RU2807894C1 - Средство, обладающее антиоксидантным и противовоспалительным действием и способ его получения - Google Patents
Средство, обладающее антиоксидантным и противовоспалительным действием и способ его получения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2807894C1 RU2807894C1 RU2023107274A RU2023107274A RU2807894C1 RU 2807894 C1 RU2807894 C1 RU 2807894C1 RU 2023107274 A RU2023107274 A RU 2023107274A RU 2023107274 A RU2023107274 A RU 2023107274A RU 2807894 C1 RU2807894 C1 RU 2807894C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antioxidant
- ethyl alcohol
- product
- minutes
- inflammatory
- Prior art date
Links
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 title claims abstract description 25
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 title claims abstract description 21
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 title claims abstract description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 26
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 15
- 230000017260 vegetative to reproductive phase transition of meristem Effects 0.000 claims abstract description 10
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000000538 analytical sample Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 4
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000000527 sonication Methods 0.000 claims abstract description 3
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 abstract description 12
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 abstract description 10
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 abstract description 10
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 abstract description 10
- JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N Bioquercetin Natural products CC1OC(OCC(O)C2OC(OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N eriodictyol 7-O-rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C=C3C(C(C(O)=C(O3)C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)=C(O)C=2)O1 IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N quercetin rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N rutin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OC[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N 0.000 abstract description 5
- ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N rutin Natural products CC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5 ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- 235000005493 rutin Nutrition 0.000 abstract description 5
- 229960004555 rutoside Drugs 0.000 abstract description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 10
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 7
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 7
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 7
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 7
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 6
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 5
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 5
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 4
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 4
- 229960001193 diclofenac sodium Drugs 0.000 description 3
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 3
- JGMJQSFLQWGYMQ-UHFFFAOYSA-M sodium;2,6-dichloro-n-phenylaniline;acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O.ClC1=CC=CC(Cl)=C1NC1=CC=CC=C1 JGMJQSFLQWGYMQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 244000072254 Primula veris Species 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- VSCWAEJMTAWNJL-UHFFFAOYSA-K aluminium trichloride Chemical compound Cl[Al](Cl)Cl VSCWAEJMTAWNJL-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 230000006950 reactive oxygen species formation Effects 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001282779 Alfredia cernua Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 244000144730 Amygdalus persica Species 0.000 description 1
- 241001061264 Astragalus Species 0.000 description 1
- 241000813531 Astragalus dasyanthus Species 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 241000201295 Euphrasia Species 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 235000002343 Primula veris Nutrition 0.000 description 1
- 235000016311 Primula vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 235000006040 Prunus persica var persica Nutrition 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 235000006533 astragalus Nutrition 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N benzo-alpha-pyrone Natural products C1=CC=C2OC(=O)C=CC2=C1 ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical class OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 235000021466 carotenoid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001747 carotenoids Chemical class 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 235000001671 coumarin Nutrition 0.000 description 1
- 150000004775 coumarins Chemical class 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 231100000351 embryotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001779 embryotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 229940124600 folk medicine Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910000358 iron sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- RUTXIHLAWFEWGM-UHFFFAOYSA-H iron(3+) sulfate Chemical compound [Fe+3].[Fe+3].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O RUTXIHLAWFEWGM-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 229910000360 iron(III) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229960001375 lactose Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 238000005502 peroxidation Methods 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- -1 phenol glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 150000007965 phenolic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000006862 quantum yield reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 150000005856 steroid saponins Chemical class 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 210000004233 talus Anatomy 0.000 description 1
- 235000018553 tannin Nutrition 0.000 description 1
- 229920001864 tannin Polymers 0.000 description 1
- 239000001648 tannin Substances 0.000 description 1
- 231100000378 teratogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003390 teratogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
Abstract
Заявленное изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству, обладающему антиоксидантной и противовоспалительной активностью. Средство, обладающее антиоксидантным и противовоспалительным действием, представляющее сухой экстракт, полученный экстракцией аналитической пробы травы трехреберника продырявленного, собранной до цветения, массой около 1,0 г -точная навеска, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, в ультразвуковой ячейке 50 мл спирта этилового 40% с озвучиванием в течении 3 минут в термостатируемом режиме при частоте колебаний 22 кГц и мощности ультразвука 90 Вт; последующим фильтрованием в мерную колбу емкостью 250 мл через бумажный фильтр и переносом сырья из ячейки вместе с фильтром в круглодонную колбу вместимостью 250 мл, соединенную с обратным холодильником с последующей экстракцией 100 мл спирта этилового 40% путем нагревания на плитке с закрытой спиралью в течение 20 мин; охлаждением полученного экстракта, фильтрованием в ту же мерную колбу вместимостью 250 мл, доведением до метки 40% спиртом этиловым с последующим высушиванием с помощью лиофильной сушки. Вышеописанное средство обладает выраженным антиоксидантным и противовоспалительным действием, характеризуется увеличенным выходом флавоноидов, а именно средство содержит 7,65±0,03% флавоноидов в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье. 2 табл., 3 пр.
Description
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и фармакогнозии, и касается средства растительного происхождения, обладающего антиоксидантной и противовоспалительной активностью.
Цель: расширение ряда средств, обладающих антиоксидантными и противовоспалительными свойствами. В качестве средства, обладающего антиоксидантным и противовоспалительным действием, применяют экстракт из воздушно-сухого сырья трехреберника продырявленного.
Известно средство растительного происхождения, обладающее антиоксидантной активностью (RU 2342942C1 от 10.01.2009), и может быть использовано для лечения и профилактики заболеваний, где основным патогенетическим фактором является нарушение процессов перекисного и свободнорадикального окисления, особенно липидов. В качестве антиоксидантного средства предложен густой экстракт травы первоцвета весеннего (Primula veris L.). Средство расширяет арсенал лекарственных средств для профилактики и лечения свободнорадикальных патологий.
Также известно средство, обладающее антиоксидантной активностью по патенту РФ на изобретение №2292214С1 от 26.07.2005 г., содержащее экстракт надземной части альфредии поникшей (Alfredia cernua Cass.), который используют в качестве средства, обладающего антиоксидантной активностью. Изобретение расширяет арсенал средств растительного происхождения, обладающих антиоксидантной активностью.
Также известно применение 5%-ного водного экстракта из побегов астрагала (Astragalus dasyanthus) в качестве антиоксидантного средства. Средство обладает выраженным антиоксидантным действием и может расширить арсенал антиоксидантных средств природного происхождения (RU 2302252C1 от 10.07.2007).
Известно средство растительного происхождения, обладающее противовоспалительным действием (RU 2308961C1 от 27.10.2007), содержащее комплекс действующих веществ, выделенных из водного экстракта листьев персика, включающий флавоноиды, дубильные вещества, кумарины, фенилкарбоновые кислоты, фенолгликозиды, сапонины, комплекс действующих веществ, выделенный из водного экстракта растения очанки, включающий флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты, стероидные сапонины, гликозиды, каротиноиды, при этом соотношение комплексов составляет 1:1 или 1:2, или 2:1, а также биологически активные компоненты, выбранные из группы глюкоза, лактоза, аскорбиновая кислота, витамины А и Б, растительная клетчатка и вспомогательные вещества, взятые в определенном соотношении. Средство предназначено для перорального применения в виде капель, порошков, таблеток, драже, капсул. Средство не обладает токсичностью, мутагенностью, эмбриотоксичностью, тератогенностью.
Также известно средство, обладающее противовоспалительным действием по патенту РФ на изобретение № 2637414 от 04.12.2017 г., содержащее спиртовую жидкую вытяжку из растительного сырья, отличающееся тем, что в качестве растительного сырья используют траву кровохлебки лекарственной, измельченную до размера частиц 2,0 мм, экстракцию проводят 70%-ным спиртом при 90°C при соотношении сырье - экстрагент 1:50 в течение 2 ч, при этом первую экстракцию проводят в течение 60 мин, вторую и третью - по 30 мин, затем фильтрацию, упаривание, концентрирование и высушивание спиртового экстракта, что способствует повышению противовоспалительной активности средства.
В литературе упоминаются противовоспалительные и антиоксидантные свойства цветков трехреберника продырявленного (Махлаюк В.П. Лекарственные растения в народной медицине. /В.П. Махлаюк. – Саратов, Приволжское книжное изд., 1991. – с.328–329; Дрибноход Ю.Ю. Косметика и косметология: все растительные средства по уходу за кожей. / Ю.Ю. Дрибноход. – СПб: Весь, 2006. – 314с), но для травы, собранной до цветения, таких свойств не установлено.
Техническим результатом заявленного изобретения является расширение арсенала средств, обладающих антиоксидантным и противовоспалительным действием.
Технический результат достигается благодаря тому, что средство, обладающее антиоксидантным и противовоспалительным действием, получают экстракцией аналитической пробы травы трехреберника продырявленного, собранной до цветения, массой около 1,0 г (точная навеска), измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм в ультразвуковой ячейке 50 мл спирта этилового 40% с озвучиванием в течении 3 минут в термостатируемом режиме при частоте колебаний 22 кГц и мощности ультразвука 90 Вт; последующим фильтрованием в мерную колбу емкостью 250 мл через бумажный фильтр и переносом сырья из ячейки вместе с фильтром в круглодонную колбу вместимостью 250 мл, соединенную с обратным холодильником с последующей экстракцией 100 мл спирта 40% путем нагревания на плитке с закрытой спиралью в течении 20 мин; охлаждением полученного экстракта, фильтрованием в мерную колбу вместимостью 250 мл, доведением до метки 40% спиртом этиловым с последующим высушиванием с помощью лиофильной сушки.
Именно такое соотношение сырья и экстрагента, концентрация спирта этилового, последовательность стадий, применяемая частота колебаний и мощность ультразвука, время экстракции, позволяют получить экстракт, который дает наиболее полный выход флавоноидов; большее время экстракции не рационально, так как содержание действующих веществ в экстракте практически не меняется, следовательно, уровень активности будет оставаться прежним. Применение ультразвука позволяет увеличить выход флавоноидов и сократить общее время получения экстракта.
Возможность использования сухого экстракта из воздушно-сухой травы трёхреберника продырявленного, собранной до цветения, в качестве средства, обладающего антиоксидантным и противовоспалительным действием, из известного уровня техники не выявлена. Экстракт из воздушно-сухой травы трёхреберника продырявленного, собранной до цветения, характеризуются высоким содержанием флавоноидов (более 7%), обладающих антиоксидантной и противовоспалительной активностью.
Предлагаемая нами совокупность признаков позволяет получить средство, устойчивое при хранении, обладающее антиоксидантным и противовоспалительным действием.
Заявленное изобретение может быть подтверждено следующими примерами.
Пример 1.
Аналитическую пробу воздушно-сухой травы трехреберника продырявленного, собранной до цветения, измельчали до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Около 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещали в ультразвуковую ячейку, заливали 50 мл спирта этилового 40%, озвучивали в течении 3 минут в термостатируемом режиме при частоте колебаний 22 кГц и мощности ультразвука 90 Вт. Извлечение фильтровали в мерную колбу емкостью 250 мл через бумажный фильтр. Сырье из ячейки вместе с фильтром переносили в круглодонную колбу вместимостью 250 мл, заливали 100 мл спирта 40%, присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на плитке с закрытой спиралью в течении 20 мин. Затем содержимое колбы охлаждали, после чего извлечение фильтровали через бумажный фильтр в ту же мерную колбу и доводили до 250 мл до метки 40% спиртом этиловым (раствор А испытуемого раствора). Полученный экстракт лиофильно высушивали.
Затем определяли содержание флавоноидов.
Пример 2.
Сумму флавоноидов определяли по методике:
2,0 мл раствора А испытуемого раствора помещали в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляли 2 мл алюминия хлорида раствора 5% в спирте 70% и 0,2 мл уксусной кислоты 30%, доводили объем раствора спиртом 70% до метки и перемешивали (раствор Б испытуемый раствор).
Оптическую плотность раствора Б испытуемого раствора измеряли через 20 мин на спектрофотометре при длине волны 408 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения использовали раствор, состоящий из 2,0 мл раствора А испытуемого раствора, 0,2 мл уксусной кислоты 30%, доведенный спиртом 70 % до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.
где А — оптическая плотность раствора Б испытуемого раствора;
Ао — оптическая плотность раствора Б СО рутина;
а – навеска сырья, г;
ао — навеска СО рутина, г;
Р – содержание основного вещества в СО рутина, %;
W — влажность сырья, %.
Содержание флавоноидов в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье в экстракте составило 7,65±0,03%.
Пример 3.
Для исследования антиоксидантной и противовоспалительной активности готовый сухой экстракт растворяли в воде дистиллированной в соотношении 1:10 и определяли показатели биологической активности экстракта травы трёхреберника продырявленного.
Антиоксидантные свойства оценивали в простых
модельных системах, имитирующих наиболее распространенные реакции
свободно-радикального окисления в организме и в средах, в которых
инициировалось образование активных форм кислорода и реакции перекисного окисления липидов. Регистрацию свечения проводили на хемилюминомере «ХЛМ-003» (Россия). Антиоксидантная активность
определялась по степени угнетения хемилюминесценции и пересчитывалась в процентах от контроля. В качестве препарата сравнения была выбрана аскорбиновая кислота. Для выявления активных форм кислорода использовали люминол (5-амино-2,3-дегидро-4-фталазиндион), который окисляется и образует электронно-возбужденные карбонильные хромофоры с высоким квантовым выходом, в результате чего резко повышается интенсивность свечения, связанного с образованием активных форм кислорода. Хемилюминесценцию регистрировали в течение 5 минут. Исследование проводилось при добавлении 1 мл раствора экстракта травы терехреберника продырявленного, собранной до цветения, на 20 мл реакционной смеси.
модельных системах, имитирующих наиболее распространенные реакции
свободно-радикального окисления в организме и в средах, в которых
инициировалось образование активных форм кислорода и реакции перекисного окисления липидов. Регистрацию свечения проводили на хемилюминомере «ХЛМ-003» (Россия). Антиоксидантная активность
определялась по степени угнетения хемилюминесценции и пересчитывалась в процентах от контроля. В качестве препарата сравнения была выбрана аскорбиновая кислота. Для выявления активных форм кислорода использовали люминол (5-амино-2,3-дегидро-4-фталазиндион), который окисляется и образует электронно-возбужденные карбонильные хромофоры с высоким квантовым выходом, в результате чего резко повышается интенсивность свечения, связанного с образованием активных форм кислорода. Хемилюминесценцию регистрировали в течение 5 минут. Исследование проводилось при добавлении 1 мл раствора экстракта травы терехреберника продырявленного, собранной до цветения, на 20 мл реакционной смеси.
Для инициации активных форм кислорода (модель I) использовали 20 мл фосфатного буфера с добавлением цитрата и люминола. Состав буфера: 2,72 г. KH2PO4, 7,82 г. KCL, 1,5 г. цитрата натрия C6H8O7Na3*5,5H2O на 1 литр дистиллированной воды. Величину рН полученного раствора доводили до 7,45 ед. титрованием насыщенным раствором КОН и добавляли 0,2 мл маточного раствора люминола (10-5 М). Образование АФК инициировали введением 1 мл 50 мМ раствора сернокислого железа.
Для оценки действия соединений на перекисное окисление липидов (модель II) из куриного желтка готовили липопротеиновые комплексы. Желток смешивали с фосфатным буфером в соотношении 1:5, затем гомогенизировали. Хемилюминесценцию инициировали добавлением 1 мл 50 мМ раствора сернокислого железа, запускавшего процесс окисления ненасыщенных жирных кислот, входящих в состав липидов. По интенсивности развивающегося свечения судили о процессах перекисного окисления липидов. Результаты исследования представлены в таблице 1.
Анализируя полученные результаты следует отметить, что исследуемое сырье трехреберника продырявленного проявляет антиоксидантную активность как на модельной системе генерации активных форм кислорода (I), так и перекисного окисления липидов (II), но по уровню антиоксидантных свойств уступает аскорбиновой кислоте. Более сопоставимые результаты АОА исследуемого препарата и препарата сравнения наблюдались в системе ПОЛ (аскорбиновая кислота снижала скорость ПОЛ на 78,1%, а трехреберник на 32,6%), во второй модельной системе - аскорбиновая кислота уменьшала генерацию АФК на 84,5%, а трехреберник на 16,1%.
Таким образом, в результате экспериментальной работы установлено, что в условиях in vitro экстракт травы терехреберника продырявленного, собранной до цветения, проявляет антиоксидантную активность.
Острую воспалительную реакцию (отек) воспроизводили субплантарным (под подошвенный или плантарный апоневроз) введением 0,1 мл 2% раствора формалина. Экспериментальная работа в условиях in vivo проведена на 30 аутбредных крысах-самцах Wistar массой 250-300 г, которые содержались в условиях вивария согласно положениям «Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях ETS N 123» (Страсбург, 18.03.1986 г).
Исследуемые препараты вводили принудительно ежедневно на протяжении недели. Отек лапки животных определяли по разнице диаметра лапки (миллиметры), измеренного штангенциркулем, через 4 и 24 часа после индукции воспаления относительно диаметра лапки до индукции воспаления. Препарат сравнения (диклофенак натрия) вводили за 1 час до моделирования отека в дозировке 10 мг/кг внутрибрюшинно. Противовоспалительный эффект оценивали по уменьшению отека лапки у крыс на фоне исследуемого растительного средства относительно показателя контрольной группы. Препарат сравнения Диклофенак натрия (ООО «Гротекс», Россия). Результаты исследования представлены в таблице 2.
В результате исследования установлено, что экстракт из травы трехреберника продырявленного вызывал угнетение отека на пике его развития (4ч) на 66,67%, а препарат сравнения на 72,22% по сравнению с группой контроля, что свидетельствует о торможении экссудативной фазы воспаления. К концу опыта (24 ч) выраженность воспалительной реакции снижалась и экстракт травы терехреберника продырявленного, собранной до цветения, показал результаты сопоставимые с препаратом сравнения, что показывает его противовоспалительный эффект.
Таблица 1. - Показатели хемилюминесценции на модельных системах генерации активных форм кислорода (I) и перекисного окисления липидов (II), % к контролю.
№ | Исследуемое вещество | Модель | Светосумма | Вспышка |
1 | Трёхреберник продырявленный | I | - 16,1 (13,9-18,5)*, a | - 11,4 (8,3-17,3)* , a |
II | - 32,6 (28,5-33,8)**, a | - 7,2 (6,5-13,2)* , a | ||
2 | Аскорбиновая кислота | I | - 84,5 (79,3-87,1)** | - 91,7 (82,3-95,2)** |
II | - 78,1 (70,4-82,4)** | - 86,8 (80,3-92,1)** | ||
Приведены медиана и межквартильный интервал по результатам 6 измерений. *р≤0,05, **р≤0,001 - в сравнении с контролем; a р≤0.05 - в сравнении с аскорбиновой кислотой. |
Таблица 2. - Противовоспалительная активность экстракта трехреберника травы
Препарат | Чис-ло животных | Диаметр лапки (мм) | Выраженность воспалительной реакции, % | Угнетение отека на пике воспаления (4ч), % | |||
0ч | 4ч | 24ч | 4ч | 24ч | 4ч | ||
Контроль | 10 | 2,9 (2,9-3,4) | 4,7(4,3-4,7)a | 4,1 (3,6-4,1)a | 62,07 | 41,38 | - |
Трехребер-ник, водн.экстракт 1:10 | 10 | 2,7 (2,5-3,1) | 3,3 (2,7-3,8)* | 3,1 (2,9-3,5)* | 22,22±3,56 | 14,81±2,15 | 66,67 |
Диклофенак натрия,10 мг/кг | 10 | 3,0 (2,7-3,2) | 3,5 (3,3-3,9)*,a | 3,2 (2,9-3,6)* | 16,67±2,78 | 6,67±1,05 | 72,22 |
Приведены медиана и межквартильный интервал по результатам 10 измерений. *р≤0,05, **р≤0,001 - в сравнении с контролем по соответствующему времени; a р≤0.05 – 0ч vs 4ч и 24ч. |
Claims (1)
- Средство, обладающее антиоксидантным и противовоспалительным действием, представляющее сухой экстракт, полученный экстракцией аналитической пробы травы трехреберника продырявленного, собранной до цветения, массой около 1,0 г -точная навеска, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, в ультразвуковой ячейке 50 мл спирта этилового 40% с озвучиванием в течении 3 минут в термостатируемом режиме при частоте колебаний 22 кГц и мощности ультразвука 90 Вт; последующим фильтрованием в мерную колбу емкостью 250 мл через бумажный фильтр и переносом сырья из ячейки вместе с фильтром в круглодонную колбу вместимостью 250 мл, соединенную с обратным холодильником с последующей экстракцией 100 мл спирта этилового 40% путем нагревания на плитке с закрытой спиралью в течение 20 мин; охлаждением полученного экстракта, фильтрованием в ту же мерную колбу вместимостью 250 мл, доведением до метки 40% спиртом этиловым с последующим высушиванием с помощью лиофильной сушки.
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2807894C1 true RU2807894C1 (ru) | 2023-11-21 |
Family
ID=
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2104733C1 (ru) * | 1996-11-06 | 1998-02-20 | Сульман Михаил Геннадьевич | Способ экстракции из твердого растительного сырья |
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2104733C1 (ru) * | 1996-11-06 | 1998-02-20 | Сульман Михаил Геннадьевич | Способ экстракции из твердого растительного сырья |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
JANMEJAI K SRIVASTAVA et all. Extraction, Characterization, Stability and Biological Activity of Flavonoids Isolated from Chamomile Flowers //Mol Cell Pharmacol. 2009 January 1; 1(3): 138. ВЕЛИХАНОВА З.Р. и др. Содержание биологически активных веществ в цветках трехреберника продырявленного // Фармация. - N8. - 2017. - С. 9-12. * |
ЕЛАПОВ А. А. и др. Особенности экстракции флавоноидов из трехреберника продырявленного (Tripleurospermum inodorum (L.) Sch.Bip.) в поле ультразвука //Материалы конференций. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2020. Т. 9, N 4, приложение 1, стр.123-124. МАРАХОВА А.И. и др. Разработка методики количественного определения флавоноидов в цветках трехреберника продырявленного TRIPLEUROSPERMUM PERFORATUM (L.) SCH.BIP //Медицинский вестник Башкортостана. Том 17, N 5 (101), 2022, стр.57-62. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Patel et al. | An overview of phytosomes as an advanced herbal drug delivery system | |
Jain et al. | Phytosome: a novel drug delivery system for herbal medicine | |
Kareparamban et al. | Phytosome: a novel revolution in herbal drugs | |
Rathore et al. | Planterosomes: A potential phyto-phospholipid carriers for the bioavailability enhancement of herbal extracts | |
WO1996003999A1 (es) | Procedimiento para la obtencion de extractos apolares y polares de curcuma y aplicaciones de los mismos | |
WO2006088385A2 (en) | Bioactive complex of triterpene acids, its production process and medicinal products with therapeutical uses | |
Singh et al. | Phytosome: Recent advance research for novel drug delivery system | |
KR101285234B1 (ko) | 백미 추출물을 포함하는 관절염 예방 및 치료용 조성물 | |
Udapurkar et al. | Phyto-phospholipid complex vesicles for phytoconstituents and herbal extracts: A promising drug delivery system | |
ES2719958T3 (es) | Composición medicinal de extracto de semilla de Emblica officinalis y método para prepararla | |
Agarwal et al. | Phytosomes: complexation, utilisation and commerical status | |
RU2807894C1 (ru) | Средство, обладающее антиоксидантным и противовоспалительным действием и способ его получения | |
Moussaid et al. | In vivo anti-inflammatory and in vitro antioxidant activities of Moroccan medicinal plants | |
Banerjee et al. | Detoxification of Nerium indicum roots based on Indian system of medicine: Phytochemical and toxicity evaluations | |
Mane et al. | Phyto-phospholipid complexes (phytosomes): a novel approach to improve the bioavailability of active constituents | |
Rani et al. | Phytosomes: potential carriers for herbal drugs | |
Abdulla et al. | Evaluation of the Anti-inflammatory Effects of Blumea aurita | |
RU2342945C1 (ru) | Способ получения средства, обладающего диуретической и противовоспалительной активностью | |
Chaudhary et al. | In-vitro anti-urolithiatic activity and simultaneous HPTLC quantification of berberine and palmatine in standardized extract of Thalictrum foliolosum DC. | |
RU2619863C1 (ru) | Способ получения средства, обладающего тиреотропной активностью | |
RU2366445C1 (ru) | Способ получения средства, обладающего гепатозащитной активностью | |
Saraç et al. | Determination of the activities of horse chestnut (Aesculus hippocastanum L.) extract against liver cancer proteins | |
RU2372934C1 (ru) | Способ получения средства, обладающего противовоспалительной активностью | |
Yaşar et al. | Effect of My Guard® Food Supplement on Acute and Subacute Toxicity on Rats | |
RU2729784C1 (ru) | Растительный сбор, обладающий антиоксидантным, противовоспалительным и капилляроукрепляющим действием |