RU2809621C2

RU2809621C2 - L718 and/or l792 mutant inhibitor of treatment-resistant egfr

Info

Publication number: RU2809621C2
Application number: RU2021122146A
Authority: RU
Inventors: Синити ХАСАКО; Такао УНО
Original assignee: Тайхо Фармасьютикал Ко., Лтд.
Priority date: 2018-12-28
Filing date: 2019-12-27
Publication date: 2023-12-13

Abstract

FIELD: biotechnology; medicine.

SUBSTANCE: invention discloses a new antitumor agent containing (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizin-8-yl) acrylamide (compound (A) or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

EFFECT: invention may be used to the treatment of a patient having a resistant malignant tumor expressing a mutant EGFR having at least one mutation selected from the group L792H, L792F, L792Y and L718Q.

21 cl, 1 ex, 1 tbl, 1 dwg

Description

Область техникиField of technology

[0001][0001]

Настоящее изобретение относится к противоопухолевому агенту для лечения злокачественных новообразований, содержащему резистентный к лечению мутантный рецептор эпидермального фактора роста экзона 18 и/или экзона 20 (далее именуемый «EGFR»).The present invention relates to an antitumor agent for the treatment of malignancies containing a treatment-resistant mutant epidermal growth factor receptor exon 18 and/or exon 20 (hereinafter referred to as “EGFR”).

Предпосылки изобретенияBACKGROUND OF THE INVENTION

[0002][0002]

EGFR представляет собой тирозинкиназу рецепторного типа, которая выполняет свою физиологическую функцию в нормальной ткани, связываясь с эпидермальным фактором роста (далее также называемым EGF), который является лигандом и способствует ингибированию роста и апоптоза в эпителиальных тканях (НПЛ 1). Кроме того, соматическая мутация гена EGFR известна как ген, вызывающий злокачественное новообразование; например, EGFR, в котором кодоны с 746 по 750 в экзоне 19 удалены (в дальнейшем также называемые «мутацией с делецией экзона 19»), и EGFR, в котором лейцин, кодируемый кодоном 858 в экзоне 21, мутирован в аргинин (далее также именуемый как «мутация L858R») постоянно индуцирует EGF-независимую киназную активность и способствует росту и выживанию раковых клеток (НПЛ 2). Эти мутации наблюдаются, например, в 30-50% случаев немелкоклеточного рака легкого в Восточной Азии. Мутации также наблюдаются примерно в 10% случаев немелкоклеточного рака легкого в Европе и США и считаются одной из причин рака (НПЛ 3).EGFR is a receptor-type tyrosine kinase that performs its physiological function in normal tissue by binding to epidermal growth factor (hereinafter also referred to as EGF), which is a ligand and promotes growth inhibition and apoptosis in epithelial tissues (EGF 1). In addition, somatic mutation of the EGFR gene is known as a malignancy-causing gene; for example, EGFR in which codons 746 to 750 in exon 19 are deleted (hereinafter also referred to as “exon 19 deletion mutation”), and EGFR in which the leucine encoded by codon 858 in exon 21 is mutated to arginine (hereinafter also referred to as known as the “L858R mutation”) consistently induces EGF-independent kinase activity and promotes the growth and survival of cancer cells (NPL 2). These mutations are observed, for example, in 30-50% of cases of non-small cell lung cancer in East Asia. Mutations are also observed in approximately 10% of non-small cell lung cancer cases in Europe and the United States and are considered to be one of the causes of cancer (NSCL 3).

[0003][0003]

Таким образом, активно ведутся исследования и разработки ингибитора EGFR в качестве противоопухолевого агента, который используется для лечения различных видов рака легких с положительным результатом мутации EGFR (НПЛ 2 и НПЛ 4). В качестве терапевтических агентов в отношении EGFR-позитивного мутантного рака легких с делецией экзона 19 и мутантного L858R использовались гефитиниб, эрлотиниб и афатиниб. 90% мутации EGFR составляют мутация с делецией экзона 19 и мутация L858R. Кроме того, было известно возникновение приобретенной резистентности в процессе лечения с использованием этих агентов, и 50% ее вызвано мутацией резистентности EGFR, в которой кодон 790 экзона 20 заменен с треонина на метионин (в дальнейшем также называемая «мутацией T790M»). Для лечения рака легких с этой мутацией в качестве терапевтического средства использовался осимертиниб. Таким образом, лечение с использованием ингибиторов EGFR пациентов с раком легких, имеющих основные мутации EGFR, находится в процессе разработки.Therefore, research and development of EGFR inhibitor as an antitumor agent is actively underway, which is used to treat various EGFR mutation-positive lung cancers (NPL 2 and NPL 4). Gefitinib, erlotinib, and afatinib have been used as therapeutic agents for EGFR-positive exon 19 deletion and L858R mutant lung cancer. 90% of EGFR mutations are the exon 19 deletion mutation and the L858R mutation. In addition, acquired resistance has been known to occur during treatment with these agents, and 50% of it is caused by an EGFR resistance mutation in which codon 790 of exon 20 is changed from threonine to methionine (hereinafter also referred to as the “T790M mutation”). Osimertinib has been used as a therapeutic agent to treat lung cancer with this mutation. Thus, treatment using EGFR inhibitors for lung cancer patients harboring core EGFR mutations is under development.

Список цитированной литературыList of cited literature

Патентная литератураPatent literature

[0004][0004]

[ПТЛ 1][PTL 1]

WO2015/175632A1WO2015/175632A1

[ПТЛ 2][PTL 2]

WO2015/025936A1WO2015/025936A1

Непатентная литератураNon-patent literature

[0005][0005]

[НПЛ 1][NPL 1]

Nat. Rev. Cancer, vol. 6, pp. 803-812 (2006)Nat. Rev. Cancer, vol. 6, pp. 803-812 (2006)

[НПЛ 2][NPL 2]

Nature Medicine, vol. 19, pp. 1389-1400 (2013)Nature Medicine, vol. 19, pp. 1389-1400 (2013)

[НПЛ 3][NPL 3]

Nat. Rev. Cancer, vol. 7, pp. 169-181 (2007)Nat. Rev. Cancer, vol. 7, pp. 169-181 (2007)

[НПЛ 4][NPL 4]

Clin. Cancer Res., vol. 24, pp. 3097-3107 (2018)Clin. Cancer Res., vol. 24, pp. 3097-3107 (2018)

Сущность изобретенияThe essence of the invention

Техническая задачаTechnical challenge

[0006][0006]

В настоящее время разрабатываются методы лечения с использованием ингибиторов EGFR пациентов с раком легких, имеющих основные мутации EGFR. В то же время известно также о наличии пациентов, резистентных к лечению осимертинибом. Сообщается, что некоторыми причинами этого являются мутации гена EGFR (НПЛ 4). Было подтверждено, например, что, резистентным к лечению осимертинибом является рак легкого, имеющий в дополнение к мутации с делецией экзона 19 или мутации L858R, обе из которых являются мутациями de novo, и мутацию T790M, которая является мутацией приобретенной резистентности, точечной мутацией, при которой лейцин, кодируемый кодоном 718 в экзоне 18 заменен произвольной аминокислотой (далее также называемой «мутация L718X») или точечной мутацией, при которой лейцин, кодируемый кодоном 792 в экзоне 20, был заменен произвольной аминокислотой (далее также называемой «мутация L792X»). Предполагается, что аминокислотная замена, вызванная мутацией L718X или L792X, вызывает стерические затруднения и снижение гидрофобного связывания, тем самым предотвращая связывание EGFR с осимертинибом (НПЛ 4). Соответственно, существует потребность в разработке ингибиторов, обладающих высокой ингибирующей активностью в отношении EGFR, имеющих гибридную мутацию из активной мутации de novo, мутации приобретенной резистентности T790M и мутации L718X или мутации L792X.Treatments using EGFR inhibitors are currently being developed for patients with lung cancer who have underlying EGFR mutations. At the same time, it is also known that there are patients resistant to osimertinib treatment. Some causes of this have been reported to be mutations in the EGFR gene (NPL 4). It has been confirmed, for example, that lung cancer that is resistant to osimertinib treatment is one that has, in addition to the exon 19 deletion mutation or the L858R mutation, both of which are de novo mutations, and the T790M mutation, which is an acquired resistance mutation, a point mutation, in which the leucine encoded by codon 718 in exon 18 is replaced by a random amino acid (hereinafter also referred to as the “L718X mutation”) or a point mutation in which the leucine encoded by codon 792 in exon 20 is replaced by a random amino acid (hereinafter also referred to as the “L792X mutation”). The amino acid substitution caused by the L718X or L792X mutation is predicted to cause steric hindrance and reduced hydrophobic binding, thereby preventing EGFR binding to osimertinib (NPL 4). Accordingly, there is a need to develop inhibitors having high inhibitory activity against EGFR having a hybrid mutation of the active de novo mutation, the acquired resistance mutation T790M and the L718X mutation or the L792X mutation.

[0007][0007]

Таким образом, предполагается, что разработка лекарств, обладающих высокой ингибирующей активностью в отношении EGFR, имеющего гибридную мутацию, включающую L718X или L792X, сделает возможным проявление противоопухолевых эффектов в отношении рака легких, резистентного к лечению осимертинибом, и, как ожидается, будет способствовать продлению жизни и улучшению качества жизни мутантных EGFR-положительных онкологических пациентов, для которых лечение не было разработано. Кроме того, ожидается, что лекарство, обладающее высокой ингибирующей активностью в отношении T790M, который представляет собой приобретенную мутацию резистентности в отношении лечения с использованием ингибиторов EGFR, снизит частоту проявления приобретенной резистентности в процессе лечения с использованием ингибиторов EGFR в отношении экзона 19 или мутантного экзона 21 EGFR, который является мутацией de novo; и поэтому ожидается, что он будет способствовать продлению жизни больных раком.Thus, it is expected that the development of drugs with potent inhibitory activity against EGFR harboring a hybrid mutation involving L718X or L792X will enable antitumor effects against osimertinib-resistant lung cancer and is expected to prolong life. and improving the quality of life of EGFR mutant-positive cancer patients for whom no treatment has been developed. In addition, a drug with strong inhibitory activity against T790M, which is an acquired resistance mutation for treatment with EGFR inhibitors, is expected to reduce the incidence of acquired resistance during treatment with EGFR inhibitors against exon 19 or mutant exon 21 EGFR, which is a de novo mutation; and therefore is expected to help prolong the life of cancer patients.

[0008][0008]

При таких обстоятельствах целью настоящего изобретения является предоставление ингибитора, который обладает высокой ингибирующей активностью в отношении EGFR, имеющего мутации L718 и L792, являющиеся мутацией, резистентной к лечению осимертинибом, и для которого терапевтические эффекты ранее известных ингибиторов EGFR являются недостаточными.Under such circumstances, the object of the present invention is to provide an inhibitor that has high inhibitory activity against EGFR having mutations L718 and L792, which are a mutation resistant to osimertinib treatment, and for which the therapeutic effects of previously known EGFR inhibitors are insufficient.

Решение задачиThe solution of the problem

[0009][0009]

Авторы настоящего изобретения провели обширное исследование и обнаружили, что ингибиторы EGFR, традиционно вводимые для лечения, обладают плохой ингибирующей активностью в отношении гибридного мутантного EGFR, содержащего мутации L718 и L792, в дополнение к активной мутации и мутации T790M приобретенной резистентности. Кроме того, авторы настоящего изобретения провели обширные исследования, начиная со сравнения сокристаллических структур соединений, и также обнаружили, что соединение по настоящему изобретению проявляет превосходную ингибирующую активность в отношении EGFR, имеющего мутации L718 и L792, и, кроме того, демонстрирует превосходную ингибирующую активность в отношении вышеуказанного гибридного мутантного EGFR. Сделав это открытие, изобретатели разработали настоящее изобретение.The present inventors have conducted extensive research and found that EGFR inhibitors traditionally administered for treatment have poor inhibitory activity against the hybrid mutant EGFR containing the L718 and L792 mutations, in addition to the active mutation and the T790M acquired resistance mutation. In addition, the inventors of the present invention have conducted extensive studies, starting from comparison of co-crystal structures of the compounds, and have also found that the compound of the present invention exhibits excellent inhibitory activity against EGFR having mutations L718 and L792, and furthermore exhibits excellent inhibitory activity in regarding the above hybrid mutant EGFR. Having made this discovery, the inventors developed the present invention.

[0010][0010]

Настоящее изобретение охватывает следующие варианты осуществления.The present invention covers the following embodiments.

[0011][0011]

Пункт 1.Paragraph 1.

Противоопухолевый агент для лечения пациента, имеющего злокачественную опухоль, экспрессирующую EGFR, имеющего по меньшей мере одну мутацию, выбранную из группы, включающей мутацию L718X в экзоне 18 и мутацию L792X в экзоне 20, где X представляет собой произвольный аминокислотный остаток, противоопухолевый агент, содержащий (S)-N-(4-амино-6-метил-5-(хинолин-3-ил)-8,9-дигидропиримидо[5,4-b]индолизин-8-ил)акриламид (соединение (A)) или его соль.An antineoplastic agent for treating a patient having an EGFR-expressing cancer having at least one mutation selected from the group consisting of the L718X mutation in exon 18 and the L792X mutation in exon 20, where X is a random amino acid residue, an antineoplastic agent containing ( S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide (compound (A)) or its salt.

[0012][0012]

Пункт 2.Point 2.

Противоопухолевый агент в соответствии с пунктом 1, где EGFR дополнительно имеет по меньшей мере одну мутацию, выбранную из группы, включающей мутацию с делецией экзона, L858R, L861Q, G719X, E709X и мутацию вставки экзона 20.The antitumor agent according to claim 1, wherein the EGFR further has at least one mutation selected from the group consisting of an exon deletion mutation, L858R, L861Q, G719X, E709X, and an exon 20 insertion mutation.

[0013][0013]

Пункт 3.Point 3.

Противоопухолевый агент в соответствии с пунктом 2, где EGFR дополнительно имеет мутацию T790M.The antitumor agent according to claim 2, wherein the EGFR additionally has the T790M mutation.

[0014][0014]

Пункт 4.Point 4.

Противоопухолевый агент в соответствии с любым из пунктов 1-3, где мутацией L718X является мутация L718Q.An antitumor agent according to any one of claims 1 to 3, wherein the L718X mutation is the L718Q mutation.

[0015][0015]

Пункт 5.Point 5.

Противоопухолевый агент в соответствии с любым из пунктов 1-4, где мутация L792X представляет собой L792H, L792F или L792Y.An antitumor agent according to any of claims 1-4, wherein the L792X mutation is L792H, L792F or L792Y.

[0016][0016]

Пункт 6.Point 6.

Способ лечения пациента, имеющего злокачественную опухоль, включающий стадию введения (S)-N-(4-амино-6-метил-5-(хинолин-3-ил)-8,9-дигидропиримидо[5,4-b]индолизин-8-ил)акриламида или его соли пациенту, имеющему злокачественную опухоль, экспрессирующую EGFR, имеющим по крайней мере одну мутацию, выбранную из группы, включающей мутацию L718X в экзоне 18 и мутацию L792X в экзоне 20.A method of treating a patient with a malignant tumor, including the step of administering (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizine- 8-yl)acrylamide or a salt thereof to a patient with an EGFR-expressing cancer having at least one mutation selected from the group consisting of the L718X mutation in exon 18 and the L792X mutation in exon 20.

[0017][0017]

Пункт 7.Point 7.

(S)-N-(4-Амино-6-метил-5-(хинолин-3-ил)-8,9-дигидропиримидо[5,4-b]индолизин-8-ил)акриламид или его соль для лечения пациента, имеющего злокачественную опухоль, экспрессирующую EGFR, имеющего по меньшей мере одну мутацию, выбранную из группы, включающей мутацию L718X в экзоне 18 и мутацию L792X в экзоне 20.(S)-N-(4-Amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide or a salt thereof for the treatment of a patient having a malignant tumor expressing EGFR, having at least one mutation selected from the group consisting of the L718X mutation in exon 18 and the L792X mutation in exon 20.

[0018][0018]

Пункт 8.Point 8.

Применение (S)-N-(4-амино-6-метил-5-(хинолин-3-ил)-8,9-дигидропиримидо[5,4-b]индолизин-8-ил)акриламида или его соли для лечения пациента, имеющего злокачественную опухоль, экспрессирующую EGFR, имеющего по меньшей мере одну мутацию, выбранную из группы, включающей мутацию L718X в экзоне 18 и мутацию L792X в экзоне 20.Use of (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide or its salt for treatment a patient having a cancer expressing EGFR, having at least one mutation selected from the group consisting of the L718X mutation in exon 18 and the L792X mutation in exon 20.

[0019][0019]

Пункт 9.Point 9.

Применение (S)-N-(4-амино-6-метил-5-(хинолин-3-ил)-8,9-дигидропиримидо[5,4-b]индолизин-8-ил)акриламида или его соли при изготовлении фармацевтического агента для лечения пациента, имеющего злокачественную опухоль, экспрессирующую EGFR, имеющего по меньшей мере одну мутацию, выбранную из группы, включающей мутацию L718X в экзоне 18 и мутацию L792X в экзоне 20.Use of (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide or its salt in the manufacture a pharmaceutical agent for treating a patient having a cancer expressing EGFR having at least one mutation selected from the group consisting of the L718X mutation in exon 18 and the L792X mutation in exon 20.

[0020][0020]

Пункт 10.Point 10.

Фармацевтическая композиция, содержащая (S)-N-(4-амино-6-метил-5-(хинолин-3-ил)-8,9-дигидропиримидо[5,4-b]индолизин-8-ил)акриламид или его соль и фармацевтически приемлемый носитель, для лечения пациента, имеющего злокачественную опухоль, экспрессирующую EGFR, имеющего по меньшей мере одну мутацию, выбранную из группы, включающей мутацию L718X в экзоне 18 и мутацию L792X в экзоне 20, где X представляет собой произвольный аминокислотный остаток.Pharmaceutical composition containing (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide or its a salt and a pharmaceutically acceptable carrier, for treating a patient having a cancer expressing EGFR having at least one mutation selected from the group consisting of the L718X mutation in exon 18 and the L792X mutation in exon 20, where X is a random amino acid residue.

[0021][0021]

Пункт 11.Point 11.

Способ прогнозирования терапевтических эффектов химиотерапии с использованием противоопухолевого агента, содержащего в качестве активного ингредиента (S)-N-(4-амино-6-метил-5-(хинолин-3-ил)-8,9-дигидропиримидо[5,4-b]индолизин-8-ил)акриламид или его соль, у пациента, имеющего злокачественную опухоль, где способ включает стадии (1) и (2), ниже::A method for predicting the therapeutic effects of chemotherapy using an antitumor agent containing (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4- b]indolizin-8-yl)acrylamide or a salt thereof, in a patient having a malignant tumor, where the method includes steps (1) and (2), below:

(1) стадию обнаружения наличия или отсутствия мутации гена EGFR, содержащегося в биологическом образце, полученном от пациента; и(1) the step of detecting the presence or absence of an EGFR gene mutation contained in a biological sample obtained from the patient; And

(2) стадию прогнозирования того, что химиотерапия с высокой вероятностью проявит достаточные терапевтические эффекты по отношению к пациенту, когда результаты обнаружения на стадии (1) показывают, что ген EGFR имеет по меньшей мере одну мутацию, выбранную из группы, включающей мутацию L718X в экзоне 18 и мутацию L792X в экзоне 20, где X представляет собой произвольный аминокислотный остаток.(2) the step of predicting that the chemotherapy is likely to produce sufficient therapeutic effects on the patient when the detection results in step (1) indicate that the EGFR gene has at least one mutation selected from the group consisting of the L718X mutation in the exon 18 and the L792X mutation in exon 20, where X is a random amino acid residue.

[0022][0022]

Пункт 12.Point 12.

Способ лечения пациента, имеющего злокачественную опухоль, включающий стадии с (1) по (3), ниже:A method for treating a patient having a malignant tumor including steps (1) to (3) is below:

(1) стадию обнаружения наличия или отсутствия мутации гена EGFR, содержащегося в биологическом образце, полученном от пациента;(1) the step of detecting the presence or absence of an EGFR gene mutation contained in a biological sample obtained from the patient;

(2) стадию прогнозирования того, что химиотерапия с использованием противоопухолевого агента, содержащего в качестве активного ингредиента (S)-N-(4-амино-6-метил-5-(хинолин-3-ил)-8,9-дигидропиримидо[5,4-b]индолизин-8-ил)акриламид или его соль, с высокой вероятностью окажет достаточное терапевтическое воздействие на пациента, когда результаты обнаружения на стадии (1) показывают, что ген EGFR имеет по меньшей мере одну мутацию, выбранную из группы, включающей мутацию L718X в экзоне 18 и мутацию L792X в экзоне 20, где X представляет собой произвольный аминокислотный остаток; и(2) a step of predicting that chemotherapy using an antitumor agent containing (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[ 5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide or a salt thereof is likely to have a sufficient therapeutic effect in the patient when the detection results in step (1) indicate that the EGFR gene has at least one mutation selected from the group , including the L718X mutation in exon 18 and the L792X mutation in exon 20, where X is an arbitrary amino acid residue; And

(3) стадию введения (S)-N-(4-амино-6-метил-5-(хинолин-3-ил)-8,9-дигидропиримидо[5,4-b]индолизин-8-ил)акриламида или его соли пациенту, имеющему злокачественную опухоль, у которого на стадии (2) с высокой вероятностью прогнозируется достаточный ответ на химиотерапию с использованием противоопухолевого агента, содержащего в качестве активного ингредиента (S)-N-(4-амино-6-метил-5-(хинолин-3-ил)-8,9-дигидропиримидо[5,4-b]индолизин-8-ил)акриламид или его соль.(3) a step of introducing (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide or its salts to a patient with a malignant tumor in whom, at stage (2), a sufficient response to chemotherapy using an antitumor agent containing (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-) as an active ingredient is highly likely to be predicted (quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide or a salt thereof.

Положительные эффекты изобретенияPositive effects of the invention

[0023][0023]

Противоопухолевый агент по настоящему изобретению проявляет высокую ингибирующую активность в отношении EGFR, имеющего мутации L718 и L792. Следовательно, противоопухолевый агент по настоящему изобретению является полезным с точки зрения предоставления противоопухолевого агента, который оказывает превосходное терапевтическое действие на пациента, имеющего злокачественную опухоль, экспрессирующую EGFR, имеющего мутации L718 и L792.The antitumor agent of the present invention exhibits high inhibitory activity against EGFR having mutations L718 and L792. Therefore, the antitumor agent of the present invention is useful from the viewpoint of providing an antitumor agent that has an excellent therapeutic effect on a patient having an EGFR-expressing cancer having L718 and L792 mutations.

[0024][0024]

Настоящее изобретение также является полезным с точки зрения предоставления способа лечения пациента, имеющего злокачественную опухоль, экспрессирующую EGFR, имеющего мутации L718 и L792.The present invention is also useful in providing a method of treating a patient having an EGFR expressing cancer having the L718 and L792 mutations.

[0025][0025]

Ингибирующая активность обычных ингибиторов EGFR в отношении EGFR значительно снижалась при наличии мутации T790M, которая представляет собой мутацию приобретенной резистентности в области экзона 20, или при наличии мутаций L718 и L792. Таким образом, было трудно оказать достаточное терапевтическое воздействие. В то же время противоопухолевый агент по настоящему изобретению обладает высокой ингибирующей активностью в отношении EGFR, имеющего мутацию L718 и/или L792, а также имеющего активную мутацию, такую как мутация Ex19del или L858R; таким образом, противоопухолевый агент по настоящему изобретению может оказывать превосходное терапевтическое действие на пациента, имеющего злокачественную опухоль, экспрессирующую EGFR, имеющего эти комплексные мутации. Противоопухолевый агент по настоящему изобретению обладает высокой ингибирующей активностью в отношении EGFR, имеющего мутацию L718 и/или L792, даже если он имеет мутацию T790M в дополнение к вышеуказанным мутациям; таким образом, противоопухолевый агент по настоящему изобретению может оказывать превосходное терапевтическое действие на пациента, имеющего злокачественную опухоль, экспрессирующую EGFR в комплексе с этими мутациями.The inhibitory activity of conventional EGFR inhibitors against EGFR was significantly reduced in the presence of the T790M mutation, which is an acquired resistance mutation in the exon 20 region, or in the presence of the L718 and L792 mutations. Thus, it was difficult to provide sufficient therapeutic effects. At the same time, the antitumor agent of the present invention has high inhibitory activity against EGFR having the L718 and/or L792 mutation, and also having an active mutation such as the Ex19del or L858R mutation; thus, the antitumor agent of the present invention can have an excellent therapeutic effect on a patient having an EGFR-expressing cancer having these complex mutations. The antitumor agent of the present invention has high inhibitory activity against EGFR having the L718 and/or L792 mutation, even if it has the T790M mutation in addition to the above mutations; thus, the antitumor agent of the present invention can have an excellent therapeutic effect on a patient having a cancer expressing EGFR in combination with these mutations.

[0026][0026]

Кроме того, противоопухолевый агент по настоящему изобретению также является полезным с точки зрения снижения частоты проявления приобретенной резистентности в процессе лечения с использованием ингибиторов EGFR в отношении экзона 18 или экзона 21 мутантного EGFR, который является мутацией de novo, из-за его высокой ингибирующей активности в отношении экзона 18 и экзона 20 мутантного EGFR, резистентного к лечению, даже при наличии мутации T790M, которая представляет собой мутацию приобретенной резистентности в области экзона 20.In addition, the antitumor agent of the present invention is also useful in reducing the incidence of acquired resistance during treatment using EGFR inhibitors against exon 18 or exon 21 of mutant EGFR, which is a de novo mutation, due to its high inhibitory activity in between exon 18 and exon 20 of mutant EGFR that is resistant to treatment, even in the presence of the T790M mutation, which is an acquired resistance mutation in the exon 20 region.

Краткое описание чертежейBrief description of drawings

[0027][0027]

[Фиг. 1][Fig. 1]

Иллюстрирует результаты оценки фосфорилирования (ингибирующей активности) в системе принудительной экспрессии мутантного EGFR с использованием клеток HEK293.Illustrates the results of assessing phosphorylation (inhibitory activity) in a mutant EGFR forced expression system using HEK293 cells.

Описание вариантов осуществления изобретенияDescription of Embodiments of the Invention

[0028][0028]

Предпочтительные примеры различных определений в объеме настоящего изобретения, используемых в данном описании, подробно поясняются ниже.Preferred examples of various definitions within the scope of the present invention used in this specification are explained in detail below.

[0029][0029]

В данном описании термин «EGFR» относится к белку рецептора эпидермального фактора роста человека и также обозначается как ErbB-1 или HER1.As used herein, the term “EGFR” refers to the human epidermal growth factor receptor protein and is also referred to as ErbB-1 or HER1.

[0030][0030]

В данном описании термин «EGFR дикого типа» относится к EGFR, свободному от соматической мутации, который представляет собой белок, содержащий аминокислотную последовательность, представленную как SEQ ID NO: 1 (номер доступа в GenBank: NP_005219.2).As used herein, the term “wild-type EGFR” refers to EGFR, free of somatic mutation, which is a protein containing the amino acid sequence shown as SEQ ID NO: 1 (GenBank accession number: NP_005219.2).

[0031][0031]

В данном описании термин «экзон 18» относится к области 688-728 в аминокислотной последовательности EGFR дикого типа (SEQ ID NO: 1).As used herein, the term “exon 18” refers to the region 688-728 in the wild-type EGFR amino acid sequence (SEQ ID NO: 1).

[0032][0032]

В данном описании термин «мутация, резистентная к лечению в экзоне 18», относится к точечной мутации или делеционной мутации в аминокислоте в области экзона 18 EGFR дикого типа (SEQ ID NO: 1). Предпочтительной резистентной к лечению мутацией экзона 18 является точечная мутация с заменой одной аминокислоты в области экзона 18. Более предпочтительно, резистентная к лечению мутация экзона 18 представляет собой L718X (из аминокислот, составляющих белок, кодируемый генетической информацией, X представляет собой произвольный аминокислотный остаток, отличный от лейцина), что является точечной мутацией, при которой лейцин, кодируемый кодоном 718 экзона 18, был заменен на произвольную аминокислоту. Более конкретно, предпочтительные примеры L718X включают L718Q, который представляет собой точечную мутацию, в которой лейцин, кодируемый кодоном 718 в области экзона 18, был заменен на глутамин; и L718V, точечная мутация, в которой лейцин, кодируемый кодоном 718, был заменен на валин.As used herein, the term “exon 18 treatment-resistant mutation” refers to a point mutation or deletion mutation in an amino acid in the exon 18 region of wild-type EGFR (SEQ ID NO: 1). The preferred treatment-resistant exon 18 mutation is a point mutation with a single amino acid substitution in the region of exon 18. More preferably, the treatment-resistant exon 18 mutation is L718X (of the amino acids that make up the protein encoded by genetic information, X is an arbitrary amino acid residue different from leucine), which is a point mutation in which the leucine encoded by codon 718 of exon 18 has been replaced by an arbitrary amino acid. More specifically, preferred examples of L718X include L718Q, which is a point mutation in which the leucine encoded by codon 718 in the exon 18 region has been replaced by glutamine; and L718V, a point mutation in which the leucine encoded by codon 718 was replaced by valine.

[0033][0033]

В данном описании термин «активная мутация экзона 18» относится к точечной мутации или делеционной мутации в аминокислоте в области экзона 18 EGFR дикого типа (SEQ ID NO: 1). Предпочтительной активной мутацией экзона 18 является точечная мутация с заменой одной аминокислоты в области экзона 18. Более предпочтительно, активная мутация экзона 18 представляет собой E709X, которая представляет собой точечную мутацию, при которой глутаминовая кислота, кодируемая кодоном 709 экзона 18, была заменена на произвольную аминокислоту; или G719X, который представляет собой точечную мутацию, при которой глицин, кодируемый кодоном 719 экзона 18, на произвольную аминокислоту. Более конкретно, предпочтительные примеры E709X включают E709K, которая представляет собой точечную мутацию, в которой глутаминовая кислота, кодируемая кодоном 709 в области экзона 18, был заменена на лизин; и E709A, который представляет собой точечную мутацию, при которой глутаминовая кислота, кодируемая кодоном 709 в области экзона 18, был заменена на аланин. Предпочтительные примеры G719X включают G719A, которая представляет собой точечную мутацию, в которой глицин, кодируемый кодоном 719 в области экзона 18, был заменен на аланин; G719S, точечная мутация, при которой глицин, кодируемый кодоном 719 в области экзона 18, был заменен на серин; и G719C, который представляет собой точечную мутацию, при которой глицин, кодируемый кодоном 719 в области экзона 18, был заменен на цистеин.As used herein, the term “active exon 18 mutation” refers to a point mutation or deletion mutation in an amino acid in the exon 18 region of wild-type EGFR (SEQ ID NO: 1). The preferred active exon 18 mutation is a point mutation with a single amino acid change in the region of exon 18. More preferably, the active exon 18 mutation is E709X, which is a point mutation in which the glutamic acid encoded by codon 709 of exon 18 has been replaced by an arbitrary amino acid ; or G719X, which is a point mutation that changes the glycine encoded by codon 719 of exon 18 to an arbitrary amino acid. More specifically, preferred examples of E709X include E709K, which is a point mutation in which glutamic acid encoded by codon 709 in the exon 18 region has been replaced by lysine; and E709A, which is a point mutation in which glutamic acid, encoded by codon 709 in the exon 18 region, was replaced by alanine. Preferred examples of G719X include G719A, which is a point mutation in which the glycine encoded by codon 719 in the exon 18 region has been replaced by alanine; G719S, a point mutation in which the glycine encoded by codon 719 in the exon 18 region was replaced by serine; and G719C, which is a point mutation in which the glycine encoded by codon 719 in the exon 18 region has been replaced by cysteine.

[0034][0034]

В настоящем изобретении термин «экзон 20» относится к области 824-875 в аминокислотной последовательности EGFR дикого типа (SEQ ID NO: 1).In the present invention, the term “exon 20” refers to the region 824-875 in the amino acid sequence of wild-type EGFR (SEQ ID NO: 1).

[0035][0035]

В данном описании термин «мутация, резистентная к лечению в экзоне 20», относится к точечной мутации в аминокислоте в области экзона 20 EGFR дикого типа (SEQ ID NO: 1). Предпочтительной резистентной к лечению мутацией экзона 20 является точечная мутация с заменой одной аминокислоты в области экзона 20. Более предпочтительно, резистентная к лечению мутация экзона 20 представляет собой L792X (из аминокислот, составляющих белок, кодируемый генетической информацией, X представляет собой произвольный аминокислотный остаток, отличный от лейцина), которая представляет собой точечную мутацию, при которой лейцин, кодируемый кодоном 792 в области экзона 20, был заменен на произвольную аминокислоту. Конкретные примеры включают L792H, точечную мутацию, в которой лейцин, кодируемый кодоном 792 в области экзона 20, был заменен на гистидин; L792F, которая представляет собой точечную мутацию, в которой лейцин, кодируемый кодоном 792, был заменен на фенилаланин; L792Y, точечная мутация, в которой лейцин, кодируемый кодоном 792, был заменен на тирозин; L792R, точечная мутация, в которой лейцин, кодируемый кодоном 792, был заменен на аргинин; L792V, точечная мутация, в которой лейцин, кодируемый кодоном 792, был заменен на валин; и L792P, который представляет собой точечную мутацию, в которой лейцин, кодируемый кодоном 792, был заменен на пролин. Из них предпочтительными являются L792F, L792H и L792Y.As used herein, the term “exon 20 treatment-resistant mutation” refers to a point mutation in an amino acid in the exon 20 region of wild-type EGFR (SEQ ID NO: 1). The preferred exon 20 treatment-resistant mutation is a point mutation with a single amino acid substitution in the region of exon 20. More preferably, the exon 20 treatment-resistant mutation is L792X (of the amino acids that make up the protein encoded by genetic information, X is an arbitrary amino acid residue different from leucine), which is a point mutation in which the leucine encoded by codon 792 in the exon 20 region has been replaced by an arbitrary amino acid. Specific examples include L792H, a point mutation in which the leucine encoded by codon 792 in the exon 20 region was replaced by histidine; L792F, which is a point mutation in which the leucine encoded by codon 792 has been replaced by phenylalanine; L792Y, a point mutation in which the leucine encoded by codon 792 was replaced by tyrosine; L792R, a point mutation in which the leucine encoded by codon 792 was replaced by arginine; L792V, a point mutation in which the leucine encoded by codon 792 was replaced by valine; and L792P, which is a point mutation in which the leucine encoded by codon 792 has been replaced by proline. Of these, L792F, L792H and L792Y are preferred.

[0036][0036]

В данном описании термин «мутация вставки экзона 20» относится к мутации со вставкой одной или нескольких (предпочтительно, от 1 до 7, более предпочтительно. от 1 до 4) аминокислот в область экзона 20 EGFR (последовательность от 761 до 823 аминокислот в SEQ ID NO: 1). Предпочтительные примеры включают мутацию со вставкой аминокислотной последовательности FQEA (фенилаланин, глутамин, глутаминовая кислота и аланин, последовательно со стороны N-конца) между аланином 763 и тирозином 764 в области экзона 20 (A763_Y764insFQEA), мутацию со вставкой аминокислотной последовательности ASV (аланин, серин и валин, последовательно со стороны N-конца) между валином 769 и аспарагиновой кислотой 770 в области экзона 20 (V769_D770insASV), мутацию со вставкой аминокислотной последовательности SVD (серин, валин и аспарагиновая кислота, последовательно со стороны N-конца) между аспарагиновой кислотой 770 и аспарагином 771 в области экзона 20 (D770_N771insSVD), мутацию со вставкой аминокислотной последовательности NPG (аспарагин, пролин и глицин, последовательно со стороны N-конца) между аспарагиновой кислотой 770 и аспарагином 771 в области экзона 20 (D770_N771insNPG), мутацию со вставкой аминокислоты G (глицин) между аспарагиновой кислотой 770 и аспарагином 771 в области экзона 20 (D770_N771insG), мутацию со вставкой аминокислотной последовательности GY (глицин и тирозин, последовательно со стороны N-конца) после делеции аспарагиновой кислоты 770 в области экзона 20 (D770>GY), мутацию со вставкой аминокислоты N (аспарагин) между аспарагином 771 и пролином 772 в области экзона 20 (N771_P772insN), мутацию со вставкой аминокислотной последовательности PR (пролин и аргинин, последовательно со стороны N-конца) между пролином 772 и гистидином 773 в области экзона 20 (P772_R773insPR), мутацию со вставкой аминокислотной последовательности NPH (аспарагин, пролин и гистидин, последовательно со стороны N-конца) между гистидином 773 и валином 774 в области экзона 20 (H773_V774insNPH), мутацию со вставкой аминокислотной последовательности PH (пролин и гистидин, последовательно со стороны N-конца) между гистидином 773 и валином 774 в области экзона 20 (H773_V774insPH), мутацию со вставкой аминокислотной последовательности AH (аланин и гистидин, последовательно со стороны N-конца) между гистидином 773 и валином 774 в области экзона 20 (H773_V774insAH), мутацию со вставкой аминокислоты H (гистидин) между гистидином 773 и валином 774 в области экзона 20 (H773_V774insH), мутацию со вставкой аминокислотной последовательности HV (гистидин и валин, последовательно со стороны N-конца) между валином 774 и цистеином 775 в области экзона 20 (V774_C774insHV), мутацию со вставкой аминокислотной последовательности EAFQ (глутаминовая кислота, аланин, фенилаланин и глутамин, последовательно со стороны N-конца) между аланином 761 и глутаминовой кислотой 762 в области экзона 20 (A761_E762insEAFQ) и тому подобное. Более предпочтительные примеры включают мутацию со вставкой аминокислотной последовательности ASV (аланин, серин и валин, последовательно со стороны N-конца) между валином 769 и аспарагиновой кислотой 770 в области экзона 20 (V769_D770insASV), мутацию со вставкой аминокислотной последовательности SVD (серин, валин и аспарагиновая кислота, последовательно со стороны N-конца) между аспарагиновой кислотой 770 и аспарагином 771 в области экзона 20 (D770_N771insSVD), мутацию со вставкой аминокислоты G (глицин) между аспарагиновой кислотой 770 и аспарагином 771 в области экзона 20 (D770_N771insG), мутацию со вставкой аминокислотной последовательности NPH (аспарагин, пролин и гистидин, последовательно со стороны N-конца) между гистидином 773 и валином 774 в области экзона 20 (H773_V774insNPH), и мутацию со вставкой аминокислотной последовательности PH (пролин и гистидин, последовательно со стороны N-конца) между гистидином 773 и валином 774 в области экзона 20 (H773_V774insPH). Особенно предпочтительные примеры включают мутацию со вставкой аминокислотной последовательности FQEA (фенилаланин, глутамин, глутаминовая кислота и аланин, последовательно со стороны N-конца) между 763 аланином и тирозином 764 в области экзона 20 (A763_Y764insFQEA), мутацию со вставкой аминокислотной последовательности ASV (аланин, серин и валин, последовательно со стороны N-конца) между валином 769 и аспарагиновой кислотой 770 в области экзона 20 (V769_D770insASV), мутацию со вставкой аминокислотной последовательности SVD (серин, валин и аспарагиновая кислота, последовательно со стороны N-конца) между аспарагиновой кислотой 770 и аспарагином 771 в области экзона 20 (D770_N771insSVD), мутацию со вставкой аминокислоты G (глицин) между аспарагиновой кислотой 770 и аспарагином 771 в области экзона 20 (D770_N771insG), мутацию со вставкой аминокислотной последовательности NPH (аспарагин, пролин и гистидин, последовательно со стороны N-конца) между гистидином 773 и валином 774 в области экзона 20 (H773_V774inchsNPH), мутацию со вставкой аминокислотной последовательности PH (пролин и гистидин, последовательно со стороны N-конца) между гистидином 773 и валином 774 в области экзона 20 (H773_V774insPH) и тому подобное.As used herein, the term “exon 20 insertion mutation” refers to a mutation inserting one or more (preferably 1 to 7, more preferably 1 to 4) amino acids into the exon 20 region of EGFR (sequence 761 to 823 amino acids in SEQ ID NO: 1). Preferred examples include an insertion mutation of the amino acid sequence FQEA (phenylalanine, glutamine, glutamic acid and alanine, sequentially from the N-terminus) between alanine 763 and tyrosine 764 in the exon 20 region (A763_Y764insFQEA), an insertion mutation of the amino acid sequence ASV (alanine, serine and valine, sequentially from the N-terminus) between valine 769 and aspartic acid 770 in the region of exon 20 (V769_D770insASV), mutation with insertion of the amino acid sequence SVD (serine, valine and aspartic acid, sequentially from the N-terminus) between aspartic acid 770 and asparagine 771 in the region of exon 20 (D770_N771insSVD), mutation with insertion of the amino acid sequence NPG (asparagine, proline and glycine, sequentially from the N-terminus) between aspartic acid 770 and asparagine 771 in the region of exon 20 (D770_N771insNPG), mutation with insertion of an amino acid G (glycine) between aspartic acid 770 and asparagine 771 in the region of exon 20 (D770_N771insG), mutation with insertion of the amino acid sequence GY (glycine and tyrosine, sequentially from the N-terminus) after deletion of aspartic acid 770 in the region of exon 20 (D770>GY ), mutation with insertion of amino acid N (asparagine) between asparagine 771 and proline 772 in the region of exon 20 (N771_P772insN), mutation with insertion of the amino acid sequence PR (proline and arginine, sequentially from the N-terminus) between proline 772 and histidine 773 in the region exon 20 (P772_R773insPR), mutation with insertion of the amino acid sequence NPH (asparagine, proline and histidine, sequentially from the N-terminus) between histidine 773 and valine 774 in the region of exon 20 (H773_V774insNPH), mutation with insertion of the amino acid sequence PH (proline and histidine , sequentially from the N-terminus) between histidine 773 and valine 774 in the region of exon 20 (H773_V774insPH), mutation with insertion of the amino acid sequence AH (alanine and histidine, sequentially from the N-terminus) between histidine 773 and valine 774 in the region of exon 20 (H773_V774insAH), mutation with the insertion of the amino acid H (histidine) between histidine 773 and valine 774 in the region of exon 20 (H773_V774insH), mutation with the insertion of the amino acid sequence HV (histidine and valine, sequentially from the N-terminus) between valine 774 and cysteine 775 in the region of exon 20 (V774_C774insHV), a mutation with the insertion of the amino acid sequence EAFQ (glutamic acid, alanine, phenylalanine and glutamine, sequentially from the N-terminus) between alanine 761 and glutamic acid 762 in the region of exon 20 (A761_E762insEAFQ) and the like. More preferred examples include an insertion mutation of the amino acid sequence ASV (alanine, serine and valine, sequentially from the N-terminus) between valine 769 and aspartic acid 770 in the exon 20 region (V769_D770insASV), an insertion mutation of the amino acid sequence SVD (serine, valine and aspartic acid, sequentially from the N-terminus) between aspartic acid 770 and asparagine 771 in the region of exon 20 (D770_N771insSVD), mutation with insertion of amino acid G (glycine) between aspartic acid 770 and asparagine 771 in the region of exon 20 (D770_N771insG), mutation with insertion of the amino acid sequence NPH (asparagine, proline and histidine, sequentially from the N-terminus) between histidine 773 and valine 774 in the region of exon 20 (H773_V774insNPH), and mutation with the insertion of the amino acid sequence PH (proline and histidine, sequentially from the N-terminus ) between histidine 773 and valine 774 in the exon 20 region (H773_V774insPH). Particularly preferred examples include an insertion mutation of the amino acid sequence FQEA (phenylalanine, glutamine, glutamic acid and alanine, sequentially from the N-terminus) between alanine 763 and tyrosine 764 in the exon 20 region (A763_Y764insFQEA), an insertion mutation of the amino acid sequence ASV (alanine, serine and valine, sequentially from the N-terminus) between valine 769 and aspartic acid 770 in the region of exon 20 (V769_D770insASV), mutation with insertion of the amino acid sequence SVD (serine, valine and aspartic acid, sequentially from the N-terminus) between aspartic acid 770 and asparagine 771 in the region of exon 20 (D770_N771insSVD), a mutation with the insertion of amino acid G (glycine) between aspartic acid 770 and asparagine 771 in the region of exon 20 (D770_N771insG), a mutation with the insertion of the amino acid sequence NPH (asparagine, proline and histidine, sequentially with side of the N-terminus) between histidine 773 and valine 774 in the region of exon 20 (H773_V774inchsNPH), mutation with insertion of the amino acid sequence PH (proline and histidine, sequentially from the N-terminus) between histidine 773 and valine 774 in the region of exon 20 (H773_V774insPH) etc.

[0037][0037]

В настоящем изобретении термин «экзон 21» относится к области 824-875 в аминокислотной последовательности EGFR дикого типа (SEQ ID NO: 1).In the present invention, the term “exon 21” refers to the region 824-875 in the amino acid sequence of wild-type EGFR (SEQ ID NO: 1).

[0038][0038]

В данном описании термин «активная мутация экзона 21» относится к точечной мутации аминокислоты в области экзона 21 EGFR дикого типа (SEQ ID NO: 1). Предпочтительной активной мутацией экзона 21 является точечная мутация с заменой одной аминокислоты в области экзона 21. Более предпочтительно, активная мутация экзона 21 представляет собой L858X, которая представляет собой точечную мутацию, при которой лейцин, кодируемый кодоном 858 в области экзона 21, был заменен на произвольную аминокислоту; или L861X, который представляет собой точечную мутацию, при которой лейцин, кодируемый кодоном 861 в области экзона 21, был заменен на произвольную аминокислоту (из аминокислот, составляющих белок, кодируемый генетической информацией, X представляет собой произвольный аминокислотный остаток, отличный от лейцина). Более конкретно, предпочтительные примеры включают L858R, который представляет собой точечную мутацию, при которой лейцин, кодируемый кодоном 858 в области экзона 21, мутирован на аргинин; и L861Q, которая представляет собой точечную мутацию, при которой лейцин, кодируемый кодоном 861 в области экзона 21, был заменен на глутамин.As used herein, the term “active exon 21 mutation” refers to an amino acid point mutation in the exon 21 region of wild-type EGFR (SEQ ID NO: 1). The preferred active exon 21 mutation is a point mutation with a single amino acid substitution in the exon 21 region. More preferably, the active exon 21 mutation is L858X, which is a point mutation in which the leucine encoded by codon 858 in the exon 21 region has been replaced by an arbitrary one amino acid; or L861X, which is a point mutation in which the leucine encoded by codon 861 in the exon 21 region has been replaced by a random amino acid (of the amino acids that make up a genetically encoded protein, X is a random amino acid residue other than leucine). More specifically, preferred examples include L858R, which is a point mutation in which the leucine encoded by codon 858 in the exon 21 region is mutated to arginine; and L861Q, which is a point mutation in which the leucine encoded by codon 861 in the exon 21 region is replaced by glutamine.

[0039][0039]

В настоящем изобретении термин «мутация, резистентная к лечению в экзоне 18 и/или экзоне 20», включает «мутацию, резистентную к лечению в экзоне 18», «мутацию, резистентную к лечению в экзоне 20», и «мутацию, резистентную к лечению в экзоне 18 и экзоне 20».In the present invention, the term “treatment-resistant mutation in exon 18 and/or exon 20” includes “treatment-resistant mutation in exon 18”, “treatment-resistant mutation in exon 20”, and “treatment-resistant mutation in exon 18 and exon 20."

[0040][0040]

В настоящем изобретении термин «точечная мутация» относится к мутации, вызывающей замену, вставку или делецию одной или нескольких (например, примерно от 1 до 10, предпочтительно, примерно от 1 до 5, более предпочтительно, примерно 1, 2 или 3) аминокислотных остатков; и может включать в себя инсерционную и/или делеционную мутацию в качестве нуклеиновой кислоты.As used herein, the term “point mutation” refers to a mutation causing a substitution, insertion, or deletion of one or more (e.g., about 1 to 10, preferably about 1 to 5, more preferably about 1, 2, or 3) amino acid residues ; and may include an insertion and/or deletion mutation as a nucleic acid.

[0041][0041]

«EGFR, имеющий мутацию, резистентную к лечению в экзоне 18 и/или экзоне 20», включает «EGFR, имеющий мутацию, резистентную к лечению в экзоне 18», «EGFR, имеющий мутацию, резистентную к лечению в экзоне 20», и «EGFR, имеющий мутацию, резистентную к лечению в экзоне 18 и/или экзоне 21».“EGFR having a treatment-resistant mutation in exon 18 and/or exon 20” includes “EGFR having a treatment-resistant mutation in exon 18”, “EGFR having a treatment-resistant mutation in exon 20”, and “ EGFR having a treatment-resistant mutation in exon 18 and/or exon 21.”

[0042][0042]

«EGFR, имеющий мутацию, резистентную к лечению в экзоне 18», относится к EGFR, имеющему по меньшей мере указанную выше мутацию L718X в экзоне 18 как мутацию, резистентную к лечению в экзоне 18. EGFR может дополнительно иметь мутацию экзона 18, отличную от L718X, но, предпочтительно, имеет единственную мутацию L718X в качестве мутации, резистентной к лечению в экзоне 18. Более того, EGFR может иметь мутацию, отличную от мутации, резистентной к лечению в экзоне 18 (например, мутация с делецией экзона 19, мутация L858R и мутация L790M).“EGFR having a treatment-resistant mutation in exon 18” refers to EGFR having at least the above-mentioned L718X mutation in exon 18 as a treatment-resistant mutation in exon 18. EGFR may additionally have an exon 18 mutation other than L718X , but preferably has a single L718X mutation as a treatment-resistant mutation in exon 18. Moreover, EGFR may have a mutation other than the treatment-resistant mutation in exon 18 (eg, exon 19 deletion mutation, L858R mutation, and mutation L790M).

[0043][0043]

В данном описании термин «EGFR, имеющий мутацию, резистентную к лечению в экзоне 20», относится к EGFR, имеющему по меньшей мере указанную выше мутацию L792X в экзоне 20 как мутацию, резистентную к лечению в экзоне 20. EGFR может иметь мутацию, отличную от мутации L792X, но, предпочтительно, имеет единственную мутацию L718X в качестве мутации экзона 20, резистентной к лечению. Более того, EGFR может иметь мутацию, отличную от мутации, резистентной к лечению в экзоне 20 (например, мутация с делецией экзона 19, мутация L858R и мутация L790M).As used herein, the term “EGFR having a treatment-resistant mutation in exon 20” refers to EGFR having at least the above-mentioned L792X mutation in exon 20 as a treatment-resistant mutation in exon 20. EGFR may have a mutation other than mutation L792X, but preferably has a single mutation L718X as an exon 20 treatment-resistant mutation. Moreover, EGFR may have a mutation other than the treatment-resistant mutation in exon 20 (eg, exon 19 deletion mutation, L858R mutation, and L790M mutation).

[0044][0044]

В данном описании термин «экзон 19» относится к области 729-823 в аминокислотной последовательности EGFR дикого типа (SEQ ID NO: 1).As used herein, the term “exon 19” refers to the region 729-823 in the wild-type EGFR amino acid sequence (SEQ ID NO: 1).

[0045][0045]

В данном описании термин «мутация с делецией экзона 19» относится к мутации с делецией одной или нескольких аминокислот в области экзона 19 EGFR дикого типа (SEQ ID NO: 1). Помимо делеции в этой области, также включена мутация со вставкой одной или нескольких произвольных аминокислот. Примеры мутации с делецией экзона 19 включают мутацию с делецией 5 аминокислот от глутаминовой кислоты 746 до аланина 750 в области экзона 19 (Del E746-A750), мутацию со вставкой серина после делеции 7 аминокислот от лейцина 747 до пролина 753 в области экзона 19 (Del 747-P753insS), мутацию с делецией 5 аминокислот от лейцина 747 до 751 треонина в области экзона 19 (Del L747-T751), мутацию со вставкой пролина после делеции 4 аминокислот от лейцина 747 до аланина 750 в области экзона 19 (Del 747-A750insP) и тому подобное. Предпочтительные примеры включают мутацию с делецией 5 аминокислот от глутаминовой кислоты 746 до аланина 750 в области экзона 19 (Del E746-A750).As used herein, the term “exon 19 deletion mutation” refers to a mutation with a deletion of one or more amino acids in the exon 19 region of wild-type EGFR (SEQ ID NO: 1). In addition to a deletion in this region, a mutation involving the insertion of one or more random amino acids is also included. Examples of an exon 19 deletion mutation include a mutation with a deletion of 5 amino acids from glutamic acid 746 to alanine 750 in the exon 19 region (Del E746-A750), a serine insertion mutation after a deletion of 7 amino acids from leucine 747 to proline 753 in the exon 19 region (Del 747-P753insS), mutation with deletion of 5 amino acids from leucine 747 to threonine 751 in the region of exon 19 (Del L747-T751), mutation with proline insertion after deletion of 4 amino acids from leucine 747 to alanine 750 in the region of exon 19 (Del 747-A750insP ) etc. Preferred examples include a 5 amino acid deletion mutation from glutamic acid 746 to alanine 750 in the exon 19 region (Del E746-A750).

[0046][0046]

Более того, EGFR, имеющий мутацию, резистентную к лечению в экзоне 18 и/или экзоне 20, может дополнительно иметь по меньшей мере одну мутацию, выбранную из группы, состоящей из мутации с делецией экзона 19, L858R, L861Q, G719X, E709X и мутации с вставкой экзона 20. Конкретные примеры включают EGFR, имеющий мутацию L718X в области экзона 18, дополнительно имеющий мутацию с делецией экзона 19, EGFR, имеющий мутацию L792X в области экзона 20, дополнительно имеющий мутацию с делецией экзона 19, EGFR, имеющий мутацию L718X в области экзона 18, дополнительно имеющий L858R, EGFR, имеющий мутацию L792X в области экзона 20, дополнительно имеющий L858R, EGFR, имеющий мутацию L718X в области экзона 18, дополнительно имеющий L861Q, EGFR, имеющий мутацию L792X в области экзона 20, дополнительно имеющий L861Q, EGFR, имеющий мутацию L718X в области экзона 18, дополнительно имеющий G719X, EGFR, имеющий мутацию L792X в области экзона 20, дополнительно имеющий G719X, EGFR, имеющий мутацию L718X в области экзона 18, дополнительно имеющий E709X, EGFR, имеющий мутацию L792X в области экзона 20, дополнительно имеющий E709X, EGFR, имеющий мутацию L718X в области экзона 18, дополнительно имеющий мутацию вставки экзона 20, и EGFR, имеющий мутацию L792X в области экзона 20, дополнительно имеющий мутацию вставки экзона 20. Предпочтительными среди них являются EGFR, имеющий мутацию L718X в области экзона 18, дополнительно имеющий мутацию с делецией экзона 19, EGFR, имеющий мутацию L792X в области экзона 20, дополнительно имеющий мутацию с делецией экзона 19, EGFR, имеющий мутацию L718X в области экзона 18, дополнительно имеющий L858R, и EGFR, имеющий мутацию L792X в области экзона 20, дополнительно имеющий L858R.Moreover, an EGFR having a treatment-resistant mutation in exon 18 and/or exon 20 may additionally have at least one mutation selected from the group consisting of exon 19 deletion mutation, L858R, L861Q, G719X, E709X mutation with an insertion of exon 20. Specific examples include EGFR having an L718X mutation in the region of exon 18, additionally having a deletion mutation in exon 19, EGFR having a L792X mutation in the region of exon 20, additionally having a deletion mutation in exon 19, EGFR having an L718X mutation in region of exon 18, additionally having L858R, EGFR, having the L792X mutation in the region of exon 20, additionally having L858R, EGFR, having the L718X mutation in the region of exon 18, additionally having L861Q, EGFR, having the L792X mutation in the region of exon 20, additionally having L861Q, EGFR, having the L718X mutation in the region of exon 18, additionally having G719X, EGFR, having the L792X mutation in the region of exon 20, additionally having G719X, EGFR, having the L718X mutation in the region of exon 18, additionally having E709X, EGFR, having the L792X mutation in the region of exon 20, further having E709X, EGFR having the L718X mutation in the exon 18 region, further having an exon 20 insertion mutation, and EGFR having the L792X mutation in the exon 20 region, further having the exon 20 insertion mutation. Preferred among these are EGFR having the L718X mutation in the region of exon 18, additionally having a mutation with a deletion of exon 19, EGFR, having a mutation L792X in the region of exon 20, additionally having a mutation with a deletion of exon 19, EGFR, having a mutation L718X in the region of exon 18, additionally having L858R, and EGFR, having a mutation L792X in the exon 20 region, additionally having L858R.

[0047][0047]

Кроме того, EGFR, имеющий мутацию, резистентную к лечению в экзоне 18 и/или экзоне 20, может дополнительно иметь мутацию T790M, в дополнение к вышеупомянутой мутации с делецией экзона 19, L858R, L861Q, G719X, E709X и мутацию вставки экзона 20. T790M представляет собой приобретенную мутацию резистентности в области экзона 20. Известно, что T790M вырабатывается при использовании существующих ингибиторов EGFR. Приобретение T790M часто снижает эффекты существующих лекарств в отношении пациентов, имеющих злокачественные опухоли.In addition, EGFR having a treatment-resistant mutation in exon 18 and/or exon 20 may additionally have the T790M mutation, in addition to the above exon 19 deletion mutation, L858R, L861Q, G719X, E709X and exon 20 insertion mutation T790M is an acquired resistance mutation in the region of exon 20. T790M is known to be produced by existing EGFR inhibitors. Purchasing T790M often reduces the effects of existing drugs in patients with cancer.

[0048][0048]

В настоящем изобретении примеры включают EGFR, имеющий мутацию L718X в области экзона 18, имеющий мутацию с делецией экзона 19, дополнительно имеющий мутацию T790M, EGFR, имеющий мутацию L792X в области экзона 20, имеющий мутацию с делецией экзона 19, дополнительно имеющий мутацию T790M, EGFR, имеющий мутацию L718X в области экзона 18, имеющий L858R, дополнительно имеющий мутацию T790M, EGFR, имеющий мутацию L792X в области экзона 20, имеющий L858R, дополнительно имеющий мутацию T790M, EGFR, имеющий мутацию L718X в области экзона 18, имеющий L861Q, дополнительно имеющий мутацию T790M, EGFR, имеющий мутацию L792X в области экзона 20, имеющий L861Q, дополнительно имеющий мутацию T790M, EGFR, имеющий мутацию L718X в области экзона 18, имеющий G719X, дополнительно имеющий мутацию T790M, EGFR, имеющий мутацию L792X в области экзона 20, имеющий G719X, дополнительно имеющий мутацию T790M, EGFR, имеющий мутацию L718X в области экзона 18, имеющий E709X, дополнительно имеющий мутацию T790M, EGFR, имеющий мутацию L792X в области экзона 20, имеющий E709X, дополнительно имеющий мутацию T790M, EGFR, имеющий мутацию L718X в области экзона 18, имеющий мутацию вставки экзона 20, дополнительно имеющий мутацию T790M, и EGFR, имеющий мутацию L792X в области экзона 20, имеющий мутацию вставки экзона 20, дополнительно имеющий мутацию T790M. Предпочтительными среди них являются EGFR, имеющий мутацию L718X в области экзона 18, имеющий мутацию с делецией экзона 19, дополнительно имеющий мутацию T790M, EGFR, имеющий мутацию L792X в области экзона 20, имеющий мутацию с делецией экзона 19, дополнительно имеющий мутацию T790M, EGFR, имеющий мутацию L718X в области экзона 18, имеющий L858R, дополнительно имеющий мутацию T790M, и EGFR, имеющий мутацию L792X в области экзона 20, имеющий L858R, дополнительно имеющий мутацию T790M.In the present invention, examples include EGFR having the L718X mutation in the exon 18 region, having the exon 19 deletion mutation, further having the T790M mutation, EGFR having the L792X mutation in the exon 20 region, having the exon 19 deletion mutation, further having the T790M mutation, EGFR , having the L718X mutation in the region of exon 18, having L858R, additionally having the T790M mutation, EGFR, having the L792X mutation in the region of exon 20, having L858R, additionally having the T790M mutation, EGFR, having the L718X mutation in the region of exon 18, having L861Q, additionally having mutation T790M, EGFR, having the L792X mutation in the region of exon 20, having L861Q, additionally having the T790M mutation, EGFR, having the L718X mutation in the region of exon 18, having G719X, additionally having the T790M mutation, EGFR, having the L792X mutation in the region of exon 20, having G719X, additionally having the T790M mutation, EGFR, having the L718X mutation in the region of exon 18, having E709X, additionally having the T790M mutation, EGFR, having the L792X mutation in the region of exon 20, having E709X, additionally having the T790M mutation, EGFR, having the L718X mutation in the region exon 18 having an exon 20 insertion mutation, additionally having a T790M mutation, and EGFR having an L792X mutation in the region of exon 20, having an exon 20 insertion mutation, additionally having a T790M mutation. Preferred among them are EGFR having the L718X mutation in the exon 18 region, having the exon 19 deletion mutation, additionally having the T790M mutation, EGFR having the L792X mutation in the exon 20 region, having the exon 19 deletion mutation, additionally having the T790M mutation, EGFR, having the L718X mutation in the region of exon 18, having L858R, additionally having the T790M mutation, and EGFR, having the L792X mutation in the region of exon 20, having L858R, additionally having the T790M mutation.

[0049][0049]

Из EGFR, имеющих вышеуказанные гибридные мутации, EGFR, имеющий мутацию L718Q в области экзона 18, EGFR, имеющий мутацию L792F в области экзона 20, EGFR, имеющий мутацию L792H, и EGFR, имеющий мутацию L792Y, являются особенно предпочтительными.Of the EGFRs having the above hybrid mutations, EGFR having the L718Q mutation in the exon 18 region, EGFR having the L792F mutation in the exon 20 region, EGFR having the L792H mutation, and EGFR having the L792Y mutation are particularly preferred.

[0050][0050]

В настоящем изобретении способ обнаружения мутаций в EGFR, экспрессируемых пациентом, имеющим злокачественную опухоль, особо не ограничивается, поскольку способ позволяет обнаруживать мутации, и могут использоваться любые известные методы обнаружения.In the present invention, the method for detecting mutations in EGFR expressed by a patient having a malignant tumor is not particularly limited, since the method can detect mutations, and any known detection methods can be used.

[0051][0051]

Образец, используемый для обнаружения мутации EGFR, особо не ограничивается, если образец представляет собой биологический образец, полученный от пациента, имеющего злокачественную опухоль, в частности, образец, полученный от пациента, имеющего злокачественную опухоль, и содержащий клетки злокачественной опухоли. Примеры биологических образцов включают жидкости организма (например, кровь, мочу и т.д.), ткани, их экстракты и культуры полученных тканей. Способ получения биологического образца может быть выбран подходящим образом в зависимости от вида биологического образца.The sample used to detect the EGFR mutation is not particularly limited if the sample is a biological sample obtained from a patient having a cancerous tumor, in particular, a sample obtained from a patient having a cancerous tumor and containing cancer cells. Examples of biological samples include body fluids (eg, blood, urine, etc.), tissues, tissue extracts, and tissue cultures. The method for obtaining the biological sample may be suitably selected depending on the type of the biological sample.

[0052][0052]

Биологический образец готовится путем соответствующей обработки в соответствии с методом определения. Кроме того, реагент, содержащий праймер или зонд, используемый для обнаружения, может быть приготовлен обычным способом в соответствии с методом его определения.The biological sample is prepared by appropriate processing in accordance with the determination method. In addition, a reagent containing a primer or probe used for detection can be prepared in a conventional manner according to its detection method.

[0053][0053]

В одном варианте осуществления настоящего изобретения стадия обнаружения присутствия мутации по настоящему изобретению в EGFR, экспрессируемого пациентом, имеющим злокачественную опухоль, может быть выполнена перед введением противоопухолевого агента пациенту, имеющему злокачественную опухоль.In one embodiment of the present invention, the step of detecting the presence of a mutation of the present invention in EGFR expressed by a patient having a cancer can be performed before administering an antitumor agent to a patient having a cancer.

[0054][0054]

Злокачественная опухоль может включать два или более различных типа злокачественных опухолевых клеток. Кроме того, у одного пациента могут возникнуть две или более злокачественных опухолей. Следовательно, у одного пациента одновременно могут быть разные мутации EGFR (например, мутация экзона 18 представляет собой мутацию экзона 18 L718Q и L718V; и мутация экзона 20 представляет собой мутацию L792F, L792H, L792Y, L792R, L792V и L792P экзона 20; однако здесь нет ограничений).A malignant tumor may include two or more different types of malignant tumor cells. In addition, two or more malignant tumors may occur in one patient. Therefore, one patient can have different EGFR mutations at the same time (for example, the exon 18 mutation is the L718Q and L718V exon 18 mutation; and the exon 20 mutation is the L792F, L792H, L792Y, L792R, L792V, and L792P exon 20 mutation; however, there is no restrictions).

[0055][0055]

Противоопухолевый агент по настоящему изобретению содержит в качестве активного ингредиента (S)-N-(4-амино-6-метил-5-(хинолин-3-ил)-8,9-дигидропиримидо[5,4-b]индолизин-8-ил)акриламид (соединение (A)) или его соль. Соединение (A) представлено следующей химической формулой.The antitumor agent of the present invention contains (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizine-8 as an active ingredient -yl)acrylamide (compound (A)) or a salt thereof. Compound (A) is represented by the following chemical formula.

[0056][0056]

[0057][0057]

Ниже поясняется способ получения соединения по настоящему изобретению.The method for producing the compound of the present invention is explained below.

Соединение A по настоящему изобретению может быть получено, например, способом получения, описанным в WO2015/025936A1, способами, описанными в примерах, и тому подобное. Однако способ получения соединения настоящего изобретения не ограничивается этими примерами реакций.Compound A of the present invention can be produced, for example, by the production method described in WO2015/025936A1, the methods described in the examples, and the like. However, the method for producing the compound of the present invention is not limited to these reaction examples.

[0058][0058]

Когда соединение A по настоящему изобретению имеет изомеры, такие как оптические изомеры, стереоизомеры и таутомеры, любой из изомеров и их смеси являются включенными в объем соединения по настоящему изобретению, если не указано иное. Например, когда соединение по настоящему изобретению имеет оптические изомеры, рацемические смеси и оптические изомеры, выделенные из рацемической смеси, также входят в объем соединения по настоящему изобретению, если не указано иное.When compound A of the present invention has isomers such as optical isomers, stereoisomers and tautomers, any of the isomers and mixtures thereof are included within the scope of the compound of the present invention unless otherwise specified. For example, when a compound of the present invention has optical isomers, racemic mixtures and optical isomers isolated from the racemic mixture are also included within the scope of the compound of the present invention unless otherwise noted.

[0059][0059]

Соли соединения A относятся к любым фармацевтически приемлемым солям; примеры включают соли присоединения оснований и соли присоединения кислот.Compound A salts include any pharmaceutically acceptable salts; examples include base addition salts and acid addition salts.

[0060][0060]

Примеры солей присоединения оснований включают соли щелочных металлов, такие как соли натрия и соли калия; соли щелочноземельных металлов, такие как соли кальция и соли магния; соли аммония; и соли органических аминов, такие как соли триметиламина, соли триэтиламина, соли дициклогексиламина, соли этаноламина, соли диэтаноламина, соли триэтаноламина, соли прокаина и соли N, N’-дибензилэтилендиамина.Examples of base addition salts include alkali metal salts such as sodium salts and potassium salts; alkaline earth metal salts such as calcium salts and magnesium salts; ammonium salts; and organic amine salts such as trimethylamine salts, triethylamine salts, dicyclohexylamine salts, ethanolamine salts, diethanolamine salts, triethanolamine salts, procaine salts and N,N'-dibenzylethylenediamine salts.

[0061][0061]

Примеры солей присоединения кислот включают соли неорганических кислот, такие как гидрохлориды, сульфаты, нитраты, фосфаты и перхлораты; соли органических кислот, такие как ацетаты, формиаты, малеаты, фумараты, тартраты, цитраты, аскорбаты и трифторацетаты; и сульфонаты, такие как метансульфонаты, изетионаты, бензолсульфонаты и п-толуолсульфонаты.Examples of acid addition salts include salts of inorganic acids such as hydrochlorides, sulfates, nitrates, phosphates and perchlorates; organic acid salts such as acetates, formates, maleates, fumarates, tartrates, citrates, ascorbates and trifluoroacetates; and sulfonates such as methanesulfonates, isethionates, benzenesulfonates and p-toluenesulfonates.

Соединение по настоящему изобретению или его соли также включают его пролекарства. Пролекарство относится к соединению, которое может быть преобразовано в соединение по настоящему изобретению или его соль посредством реакции с ферментом, желудочной кислотой или тому подобным в физиологических условиях in vivo, то есть соединение, которое можно преобразовать в соединение по настоящему изобретению или его соль ферментативным окислением, восстановлением, гидролизом или тому подобным; или соединение, которое можно преобразовать в соединение по настоящему изобретению или его соль путем гидролиза или тому подобного с помощью желудочной кислоты или подобного. Кроме того, пролекарство может быть соединением, которое может быть преобразовано в соединение по настоящему изобретению или его соль в физиологических условиях, таких как описанные в работе «Iyakuhin no Kaihatsu [Development of Pharmaceuticals]», Vol. 7, Molecular Design, published in 1990 by Hirokawa Shoten Co., pp. 163-198.The compound of the present invention or its salts also include its prodrugs. Prodrug refers to a compound that can be converted into a compound of the present invention or a salt thereof by reaction with an enzyme, gastric acid or the like under physiological conditions in vivo, that is, a compound that can be converted into a compound of the present invention or a salt thereof by enzymatic oxidation , reduction, hydrolysis or the like; or a compound that can be converted into the compound of the present invention or a salt thereof by hydrolysis or the like with stomach acid or the like. Moreover, a prodrug may be a compound that can be converted into a compound of the present invention or a salt thereof under physiological conditions such as those described in “Iyakuhin no Kaihatsu [Development of Pharmaceuticals]”, Vol. 7, Molecular Design, published in 1990 by Hirokawa Shoten Co., pp. 163-198.

[0063][0063]

Описание болезнейDescription of diseases

Конкретные примеры опухолей, на которые нацелено настоящее изобретение, включают, но не ограничиваются ими, рак головы и шеи, рак желудочно-кишечного тракта (рак пищевода, рак желудка, рак двенадцатиперстной кишки, рак печени, рак желчных путей (например, рак желчного пузыря и желчных протоков), рак поджелудочной железы, колоректальный рак (например, рак толстой кишки и рак прямой кишки и т.д.), рак легких (например, немелкоклеточный рак легкого, мелкоклеточный рак легкого и мезотелиома), рак груди, рак половых органов (рак яичников, рак матки (например, рак шейки матки и рак эндометрия и т.д.), урологический рак (например, рак почки, рак мочевого пузыря, рак простаты и опухоль яичек), гемопоэтическую опухоль (например, лейкоз, злокачественная лимфома и множественная миелома), остеосаркома, саркома мягких тканей, рак кожи, опухоль головного мозга и тому подобное. Предпочтительные примеры включают рак легких, рак груди, рак головы и шеи, опухоль мозга, рак матки, рак желудочно-кишечного тракта, гемопоэтическую опухоль и рак кожи. Рак легких особенно предпочтителен.Specific examples of tumors targeted by the present invention include, but are not limited to, head and neck cancer, gastrointestinal cancer (esophageal cancer, stomach cancer, duodenal cancer, liver cancer, biliary tract cancer (e.g., gallbladder cancer and bile ducts), pancreatic cancer, colorectal cancer (for example, colon cancer and rectal cancer, etc.), lung cancer (for example, non-small cell lung cancer, small cell lung cancer and mesothelioma), breast cancer, genital cancer (ovarian cancer, uterine cancer (for example, cervical cancer and endometrial cancer, etc.), urological cancer (for example, kidney cancer, bladder cancer, prostate cancer and testicular tumor), hematopoietic tumor (for example, leukemia, malignant lymphoma and multiple myeloma), osteosarcoma, soft tissue sarcoma, skin cancer, brain tumor and the like. Preferred examples include lung cancer, breast cancer, head and neck cancer, brain tumor, uterine cancer, gastrointestinal cancer, hematopoietic tumor and skin cancer. Lung cancer is especially preferred.

[0064][0064]

Когда соединение по настоящему изобретению или его соль используют в качестве фармацевтического агента, при необходимости может быть добавлен фармацевтический носитель, тем самым образуя подходящую лекарственную форму в соответствии с целями профилактики и лечения. Примеры лекарственной формы включают пероральные препараты, инъекции, суппозитории, мази, пластыри и тому подобное. Предпочтительны пероральные препараты. Такие лекарственные формы могут быть получены методами, обычно известными специалистам в данной области.When the compound of the present invention or a salt thereof is used as a pharmaceutical agent, a pharmaceutical carrier may be added as necessary, thereby forming a suitable dosage form in accordance with the purposes of prevention and treatment. Examples of dosage form include oral drugs, injections, suppositories, ointments, patches and the like. Oral medications are preferred. Such dosage forms can be prepared by methods generally known to those skilled in the art.

[0065][0065]

Как фармацевтически приемлемый носитель в твердых препаратах могут быть примешаны в качестве наполнителя, связующего, разрыхлителя, смазки или красителя различные обычные органические или неорганические материалы носителя, используемые в качестве материалов для изготовления; или в качестве растворителя, солюбилизирующего агента, суспендирующего агента, изотонизирующего агента, буфера или успокаивающего агента в жидких препаратах. Кроме того, при необходимости также могут быть использованы добавки к фармацевтическим препаратам, такие как антисептики, антиоксиданты, красители, подсластители и стабилизаторы.As a pharmaceutically acceptable carrier in solid preparations, various conventional organic or inorganic carrier materials used as manufacturing materials may be admixed as filler, binder, disintegrant, lubricant or coloring agent; or as a solvent, solubilizing agent, suspending agent, isotonicizing agent, buffer or soothing agent in liquid preparations. In addition, pharmaceutical additives such as antiseptics, antioxidants, colorants, sweeteners and stabilizers can also be used if necessary.

[0066][0066]

Твердые препараты для перорального применения готовят следующим образом. После добавления к соединению по настоящему изобретению наполнителя, необязательно вместе с наполнителем, связующего, разрыхлителя, смазывающего вещества, красителя, агента, маскирующего вкус или ароматизатора и т.д., полученную смесь обычными способами формуют в таблетки, таблетки с покрытием, гранулы, порошки, капсулы и тому подобное.Solid preparations for oral administration are prepared as follows. After adding an excipient, optionally together with the excipient, binder, disintegrant, lubricant, coloring agent, taste masking agent or flavoring agent, etc., to the compound of the present invention, the resulting mixture is formed into tablets, coated tablets, granules, powders by conventional methods , capsules and the like.

[0067][0067]

Примеры наполнителей включают лактозу, сахарозу, D-маннит, глюкозу, крахмал, карбонат кальция, каолин, микрокристаллическую целлюлозу и ангидрид кремниевой кислоты. Примеры связующих включают воду, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол, простой сироп, жидкую глюкозу, жидкий α-крахмал, жидкий желатин, D-маннит, карбоксиметилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилкрахмал, метилцеллюлозу, этилцеллюлозу, шеллак, фосфат кальция, поливинилпирролидон и тому подобное. Примеры разрыхлителей включают сухой крахмал, альгинат натрия, порошкообразный агар, гидрокарбонат натрия, карбонат кальция, лаурилсульфат натрия, моноглицерид стеариновой кислоты, лактозу и тому подобное. Примеры смазывающих веществ включают очищенный тальк, стеарат натрия, стеарат магния, буру, полиэтиленгликоль и тому подобное. Примеры красителей включают оксид титана, оксид железа и тому подобное. Примеры маскирующих вкус или ароматизирующих агентов включают сахарозу, кожуру горького апельсина, лимонную кислоту, винную кислоту и тому подобное.Examples of excipients include lactose, sucrose, D-mannitol, glucose, starch, calcium carbonate, kaolin, microcrystalline cellulose and silicic anhydride. Examples of binders include water, ethanol, 1-propanol, 2-propanol, simple syrup, liquid glucose, liquid α-starch, liquid gelatin, D-mannitol, carboxymethylcellulose, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylstarch, methylcellulose, ethylcellulose, shellac, calcium phosphate, polyvinylpyrrolidone and things like that. Examples of disintegrants include dry starch, sodium alginate, powdered agar, sodium bicarbonate, calcium carbonate, sodium lauryl sulfate, stearic acid monoglyceride, lactose and the like. Examples of lubricants include purified talc, sodium stearate, magnesium stearate, borax, polyethylene glycol and the like. Examples of dyes include titanium oxide, iron oxide and the like. Examples of taste masking or flavoring agents include sucrose, bitter orange peel, citric acid, tartaric acid and the like.

[0068][0068]

Когда готовят жидкий препарат для перорального введения, к соединению по настоящему изобретению можно добавлять агент, маскирующий вкус, буфер, стабилизатор, ароматизатор и тому подобное, и полученная смесь может быть приготовлена в виде перорального жидкого препарата, сиропа, эликсира и т.д. обычным способом.When a liquid preparation for oral administration is prepared, a taste-masking agent, buffer, stabilizer, flavoring agent and the like can be added to the compound of the present invention, and the resulting mixture can be prepared into an oral liquid preparation, syrup, elixir, etc. in the usual way.

[0069][0069]

Когда готовят средство для инъекций, к соединению по настоящему изобретению могут быть добавлены регулятор pH, буфер, стабилизатор, изотонический агент, местный анестетик и тому подобное и смесь может быть приготовлена для подкожной, внутримышечной или внутривенной инъекции обычным способом.When preparing an injection, a pH adjuster, buffer, stabilizer, isotonic agent, local anesthetic and the like can be added to the compound of the present invention, and the mixture can be prepared for subcutaneous, intramuscular or intravenous injection in a conventional manner.

[0070][0070]

Примеры используемого в настоящем документе регулятора pH и буфера включают цитрат натрия, ацетат натрия и фосфат натрия. Примеры стабилизатора включают пиросульфит натрия, EDTA, тиогликолевую кислоту и тиомолочную кислоту. Примеры местного анестетика включают гидрохлорид прокаина и гидрохлорид лидокаина. Примеры изотонизирующего агента включают хлорид натрия, глюкозу, D-маннит и глицерин.Examples of the pH adjuster and buffer used herein include sodium citrate, sodium acetate and sodium phosphate. Examples of the stabilizer include sodium pyrosulfite, EDTA, thioglycolic acid and thiolactic acid. Examples of local anesthetic include procaine hydrochloride and lidocaine hydrochloride. Examples of the isotonic agent include sodium chloride, glucose, D-mannitol and glycerin.

[0071][0071]

При получении суппозитория к соединению A могут быть добавлены фармацевтически приемлемые носители, известные в соответствующей области, такие как полиэтиленгликоль, ланолин, масло какао и триглицерид жирных кислот; и, при необходимости, поверхностно-активные вещества, такие как Tween 80 (зарегистрированная торговая марка), и полученная смесь может быть изготовлена в виде суппозитория обычным способом.When preparing a suppository, pharmaceutically acceptable carriers known in the art, such as polyethylene glycol, lanolin, cocoa butter and triglyceride fatty acids, can be added to compound A; and, if necessary, surfactants such as Tween 80 (registered trademark), and the resulting mixture can be prepared as a suppository in the usual manner.

[0072][0072]

При получении мази с соединением A при необходимости можно смешивать обычно используемую основу, стабилизатор, смачивающий агент, консервант и тому подобное; и полученную смесь смешивают и превращают в мазь обычным способом.When preparing an ointment with Compound A, a commonly used base, stabilizer, wetting agent, preservative and the like can be mixed as necessary; and the resulting mixture is mixed and made into an ointment in the usual manner.

[0073][0073]

Примеры основы включают жидкий парафин, белый вазелин, белый пчелиный воск, октилдодециловый спирт и парафин.Examples of the base include liquid paraffin, white petrolatum, white beeswax, octyl dodecyl alcohol and paraffin.

[0074][0074]

Примеры консерванта включают метилпараоксибензоат, этилпараоксибензоат и пропилпараоксибензоат.Examples of the preservative include methyl paraoxybenzoate, ethyl paraoxybenzoate and propyl paraoxybenzoate.

[0075][0075]

При изготовлении пластыря описанная выше мазь, крем, гель, паста и тому подобное может быть нанесена на обычный субстрат обычным способом.When making a patch, the above-described ointment, cream, gel, paste and the like can be applied to a common substrate in a conventional manner.

[0076][0076]

Примеры субстратов включают тканые или нетканые материалы, содержащие хлопок, штапельные волокна или химические волокна; и также могут быть использованы пленки или вспененные листы из мягкого винилхлорида, полиэтилена, полиуретана и т.д.Examples of substrates include woven or non-woven materials containing cotton, staple fibers or man-made fibers; and films or foam sheets of soft vinyl chloride, polyethylene, polyurethane, etc. can also be used.

[0077][0077]

Количество соединения A, которое должно быть включено в каждую из таких стандартных дозированных форм, зависит от состояния пациента, которому вводят соединение, его лекарственной формы и т.д. Обычно в случае перорального средства количество соединения, предпочтительно, составляет от 0,05 до 1000 мг на лекарственную форму. В случае инъекции количество соединения, предпочтительно, составляет от 0,01 до 500 мг на лекарственную форму; и в случае суппозитория количество соединения, предпочтительно. составляет от 1 до 1000 мг на лекарственную форму.The amount of Compound A to be included in each of such unit dosage forms depends on the condition of the patient to whom the compound is administered, its dosage form, etc. Generally, in the case of an oral agent, the amount of the compound is preferably from 0.05 to 1000 mg per dosage form. In the case of injection, the amount of the compound is preferably from 0.01 to 500 mg per dosage form; and in the case of a suppository, the amount of compound is preferable. ranges from 1 to 1000 mg per dosage form.

[0078][0078]

Кроме того, суточная доза лекарства в такой лекарственной форме зависит от состояния, веса тела, возраста, пола и т.д. пациента и не может быть обобщена. Обычно для взрослого (масса тела: 50 кг) суточная доза соединения по настоящему изобретению обычно может составлять от 0,05 до 5000 мг и, предпочтительно, от 0,1 до 1000 мг; и, предпочтительно, вводится одной дозой или двумя-тремя разделенными дозами в день.In addition, the daily dose of the drug in such a dosage form depends on the condition, body weight, age, gender, etc. patient and cannot be generalized. Typically, for an adult (body weight: 50 kg), the daily dose of the compound of the present invention may generally be from 0.05 to 5000 mg and preferably from 0.1 to 1000 mg; and is preferably administered in one dose or two to three divided doses per day.

[0079][0079]

Настоящее изобретение относится также к способу лечения пациента, имеющего злокачественную опухоль, включающий стадию введения соединения A или его соли пациенту, имеющему злокачественную опухоль, экспрессирующую EGFR, имеющего резистентную к лечению мутацию в экзоне 18 и/или экзоне 20.The present invention also provides a method of treating a patient having a cancer, comprising the step of administering Compound A or a salt thereof to a patient having a cancer expressing EGFR having a treatment-resistant mutation in exon 18 and/or exon 20.

[0080][0080]

Настоящее изобретение относится также к соединению A или его соли для лечения пациента, имеющего злокачественную опухоль, экспрессирующую EGFR, имеющего резистентную к лечению мутацию в экзоне 18 и/или экзоне 20.The present invention also provides Compound A or a salt thereof for the treatment of a patient having an EGFR-expressing cancer having a treatment-resistant mutation in exon 18 and/or exon 20.

[0081][0081]

Настоящее изобретение относится также к применению соединения A или его соли для лечения пациента, имеющего злокачественную опухоль, экспрессирующую EGFR, имеющего резистентную к лечению мутацию в экзоне 18 и/или экзоне 20.The present invention also relates to the use of Compound A or a salt thereof for the treatment of a patient having an EGFR-expressing cancer having a treatment-resistant mutation in exon 18 and/or exon 20.

[0082][0082]

Настоящее изобретение относится также к применению соединения A или его соли при изготовлении фармацевтического агента для лечения пациента, имеющего злокачественную опухоль, экспрессирующую EGFR, имеющего резистентную к лечению мутацию в экзоне 18 и/или экзоне 20.The present invention also relates to the use of Compound A or a salt thereof in the manufacture of a pharmaceutical agent for the treatment of a patient having an EGFR-expressing cancer having a treatment-resistant mutation in exon 18 and/or exon 20.

[0083][0083]

Настоящее изобретение относится также к способу прогнозирования терапевтических эффектов химиотерапии с использованием противоопухолевого агента, содержащего в качестве активного ингредиента соединение А или его соль, у пациента, имеющего злокачественную опухоль, где способ включает стадии (1) и (2), ниже:The present invention also relates to a method for predicting the therapeutic effects of chemotherapy using an antitumor agent containing Compound A or a salt thereof as an active ingredient in a patient having a malignant tumor, where the method includes steps (1) and (2) below:

(2) стадию прогнозирования того, что химиотерапия с высокой вероятностью окажет достаточное терапевтическое воздействие на пациента, когда результаты обнаружения на стадии (1) показывают, что ген EGFR имеет резистентную к лечению мутацию в экзоне 18 и/или экзоне 20.(2) the step of predicting that chemotherapy is likely to have a sufficient therapeutic effect on the patient when the detection results in step (1) indicate that the EGFR gene has a treatment-resistant mutation in exon 18 and/or exon 20.

[0084][0084]

Настоящее изобретение относится также к способу лечения пациента, имеющего злокачественную опухоль, включающему стадии с (1) по (3), ниже:The present invention also relates to a method for treating a patient having a malignant tumor, comprising steps (1) to (3) below:

(2) стадию прогнозирования того, что химиотерапия с использованием противоопухолевого агента, содержащего в качестве активного ингредиента (S)-N-(4-амино-6-метил-5-(хинолин-3-ил)-8,9-дигидропиримидо[5,4-b]индолизин-8-ил)акриламид или его соль, с высокой вероятностью будет проявлять достаточные терапевтические эффекты в отношении пациента, когда результаты обнаружения на стадии (1) показывают, что ген EGFR имеет экзон 18 и/или мутацию в экзоне 20, резистентную к лечению; и(2) a step of predicting that chemotherapy using an antitumor agent containing (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[ 5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide or a salt thereof is likely to exhibit sufficient therapeutic effects in a patient when the detection results in step (1) indicate that the EGFR gene has exon 18 and/or a mutation in exon 20, resistant to treatment; And

(3) стадию введения (S)-N-(4-амино-6-метил-5-(хинолин-3-ил)-8,9-дигидропиримидо[5,4-b]индолизин-8-ил)акриламида или его соли пациенту, имеющему злокачественную опухоль, у которого с высокой вероятностью прогнозируется достаточный ответ на химиотерапию с использованием противоопухолевого агента, содержащего в качестве активного ингредиента (S)-N-(4-амино-6-метил-5-(хинолин-3-ил)-8,9-дигидропиримидо[5,4-b]индолизин-8-ил)акриламид или его соль на стадии (2).(3) a step of introducing (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide or its salts to a patient with a malignant tumor who is highly likely to have a sufficient response to chemotherapy using an antitumor agent containing (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinoline-3-) as the active ingredient yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide or a salt thereof in step (2).

[0085][0085]

Последовательность оснований гена EGFR общеизвестна. Регистрационным номером в GenBank последовательности оснований кДНК является NM_005228.4.The base sequence of the EGFR gene is well known. The GenBank accession number for the cDNA base sequence is NM_005228.4.

[0086][0086]

«Терапевтические эффекты» можно оценить по эффектам уменьшения опухоли, эффектам подавления рецидива, эффектам продления жизни и тому подобное. Эффекты подавления рецидива могут быть показаны как степень продления периода отсутствия рецидивов или степень улучшения частоты рецидивов; и эффекты продления жизни могут быть показаны как степень полного времени выживания или степень увеличения медианы выживаемости без прогрессирования или тому подобное. «Достаточные терапевтические эффекты» химиотерапии с использованием противоопухолевого агента, содержащего в качестве активного ингредиента соединение А или его соль, означает, например, что превосходные терапевтические эффекты достигаются при введении противоопухолевого агента, содержащего в качестве активного ингредиента соединение A или его соль, например, увеличение времени выживания, подавление рецидива и тому подобное по сравнению с отсутствием введения.“Therapeutic effects” can be assessed by tumor shrinking effects, relapse suppression effects, life prolonging effects, and the like. Relapse suppression effects can be shown as the extent to which the relapse-free period is prolonged or the extent to which relapse rates are improved; and the life-prolonging effects may be shown as the degree of overall survival time or the degree of increase in median progression-free survival or the like. “Sufficient therapeutic effects” of chemotherapy using an antitumor agent containing Compound A or a salt thereof as an active ingredient means, for example, that excellent therapeutic effects are achieved by administering an antitumor agent containing Compound A or a salt thereof as an active ingredient, for example, an increase survival time, relapse suppression and the like compared to no administration.

ПримерыExamples

[0087][0087]

Далее приводится более подробное описание настоящего изобретения со ссылкой на следующий пример исследования. Однако настоящее изобретение не ограничивается этим примером (примером исследования).The present invention will now be described in more detail with reference to the following study example. However, the present invention is not limited to this example (research example).

Пример исследования 1Case Study 1

[0088][0088]

Исследование эффективности лекарственного средства in vitroIn vitro study of the effectiveness of the drug

Результаты оценки внутриклеточного фосфорилирования в системе принудительной экспрессии мутантного EGFR с использованием клеток HEK293 (ингибирующая активность)Results of assessing intracellular phosphorylation in a system for forced expression of mutant EGFR using HEK293 cells (inhibitory activity)

Внутриклеточную целевую ингибирующую активность соединений оценивали на основании следующего в качестве индекса: внутриклеточное фосфорилирование EGFR в системе принудительной экспрессии мутантного EGFR с использованием клеток Jump-In (товарный знак) Grip (товарный знак) HEK293 (Thermo Fisher Scientific Inc.) (далее также называемые «клетки HEK293»). Клетки HEK293 выдерживали в среде D-MEM с GlutaMAX (товарный знак)-I (с высоким содержанием глюкозы) (Thermo Fisher Scientific Inc.), которая содержала 10% диализованного FBS. Клетки HEK293 высевали в каждую лунку 96-луночного микропланшета с плоским дном таким образом, чтобы количество клеток на лунку составляло 10000, и инкубировали в инкубаторе, содержащем 5% газообразного CO₂ при температуре 37°C в течение ночи. Затем с использованием реагента для трансфекции ViaFect (товарный знак) вместе с Opti-MEM (товарный знак) I (Thermo Fisher Scientific Inc.) (Promega Corporation) вводили вектор pcDNATM 6.2/V5-DEST, кодирующий ген EGFR человека (Del E746-A750 (далее также называемый «Ex19del»), Ex19del+T790M (символ «+» указывает на наличие обеих мутаций), Ex19del+T790M+L718Q, Ex19del+T790M+L792H, Ex19del+T790M+L792F, Ex19del+T790M+L792Y, L858R, L858R+T790M, L858R+T790M+L718Q, L858R+T790M+L790M+L790M+L790M+L790M+L790M+L792H+L792Y) вместе с Opti-MEM (товарный знак) I (Thermo Fisher Scientific Inc.). Клетки снова инкубировали в инкубаторе, содержащем газообразный 5% CO₂, при температуре 37°C в течение ночи. На следующий день в ДМСО отдельно растворяли соединение A, эрлотиниб, афатиниб и осимертиниб (эрлотиниб, афатиниб и осимертиниб, каждый может именоваться в дальнейшем «сравнительное соединение») и разбавляли ДМСО или средой. Затем растворы отдельно добавляли в каждую лунку планшета для культивирования клеток, и клетки в течение 6 часов инкубировали в инкубаторе, содержащем газообразный 5% CO₂, 37°C. После инкубации клетки иммобилизовали с использованием 20% нейтрального забуференного формалина (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) и блокировали блокирующим буфером Odyssey (торговая марка) (PBS) (M&S TechnoSystems Inc.). Затем клетки подвергали взаимодействию с первичным антителом (EGFR Antibody Cocktail #AHR5062 (Thermo Fisher Scientific Inc.) и фосфо-EGFR рецептором (Tyr1068) Antibody #2234L (CST)), разбавленным блокирующим буфером Odyssey (торговая марка) (PBS) до 1/200, и клетки оставляли на ночь при температуре 4°C. На следующий день клетки подвергали взаимодействию с вторичным антителом (IRDye 800CW Goat aRabbit #926-32211 и IRDye 680RD Goat aMouse #926-68070 (M&S TechnoSystems Inc.)), разбавленным блокирующим буфером Odyssey (торговая марка) (PBS) до 1/800, и клеткам давали постоять при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем клетки подвергали взаимодействию с первичным антителом (EGFR Antibody Cocktail #AHR5062 (Thermo Fisher Scientific Inc.) и фосфо-EGFR рецептором (Tyr1068) Antibody #2234L (CST)), разбавленным блокирующим буфером Odyssey (торговая марка) (PBS) до 1/200, и клетки оставляли на ночь при температуре 4°C. На следующий день клетки подвергали взаимодействию с вторичным антителом (IRDye 800CW Goat aRabbit #926-32211 и IRDye 680RD Goat aMouse #926-68070 (M&S TechnoSystems Inc.)), разбавленным блокирующим буфером Odyssey (торговая марка) (PBS) до 1/800, и клеткам давали постоять при комнатной температуре в течение 1 часа.The intracellular target inhibitory activity of the compounds was assessed based on the following as an index: intracellular phosphorylation of EGFR in a mutant EGFR forced expression system using Jump-In (trademark) Grip (trademark) HEK293 cells (Thermo Fisher Scientific Inc.) (hereinafter also referred to as " HEK293 cells"). HEK293 cells were maintained in D-MEM with GlutaMAX (trademark)-I (high glucose) (Thermo Fisher Scientific Inc.) containing 10% dialyzed FBS. HEK293 cells were seeded into each well of a 96-well flat-bottom microplate at 10,000 cells per well and incubated in an incubator containing 5% CO ₂ gas at 37°C overnight. The pcDNATM 6.2/V5-DEST vector encoding the human EGFR gene (Del E746-A750) was then introduced using ViaFect (trademark) transfection reagent along with Opti-MEM (trademark) I (Thermo Fisher Scientific Inc.) (Promega Corporation). (hereinafter also called "Ex19del"), Ex19del+T790M (the "+" symbol indicates the presence of both mutations), Ex19del+T790M+L718Q, Ex19del+T790M+L792H, Ex19del+T790M+L792F, Ex19del+T790M+L792Y, L858R, L858R+T790M, L858R+T790M+L718Q, L858R+T790M+L790M+L790M+L790M+L790M+L790M+L792H+L792Y) together with Opti-MEM (trademark) I (Thermo Fisher Scientific Inc.). The cells were again incubated in an incubator containing 5% CO ₂ gas at 37°C overnight. The next day, Compound A, erlotinib, afatinib, and osimertinib (erlotinib, afatinib, and osimertinib, each hereinafter referred to as “comparative compound”) were separately dissolved in DMSO and diluted with DMSO or vehicle. The solutions were then separately added to each well of the cell culture plate, and the cells were incubated for 6 hours in an incubator containing 5% CO ₂ gas, 37°C. After incubation, cells were immobilized using 20% neutral buffered formalin (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) and blocked with Odyssey (trade mark) blocking buffer (PBS) (M&S TechnoSystems Inc.). Cells were then reacted with primary antibody (EGFR Antibody Cocktail #AHR5062 (Thermo Fisher Scientific Inc.) and phospho-EGFR receptor (Tyr1068) Antibody #2234L (CST)) diluted to 1/2 in Odyssey (trade mark) blocking buffer (PBS). 200, and the cells were left overnight at 4°C. The next day, cells were reacted with secondary antibody (IRDye 800CW Goat aRabbit #926-32211 and IRDye 680RD Goat aMouse #926-68070 (M&S TechnoSystems Inc.)) diluted to 1/800 in Odyssey (trade mark) blocking buffer (PBS). , and the cells were allowed to stand at room temperature for 1 hour. Cells were then reacted with primary antibody (EGFR Antibody Cocktail #AHR5062 (Thermo Fisher Scientific Inc.) and phospho-EGFR receptor (Tyr1068) Antibody #2234L (CST)) diluted to 1/2 in Odyssey (trade mark) blocking buffer (PBS). 200, and the cells were left overnight at 4°C. The next day, cells were reacted with secondary antibody (IRDye 800CW Goat aRabbit #926-32211 and IRDye 680RD Goat aMouse #926-68070 (M&S TechnoSystems Inc.)) diluted to 1/800 in Odyssey (trade mark) blocking buffer (PBS). , and the cells were allowed to stand at room temperature for 1 hour.

[0089][0089]

Значение, полученное вычитанием значения FI лунки без первичного антитела из значения FI, определенного при длине волны флуоресценции 800 или 700 нм, было обозначено как FI (800, EGFR)-контроль (для 800 нм) и FI (700, p-EGFR)-контроль (для 700 нм). Значение, полученное делением FI (700, p-EGFR)-контроль каждой лунки на FI (800, EGFR)-контроль, было определено как FI (p-EGFR/EGFR). Степень фосфорилирования EGFR рассчитывали с использованием следующей формулы для определения концентрации исследуемых соединений, при которой EGFR фосфорилировался на 50% (IC₅₀ (мкМ)). В таблице 1 проиллюстрированы результаты.The value obtained by subtracting the FI value of the well without primary antibody from the FI value determined at a fluorescence wavelength of 800 or 700 nm was designated as FI (800, EGFR)-control (for 800 nm) and FI (700, p-EGFR)- control (for 700 nm). The value obtained by dividing the FI (700, p-EGFR)-control of each well by the FI (800, EGFR)-control was defined as FI (p-EGFR/EGFR). The extent of EGFR phosphorylation was calculated using the following formula to determine the concentration of test compounds at which EGFR was 50% phosphorylated (IC ₅₀ (μM)). Table 1 illustrates the results.

[0090][0090]

Степень фосфорилирования EGFR (%)=T/C×100Degree of EGFR phosphorylation (%)=T/C×100

T: FI (p-EGFR/EGFR) лунки, в которую было добавлено исследуемое соединение.T: FI (p-EGFR/EGFR) of the well to which the test compound was added.

C: FI (p-EGFR/EGFR) лунки, в которую не добавляли исследуемое соединение.C: FI (p-EGFR/EGFR) wells to which no test compound was added.

[0091][0091]

Как видно из таблицы 1, соединение A проявляет высокую ингибирующую активность в отношении внутриклеточного фосфорилирования гибридного мутантного EGFR, содержащего L718Q и L792X; и активность была выше, чем у эрлотиниба, афатиниба и осимертиниба.As can be seen from table 1, compound A exhibits high inhibitory activity against intracellular phosphorylation of the hybrid mutant EGFR containing L718Q and L792X; and the activity was higher than that of erlotinib, afatinib and osimertinib.

[0092][0092]

[Таблица 1][Table 1]

Соединение A по настоящему изобретениюCompound A of the present invention ОсимертинибOsimertinib АфатинибAfatinib ЭрлотинибErlotinib Ex19delEx19del 11,2±6,411.2±6.4 52,1±23,652.1±23.6 18,5±10,218.5±10.2 201±6201±6 Ex19del+T790MEx19del+T790M 16,9±5,916.9±5.9 69,7±15,669.7±15.6 250±64250±64 >1000>1000 Ex19del+T790M+L718QEx19del+T790M+L718Q 82,5±9,082.5±9.0 5800±29405800±2940 >10000>10000 >10000>10000 Ex19del+T790M+L792HEx19del+T790M+L792H 11,1±5,611.1±5.6 513±280513±280 8190±5608190±560 >10000>10000 Ex19del+T790M+L792FEx19del+T790M+L792F 6,25±1,836.25±1.83 65,7±15,565.7±15.5 692±325692±325 >10000>10000 Ex19del+T790M+L792YEx19del+T790M+L792Y 6,54±1,496.54±1.49 111±38111±38 508±218508±218 >10000>10000 L858RL858R 13,8±3,813.8±3.8 53,3±11,053.3±11.0 17,9±3,017.9±3.0 167±22167±22 L858R+T790ML858R+T790M 16,0±2,616.0±2.6 59,0±10,959.0±10.9 162±38162±38 >1000>1000 L858R+T790M+L718QL858R+T790M+L718Q 104±40104±40 7880±9507880±950 3670±16903670±1690 >10000>10000 L858R+T790M+L792HL858R+T790M+L792H 15,3±5,015.3±5.0 441±161441±161 2190±13102190±1310 >10000>10000 L858R+T790M+L792FL858R+T790M+L792F 9,07±4,749.07±4.74 124±40124±40 538±274538±274 >10000>10000 L858R+T790M+L792YL858R+T790M+L792Y 11,3±5,811.3±5.8 273±72273±72 512±269512±269 >10000>10000

--->--->

СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ LIST OF SEQUENCES

<110> TAIHO PHARMACEUTICAL CO., LTD.<110> TAIHO PHARMACEUTICAL CO., LTD.

<120> L718 И/ИЛИ L792 МУТАНТНЫЙ ИНГИБИТОР EGFR, РЕЗИСТЕНТНЫЙ К <120> L718 AND/OR L792 MUTANT EGFR INHIBITOR, RESISTANT TO

ЛЕЧЕНИЮTREATMENT

<130> P19-261WO<130> P19-261WO

<150> JP 2018-247131<150>JP 2018-247131

<151> 2018-12-28<151> 2018-12-28

<160> 1<160> 1

<170> PatentIn version 3.5<170> Patent In version 3.5

<210> 1<210> 1

<211> 1210<211> 1210

<212> БЕЛОК<212> PROTEIN

<213> Homo sapiens<213> Homo sapiens

<400> 1<400> 1

Met Arg Pro Ser Gly Thr Ala Gly Ala Ala Leu Leu Ala Leu Leu AlaMet Arg Pro Ser Gly Thr Ala Gly Ala Ala Leu Leu Ala Leu Leu Ala

1 5 10 151 5 10 15

Ala Leu Cys Pro Ala Ser Arg Ala Leu Glu Glu Lys Lys Val Cys GlnAla Leu Cys Pro Ala Ser Arg Ala Leu Glu Glu Lys Lys Val Cys Gln

20 25 30 20 25 30

Gly Thr Ser Asn Lys Leu Thr Gln Leu Gly Thr Phe Glu Asp His PheGly Thr Ser Asn Lys Leu Thr Gln Leu Gly Thr Phe Glu Asp His Phe

35 40 45 35 40 45

Leu Ser Leu Gln Arg Met Phe Asn Asn Cys Glu Val Val Leu Gly AsnLeu Ser Leu Gln Arg Met Phe Asn Asn Cys Glu Val Val Leu Gly Asn

50 55 60 50 55 60

Leu Glu Ile Thr Tyr Val Gln Arg Asn Tyr Asp Leu Ser Phe Leu LysLeu Glu Ile Thr Tyr Val Gln Arg Asn Tyr Asp Leu Ser Phe Leu Lys

65 70 75 8065 70 75 80

Thr Ile Gln Glu Val Ala Gly Tyr Val Leu Ile Ala Leu Asn Thr ValThr Ile Gln Glu Val Ala Gly Tyr Val Leu Ile Ala Leu Asn Thr Val

85 90 95 85 90 95

Glu Arg Ile Pro Leu Glu Asn Leu Gln Ile Ile Arg Gly Asn Met TyrGlu Arg Ile Pro Leu Glu Asn Leu Gln Ile Ile Arg Gly Asn Met Tyr

100 105 110 100 105 110

Tyr Glu Asn Ser Tyr Ala Leu Ala Val Leu Ser Asn Tyr Asp Ala AsnTyr Glu Asn Ser Tyr Ala Leu Ala Val Leu Ser Asn Tyr Asp Ala Asn

115 120 125 115 120 125

Lys Thr Gly Leu Lys Glu Leu Pro Met Arg Asn Leu Gln Glu Ile LeuLys Thr Gly Leu Lys Glu Leu Pro Met Arg Asn Leu Gln Glu Ile Leu

130 135 140 130 135 140

His Gly Ala Val Arg Phe Ser Asn Asn Pro Ala Leu Cys Asn Val GluHis Gly Ala Val Arg Phe Ser Asn Asn Pro Ala Leu Cys Asn Val Glu

145 150 155 160145 150 155 160

Ser Ile Gln Trp Arg Asp Ile Val Ser Ser Asp Phe Leu Ser Asn MetSer Ile Gln Trp Arg Asp Ile Val Ser Ser Asp Phe Leu Ser Asn Met

165 170 175 165 170 175

Ser Met Asp Phe Gln Asn His Leu Gly Ser Cys Gln Lys Cys Asp ProSer Met Asp Phe Gln Asn His Leu Gly Ser Cys Gln Lys Cys Asp Pro

180 185 190 180 185 190

Ser Cys Pro Asn Gly Ser Cys Trp Gly Ala Gly Glu Glu Asn Cys GlnSer Cys Pro Asn Gly Ser Cys Trp Gly Ala Gly Glu Glu Asn Cys Gln

195 200 205 195 200 205

Lys Leu Thr Lys Ile Ile Cys Ala Gln Gln Cys Ser Gly Arg Cys ArgLys Leu Thr Lys Ile Ile Cys Ala Gln Gln Cys Ser Gly Arg Cys Arg

210 215 220 210 215 220

Gly Lys Ser Pro Ser Asp Cys Cys His Asn Gln Cys Ala Ala Gly CysGly Lys Ser Pro Ser Asp Cys Cys His Asn Gln Cys Ala Ala Gly Cys

225 230 235 240225 230 235 240

Thr Gly Pro Arg Glu Ser Asp Cys Leu Val Cys Arg Lys Phe Arg AspThr Gly Pro Arg Glu Ser Asp Cys Leu Val Cys Arg Lys Phe Arg Asp

245 250 255 245 250 255

Glu Ala Thr Cys Lys Asp Thr Cys Pro Pro Leu Met Leu Tyr Asn ProGlu Ala Thr Cys Lys Asp Thr Cys Pro Pro Leu Met Leu Tyr Asn Pro

260 265 270 260 265 270

Thr Thr Tyr Gln Met Asp Val Asn Pro Glu Gly Lys Tyr Ser Phe GlyThr Thr Tyr Gln Met Asp Val Asn Pro Glu Gly Lys Tyr Ser Phe Gly

275 280 285 275 280 285

Ala Thr Cys Val Lys Lys Cys Pro Arg Asn Tyr Val Val Thr Asp HisAla Thr Cys Val Lys Lys Cys Pro Arg Asn Tyr Val Val Thr Asp His

290 295 300 290 295 300

Gly Ser Cys Val Arg Ala Cys Gly Ala Asp Ser Tyr Glu Met Glu GluGly Ser Cys Val Arg Ala Cys Gly Ala Asp Ser Tyr Glu Met Glu Glu

305 310 315 320305 310 315 320

Asp Gly Val Arg Lys Cys Lys Lys Cys Glu Gly Pro Cys Arg Lys ValAsp Gly Val Arg Lys Cys Lys Lys Cys Glu Gly Pro Cys Arg Lys Val

325 330 335 325 330 335

Cys Asn Gly Ile Gly Ile Gly Glu Phe Lys Asp Ser Leu Ser Ile AsnCys Asn Gly Ile Gly Ile Gly Glu Phe Lys Asp Ser Leu Ser Ile Asn

340 345 350 340 345 350

Ala Thr Asn Ile Lys His Phe Lys Asn Cys Thr Ser Ile Ser Gly AspAla Thr Asn Ile Lys His Phe Lys Asn Cys Thr Ser Ile Ser Gly Asp

355 360 365 355 360 365

Leu His Ile Leu Pro Val Ala Phe Arg Gly Asp Ser Phe Thr His ThrLeu His Ile Leu Pro Val Ala Phe Arg Gly Asp Ser Phe Thr His Thr

370 375 380 370 375 380

Pro Pro Leu Asp Pro Gln Glu Leu Asp Ile Leu Lys Thr Val Lys GluPro Pro Leu Asp Pro Gln Glu Leu Asp Ile Leu Lys Thr Val Lys Glu

385 390 395 400385 390 395 400

Ile Thr Gly Phe Leu Leu Ile Gln Ala Trp Pro Glu Asn Arg Thr AspIle Thr Gly Phe Leu Leu Ile Gln Ala Trp Pro Glu Asn Arg Thr Asp

405 410 415 405 410 415

Leu His Ala Phe Glu Asn Leu Glu Ile Ile Arg Gly Arg Thr Lys GlnLeu His Ala Phe Glu Asn Leu Glu Ile Ile Arg Gly Arg Thr Lys Gln

420 425 430 420 425 430

His Gly Gln Phe Ser Leu Ala Val Val Ser Leu Asn Ile Thr Ser LeuHis Gly Gln Phe Ser Leu Ala Val Val Ser Leu Asn Ile Thr Ser Leu

435 440 445 435 440 445

Gly Leu Arg Ser Leu Lys Glu Ile Ser Asp Gly Asp Val Ile Ile SerGly Leu Arg Ser Leu Lys Glu Ile Ser Asp Gly Asp Val Ile Ile Ser

450 455 460 450 455 460

Gly Asn Lys Asn Leu Cys Tyr Ala Asn Thr Ile Asn Trp Lys Lys LeuGly Asn Lys Asn Leu Cys Tyr Ala Asn Thr Ile Asn Trp Lys Lys Leu

465 470 475 480465 470 475 480

Phe Gly Thr Ser Gly Gln Lys Thr Lys Ile Ile Ser Asn Arg Gly GluPhe Gly Thr Ser Gly Gln Lys Thr Lys Ile Ile Ser Asn Arg Gly Glu

485 490 495 485 490 495

Asn Ser Cys Lys Ala Thr Gly Gln Val Cys His Ala Leu Cys Ser ProAsn Ser Cys Lys Ala Thr Gly Gln Val Cys His Ala Leu Cys Ser Pro

500 505 510 500 505 510

Glu Gly Cys Trp Gly Pro Glu Pro Arg Asp Cys Val Ser Cys Arg AsnGlu Gly Cys Trp Gly Pro Glu Pro Arg Asp Cys Val Ser Cys Arg Asn

515 520 525 515 520 525

Val Ser Arg Gly Arg Glu Cys Val Asp Lys Cys Asn Leu Leu Glu GlyVal Ser Arg Gly Arg Glu Cys Val Asp Lys Cys Asn Leu Leu Glu Gly

530 535 540 530 535 540

Glu Pro Arg Glu Phe Val Glu Asn Ser Glu Cys Ile Gln Cys His ProGlu Pro Arg Glu Phe Val Glu Asn Ser Glu Cys Ile Gln Cys His Pro

545 550 555 560545 550 555 560

Glu Cys Leu Pro Gln Ala Met Asn Ile Thr Cys Thr Gly Arg Gly ProGlu Cys Leu Pro Gln Ala Met Asn Ile Thr Cys Thr Gly Arg Gly Pro

565 570 575 565 570 575

Asp Asn Cys Ile Gln Cys Ala His Tyr Ile Asp Gly Pro His Cys ValAsp Asn Cys Ile Gln Cys Ala His Tyr Ile Asp Gly Pro His Cys Val

580 585 590 580 585 590

Lys Thr Cys Pro Ala Gly Val Met Gly Glu Asn Asn Thr Leu Val TrpLys Thr Cys Pro Ala Gly Val Met Gly Glu Asn Asn Thr Leu Val Trp

595 600 605 595 600 605

Lys Tyr Ala Asp Ala Gly His Val Cys His Leu Cys His Pro Asn CysLys Tyr Ala Asp Ala Gly His Val Cys His Leu Cys His Pro Asn Cys

610 615 620 610 615 620

Thr Tyr Gly Cys Thr Gly Pro Gly Leu Glu Gly Cys Pro Thr Asn GlyThr Tyr Gly Cys Thr Gly Pro Gly Leu Glu Gly Cys Pro Thr Asn Gly

625 630 635 640625 630 635 640

Pro Lys Ile Pro Ser Ile Ala Thr Gly Met Val Gly Ala Leu Leu LeuPro Lys Ile Pro Ser Ile Ala Thr Gly Met Val Gly Ala Leu Leu Leu

645 650 655 645 650 655

Leu Leu Val Val Ala Leu Gly Ile Gly Leu Phe Met Arg Arg Arg HisLeu Leu Val Val Ala Leu Gly Ile Gly Leu Phe Met Arg Arg Arg His

660 665 670 660 665 670

Ile Val Arg Lys Arg Thr Leu Arg Arg Leu Leu Gln Glu Arg Glu LeuIle Val Arg Lys Arg Thr Leu Arg Arg Leu Leu Gln Glu Arg Glu Leu

675 680 685 675 680 685

Val Glu Pro Leu Thr Pro Ser Gly Glu Ala Pro Asn Gln Ala Leu LeuVal Glu Pro Leu Thr Pro Ser Gly Glu Ala Pro Asn Gln Ala Leu Leu

690 695 700 690 695 700

Arg Ile Leu Lys Glu Thr Glu Phe Lys Lys Ile Lys Val Leu Gly SerArg Ile Leu Lys Glu Thr Glu Phe Lys Lys Ile Lys Val Leu Gly Ser

705 710 715 720705 710 715 720

Gly Ala Phe Gly Thr Val Tyr Lys Gly Leu Trp Ile Pro Glu Gly GluGly Ala Phe Gly Thr Val Tyr Lys Gly Leu Trp Ile Pro Glu Gly Glu

725 730 735 725 730 735

Lys Val Lys Ile Pro Val Ala Ile Lys Glu Leu Arg Glu Ala Thr SerLys Val Lys Ile Pro Val Ala Ile Lys Glu Leu Arg Glu Ala Thr Ser

740 745 750 740 745 750

Pro Lys Ala Asn Lys Glu Ile Leu Asp Glu Ala Tyr Val Met Ala SerPro Lys Ala Asn Lys Glu Ile Leu Asp Glu Ala Tyr Val Met Ala Ser

755 760 765 755 760 765

Val Asp Asn Pro His Val Cys Arg Leu Leu Gly Ile Cys Leu Thr SerVal Asp Asn Pro His Val Cys Arg Leu Leu Gly Ile Cys Leu Thr Ser

770 775 780 770 775 780

Thr Val Gln Leu Ile Thr Gln Leu Met Pro Phe Gly Cys Leu Leu AspThr Val Gln Leu Ile Thr Gln Leu Met Pro Phe Gly Cys Leu Leu Asp

785 790 795 800785 790 795 800

Tyr Val Arg Glu His Lys Asp Asn Ile Gly Ser Gln Tyr Leu Leu AsnTyr Val Arg Glu His Lys Asp Asn Ile Gly Ser Gln Tyr Leu Leu Asn

805 810 815 805 810 815

Trp Cys Val Gln Ile Ala Lys Gly Met Asn Tyr Leu Glu Asp Arg ArgTrp Cys Val Gln Ile Ala Lys Gly Met Asn Tyr Leu Glu Asp Arg Arg

820 825 830 820 825 830

Leu Val His Arg Asp Leu Ala Ala Arg Asn Val Leu Val Lys Thr ProLeu Val His Arg Asp Leu Ala Ala Arg Asn Val Leu Val Lys Thr Pro

835 840 845 835 840 845

Gln His Val Lys Ile Thr Asp Phe Gly Leu Ala Lys Leu Leu Gly AlaGln His Val Lys Ile Thr Asp Phe Gly Leu Ala Lys Leu Leu Gly Ala

850 855 860 850 855 860

Glu Glu Lys Glu Tyr His Ala Glu Gly Gly Lys Val Pro Ile Lys TrpGlu Glu Lys Glu Tyr His Ala Glu Gly Gly Lys Val Pro Ile Lys Trp

865 870 875 880865 870 875 880

Met Ala Leu Glu Ser Ile Leu His Arg Ile Tyr Thr His Gln Ser AspMet Ala Leu Glu Ser Ile Leu His Arg Ile Tyr Thr His Gln Ser Asp

885 890 895 885 890 895

Val Trp Ser Tyr Gly Val Thr Val Trp Glu Leu Met Thr Phe Gly SerVal Trp Ser Tyr Gly Val Thr Val Trp Glu Leu Met Thr Phe Gly Ser

900 905 910 900 905 910

Lys Pro Tyr Asp Gly Ile Pro Ala Ser Glu Ile Ser Ser Ile Leu GluLys Pro Tyr Asp Gly Ile Pro Ala Ser Glu Ile Ser Ser Ile Leu Glu

915 920 925 915 920 925

Lys Gly Glu Arg Leu Pro Gln Pro Pro Ile Cys Thr Ile Asp Val TyrLys Gly Glu Arg Leu Pro Gln Pro Pro Ile Cys Thr Ile Asp Val Tyr

930 935 940 930 935 940

Met Ile Met Val Lys Cys Trp Met Ile Asp Ala Asp Ser Arg Pro LysMet Ile Met Val Lys Cys Trp Met Ile Asp Ala Asp Ser Arg Pro Lys

945 950 955 960945 950 955 960

Phe Arg Glu Leu Ile Ile Glu Phe Ser Lys Met Ala Arg Asp Pro GlnPhe Arg Glu Leu Ile Ile Glu Phe Ser Lys Met Ala Arg Asp Pro Gln

965 970 975 965 970 975

Arg Tyr Leu Val Ile Gln Gly Asp Glu Arg Met His Leu Pro Ser ProArg Tyr Leu Val Ile Gln Gly Asp Glu Arg Met His Leu Pro Ser Pro

980 985 990 980 985 990

Thr Asp Ser Asn Phe Tyr Arg Ala Leu Met Asp Glu Glu Asp Met AspThr Asp Ser Asn Phe Tyr Arg Ala Leu Met Asp Glu Glu Asp Met Asp

995 1000 1005 995 1000 1005

Asp Val Val Asp Ala Asp Glu Tyr Leu Ile Pro Gln Gln Gly PheAsp Val Val Asp Ala Asp Glu Tyr Leu Ile Pro Gln Gln Gly Phe

1010 1015 1020 1010 1015 1020

Phe Ser Ser Pro Ser Thr Ser Arg Thr Pro Leu Leu Ser Ser LeuPhe Ser Ser Pro Ser Thr Ser Arg Thr Pro Leu Leu Ser Ser Leu

1025 1030 1035 1025 1030 1035

Ser Ala Thr Ser Asn Asn Ser Thr Val Ala Cys Ile Asp Arg AsnSer Ala Thr Ser Asn Asn Ser Thr Val Ala Cys Ile Asp Arg Asn

1040 1045 1050 1040 1045 1050

Gly Leu Gln Ser Cys Pro Ile Lys Glu Asp Ser Phe Leu Gln ArgGly Leu Gln Ser Cys Pro Ile Lys Glu Asp Ser Phe Leu Gln Arg

1055 1060 1065 1055 1060 1065

Tyr Ser Ser Asp Pro Thr Gly Ala Leu Thr Glu Asp Ser Ile AspTyr Ser Ser Asp Pro Thr Gly Ala Leu Thr Glu Asp Ser Ile Asp

1070 1075 1080 1070 1075 1080

Asp Thr Phe Leu Pro Val Pro Glu Tyr Ile Asn Gln Ser Val ProAsp Thr Phe Leu Pro Val Pro Glu Tyr Ile Asn Gln Ser Val Pro

1085 1090 1095 1085 1090 1095

Lys Arg Pro Ala Gly Ser Val Gln Asn Pro Val Tyr His Asn GlnLys Arg Pro Ala Gly Ser Val Gln Asn Pro Val Tyr His Asn Gln

1100 1105 1110 1100 1105 1110

Pro Leu Asn Pro Ala Pro Ser Arg Asp Pro His Tyr Gln Asp ProPro Leu Asn Pro Ala Pro Ser Arg Asp Pro His Tyr Gln Asp Pro

1115 1120 1125 1115 1120 1125

His Ser Thr Ala Val Gly Asn Pro Glu Tyr Leu Asn Thr Val GlnHis Ser Thr Ala Val Gly Asn Pro Glu Tyr Leu Asn Thr Val Gln

1130 1135 1140 1130 1135 1140

Pro Thr Cys Val Asn Ser Thr Phe Asp Ser Pro Ala His Trp AlaPro Thr Cys Val Asn Ser Thr Phe Asp Ser Pro Ala His Trp Ala

1145 1150 1155 1145 1150 1155

Gln Lys Gly Ser His Gln Ile Ser Leu Asp Asn Pro Asp Tyr GlnGln Lys Gly Ser His Gln Ile Ser Leu Asp Asn Pro Asp Tyr Gln

1160 1165 1170 1160 1165 1170

Gln Asp Phe Phe Pro Lys Glu Ala Lys Pro Asn Gly Ile Phe LysGln Asp Phe Phe Pro Lys Glu Ala Lys Pro Asn Gly Ile Phe Lys

1175 1180 1185 1175 1180 1185

Gly Ser Thr Ala Glu Asn Ala Glu Tyr Leu Arg Val Ala Pro GlnGly Ser Thr Ala Glu Asn Ala Glu Tyr Leu Arg Val Ala Pro Gln

1190 1195 1200 1190 1195 1200

Ser Ser Glu Phe Ile Gly AlaSer Ser Glu Phe Ile Gly Ala

1205 1210 1205 1210

<---<---

Claims

1. Antitumor agent containing (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide (Compound (A)) or a salt thereof, for treating a patient having an EGFR-expressing cancer having at least one mutation selected from the group consisting of the L718X mutation in exon 18 and the L792X mutation in exon 20, where X is the arbitrary amino acid residue and said mutations are selected from the group consisting of L792H, L792F, L792Y and L718Q.

2. The antitumor agent according to claim 1, wherein EGFR further has at least one mutation selected from the group consisting of exon 19 deletion mutation, L858R, L861Q, G719X, E709X and exon 20 insertion mutation.

3. The antitumor agent according to claim 2, wherein the EGFR additionally has the T790M mutation.

4. A method of treating a patient with a malignant tumor, including the step of administering (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b] indolizin-8-yl)acrylamide or a salt thereof to a patient having a cancer expressing EGFR having at least one mutation selected from the group consisting of the L718X mutation in exon 18 and the L792X mutation in exon 20, and said mutations are selected from the group , consisting of L792H, L792F, L792Y and L718Q.

5. The method of claim 4, wherein the EGFR further has at least one mutation selected from the group consisting of exon 19 deletion mutation, L858R, L861Q, G719X, E709X and exon 20 insertion mutation.

6. The method according to claim 5, wherein the EGFR additionally has the T790M mutation.

7. Use of (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide or its salt for treating a patient having a cancer expressing EGFR having at least one mutation selected from the group consisting of the L718X mutation in exon 18 and the L792X mutation in exon 20, and said mutations selected from the group consisting of L792H, L792F, L792Y and L718Q.

8. The use of claim 7, wherein the EGFR further has at least one mutation selected from the group consisting of exon 19 deletion mutation, L858R, L861Q, G719X, E709X and exon 20 insertion mutation.

9. Use according to claim 8, wherein the EGFR additionally has the T790M mutation.

10. Use of (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide or its salt in the manufacture of a pharmaceutical agent for the treatment of a patient having a cancer expressing EGFR, having at least one mutation selected from the group consisting of the L718X mutation in exon 18 and the L792X mutation in exon 20, and said mutations are selected from the group consisting of L792H , L792F, L792Y and L718Q.

11. The use of claim 10, wherein the EGFR further has at least one mutation selected from the group consisting of exon 19 deletion mutation, L858R, L861Q, G719X, E709X and exon 20 insertion mutation.

12. Use according to claim 11, wherein the EGFR additionally has the T790M mutation.

13. A pharmaceutical composition for treating a patient having a malignant tumor expressing EGFR having at least one mutation selected from the group consisting of the L718X mutation in exon 18 and the L792X mutation in exon 20, where X is a random amino acid residue, where the composition contains (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide or a salt thereof and pharmaceutically acceptable carrier, and said mutations are selected from the group consisting of L792H, L792F, L792Y and L718Q.

14. The pharmaceutical composition according to claim 13, wherein EGFR further has at least one mutation selected from the group consisting of exon 19 deletion mutation, L858R, L861Q, G719X, E709X and exon 20 insertion mutation.

15. The pharmaceutical composition according to claim 14, wherein the EGFR additionally has the T790M mutation.

16. A method for predicting the therapeutic effects of chemotherapy using an antitumor agent containing (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5, 4-b]indolizin-8-yl)acrylamide or a salt thereof, in a patient having a malignant tumor, where the method includes steps (1) and (2) below:

(1) the step of detecting the presence or absence of an EGFR gene mutation contained in a biological sample obtained from the patient; And

(2) the step of predicting that the chemotherapy is likely to exhibit sufficient therapeutic effects on the patient when the detection results in step (1) indicate that the EGFR gene has at least one mutation selected from the group consisting of the L718X mutation in exon 18 and the L792X mutation in exon 20, where X is a random amino acid residue and the mutations are selected from the group consisting of L792H, L792F, L792Y and L718Q.

17. The method of claim 16, wherein the EGFR further has at least one mutation selected from the group consisting of an exon 19 deletion mutation, L858R, L861Q, G719X, E709X and an exon 20 insertion mutation.

18. The method according to claim 17, wherein the EGFR additionally has the T790M mutation.

19. A method of treating a patient having a malignant tumor, including steps (1) to (3) below:

(1) the step of detecting the presence or absence of an EGFR gene mutation contained in a biological sample obtained from the patient;

(2) a step of predicting that chemotherapy using an antitumor agent containing (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[ 5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide or a salt thereof is likely to have a sufficient therapeutic effect in the patient when the detection results in step (1) indicate that the EGFR gene has at least one mutation selected from the group , consisting of the L718X mutation in exon 18 and the L792X mutation in exon 20, where X is an arbitrary amino acid residue; And

(3) a step of introducing (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-(quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide or its salts to a patient with a malignant tumor in whom, at stage (2), a sufficient response to chemotherapy using an antitumor agent containing (S)-N-(4-amino-6-methyl-5-) as an active ingredient is highly likely to be predicted (quinolin-3-yl)-8,9-dihydropyrimido[5,4-b]indolizin-8-yl)acrylamide or a salt thereof, and said mutations are selected from the group consisting of L792H, L792F, L792Y and L718Q.

20. The method of claim 19, wherein the EGFR further has at least one mutation selected from the group consisting of an exon 19 deletion mutation, L858R, L861Q, G719X, E709X and an exon 20 insertion mutation.

21. The method according to claim 20, wherein the EGFR additionally has the T790M mutation.