVA TIDIDGQT THADSVKGRFT ISRDNVKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAADRDRCGSIWTYAYKYRGQGTQ VTVSS
ФНО_71 (SEQ ID № 50):TNF_71 (SEQ ID No. 50):
QVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYAAYCMGWFRQADGKEREGVATIDIDGLT THADSVKGRFTISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAADRDRCGSIWTYAYKYRGQGTQ VTVSSQVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYA AYCMGW FRQADGKEREGVA TIDIDGLT THADSVKGRFT ISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAA DRDRCGSIWTYAYKY RGQGTQ VTVSS
ФНО_21 (SEQ ID № 51):TNF_21 (SEQ ID No. 51):
QVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYAAYCMGWFRQADGKEREGVATIDIDGQT THADSVKGRFTISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAADRDRCGSIWTYAYKYRGQGTQ VTVSSQVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYA AYCMGW FRQADGKEREGVA TIDIDGQT THADSVKGRFT ISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAA DRDRCGSIWTYAYKY RGQGTQ VTVSS
ФНО_38 (SEQ ID № 52):TNF_38 (SEQ ID No. 52):
EVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYAAYCMGWFRQADGKEREGVATIDIDGQT THADSVKGRFTISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAADRDRCGSIWTYAYKYRGQGTQ VTVSSEVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYA AYCMGW FRQADGKEREGVA TIDIDGQT THADSVKGRFT ISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAA DRDRCGSIWTYAYKY RGQGTQ VTVSS
ФНО_18 (SEQ ID № 53):TNF_18 (SEQ ID No. 53):
EVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYAAYCMGWFRQADGKEREGVATIDIDGLT THADSVKGRFTISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAADRDRCGSIWTYAYKYRGQGTL VTVSSEVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYA AYCMGW FRQADGKEREGVA TIDIDGLT THADSVKGRFT ISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAA DRDRCGSIWTYAYKY RGQGTL VTVSS
ФНО_37 (SEQ ID № 54):TNF_37 (SEQ ID No. 54):
DVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYAAYCMGWFRQADGKEREGVATIDIDGQT THADSVKGRFTISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAADRDRCGSIWTYAYKYRGQGTL VTVSSDVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYA AYCMGW FRQADGKEREGVA TIDIDGQT THADSVKGRFT ISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAA DRDRCGSIWTYAYKY RGQGTL VTVSS
ФНО_66 (SEQ ID № 55):TNF_66 (SEQ ID No. 55):
HVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYAAYCMGWFRQADGKEREGVATIDIDGLT THADSVKGRFTISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAADRDRCGSIWTYAYKYRGQGTL VTVSSHVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYA AYCMGW FRQADGKEREGVA TIDIDGLT THADSVKGRFT ISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAA DRDRCGSIWTYAYKY RGQGTL VTVSS
ФНО_68 (SEQ ID № 56):TNF_68 (SEQ ID No. 56):
HVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYAAYCMGWFRQADGKEREGVATIDIDGLA THADSVKGRFTISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAADRDRCGSIWTYAYKYRGQGTL VTVSS ФНО_78 (SEQ ID № 57):HVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYA AYCMGW FRQADGKEREGVA TIDIDGLA THADSVKGRFT ISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAA DRDRCGSIWTYAYKY RGQGTL VTVSS TNF_78 (SEQ ID No. 57):
HVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYAAYCMGWFRQADRKEREGVATIDIDGQT THADSVKGRFTISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAADRDRCGSIWTYAYKYRGQGTQ VTVSSHVQLVESGGGSVEAGGSLRLSCAASGFRYA AYCMGW FRQADRKEREGVA TIDIDGQT THADSVKGRFT ISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAA DRDRCGSIWTYAYKY RGQGTQ VTVSS
ФНО_67 (SEQ ID № 58):TNF_67 (SEQ ID No. 58):
HVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGFRYAAYCMGWFRQADGKVREGVATIDIDGQ TTHADSVKGRFTISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAADRDRCGSIWTYAYKYRGQGT LVTVSSHVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGFRYA AYCMGW FRQADGKVREGVA TIDIDGQ TTHADSVKGRFT ISRDNAKNTLSLQMNDLKPEDTAMYYCAA DRDRCGSIWTYAYKY RGQGT LVTVSS
ФНО_6 (SEQ ID № 59):TNF_6 (SEQ ID No. 59):
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGFIDSFGVMAWFRQAPGKEREGVAAVYRRAG DTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDSAMYYCAARTYGSVSSWTGYKYWGQG TQVTVSSQVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGFIDS FGVMA WFRQAPGKEREGVA AVYRRAG DTYYADSVKGRFT ISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDSAMYYCAA RTYGSVSSWTGYKY WGQG TQVTVSS
ФНО_7 (SEQ ID № 60):TNF_7 (SEQ ID No. 60):
DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGFIDSFGVMAWFRQTPGKEREGVAAVYRRAG DTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDSAMYYCAARTYGSVSSWTGYKYWGQG TQVTVSSDVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGFIDS FGVMA WFRQTPGKEREGVA AVYRRAG DTYYADSVKGRFT ISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDSAMYYCAA RTYGSVSSWTGYKY WGQG TQVTVSS
ФНО_13 (SEQ ID № 61):TNF_13 (SEQ ID No. 61):
DVQLVESGGGSVQVGGSLTLSCAVSGYTDSYGVMAWFRQAPGKEREGVASIYRNSGI TYYPDSVKGRFTISRDNAKNTVLLQMNSLKPEDSATYYCAVRSFGSVSTWAGYVYWGQGTQ VTVSSDVQLVESGGGSVQVGGSLTLSCAVSGYTDS YGVMA WFRQAPGKEREGVA SIYRNSGI TYYPDSVKGRFT ISRDNAKNTVLLQMNSLKPEDSATYYCAV RSFGSVSTWAGYVY WGQGTQ VTVSS
ФНО_60 (SEQ ID № 62):TNF_60 (SEQ ID No. 62):
DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGFIDSFGVMAWFRQAPGKEREGVAAVYRRAG DTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDSAMYYCAARTYGSVSSWTGYKYWGRG TQVTVSSDVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGFIDS FGVMA WFRQAPGKEREGVA AVYRRAG DTYYADSVKGRFT ISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDSAMYYCAA RTYGSVSSWTGYKY WGRG TQVTVSS
ФНО_73 (SEQ ID № 63): TNF_73 (SEQ ID No. 63):
DVQLVESGGGSVRAGGSLRLSCTASGDTSKSDCMAWFRQAPGKERERVGAIYTRNGY THYADSVNGRFTISQDNAKNALYLQMSGLKPEDTAMYYCAARFRIYGQCVEDDDIDYWGQG TLVTVSSDVQLVESGGGSVRAGGSLRLSCTASGDTSK SDCMA WFRQAPGKERERVG AIYTRNGY THYADSVNGRFT ISQDNAKNALYLQMSGLKPEDTAMYYCAA RFRIYGQCVEDDDIDY WGQG TLVTVSS
ФНО_69 (SEQ ID № 64):TNF_69 (SEQ ID No. 64):
EVQLVESGGGSVLAGGSLRLSCVASGFTSRYNYMAWFRQAPGKEREGVATIGTASGS ADYYGSVKDRFTISQDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAMYYCAARTYGTISLTPSDYRYWGQGT LVTVSSEVQLVESGGGSVLAGGSLRLSCVASGFTSR YNYMA WFRQAPGKEREGVA TIGTASGS ADYYGSVKDRFT ISQDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAMYYCAA RTYGTISLTPSDYRY WGQGT LVTVSS
ФНО_76 (SEQ ID № 65):TNF_76 (SEQ ID No. 65):
QVQVVEYGGGSVQAGETVRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGHEWELVSNITTEGIT SEASSSYADSVRGRFTIFDNAKNMVYLQMNSLKHEDTAVYYCAPDPYAYSTYREYCTWAQG TQGTLVTVSSQVQVVEYGGGSVQAGETVRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGHEWELVS NITTEGIT SEASSSYADSVRGRFT IFDNAKNMVYLQMNSLKHEDTAVYYCAP DPYAYSTYREYCT WAQG TQGTLVTVSS
ФНО_62 (SEQ ID № 66):TNF_62 (SEQ ID No. 66):
QVQLVESGGGPVQAGETLRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGHECELVSTITTEGITS EASSYYADSVRGRFTISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAPDPYAYSTYSDYCSWAQG TQGTLVTVSSQVQLVESGGGPVQAGETLRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGHECELVS TITTEGITS EASSYYADSVRGRFT ISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAP DPYAYSTYSDYCS WAQG TQGTLVTVSS
ФНО_43 (SEQ ID № 67):TNF_43 (SEQ ID No. 67):
QVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGHECELVSTITTEGITS EASSYYADSVRGRFTISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAPDPYAYSTYSDYCTWAQG TQGTLVTVSSQVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGHECELVS TITTEGITS EASSYYADSVRGRFT ISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAP DPYAYSTYSDYCT WAQG TQGTLVTVSS
ФНО_15 (SEQ ID № 68):TNF_15 (SEQ ID No. 68):
QVQPVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGHECELVSTITTEGITS EASSYYADSVRGRFTISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAPDPYAYSTYSDYCTWAQG AQGTLVTVSSQVQPVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGHECELVS TITTEGITS EASSYYADSVRGRFT ISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAP DPYAYSTYSDYCT WAQG AQGTLVTVSS
ФНО_11 (SEQ ID № 69):TNF_11 (SEQ ID No. 69):
QVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGHECELVSTITTEGITS EASSYYADSVRGRFTISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAPDPYAYSTYSDYCSWAQG TQGTQVTVSSQVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGHECELVS TITTEGITS EASSYYADSVRGRFT ISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAP DPYAYSTYSDYCS WAQG TQGTQVTVSS
ФНО_17 (SEQ ID № 70):TNF_17 (SEQ ID No. 70):
QVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGHECELVSTITTEGITS EASSYYADSVRGRFTISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAPDPYAYSTYSDYCTWAQG TQGTQVTVSSQVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGHECELVS TITTEGITS EASSYYADSVRGRFT ISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAP DPYAYSTYSDYCT WAQG TQGTQVTVSS
ФНО_63 (SEQ ID № 71):TNF_63 (SEQ ID No. 71):
QVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGHECELVSTITTEGITS EASSYYADSVRGRFTISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAPDPYAYSTYSDYCTWAQG TQGTLVTVSSQVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGHECELVS TITTEGITS EASSYYADSVRGRFT ISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAP DPYAYSTYSDYCT WAQG TQGTLVTVSS
ФНО_20 (SEQ ID № 72):TNF_20 (SEQ ID No. 72):
HVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGHECELVSTITTEGITS EASSYYADSVRGRFTISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAPDPYAYSTYSDYCTWAQG TQGTQVTVSSHVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGHECELVS TITTEGITS EASSYYADSVRGRFT ISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAP DPYAYSTYSDYCT WAQG TQGTQVTVSS
ФНО_58 (SEQ ID № 73):TNF_58 (SEQ ID No. 73):
EVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGHECELVSTITTEGITS EASSYYADSVRGRFTISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAPDPYAYSTYSDYCTWAQG TQGALVTVSSEVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGHECELVS TITTEGITS EASSYYADSVRGRFT ISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAP DPYAYSTYSDYCT WAQG TQGALVTVSS
ФНО_27 (SEQ ID № 74):TNF_27 (SEQ ID No. 74):
EVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGHECELVSTITTEGITS EASSYYADSVRGRFTISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAPDPYAYSTYSDYCTWAQG TQGTLVTVSSEVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGHECELVS TITTEGITS EASSYYADSVRGRFT ISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAP DPYAYSTYSDYCT WAQG TQGTLVTVSS
ФНО_28 (SEQ ID № 75):TNF_28 (SEQ ID No. 75):
EVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGHECELVSTITTEGITS EASSYYADSVRGRFTISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAPDPYAYSTYSDYCSWAQG TQGTQVTVSSEVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGHECELVS TITTEGITS EASSYYADSVRGRFT ISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAP DPYAYSTYSDYCS WAQG TQGTQVTVSS
ФНО_4 (SEQ ID № 76):TNF_4 (SEQ ID No. 76):
EVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGHECELVSTITTEGITS EASSYYADSVRGRFTISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAPDPYAYSTYSDYCTWAQG TQGTQVTVSSEVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGHECELVS TITTEGITS EASSYYADSVRGRFT ISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAP DPYAYSTYSDYCT WAQG TQGTQVTVSS
ФНО_14 (SEQ ID № 77):TNF_14 (SEQ ID No. 77):
DVQLVESRGGSVQAGETLRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGHECELVSTITTEGITS EASSYYADSVRGRFTISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAPDPYAYSTYSDYCTWAQG TQGTLVTVSSDVQLVESRGGSVQAGETLRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGHECELVS TITTEGITS EASSYYADSVRGRFT ISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAP DPYAYSTYSDYCT WAQG TQGTLVTVSS
ФНО_3 (SEQ ID № 78):TNF_3 (SEQ ID No. 78):
DVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGHVCELVSTITTEGITS EASSYYADSVRGRFTISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAPDPYAYSTYSDYCSWAQG TQGTQVTVSSDVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGHVCELVS TITTEGITS EASSYYADSVRGRFT ISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAP DPYAYSTYSDYCS WAQG TQGTQVTVSS
ФНО_1 (SEQ ID № 79):TNF_1 (SEQ ID No. 79):
DVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGLECELVSTITTEGITS EASSYADSVRGRFTISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAPDPYAYSTYSEYCTWAQGT QGTLVTVSSDVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGLECELVS TITTEGITS EASSYADSVRGRFT ISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAP DPYAYSTYSEYCT WAQGT QGTLVTVSS
ФНО_45 (SEQ ID № 80):TNF_45 (SEQ ID No. 80):
DVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGHECELVSTITTEGITS EASSYYADSVRGRFTISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAPDPYAYSTYSDYCTWAQG TQGTLVTVSSDVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGHECELVS TITTEGITS EASSYYADSVRGRFT ISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAP DPYAYSTYSDYCT WAQG TQGTLVTVSS
ФНО_22 (SEQ ID № 81):TNF_22 (SEQ ID No. 81):
DVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFAEADMGWYRQAPGHECELVSTITTEGITS VASSYYADSVRGRFTISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAPDPYAYSTYSDYCTWAQG TQGTQVTVSSDVQLVESGGGSVQAGETLRLSCTASGFTFA EADMG WYRQAPGHECELVS TITTEGITS VASSYYADSVRGRFT ISRDNAKNMVYLQMNSLKPEDTAVYYCAP DPYAYSTYSDYCT WAQG TQGTQVTVSS
[0102] Испытывали ингибирование роста нескольких ОдАт к ФНО-альфа in vitro, как описано ниже. Кроме того, настоящее изобретение включает одно или более мышиных моноклональных антител, которые направлены против одного или более доменов ОдАт к ФНО-альфа по данному изобретению. Мышиное моноклональное антитело можно создать с помощью методов, которые известны специалистам в данной области техники, как описано ниже. Мышиное моноклональное антитело можно использовать в диагностических анализах, например, антитело можно использовать в иммунологическом анализе, таком как ELISA, с целью измерения количества ОдАт к ФНО-альфа в сыворотке крови пациента.[0102] The growth inhibition of several anti-TNF-alpha sdAbs was tested in vitro as described below. In addition, the present invention includes one or more murine monoclonal antibodies that are directed against one or more domains of the TNF-alpha sdAb of the present invention. The mouse monoclonal antibody can be generated using methods known to those skilled in the art, as described below. The mouse monoclonal antibody can be used in diagnostic assays, for example, the antibody can be used in an immunoassay, such as an ELISA, to measure the amount of TNF-alpha sdAb in a patient's blood serum.
[0103] Белки RAF представляют собой семейство серин/треонин-специфических киназ, которые служат в качестве центрального промежуточного звена при передаче внеклеточных сигналов на митоген-активируемый протеинкиназный путь, который регулирует клеточный рост, дифференцировку и выживаемость. BRAF является представителем семейства RAF, который активируется представителями семейства Ras при индуцированной фактором роста стимуляции. Активный Ras может индуцировать гетеродимеризацию cRaf и BRAF, и это может объяснить наблюдаемый кооперативный эффект cRaf и BRaf в клетках, отвечающих на сигналы фактора роста. Активирующие мутации в гене BRAF присутствуют в большом проценте злокачественных меланом человека и пропорционально в раковых заболеваниях толстой кишки. Подавляющее большинство этих мутаций приводит к замене валина на глутаминовую кислоту в остатке 599 в сегменте активации BRAF.[0103] RAF proteins are a family of serine/threonine-specific kinases that serve as a central intermediate in transducing extracellular signals to the mitogen-activated protein kinase pathway, which regulates cell growth, differentiation and survival. BRAF is a member of the RAF family that is activated by members of the Ras family upon growth factor-induced stimulation. Active Ras can induce heterodimerization of cRaf and BRAF, and this may explain the observed cooperative effect of cRaf and BRaf in cells responding to growth factor signals. Activating mutations in the BRAF gene are present in a large percentage of human malignant melanomas and proportionately in colon cancers. The vast majority of these mutations result in a valine to glutamic acid substitution at residue 599 in the BRAF activation segment.
[0104] ОдАт к BRAF были разработаны для направленного воздействия на BRAF дикого типа и мутантный BRAF, чтобы блокировать его роль в злокачественных клетках, таких как, например, клетки, связанные с раком толстой кишки и другими злокачественными опухолями.[0104] BRAF sdAbs have been designed to target wild-type and mutant BRAF to block its role in malignant cells, such as, for example, cells associated with colon cancer and other malignancies.
[0105] С помощью методов, которые хорошо известны в данной области, рекомбинантный белок BRAF человека использовали для создания ОдАт, которые направлены против или могут связываться с эпитопом BRAF.[0105] Using methods that are well known in the art, recombinant human BRAF protein has been used to create OdAbs that are directed against or can bind to a BRAF epitope.
[0106] Кроме того, настоящее изобретение включает одно или более мышиных моноклональных антител, которые направлены против одного или более доменов ОдАт к BRAF по данному изобретению. Мышиное моноклональное антитело можно создать с помощью методов, которые известны специалистам в данной области техники. Мышиное моноклональное антитело можно использовать в диагностических анализах, например, антитело можно использовать в иммунологическом анализе, таком как ELISA, с целью измерения количества ОдАт к BRAF в сыворотке крови пациента.[0106] In addition, the present invention includes one or more murine monoclonal antibodies that are directed against one or more domains of the BRAF sdAb of the present invention. The mouse monoclonal antibody can be generated using methods known to those skilled in the art. The mouse monoclonal antibody can be used in diagnostic assays, for example, the antibody can be used in an immunoassay, such as an ELISA, to measure the amount of BRAF OdAb in a patient's blood serum.
ПРИМЕРЫEXAMPLES
ПРИМЕР 1: VHH13-ОДАТ (SEQ ID № 3) К STAT3 СВЯЗЫВАЕТ STAT3EXAMPLE 1: VHH13-ODAT (SEQ ID NO. 3) BINDS STAT3 TO STAT3
[0107] В этом примере аффинность двух мишеней VHH к STAT3 измеряли с помощью безмаркерного анализа связывания на основе Octet. В данном анализе в качестве зондов-антигенов использовали VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3, к KRAS (отрицательный контроль) и GST-STAT3 (16 кДа одновалентный антиген, Creative BioMart № STAT3-1476H). Белок GST-STAT3 в концентрации 20 мкг/мл иммобилизовали в ФСБ с использованием аминопропилсилановых (APS) биосенсоров Dip and Read, специально предназначенных для гидрофобного белка. Затем зонды погружали в лунки с белком GST-STAT3, VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 или к KRAS в указанной концентрации. Измеряли скорость ассоциации (скорость образования) антигена. Сенсоры гасили 1% БСА в воде. Зонды погружали в буфер для анализа (ФСБ) и измеряли скорость диссоциации (скорость распада).[0107] In this example, the affinity of two VHH targets for STAT3 was measured using a marker-free Octet-based binding assay. In this assay, VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3, to KRAS (negative control) and GST-STAT3 (16 kDa monovalent antigen, Creative BioMart No. STAT3-1476H) were used as antigen probes. GST-STAT3 protein at a concentration of 20 μg/mL was immobilized in PBS using aminopropylsilane (APS) Dip and Read biosensors specifically designed for the hydrophobic protein. Then the probes were immersed in wells containing GST-STAT3, VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 or to KRAS at the indicated concentration. The rate of association (rate of formation) of the antigen was measured. The sensors were quenched by 1% BSA in water. The probes were immersed in assay buffer (PBS) and the dissociation rate (decay rate) was measured.
[0108] Аффинность, представленную константой равновесия для диссоциации антигена и антигенсвязывающего белка (KD), определяли исходя из полученной константы аффинности (KA), и KD с помощью метода глобальной аппроксимации 1:1 с использованием программного обеспечения Fortebio, как показано ниже в Таблице 1. Аффинность определяли посредством усреднения значений KD для кривых со значениями R2 > 0,95. Результат для 250 нМ VHH13 к STAT3 был опущен, так как он представляет собой резко отклоняющееся значение. Было установлено, что аффинность VHH13-ОдАт (SEQ ID № 3) к STAT3 составляла 1,16×10-7. Аффинность VHH к KRAS не была определена.[0108] The affinity represented by the equilibrium constant for the dissociation of antigen and antigen binding protein (KD) was determined from the obtained affinity constant (KA), and KD using a 1:1 global approximation method using Fortebio software, as shown below in Table 1 Affinity was determined by averaging KD values for curves with R2 values > 0.95. The result for 250 nM VHH13 to STAT3 has been omitted because it represents an outlier value. It was found that the affinity of VHH13-OdAb (SEQ ID no. 3) for STAT3 was 1.16×10 -7 . The affinity of VHH for KRAS has not been determined.
ПРИМЕР 2: ИССЛЕДОВАНИЯ ИММУНОПРЕЦИПИТАЦИИEXAMPLE 2: IMMUNOPRECIPITATION STUDIES
[0109] Анализировали специфичность ОдАт к STAT3 в клетках рака молочной железы человека. В этом примере клетки рака молочной железы человека MDA-MB-231 выращивали до достижения 50%-70% конфлюэнтности. Затем клетки разрушали в свежеприготовленном охлажденном на льду буфере для лизиса (20 мМ ГЭПЭС, рН 7,9, 400 мМ NaCl, 0,1% NP-40, 10% глицерина, 1 мМ ванадата натрия, 1 мМ фторида натрия, 1 мМ дитиотреитола, 1 мМ фенилметилсульфонилфторида, 10 мкг/мл апротинина, 10 мкг/мл лейпептина) в течение 45 минут на льду. Затем лизаты центрифугировали, собирали супернатант и определяли концентрацию белка с помощью модифицированного метода Лоури (Bio Rad, Геркулес, штат Калифорния). Общий белок (1 мг) инкубировали с 1,5 мг Dynabeads (Invitrogen) с ОдАт к STAT3, положительным контролем (STAT3, кат. № SC-482, Santa Cruz Biotechnology, Даллас, штат Техас) или отрицательным контролем (STAT-1, кат. № 9172, Cell Signaling, Дэнверс, штат Массачусетс) в течение 1 ч при 4°С. Затем гранулы промывали. После последней промывки добавляли 60 мкл буфера для лизиса и подвергали полученный супернатант Вестерн-блоттингу. Вкратце, образцы разделяли на 10% полиакриламидном геле и переносили на нитроцеллюлозную мембрану. Мембраны блокировали, а затем инкубировали с соответствующими первичными и вторичными антителами. Антителом к STAT3, использованным в качестве положительного контроля, было антитело от Cell Signaling (кат. № 4904, Дэнверс, штат Массачусетс). Реакцию хемилюминесценции проводили с использованием системы ECL от Santa Cruz Biotechnology (Даллас, штат Техас).[0109] The specificity of sdAb to STAT3 in human breast cancer cells was analyzed. In this example, MDA-MB-231 human breast cancer cells were grown to 50%-70% confluency. Cells were then disrupted in freshly prepared ice-cold lysis buffer (20 mM HEPES, pH 7.9, 400 mM NaCl, 0.1% NP-40, 10% glycerol, 1 mM sodium vanadate, 1 mM sodium fluoride, 1 mM dithiothreitol , 1 mM phenylmethylsulfonyl fluoride, 10 μg/ml aprotinin, 10 μg/ml leupeptin) for 45 minutes on ice. The lysates were then centrifuged, the supernatant was collected, and the protein concentration was determined using the modified Lowry method (Bio Rad, Hercules, CA). Total protein (1 mg) was incubated with 1.5 mg Dynabeads (Invitrogen) with STAT3 sdAb, positive control (STAT3, cat. no. SC-482, Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX) or negative control (STAT-1, Cat. No. 9172, Cell Signaling, Danvers, Massachusetts) for 1 hour at 4°C. The granules were then washed. After the last wash, 60 μl of lysis buffer was added and the resulting supernatant was subjected to Western blotting. Briefly, samples were separated on a 10% polyacrylamide gel and transferred to a nitrocellulose membrane. Membranes were blocked and then incubated with appropriate primary and secondary antibodies. The anti-STAT3 antibody used as a positive control was an antibody from Cell Signaling (cat. no. 4904, Danvers, MA). The chemiluminescence reaction was performed using an ECL system from Santa Cruz Biotechnology (Dallas, TX).
[0110] Как проиллюстрировано на Фиг. 3, эндогенный STAT3, иммунопреципитированный со всеми ОдАт, испытывали в различных количествах. М представляет собой маркерную дорожку, содержащую маркер, дорожка 1 содержала VHH13 (SEQ ID №: 3) к STAT3, полученное и выделенное из клеток млекопитающих, дорожка 2 содержала VHH14 (SEQ ID №: 4) к STAT3, полученное и выделенное из клеток млекопитающих, дорожка 3 содержала VHH13 (SEQ ID №: 3) к STAT3, полученное и выделенное из бактериальных клеток, дорожка 4 содержала VHH14 (SEQ ID №: 4) к STAT3, полученное и выделенное из клеток млекопитающих, дорожка 5 представляла собой положительное к STAT3 антитело, дорожка 6, использующая STAT-1 в качестве отрицательного контроля, не показала полосу.[0110] As illustrated in FIG. 3, endogenous STAT3 immunoprecipitated with all sdAbs was tested in different amounts. M represents a marker lane containing a marker, lane 1 contained VHH13 (SEQ ID No: 3) to STAT3, obtained and isolated from mammalian cells, lane 2 contained VHH14 (SEQ ID No: 4) to STAT3, obtained and isolated from mammalian cells , lane 3 contained VHH13 (SEQ ID No: 3) to STAT3, obtained and isolated from bacterial cells, lane 4 contained VHH14 (SEQ ID No: 4) to STAT3, obtained and isolated from mammalian cells, lane 5 was positive to STAT3 antibody, lane 6, using STAT-1 as a negative control, showed no band.
ПРИМЕР 3: ПОЛУЧЕННОЕ В БАКТЕРИИ VHH13 К STAT3 СВЯЗЫВАЕТСЯ С ВЫСОКОЙ АФФИННОСТЬЮ С КЛЕТОЧНЫМИ ЛИНИЯМИ, СОДЕРЖАЩИМИ КОНСТИТУТИВНО АКТИВИРОВАННЫЙ STAT3EXAMPLE 3: BACTERIAL VHH13 STAT3 BINDS WITH HIGH AFFINITY TO CELL LINES CONTAINING CONSTITUTIVELY ACTIVATE STAT3
[0111] Анализировали специфичность полученного в бактерии VHH13 (SEQ ID №: 3) к STAT3 с использованием конститутивно активированного STAT3 в клеточных линиях человека (PANC-1 и DU145) и мыши (4T1). Также обрабатывали коммерчески доступные клетки HeLa гамма-интерфероном (INFГ), чтобы индуцировать фосфорилированный STAT3. Линию нулевых клеток PC-3 STAT3 использовали в качестве отрицательного контроля.[0111] The specificity of bacterially derived VHH13 (SEQ ID No: 3) for STAT3 was analyzed using constitutively activated STAT3 in human (PANC-1 and DU145) and mouse (4T1) cell lines. Commercially available HeLa cells were also treated with interferon gamma (INFG) to induce phosphorylated STAT3. The PC-3 STAT3 null cell line was used as a negative control.
[0112] Клетки выращивали до достижения 50%-70% конфлюэнтности, а затем разрушали в свежеприготовленном охлажденном на льду буфере для лизиса, как описано выше, в течение 45 минут на льду. Затем лизаты центрифугировали, собирали супернатант и определяли концентрацию белка, как описано выше. Общий белок (1 мг) инкубировали с 1,5 мг Dynabeads (Invitrogen) с полученным в бактерии VHH13 (SEQ ID №: 3) к STAT3 или отрицательным контролем (KRAS, Creative Biolabs, Ширли, штат Нью-Йорк) в течение 1 часа при 4°C. Затем гранулы промывали. После последней промывки добавляли 60 мкл буфера для лизиса и подвергали полученный супернатант Вестерн-блоттингу, как описано в Примере 2.[0112] Cells were grown until 50%-70% confluent and then disrupted in freshly prepared ice-cold lysis buffer as described above for 45 minutes on ice. The lysates were then centrifuged, the supernatant was collected, and the protein concentration was determined as described above. Total protein (1 mg) was incubated with 1.5 mg Dynabeads (Invitrogen) with bacteria-derived VHH13 (SEQ ID no: 3) to STAT3 or negative control (KRAS, Creative Biolabs, Shirley, NY) for 1 hour at 4°C. The granules were then washed. After the last wash, 60 μl of lysis buffer was added and the resulting supernatant was subjected to Western blotting as described in Example 2.
[0113] Как проиллюстрировано на Фиг. 4, эндогенный STAT3 иммунопреципитировали полученным в бактерии VHH13 (SEQ ID №: 3) к STAT3 в конститутивно активированных линиях клеток STAT3: PANC-1 (дорожка 1), DU145 (дорожка 2) и 4T1 (дорожка 4). Кроме того, полученное в бактерии VHH13 (SEQ ID №: 3) к STAT3 связывалось с фосфо-STAT3 в лизате HeLa (дорожка 3). Не было отмечено полос ни для KRAS PANC-1, дорожка 3, ни для PC-3 (отрицательный контроль), дорожка 6.[0113] As illustrated in FIG. 4, endogenous STAT3 was immunoprecipitated from bacteria VHH13 (SEQ ID No: 3) to STAT3 in constitutively activated STAT3 cell lines: PANC-1 (lane 1), DU145 (lane 2) and 4T1 (lane 4). In addition, anti-STAT3 derived from the bacterium VHH13 (SEQ ID No: 3) bound to phospho-STAT3 in HeLa lysate (lane 3). No bands were observed for either KRAS PANC-1, lane 3, or PC-3 (negative control), lane 6.
ПРИМЕР 4: ИССЛЕДОВАНИЯ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ ОДАТ К STAT3 В РАКОВЫХ КЛЕТКАХ ЛИНИИ MDA-MB-231EXAMPLE 4: STUDIES OF ODATE CYTOTOXICITY TO STAT3 IN MDA-MB-231 CANCER CELLS
[0114] В этом примере антипролиферативное действие ОдАт к STAT3 анализировали с использованием клеточной линии рака молочной железы MDA-MB-231. Для опытов, клетки MDA-MB-231 выращивали до тех пор, пока они не достигали конфлюэнтности, составляющей 90%. В то же время, клетки промывали, трипсинизировали и подсчитывали с помощью Coulter Counter (Beckman, Брея, штат Калифорния). Исследования пролиферации проводили с помощью 3-[4,5-диметилтиазолил]-2,5-дифенилтетразолийбромидного (MTT) метода. Для этого клетки высевали в 96-луночный планшет при плотности, составляющей 5×103 на лунку, как указано производителем (Roche Diagnostics Corporation, Индианаполис, штат Индиана). Клеткам давали возможность прилипнуть в течение 24 часов, а затем добавляли ОдАт в соответствующих концентрациях (т.е. 0, 0,5, 1,0, 10,0 или 100 мкг/мл). Клетки подсчитывали на 3-й день. У клеток, обрабатываемых в течение 5 дней, на 3-й день обновляли питательные среды, содержащие ОдАт. По истечении срока в каждую лунку добавляли 10 мкл реагента MTT (0,5 мг/мл), как указано производителем. После 4-часового инкубационного периода добавляли 100 мкл раствора для солюбилизации, и на ночь помещали планшет в инкубатор. Все планшеты считывали при длине волны, составляющей 570 нм, с использованием планшет-ридера Biotek (Винуски, штат Вермонт).[0114] In this example, the antiproliferative effect of the STAT3 sdAb was analyzed using the breast cancer cell line MDA-MB-231. For experiments, MDA-MB-231 cells were grown until they reached 90% confluence. At the same time, cells were washed, trypsinized, and counted using a Coulter Counter (Beckman, Brea, CA). Proliferation studies were performed using the 3-[4,5-dimethylthiazolyl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) method. To do this, cells were seeded in a 96-well plate at a density of 5 x 10 3 per well as specified by the manufacturer (Roche Diagnostics Corporation, Indianapolis, Indiana). Cells were allowed to adhere for 24 hours and then OdAb was added at appropriate concentrations (i.e., 0, 0.5, 1.0, 10.0, or 100 μg/ml). Cells were counted on day 3. For cells treated for 5 days, the culture media containing OdAb was renewed on the 3rd day. At the end of the period, 10 μL of MTT reagent (0.5 mg/mL) was added to each well as specified by the manufacturer. After a 4-hour incubation period, 100 μL of solubilization solution was added and the plate was placed in the incubator overnight. All plates were read at 570 nm using a Biotek plate reader (Winooski, Vermont).
[0115] Все данные анализировали с использованием GraphPad InStat 3 (GraphPad Software, Inc., Ла-Хойя, штат Калифорния). Группы лечения сравнивали с контрольной группой, получающей носитель, с помощью однофакторного дисперсионного анализа. Если наблюдалась значительная разница (p < 0,05), проводили тест множественных сравнений Тьюки-Крамера.[0115] All data were analyzed using GraphPad InStat 3 (GraphPad Software, Inc., La Jolla, California). Treatment groups were compared with vehicle controls using one-way analysis of variance. If a significant difference was observed (p < 0.05), a Tukey-Kramer multiple comparison test was performed.
[0116] Основываясь на опыте МТТ, было установлено, что полученное в бактерии VHH13-ОдАт к STAT3 (SEQ ID № 3) является эффективным в ингибировании роста клеток на 3-й и 5-й день после обработки, как показано в Таблицах 2-5 ниже.[0116] Based on the MTT experience, it was found that the bacterially produced VHH13-ODAb to STAT3 (SEQ ID No. 3) was effective in inhibiting cell growth on days 3 and 5 after treatment, as shown in Tables 2- 5 below.
ПРИМЕР 5: ИССЛЕДОВАНИЯ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ ОДАТ К STAT3 В КЛЕТОЧНЫХ ЛИНИЯХ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ (MDA-MB-231) И ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ (PANC-1) ЧЕЛОВЕКАEXAMPLE 5: ODATE CYTOTOXICITY STUDY TO STAT3 IN HUMAN BREAST (MDA-MB-231) AND PANCREAS (PANC-1) CANCER CELL LINES
[0117] В этом примере антипролиферативное действие VHH13-ОдАт (SEQ ID № 3) и VHH14-ОдАт (SEQ ID № 4) к STAT3 анализировали с использованием клеточной линии рака молочной железы человека MDA-MB-231 и клеточной линии рака поджелудочной железы человека PANC-1. Для опытов, клетки MDA-MB-231 и PANC-1 выращивали до тех пор, пока они не достигали 90% конфлюэнтности. В то же время, клетки промывали, трипсинизировали и подсчитывали с помощью Coulter Counter (Beckman, Брея, штат Калифорния). Исследования пролиферации проводили с помощью метода MTT, описанного выше. У клеток, обрабатываемых в течение 5 дней, на 3-й день обновляли питательные среды, содержащие ОдАт к STAT3.[0117] In this example, the antiproliferative effects of VHH13-OdAb (SEQ ID No. 3) and VHH14-OdAb (SEQ ID No. 4) to STAT3 were analyzed using the human breast cancer cell line MDA-MB-231 and the human pancreatic cancer cell line PANC-1. For experiments, MDA-MB-231 and PANC-1 cells were grown until they reached 90% confluence. At the same time, cells were washed, trypsinized, and counted using a Coulter Counter (Beckman, Brea, CA). Proliferation studies were performed using the MTT method described above. In cells treated for 5 days, on the 3rd day, the culture media containing sdAb to STAT3 was renewed.
[0118] Все данные анализировали с использованием GraphPad InStat 3. Группы лечения сравнивали с контрольной группой, получающей носитель, с помощью однофакторного дисперсионного анализа. Если наблюдалась значительная разница (p < 0,05), проводили тест множественных сравнений Тьюки-Крамера.[0118] All data were analyzed using GraphPad InStat 3. Treatment groups were compared with a vehicle control group using one-way analysis of variance. If a significant difference was observed (p < 0.05), a Tukey-Kramer multiple comparison test was performed.
[0119] Основываясь на опыте МТТ, было установлено, что и VHH13 (SEQ ID № 3), и VHH14 (SEQ ID № 4) ингибируют рост клеток как в раковых клетках MDA-MB-231, так и PANC-1, как показано в Таблицах 6-13 ниже.[0119] Based on the MTT assay, both VHH13 (SEQ ID No. 3) and VHH14 (SEQ ID No. 4) were found to inhibit cell growth in both MDA-MB-231 and PANC-1 cancer cells, as shown in Tables 6-13 below.
ПРИМЕР 6: АНТИПРОЛИФЕРАТИВНОЕ ДЕЙСТВИЕ ОДАТ К STAT3 В КЛЕТОЧНЫХ ЛИНИЯХ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ЧЕЛОВЕКА И РАКА ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ЧЕЛОВЕКАEXAMPLE 6: ANTIPROLIFERATIVE EFFECT OF ODATE TO STAT3 IN HUMAN BREAST CANCER AND HUMAN PROSTATE CANCER CELL LINES
[0120] Антипролиферативное действие VHH13-ОдАт (SEQ ID № 3) к STAT3 анализировали в клеточной линии рака молочной железы человека MDA-MB-231 и клеточных линиях рака предстательной железы человека DU145. Для опытов, раковые клетки выращивали до тех пор, пока они не достигали 90% конфлюэнтности. В то же время, клетки промывали, трипсинизировали и подсчитывали с помощью Coulter Counter (Beckman, Брея, штат Калифорния). Исследования пролиферации осуществляли с помощью метода MTT, как описано выше.[0120] The antiproliferative effect of VHH13-ODAb (SEQ ID No. 3) to STAT3 was analyzed in the human breast cancer cell line MDA-MB-231 and human prostate cancer cell lines DU145. For experiments, cancer cells were grown until they reached 90% confluency. At the same time, cells were washed, trypsinized, and counted using a Coulter Counter (Beckman, Brea, CA). Proliferation studies were performed using the MTT method as described above.
[0121] Антипролиферативные свойства полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID № 3) к STAT3 в клетках MDA-MB-231 сравнивали с его действиями в клетках DU145. Как показано в Таблице 14, клетки MDA-MB-231, обработанные ОдАт к STAT3 (SEQ ID №: 3), показали среднее ингибирование роста, составляющее 29,6 и 91,2 при 50,0 и 100 мкг/мл, соответственно. В клетках DU145 наблюдалось аналогичное ингибирование роста (31,2 и 92,1% в случае 50,0 и 100 мкг/мл, соответственно), как приведено в Таблице 15.[0121] The antiproliferative properties of the bacterially derived VHH13-OdAb (SEQ ID No. 3) to STAT3 in MDA-MB-231 cells were compared with its actions in DU145 cells. As shown in Table 14, MDA-MB-231 cells treated with STAT3 OdAb (SEQ ID No: 3) showed average growth inhibition of 29.6 and 91.2 at 50.0 and 100 μg/ml, respectively. In DU145 cells, similar growth inhibition was observed (31.2 and 92.1% at 50.0 and 100 μg/ml, respectively) as shown in Table 15.
ПРИМЕР 7: АНТИПРОЛИФЕРАТИВНОЕ ДЕЙСТВИЕ VHH13-ОДАТ (SEQ ID № 3) К STAT3 НА КЛЕТОЧНЫЕ ЛИНИИ РАКА ЧЕЛОВЕКАEXAMPLE 7: ANTIPROLIFERATIVE EFFECT OF VHH13-ODATE (SEQ ID NO. 3) TO STAT3 ON HUMAN CANCER CELL LINES
[0122] Для испытания антипролиферативного действия VHH13-ОдАт (SEQ ID № 3) к STAT3 использовали клеточные линии рака человека: MDA-MB-231, MDA-MB-468, MCF-7, BT474 и DU145, как показано в Таблице 16.[0122] Human cancer cell lines MDA-MB-231, MDA-MB-468, MCF-7, BT474 and DU145 were used to test the anti-proliferative effects of VHH13-ODAb (SEQ ID No. 3) against STAT3, as shown in Table 16.
[0123] Все клеточные линии рака человека были получены из Американской коллекции типовых культур (Манассас, штат Вирджиния). Клеточные линии поддерживали и культивировали в среде RPMI 1640 (MDA-MB-231, MDA-MB-468, MCF-7, BT474) или MEM-E (DU145), содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки, 2 мМ L-глутамина и 1% раствор антибиотика и противогрибкового средства (10 ед/мл пенициллина, 10 мкг/мл стрептомицина и 25 мкг/мл амфотерицина В). Клетки выдерживали при 37°С в увлажненной атмосфере, содержащей 5% CO2. Расходуемые клеточные культуры были получены от Life Technologies, Inc., (Гранд Айленд, штат Нью-Йорк). Реагент МТТ был приобретен у Sigma Aldrich (Сент-Луис, штат Миссури).[0123] All human cancer cell lines were obtained from the American Type Culture Collection (Manassas, VA). Cell lines were maintained and cultured in RPMI 1640 (MDA-MB-231, MDA-MB-468, MCF-7, BT474) or MEM-E (DU145) medium containing 10% fetal bovine serum, 2 mM L-glutamine and 1 % solution of antibiotic and antifungal agent (10 units/ml penicillin, 10 µg/ml streptomycin and 25 µg/ml amphotericin B). Cells were maintained at 37°C in a humidified atmosphere containing 5% CO2. Consumable cell cultures were obtained from Life Technologies, Inc., (Grand Island, NY). MTT reagent was purchased from Sigma Aldrich (St. Louis, MO).
[0124] Для опытов, раковые клетки выращивали до тех пор, пока они не достигали 90% конфлюэнтности. В то же время, клетки промывали, трипсинизировали и подсчитывали с помощью Coulter Counter (Beckman, Брея, штат Калифорния). Исследования пролиферации проводили с помощью метода MTT, как описано выше.[0124] For experiments, cancer cells were grown until they reached 90% confluence. At the same time, cells were washed, trypsinized, and counted using a Coulter Counter (Beckman, Brea, CA). Proliferation studies were performed using the MTT method as described above.
[0125] Антипролиферативные свойства полученных в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID № 3) к STAT3 оценивали по пяти клеткам рака молочной железы, представляющим различные классификации (Таблица 34). Как показано в Таблице 17, все клеточные линии демонстрировали значительное ингибирование роста через 72 часа после обработки. Для всех клеточных линий наибольшее ингибирование роста отмечалось при дозе, составляющей 100 и 200 мкг/мл. Полумаксимальная ингибирующая концентрация (IC50) для роста в испытуемых клеточных линиях составляла: 10,1 ± 2,4, 12,36 ± 1,5, 14,8 ± 1,6 и 25,2 ± 14,7 в случае клеточных линий MDA-MB-231, MDA-MB-468, MCF-7 и BT474, соответственно. Эти данные свидетельствуют о том, что клеточным линиям трижды негативного рака молочной железы требуется самая низкая концентрация VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) для достижения IC50 по сравнению с эстроген/прогестерон положительными клеточными линиями (т.е., MCF-7) или клеточными линиями с амплификацией гена HER2 (т.е., BT474).[0125] The antiproliferative properties of bacterially derived VHH13-OdAb (SEQ ID No. 3) to STAT3 were assessed in five breast cancer cells representing different classifications (Table 34). As shown in Table 17, all cell lines showed significant growth inhibition 72 hours after treatment. For all cell lines, the greatest growth inhibition was observed at doses of 100 and 200 μg/ml. The half-maximal inhibitory concentration (IC50) for growth in the cell lines tested were: 10.1 ± 2.4, 12.36 ± 1.5, 14.8 ± 1.6 and 25.2 ± 14.7 in the case of MDA cell lines -MB-231, MDA-MB-468, MCF-7 and BT474, respectively. These data suggest that triple negative breast cancer cell lines require the lowest concentration of VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to achieve IC50 compared to estrogen/progesterone positive cell lines ( i.e. , MCF-7) or cell lines with HER2 gene amplification ( ie , BT474).
[0126] Также оценивали действие полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 в клеточной линии рака предстательной железы человека DU145, как показано в Таблице 18. Полученное в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 демонстрировало дозозависимое ингибирование роста во всех испытуемых раковых клетках.[0126] The effect of bacterially derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) against STAT3 was also evaluated in the human prostate cancer cell line DU145, as shown in Table 18. Bacterially derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) against STAT3 exhibited dose-dependent growth inhibition in all cancer cells tested.
ПРИМЕР 8: МАКСИМАЛЬНО ПЕРЕНОСИМАЯ ДОЗА ПОЛУЧЕННОГО В БАКТЕРИИ VHH13 (SEQ ID №: 3) К STAT3 У МЫШЕЙ BALB/CEXAMPLE 8: MAXIMUM TOLERATED DOSE OF BACTERIALLY PRODUCED VHH13 (SEQ ID NO: 3) TO STAT3 IN BALB/C MICE
[0127] В этом Примере анализировали переносимость полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID № 3) к STAT3 у подопытных животных с использованием клеточной линии рака молочной железы человека MDA-MB-231. Для опыта, в общей сложности 9 "голых" самок мышей BALB/C (6-7 недель) разделяли на три группы в зависимости от массы тела. (Таблица 19) Мыши (n = 3) получали либо носитель (ФСБ), либо полученное в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 в дозе, составляющей 250 или 500 мкг/кг массы тела/день, в течение пяти дней. В ходе исследования, смертность/заболеваемость происходила два раза в день. Массу тела регистрировали на 1-й, 4-й и 6-й дни исследования, а также в день прекращения исследования (13-й день). Токсичность оценивали по измерениям массы тела и поведению мыши по сравнению с контрольными мышами, получающими носитель. После завершения фазы лечения за животными наблюдали в течение дополнительной недели, чтобы отмечать любые отклонения в массе тела и/или общего состояния здоровья после обработки.[0127] In this Example, the tolerance of bacterially derived VHH13-OdAb (SEQ ID No. 3) to STAT3 was analyzed in experimental animals using the human breast cancer cell line MDA-MB-231. For the experiment, a total of 9 female BALB/C nude mice (6-7 weeks old) were divided into three groups based on body weight. (Table 19) Mice (n = 3) received either vehicle (PBS) or bacterially derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 at a dose of 250 or 500 μg/kg body weight/day for five days. During the study, mortality/morbidity occurred twice daily. Body weight was recorded on days 1, 4 and 6 of the study, as well as on the day the study stopped (day 13). Toxicity was assessed by body weight measurements and mouse behavior compared to control vehicle-treated mice. After completion of the treatment phase, animals were observed for an additional week to note any abnormalities in body weight and/or general health after treatment.
[0128] Как показано в Таблице 20, масса тела в группах существенно не отличалась, и полученное в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 не приводило к какими-либо смертельным случаям, обусловленным приемом препарата, при любом уровне дозирования. Кроме того, не наблюдалось никаких изменений в поведении у животных, получавших полученные в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3, по сравнению с контрольными мышами.[0128] As shown in Table 20, body weights were not significantly different between the groups, and the bacteria-derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 did not result in any drug-related deaths at any dosage level . In addition, no changes in behavior were observed in animals treated with the bacteria-derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 compared to control mice.
ПРИМЕР 9: АКТИВНОСТЬ ПОЛУЧЕННОГО В БАКТЕРИИ VHH13 (SEQ ID №: 3) К STAT3 В КСЕНОТРАНСПЛАНТАТЕ ОПУХОЛИ У "ГОЛЫХ" МЫШЕЙ BALB/C, А ТАКЖЕ В КЛЕТКАХ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ЧЕЛОВЕКА И РАКА ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ЧЕЛОВЕКАEXAMPLE 9: ACTIVITY OF BACTERIALLY-derived VHH13 (SEQ ID No: 3) TO STAT3 IN TUMOR XENOTRANSPLANTS IN BALB/C NAKED MICE AND IN HUMAN BREAST CANCER AND HUMAN PANCREAS CANCER CELLS
[0129] В этом примере оценивали активность полученного в бактерии VHH13- ОдАт (SEQ ID № 3) к STAT3 у мышей с использованием клеточной линии рака молочной железы человека MDA-MB-231. Вкратце, активность полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 оценивали с использованием: ксенотрансплантатной модели рака молочной железы человека MDA-MB-231 и ксенотрансплантатной модели рака поджелудочной железы человека PANC-1. Режимы дозирования были следующими: Группа 1 (n = 6; ФСБ, в/б), один раз в день в течение 14 дней [ОД x 14]; и Группа 2 (n-12; 500 мкг/кг м.т., в/б), один раз в день в течение 14 дней [ОД x 14]. За введением препарата следовал период наблюдения, составлявший 5 дней.[0129] In this example, the anti-STAT3 activity of the bacterially derived VHH13-ODAb (SEQ ID NO: 3) was assessed in mice using the human breast cancer cell line MDA-MB-231. Briefly, the anti-STAT3 activity of the bacterially derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) was assessed using: the MDA-MB-231 human breast cancer xenograft model and the PANC-1 human pancreatic cancer xenograft model. Dosing regimens were as follows: Group 1 (n = 6; PBS, i.p.), once daily for 14 days [OD x 14]; and Group 2 (n-12; 500 mcg/kg bw, i.p.), once daily for 14 days [OD x 14]. The drug administration was followed by an observation period of 5 days.
[0130] Клеточные линии рака молочной железы человека (MDA-MB-231 и PANC-1) были получены из Американской коллекции типовых культур (ATCC) (Манассас, штат Вирджиния). Клетки MDA-MB-231 выращивали в MEM (Life Technologies, Гранд Айленд, штат Нью-Йорк) с добавлением 10% FBS (Atlanta Biologicals, Флауэри Бранч, штат Джорджия) и пенициллин-стрептомицин-глутамина (Life Technologies, Гранд Айленд, штат Нью-Йорк). Клетки PANC-1 выращивали в среде RPMI 1640 (Life Technologies, Гранд Айленд, штат Нью-Йорк) с добавлением 10% FBS и пенициллин-стрептомицин- глутамина. Все клетки выращивали в инкубаторе в присутствии 5% CO2 при 37°С.[0130] Human breast cancer cell lines (MDA-MB-231 and PANC-1) were obtained from the American Type Culture Collection (ATCC) (Manassas, VA). MDA-MB-231 cells were grown in MEM (Life Technologies, Grand Island, NY) supplemented with 10% FBS (Atlanta Biologicals, Flowery Branch, GA) and penicillin-streptomycin-glutamine (Life Technologies, Grand Island, NY NY). PANC-1 cells were grown in RPMI 1640 medium (Life Technologies, Grand Island, NY) supplemented with 10% FBS and penicillin-streptomycin-glutamine. All cells were grown in an incubator in the presence of 5% CO2 at 37°C.
[0131] Самцы бестимусных мышей Nude-Foxnlnu в возрасте от 4 до 5 недель были приобретены у Harlan Laboratories (Индианаполис, штат Индиана). Животных карантинировали в течение одной недели и содержали по пять мышей в клетке, при 12- часовом светотемновом цикле и относительной влажности, составляющей 50%. Питьевую воду и корм предоставляли животным в неограниченном количестве. Всех животных содержали в стерильных условиях и проводили опыты при одобрении Комитета по биоэтике НИИ IIT. Для исследования ксенотрансплантата MDA-MB-231, клетки (4×106) в конечном объеме, составляющем 100 мкл среды MEM, вводили подкожно в правый бок мышей. Для исследования ксенотрансплантата PANC-1, клетки (5×106) в конечном объеме, составляющем 100 мкл среды RPMI, вводили подкожно в правый бок мышей. Измерения опухолей для обеих моделей начинали, как только опухоли становились пальпируемыми. Затем опухоли измеряли дважды в неделю. Животных рандомизировали по группам, когда опухоли достигали размера, находящегося в диапазоне 75-175 мм3, группы контроля (n = 6) и лечения (n = 12) рандомизировали с помощью алгоритма стратифицированной случайной выборки. Лечение (полученное в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3) или носитель (ФСБ) инициировали на следующий день после рандомизации. Лечение хорошо переносилось и не приводило к смертельным случаям, обусловленным приемом препарата. Существенная потеря веса не отмечалась.[0131] Male Nude-Foxnl nu nude mice, 4 to 5 weeks old, were purchased from Harlan Laboratories (Indianapolis, Indiana). Animals were quarantined for one week and housed five mice per cage under a 12-hour light-dark cycle and 50% relative humidity. Drinking water and food were provided to the animals in unlimited quantities. All animals were kept under sterile conditions and experiments were carried out with the approval of the Bioethics Committee of the IIT Research Institute. To study the MDA-MB-231 xenograft, cells (4 x 10 6 ) in a final volume of 100 μl MEM medium were injected subcutaneously into the right flank of mice. For the PANC-1 xenograft assay, cells (5 x 10 6 ) in a final volume of 100 μl RPMI medium were injected subcutaneously into the right flank of mice. Tumor measurements for both models began as soon as the tumors became palpable. Tumors were then measured twice weekly. Animals were randomized into groups when tumors reached a size ranging from 75-175 mm 3 , control (n = 6) and treatment (n = 12) groups were randomized using a stratified random sampling algorithm. Treatment (derived in bacteria VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3) or vehicle (PBS) was initiated the day after randomization. The treatment was well tolerated and did not lead to drug-related deaths. No significant weight loss was noted.
[0132] Для исследования ксенотрансплантата MDA-MB-231, рандомизационный средний (±SE) размер опухоли составлял: 103,01 ± 11,89 и 102, 61 ± 9,60 в случае групп контроля и лечения, соответственно. Средние массы тела (± SE) при рандомизации составляли: 32,08 ± 0,76 и 30,27 + 0,75 для Группы 1 и Группы 2, соответственно. В Таблице 21 представлены средние массы тела (± SE) для всего исследования.[0132] For the MDA-MB-231 xenograft study, the randomization mean (±SE) tumor size was: 103.01 ± 11.89 and 102.61 ± 9.60 for the control and treatment groups, respectively. Mean body weights (± SE) at randomization were: 32.08 ± 0.76 and 30.27 + 0.75 for Group 1 and Group 2, respectively. Table 21 presents mean body weights (± SE) for the entire study.
[0133] На 14-й день введения дозы средний размер опухоли (±SE) для группы контроля составлял 179,11 ± 19,39 по сравнению с 118,86 ± 15,94 для группы лечения. Средние массы тела (± SE) на момент прекращения составляли: 31,98 ± 0,71 и 30,55 ± 0,74 для Группы 1 и Группы 2, соответственно. Таблица 22 резюмирует объемы опухолей (± SE) для всего исследования. % среднего ингибирования роста опухоли в группе лечения составлял 33,64%. Время удвоения опухолей было следующим: Группа 1: 44,27 дней; и Группа 2: 61,06 дней. На Фиг. 5 проиллюстрировано ингибирование роста полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 в ксенотрансплантатной модели MDA- MB-231. Полученное в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 демонстрировало значительное ингибирование роста (p = 0,047). Таким образом, полученное в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 обладает химиотерапевтической активностью в модельной системе рака молочной железы человека MDA-MB-231.[0133] On day 14 of dosing, the mean tumor size (±SE) for the control group was 179.11 ± 19.39 compared to 118.86 ± 15.94 for the treatment group. Mean body weights (± SE) at the time of discontinuation were: 31.98 ± 0.71 and 30.55 ± 0.74 for Group 1 and Group 2, respectively. Table 22 summarizes tumor volumes (± SE) for the entire study. The % mean tumor growth inhibition in the treatment group was 33.64%. Tumor doubling times were as follows: Group 1: 44.27 days; and Group 2: 61.06 days. In FIG. Figure 5 illustrates growth inhibition of bacterially derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 in the MDA-MB-231 xenograft model. Bacteria-derived VHH13-OdAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 demonstrated significant growth inhibition (p = 0.047). Thus, VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) obtained in bacteria against STAT3 has chemotherapeutic activity in the human breast cancer model system MDA-MB-231.
[0134] Для исследования ксенотрансплантата PANC-1, рандомизационные средние (+SE) размеры опухоли составляли 107,01 ± 4,54 в группе контроля и 110,58 ± 6,18 в группе лечения. Средние массы тела (± SE) при рандомизации составляли: 29,0 ± 0,81 и[0134] For the PANC-1 xenograft study, randomization mean (+SE) tumor sizes were 107.01 ± 4.54 in the control group and 110.58 ± 6.18 in the treatment group. Mean body weights (± SE) at randomization were: 29.0 ± 0.81 and
28,5 ± 0,70 для Группы 1 и Группы 2, соответственно. Средние массы тела (± SE) на момент прекращения составляли: 31,2 ± 0,99 и 30,1 ± 0,75 для Группы 1 и Группы 2, соответственно. Таблица 23 резюмирует средние массы тела (± SE) для всего исследования. На 14-й день введения дозы средний размер опухоли (±SE) для группы контроля составлял 287,30 ± 33,94 по сравнению с 318,74 ± 29,76 для группы лечения. Таблица 24 резюмирует объемы опухолей (± SE) для всего исследования.28.5 ± 0.70 for Group 1 and Group 2, respectively. Mean body weights (± SE) at the time of discontinuation were: 31.2 ± 0.99 and 30.1 ± 0.75 for Group 1 and Group 2, respectively. Table 23 summarizes the mean body weights (± SE) for the entire study. On day 14 of dosing, the mean tumor size (±SE) for the control group was 287.30 ± 33.94 compared to 318.74 ± 29.76 for the treatment group. Table 24 summarizes tumor volumes (± SE) for the entire study.
[0135] Время удвоения опухолей было следующим: Группа 1: 22,44 дней; и Группа 2: 23,02 дней. Полученное в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 не показало значительное ингибирование роста в модельной системе рака поджелудочной железы человека PANC-1.[0135] Tumor doubling times were as follows: Group 1: 22.44 days; and Group 2: 23.02 days. Bacteria-derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 did not show significant growth inhibition in the PANC-1 human pancreatic cancer model system.
ПРИМЕР 10: ИССЛЕДОВАНИЕ КСЕНОТРАНСПЛАНТАТА MDA-MB-231EXAMPLE 10: STUDY OF MDA-MB-231 XENOTRANSPLANT
[0136] В этом Примере дополнительно оценивали эффективность полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 в ксенотрансплантатной модели рака молочной железы человека MDA-MB-231. Режимы дозирования были следующими: Группа 1 (n = 4; ФСБ; в/б) дважды в день в течение 14 дней [ДД x 14]; Группа 2 (n = 4; 1 мг/кг м.т.; в/б), дважды в день в течение 14 дней [ДД x 14]; Группа 3 (n = 4; 2 мг/кг м.т.; в/б) дважды в день в течение 14 дней [ДД x 14]; и Группа 4 (n = 4; 2 мг/кг м.т.; в/б) один раз в день в течение 14 дней [ОД x 14]. За введением следовал период наблюдения, составлявший 7 дней.[0136] This Example further assessed the effectiveness of the bacterially derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 in the human breast cancer xenograft model MDA-MB-231. Dosing regimens were as follows: Group 1 (n = 4; PBS; i.p.) twice daily for 14 days [DD x 14]; Group 2 (n = 4; 1 mg/kg bw; i.p.), twice daily for 14 days [DD x 14]; Group 3 (n = 4; 2 mg/kg bw; i.p.) twice daily for 14 days [DD x 14]; and Group 4 (n = 4; 2 mg/kg bw; i.p.) once daily for 14 days [OD x 14]. Administration was followed by an observation period of 7 days.
[0137] Клеточные линии рака молочной железы человека MDA-MB-231 и самки бестимусных мышей Nude-Foxnlnu были описаны выше.[0137] The MDA-MB-231 human breast cancer cell lines and Nude-Foxnl nu female nude mice were described above.
[0138] Клетки MDA-MB-231 вводили при плотности, составляющей 5×106, подкожно в правый бок мышей в конечном объеме, составляющем 100 мкл в среде MEM. Измерения опухолей начинали, как только опухоли становились пальпируемыми. Затем опухоли измеряли дважды в неделю. Животных рандомизируют по группам с помощью алгоритма стратифицированной случайной выборки, когда опухоли достигают размера, находящегося в диапазоне 55-150 мм3. Лечение (полученным в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3) или носитель (ФСБ) инициировали на следующий день после рандомизации.[0138] MDA-MB-231 cells were injected at a density of 5×10 6 subcutaneously into the right flank of mice in a final volume of 100 μl in MEM medium. Tumor measurements began as soon as the tumors became palpable. Tumors were then measured twice weekly. Animals are randomized into groups using a stratified random sampling algorithm when tumors reach a size in the range of 55-150 mm 3 . Treatment (bacteria-derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3) or vehicle (PBS) was initiated the day after randomization.
[0139] Рандомизационный средний (± SE) размер опухоли составлял: 92,08 ± 13,24, 82,38 ± 5,17, 77,47 ± 7,17 и 104,71 ± 14,64 для Групп 1, 2, 3 и 4, соответственно. Как показано в Таблице 25, средние массы тела (± SE) при рандомизации составляли: 23,65 ± 0,72, 23,45 ± 0,66, 23,10 ± 0,20 и 22,45 ± 1,25 для Групп 1, 2, 3 и 4, соответственно.[0139] Randomization mean (± SE) tumor size was: 92.08 ± 13.24, 82.38 ± 5.17, 77.47 ± 7.17, and 104.71 ± 14.64 for Groups 1, 2, 3 and 4, respectively. As shown in Table 25, mean body weights (± SE) at randomization were: 23.65 ± 0.72, 23.45 ± 0.66, 23.10 ± 0.20, and 22.45 ± 1.25 for Groups 1, 2, 3 and 4, respectively.
[0140] Как показано в Таблице 26, на 14-й день введения дозы, средний размер опухоли (±SE) для контрольной группы составлял 221,51 ± 57,32 по сравнению с 67,12 ± 10,66, 58,27 ± 22,54 и 131,44 ± 22,86 для 2, 3 и 4 группы лечения, соответственно. На момент прекращения (42-й день) средний размер опухоли (± S.E.) составлял: 255,42 ± 65,46, 55,98 ± 6,94, 41,15 ± 13,21 и 145,51 ± 52,32, для групп 1, 2, 3 и 4, соответственно. Средние массы тела (± SE) на момент прекращения составляли: 24,80 ± 0,49, 23,25 ± 1,20, 24,00 ± 0,32 и 23,2 ± 1,46 для Групп 1, 2, 3 и 4, соответственно. Максимальный средний % чистой потери веса (день) составил: 0,7 (36), 1,5 (23), 1,8 (36) и 2,2 (29) для Групп 1, 2, 3 и 4, соответственно.[0140] As shown in Table 26, on day 14 of dosing, the mean tumor size (±SE) for the control group was 221.51±57.32 compared to 67.12±10.66, 58.27± 22.54 and 131.44 ± 22.86 for treatment groups 2, 3 and 4, respectively. At the time of discontinuation (day 42), the mean tumor size (± S.E.) was: 255.42 ± 65.46, 55.98 ± 6.94, 41.15 ± 13.21 and 145.51 ± 52.32. for groups 1, 2, 3 and 4, respectively. Mean body weights (± SE) at the time of discontinuation were: 24.80 ± 0.49, 23.25 ± 1.20, 24.00 ± 0.32 and 23.2 ± 1.46 for Groups 1, 2, 3 and 4, respectively. The maximum mean % net weight loss (day) was: 0.7 (36), 1.5 (23), 1.8 (36) and 2.2 (29) for Groups 1, 2, 3 and 4, respectively.
[0141] Кроме того, как показано в Таблице 26, среднее ингибирование роста в группах лечения составляло 78,3, 75,2 и 55,9 для Групп 2, 3 и 4, соответственно. Время удвоения опухолей составляло: Группа 1: 20,56 дней; Группа 2: 34,54 дней; Группа 3: 30,07 дней; и Группа 4: 27,17 дней. Наблюдалась задержка роста, составляющая 13,99, 9,52 и 6,61 дней, для Групп 2, 3 и 4, соответственно. Значения % соотношения лечение/контроль для групп лечения составляли: Группа 2: -33,75 (остановка роста опухоли); Группа 3: -54,4 (регрессия опухоли); и Группа 4: 10,28 (ингибирование роста опухоли). На Фиг. 6 проиллюстрировано ингибирование роста полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 в ксенотрансплантатной модели MDA-MB-231.[0141] In addition, as shown in Table 26, the average growth inhibition in the treatment groups was 78.3, 75.2 and 55.9 for Groups 2, 3 and 4, respectively. Tumor doubling times were: Group 1: 20.56 days; Group 2: 34.54 days; Group 3: 30.07 days; and Group 4: 27.17 days. Growth delays of 13.99, 9.52 and 6.61 days were observed for Groups 2, 3 and 4, respectively. The % treatment/control ratio values for the treatment groups were: Group 2: -33.75 (tumor growth arrest); Group 3: -54.4 (tumor regression); and Group 4: 10.28 (tumor growth inhibition). In FIG. 6 illustrates growth inhibition of bacterially derived VHH13-OdAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 in the MDA-MB-231 xenograft model.
[0142] Введение полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 вызывало значительное ингибирование роста в Группе 2 (р = 0,02) [1 мг/кг; ДД x 14] и Группе 3 (р = 0,02) [2 мг/кг; ДД х 14]. Кроме того, три из четырех опухолей показали значительную регрессию. На основании этих данных можно сделать вывод, что полученное в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 обладает химиотерапевтической активностью в модельной системе рака молочной железы человека MDA-MB-231.[0142] Administration of bacteria-derived VHH13-OdAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 caused significant growth inhibition in Group 2 (p = 0.02) [1 mg/kg; DD x 14] and Group 3 (p = 0.02) [2 mg/kg; DD x 14]. In addition, three of the four tumors showed significant regression. Based on these data, it can be concluded that the bacteria-derived VHH13-OdAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 has chemotherapeutic activity in the MDA-MB-231 human breast cancer model system.
ПРИМЕР 11: ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПОЛУЧЕННОГО В БАКТЕРИИ VHH13-ОДАТ (SEQ ID №: 3) К STAT3 В ТРЕХ КСЕНОТРАНСПЛАНТАТНЫХ МОДЕЛЯХ РАКА ЧЕЛОВЕКАEXAMPLE 11: EFFECTIVENESS OF BACTERIALLY DERIVED VHH13-ODATE (SEQ ID NO: 3) TO STAT3 IN THREE XENOTRANSPLANT MODELS OF HUMAN CANCER
[0143] В этом Примере оценивали эффективность полученного в бактерии VHH13- ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 в ксенотрансплантатных моделях рака молочной железы MDA-MB-231, поджелудочной железы PANC-1 и предстательной железы DU145 человека.[0143] This Example assessed the effectiveness of the bacterially derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 in xenograft models of human breast cancer MDA-MB-231, pancreatic PANC-1 and prostate cancer DU145.
[0144] Бестимусные мыши Nude-Foxn1nu, клетки рака молочной железы MDA-MB-231, клеточные линии рака поджелудочной железы PANC-1 и рака предстательной железы DU145 были описаны выше. В 1-й день исследования масса тела мышей находилась в диапазоне от 17 до 19 г (34 самки) и от 21 до 23 г (16 самцов).[0144] Nude-Foxn1 nu nude mice, MDA-MB-231 breast cancer cells, PANC-1 pancreatic cancer cell lines, and DU145 prostate cancer cell lines were described above. On day 1 of the study, the body weight of mice ranged from 17 to 19 g (34 females) and from 21 to 23 g (16 males).
[0145] Клетки в ранних пассажах (4-10) использовали для имплантации в мышей и собирали во время логарифмической фазы роста. MDA-MB-231 (5×106), DU145 (5×106) и PANC-1 (1,5×106) вводили подкожно в правый бок мышей в конечном объеме, составляющем 100 мкл среды. Измерения опухолей начинали, как только опухоли становились пальпируемыми. Затем опухоли измеряли дважды в неделю.[0145] Cells at early passages (4-10) were used for implantation into mice and harvested during logarithmic growth phase. MDA-MB-231 (5×10 6 ), DU145 (5×10 6 ), and PANC-1 (1.5×10 6 ) were injected subcutaneously into the right flank of mice in a final volume of 100 μl of medium. Tumor measurements began as soon as the tumors became palpable. Tumors were then measured twice weekly.
[0146] Животных рандомизировали по группам с помощью алгоритма стратифицированной случайной выборки, когда опухоли достигали размера, находящегося в диапазоне: 74-120 мм3 (MDA-MB-231), 89-146 мм3 (DU145) или 60-160 мм3 (PANC-1). Лечение (содержащее полученное в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 и называемое в данном документе как SBT-100) или носитель (ФСБ) инициировали на следующий день после рандомизации, называемый 1-м днем.[0146] Animals were randomized into groups using a stratified random sampling algorithm when tumors reached a size ranging from: 74-120 mm 3 (MDA-MB-231), 89-146 mm 3 (DU145) or 60-160 mm 3 (PANC-1). Treatment (containing bacteria-derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 and referred to herein as SBT-100) or vehicle (PBS) was initiated the day after randomization, referred to as day 1.
[0147] Полученное в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 доставляли в виде предварительно смешанного раствора в концентрации, составляющей 0,651 мг/мл, и хранили при -20°C до готовности к использованию. Исходный раствор разбавляли в стерильном ФСБ с рН 7,6 с получением 5 мг/кг в объеме дозирования, составляющем 10 мл/кг. Рабочий раствор готовили каждые 7 дней, аликвотировали в семь пробирок и хранили при 4°С. В каждый день лечения до комнатной температуры доводили только необходимую пробирку. Весь оставшийся материал ОдАт хранили при 4°С на случай возникновения необходимости в следующей дозе. На 8-й день любой оставшийся материал ОдАт выбрасывали, и готовили свежую порцию.[0147] The bacterially produced VHH13-OdAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 was delivered as a premixed solution at a concentration of 0.651 mg/ml and stored at -20°C until ready for use. The stock solution was diluted in sterile PBS pH 7.6 to give 5 mg/kg in a dosage volume of 10 ml/kg. The working solution was prepared every 7 days, aliquoted into seven tubes and stored at 4°C. On each day of treatment, only the required tube was brought to room temperature. All remaining OdAb material was stored at 4°C in case the next dose was needed. On day 8, any remaining OdAt material was discarded and a fresh batch was prepared.
[0148] Двум группам (контроль и SBT-100) мышей в модели опухоли вводили дозу в соответствии с протоколом, показанным в Таблице 27. Режимы дозирования были следующими: Группа 1 (n = 4; ФСБ) дважды в день в течение 14 дней [ДД x 14]; Группа 2 (n = 4; SBT-100, 5 мг/кг м.т.), дважды в день в течение 14 дней [ДД x 14]. И носитель (ФСБ с рН 7,6), и SBT-100 вводили внутрибрюшинно (в/б) дважды в день, с интервалом в шесть часов в течение четырнадцати дней. Дозирование проводили в соответствии с массами отдельных животных. За введением следовал восстановительный период, составлявший 7 дней.[0148] Two groups (control and SBT-100) of mice in the tumor model were dosed according to the protocol shown in Table 27. The dosing regimens were as follows: Group 1 (n = 4; PBS) twice daily for 14 days [0148] DD x 14]; Group 2 (n = 4; SBT-100, 5 mg/kg b.w.), twice daily for 14 days [DD x 14]. Both vehicle (PBS pH 7.6) and SBT-100 were administered intraperitoneally (i.p.) twice daily, six hours apart, for fourteen days. Dosing was carried out according to the weights of individual animals. The administration was followed by a recovery period of 7 days.
[0149] Для рандомизации животных по группам, сбора данных (например, дозировка, масса тела, измерения опухоли, клинические наблюдения) и проведения анализа данных использовали программное обеспечение Study Log Study Director Animal Study Management (Сан-Франциско, штат Калифорния).[0149] Study Log Study Director Animal Study Management software (San Francisco, California) was used to randomize animals into groups, collect data (eg, dosage, body weight, tumor measurements, clinical observations), and perform data analysis.
[0150] В ксенотрансплантатной модели опухоли MDA-MB-231, животных рандомизировали по группам на 23-й день после инокуляции опухоли со средним (±SE) размером, составляющим: 77,98 ± 21,58 и 84,71 ± 5,56 для Групп 1 и 2, соответственно. Средние массы тела (± SE) при рандомизации составляли: 20,04 ± 0,62 и 23,7 ± 1,84 для Групп 1 и 2, соответственно. Таблица 28 резюмирует средние массы тела (± SE) для всего исследования. В последний день введения дозы (14-й день), средний размер опухоли (±SE) для контрольной группы составлял 168,28 ± 51,57 по сравнению с 83,81 ± 22,65 для мышей, обработанных SBT-100. Таблица 29 резюмирует объемы опухолей (± SE) для всего исследования. На момент прекращения (28-й день) средний размер опухоли (± S.E.) составлял: 270,49 ± 112,35 и 91,72 ± 33,17, для Групп 1 и 2, соответственно. Средние массы тела (± SE) на момент прекращения составляли: 25,36 ± 1,07 и 24,25 ± 1,68 для Групп 1 и 2, соответственно. В конце исследования среднее ингибирование роста опухоли в группе, обработанной SBT-100, составило 85,8% (p = 0,006). На Фиг. 7 проиллюстрирован средний объем опухоли. Время удвоения опухолей составляло 25,78 дней по сравнению с 111,6 дней для Группы 1 и Группы 2, соответственно. % соотношение лечение/контроль для Группы 2 составляло 13,35 (ингибирование опухоли).[0150] In the MDA-MB-231 xenograft tumor model, animals were randomized to groups on day 23 post tumor inoculation with mean (±SE) sizes of: 77.98 ± 21.58 and 84.71 ± 5.56 for Groups 1 and 2, respectively. Mean body weights (± SE) at randomization were: 20.04 ± 0.62 and 23.7 ± 1.84 for Groups 1 and 2, respectively. Table 28 summarizes the mean body weights (± SE) for the entire study. On the last day of dosing (day 14), the mean tumor size (±SE) for the control group was 168.28 ± 51.57 compared to 83.81 ± 22.65 for SBT-100-treated mice. Table 29 summarizes tumor volumes (± SE) for the entire study. At the time of discontinuation (day 28), the mean tumor size (± S.E.) was: 270.49 ± 112.35 and 91.72 ± 33.17, for Groups 1 and 2, respectively. Mean body weights (± SE) at the time of discontinuation were: 25.36 ± 1.07 and 24.25 ± 1.68 for Groups 1 and 2, respectively. At the end of the study, the mean tumor growth inhibition in the SBT-100-treated group was 85.8% (p = 0.006). In FIG. Figure 7 illustrates the average tumor volume. Tumor doubling time was 25.78 days compared to 111.6 days for Group 1 and Group 2, respectively. The % treatment/control ratio for Group 2 was 13.35 (tumor inhibition).
[0151] В ксенотрансплантатной модели опухоли DU145, животных рандомизировали по группам на 17-й день после инокуляции опухоли со средним (±SE) размером, составляющим: 111,87 ± 20,53 и 111,23 ± 25,16 для Групп 1 и 2, соответственно. Средние массы тела (± SE) при рандомизации составляли: 29,10 ± 1,94 и 30,68 ± 1,56 для Групп 1 и 2, соответственно. Таблица 30 резюмирует средние арифметические массы тела (± SE) для всего исследования. В последний день введения дозы (14-й день), средний размер опухоли (±SE) для контрольной группы составлял[0151] In the DU145 xenograft tumor model, animals were randomized to groups on day 17 post tumor inoculation with a mean (±SE) size of: 111.87 ± 20.53 and 111.23 ± 25.16 for Groups 1 and 2, respectively. Mean body weights (± SE) at randomization were: 29.10 ± 1.94 and 30.68 ± 1.56 for Groups 1 and 2, respectively. Table 30 summarizes the arithmetic mean body weights (± SE) for the entire study. On the last day of dosing (day 14), the mean tumor size (±SE) for the control group was
621,81 ± 276,25 по сравнению с 364,14 ± 51,64 для мышей, обработанных SBT-100. Таблица 31 резюмирует объемы опухолей (± SE) для всего исследования. На момент прекращения (28-й день) средний размер опухоли (± S.E.) составлял: 819,42 ± 351,88 и 601,83 ± 131,51, для Групп 1 и 2, соответственно. Средние массы тела (± SE) на момент прекращения составляли: 29,20 ± 2,33 и 29,60 ± 1,04 для Групп 1 и 2, соответственно. В конце исследования среднее ингибирование роста опухоли в группе, обработанной SBT-100, составило 26,6% (p = 0,29). На Фиг. 8 проиллюстрирован средний объем опухоли. Время удвоения опухолей составляло 14,57 дней по сравнению с 18,19 дней для Группы 1 и Группы 2, соответственно. % соотношение лечение/контроль для621.81 ± 276.25 compared to 364.14 ± 51.64 for SBT-100-treated mice. Table 31 summarizes tumor volumes (± SE) for the entire study. At the time of termination (day 28), the mean tumor size (± S.E.) was: 819.42 ± 351.88 and 601.83 ± 131.51, for Groups 1 and 2, respectively. Mean body weights (± SE) at the time of discontinuation were: 29.20 ± 2.33 and 29.60 ± 1.04 for Groups 1 and 2, respectively. At the end of the study, the mean tumor growth inhibition in the SBT-100-treated group was 26.6% (p = 0.29). In FIG. Figure 8 illustrates the average tumor volume. Tumor doubling time was 14.57 days compared to 18.19 days for Group 1 and Group 2, respectively. % treatment/control ratio for
Группы 2 составляло 74,8.Group 2 was 74.8.
[0152] В ксенотрансплантатной модели опухоли PANC-1, животных рандомизировали по группам на 22-й день после инокуляции опухоли со средним (±SE) размером, составляющим: 78,74 ± 40,21 и 93,84 ± 36,31 для Групп 1 и 2, соответственно. Средние массы тела (± SE) при рандомизации составляли: 22,50 ± 1,47 и 24,23 ± 1,63 для Групп 1 и 2, соответственно. Таблица 32 резюмирует средние массы тела (± SE) для всего исследования. В последний день введения дозы (14-й день), средний размер опухоли (±SE) для контрольной группы составлял 204,95 ± 178,90 по сравнению с 159,03 ± 28,01 для мышей, обработанных SBT-100. Таблица 33 резюмирует объемы опухолей (± SE) для всего исследования. На момент прекращения (28-й день) средний размер опухоли (± S.E.) составлял: 284,77 ± 288,88 и 203,02 ± 30,34, для Групп 1 и 2, соответственно. Средние массы тела (± SE) на момент прекращения составляли: 27,38 ± 1,07 и 26,23 ± 1,19 для Групп 1 и 2, соответственно. В конце исследования среднее ингибирование роста опухоли в группе, обработанной SBT-100, составило 41,78% (p = 0,35). На Фиг. 9 проиллюстрирован средний объем опухоли. Время удвоения опухолей составляло 18,51 дней по сравнению с 35,70 дней для Группы 1 и Группы 2, соответственно. % соотношение лечение/контроль для Группы 2 составляло 52,79.[0152] In the PANC-1 xenograft tumor model, animals were randomized to groups on day 22 after tumor inoculation with a mean (±SE) size of: 78.74 ± 40.21 and 93.84 ± 36.31 for Groups 1 and 2, respectively. Mean body weights (± SE) at randomization were: 22.50 ± 1.47 and 24.23 ± 1.63 for Groups 1 and 2, respectively. Table 32 summarizes the mean body weights (± SE) for the entire study. On the last day of dosing (day 14), the mean tumor size (±SE) for the control group was 204.95 ± 178.90 compared to 159.03 ± 28.01 for SBT-100-treated mice. Table 33 summarizes tumor volumes (± SE) for the entire study. At the time of termination (day 28), the mean tumor size (± S.E.) was: 284.77 ± 288.88 and 203.02 ± 30.34, for Groups 1 and 2, respectively. Mean body weights (± SE) at the time of discontinuation were: 27.38 ± 1.07 and 26.23 ± 1.19 for Groups 1 and 2, respectively. At the end of the study, the mean tumor growth inhibition in the SBT-100-treated group was 41.78% (p = 0.35). In FIG. Figure 9 illustrates the average tumor volume. Tumor doubling time was 18.51 days compared to 35.70 days for Group 1 and Group 2, respectively. The % treatment/control ratio for Group 2 was 52.79.
ПРИМЕР 12: ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПОЛУЧЕННОГО В БАКТЕРИИ VHH13-ОДАТ (SEQ ID №: 3) К STAT3 В КСЕНОТРАНСПЛАНТАТНОЙ МОДЕЛИ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ЧЕЛОВЕКА РЭ+/РП+ (MCF-7)EXAMPLE 12: EFFECTIVENESS OF BACTERIALLY PRODUCED VHH13-ODATE (SEQ ID NO: 3) TO STAT3 IN A XENOTRANSPLANT MODEL OF HUMAN BREAST CANCER RE+/RP+ (MCF-7)
[0153] Этот Пример демонстрирует эффективность полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 в ксенотрансплантатной модели рака молочной железы человека MCF-7 у "голых" мышей.[0153] This Example demonstrates the effectiveness of the bacterially derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 in the MCF-7 xenograft model of human breast cancer in nude mice.
[0154] Самкам бестимусных "голых" мышей (Crl:NU(Ncr)-Foxn1nu, Charles River) было двенадцать недель, их масса тела (м.т.) находилась в диапазоне от 23,0 до 30,1 г на 1-й день исследования. Животных кормили и содержали, как описано выше.[0154] Female athymic nude mice (Crl:NU(Ncr) -Foxn1nu , Charles River) were twelve weeks old and had body weights (bw) ranging from 23.0 to 30.1 g/day. th day of the study. Animals were fed and housed as described above.
[0155] Клетки карциномы молочной железы человека линии MCF-7 получали и культивировали, как описано выше, и использовали для модели ксенотрансплантата мыши. За три дня до имплантации опухолевых клеток, каждому подопытному животному подкожно в область между лопатками имплантировали пеллеты с эстрогеном (0,36 мг эстрадиола, с пролонгированным 60-дневным высвобождением, Innovative Research of America, Сарасота, штат Флорида) с использованием стерилизованного троакара.[0155] Human breast carcinoma cell line MCF-7 was prepared and cultured as described above and used for the mouse xenograft model. Three days before tumor cell implantation, estrogen pellets (0.36 mg estradiol, 60-day extended release, Innovative Research of America, Sarasota, Florida) were implanted subcutaneously in the interscapular region of each experimental animal using a sterilized trocar.
[0156] Опухолевые клетки, используемые для имплантации, собирали во время логарифмической фазы роста и ресуспендировали в фосфатно-солевом буферном растворе (ФСБ) в концентрации, составляющей 1×108 клеток/мл. В день имплантации каждой подопытной мыши вводили 1×107 клеток MCF-7 (0,1 мл клеточной суспензии), имплантированных подкожно в правый бок, и контролировали рост опухолей по мере того, как средний размер приближался к целевому диапазону, составляющему 100-150 мм3. Через двадцатиоднодневный срок, принимаемый за 1-й день исследования, животных распределяли на две группы, каждая из которых состояла из четырех мышей с объемами отдельных опухолей, находящимися в пределах 108-144 мм3, и средними по группе объемами опухолей, составляющими 117-123 мм3.[0156] Tumor cells used for implantation were collected during logarithmic growth phase and resuspended in phosphate buffered saline (PBS) at a concentration of 1×10 8 cells/ml. On the day of implantation, each experimental mouse was injected with 1 x 10 7 MCF-7 cells (0.1 ml cell suspension) implanted subcutaneously in the right flank and tumor growth was monitored as the average size approached the target range of 100-150 mm 3 . After a twenty-one-day period, taken as the 1st day of the study, the animals were divided into two groups, each of which consisted of four mice with individual tumor volumes ranging from 108-144 mm 3 and group-average tumor volumes of 117-123 mm 3 .
[0157] Полученное в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 предоставляли в виде предварительно смешанного, готового раствора для введения в концентрации, составляющей 0,41867 мг/мл в 1 мл аликвотах, и хранили при -20°C до возникновения необходимости в нем. 0,41867 мг/мл раствора обеспечивали 1 мг/кг дозы в объеме дозирования, составляющем 23,88 мл/кг. В каждый день лечения до комнатной температуры доводили только необходимые пробирки с полученным в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3. Все оставшиеся дозы суспензий хранили при 4°С на случай возникновения необходимости в следующей дозе.[0157] Bacteria-derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 was provided as a premixed, ready-to-administer solution at a concentration of 0.41867 mg/mL in 1 mL aliquots and stored at -20°C until the need arises. The 0.41867 mg/ml solution provided a 1 mg/kg dose in a dosage volume of 23.88 ml/kg. On each day of treatment, only the necessary tubes with the VHH13-OdAb (SEQ ID No: 3) obtained in the bacterium to STAT3 were brought to room temperature. All remaining doses of suspensions were stored at 4°C in case the next dose was needed.
[0158] Двум группам бестимусных "голых" мышей вводили дозу в соответствии с протоколом, показанным в Таблице 34. Все дозы носителя (контроль) и полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 вводили внутрибрюшинно (в/б) трижды в день, с интервалом в шесть часов в течение четырнадцати дней, с введением двух доз в 1-й день и введением одной дозы утром 15-го дня (ТД х 14, 2 дозы в первый день). Объем дозирования для носителя и полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №:[0158] Two groups of athymic nude mice were dosed according to the protocol shown in Table 34. All doses of vehicle (control) and bacteria-derived VHH13-OdAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 were administered intraperitoneally (i.p. ) three times daily, six hours apart, for fourteen days, with two doses given on day 1 and one dose given on the morning of day 15 (TD x 14, 2 doses on day 1). Dosing volume for carrier and bacteria-derived VHH13-ODAb (SEQ ID No.:
3) к STAT3 составлял 0,478 мл на 20 грамм массы тела (23,88 мл/кг), и его подбирали пропорционально массе тела каждого отдельного животного. Группа 1 получала носитель и служила в качестве эталонной группы в отношении приживления и прогрессирования опухоли, а также в качестве контроля. Группа 2 получала полученное в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 в дозе, составляющей 1 мг/кг.3) to STAT3 was 0.478 ml per 20 grams of body weight (23.88 ml/kg), and was selected in proportion to the body weight of each individual animal. Group 1 received vehicle and served as a reference group for tumor engraftment and progression and as a control. Group 2 received bacterially produced VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 at a dose of 1 mg/kg.
[0159] Опухоли измеряли дважды в неделю, и каждое животное умерщвляли, когда его новообразование достигало предварительно установленного конечного объема (1000 мм3) или в конце исследования, на 39-й день, в зависимости от того, какое из указанных событий наступало раньше. Когда опухоль достигала предварительно установленного конечного объема, животное регистрировали как умерщвленное по причине прогрессирования опухоли (TP), с указанием даты умерщвления. Время до конечной точки клинического исследования (TTE) для каждой мыши рассчитывали с помощью следующего уравнения:[0159] Tumors were measured twice weekly, and each animal was sacrificed when its tumor reached a predetermined end volume (1000 mm 3 ) or at the end of the study, on day 39, whichever occurred first. When the tumor reached a predetermined final volume, the animal was recorded as sacrificed due to tumor progression (TP), with the date of sacrifice indicated. Time to clinical trial endpoint (TTE) for each mouse was calculated using the following equation:
где TTE выражается в днях, предварительно установленный конечный объем выражается в мм3, b представляет собой свободный член уравнения регрессии и m представляет собой наклон линии, полученной с помощью линейной регрессии логарифмически преобразованного набора данных о росте опухоли. Набор данных состоит из первого наблюдения, которое превысило предварительно установленный конечный объем, используемый в анализе, и трех последовательных наблюдений, которые непосредственно предшествовали достижению этого предварительно установленного конечного объема. Расчетное TTE, как правило, меньше, чем дата TP - день, в который животное умерщвляли из-за размера опухоли. Животным, которые не достигали предварительно установленного объема конечной точки, присваивали значение TTE, равное последнему дню исследования (Д39). Любому животному, классифицированному, как умершее от связанных с лечением (TR) причин, должно было быть присвоено значение TTE, равное дню смерти. Любое животное, классифицированное, как умершее от не связанных с лечением (NTR) причин, должно было быть исключено из расчетов TTE.where TTE is expressed in days, the prespecified final volume is expressed in mm 3 , b is the intercept of the regression equation, and m is the slope of the line obtained by linear regression of the log-transformed tumor growth data set. The data set consists of the first observation that exceeded the preset endpoint used in the analysis and three consecutive observations that immediately preceded reaching that preset endpoint. The estimated TTE is typically less than the TP date, the day on which the animal was sacrificed due to tumor size. Animals that did not reach the prespecified endpoint volume were assigned a TTE value equal to the last day of the study (D39). Any animal classified as dying from treatment-related (TR) causes was assigned a TTE value equal to the day of death. Any animal classified as dying from non-treatment-related (NTR) causes had to be excluded from TTE calculations.
[0160] Эффективность лечения определяли по замедлению роста опухоли (TGD), которая определяется как увеличение медианы TTE, выраженное в днях, для группы лечения по сравнению с контрольной группой:[0160] Treatment efficacy was determined by tumor growth deceleration (TGD), which is defined as the increase in median TTE, expressed in days, for the treatment group compared to the control group:
TGD = T - CTGD = T - C
Процентное увеличение медианы ТТЕ, по отношению к контрольной группе, представляет собойThe percentage increase in median TTE, relative to the control group, is
где:Where:
T = медиана ТТЕ для группы лечения, иT = median TTE for treatment group, and
C = медиана ТТЕ для обозначенной контрольной группы.C = median TTE for the designated control group.
[0161] Эффективность лечения в каждой группе может быть обозначена медианой объема опухоли, MTV(n), которую определяли как медиану объема опухоли в последний день исследования (Д39) среди оставшихся животных (n), опухоли которых не достигли предварительно установленного конечного объема.[0161] Treatment efficacy in each group can be indicated by the median tumor volume, MTV(n), which was defined as the median tumor volume on the last day of the study (D39) among the remaining animals (n) whose tumors did not reach the predetermined target volume.
[0162] Эффективность лечения также можно определить по числу случаев и интенсивности регрессионных реакций, наблюдаемых во время исследования. Лечение может вызывать частичную регрессию (PR) или полную регрессию (CR) опухоли у животного. В реакции PR, объем опухоли составлял 50% или менее от его объема в Д1 в случае трех последовательных измерений в ходе исследования, и составлял не менее чем 13,5 мм3 в одном или более из этих трех измерений. В реакции CR, объем опухоли составлял менее чем 13,5 мм3 в случае трех последовательных измерений в ходе исследования. Любое животное с реакцией CR в конце исследования дополнительно классифицировали как выжившее с полной регрессией опухоли (TFS).[0162] The effectiveness of treatment can also be determined by the number of cases and intensity of regression reactions observed during the study. Treatment can cause partial regression (PR) or complete regression (CR) of the tumor in the animal. In the PR reaction, the tumor volume was 50% or less of its volume in D1 in the case of three consecutive measurements during the study, and was not less than 13.5 mm 3 in one or more of these three measurements. In the CR response, tumor volume was less than 13.5 mm 3 for three consecutive measurements during the study. Any animal with a CR response at the end of the study was further classified as a complete tumor resolution survivor (TFS).
[0163] Животных взвешивали ежедневно в течение первых пяти дней, а затем дважды в неделю в течение оставшейся части исследования. Мышей часто осматривали на предмет состояния здоровья и выраженных признаков каких-либо неблагоприятных побочных эффектов, связанных с лечением TR, и фиксировали заслуживающие внимания клинические наблюдения. В соответствии с протоколом контролировали индивидуальную потерю веса, и любое животное с потерей веса, превышающей 30% за одно измерение, или превышающей 25% в течение трех измерений, подлежало умерщвлению по состоянию здоровья в виде TR смерти. Если средняя масса тела в группе восстанавливалась, в этой группе могли возобновить введение доз, но в более низкой дозе или с менее частым режимом дозирования. Приемлемую токсичность определяли как среднюю потерю м.т. в группе, составляющую менее чем 20% во время исследования, и не более чем од ин случай TR смерти на десять обработанных животных, или 10%. Любой режим применения препарата, приводящий к большей токсичности, рассматривается как превышающий максимальную переносимую дозу (MTD). Смерть классифицировали как TR, если она было связана с побочными эффектами лечения, о чем свидетельствовали клинические признаки и/или аутопсия, или также могла классифицироваться как TR, если произошла по неизвестным причинам в течение периода введения препарата или в течение 14 дней с момента введения последней дозы. Смерть классифицировали как NTR, если имелось доказательство того, что смерть была связана с моделью опухоли, а не с лечением. NTR смерти дополнительно классифицировали как NTRa (в результате несчастного случая или человеческой ошибки), NTRm (в результате подтвержденного аутопсией распространения из-за инвазии или метастазирования) и NTRu (по неизвестным причинам).[0163] Animals were weighed daily for the first five days and then twice weekly for the remainder of the study. Mice were frequently examined for health status and significant signs of any adverse side effects associated with TR treatment, and noteworthy clinical observations were recorded. Individual weight loss was monitored per protocol, and any animal with a weight loss greater than 30% in one measurement or greater than 25% over three measurements was euthanized for health reasons as TR death. If a group's mean body weight was restored, dosing could be resumed in that group, but at a lower dose or less frequent dosing schedule. Acceptable toxicity was defined as the average bw loss. in the group, representing less than 20% during the study, and no more than one TR death per ten treated animals, or 10%. Any regimen that results in greater toxicity is considered to be in excess of the maximum tolerated dose (MTD). Death was classified as TR if it was associated with side effects of treatment, as evidenced by clinical signs and/or autopsy, or could also be classified as TR if it occurred from unknown causes during the drug administration period or within 14 days of the last drug administration doses. Death was classified as NTR if there was evidence that the death was related to the tumor model rather than treatment. NTR deaths were further classified as NTRa (due to accident or human error), NTRm (due to autopsy-proven spread due to invasion or metastasis), and NTRu (due to unknown causes).
[0164] Для графических анализов использовали Prism 6.07 (GraphPad) для Windows. Статистику не использовали из-за небольшого объема выборки.[0164] Prism 6.07 (GraphPad) for Windows was used for graphical analyses. Statistics were not used due to the small sample size.
[0165] Диаграмму рассеяния строили, чтобы показать значения TTE для отдельных мышей, по группам; эта диаграмма показывает NTR смерти, которые были исключены из всех других фигур. Объемы опухолей отдельных животных, медианные и средние объемы опухолей в группе строили как функции времени. Когда животное выбывало из исследования по причине размера опухоли или TR смерти, его последний зафиксированный объем опухоли включали с данными, используемыми для расчета медианы объема в последующие моменты времени. График Каплана- Майера строили, чтобы показать процент животных в каждой группе, оставшихся в исследовании, в зависимости от времени. Кривые опухолевого роста усекали после того, как в одной и той же группе происходило два случая TR смерти. Средние изменения м.т. в группе в ходе исследования наносили на график, как процентное изменение, ± SEM, с 1-го дня. Кривые опухолевого роста и изменения м.т. усекали после того, как более половины анализируемых мышей в группе выбывало из исследования. На Фиг. 10 проиллюстрирован средний объем опухоли в исследовании.[0165] A scatterplot was generated to show TTE values for individual mice, by group; this chart shows the NTR of deaths that have been excluded from all other figures. Tumor volumes of individual animals and median and group mean tumor volumes were plotted as functions of time. When an animal withdrew from the study due to tumor size or TR of death, its last recorded tumor volume was included with the data used to calculate the median volume at subsequent time points. A Kaplan-Meier plot was generated to show the percentage of animals in each group remaining in the study as a function of time. Tumor growth curves were truncated after two TR deaths occurred in the same group. Average changes in b.m. in the study group were plotted as percent change ± SEM from day 1. Tumor growth curves and changes in b.m. were truncated after more than half of the analyzed mice in the group dropped out of the study. In FIG. Figure 10 illustrates the average tumor volume in the study.
[0166] Таблица 35 предоставляет средние потери м.т., TR и NTR смерти у мышей. При наблюдении фиксировали клинические признаки, как показано в Таблицах 36-38. Во время исследования случаев TR смертей не произошло. Потери веса были переменными, существенными для одного животного в каждой группе, и происходили в результате эстрогенного эффекта. Клинические наблюдения, в том числе потеря веса, увеличение рогов матки и соли в мочевом пузыре, присутствовали в обеих группах и были также обусловлены эстрогенным эффектом. Токсичность эстрогена привела к двум не связанным с лечением смертям в каждой группе. Оцененное в исследовании лечение имело приемлемую переносимость.[0166] Table 35 provides the average bw losses, TR and NTR death in mice. During observation, clinical signs were recorded as shown in Tables 36-38. No TR deaths occurred during the study. Weight losses were variable, significant for one animal in each group, and occurred as a result of the estrogenic effect. Clinical observations, including weight loss, enlarged uterine horns and bladder salt, were present in both groups and were also due to the estrogenic effect. Estrogen toxicity resulted in two non-treatment-related deaths in each group. The treatments evaluated in the study were acceptable tolerability.
[0167] Так как две из четырех мышей в контрольной группе, а также в группе лечения умерли от токсичности эстрогена, нельзя сделать статистический вывод. Исходя из данных, медиана роста опухоли и средний объем опухоли уменьшились в группе лечения по сравнению с контрольной группой. Эта разница присутствовала в течение 14 дней лечения, а также до 25-го дня исследования. Контрольной группе потребовалось 25 дней, чтобы ее опухоли достигли объема, составляющего 1000 мм3, тогда как группе лечения потребовалось 36 дней, чтобы ее опухоли достигли объема, составляющего 1000 мм3. Это свидетельствует о том, что полученное в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 замедляет рост опухоли MCF-7 in vivo. На протяжении всего исследования и в контрольной группе, и в группе лечения сохранялись аналогичные массы. Это свидетельствует о том, что полученное в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 не вызывало токсичность по отношению к потере веса.[0167] Since two out of four mice in the control group as well as in the treatment group died from estrogen toxicity, no statistical conclusion can be drawn. Based on the data, median tumor growth and mean tumor volume decreased in the treatment group compared to the control group. This difference was present throughout the 14 days of treatment and up to the 25th day of the study. The control group took 25 days for their tumors to reach a volume of 1000 mm 3 while the treatment group took 36 days for their tumors to reach a volume of 1000 mm 3 . This indicates that the bacterially produced VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 slows down the growth of the MCF-7 tumor in vivo . Throughout the study, both the control and treatment groups maintained similar weights. This indicates that the bacteria-derived VHH13-OdAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 did not cause weight loss toxicity.
ПРИМЕР 13: ЛЕЧЕНИЕ ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ С HER2+ (BT474) С ПОМОЩЬЮ ПОЛУЧЕННОГО В БАКТЕРИИ VHH13-ОДАТ (SEQ ID №: 3) К STAT3 У КСЕНОТРАНСПЛАНТАТНЫХ МЫШЕЙEXAMPLE 13: TREATMENT OF HER2+ HUMAN BREAST CANCER (BT474) WITH BACTERIALLY DEVELOPED VHH13-ODATE (SEQ ID NO: 3) TO STAT3 IN XENOTRANGLANT MICE
[0168] В этом Примере определяли эффективность полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 в ксенотрансплантате рака молочной железы человека BT474 у мышей CB.17 SCID.[0168] In this Example, the potency of a bacterially derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 was determined in a human breast cancer xenograft BT474 in CB.17 SCID mice.
[0169] Две группы 8-12 недельных мышей CB.17 SCID, содержащих ксенотрансплантаты из 1 мм3 фрагментов опухоли ВТ474 в своем боку, обрабатывали в соответствии с протоколом, показанным в Таблице 39, когда опухоли достигали среднего размера, составляющего 100-150 мм3. Все дозы носителя (ФСБ контроль) и полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 (показано в Таблице 39 как SB-01) вводили внутрибрюшинно (в/б) трижды в день, с интервалом в шесть часов в течение четырнадцати дней, с введением двух доз в 1-й день (ТД х 14, 2 дозы в первый день). Объем дозирования для носителя и полученного в бактерии VHH13- ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 составлял 0,478 мл на 20 грамм массы тела (23,88 мл/кг), и его подбирали пропорционально массе тела каждого отдельного животного. Группа 1 получала носитель и служила в качестве эталонной группы в отношении приживления и прогрессирования опухоли, а также в качестве контроля. Группа 2 получала полученное в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 в дозе, составляющей 1 мг/кг.[0169] Two groups of 8-12 week old CB.17 SCID mice containing xenografts of 1 mm 3 BT474 tumor fragments in their flank were treated according to the protocol shown in Table 39 when the tumors reached an average size of 100-150 mm 3 . All doses of vehicle (PBS control) and bacteria-derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 (shown in Table 39 as SB-01) were administered intraperitoneally (i.p.) three times daily, at six-hour intervals. for fourteen days, with two doses administered on day 1 (TD x 14, 2 doses on day 1). The dosage volume for the vehicle and bacteria-derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 was 0.478 ml per 20 grams of body weight (23.88 ml/kg), and was adjusted in proportion to the body weight of each individual animal. Group 1 received vehicle and served as a reference group for tumor engraftment and progression and as a control. Group 2 received bacterially produced VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 at a dose of 1 mg/kg.
[0170] В течение первых 14 дней исследования группа лечения получала B VHH13 к STAT3, а контрольная группа получала только носитель. Как показано в Таблице 40, в течение этого времени, группа лечения сохраняла и набирала вес на протяжении всего исследования, в то время как в контрольной группе масса тела была более низкой на протяжении всего исследования. Это свидетельствует о том, что группа лечения не испытывала токсичность от приема полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 по отношению к потере веса. Средний объем опухоли и медиана объема опухоли в обеих группах были сходными, и абсолютно одинаковыми на 15-й день исследования. На 59-й день исследования обе группы достигли объема опухоли, составляющего 700 мм3. Это свидетельствует о том, что полученное в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 не уменьшало рост опухолей ВТ474 in vivo, по сравнению с контрольной группой. На Фиг. 11 проиллюстрирован средний объем опухоли в группе.[0170] During the first 14 days of the study, the treatment group received B VHH13 to STAT3, and the control group received vehicle alone. As shown in Table 40, during this time, the treatment group maintained and gained weight throughout the study, while the control group maintained lower body weight throughout the study. This indicates that the treatment group did not experience toxicity from the bacteria-derived VHH13-ODAb (SEQ ID NO: 3) to STAT3 in relation to weight loss. The mean tumor volume and median tumor volume were similar in both groups, and exactly the same at day 15 of the study. On day 59 of the study, both groups achieved a tumor volume of 700 mm 3 . This indicates that the bacteria-derived VHH13-OdAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 did not reduce the growth of BT474 tumors in vivo compared to the control group. In FIG. Figure 11 illustrates the average tumor volume in the group.
ПРИМЕР 14: ПОЛУЧЕНИЕ МЫШИНОГО МОНОКЛОНАЛЬНОГО АНТИТЕЛА, НАПРАВЛЕННОГО ПРОТИВ ПОЛУЧЕННОГО В БАКТЕРИИ VHH13-ОДАТ (SEQ ID №: 3) К STAT3EXAMPLE 14: PREPARATION OF MOUSE MONOCLONAL ANTIBODY DIRECTED AGAINST BACTERIALLY DEVELOPED VHH13-ODATE (SEQ ID NO: 3) TO STAT3
[0171] В этом Примере создавали мышиные моноклональные антитела к ОдАт по данному изобретению. Животными, которых использовали, были самки мышей BALB/c, в возрасте 8-10 недель. Использовали водорастворимый адъювант (CBL). Использованные HAT и HT были приобретены у Sigma-Aldrich.[0171] In this Example, mouse monoclonal antibodies to the OdAb of the present invention were generated. Animals used were female BALB/c mice, 8-10 weeks old. A water-soluble adjuvant (CBL) was used. The HATs and HTs used were purchased from Sigma-Aldrich.
[0172] Полученное в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3 использовали для иммунизации трех мышей и получения гибридомных клеточных линий. Мышей трижды иммунизировали, каждый раз водорастворимым адъювантом. В одной мыши сывороточные титры достигали 1/51200. Мышь умерщвляли и создавали гибридомные клеточные линии посредством слияния клеток селезенки с клеточной линией миеломы Sp2/0.[0172] Bacteria-derived VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3 was used to immunize three mice and generate hybridoma cell lines. Mice were immunized three times, each time with a water-soluble adjuvant. In one mouse, serum titers reached 1/51200. The mouse was sacrificed and hybridoma cell lines were generated by fusing spleen cells with the Sp2/0 myeloma cell line.
[0173] Слитые клетки высевали в 96-луночные планшеты посредством серийного разведения. Слитые клетки культивировали в присутствии HAT, и испытывали 651 отдельных клонов. Было установлено, что 27 положительных клонов из 651 отдельных клонов специфически связывались с антигеном полученного в бактерии VHH13-ОдАт (SEQ ID №: 3) к STAT3.[0173] Confluent cells were seeded into 96-well plates by serial dilution. The fusion cells were cultured in the presence of HAT, and 651 individual clones were tested. It was found that 27 positive clones out of 651 individual clones specifically bound to the bacterial antigen VHH13-ODAb (SEQ ID No: 3) to STAT3.
ПРИМЕР 15: ЦИТОТОКСИЧНОСТЬ ОДНОДОМЕННЫХ АНТИТЕЛ KRAS (G12D) В КЛЕТКАХ РАКА ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ЧЕЛОВЕКА PANC-1EXAMPLE 15: CYTOTOXICITY OF SINGLE-DOMAIN KRAS ANTIBODIES (G12D) IN HUMAN PANCREAS CANCER PANC-1 CELLS
[0174] Этот Пример демонстрирует антипролиферативное действие ОдАт к KRAS (G12D) (SEQ ID №: 2) с использованием клеточной линии рака поджелудочной железы человека PANC-1. Для опытов, клетки PANC-1 выращивали до тех пор, пока они не достигали конфлюэнтности, составляющей 90%. В то же время, исследования пролиферации проводили с помощью метода MTT, как описано выше.[0174] This Example demonstrates the antiproliferative effects of the KRAS sdAb (G12D) (SEQ ID No: 2) using the human pancreatic cancer cell line PANC-1. For experiments, PANC-1 cells were grown until they reached 90% confluence. At the same time, proliferation studies were performed using the MTT method as described above.
[0175] В Таблице 41 показаны антипролиферативные свойства ОдАт к KRAS (G12D) (SEQ ID №: 2) в клетках PANC-1 через три дня после обработки. Клетки PANC-1, обработанные ОдАт к KRAS (G12D) (SEQ ID №: 2), показали среднее ингибирование роста, составляющее 19,9 и 37,7 при 50,0 и 100 мкг/мл, соответственно.[0175] Table 41 shows the antiproliferative properties of the KRAS sdAb (G12D) (SEQ ID No: 2) in PANC-1 cells three days after treatment. PANC-1 cells treated with KRAS sdAb (G12D) (SEQ ID No: 2) showed average growth inhibition of 19.9 and 37.7 at 50.0 and 100 μg/ml, respectively.
[0176] Таким образом, ОдАт к KRAS (G12D) (SEQ ID №: 2) показало дозозависимое ингибирование роста в клетках рака поджелудочной железы человека PANC-1.[0176] In summary, the KRAS sdAb (G12D) (SEQ ID No: 2) showed dose-dependent growth inhibition in human pancreatic cancer PANC-1 cells.
ПРИМЕР 16: IN VITRO ИНГИБИРОВАНИЕ РОСТА С ПОМОЩЬЮ ОДАТ К ФНО- АЛЬФАEXAMPLE 16: IN VITRO GROWTH INHIBITION WITH ODATE TO TNF-ALPHA
[0177] Этот Пример демонстрирует разработку методики определения концентрации ФНО-альфа и оценки ингибирования функции ФНО-альфа. Концентрацию ФНО-альфа, необходимую, чтобы показать измеряемую модуляцию активности в лимфобластной клеточной линии легкого человека U937, оценивали посредством количественного определения присутствующего АТФ, который сигнализирует о присутствии метаболически активных клеток, с использованием люминесцентного анализа жизнеспособности клеток CellTiter-GJo® от Promega.[0177] This Example demonstrates the development of a methodology for determining TNF-alpha concentration and assessing inhibition of TNF-alpha function. The concentration of TNF-alpha required to show measurable modulation of activity in the human lung lymphoblastic cell line U937 was assessed by quantifying the ATP present, which signals the presence of metabolically active cells, using the CellTiter-GJo® luminescent cell viability assay from Promega.
[0178] Клетки U937 высевали в 96-луночный микрокультуральный планшет из прозрачного полистирола (96-луночный плоскодонный планшет Corning® Costar®, кат. № 3997) в общем объеме, составляющем 90 мкл/лунка. После 24 часов инкубирования в увлажненном инкубаторе при 37°C с 5% CO2 и 95% воздуха, в каждую лунку в двух повторностях (10-пунктовая кривая доза-ответ, самая высокая концентрация 20 нг/мл) добавляли 5 мкл 20-кратно серийно разведенного в среде для выращивания ФНО-альфа. Кроме того, в каждую лунку в двух повторностях (концентрация 1 нМ) добавляли 5 мкл 20-кратно разведенного в среде для выращивания стауроспорина.[0178] U937 cells were seeded into a 96-well clear polystyrene microculture plate (Corning® Costar® 96-well Flat Bottom Plate, Cat. No. 3997) in a total volume of 90 μl/well. After 24 hours of incubation in a humidified incubator at 37°C with 5% CO 2 and 95% air, 5 μl was added to each well in duplicate (10-point dose-response curve, highest concentration 20 ng/ml) 20 times serially diluted in TNF-alpha growth medium. In addition, 5 μl of 20-fold diluted staurosporine in growth medium was added to each well in duplicate (1 nM concentration).
[0179] После 24 часов культивирования в присутствии испытуемых веществ, концентрацию соединения, необходимую, чтобы показать измеряемую модуляцию активности ФНО-альфа в клеточной линии U937, оценивали посредством количественного определения присутствующего АТФ. Процентный рост клеток рассчитывали по отношению к необработанным контрольным лункам. Все испытания проводили в двух повторностях при каждом уровне концентрации.[0179] After 24 hours of culture in the presence of test substances, the concentration of compound required to show measurable modulation of TNF-alpha activity in the U937 cell line was assessed by quantifying the ATP present. Percentage cell growth was calculated relative to untreated control wells. All tests were performed in duplicate at each concentration level.
[0180] Значение ЕС50 для испытуемых веществ оценивали с использованием Prism 6.05 посредством аппроксимации данных с помощью следующего четырехпараметрического логистического уравнения:[0180] The EC50 value for the test substances was estimated using Prism 6.05 by fitting the data using the following four-parameter logistic equation:
где Верх представляет собой максимальный % контрольного поглощения, Низ представляет собой минимальный % контрольного поглощения при самой высокой концентрации вещества, Y представляет собой % контрольного поглощения, X представляет собой концентрацию вещества, IC50 представляет собой концентрацию вещества, которое ингибирует рост клеток на 50% по сравнению с контрольными клетками, и n представляет собой наклон кривой.where Top is the maximum % control absorbance, Bottom is the minimum % control absorbance at the highest concentration of the substance, Y is the % control absorbance, X is the concentration of the substance, IC50 is the concentration of the substance that inhibits cell growth by 50% compared with control cells, and n represents the slope of the curve.
[0181] На Фиг. 12 и 13 проиллюстрировано, что ФНО-альфа является цитотоксическим для клеток U937. IC50 для ФНО-альфа в отношении U937 составляет 95,10 пг/мл. Кривая ФНО-альфа показывает цитотоксический эффект титрования дозы.[0181] In FIG. 12 and 13 illustrate that TNF-alpha is cytotoxic to U937 cells. The IC50 for TNF-alpha against U937 is 95.10 pg/ml. The TNF-alpha curve shows the cytotoxic effect of dose titration.
[0182] На Фиг. 14 проиллюстрировано, что цитотоксичность ФНО-альфа в отношении U937 ингибируется тремя различными VHH к ФНО-альфа. Когда VHH62-ОдАт (SEQ ID №: 47) к ФНО-альфа, VHH66-ОдАт (SEQ ID №: 45) к ФНО-альфа и VHH69-ОдАт (SEQ ID №: 46) к ФНО-альфа инкубировали с постоянной дозой ФНО-альфа, при ЕС50, все три VHH к ФНО-альфа ингибировали цитотоксическую активность ФНО-альфа в отношении U937. IC50 VHH62-ОдАт (SEQ ID №: 47) к ФНО-альфа составляла около 713,6 мкг/мл. IC50 VHH69-ОдАт (SEQ ID №: 46) к ФНО-альфа составляла более чем 208,055 мкг/мл. IC50 VHH66-ОдАт (SEQ ID №: 45) к ФНО-альфа нельзя было определить, так как оно полностью ингибировало цитотоксичность ФНО-альфа при концентрациях, составляющих от около 1×102мкг/мл до 1×102 мкг/мл VHH66-ОдАт (SEQ ID №: 45) к ФНО-альфа. В этом диапазоне концентраций VHH66-ОдАт (SEQ ID №: 45) к ФНО-альфа происходит увеличение роста клеток U937 и, таким образом, полное ингибирование активности ФНО-альфа.[0182] In FIG. 14 illustrates that the cytotoxicity of TNF-alpha to U937 is inhibited by three different VHHs to TNF-alpha. When VHH62-OdAb (SEQ ID No.: 47) to TNF-alpha, VHH66-OdAb (SEQ ID No.: 45) to TNF-alpha and VHH69-OdAb (SEQ ID No.: 46) to TNF-alpha were incubated with a constant dose of TNF -alpha, at EC50, all three VHHs to TNF-alpha inhibited the cytotoxic activity of TNF-alpha against U937. The IC50 of VHH62-ODAb (SEQ ID No: 47) to TNF-alpha was about 713.6 μg/ml. The IC50 of VHH69-ODAb (SEQ ID No: 46) to TNF-alpha was more than 208.055 μg/ml. The IC50 of VHH66-ODAb (SEQ ID No: 45) to TNF-alpha could not be determined because it completely inhibited the cytotoxicity of TNF-alpha at concentrations ranging from about 1 x 10 2 μg/ml to 1 x 10 2 μg/ml VHH66 -ODAT (SEQ ID No: 45) to TNF-alpha. In this concentration range of VHH66-ODAb (SEQ ID No: 45) to TNF-alpha, there is an increase in the growth of U937 cells and, thus, complete inhibition of TNF-alpha activity.
[0183] Хотя настоящее изобретение было описано со ссылкой на определенные предпочтительные варианты реализации достаточно подробно, возможны и другие варианты реализации. Этапы, описанные для способов по данному изобретению, например, не предназначены для ограничения, а также не предназначены для указания того, что каждый этап является обязательно неотъемлемым для данного способа, а наоборот представляют собой лишь типовые этапы. Таким образом, объем прилагаемой формулы изобретения не должен ограничиваться описанием предпочтительных вариантов реализации, содержащихся в данном описании. Все ссылки, приведенные в данном документе, включены посредством ссылки в полном объеме.[0183] Although the present invention has been described with reference to certain preferred embodiments in some detail, other embodiments are possible. The steps described for the methods of this invention, for example, are not intended to be limiting, nor are they intended to indicate that each step is necessarily integral to the method, but rather represent typical steps only. Accordingly, the scope of the appended claims should not be limited to the description of the preferred embodiments contained herein. All references contained in this document are incorporated by reference in their entirety.
--->--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙLIST OF SEQUENCES
<110> Singh, Sunanda<110> Singh, Sunanda
<120> Однодоменные антитела к внутриклеточным антигенам<120> Single domain antibodies to intracellular antigens
<130> 7304-51293-4PCT<130> 7304-51293-4PCT
<150> US 62/067908<150> US 62/067908
<151> 2014-10-23<151> 2014-10-23
<150> US 62/148656<150> US 62/148656
<151> 2015-04-16<151> 2015-04-16
<150> US 62/188353<150> US 62/188353
<151> 2015-07-02<151> 2015-07-02
<150> US 62/210795<150> US 62/210795
<151> 2015-08-27<151> 2015-08-27
<160> 81<160> 81
<170> PatentIn версия 3.5<170> PatentIn version 3.5
<210> 1<210> 1
<211> 372<211> 372
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 1<400> 1
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcaga ctggagggtc tctgagactc 60gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcaga ctggagggtc tctgagactc 60
tcctgtgcag tttctggaaa tatcggcagc agctactgca tgggctggtt ccgccaggct 120tcctgtgcag tttctggaaa tatcggcagc agctactgca tgggctggtt ccgccaggct 120
ccagggaaga agcgcgaggc ggtcgcacgt attgtacgtg atggtgccac tggctacgca 180ccagggaaga agcgcgaggc ggtcgcacgt attgtacgtg atggtgccac tggctacgca 180
gactacgtga agggccgatt caccatctcc cgagacagcg ccaagaacac tctgtatctg 240gactacgtga agggccgatt caccatctcc cgagacagcg ccaagaacac tctgtatctg 240
caaatgaaca ggctgatacc tgaggacact gccatctact actgtgcggc agacctgccc 300caaatgaaca ggctgatacc tgaggacact gccatctact actgtgcggc agacctgccc 300
ccaggttgtt tgactcaggc gatttggaat tttggttatc ggggccaggg aaccctggtc 360ccaggttgtt tgactcaggc gatttggaat tttggttatc ggggccaggg aaccctggtc 360
accgtctcct ca 372accgtctcct ca 372
<210> 2<210> 2
<211> 124<211> 124
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 2<400> 2
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Thr Gly GlyGlu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Thr Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Asn Ile Gly Ser Ser TyrSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Asn Ile Gly Ser Ser Tyr
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Lys Arg Glu Ala ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Lys Arg Glu Ala Val
35 40 4535 40 45
Ala Arg Ile Val Arg Asp Gly Ala Thr Gly Tyr Ala Asp Tyr Val LysAla Arg Ile Val Arg Asp Gly Ala Thr Gly Tyr Ala Asp Tyr Val Lys
50 55 6050 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ser Ala Lys Asn Thr Leu Tyr LeuGly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ser Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65 70 75 8065 70 75 80
Gln Met Asn Arg Leu Ile Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys AlaGln Met Asn Arg Leu Ile Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala
85 90 9585 90 95
Ala Asp Leu Pro Pro Gly Cys Leu Thr Gln Ala Ile Trp Asn Phe GlyAla Asp Leu Pro Pro Gly Cys Leu Thr Gln Ala Ile Trp Asn Phe Gly
100 105 110100 105 110
Tyr Arg Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerTyr Arg Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 3<210> 3
<211> 127<211> 127
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 3<400> 3
His Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyHis Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg SerSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg Ser
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ser Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValSer Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg TyrAla Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg Tyr
100 105 110100 105 110
Met Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerMet Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 4<210> 4
<211> 126<211> 126
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 4<400> 4
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met GlySer Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met Gly
20 25 3020 25 30
Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala LeuTrp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala Leu
35 40 4535 40 45
Ser Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly ArgSer Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly Arg
50 55 6050 55 60
Phe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln MetPhe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln Met
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala ArgAsn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg
85 90 9585 90 95
Glu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly GlyGlu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly Gly
100 105 110100 105 110
His Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerHis Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 5<210> 5
<211> 126<211> 126
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 5<400> 5
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyAsp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met GlySer Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met Gly
20 25 3020 25 30
Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala LeuTrp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala Leu
35 40 4535 40 45
Ser Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly ArgSer Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly Arg
50 55 6050 55 60
Phe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln MetPhe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln Met
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala ArgAsn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg
85 90 9585 90 95
Glu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly GlyGlu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly Gly
100 105 110100 105 110
His Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerHis Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 6<210> 6
<211> 126<211> 126
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 6<400> 6
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyAsp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met GlySer Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met Gly
20 25 3020 25 30
Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala LeuTrp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala Leu
35 40 4535 40 45
Ser Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly ArgSer Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly Arg
50 55 6050 55 60
Phe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln MetPhe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln Met
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala ArgAsn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg
85 90 9585 90 95
Glu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly GlyGlu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly Gly
100 105 110100 105 110
His Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerHis Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 7<210> 7
<211> 126<211> 126
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 7<400> 7
His Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyHis Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met GlySer Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met Gly
20 25 3020 25 30
Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala LeuTrp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala Leu
35 40 4535 40 45
Ser Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly ArgSer Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly Arg
50 55 6050 55 60
Phe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln MetPhe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln Met
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala ArgAsn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg
85 90 9585 90 95
Glu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly GlyGlu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly Gly
100 105 110100 105 110
His Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerHis Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 8<210> 8
<211> 126<211> 126
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 8<400> 8
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met GlySer Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met Gly
20 25 3020 25 30
Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala LeuTrp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala Leu
35 40 4535 40 45
Ser Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly ArgSer Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly Arg
50 55 6050 55 60
Phe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln MetPhe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln Met
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala ArgAsn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg
85 90 9585 90 95
Glu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly GlyGlu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly Gly
100 105 110100 105 110
His Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerHis Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 9<210> 9
<211> 126<211> 126
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 9<400> 9
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met GlySer Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met Gly
20 25 3020 25 30
Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala LeuTrp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala Leu
35 40 4535 40 45
Ser Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly ArgSer Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly Arg
50 55 6050 55 60
Phe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln MetPhe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln Met
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala ArgAsn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg
85 90 9585 90 95
Glu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly GlyGlu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly Gly
100 105 110100 105 110
His Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerHis Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 10<210> 10
<211> 126<211> 126
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 10<400> 10
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met GlySer Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met Gly
20 25 3020 25 30
Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala LeuTrp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala Leu
35 40 4535 40 45
Ser Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly ArgSer Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly Arg
50 55 6050 55 60
Phe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln MetPhe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln Met
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala ArgAsn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg
85 90 9585 90 95
Glu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly GlyGlu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly Gly
100 105 110100 105 110
His Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerHis Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 11<210> 11
<211> 126<211> 126
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 11<400> 11
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met GlySer Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met Gly
20 25 3020 25 30
Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala LeuTrp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala Leu
35 40 4535 40 45
Ser Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly ArgSer Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly Arg
50 55 6050 55 60
Phe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln MetPhe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln Met
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala ArgAsn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg
85 90 9585 90 95
Glu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly GlyGlu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly Gly
100 105 110100 105 110
His Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerHis Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 12<210> 12
<211> 126<211> 126
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 12<400> 12
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met GlySer Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met Gly
20 25 3020 25 30
Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala LeuTrp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala Leu
35 40 4535 40 45
Ser Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly ArgSer Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly Arg
50 55 6050 55 60
Phe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln MetPhe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln Met
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala ArgAsn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg
85 90 9585 90 95
Glu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly SerGlu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly Ser
100 105 110100 105 110
His Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerHis Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 13<210> 13
<211> 126<211> 126
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 13<400> 13
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyGlu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met GlySer Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met Gly
20 25 3020 25 30
Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala LeuTrp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala Leu
35 40 4535 40 45
Ser Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly ArgSer Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly Arg
50 55 6050 55 60
Phe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln MetPhe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln Met
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala ArgAsn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg
85 90 9585 90 95
Glu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly GlyGlu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly Gly
100 105 110100 105 110
His Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerHis Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 14<210> 14
<211> 126<211> 126
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 14<400> 14
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly AspAsp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Asp
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met GlySer Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Thr Tyr Thr Gly Cys Met Gly
20 25 3020 25 30
Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala LeuTrp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala Leu
35 40 4535 40 45
Ser Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly ArgSer Ser Arg Gly Phe Ala Gly His Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly Arg
50 55 6050 55 60
Phe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln MetPhe Ser Ile Ser Arg Asp Tyr Val Lys Asn Ala Val Tyr Leu Gln Met
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala ArgAsn Thr Val Lys Pro Glu Asp Ala Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg
85 90 9585 90 95
Glu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly GlyGlu Gly Trp Glu Cys Gly Glu Thr Trp Leu Asp Arg Thr Ala Gly Gly
100 105 110100 105 110
His Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerHis Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 15<210> 15
<211> 127<211> 127
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 15<400> 15
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg SerSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg Ser
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ser Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValSer Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg TyrAla Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg Tyr
100 105 110100 105 110
Met Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerMet Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 16<210> 16
<211> 127<211> 127
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 16<400> 16
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg SerSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg Ser
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ser Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValSer Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Asn Asn Thr Leu TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Asn Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg TyrAla Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg Tyr
100 105 110100 105 110
Met Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerMet Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 17<210> 17
<211> 127<211> 127
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 17<400> 17
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyGlu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg SerSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg Ser
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ser Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValSer Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg TyrAla Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg Tyr
100 105 110100 105 110
Met Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerMet Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 18<210> 18
<211> 127<211> 127
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 18<400> 18
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyAsp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg SerSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg Ser
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ser Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValSer Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg TyrAla Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg Tyr
100 105 110100 105 110
Met Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerMet Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 19<210> 19
<211> 127<211> 127
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 19<400> 19
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyAsp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg SerSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg Ser
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ser Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValSer Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg TyrAla Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg Tyr
100 105 110100 105 110
Met Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerMet Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 20<210> 20
<211> 127<211> 127
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 20<400> 20
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyAsp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg SerSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg Ser
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ser Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValSer Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg TyrAla Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg Tyr
100 105 110100 105 110
Met Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerMet Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 21<210> 21
<211> 127<211> 127
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 21<400> 21
His Val Gln Leu Val Glu Ser Glu Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyHis Val Gln Leu Val Glu Ser Glu Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg SerSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg Ser
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ser Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValSer Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg TyrAla Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg Tyr
100 105 110100 105 110
Met Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerMet Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 22<210> 22
<211> 127<211> 127
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 22<400> 22
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg SerSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg Ser
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ser Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValSer Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg TyrAla Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg Tyr
100 105 110100 105 110
Met Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerMet Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 23<210> 23
<211> 127<211> 127
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 23<400> 23
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg SerSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg Ser
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ser Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValSer Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg TyrAla Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg Tyr
100 105 110100 105 110
Met Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerMet Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 24<210> 24
<211> 127<211> 127
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 24<400> 24
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyGlu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg SerSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg Ser
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ser Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValSer Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Ser Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg TyrAla Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg Tyr
100 105 110100 105 110
Met Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerMet Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 25<210> 25
<211> 127<211> 127
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 25<400> 25
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyAsp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg SerSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg Ser
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ser Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValSer Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg TyrAla Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg Tyr
100 105 110100 105 110
Met Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerMet Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 26<210> 26
<211> 127<211> 127
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 26<400> 26
His Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyHis Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg SerSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg Ser
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ser Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValSer Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg TyrAla Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg Tyr
100 105 110100 105 110
Met Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerMet Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 27<210> 27
<211> 127<211> 127
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 27<400> 27
His Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyHis Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg SerSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg Ser
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ser Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValSer Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg TyrAla Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg Tyr
100 105 110100 105 110
Met Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerMet Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 28<210> 28
<211> 127<211> 127
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 28<400> 28
His Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyHis Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg SerSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg Ser
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ser Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValSer Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg TyrAla Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg Tyr
100 105 110100 105 110
Met Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerMet Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 29<210> 29
<211> 127<211> 127
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 29<400> 29
His Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyHis Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg SerSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ala Asn Gly Gly Arg Ser
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ser Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValSer Gly Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Thr Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg TyrAla Thr Ser Arg Phe Asp Cys Tyr Arg Gly Ser Trp Phe Asn Arg Tyr
100 105 110100 105 110
Met Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerMet Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 30<210> 30
<211> 378<211> 378
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 30<400> 30
gatgtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggaggctc tctgagactc 60gatgtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggaggctc tctgagactc 60
tcctgtgtag cctctacata caccggctgc atgggctggt tccgccaggc tcctggaaag 120tcctgtgtag cctctacata caccggctgc atgggctggt tccgccaggc tcctggaaag 120
gagcgcgagg gagtcgcagc tcttagtagc cgtggttttg ccgggcacta taccgactcc 180gagcgcgagg gagtcgcagc tcttagtagc cgtggttttg ccgggcacta taccgactcc 180
gtgaagggcc gattctccat ctcccgagac tacgtcaaga atgcggtgta tctgcaaatg 240gtgaagggcc gattctccat ctcccgagac tacgtcaaga atgcggtgta tctgcaaatg 240
aacactgtga aacctgagga cgctgccatg tactactgtg cagcacggga gggatgggag 300aacactgtga aacctgagga cgctgccatg tactactgtg cagcacggga gggatgggag 300
tgcggtgaga cctggttgga ccggaccgcc gggggccata cctactgggg ccaggggacc 360tgcggtgaga cctggttgga ccggaccgcc gggggccata cctactgggg ccaggggacc 360
caggtcaccg tctcctca 378caggtcaccg tctcctca 378
<210> 31<210> 31
<211> 378<211> 378
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 31<400> 31
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggaggctc tctgagactc 60caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggaggctc tctgagactc 60
tcctgtgtag cctctacata caccggctgc atgggctggt tccgccaggc tcctggaaag 120tcctgtgtag cctctacata caccggctgc atgggctggt tccgccaggc tcctggaaag 120
gagcgcgagg gagtcgcagc tcttagtagc cgtggttttg ccgggcacta taccgactcc 180gagcgcgagg gagtcgcagc tcttagtagc cgtggttttg ccgggcacta taccgactcc 180
gtgaagggcc gattctccat ctcccgagac tacgtcaaga atgcggtgta tctgcaaatg 240gtgaagggcc gattctccat ctcccgagac tacgtcaaga atgcggtgta tctgcaaatg 240
aacactgtga aacctgagga cgctgccatg tactactgtg cagcacggga gggatgggag 300aacactgtga aacctgagga cgctgccatg tactactgtg cagcacggga gggatgggag 300
tgcggtgaga cctggttgga ccggaccgcc gggggccata cctactgggg ccaggggacc 360tgcggtgaga cctggttgga ccggaccgcc gggggccata cctactgggg ccaggggacc 360
ctggtcaccg tctcctca 378ctggtcaccg tctcctca 378
<210> 32<210> 32
<211> 381<211> 381
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 32<400> 32
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggagggtc tctgagactc 60caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggagggtc tctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggagc caatggtggt cggagctgca tgggctggtt ccgccaggtt 120tcctgtgcag cctctggagc caatggtggt cggagctgca tgggctggtt ccgccaggtt 120
ccagggaagg agcgcgaggg ggtttctggt atttcaaccg gtggtcttat tacatactat 180ccagggaagg agcgcgaggg ggtttctggt atttcaaccg gtggtcttat tacatactat 180
gccgactccg tgaagggccg attcaccatc tcccaagaca acaccaagaa cacgctgtat 240gccgactccg tgaagggccg attcaccatc tcccaagaca acaccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgaa acctgaggac actgccatgt actactgtgc gacgagtcgg 300ctgcaaatga acagcctgaa acctgaggac actgccatgt actactgtgc gacgagtcgg 300
tttgactgct atagaggctc ttggttcaac cgatatatgt ataacagttg gggccagggg 360tttgactgct atagaggctc ttggttcaac cgatatatgt ataacagttg gggccagggg 360
accctggtca ccgtctcctc a 381accctggtca ccgtctcctc a 381
<210> 33<210> 33
<211> 381<211> 381
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 33<400> 33
catgtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggagggtc tctgagactc 60catgtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggagggtc tctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggagc caacggtggt cggagctgca tgggctggtt ccgccaggtt 120tcctgtgcag cctctggagc caacggtggt cggagctgca tgggctggtt ccgccaggtt 120
ccagggaagg agcgcgaggg ggtttctggt atttcaaccg gtggtcttat tacatactat 180ccagggaagg agcgcgaggg ggtttctggt atttcaaccg gtggtcttat tacatactat 180
gccgactccg tgaagggccg attcaccatc tcccaagaca acaccaagaa cacgctgtat 240gccgactccg tgaagggccg attcaccatc tcccaagaca acaccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgaa acctgaggac actgccatgt actactgtgc gacgagtcgg 300ctgcaaatga acagcctgaa acctgaggac actgccatgt actactgtgc gacgagtcgg 300
tttgactgct atagaggctc ttggttcaac cgatatatgt ataacagttg gggccagggg 360tttgactgct atagaggctc ttggttcaac cgatatatgt ataacagttg gggccagggg 360
acccaggtca ctgtctcctc a 381acccaggtca ctgtctcctc a 381
<210> 34<210> 34
<211> 381<211> 381
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 34<400> 34
gatgtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggagggtc tctgagactc 60gatgtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggagggtc tctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggagc caatggtggt cggagctgca tgggctggtt ccgccaggtt 120tcctgtgcag cctctggagc caatggtggt cggagctgca tgggctggtt ccgccaggtt 120
ccagggaagg agcgcgaggg ggtttctggt atttcaaccg gtggtcttat tacatactat 180ccagggaagg agcgcgaggg ggtttctggt atttcaaccg gtggtcttat tacatactat 180
gccgactccg tgaagggccg attcaccatc tcccaagaca acaccaagaa cacgctgtat 240gccgactccg tgaagggccg attcaccatc tcccaagaca acaccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgaa acctgaggac actgccatgt actactgtgc gacgagtcgg 300ctgcaaatga acagcctgaa acctgaggac actgccatgt actactgtgc gacgagtcgg 300
tttgactgct atagaggctc ttggttcaac cgatatatgt ataacagttg gggccagggg 360tttgactgct atagaggctc ttggttcaac cgatatatgt ataacagttg gggccagggg 360
accctggtca ccgtctcctc a 381accctggtca ccgtctcctc a 381
<210> 35<210> 35
<211> 378<211> 378
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 35<400> 35
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggaggctc tctgagactc 60caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggaggctc tctgagactc 60
tcctgtgtag cctctacata caccggctgc atgggctggt tccgccaggc tcctggaaag 120tcctgtgtag cctctacata caccggctgc atgggctggt tccgccaggc tcctggaaag 120
gagcgcgagg gagtcgcagc tcttagcagc cgtggttttg ccgggcacta taccgactcc 180gagcgcgagg gagtcgcagc tcttagcagc cgtggttttg ccgggcacta taccgactcc 180
gtgaagggcc gattctccat ctcccgagac tacgtcaaga atgcggtgta tctgcaaatg 240gtgaagggcc gattctccat ctcccgagac tacgtcaaga atgcggtgta tctgcaaatg 240
aacactgtga aacctgagga cgctgccatg tactactgtg cagcacggga gggatgggag 300aacactgtga aacctgagga cgctgccatg tactactgtg cagcacggga gggatgggag 300
tgcggtgaga cctggttgga ccggaccgcc gggagccata cctactgggg ccaggggacc 360tgcggtgaga cctggttgga ccggaccgcc gggagccata cctactgggg ccaggggacc 360
ctggtcaccg tctcctca 378ctggtcaccg tctcctca 378
<210> 36<210> 36
<211> 378<211> 378
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 36<400> 36
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggaggctc tctgagactc 60gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggaggctc tctgagactc 60
tcctgtgtag cctctacata caccggctgc atgggctggt tccgccaggc tcctggaaag 120tcctgtgtag cctctacata caccggctgc atgggctggt tccgccaggc tcctggaaag 120
gagcgcgagg gagtcgcagc tcttagtagc cgtggttttg ccgggcacta taccgactcc 180gagcgcgagg gagtcgcagc tcttagtagc cgtggttttg ccgggcacta taccgactcc 180
gtgaagggcc gattctccat ctcccgagac tacgtcaaga atgcggtgta tctgcaaatg 240gtgaagggcc gattctccat ctcccgagac tacgtcaaga atgcggtgta tctgcaaatg 240
aacactgtga aacctgagga cgctgccatg tactactgtg cagcacggga gggatgggag 300aacactgtga aacctgagga cgctgccatg tactactgtg cagcacggga gggatgggag 300
tgcggtgaga cctggttgga ccgaaccgcc gggggccata cctactgggg ccaggggacc 360tgcggtgaga cctggttgga ccgaaccgcc gggggccata cctactgggg ccaggggacc 360
ctggtcaccg tctcctca 378ctggtcaccg tctcctca 378
<210> 37<210> 37
<211> 381<211> 381
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 37<400> 37
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggagggtc tctgagactc 60gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggagggtc tctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggagc caatggtggt cggagctgca tgggctggtt ccgccaggtt 120tcctgtgcag cctctggagc caatggtggt cggagctgca tgggctggtt ccgccaggtt 120
ccagggaagg agcgcgaggg ggtttctggt atttcaaccg gtggtcttat tacatactat 180ccagggaagg agcgcgaggg ggtttctggt atttcaaccg gtggtcttat tacatactat 180
gccgactccg tgaagggtcg attcaccatc tcccaagaca acaccaagaa cacgctgtat 240gccgactccg tgaagggtcg attcaccatc tcccaagaca acaccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga gcagcctgaa acctgaggac actgccatgt actactgtgc gacgagtcgg 300ctgcaaatga gcagcctgaa acctgaggac actgccatgt actactgtgc gacgagtcgg 300
tttgactgct atagaggctc ttggttcaac cgatatatgt ataacagttg gggccagggg 360tttgactgct atagaggctc ttggttcaac cgatatatgt ataacagttg gggccagggg 360
acccaggtca ccgtctcctc a 381acccaggtca ccgtctcctc a 381
<210> 38<210> 38
<211> 378<211> 378
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 38<400> 38
catgtgcagc tggtggagtc tggggggggc tcggtgcagg ctggaggctc tctgagactc 60catgtgcagc tggtggagtc tggggggggc tcggtgcagg ctggaggctc tctgagactc 60
tcctgtgtag cctctacata caccggctgc atgggctggt tccgccaggc tcctggaaag 120tcctgtgtag cctctacata caccggctgc atgggctggt tccgccaggc tcctggaaag 120
gagcgcgagg gagtcgcagc tcttagtagc cgtggttttg ccgggcacta taccgactcc 180gagcgcgagg gagtcgcagc tcttagtagc cgtggttttg ccgggcacta taccgactcc 180
gtgaagggcc gattctccat ctcccgagac tacgtcaaga atgcggtgta tctgcaaatg 240gtgaagggcc gattctccat ctcccgagac tacgtcaaga atgcggtgta tctgcaaatg 240
aacactgtga aacctgagga cgctgccatg tactactgtg cagcacggga gggatgggag 300aacactgtga aacctgagga cgctgccatg tactactgtg cagcacggga gggatgggag 300
tgcggtgaga cctggttgga ccggaccgcc gggggccata cctactgggg ccaggggacc 360tgcggtgaga cctggttgga ccggaccgcc gggggccata cctactgggg ccaggggacc 360
caggtcaccg tctcctca 378caggtcaccg tctcctca 378
<210> 39<210> 39
<211> 381<211> 381
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 39<400> 39
gatgtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggagggtc tctgagactc 60gatgtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggagggtc tctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggagc caatggtggt cggagctgca tgggctggtt ccgccaggtt 120tcctgtgcag cctctggagc caatggtggt cggagctgca tgggctggtt ccgccaggtt 120
ccagggaagg agcgcgaggg ggtttctggt atttcaaccg gtggtcttat tacatactat 180ccagggaagg agcgcgaggg ggtttctggt atttcaaccg gtggtcttat tacatactat 180
gccgactccg tgaagggccg attcaccatc tcccaagaca acaccaagaa cacgctgtat 240gccgactccg tgaagggccg attcaccatc tcccaagaca acaccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgaa acctgaggac actgccatgt actactgtgc gacgagtcgg 300ctgcaaatga acagcctgaa acctgaggac actgccatgt actactgtgc gacgagtcgg 300
tttgactgct atagaggctc ttggttcaac cgatatatgt ataacagttg gggccagggg 360tttgactgct atagaggctc ttggttcaac cgatatatgt ataacagttg gggccagggg 360
acccaggtca ccgtctcctc a 381acccaggtca ccgtctcctc a 381
<210> 40<210> 40
<211> 381<211> 381
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 40<400> 40
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggagggtc tctgagactc 60caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggagggtc tctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggagc caatggtggt cggagctgca tgggctggtt ccgccaggtt 120tcctgtgcag cctctggagc caatggtggt cggagctgca tgggctggtt ccgccaggtt 120
ccagggaagg agcgcgaggg ggtttctggt atttcaaccg gtggtcttat tacatactat 180ccagggaagg agcgcgaggg ggtttctggt atttcaaccg gtggtcttat tacatactat 180
gccgactccg tgaagggccg attcaccatc tcccaagaca acaccaagaa cacgctgtat 240gccgactccg tgaagggccg attcaccatc tcccaagaca acaccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgaa acctgaggac actgccatgt actactgtgc gacgagtcgg 300ctgcaaatga acagcctgaa acctgaggac actgccatgt actactgtgc gacgagtcgg 300
tttgactgct atagaggctc ttggttcaac cgatatatgt ataacagttg gggccagggg 360tttgactgct atagaggctc ttggttcaac cgatatatgt ataacagttg gggccagggg 360
acccaggtca ccgtctcctc a 381acccaggtca ccgtctcctc a 381
<210> 41<210> 41
<211> 378<211> 378
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 41<400> 41
gatgtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggagactc tctgagactc 60gatgtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcggtgcagg ctggagactc tctgagactc 60
tcctgtgtag cctctacata caccggctgc atgggctggt tccgccaggc tcctggaaag 120tcctgtgtag cctctacata caccggctgc atgggctggt tccgccaggc tcctggaaag 120
gagcgcgagg gagtcgcagc tcttagtagc cgtggttttg ccgggcacta taccgactcc 180gagcgcgagg gagtcgcagc tcttagtagc cgtggttttg ccgggcacta taccgactcc 180
gtgaagggcc gattctccat ctcccgagac tacgtcaaga atgcggtgta tctgcaaatg 240gtgaagggcc gattctccat ctcccgagac tacgtcaaga atgcggtgta tctgcaaatg 240
aacactgtga aacctgagga cgctgccatg tactactgtg cagcacggga gggatgggag 300aacactgtga aacctgagga cgctgccatg tactactgtg cagcacggga gggatgggag 300
tgcggtgaga cctggttgga ccggaccgcc gggggccata cctactgggg ccaggggacc 360tgcggtgaga cctggttgga ccggaccgcc gggggccata cctactgggg ccaggggacc 360
ctggtcactg tctcctca 378ctggtcactg tctcctca 378
<210> 42<210> 42
<211> 378<211> 378
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 42<400> 42
gtgcagctgg tggagtctgg gggaggctcg gtgcaggctg gagggtctct gagactctcc 60gtgcagctgg tggagtctgg gggaggctcg gtgcaggctg gagggtctct gagactctcc 60
tgtgcagcct ctggagccaa tggtggtcgg agctgcatgg gctggttccg ccaggttcca 120 tgtgcagcct ctggagccaa tggtggtcgg agctgcatgg gctggttccg ccaggttcca 120
gggaaggagc gtgagggggt ttctggtatt tcaaccggtg gtcttattac atactatgcc 180gggaagggagc gtgagggggt ttctggtatt tcaaccggtg gtcttattac atactatgcc 180
gactccgtga agggccgatt caccatctcc caagacaaca ccaagaacac gctgtatctg 240gactccgtga agggccgatt caccatctcc caagacaaca ccaagaacac gctgtatctg 240
caaatgaaca gcctgaaacc tgaggacact gccatgtact actgtgcgac gagtcggttt 300caaatgaaca gcctgaaacc tgaggacact gccatgtact actgtgcgac gagtcggttt 300
gactgctata gaggctcttg gttcaaccga tatatgtata acagttgggg ccaggggacc 360gactgctata gaggctcttg gttcaaccga tatatgtata acagttgggg ccaggggacc 360
ctggtcactg tctcctca 378ctggtcactg tctcctca 378
<210> 43<210> 43
<211> 378<211> 378
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 43<400> 43
gtgcagctgg tggagtctga gggaggctcg gtgcaggctg gagggtctct gagactctcc 60gtgcagctgg tggagtctga gggaggctcg gtgcaggctg gagggtctct gagactctcc 60
tgtgcagcct ctggagccaa tggtggtcgg agctgcatgg gctggttccg ccaggttcca 120tgtgcagcct ctggagccaa tggtggtcgg agctgcatgg gctggttccg ccaggttcca 120
gggaaggagc gcgagggggt ttctggtatt tcaaccggtg gtcttattac atactatgcc 180gggaagggagc gcgagggggt ttctggtatt tcaaccggtg gtcttattac atactatgcc 180
gactccgtga agggccgatt caccatctcc caagacaaca ccaagaacac gctgtatctg 240gactccgtga agggccgatt caccatctcc caagacaaca ccaagaacac gctgtatctg 240
caaatgaaca gcctgaaacc tgaggacact gccatgtact actgtgcgac gagtcggttt 300caaatgaaca gcctgaaacc tgaggacact gccatgtact actgtgcgac gagtcggttt 300
gactgctata gaggctcttg gttcaaccga tatatgtata acagttgggg ccaggggacc 360gactgctata gaggctcttg gttcaaccga tatatgtata acagttgggg ccaggggacc 360
ctggtcaccg tctcctca 378ctggtcaccg tctcctca 378
<210> 44<210> 44
<211> 378<211> 378
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 44<400> 44
gtgcagctgg tggagtctgg gggaggctcg gtgcaggctg gagggtctct gagactctcc 60gtgcagctgg tggagtctgg gggaggctcg gtgcaggctg gagggtctct gagactctcc 60
tgtgcagcct ctggagccaa tggtggtcgg agctgcatgg gctggttccg ccaggttcca 120tgtgcagcct ctggagccaa tggtggtcgg agctgcatgg gctggttccg ccaggttcca 120
gggaaggagc gcgagggggt ttctggtatt tcaaccggtg gtcttattac atactatgcc 180gggaagggagc gcgagggggt ttctggtatt tcaaccggtg gtcttattac atactatgcc 180
gactccgtga agggccgatt caccatctcc caagacaaca ccaataacac gctgtatctg 240gactccgtga agggccgatt caccatctcc caagacaaca ccaataacac gctgtatctg 240
caaatgaaca gcctgaaacc tgaggacact gccatgtact actgtgcgac gagtcggttt 300caaatgaaca gcctgaaacc tgaggacact gccatgtact actgtgcgac gagtcggttt 300
gactgctata gaggctcttg gttcaaccga tatatgtata acagttgggg ccaggggacc 360gactgctata gaggctcttg gttcaaccga tatatgtata acagttgggg ccaggggacc 360
ctggtcactg tctcctca 378ctggtcactg tctcctca 378
<210> 45<210> 45
<211> 123<211> 123
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 45<400> 45
His Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly GlyHis Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala TyrSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala Tyr
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Thr Ile Asp Ile Asp Gly Leu Thr Thr His Ala Asp Ser Val LysAla Thr Ile Asp Ile Asp Gly Leu Thr Thr His Ala Asp Ser Val Lys
50 55 6050 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser LeuGly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser Leu
65 70 75 8065 70 75 80
Gln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys AlaGln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 9585 90 95
Ala Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys TyrAla Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys Tyr
100 105 110100 105 110
Arg Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerArg Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 46<210> 46
<211> 124<211> 124
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 46<400> 46
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Leu Ala Gly GlyGlu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Leu Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Ser Arg Tyr AsnSer Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Ser Arg Tyr Asn
20 25 3020 25 30
Tyr Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValTyr Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Thr Ile Gly Thr Ala Ser Gly Ser Ala Asp Tyr Tyr Gly Ser ValAla Thr Ile Gly Thr Ala Ser Gly Ser Ala Asp Tyr Tyr Gly Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val TyrLys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Ala Arg Thr Tyr Gly Thr Ile Ser Leu Thr Pro Ser Asp Tyr ArgAla Ala Arg Thr Tyr Gly Thr Ile Ser Leu Thr Pro Ser Asp Tyr Arg
100 105 110100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerTyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 47<210> 47
<211> 129<211> 129
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 47<400> 47
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Pro Val Gln Ala Gly GluGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Pro Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr TyrSer Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr Tyr
50 55 6050 55 60
Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala LysAla Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr AlaAsn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala
85 90 9585 90 95
Val Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser AspVal Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Asp
100 105 110100 105 110
Tyr Cys Ser Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val SerTyr Cys Ser Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
115 120 125115 120 125
SerSer
<210> 48<210> 48
<211> 123<211> 123
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 48<400> 48
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly ArgGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly Arg
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala TyrSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala Tyr
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Thr Ile Asp Ile Asp Gly Gln Thr Thr His Ala Asp Ser Val LysAla Thr Ile Asp Ile Asp Gly Gln Thr Thr His Ala Asp Ser Val Lys
50 55 6050 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser LeuGly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser Leu
65 70 75 8065 70 75 80
Gln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys AlaGln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 9585 90 95
Ala Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys TyrAla Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys Tyr
100 105 110100 105 110
Arg Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerArg Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 49<210> 49
<211> 123<211> 123
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 49<400> 49
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly GlyGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala TyrSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala Tyr
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Thr Ile Asp Ile Asp Gly Gln Thr Thr His Ala Asp Ser Val LysAla Thr Ile Asp Ile Asp Gly Gln Thr Thr His Ala Asp Ser Val Lys
50 55 6050 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Val Lys Asn Thr Leu Ser LeuGly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Val Lys Asn Thr Leu Ser Leu
65 70 75 8065 70 75 80
Gln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys AlaGln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 9585 90 95
Ala Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys TyrAla Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys Tyr
100 105 110100 105 110
Arg Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerArg Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 50<210> 50
<211> 123<211> 123
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 50<400> 50
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly GlyGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala TyrSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala Tyr
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Thr Ile Asp Ile Asp Gly Leu Thr Thr His Ala Asp Ser Val LysAla Thr Ile Asp Ile Asp Gly Leu Thr Thr His Ala Asp Ser Val Lys
50 55 6050 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser LeuGly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser Leu
65 70 75 8065 70 75 80
Gln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys AlaGln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 9585 90 95
Ala Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys TyrAla Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys Tyr
100 105 110100 105 110
Arg Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerArg Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 51<210> 51
<211> 123<211> 123
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 51<400> 51
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly GlyGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala TyrSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala Tyr
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Thr Ile Asp Ile Asp Gly Gln Thr Thr His Ala Asp Ser Val LysAla Thr Ile Asp Ile Asp Gly Gln Thr Thr His Ala Asp Ser Val Lys
50 55 6050 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser LeuGly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser Leu
65 70 75 8065 70 75 80
Gln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys AlaGln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 9585 90 95
Ala Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys TyrAla Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys Tyr
100 105 110100 105 110
Arg Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerArg Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 52<210> 52
<211> 123<211> 123
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 52<400> 52
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly GlyGlu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala TyrSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala Tyr
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Thr Ile Asp Ile Asp Gly Gln Thr Thr His Ala Asp Ser Val LysAla Thr Ile Asp Ile Asp Gly Gln Thr Thr His Ala Asp Ser Val Lys
50 55 6050 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser LeuGly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser Leu
65 70 75 8065 70 75 80
Gln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys AlaGln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 9585 90 95
Ala Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys TyrAla Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys Tyr
100 105 110100 105 110
Arg Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerArg Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 53<210> 53
<211> 123<211> 123
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 53<400> 53
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly GlyGlu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala TyrSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala Tyr
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Thr Ile Asp Ile Asp Gly Leu Thr Thr His Ala Asp Ser Val LysAla Thr Ile Asp Ile Asp Gly Leu Thr Thr His Ala Asp Ser Val Lys
50 55 6050 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser LeuGly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser Leu
65 70 75 8065 70 75 80
Gln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys AlaGln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 9585 90 95
Ala Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys TyrAla Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys Tyr
100 105 110100 105 110
Arg Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerArg Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 54<210> 54
<211> 123<211> 123
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 54<400> 54
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly GlyAsp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala TyrSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala Tyr
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Thr Ile Asp Ile Asp Gly Gln Thr Thr His Ala Asp Ser Val LysAla Thr Ile Asp Ile Asp Gly Gln Thr Thr His Ala Asp Ser Val Lys
50 55 6050 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser LeuGly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser Leu
65 70 75 8065 70 75 80
Gln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys AlaGln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 9585 90 95
Ala Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys TyrAla Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys Tyr
100 105 110100 105 110
Arg Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerArg Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 55<210> 55
<211> 123<211> 123
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 55<400> 55
His Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly GlyHis Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala TyrSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala Tyr
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Thr Ile Asp Ile Asp Gly Leu Thr Thr His Ala Asp Ser Val LysAla Thr Ile Asp Ile Asp Gly Leu Thr Thr His Ala Asp Ser Val Lys
50 55 6050 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser LeuGly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser Leu
65 70 75 8065 70 75 80
Gln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys AlaGln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 9585 90 95
Ala Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys TyrAla Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys Tyr
100 105 110100 105 110
Arg Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerArg Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 56<210> 56
<211> 123<211> 123
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 56<400> 56
His Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly GlyHis Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala TyrSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala Tyr
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Thr Ile Asp Ile Asp Gly Leu Ala Thr His Ala Asp Ser Val LysAla Thr Ile Asp Ile Asp Gly Leu Ala Thr His Ala Asp Ser Val Lys
50 55 6050 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser LeuGly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser Leu
65 70 75 8065 70 75 80
Gln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys AlaGln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 9585 90 95
Ala Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys TyrAla Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys Tyr
100 105 110100 105 110
Arg Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerArg Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 57<210> 57
<211> 123<211> 123
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 57<400> 57
His Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly GlyHis Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Glu Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala TyrSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala Tyr
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Arg Lys Glu Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Arg Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Thr Ile Asp Ile Asp Gly Gln Thr Thr His Ala Asp Ser Val LysAla Thr Ile Asp Ile Asp Gly Gln Thr Thr His Ala Asp Ser Val Lys
50 55 6050 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser LeuGly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser Leu
65 70 75 8065 70 75 80
Gln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys AlaGln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 9585 90 95
Ala Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys TyrAla Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys Tyr
100 105 110100 105 110
Arg Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerArg Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 58<210> 58
<211> 123<211> 123
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 58<400> 58
His Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyHis Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala TyrSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Ala Ala Tyr
20 25 3020 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Val Arg Glu Gly ValCys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Asp Gly Lys Val Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Thr Ile Asp Ile Asp Gly Gln Thr Thr His Ala Asp Ser Val LysAla Thr Ile Asp Ile Asp Gly Gln Thr Thr His Ala Asp Ser Val Lys
50 55 6050 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser LeuGly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Ser Leu
65 70 75 8065 70 75 80
Gln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys AlaGln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 9585 90 95
Ala Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys TyrAla Asp Arg Asp Arg Cys Gly Ser Ile Trp Thr Tyr Ala Tyr Lys Tyr
100 105 110100 105 110
Arg Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerArg Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 59<210> 59
<211> 123<211> 123
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 59<400> 59
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ile Asp Ser Phe GlySer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ile Asp Ser Phe Gly
20 25 3020 25 30
Val Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValVal Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Ala Val Tyr Arg Arg Ala Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValAla Ala Val Tyr Arg Arg Ala Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Ser Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Ser Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Ala Arg Thr Tyr Gly Ser Val Ser Ser Trp Thr Gly Tyr Lys TyrAla Ala Arg Thr Tyr Gly Ser Val Ser Ser Trp Thr Gly Tyr Lys Tyr
100 105 110100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerTrp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 60<210> 60
<211> 123<211> 123
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 60<400> 60
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyAsp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ile Asp Ser Phe GlySer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ile Asp Ser Phe Gly
20 25 3020 25 30
Val Met Ala Trp Phe Arg Gln Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValVal Met Ala Trp Phe Arg Gln Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Ala Val Tyr Arg Arg Ala Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValAla Ala Val Tyr Arg Arg Ala Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Ser Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Ser Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Ala Arg Thr Tyr Gly Ser Val Ser Ser Trp Thr Gly Tyr Lys TyrAla Ala Arg Thr Tyr Gly Ser Val Ser Ser Trp Thr Gly Tyr Lys Tyr
100 105 110100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerTrp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 61<210> 61
<211> 123<211> 123
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 61<400> 61
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Val Gly GlyAsp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Val Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Tyr Thr Asp Ser Tyr GlySer Leu Thr Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Tyr Thr Asp Ser Tyr Gly
20 25 3020 25 30
Val Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValVal Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Ser Ile Tyr Arg Asn Ser Gly Ile Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser ValAla Ser Ile Tyr Arg Asn Ser Gly Ile Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val LeuLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Leu
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Ser Ala Thr Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Ser Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Val Arg Ser Phe Gly Ser Val Ser Thr Trp Ala Gly Tyr Val TyrAla Val Arg Ser Phe Gly Ser Val Ser Thr Trp Ala Gly Tyr Val Tyr
100 105 110100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerTrp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 62<210> 62
<211> 123<211> 123
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 62<400> 62
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GlyAsp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ile Asp Ser Phe GlySer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ile Asp Ser Phe Gly
20 25 3020 25 30
Val Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValVal Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Ala Val Tyr Arg Arg Ala Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser ValAla Ala Val Tyr Arg Arg Ala Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val TyrLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Ser Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Ser Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Ala Arg Thr Tyr Gly Ser Val Ser Ser Trp Thr Gly Tyr Lys TyrAla Ala Arg Thr Tyr Gly Ser Val Ser Ser Trp Thr Gly Tyr Lys Tyr
100 105 110100 105 110
Trp Gly Arg Gly Thr Gln Val Thr Val Ser SerTrp Gly Arg Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 63<210> 63
<211> 125<211> 125
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 63<400> 63
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Arg Ala Gly GlyAsp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Arg Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Asp Thr Ser Lys Ser AspSer Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Asp Thr Ser Lys Ser Asp
20 25 3020 25 30
Cys Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Arg ValCys Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Arg Val
35 40 4535 40 45
Gly Ala Ile Tyr Thr Arg Asn Gly Tyr Thr His Tyr Ala Asp Ser ValGly Ala Ile Tyr Thr Arg Asn Gly Tyr Thr His Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 6050 55 60
Asn Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Ala Lys Asn Ala Leu TyrAsn Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Ala Lys Asn Ala Leu Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Ser Gly Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Ser Gly Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Ala Arg Phe Arg Ile Tyr Gly Gln Cys Val Glu Asp Asp Asp IleAla Ala Arg Phe Arg Ile Tyr Gly Gln Cys Val Glu Asp Asp Asp Ile
100 105 110100 105 110
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerAsp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 64<210> 64
<211> 124<211> 124
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 64<400> 64
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Leu Ala Gly GlyGlu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Leu Ala Gly Gly
1 5 10 151 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Ser Arg Tyr AsnSer Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Ser Arg Tyr Asn
20 25 3020 25 30
Tyr Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly ValTyr Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 4535 40 45
Ala Thr Ile Gly Thr Ala Ser Gly Ser Ala Asp Tyr Tyr Gly Ser ValAla Thr Ile Gly Thr Ala Ser Gly Ser Ala Asp Tyr Tyr Gly Ser Val
50 55 6050 55 60
Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val TyrLys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 8065 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr CysLeu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 9585 90 95
Ala Ala Arg Thr Tyr Gly Thr Ile Ser Leu Thr Pro Ser Asp Tyr ArgAla Ala Arg Thr Tyr Gly Thr Ile Ser Leu Thr Pro Ser Asp Tyr Arg
100 105 110100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerTyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120115 120
<210> 65<210> 65
<211> 128<211> 128
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 65<400> 65
Gln Val Gln Val Val Glu Tyr Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GluGln Val Gln Val Val Glu Tyr Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Val Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Val Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Trp Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Trp Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Asn Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Ser TyrSer Asn Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Ser Tyr
50 55 6050 55 60
Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Phe Asp Asn Ala Lys AsnAla Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Phe Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 8065 70 75 80
Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys His Glu Asp Thr Ala ValMet Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys His Glu Asp Thr Ala Val
85 90 9585 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Arg Glu TyrTyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Arg Glu Tyr
100 105 110100 105 110
Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerCys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 66<210> 66
<211> 129<211> 129
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 66<400> 66
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Pro Val Gln Ala Gly GluGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Pro Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr TyrSer Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr Tyr
50 55 6050 55 60
Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala LysAla Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr AlaAsn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala
85 90 9585 90 95
Val Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser AspVal Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Asp
100 105 110100 105 110
Tyr Cys Ser Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val SerTyr Cys Ser Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
115 120 125115 120 125
SerSer
<210> 67<210> 67
<211> 129<211> 129
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 67<400> 67
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GluGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr TyrSer Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr Tyr
50 55 6050 55 60
Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala LysAla Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr AlaAsn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala
85 90 9585 90 95
Val Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser AspVal Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Asp
100 105 110100 105 110
Tyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val SerTyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
115 120 125115 120 125
SerSer
<210> 68<210> 68
<211> 129<211> 129
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 68<400> 68
Gln Val Gln Pro Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GluGln Val Gln Pro Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr TyrSer Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr Tyr
50 55 6050 55 60
Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala LysAla Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr AlaAsn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala
85 90 9585 90 95
Val Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser AspVal Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Asp
100 105 110100 105 110
Tyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Ala Gln Gly Thr Leu Val Thr Val SerTyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Ala Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
115 120 125115 120 125
SerSer
<210> 69<210> 69
<211> 129<211> 129
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 69<400> 69
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GluGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr TyrSer Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr Tyr
50 55 6050 55 60
Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala LysAla Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr AlaAsn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala
85 90 9585 90 95
Val Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser AspVal Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Asp
100 105 110100 105 110
Tyr Cys Ser Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Gln Val Thr Val SerTyr Cys Ser Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser
115 120 125115 120 125
SerSer
<210> 70<210> 70
<211> 129<211> 129
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 70<400> 70
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GluGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr TyrSer Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr Tyr
50 55 6050 55 60
Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala LysAla Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr AlaAsn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala
85 90 9585 90 95
Val Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser AspVal Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Asp
100 105 110100 105 110
Tyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Gln Val Thr Val SerTyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser
115 120 125115 120 125
SerSer
<210> 71<210> 71
<211> 129<211> 129
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 71<400> 71
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GluGln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr TyrSer Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr Tyr
50 55 6050 55 60
Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala LysAla Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr AlaAsn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala
85 90 9585 90 95
Val Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser AspVal Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Asp
100 105 110100 105 110
Tyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val SerTyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
115 120 125115 120 125
SerSer
<210> 72<210> 72
<211> 129<211> 129
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 72<400> 72
His Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GluHis Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr TyrSer Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr Tyr
50 55 6050 55 60
Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala LysAla Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr AlaAsn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala
85 90 9585 90 95
Val Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser AspVal Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Asp
100 105 110100 105 110
Tyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Gln Val Thr Val SerTyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser
115 120 125115 120 125
SerSer
<210> 73<210> 73
<211> 129<211> 129
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 73<400> 73
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GluGlu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr TyrSer Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr Tyr
50 55 6050 55 60
Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala LysAla Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr AlaAsn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala
85 90 9585 90 95
Val Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser AspVal Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Asp
100 105 110100 105 110
Tyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Ala Leu Val Thr Val SerTyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Ala Leu Val Thr Val Ser
115 120 125115 120 125
SerSer
<210> 74<210> 74
<211> 129<211> 129
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 74<400> 74
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GluGlu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr TyrSer Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr Tyr
50 55 6050 55 60
Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala LysAla Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr AlaAsn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala
85 90 9585 90 95
Val Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser AspVal Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Asp
100 105 110100 105 110
Tyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val SerTyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
115 120 125115 120 125
SerSer
<210> 75<210> 75
<211> 129<211> 129
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 75<400> 75
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GluGlu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr TyrSer Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr Tyr
50 55 6050 55 60
Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala LysAla Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr AlaAsn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala
85 90 9585 90 95
Val Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser AspVal Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Asp
100 105 110100 105 110
Tyr Cys Ser Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Gln Val Thr Val SerTyr Cys Ser Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser
115 120 125115 120 125
SerSer
<210> 76<210> 76
<211> 129<211> 129
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 76<400> 76
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GluGlu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr TyrSer Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr Tyr
50 55 6050 55 60
Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala LysAla Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr AlaAsn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala
85 90 9585 90 95
Val Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser AspVal Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Asp
100 105 110100 105 110
Tyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Gln Val Thr Val SerTyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser
115 120 125115 120 125
SerSer
<210> 77<210> 77
<211> 129<211> 129
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 77<400> 77
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Arg Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GluAsp Val Gln Leu Val Glu Ser Arg Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr TyrSer Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr Tyr
50 55 6050 55 60
Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala LysAla Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr AlaAsn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala
85 90 9585 90 95
Val Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser AspVal Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Asp
100 105 110100 105 110
Tyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val SerTyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
115 120 125115 120 125
SerSer
<210> 78<210> 78
<211> 129<211> 129
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 78<400> 78
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GluAsp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Val Cys Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Val Cys Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr TyrSer Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr Tyr
50 55 6050 55 60
Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala LysAla Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr AlaAsn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala
85 90 9585 90 95
Val Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser AspVal Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Asp
100 105 110100 105 110
Tyr Cys Ser Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Gln Val Thr Val SerTyr Cys Ser Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser
115 120 125115 120 125
SerSer
<210> 79<210> 79
<211> 128<211> 128
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 79<400> 79
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GluAsp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Leu Glu Cys Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Leu Glu Cys Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr AlaSer Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr Ala
50 55 6050 55 60
Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys AsnAsp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 8065 70 75 80
Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala ValMet Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val
85 90 9585 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Glu TyrTyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Glu Tyr
100 105 110100 105 110
Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerCys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125115 120 125
<210> 80<210> 80
<211> 129<211> 129
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 80<400> 80
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GluAsp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr TyrSer Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Glu Ala Ser Ser Tyr Tyr
50 55 6050 55 60
Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala LysAla Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr AlaAsn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala
85 90 9585 90 95
Val Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser AspVal Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Asp
100 105 110100 105 110
Tyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val SerTyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
115 120 125115 120 125
SerSer
<210> 81<210> 81
<211> 129<211> 129
<212> PRT<212>PRT
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220><220>
<223> Верблюдовые<223> Camelids
<400> 81<400> 81
Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly GluAsp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 151 5 10 15
Thr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu AlaThr Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Glu Ala
20 25 3020 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu ValAsp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly His Glu Cys Glu Leu Val
35 40 4535 40 45
Ser Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Val Ala Ser Ser Tyr TyrSer Thr Ile Thr Thr Glu Gly Ile Thr Ser Val Ala Ser Ser Tyr Tyr
50 55 6050 55 60
Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala LysAla Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
65 70 75 8065 70 75 80
Asn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr AlaAsn Met Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala
85 90 9585 90 95
Val Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser AspVal Tyr Tyr Cys Ala Pro Asp Pro Tyr Ala Tyr Ser Thr Tyr Ser Asp
100 105 110100 105 110
Tyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Gln Val Thr Val SerTyr Cys Thr Trp Ala Gln Gly Thr Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser
115 120 125115 120 125
SerSer
<---<---
Claims (12)
Applications Claiming Priority (8)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US61/148,656 | 2009-01-30 | ||
US201462067908P | 2014-10-23 | 2014-10-23 | |
US62/067,908 | 2014-10-23 | ||
US201561148656P | 2015-04-16 | 2015-04-16 | |
US201562188353P | 2015-07-02 | 2015-07-02 | |
US62/188,353 | 2015-07-02 | ||
US201562210795P | 2015-08-27 | 2015-08-27 | |
US62/210,795 | 2015-08-27 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2017116710A Division RU2017116710A (en) | 2014-10-23 | 2015-10-23 | SINGLE-DOMAIN ANTIBODIES AIMED AGAINST EXTRACELLULAR ANTIGENES |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2019101598A RU2019101598A (en) | 2019-07-01 |
RU2810002C2 true RU2810002C2 (en) | 2023-12-21 |
Family
ID=
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2011097480A1 (en) * | 2010-02-05 | 2011-08-11 | University Of Louisville Research Foundation, Inc. | Exosomal compositions and methods for the treatment of disease |
RU2489148C2 (en) * | 2006-10-02 | 2013-08-10 | Оцука Фармасьютикал Ко., Лтд. | Stat3/5 activation inhibitor |
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2489148C2 (en) * | 2006-10-02 | 2013-08-10 | Оцука Фармасьютикал Ко., Лтд. | Stat3/5 activation inhibitor |
WO2011097480A1 (en) * | 2010-02-05 | 2011-08-11 | University Of Louisville Research Foundation, Inc. | Exosomal compositions and methods for the treatment of disease |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
WO 2004080394 A2,. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7195400B2 (en) | Single domain antibodies directed against intracellular antigens | |
RU2810002C2 (en) | Single-domain antibodies against intracellular antigens | |
US9850321B2 (en) | Single domain antibodies directed against intracellular antigens |