RU2807216C2 - Антитела, связывающие cd3 - Google Patents
Антитела, связывающие cd3 Download PDFInfo
- Publication number
- RU2807216C2 RU2807216C2 RU2022103374A RU2022103374A RU2807216C2 RU 2807216 C2 RU2807216 C2 RU 2807216C2 RU 2022103374 A RU2022103374 A RU 2022103374A RU 2022103374 A RU2022103374 A RU 2022103374A RU 2807216 C2 RU2807216 C2 RU 2807216C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- gly
- amino acid
- ser
- domain
- acid sequence
- Prior art date
Links
- 230000027455 binding Effects 0.000 title claims description 125
- 108010008014 B-Cell Maturation Antigen Proteins 0.000 claims abstract description 31
- 102000006942 B-Cell Maturation Antigen Human genes 0.000 claims abstract description 31
- BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-n-[3-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-(dimethylamino)phenyl]-1-n,1-n-dimethylbenzene-1,4-diamine Chemical compound C1=C(C(C=2C=CC(Cl)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)C(N(C)C)=CC=C1NC(C=1)=CC=C(N(C)C)C=1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=C(Cl)C=C1 BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 20
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 89
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 70
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 59
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 56
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 55
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 44
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 30
- 101100112922 Candida albicans CDR3 gene Proteins 0.000 claims description 21
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 20
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 19
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 9
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 8
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 6
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims description 6
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims description 6
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 101000801255 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 17 Proteins 0.000 claims 3
- 102000046935 human TNFRSF17 Human genes 0.000 claims 3
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 25
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 24
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 23
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 15
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 abstract description 13
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 abstract description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 8
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 abstract description 4
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 abstract description 2
- 239000012642 immune effector Substances 0.000 abstract description 2
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 abstract description 2
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 117
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 87
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 87
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 87
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 80
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 63
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 63
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 description 57
- 108050005493 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Proteins 0.000 description 57
- 102100035360 Cerebellar degeneration-related antigen 1 Human genes 0.000 description 52
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 47
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 40
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 40
- 238000000034 method Methods 0.000 description 38
- MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N Asn-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 34
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 31
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 24
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 24
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 23
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 23
- QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N Ser-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 22
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 22
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Natural products NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- OYTPNWYZORARHL-XHNCKOQMSA-N Gln-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N OYTPNWYZORARHL-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 21
- MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N Gly-Leu-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N 0.000 description 21
- AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N Leu-Gln-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 21
- GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N Lys-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 21
- YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N Ser-Gly-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 21
- IOVHBRCQOGWAQH-ZKWXMUAHSA-N Ser-Gly-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O IOVHBRCQOGWAQH-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 21
- 108010069020 alanyl-prolyl-glycine Proteins 0.000 description 21
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 21
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 21
- BUDNAJYVCUHLSV-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asp-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BUDNAJYVCUHLSV-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 20
- MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N Asp-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 20
- YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N Glu-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 20
- PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N Gly-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)NCC(O)=O PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 20
- WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N Gly-Phe-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)CN)O WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N 0.000 description 20
- PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N L-Arginyl-L-glutamin-acetat Natural products NC(=N)NCCCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 20
- FGWUALWGCZJQDJ-URLPEUOOSA-N Phe-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O FGWUALWGCZJQDJ-URLPEUOOSA-N 0.000 description 20
- QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N Ser-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 20
- MBLJBGZWLHTJBH-SZMVWBNQSA-N Trp-Val-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)=CNC2=C1 MBLJBGZWLHTJBH-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 20
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 20
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 20
- YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ala-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 19
- FQCILXROGNOZON-YUMQZZPRSA-N Gln-Pro-Gly Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O FQCILXROGNOZON-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 19
- 101000737793 Homo sapiens Cerebellar degeneration-related antigen 1 Proteins 0.000 description 19
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 19
- UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 19
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 19
- SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N Ala-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 18
- MAEQBGQTDWDSJQ-LSJOCFKGSA-N Ala-Met-His Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N MAEQBGQTDWDSJQ-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 18
- SLKLLQWZQHXYSV-CIUDSAMLSA-N Asn-Ala-Lys Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O SLKLLQWZQHXYSV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 18
- CCQOOWAONKGYKQ-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)CN CCQOOWAONKGYKQ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 18
- ZZWUYQXMIFTIIY-WEDXCCLWSA-N Gly-Thr-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ZZWUYQXMIFTIIY-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 18
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 18
- FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N Leu-Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 18
- YIRIDPUGZKHMHT-ACRUOGEOSA-N Leu-Tyr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O YIRIDPUGZKHMHT-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 18
- AIMGJYMCTAABEN-GVXVVHGQSA-N Leu-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AIMGJYMCTAABEN-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 18
- HQTKVSCNCDLXSX-BQBZGAKWSA-N Ser-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O HQTKVSCNCDLXSX-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 18
- AXKJPUBALUNJEO-UBHSHLNASA-N Ser-Trp-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O AXKJPUBALUNJEO-UBHSHLNASA-N 0.000 description 18
- HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N Val-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 18
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 18
- UAQSZXGJGLHMNV-XEGUGMAKSA-N Ile-Gly-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)N UAQSZXGJGLHMNV-XEGUGMAKSA-N 0.000 description 17
- SVGAWGVHFIYAEE-JSGCOSHPSA-N Trp-Gly-Gln Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 SVGAWGVHFIYAEE-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 17
- 108010008685 alanyl-glutamyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 17
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 17
- 230000006870 function Effects 0.000 description 17
- 108010048994 glycyl-tyrosyl-alanine Proteins 0.000 description 17
- 108010084760 glycyl-tyrosyl-glycyl-aspartate Proteins 0.000 description 17
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 17
- VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N Arg-Ala-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 16
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 16
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 16
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 16
- 102100035361 Cerebellar degeneration-related protein 2 Human genes 0.000 description 15
- 101000737796 Homo sapiens Cerebellar degeneration-related protein 2 Proteins 0.000 description 15
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 15
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 15
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 15
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 13
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 13
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 13
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 12
- ZENDEDYRYVHBEG-SRVKXCTJSA-N Phe-Asp-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 ZENDEDYRYVHBEG-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 11
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 11
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 11
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 11
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 10
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 10
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 description 10
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 10
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 10
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 10
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 9
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 9
- RWOKVQUCENPXGE-IHRRRGAJSA-N Tyr-Ser-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O RWOKVQUCENPXGE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 9
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 9
- 108010044311 leucyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 9
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 9
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 9
- 102100029193 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Human genes 0.000 description 8
- 101710099301 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 8
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 8
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 8
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 8
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 8
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 7
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 7
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 7
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 7
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 6
- 102100024216 Programmed cell death 1 ligand 1 Human genes 0.000 description 6
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 description 6
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 6
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 6
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 6
- 108010020755 prolyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 5
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 5
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 5
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 5
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 5
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 5
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 5
- ADBDQGBDNUTRDB-ULQDDVLXSA-N Tyr-Arg-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ADBDQGBDNUTRDB-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 5
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 5
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 5
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 5
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 5
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 5
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 5
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 5
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 5
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 5
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 5
- VCSABYLVNWQYQE-UHFFFAOYSA-N Ala-Lys-Lys Natural products NCCCCC(NC(=O)C(N)C)C(=O)NC(CCCCN)C(O)=O VCSABYLVNWQYQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 4
- IOQWIOPSKJOEKI-SRVKXCTJSA-N Lys-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IOQWIOPSKJOEKI-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 4
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 4
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 4
- KZSYAEWQMJEGRZ-RHYQMDGZSA-N Thr-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O KZSYAEWQMJEGRZ-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 4
- MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N Thr-Val-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 4
- MQGGXGKQSVEQHR-KKUMJFAQSA-N Tyr-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 MQGGXGKQSVEQHR-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 4
- PZTZYZUTCPZWJH-FXQIFTODSA-N Val-Ser-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N PZTZYZUTCPZWJH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 4
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 4
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 4
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 4
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 4
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 4
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PIXQDIGKDNNOOV-GUBZILKMSA-N Ala-Lys-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O PIXQDIGKDNNOOV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- XSPKAHFVDKRGRL-DCAQKATOSA-N Arg-Pro-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O XSPKAHFVDKRGRL-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 3
- 102100029822 B- and T-lymphocyte attenuator Human genes 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100031151 C-C chemokine receptor type 2 Human genes 0.000 description 3
- 101710149815 C-C chemokine receptor type 2 Proteins 0.000 description 3
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 3
- 102100039498 Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Human genes 0.000 description 3
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 3
- OMOZPGCHVWOXHN-BQBZGAKWSA-N Gly-Met-Ser Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)CN OMOZPGCHVWOXHN-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 101001137987 Homo sapiens Lymphocyte activation gene 3 protein Proteins 0.000 description 3
- 101001117317 Homo sapiens Programmed cell death 1 ligand 1 Proteins 0.000 description 3
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 3
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102100039688 Insulin-like growth factor 1 receptor Human genes 0.000 description 3
- IBMVEYRWAWIOTN-UHFFFAOYSA-N L-Leucyl-L-Arginyl-L-Proline Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCCC1C(O)=O IBMVEYRWAWIOTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 3
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 3
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 3
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 3
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 3
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 3
- WMGVYPPIMZPWPN-SRVKXCTJSA-N Phe-Asp-Asn Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N WMGVYPPIMZPWPN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- 102100024213 Programmed cell death 1 ligand 2 Human genes 0.000 description 3
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N Thr-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N 0.000 description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 230000001270 agonistic effect Effects 0.000 description 3
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 3
- 125000000151 cysteine group Chemical class N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 3
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 3
- 108010063718 gamma-glutamylaspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 3
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 238000007481 next generation sequencing Methods 0.000 description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 3
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 3
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZDILXFDENZVOTL-BPNCWPANSA-N Ala-Val-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ZDILXFDENZVOTL-BPNCWPANSA-N 0.000 description 2
- 235000002198 Annona diversifolia Nutrition 0.000 description 2
- YNSGXDWWPCGGQS-YUMQZZPRSA-N Arg-Gly-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YNSGXDWWPCGGQS-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- WVNFNPGXYADPPO-BQBZGAKWSA-N Arg-Gly-Ser Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WVNFNPGXYADPPO-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- UGXYFDQFLVCDFC-CIUDSAMLSA-N Asn-Ser-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O UGXYFDQFLVCDFC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- JBDLMLZNDRLDIX-HJGDQZAQSA-N Asn-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O JBDLMLZNDRLDIX-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 2
- POTCZYQVVNXUIG-BQBZGAKWSA-N Asp-Gly-Pro Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O POTCZYQVVNXUIG-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- SNDBKTFJWVEVPO-WHFBIAKZSA-N Asp-Gly-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SNDBKTFJWVEVPO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 description 2
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 2
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 2
- 241000282832 Camelidae Species 0.000 description 2
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- 241000251730 Chondrichthyes Species 0.000 description 2
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 2
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 2
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 2
- BYYNJRSNDARRBX-YFKPBYRVSA-N Gly-Gln-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O BYYNJRSNDARRBX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- HDNXXTBKOJKWNN-WDSKDSINSA-N Gly-Glu-Asn Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O HDNXXTBKOJKWNN-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102100034458 Hepatitis A virus cellular receptor 2 Human genes 0.000 description 2
- 101000864344 Homo sapiens B- and T-lymphocyte attenuator Proteins 0.000 description 2
- 101000889276 Homo sapiens Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Proteins 0.000 description 2
- 101001117312 Homo sapiens Programmed cell death 1 ligand 2 Proteins 0.000 description 2
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 2
- 101000946860 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Proteins 0.000 description 2
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 2
- 101000610604 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B Proteins 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 2
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 2
- 101710184277 Insulin-like growth factor 1 receptor Proteins 0.000 description 2
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 2
- 102000017578 LAG3 Human genes 0.000 description 2
- 241000282838 Lama Species 0.000 description 2
- QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N Leu-Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- PDIDTSZKKFEDMB-UWVGGRQHSA-N Lys-Pro-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O PDIDTSZKKFEDMB-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-proline Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 2
- VUYCNYVLKACHPA-KKUMJFAQSA-N Phe-Asp-His Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)N VUYCNYVLKACHPA-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- ZTVCLZLGHZXLOT-ULQDDVLXSA-N Pro-Glu-Trp Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)C(=O)O ZTVCLZLGHZXLOT-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 2
- 102000014128 RANK Ligand Human genes 0.000 description 2
- 108010025832 RANK Ligand Proteins 0.000 description 2
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 201000010208 Seminoma Diseases 0.000 description 2
- 102100035794 T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Human genes 0.000 description 2
- FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N Thr-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 2
- YOPQYBJJNSIQGZ-JNPHEJMOSA-N Thr-Tyr-Tyr Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 YOPQYBJJNSIQGZ-JNPHEJMOSA-N 0.000 description 2
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 102100040113 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10A Human genes 0.000 description 2
- 102100040112 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B Human genes 0.000 description 2
- 229940127174 UCHT1 Drugs 0.000 description 2
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 description 2
- OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N Val-Tyr-Tyr Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)N OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 2
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 2
- 102000009484 Vascular Endothelial Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 2
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000005888 antibody-dependent cellular phagocytosis Effects 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 239000008135 aqueous vehicle Substances 0.000 description 2
- 108010069926 arginyl-glycyl-serine Proteins 0.000 description 2
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 2
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- -1 carboxy, sulfonyloxy Chemical group 0.000 description 2
- YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N catechol Chemical compound OC1=CC=CC=C1O YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 2
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 2
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 229940121657 clinical drug Drugs 0.000 description 2
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 2
- 238000012063 dual-affinity re-targeting Methods 0.000 description 2
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 2
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 2
- 108010010147 glycylglutamine Proteins 0.000 description 2
- 238000011194 good manufacturing practice Methods 0.000 description 2
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 2
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 2
- 230000004073 interleukin-2 production Effects 0.000 description 2
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 2
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 2
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 229950001869 mapatumumab Drugs 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 2
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 208000024191 minimally invasive lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 229950002142 minretumomab Drugs 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N pentan-3-ol Chemical compound CCC(O)CC AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 210000004986 primary T-cell Anatomy 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003156 radioimmunoprecipitation Methods 0.000 description 2
- GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N resorcinol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1 GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 230000009450 sialylation Effects 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 2
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 101150084750 1 gene Proteins 0.000 description 1
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 4-(4-fluorophenyl)oxane-4-carboxylic acid Chemical compound C=1C=C(F)C=CC=1C1(C(=O)O)CCOCC1 CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 102000007471 Adenosine A2A receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010085277 Adenosine A2A receptor Proteins 0.000 description 1
- 101150051188 Adora2a gene Proteins 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- BTYTYHBSJKQBQA-GCJQMDKQSA-N Ala-Asp-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N)O BTYTYHBSJKQBQA-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 1
- KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N Ala-Glu-Asp Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- RTZCUEHYUQZIDE-WHFBIAKZSA-N Ala-Ser-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O RTZCUEHYUQZIDE-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- WNHNMKOFKCHKKD-BFHQHQDPSA-N Ala-Thr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O WNHNMKOFKCHKKD-BFHQHQDPSA-N 0.000 description 1
- ZXKNLCPUNZPFGY-LEWSCRJBSA-N Ala-Tyr-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N ZXKNLCPUNZPFGY-LEWSCRJBSA-N 0.000 description 1
- PQWTZSNVWSOFFK-FXQIFTODSA-N Arg-Asp-Asn Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N)CN=C(N)N PQWTZSNVWSOFFK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- AUFHLLPVPSMEOG-YUMQZZPRSA-N Arg-Gly-Glu Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AUFHLLPVPSMEOG-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N Arg-Phe-Ser Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- FMYQECOAIFGQGU-CYDGBPFRSA-N Arg-Val-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O FMYQECOAIFGQGU-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- ANRZCQXIXGDXLR-CWRNSKLLSA-N Asn-Trp-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)C(=O)O ANRZCQXIXGDXLR-CWRNSKLLSA-N 0.000 description 1
- KPNUCOPMVSGRCR-DCAQKATOSA-N Asp-His-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O KPNUCOPMVSGRCR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- PYXXJFRXIYAESU-PCBIJLKTSA-N Asp-Ile-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O PYXXJFRXIYAESU-PCBIJLKTSA-N 0.000 description 1
- JSHWXQIZOCVWIA-ZKWXMUAHSA-N Asp-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O JSHWXQIZOCVWIA-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- GCACQYDBDHRVGE-LKXGYXEUSA-N Asp-Thr-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@H](O)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O GCACQYDBDHRVGE-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- GYNUXDMCDILYIQ-QRTARXTBSA-N Asp-Val-Trp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N GYNUXDMCDILYIQ-QRTARXTBSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 108091008875 B cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 101710144268 B- and T-lymphocyte attenuator Proteins 0.000 description 1
- 208000004736 B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 102100024217 CAMPATH-1 antigen Human genes 0.000 description 1
- 102000001902 CC Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010040471 CC Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 108010065524 CD52 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 102000016917 Complement C1 Human genes 0.000 description 1
- 108010028774 Complement C1 Proteins 0.000 description 1
- 102000014447 Complement C1q Human genes 0.000 description 1
- 108010078043 Complement C1q Proteins 0.000 description 1
- AMRLSQGGERHDHJ-FXQIFTODSA-N Cys-Ala-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O AMRLSQGGERHDHJ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- SZQCDCKIGWQAQN-FXQIFTODSA-N Cys-Arg-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SZQCDCKIGWQAQN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- VCIIDXDOPGHMDQ-WDSKDSINSA-N Cys-Gly-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O VCIIDXDOPGHMDQ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100025137 Early activation antigen CD69 Human genes 0.000 description 1
- 108010043940 Ephrin-A3 Proteins 0.000 description 1
- 102100033940 Ephrin-A3 Human genes 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 108010021468 Fc gamma receptor IIA Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 206010017993 Gastrointestinal neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- JXFLPKSDLDEOQK-JHEQGTHGSA-N Gln-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O JXFLPKSDLDEOQK-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 1
- LGIKBBLQVSWUGK-DCAQKATOSA-N Gln-Leu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O LGIKBBLQVSWUGK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- WPJDPEOQUIXXOY-AVGNSLFASA-N Gln-Tyr-Asn Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O WPJDPEOQUIXXOY-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- MXOODARRORARSU-ACZMJKKPSA-N Glu-Ala-Ser Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N MXOODARRORARSU-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- AVZHGSCDKIQZPQ-CIUDSAMLSA-N Glu-Arg-Ala Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C(O)=O AVZHGSCDKIQZPQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- YKLNMGJYMNPBCP-ACZMJKKPSA-N Glu-Asn-Asp Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N YKLNMGJYMNPBCP-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- PAQUJCSYVIBPLC-AVGNSLFASA-N Glu-Asp-Phe Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PAQUJCSYVIBPLC-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- INGJLBQKTRJLFO-UKJIMTQDSA-N Glu-Ile-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O INGJLBQKTRJLFO-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 1
- MIWJDJAMMKHUAR-ZVZYQTTQSA-N Glu-Trp-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N MIWJDJAMMKHUAR-ZVZYQTTQSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- YNIMVVJTPWCUJH-KBPBESRZSA-N Gly-His-Tyr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O YNIMVVJTPWCUJH-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- IXHQLZIWBCQBLQ-STQMWFEESA-N Gly-Pro-Phe Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 IXHQLZIWBCQBLQ-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- OHUKZZYSJBKFRR-WHFBIAKZSA-N Gly-Ser-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O OHUKZZYSJBKFRR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- FGPLUIQCSKGLTI-WDSKDSINSA-N Gly-Ser-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O FGPLUIQCSKGLTI-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- LCRDMSSAKLTKBU-ZDLURKLDSA-N Gly-Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN LCRDMSSAKLTKBU-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- DBUNZBWUWCIELX-JHEQGTHGSA-N Gly-Thr-Glu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O DBUNZBWUWCIELX-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 1
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Polymers OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N H-Gly-Phe-OH Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 101710083479 Hepatitis A virus cellular receptor 2 homolog Proteins 0.000 description 1
- 102100022623 Hepatocyte growth factor receptor Human genes 0.000 description 1
- QCBYAHHNOHBXIH-UWVGGRQHSA-N His-Pro-Gly Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(O)=O)C1=CN=CN1 QCBYAHHNOHBXIH-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 1
- 101000934374 Homo sapiens Early activation antigen CD69 Proteins 0.000 description 1
- 101000851181 Homo sapiens Epidermal growth factor receptor Proteins 0.000 description 1
- 101001068133 Homo sapiens Hepatitis A virus cellular receptor 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000972946 Homo sapiens Hepatocyte growth factor receptor Proteins 0.000 description 1
- 101001034652 Homo sapiens Insulin-like growth factor 1 receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 description 1
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 description 1
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 1
- 101000830603 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 11 Proteins 0.000 description 1
- 101000610605 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10A Proteins 0.000 description 1
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100026120 IgG receptor FcRn large subunit p51 Human genes 0.000 description 1
- 101710177940 IgG receptor FcRn large subunit p51 Proteins 0.000 description 1
- ASCFJMSGKUIRDU-ZPFDUUQYSA-N Ile-Arg-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O ASCFJMSGKUIRDU-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- AQTWDZDISVGCAC-CFMVVWHZSA-N Ile-Asp-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)N AQTWDZDISVGCAC-CFMVVWHZSA-N 0.000 description 1
- IITVUURPOYGCTD-NAKRPEOUSA-N Ile-Pro-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O IITVUURPOYGCTD-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- PXKACEXYLPBMAD-JBDRJPRFSA-N Ile-Ser-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N PXKACEXYLPBMAD-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- HXIDVIFHRYRXLZ-NAKRPEOUSA-N Ile-Ser-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N HXIDVIFHRYRXLZ-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- 108091008028 Immune checkpoint receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000037978 Immune checkpoint receptors Human genes 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 108010042918 Integrin alpha5beta1 Proteins 0.000 description 1
- 108010047852 Integrin alphaVbeta3 Proteins 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- UGTHTQWIQKEDEH-BQBZGAKWSA-N L-alanyl-L-prolylglycine zwitterion Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O UGTHTQWIQKEDEH-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- HXWALXSAVBLTPK-NUTKFTJISA-N Leu-Ala-Trp Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N HXWALXSAVBLTPK-NUTKFTJISA-N 0.000 description 1
- UCOCBWDBHCUPQP-DCAQKATOSA-N Leu-Arg-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UCOCBWDBHCUPQP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- ZTLGVASZOIKNIX-DCAQKATOSA-N Leu-Gln-Glu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N ZTLGVASZOIKNIX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- WQWSMEOYXJTFRU-GUBZILKMSA-N Leu-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WQWSMEOYXJTFRU-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- LINKCQUOMUDLKN-KATARQTJSA-N Leu-Thr-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N)O LINKCQUOMUDLKN-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- MVJRBCJCRYGCKV-GVXVVHGQSA-N Leu-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O MVJRBCJCRYGCKV-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 description 1
- 102100029204 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Human genes 0.000 description 1
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 description 1
- 102100020862 Lymphocyte activation gene 3 protein Human genes 0.000 description 1
- YKIRNDPUWONXQN-GUBZILKMSA-N Lys-Asn-Gln Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N YKIRNDPUWONXQN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- GQFDWEDHOQRNLC-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN GQFDWEDHOQRNLC-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- RFQATBGBLDAKGI-VHSXEESVSA-N Lys-Gly-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)CNC(=O)[C@H](CCCCN)N)C(=O)O RFQATBGBLDAKGI-VHSXEESVSA-N 0.000 description 1
- YTJFXEDRUOQGSP-DCAQKATOSA-N Lys-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YTJFXEDRUOQGSP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- UGCIQUYEJIEHKX-GVXVVHGQSA-N Lys-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UGCIQUYEJIEHKX-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- SPSSJSICDYYTQN-HJGDQZAQSA-N Met-Thr-Gln Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O SPSSJSICDYYTQN-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 101100407308 Mus musculus Pdcd1lg2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 description 1
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N N-alpha-L-glutamyl-L-phenylalanine Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N N-methylglucamine Chemical compound CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- WSXKXSBOJXEZDV-DLOVCJGASA-N Phe-Ala-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC=CC=C1 WSXKXSBOJXEZDV-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- LSXGADJXBDFXQU-DLOVCJGASA-N Phe-Ala-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 LSXGADJXBDFXQU-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- HTTYNOXBBOWZTB-SRVKXCTJSA-N Phe-Asn-Asn Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N HTTYNOXBBOWZTB-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- RVRRHFPCEOVRKQ-KKUMJFAQSA-N Phe-His-Asn Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N RVRRHFPCEOVRKQ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N Phe-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N 0.000 description 1
- MSSXKZBDKZAHCX-UNQGMJICSA-N Phe-Thr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MSSXKZBDKZAHCX-UNQGMJICSA-N 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HAAQQNHQZBOWFO-LURJTMIESA-N Pro-Gly-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1 HAAQQNHQZBOWFO-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 108700030875 Programmed Cell Death 1 Ligand 2 Proteins 0.000 description 1
- 101710094000 Programmed cell death 1 ligand 1 Proteins 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 101710100969 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Proteins 0.000 description 1
- 102100029986 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Human genes 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000555745 Sciuridae Species 0.000 description 1
- 241000239226 Scorpiones Species 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- KCFKKAQKRZBWJB-ZLUOBGJFSA-N Ser-Cys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O KCFKKAQKRZBWJB-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- FMDHKPRACUXATF-ACZMJKKPSA-N Ser-Gln-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FMDHKPRACUXATF-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- KDGARKCAKHBEDB-NKWVEPMBSA-N Ser-Gly-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)CNC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O KDGARKCAKHBEDB-NKWVEPMBSA-N 0.000 description 1
- GJFYFGOEWLDQGW-GUBZILKMSA-N Ser-Leu-Gln Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N GJFYFGOEWLDQGW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- UBRMZSHOOIVJPW-SRVKXCTJSA-N Ser-Leu-Lys Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O UBRMZSHOOIVJPW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- HDBOEVPDIDDEPC-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O HDBOEVPDIDDEPC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ADJDNJCSPNFFPI-FXQIFTODSA-N Ser-Pro-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CO ADJDNJCSPNFFPI-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- OLKICIBQRVSQMA-SRVKXCTJSA-N Ser-Ser-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O OLKICIBQRVSQMA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- RXUOAOOZIWABBW-XGEHTFHBSA-N Ser-Thr-Arg Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N RXUOAOOZIWABBW-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- ZKOKTQPHFMRSJP-YJRXYDGGSA-N Ser-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ZKOKTQPHFMRSJP-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 208000000389 T-cell leukemia Diseases 0.000 description 1
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 1
- 108091007178 TNFRSF10A Proteins 0.000 description 1
- 102000007000 Tenascin Human genes 0.000 description 1
- 108010008125 Tenascin Proteins 0.000 description 1
- XSLXHSYIVPGEER-KZVJFYERSA-N Thr-Ala-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O XSLXHSYIVPGEER-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- IJVNLNRVDUTWDD-MEYUZBJRSA-N Thr-Leu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O IJVNLNRVDUTWDD-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- BIBYEFRASCNLAA-CDMKHQONSA-N Thr-Phe-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=CC=C1 BIBYEFRASCNLAA-CDMKHQONSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZIQDVNORJKTMO-WDSOQIARSA-N Trp-Arg-His Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC3=CN=CN3)C(=O)O)N KZIQDVNORJKTMO-WDSOQIARSA-N 0.000 description 1
- KIMOCKLJBXHFIN-YLVFBTJISA-N Trp-Ile-Gly Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(O)=O)=CNC2=C1 KIMOCKLJBXHFIN-YLVFBTJISA-N 0.000 description 1
- HWCBFXAWVTXXHZ-NYVOZVTQSA-N Trp-Ser-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC3=CNC4=CC=CC=C43)C(=O)O)N HWCBFXAWVTXXHZ-NYVOZVTQSA-N 0.000 description 1
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100024568 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 11 Human genes 0.000 description 1
- 101710165473 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100022153 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 description 1
- 206010064390 Tumour invasion Diseases 0.000 description 1
- 206010053613 Type IV hypersensitivity reaction Diseases 0.000 description 1
- VTFWAGGJDRSQFG-MELADBBJSA-N Tyr-Asn-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N)C(=O)O VTFWAGGJDRSQFG-MELADBBJSA-N 0.000 description 1
- QOIKZODVIPOPDD-AVGNSLFASA-N Tyr-Cys-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O QOIKZODVIPOPDD-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N Tyr-Gln-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- CNLKDWSAORJEMW-KWQFWETISA-N Tyr-Gly-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CNLKDWSAORJEMW-KWQFWETISA-N 0.000 description 1
- OLWFDNLLBWQWCP-STQMWFEESA-N Tyr-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O OLWFDNLLBWQWCP-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- AZGZDDNKFFUDEH-QWRGUYRKSA-N Tyr-Gly-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 AZGZDDNKFFUDEH-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- DZKFGCNKEVMXFA-JUKXBJQTSA-N Tyr-Ile-His Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)Cc1ccc(O)cc1)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(O)=O DZKFGCNKEVMXFA-JUKXBJQTSA-N 0.000 description 1
- ZPFLBLFITJCBTP-QWRGUYRKSA-N Tyr-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O ZPFLBLFITJCBTP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- MWUYSCVVPVITMW-IGNZVWTISA-N Tyr-Tyr-Ala Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 MWUYSCVVPVITMW-IGNZVWTISA-N 0.000 description 1
- ANHVRCNNGJMJNG-BZSNNMDCSA-N Tyr-Tyr-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O ANHVRCNNGJMJNG-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- RMRFSFXLFWWAJZ-HJOGWXRNSA-N Tyr-Tyr-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 RMRFSFXLFWWAJZ-HJOGWXRNSA-N 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- JIODCDXKCJRMEH-NHCYSSNCSA-N Val-Arg-Gln Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N JIODCDXKCJRMEH-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- VFOHXOLPLACADK-GVXVVHGQSA-N Val-Gln-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](C(C)C)N VFOHXOLPLACADK-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- GBIUHAYJGWVNLN-AEJSXWLSSA-N Val-Ser-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N GBIUHAYJGWVNLN-AEJSXWLSSA-N 0.000 description 1
- GBIUHAYJGWVNLN-UHFFFAOYSA-N Val-Ser-Pro Natural products CC(C)C(N)C(=O)NC(CO)C(=O)N1CCCC1C(O)=O GBIUHAYJGWVNLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CEKSLIVSNNGOKH-KZVJFYERSA-N Val-Thr-Ala Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O CEKSLIVSNNGOKH-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N [4-[[(2S)-5-(carbamoylamino)-2-[[(2S)-2-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)hexanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]pentanoyl]amino]phenyl]methyl N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-3-[[(1S,2R)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-methylamino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-N-methylcarbamate Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]([C@@H](CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)c1ccccc1)OC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)OCc1ccc(NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCN2C(=O)CCC2=O)C(C)C)cc1)C(C)C IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N 0.000 description 1
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 1
- 229950009084 adecatumumab Drugs 0.000 description 1
- 230000000240 adjuvant effect Effects 0.000 description 1
- 238000012382 advanced drug delivery Methods 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 229960000548 alemtuzumab Drugs 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 1
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010009111 arginyl-glycyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010094001 arginyl-tryptophyl-arginine Proteins 0.000 description 1
- 238000003491 array Methods 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 208000013404 behavioral symptom Diseases 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 1
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H bis[(2-oxo-1,3,2$l^{5},4$l^{2}-dioxaphosphaplumbetan-2-yl)oxy]lead Chemical compound [Pb+2].[Pb+2].[Pb+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 229960000455 brentuximab vedotin Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N butyl alcohol Substances CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000009400 cancer invasion Effects 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000007541 cellular toxicity Effects 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960005395 cetuximab Drugs 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 229950006647 cixutumumab Drugs 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 239000005289 controlled pore glass Substances 0.000 description 1
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000037029 cross reaction Effects 0.000 description 1
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 206010052015 cytokine release syndrome Diseases 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960001251 denosumab Drugs 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 1
- ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N diethanolamine Chemical compound OCCNCCO ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 1
- 238000009510 drug design Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 229950009569 etaracizumab Drugs 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 229950009929 farletuzumab Drugs 0.000 description 1
- 230000006126 farnesylation Effects 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 210000002080 free macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000033581 fucosylation Effects 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 229960000578 gemtuzumab Drugs 0.000 description 1
- 108091008053 gene clusters Proteins 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N glycyl-L-tyrosine hemihydrate Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010001064 glycyl-glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010045126 glycyl-tyrosyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 1
- 108010087823 glycyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- 238000005734 heterodimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000004191 hydrophobic interaction chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 108091008042 inhibitory receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 230000031261 interleukin-10 production Effects 0.000 description 1
- 230000003996 interleukin-20 production Effects 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 229950000518 labetuzumab Drugs 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000033334 lymphocyte anergy Effects 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000026037 malignant tumor of neck Diseases 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Chemical class 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 208000037819 metastatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000011575 metastatic malignant neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 238000009126 molecular therapy Methods 0.000 description 1
- 229940125645 monoclonal antibody drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000000869 mutational effect Effects 0.000 description 1
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003739 neck Anatomy 0.000 description 1
- 230000009826 neoplastic cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 229950010203 nimotuzumab Drugs 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 230000000683 nonmetastatic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 229950007283 oregovomab Drugs 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 229950007318 ozogamicin Drugs 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N p-hydroxybenzoic acid methyl ester Natural products COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960001972 panitumumab Drugs 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 239000004031 partial agonist Substances 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229960005570 pemtumomab Drugs 0.000 description 1
- 229960002087 pertuzumab Drugs 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108010024607 phenylalanylalanine Proteins 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 231100000683 possible toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000164 protein isolation Methods 0.000 description 1
- 238000001814 protein method Methods 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000012743 protein tagging Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 230000000541 pulsatile effect Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 1
- HNMATTJJEPZZMM-BPKVFSPJSA-N s-[(2r,3s,4s,6s)-6-[[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-[(2s,4s,5s)-5-[acetyl(ethyl)amino]-4-methoxyoxan-2-yl]oxy-6-[[(2s,5z,9r,13e)-13-[2-[[4-[(2e)-2-[1-[4-(4-amino-4-oxobutoxy)phenyl]ethylidene]hydrazinyl]-2-methyl-4-oxobutan-2-yl]disulfanyl]ethylidene]-9-hydroxy-12-(m Chemical compound C1[C@H](OC)[C@@H](N(CC)C(C)=O)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2C\3=C(NC(=O)OC)C(=O)C[C@@](C/3=C/CSSC(C)(C)CC(=O)N\N=C(/C)C=3C=CC(OCCCC(N)=O)=CC=3)(O)C#C\C=C/C#C2)O[C@H](C)[C@@H](NO[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](SC(=O)C=3C(=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@H](OC)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)=C(I)C=3C)OC)[C@@H](O)C2)[C@@H]1O HNMATTJJEPZZMM-BPKVFSPJSA-N 0.000 description 1
- 229950008834 seribantumab Drugs 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- 229950008684 sibrotuzumab Drugs 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001540 sodium lactate Substances 0.000 description 1
- 229940005581 sodium lactate Drugs 0.000 description 1
- 235000011088 sodium lactate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M stearalkonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000019635 sulfation Effects 0.000 description 1
- 238000005670 sulfation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 150000007970 thio esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 108010072986 threonyl-seryl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 229960005267 tositumomab Drugs 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000281 trometamol Drugs 0.000 description 1
- 108010044292 tryptophyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 230000005909 tumor killing Effects 0.000 description 1
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010003137 tyrosyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000001635 urinary tract Anatomy 0.000 description 1
- 108010009962 valyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 229950001212 volociximab Drugs 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 108010027345 wheylin-1 peptide Proteins 0.000 description 1
- 238000012447 xenograft mouse model Methods 0.000 description 1
Abstract
Данное изобретение относится к новым молекулам биспецифических антител, связывающих СD3δε и BCMA, способных активировать иммунные эффекторные клетки, и их применению в диагностике и/или лечении различных заболеваний. Изобретение позволяет получить биспецифические антитела для терапевтического применения с поддержкой противоопухолевых эффектов с одновременным уменьшением высвобождения провоспалительных цитокинов. 11 н. и 14 з.п. ф-лы, 10 ил., 6 пр.
Description
Перекрестная ссылка
Данная заявка испрашивает приоритет предварительной заявки на патент США № 62/394360, поданной 14 сентября 2016 года и предварительной заявки на патент США № 62/491908, поданной 28 апреля 2017 года, которые включены в данный документ посредством ссылки в полном объеме.
Уровень техники
Иммунная система организма служит защитой от инфекции, травм и рака. Две отдельные, но взаимосвязанные системы, гуморальная и клеточная иммунные системы, работают вместе, чтобы защитить организм. Гуморальная система опосредуется растворимыми факторами, называемыми антителами, которые нейтрализуют продукты, признанные организмом чужеродными. Тогда как, клеточная система включает клетки, такие как Т-клетки и макрофаги, которые удаляют и нейтрализуют чужеродные вторжения.
Активация Т-клеток имеет решающее значение для стимуляции иммунных реакций. Т-клетки проявляют иммунологическую специфичность и направляют большинство клеточных иммунных ответов. Хотя Т-клетки не секретируют антитела, они необходимы для секреции антител В-лимфоцитами. Активация Т-клеток требует участия ряда молекул клеточной поверхности, таких как рецепторный комплекс Т-клеток, и молекулы CD4 или CD8. Антиген-специфический Т-клеточный рецептор (ТКР) состоит из дисульфид-связанного гетеродимера, мембранного гликопротеина с цепями, альфа и бета (α и β) или гамма и дельта (γ и δ). ТКР нековалентно связан с комплексом инвариантных белков, обозначенных CD3.
Известно, что Т-клетки оказывают сильное противоопухолевое действие в многочисленных экспериментальных условиях. Антитела, способные эффективно вовлекать Т-клетки против опухолевых клеток, были доступны в виде биспецифических антител, например, направленных на антигены, ассоциированные с опухолью (ТАА - tumor-associated antigen) и агонистические мембранные белки Т-клеток, такие как комплекс ТКР/CD3 и CD28. Эти биспецифические антитела способны активировать Т-клетки независимо от специфичности их ТКР, что приводит к специфическому лизису клеток, несущих соответствующие TAA.
Однако, хотя биспецифические антитела к CD3 могут перенаправлять лизис, опосредованный Т-клетками, на злокачественные клетки, клинические испытания с применением бсАт на основе CD3 показали высокую токсичность у пациентов. Неспецифическая активация Т-клеток от бсАт может происходить антиген-независимым образом из-за взаимодействия Fc/Fc-рецептора (FcR) или антиген-зависимым образом, в случае если антиген экспрессируется как на нормальных, так и на опухолевых клетках. Оба механизма могут быть ответственны за токсичность, наблюдаемую в предыдущих клинических исследованиях. (См., например, Link и соавт. (1998 год) Int. J. Cancer 77(2):251-6; Durben и соавт. Molecular Therapy (2015 год); 23 4, 648-655). Из-за возникающего в результате синдрома высвобождения цитокинов имели место значительные ограничения в разработке этих антител для терапевтических целей.
Взаимодействие Т-клеточного рецептора (TCR) с его пептид-МНС-лигандом определяет активность Т-клетки. Характеристики связывания этого взаимодействия были детально изучены и было показано, что оно контролирует функцию Т-клеток. Сила и природа взаимодействия TCR-пептид/MHC определяет, выполняют ли T-клетки эффекторные функции или инактивируются и удаляются. Антитела против CD3 активируют Т-клетки путем изменения конформации CD3ε-цепи и в зависимости от эпитопа могут оказывать агонистическое или антагонистическое действие на Т-клетки (Yoon et al., 1994 Immunity 1: 563-569). В свете значительных побочных эффектов многих агонистов Т-клеток может оказаться предпочтительным поддерживать сильные противоопухолевые эффекты с одновременным уменьшении высвобождения провоспалительных цитокинов. Однако частично агонистические анти-CD3-антитела могут субоптимально изменять цепь CD3ε, приводя к неэффективной передаче сигнала, и большинство анти-CD3-антител являются полными агонистами для обоих путей. Неясно, могут ли эти эффекторные функции быть разделены. Многие существующие анти-CD3-антитела (например, SP-34, UCHT1, OKT3) имеют сродство в диапазоне 1-50 нМ KD, однако это может быть не оптимальным для терапевтического применения.
CD3-специфические антитела и биспецифические антитела, полученные из них, обеспечиваются данным изобретением.
Публикации
Антитела к CD3 описаны, например, в патентах США № 5585097; 5929212; 5968509; 6706,265; 6750325; 7381803; 7728114. Биспецифические антитела со специфичностью связывания CD3 описаны, например, в патентах США № 7262276; 7635472; 7862813; и 8236308, каждый из которых специально включен в данный документ посредством ссылки.
Сущность изобретения
Композиции и способы их применения предоставлены для семейства родственных антител, которые связываются и активируют передачу сигналов посредством CD3, например, активацией CD3+ T-клеток. Семейство антител содержит набор последовательностей CDR, как определено в данном документе. Семейство антител обеспечивает ряд преимуществ, которые способствуют полезности в качестве клинического лекарственного средства(в). Антитела в семействе включают членов с рядом аффинностей связывания, позволяющих выбирать конкретную последовательность с желаемой аффинностью. Способность точно настраивать аффинность имеет особое значение для управления уровнем активации CD3 у индивида, которого лечат, и, таким образом, для снижения токсичности.
В некоторых вариантах осуществления анти-CD3 антитела обладают аффинностью (KD) к CD3 в диапазоне от около 10-6 до около 10-11. Антитела к CD3, которые имеют аффинность (KD) 50 нМ или более, 100 нМ или более, 500 нМ или более или 1 мкМ, или более, могут быть желательными для более точной имитации взаимодействия ТКР/ГКГС (главный комплекс гистосовместимости) и минимизации высвобождения токсических цитокинов при поддержании эффективного лизиса опухолевых клеток. В некоторых вариантах реализации изобретения антитела к CD3 характеризуются или отбираются для снижения склонности индуцировать высвобождение цитокинов при связывании с компетентной Т-клеткой, например, для высвобождения ИЛ-2 и ИФНγ. Антитела могут быть отобраны для терапевтического применения, которое оптимизирует уничтожение опухолевых клеток и сниженное высвобождение цитокинов, например антитело, в семействе последовательностей антител, описанных в данном документе, индуцирует высвобождение цитокинов, которое составляет менее чем около половины от максимума, наблюдаемого для члена семьи в сравнительном анализе, и может быть меньше, например, меньше и около 25% от максимума, наблюдаемого для члена семьи в сравнительном анализе. В некоторых вариантах реализации изобретения предлагаются биспецифические или мультиспецифические антитела, которые содержат по меньшей мере вариабельную область тяжелой цепи из семейства антител и могут содержать вариабельную область тяжелой и легкой цепи, представленную в данном документе. Биспецифические антитела содержат по меньшей мере вариабельную область тяжелой цепи антитела, специфичного к белку, отличному от CD3, и могут содержать вариабельную область тяжелой и легкой цепи. В некоторых таких вариантах реализации изобретения второе антитело специфично связывается с антигеном, ассоциированным с опухолью, нацеливающим антигеном, например, интегринами и тому подобным, патогенным антигеном, белком контрольной точки и тому подобным. Различные форматы биспецифических антител находятся в пределах объема изобретения, включая без ограничения одноцепочечные полипептиды, двухцепочечные полипептиды, трехцепочечные полипептиды, четырехцепочечные полипептиды и кратные им.
Каждое из CD3-специфических антител содержит домен VH, содержащий последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 в каркасе VH человека. Последовательности CDR семейства 2 могут быть расположены, например, в области около аминокислотных остатков 26-33; 51-58; и 97-112 для CDR1, CDR2 и CDR3, соответственно, предоставленных типовых последовательностей вариабельной области, изложенных в SEQ ID NO: 1-18. Специалисту в данной области техники должно быть понятно, что последовательности CDR могут находиться в другом положении, в случае если выбрана другая каркасная последовательность, хотя обычно порядок последовательностей будет оставаться тем же.
Последовательности CDR для антитела семейства 2 по данному изобретению могут иметь следующие формулы последовательности. Х обозначает вариабельную аминокислоту, которая может представлять собой специфические аминокислоты, как указано ниже.
CDR1
G1 | F2 | T3 | F4 | X5 | X6 | Y7 | A8 |
при этом:
X5 может быть любой аминокислотой; в некоторых вариантах реализации изобретения X5 представляет собой D, A или H, в некоторых вариантах реализации изобретения X5 представляет собой D.
X6 может быть любой аминокислотой; в некоторых вариантах реализации изобретения X6 представляет собой D или N; в некоторых вариантах реализации D6 представляет собой D.
В некоторых вариантах реализации последовательность CDR1 анти-CD3 антитела семейства 2 содержит последовательность приведенную в любой SEQ ID NO: 1-18, остатки 26-33.
CDR2
I1’ | S2’ | W3’ | N4’ | S5’ | G6’ | S7’ | I8’ |
В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность CDR2 антитела к CD3 семейства 2 содержит последовательность, изложенную в любой из SEQ ID NO: 1-18, остатки 51-58.
CDR3
A1” K2” D3” S4” R5” G6” Y7” G8” X9” Y10” X11” X12” G13” G12” A15” Y16”
при этом:
X9” может быть любой аминокислотой, в некоторых вариантах реализации изобретения X9” представляет собой D или S; в некоторых вариантах реализации изобретения X9” представляет собой D;
X11” может быть любой аминокислотой; в некоторых вариантах реализации изобретения X11” представляет собой R или S;
X12” может быть любой аминокислотой; в некоторых вариантах реализации изобретения X12” представляет собой L или R;
В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность CD3 анти- CD3 антитела семейства 2 имеет формулу A K D S R G Y G D Y X11” X12” G G A Y, где X11” и X12” являются тем, как определено выше. В некоторых вариантах реализации изобретения CD3-связывающий домен VH антитела семейства 2 связан с доменом вариабельной области легкой цепи. В некоторых таких вариантах реализации изобретения легкая цепь представляет собой фиксированную легкую цепь.
В некоторых вариантах реализации изобретения легкая цепь содержит домен VL с последовательностями CDR1, CDR2 и CDR3 в каркасе VL человека. Последовательности CDR могут быть теми, которые приведены в SEQ ID NO: 19. В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность CDR1 содержит аминокислотные остатки 27-32; 50-52; 89-97 для CDR1, CDR2, CDR3 соответственно.
В некоторых вариантах реализации изобретения последовательности CDR антитела по данному изобретению представляют собой последовательность с по меньшей мере 85% идентичностью, по меньшей мере 90% идентичностью, по меньшей мере 95% идентичностью, по меньшей мере 99% идентичностью относительно последовательности CDR или набора последовательностей CDR в SEQ ID NO: 1-18. В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность CDR по данному изобретению содержит одну, две, три или более аминокислотных замен по отношению к последовательности CDR или набора последовательностей CDR в любой из SEQ ID NO:1-18. В некоторых вариантах реализации изобретения указанная аминокислотная замена(ы) представляет собой одну или более в положении 5 или 10 из CDR1, положении 2, 6 или 7 из CDR2, положении 1, 8, 9 или 10 из CDR3 относительно формул семейства 2, представленных выше.
В некоторых вариантах реализации изобретения биспецифическое антитело по данному изобретению содержит CD3-связывающую вариабельную область, описанную в данном документе, спаренную с легкой цепью. В некоторых вариантах реализации изобретения легкая цепь содержит последовательность вариабельной области, изложенную в SEQ ID NO: 19, или вариабельную область, содержащую набор последовательностей CDR в SEQ ID NO: 19, и каркасные последовательности. Различные последовательности Fc находят применение, включая, без ограничения, человеческие IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3, IgG4 и тому подобные. В некоторых вариантах реализации изобретения второе плечо биспецифического антитела содержит вариабельную область, которая специфически связывается с антигеном, ассоциированным с опухолью. В некоторых вариантах реализации изобретения второе плечо биспецифического антитела содержит вариабельную область, которая специфически связывается с ВСМА. В некоторых вариантах реализации изобретения плечо к BCMA представляет собой одноцепочечную вариабельную область, например, как изображено на фиг 2В. В некоторых вариантах реализации изобретения плечо к BCMA содержит последовательность вариабельной области, изложенную в SEQ ID NO: 20; или тандемную последовательность вариабельной области, изложенную в SEQ ID NO: 21. Последовательность Fc плеча к BCMA может представлять собой, без ограничения, IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3, IgG4 человека и тому подобное. Последовательности CDR могут быть теми, которые содержатся в SEQ ID NO: 20. В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность CDR содержит аминокислотные остатки 26-33; 51-58; 97-108 для CDR1, CDR2, CDR3 соответственно.
В других вариантах реализации изобретения предлагаются фармацевтические композиции, содержащие по меньшей мере CD3-связывающий домен VH по данному изобретению, например, моноспецифическое, биспецифическое и тому подобное антитело или антителоподобный белок, содержащий по меньшей мере CD3-связывающий домен VH по данному изобретению; и фармацевтически приемлемый наполнитель. Композиция может быть лиофилизирована, суспендирована в растворе и тому подобное. И может быть представлена в виде стандартной дозы.
В некоторых вариантах реализации изобретения предложен способ лечения рака, включающий введение индивиду, имеющему для этого показания, эффективной дозы моноспецифического, биспецифического и тому подобного антитела по данному изобретению. Когда антитело является биспецифическим, второй антигенсвязывающий участок может специфически связывать опухолевый антиген, белок контрольной точки и тому подобное. В различных вариантах реализации изобретения рак выбран из группы, состоящей из рака яичников, рака молочной железы, желудочно-кишечного тракта, рака головного мозга, рака головы и шеи, рака предстательной железы, рака толстой кишки, рака легких, лейкемии, лимфомы, саркомы, карциномы, опухолей нервных клеток, плоскоклеточного рака, эмбрионально-клеточных опухолей, метастазов, недифференцированных опухолей, семином, меланом, миелом, нейробластом, опухолей смешанных клеток и неоплазий, вызванных инфекционными агентами.
В некоторых вариантах реализации изобретения предложен способ лечения инфекционного заболевания, включающий введение индивидууму, имеющему для этого показания, эффективной дозы моноспецифического, биспецифического и тому подобного антитела по данному изобретению. Когда антитело является биспецифическим, второй антигенсвязывающий участок может специфически связывать патогенный антиген, например, бактерии, вирусы или паразиты.
В других вариантах реализации изобретения предложен способ получения биспецифического антитела по данному изобретению, включающий экспрессию последовательностей антитела, например, одной или более кодирующих последовательностей легкой цепи, одной или более кодирующих последовательностей тяжелой цепи в одной клетке-хозяине. В различных вариантах реализации изобретения клетка-хозяин может представлять собой прокариотическую или эукариотическую клетку, такую как клетка млекопитающего.
Краткое описание графических материалов
Изобретение лучше всего будет понятно из последующего подробного описания при чтении вместе с прилагаемыми графическими материалами. Файл патента или заявки содержит по меньшей мере одно графическое изображение, выполненное в цвете. Копии этого патента или патентной заявки с цветным графическим материалом(и) будут предоставлены патентным ведомством по запросу и после уплаты необходимого взноса. Следует подчеркнуть, что в соответствии с установившейся практикой согласно общепринятой практике, различные объекты графических материалов проиллюстрированы без соблюдения масштаба. Напротив, размеры различных объектов произвольно увеличены или уменьшены для ясности. В графические материалы включены следующие фигуры.
Фиг. 1A-1C. На фиг. 1A проиллюстрировано выравнивание областей CDR1, 2 и 3 членов семейства 2 антител из SEQ ID NO: 1-18, которые специфически связываются с CD3 человека и соответствуют остаткам 26-33; 51-58; и 97-112. На фиг. 1B проиллюстрированы области CDR1, 2 и 3 фиксированной легкой цепи (SEQ ID NO: 19); и типовая последовательность к ВСМА (SEQ ID NO: 20 и SEQ ID NO: 21). Фиг. 1C демонстрирует последовательности CDR эталонного анти-CD3 антитела (SEQ ID NO: 20), ID 304704.
На фиг. 2A-2E проиллюстрированы схематические модели биспецифических антител человека. На фиг. 2A проиллюстрировано биспецифическое антитело к CD3:опухолевому антигену с общей легкой цепью (всего 3 уникальные цепи). На фиг. 2B проиллюстрировано биспецифическое антитело к CD3:опухолевому антигену с 2 уникальными легкими цепями (всего 4 уникальные цепи). На фиг. 2C проиллюстрировано биспецифическое антитело к CD3:опухолевому антигену с тяжелой цепью только опухолевого антигенсвязывающего домена (3 уникальные цепи). На фиг. 2D проиллюстрировано биспецифическое антитело к CD3:опухолевому антигену с опухолевым антигенсвязывающим доменом scFv (всего 3 уникальные цепи). На фиг. 2E проиллюстрировано биспецифическое антитело к CD3:опухолевому антигену с связывающим доменом scFv к CD3 (всего 3 уникальные цепи).
Фиг. 3. Таблица данных по анти-CD3 семейства 2, обобщает поведение антител к CD3 в моноспецифическом и биспецифическом формате. В столбце 1 показан идентификатор последовательности для последовательности VH к CD3. В столбце 2 показано значение СИФ для связывания клетками Jurkat исходного моноспецифического (антитела) к CD3. В столбце 3 показано значение СИФ для связывания T-клетками яванского макака исходного моноспецифического (антитела) к CD3. В столбце 4 показано название биспецифического антитела aCD3:aBCMA. В столбце 5 показаны пикограммы ИЛ-2, высвобождаемого пан-Т-клетками, стимулированными биспецифическим антителом, связывающим белок ВСМА, помещенным на пластике, в указанной дозе. В столбце 6 показаны пикограммы ИЛ-6, высвобождаемого пан-Т-клетками, стимулированными биспецифическим антителом, связывающим белок ВСМА, помещенным на пластике, в указанной дозе. В столбце 7 показаны пикограммы ИЛ-10, высвобождаемого пан-Т-клетками, стимулированными биспецифическим антителом, связывающим белок ВСМА, помещенным на пластике, в указанной дозе. В столбце 8 показаны пикограммы ИФН-γ, высвобождаемого пан-Т-клетками, стимулированными биспецифическим антителом, связывающим белок ВСМА, помещенным на пластике, в указанной дозе. В столбце 9 показаны пикограммы ФНОα, высвобождаемого пан-Т-клетками, стимулированными биспецифическим антителом, связывающим белок ВСМА, помещенным на пластике, в указанной дозе. В столбце 10 показана ЭК50 лизиса опухолевых клеток U266, опосредованного биспецифическими антителами, в присутствии пан-Т-клеток человека. В столбце 11 показан процент лизиса опухолевых клеток U266, в присутствии биспецифического антитела и пан-Т-клеток человека при дозе 333 нг/мл биспецифического антитела. В столбце 12 показана аффинность белкового связывания плеча к CD3 биспецифического антитела, измеренная с помощью Octet. В столбце 13 показано значение СИФ для связывания клетками Jurkat биспецифического антитела.
На фиг. 4 проиллюстрирован опосредованный биспецифическими антителами лизис опухолевых клеток. Семь биспецифических антител αCD3_fam2:aBCMA, каждое с уникальным плечом к CD3 и общим плечом к BCMA, были протестированы на способность убивать опухолевые клетки U266 BCMA+ посредством перенаправления активированных первичных Т-клеток. В этом эксперименте клетки U266, которые экспрессируют BCMA, смешивали с активированными пан-Т-клетками в соотношении E:T 10:1 наряду с добавлением биспецифического антитела. Ось x демонстрирует концентрацию применяемого антитела, а ось y демонстрирует % лизиса опухолевых клеток через 6 часов после добавления антитела.
На фиг. 5 проиллюстрирована биспецифическая активность уничтожения U266, коррелирующая с высвобождением ИЛ-2. Сравнение активности лизиса опухолевых клеток, опосредованной биспецифическими антителами, с высвобождением цитокина ИЛ-2 изображено на диаграмме рассеяния. Корреляция между производством ИЛ-2 и лизисом опухолевых клеток U266 составляет R2= 0,37.
На фиг. 6 проиллюстрирована биспецифическая активность уничтожения U266, коррелирующая с высвобождением ИФН-γ. Сравнение активности лизиса опухолевых клеток, опосредованной биспецифическими антителами, с высвобождением цитокина ИФН- γ изображено на диаграмме рассеяния. Корреляция между производством ИФН- g и лизисом опухолевых клеток U266 составляет R2= 0,53.
На фиг. 7 проиллюстрирована биспецифическая активность уничтожения U266, коррелирующая с аффинностью связывания с CD3. Сравнение активности лизиса опухолевых клеток U266, опосредованной биспецифическими антителами, с аффинностью связывания с CD3 изображено на диаграмме рассеяния. Корреляция между ЭК50 уничтожения U266 и аффинностью связывания белка составляет R2= 0,93.
На фиг. 8A-8D проиллюстрирован опосредованный биспецифическими антителами лизис опухолевых клеток. Биспецифические антитела αCD3_F1F: aBCMA анализировали на способность уничтожать три различных линии опухолевых клеток ВСМА+ и одну линию ВСМА-негативных клеток путем перенаправления активированных исходных Т-клеток. В этом эксперименте опухолевые клетки смешивали с активированными пан-Т-клетками в соотношении E:T 10:1 наряду с добавлением биспецифического антитела. На фиг. 8A проиллюстрировано уничтожение клеток RPMI-8226. На фиг. 8B проиллюстрировано уничтожение клеток NCI-H929, на фиг. 8C проиллюстрировано уничтожение клеток U-266 и на фиг. 8D проиллюстрировано уничтожение клеток K562, отрицательный контроль. Ось x демонстрирует концентрацию применяемого антитела, а ось y демонстрирует % лизиса опухолевых клеток через 6 часов после добавления антитела.
На фиг. 9A-9D проиллюстрировано опосредованное биспецифическими антителами высвобождение ИЛ-2. Уровень высвобождения цитокинов ИЛ-2 измеряли после культивирования Т-клеток человека в покое с различными линиями опухолевых клеток и увеличивающимися дозами биспецифического антитела αCD3_F1F:aBCMA. На фиг. 9A проиллюстрировано высвобождение ИЛ-2, стимулированное клетками RPMI-8226, на фиг. 9B проиллюстрировано высвобождение ИЛ-2, стимулированное клетками NCI-H929, на фиг. 9C проиллюстрировано высвобождение ИЛ-2, стимулированное клетками U-266 и на фиг. 9D проиллюстрировано высвобождение ИЛ-2, стимулированное клетками K562, отрицательный контроль.
На фиг. 10A-10D проиллюстрировано опосредованное биспецифическими антителами высвобождение ИФН-γ. Уровень высвобождения цитокина ИФН-γ измеряли после культивирования Т-клеток человека в покое с различными линиями опухолевых клеток и увеличивающимися дозами биспецифического антитела αCD3_F1F:aBCMA (как проиллюстрировано на фиг. 10). На фиг. 10A проиллюстрировано высвобождение ИФН-γ, стимулированное клетками RPMI-8226, на фиг. 10B проиллюстрировано высвобождение ИФН-γ, стимулированное клетками NCI-H929, на фиг. 10C проиллюстрировано высвобождение ИФН-γ, стимулированное клетками U-266 и на фиг. 10D проиллюстрировано высвобождение ИФН-γ, стимулированное клетками K562, отрицательный контроль.
Подробное описание
Чтобы облегчить понимание этого изобретения, ряд терминов определен ниже.
Перед описанием данных активных агентов и способов, следует понимать, что это изобретение не ограничивается конкретной описанной методологией, продуктами, устройствами и факторами, поскольку такие способы, устройства и составы, конечно, могут видоизменяться. Следует также понимать, что применяемая в данном документе терминология предназначена только для описания конкретных вариантов реализации изобретения и не предназначена для ограничения объема данного изобретения, которое будет ограничено только прилагаемой формулой изобретения.
Необходимо отметить, что в данном документе и в прилагаемой формуле изобретения формы единственного числа включают обозначаемые объекты во множественном числе, если иное непосредственно не следует из контекста. Таким образом, например, ссылка на "потенциальный лекарственный препарат" относится к одному или более таким потенциальным кандидатам, а ссылка на "способ" включает ссылки на эквивалентные этапы и способы, известные специалистам в данной области техники, и так далее.
Если не указано иное, все употребляемые в данном документе технические и научные термины имеют значения, обычно подразумеваемые специалистом в данной области техники, к которой принадлежит изобретение. Все публикации, упомянутые в данном документе, включены в данный документ посредством ссылки с целью описания и раскрытия устройств, составов и методов, которые описаны в публикации и которые могут применяться в связи с описанным выше изобретением.
В случае, когда предусмотрен диапазон значений, следует понимать, что каждое промежуточное значение, до десятой единицы нижнего предела, если из контекста явно не следует иное, между верхним и нижним пределом этого диапазона и любое другое указанное или промежуточное значение в этом указанном диапазоне охватываются в пределах изобретения. Верхний и нижний пределы этих меньших диапазонов могут быть независимо включены в меньшие диапазоны, а также включены в данное изобретение, с учетом любого конкретно исключенного предела в указанном диапазоне. В тех случаях, когда указанный диапазон включает одно или оба из этих пределов, в изобретение также включены диапазоны, исключающие любой или оба из этих включенных пределов.
В последующем описании изложены многочисленные конкретные подробности с целью обеспечения более полного понимания данного изобретения. Однако для специалиста в данной области техники будет очевидно, что данное изобретение может применяться на практике и без одной или более указанных конкретных подробностей. В других случаях общеизвестные особенности и процедуры, хорошо известные специалистам в данной области техники, не описываются с целью избегания затруднения понимания изобретения.
Обычно в данном изобретении применяются общепринятые способы синтеза белка, культуры рекомбинантных клеток и выделения белка и методы рекомбинантной ДНК, известные специалистам в данной области техники. Такие методы подробно описаны в литературе, см., например, Maniatis, Fritsch & Sambrook, Molecular Cloning:A Laboratory Manual (1982 год); Sambrook, Russell and Sambrook, Molecular Cloning:A Laboratory Manual (2001 год); Harlow, Lane and Harlow, Using Antibodies:A Laboratory Manual:Portable Protocol No. I, Cold Spring Harbor Laboratory (1998 год); и Harlow and Lane, Antibodies:A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory; (1988 год).
Определения терминов
Под термином "содержащий" подразумевается, что перечисленные элементы требуются для композиции/способа/набора, однако для формирования композиции/способа/набора и тому подобного в рамках формулы изобретения могут быть включены и другие элементы.
Под термином "состоящий по существу из" подразумевается ограничение рамок описанной композиции или способа указанными материалами или поэтапными действиями, не оказывающими существенного влияния на основную и новую характеристику (характеристики) объекта изобретения.
Под термином “состоящий из” подразумевается исключение любого элемента, поэтапного действия или ингредиента, не указанного в формуле изобретения, из композиции, способа или набора.
Термины “лекарственное средство”, “лечение” и тому подобное используются в данном документе для общего обозначения желательного фармакологического и/или физиологического эффекта. Эффект может быть профилактическим в смысле полного или частичного предотвращения заболевания или его симптома, и/или терапевтическим в смысле частичного или полного излечения заболевания и/или нежелательного эффекта, относящегося к указанному заболеванию. Термин “лечение” в данном документе охватывает любое лечение заболевания у млекопитающего, и включает:(a) профилактику возникновения заболевания у субъекта, который, возможно, предрасположен к данному заболеванию, однако которому не поставлен диагноз данного заболевания; (b) ингибирование заболевания, то есть, остановку его развития; или (c) облегчение заболевания, то есть, регрессию заболевания. Терапевтический агент можно вводить до, во время или после начала заболевания или травмы. Лечение текущего заболевания, при котором лечение стабилизирует или ослабляет нежелательные клинические симптомы у пациента, представляет особый интерес. Такое лечение желательно выполнять до полной потери функции пораженных тканей. Рассматриваемое лекарственное средство можно вводить во время симптоматической стадии заболевания, и, в некоторых случаях, после симптоматической стадии заболевания.
"Терапевтически эффективное количество" означает количество активного агента, необходимое для получения терапевтического благоприятного эффекта у субъекта. Например, “терапевтически эффективное количество” представляет собой количество, индуцирующее, облегчающее или иным образом вызывающее улучшение патологических симптомов, прогрессирования заболевания или физиологических состояний, ассоциированных с заболеванием или, или улучшающее устойчивость к расстройству.
Термины “субъект”, “индивид” и “пациент” в данном документе используются на равных основаниях и относятся к млекопитающему, подвергаемому оценке на предмет лечения и/или лечению. В одном варианте реализации млекопитающее является человеком. Термины “субъект”, “индивид” и “пациент” без ограничений охватывают индивидов с раком, аутоиммунными заболеваниями, патогенными инфекциями и тому подобным. Субъекты могут являться людьми, но включают и других млекопитающих, особенно пригодных для применения в качестве лабораторных моделей заболеваний человека, например, мышь, крысу и тому подобное.
Термины "рак", "новообразование" и "опухоль" применяются в данном документе взаимозаменяемо для обозначения клеток, которые демонстрируют автономный нерегулируемый рост таким образом, что они демонстрируют аберрантный фенотип роста, характеризующийся значительной потерей контроля над пролиферацией клеток. Клетки, представляющие интерес для обнаружения, анализа или лечения в данной заявке, включают предраковые (например, доброкачественные), злокачественные, предметастатические, метастатические и неметастатические клетки. Рак практически каждой ткани является известным. Фраза "раковая нагрузка" относится к количеству раковых клеток или объему рака у субъекта. Соответственно, снижение раковой нагрузки означает уменьшение количества раковых клеток или объема рака у субъекта. В данном контексте термин "раковая клетка" относится к любой клетке, которая представляет собой раковую клетку или получена из раковой клетки, например, клона раковой клетки. Специалистам в данной области техники известны многие типы раковых заболеваний, включая солидные опухоли, такие как карциномы, саркомы, глиобластомы, меланомы, лимфомы, миеломы и тому подобное, и циркулирующие злокачественные новообразования, такие как лейкемии, включая, в частности, В-клеточные лейкемии, Т-клеточные лейкемии и тому подобное. Примеры рака включают, но без ограничений, рак яичников, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак легких, рак простаты, гепатоцеллюлярный рак, рак желудка, рак поджелудочной железы, рак шейки матки, рак яичников, рак печени, рак мочевого пузыря, рак мочевыводящих путей, рак щитовидной железы, рак почки, карциному, меланому, рак головы и шеи и рак головного мозга.
Термины "антителозависимая клеточноопосредованная цитотоксичность" и "АЗКЦ" относятся к реакции, опосредованной клетками, в которой неспецифические цитотоксические клетки, которые экспрессируют рецепторы Fc, такие как естественные клетки-киллеры, нейтрофилы и макрофаги, распознают связанное антитело на целевой клетке и вызывают лизис целевой клетки. Активность АЗКЦ может быть оценена с применением способов, таких как описанные в патенте США № 5,821,337. АЗКЦ относится к антителозависимому клеточноопосредованному фагоцитозу.
"Эффекторные клетки" представляют собой лейкоциты, которые экспрессируют один или более рецепторов константной области и выполняют эффекторные функции.
"Цитокин" представляет собой белок, высвобождаемый одной клеткой для воздействия на другую клетку в качестве межклеточного медиатора. Цитокины, представляющие интерес, включают, без ограничения, цитокины высвобождаемые из активированных Т клеток, например ИЛ-2, ИФН-γ и др.
Термин "неиммуногенный" относится к материалу, который не инициирует, не провоцирует и не усиливает иммунный ответ, при этом иммунный ответ включает в себя адаптивный и/или врожденный иммунный ответ.
Термин "выделенный" означает, что материал извлечен из своего исходного окружения (например, природной среды, если он встречается в естественных условиях). Например, природный полинуклеотид или полипептид, присутствующий в живом животном, не является выделенным, но тот же полинуклеотид или полипептид, отделенный от материалов, совместно с ним присутствующих в естественной системе, является выделенным. Такие нуклеотиды могут входить в состав вектора, и/или такие полинуклеотиды или полипептиды могут входить в состав композиции, и по-прежнему являться выделенными в том смысле, что такой вектор или композиция не являются частью их природного окружения.
Под термином "фармацевтически приемлемое вещество" подразумевают вспомогательное вещество, которое можно применять при получении фармацевтической композиции, и которое является в целом безопасным, нетоксичным и желательным; этот термин включает вспомогательные вещества, приемлемые как для ветеринарного использования, так и для фармацевтического использования для лечения людей. Такие вспомогательные вещества могут быть твердыми, жидкими, полужидкими или, в случае аэрозольной композиции, газообразными.
Под термином “фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры” подразумевают соли и сложные эфиры, являющиеся фармацевтически приемлемыми и обладающие желательными фармакологическими свойствами. Такие соли включают соли, которые могут образовываться при реакции кислых протонов, присутствующих в соединениях, с неорганическими или органическими основаниями. Подходящие неорганические соли включают соли, образованные щелочными металлами, например, натрием и калием, магнием, кальцием и алюминием. Подходящие органические соли включают соли, образованные органическими основаниями, например, аминными основаниями, например, этаноламином, диэтаноламином, триэтаноламином, трометамином, N-метилглюкамином и тому подобным. Такие соли также включают кислотно-аддитивные соли, образованные неорганическими кислотами (например, соляной и бромистоводородной кислотой) и органическими кислотами (например, уксусной кислотой, лимонной кислотой, малеиновой кислотой и алкан- и аренсульфоновыми кислотами, например, метансульфоновой кислотой и бензолсульфоновой кислотой). Фармацевтически приемлемые сложные эфиры включают эфиры, образованные из карбокси-, сульфонилокси- и фосфоноксигрупп, присутствующих в соединениях, например, C1-6 алкиловые эфиры. При наличии двух кислотных групп фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир может представлять собой монокислоту-моносоль или сложный эфир или двойную соль, или сложный эфир, и, аналогичным образом, при наличии более чем двух кислотных групп, некоторые или все из таких групп могут находиться в виде соли или этерифицированном виде. Соединения, названия которых указаны в данном изобретении, могут присутствовать вне в форме соли или сложного эфира, или в форме соли и/или сложного эфира, и подразумевается, что наименование таких соединений включают как исходное соединение (не соль и не сложный эфир), так и его фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры. Кроме того, некоторые соединения, названия которых указаны в данном изобретении, могут присутствовать в более чем одной стереоизомерной форме, и подразумевается, что наименование таких соединений включают все одиночные стереоизомеры и все смеси (рацемические или другие) таких стереоизомеров.
Термины "фармацевтически приемлемый", "физиологически переносимый" и их грамматические формы по отношению к композициям, носителям, разбавителям и реагентам применяются на равных основаниях и означают, что указанные материалы можно вводить или наносить на организм человека без нежелательных физиологических эффектов, которые могли бы препятствовать введению композиции.
"Гомологию" между двумя последовательностями определяют по идентичности последовательностей. Если две последовательности, которые должны сравниваться друг с другом, отличаются по длине, идентичность последовательности предпочтительно относится к проценту нуклеотидных остатков более короткой последовательности, которые идентичны нуклеотидным остаткам более длинной последовательности. Обычно идентичность последовательностей можно определять с помощью компьютерных программ, таких как программа Bestfit (Wisconsin Sequence Analysis Package, версия 8 для Unix, Genetics Computer Group, University Research Park, 575 Science Drive Madison, Wis. 53711). Программа Bestfit применяет локальный алгоритм гомологии Смита-Уотермана (Smith и Waterman), Advances in Applied Mathematics 2 (1981 год), 482-489, для поиска сегмента с самой высокой идентичностью последовательности между двумя последовательностями. В случае применения Bestfit или другой программы выравнивания последовательностей с целью определения того, идентична ли конкретная последовательность, например, на 95% эталонной последовательности, предлагаемой в данном изобретении, параметры предпочтительно регулируют таким образом, чтобы процент идентичности рассчитывался для всей длины эталонной последовательности, и при этом, чтобы допускались гэпы в гомологии вплоть до 5% от общего количества нуклеотидов в эталонной последовательности. В случае применения Bestfit так называемые необязательные параметры предпочтительно оставляют в своих предустановленных ("по умолчанию") значениях. Отклонения, появляющиеся при сравнении данной последовательности и описанных выше последовательностей, предлагаемых в данном изобретении, могут быть вызваны, например, добавлением, делецией, заменой, вставкой или рекомбинацией. Такое сравнение последовательностей можно предпочтительно выполнять с помощью программы "fasta20u66" (версия 2. 0u66, сентябрь 1998 года, разработана William R. Pearson и University of Virginia; смотри также публикацию W. R. Pearson (1990 год), Methods in Enzymology 183, 63-98, прилагаемые примеры и http://workbench.sdsc.edu/). Для этой цели могут применять настройки параметров "по умолчанию".
Термин "вариант" относится к полипептидам, имеющим аминокислотные последовательности, которые в некоторой степени отличаются от полипептида с нативной последовательностью. Обычно варианты аминокислотных последовательностей будут обладать, по меньшей мере, около 80% идентичностью последовательности, более предпочтительно, по меньшей мере, на около 90% гомологичны по последовательности. Варианты аминокислотной последовательности могут иметь замены, делеции и/или вставки в определенных положениях в эталонной аминокислотной последовательности.
Термин "вектор" в контексте данного документа обозначает молекулу нуклеиновой кислоты, способную переносить другую нуклеиновую кислоту, с ней соединенную. Один тип вектора представляет собой "плазмиду", которая относится к циклической двухцепочечной петле ДНК, в которую могут быть лигированы дополнительные сегменты ДНК. Другой тип вектора представляет собой вирусный вектор, в котором дополнительные сегменты ДНК могут быть лигированы в вирусный геном. Определенные векторы способны к автономной репликации в клетке-хозяине, в которую они введены (например, бактериальные векторы, имеющие бактериальную точку начала репликации, и эписомальные векторы млекопитающих). Другие векторы (например, не-эписомальные векторы млекопитающих) могут быть интегрированы в геном клетки-хозяина при введении в клетку хозяина и, таким образом, реплицироваться вместе с геномом хозяина. Более того, некоторые векторы способны направлять экспрессию генов, с которыми они функционально связаны. Такие векторы упоминаются в данном документе как "рекомбинантные экспрессионные векторы" (или просто, "рекомбинантные векторы"). В общем, векторы экспрессии, используемые в технологиях рекомбинантной ДНК, часто имеют форму плазмид. В данном описании изобретения "плазмида" и "вектор" могут быть взаимозаменяемы, поскольку плазмида является наиболее часто используемой формой вектора.
Применяемый в данном документе термин "клетка-хозяин" (или "рекомбинантная клетка-хозяин") предназначен для обозначения клетки, которая была генетически изменена или способна генетически изменяться путем введения экзогенного полинуклеотида, такого как рекомбинантная плазмида или вектор. Следует понимать, что такие термины предназначены для обозначения не только конкретной исследуемой клетки, но и клеток, происходящих из нее. Поскольку некоторые модификации могут произойти в последующих поколениях из-за мутаций или воздействия окружающей среды, такое потомство не может, по сути, быть идентичным родительской клетке, но все еще включено в термин "клетка-хозяин", как применяется в данном документе.
"Аффинность связывания" обычно относится к силе суммарного количества нековалентных взаимодействий между одним сайтом связывания молекулы (например, антителом или другой связывающей молекулой) и ее партнером по связыванию (например, антигеном или рецептором). Аффинность молекулы X к ее партнеру Y, как правило, можно представить в виде константы диссоциации (Kd). Аффинность можно измерить с помощью общепринятых способов, известных в данной области техники, в том числе тех, которые описаны в данном документе. Низкоаффинные антитела слабо связывают антиген (или рецептор) и склонны легко диссоциировать, тогда как высокоаффинные антитела связывают антиген (или рецептор) более плотно и имеют тенденцию оставаться связанными дольше.
Если специально не указано иное, термин "конъюгат", как описано и заявлено в данном документе, определяется как гетерогенная молекула, образованная ковалентным присоединением одного или более фрагментов антитела к одной или более молекуле(ам) полимера, при этом гетерогенная молекула растворима в воде, то есть растворима в физиологических жидкостях, таких как кровь, и при этом гетерогенная молекула свободна от любого структурированного агрегата. Представляющий интерес конъюгат представляет собой ПЭГ. В контексте вышеприведенного определения термин "структурированный агрегат" относится к (1) любому агрегату молекул в водном растворе, имеющему структуру сфероида или сфероидной оболочки, так что гетерогенная молекула не находится в мицелле или другой эмульсионной структуре, и не фиксирована в липидном бислое, везикуле или липосоме; и (2) любому агрегату молекул в твердой или нерастворимой форме, такой как матрица хроматографических шариков, который не высвобождает гетерогенную молекулу в раствор при контакте с водной фазой. Соответственно, термин "конъюгат", как он определено в данном документе, охватывает вышеупомянутую гетерогенную молекулу как преципитат, осадок, биоразрушаемая матрица или другое твердое вещество, способное высвобождать гетерогенную молекулу в водный раствор при гидратации твердого вещества.
Слово "метка" при использовании в данном документе относится к детектируемому соединению или композиции, которое прямо или косвенно конъюгировано с антителом. Сама метка может быть выявляемой сама по себе (например, метки-радиоизотопы или флуоресцентные метки) или, в случае ферментной метки, может катализировать такие химические изменения субстратного соединения или композиции, которые можно выявить.
Под "твердой фазой" подразумевается безводная матрица, к которой может приставать антитело по данному изобретению. Примеры твердых фаз, охватываемых данным документом, включают те, которые сформированы частично или полностью из стекла (например, стекла с контролируемым размером пор), полисахаридов (например, агарозы), полиакриламидов, полистирола, поливинилового спирта и силиконов. В определенных вариантах реализации изобретения, в зависимости от контекста, твердая фаза может содержать лунку аналитического планшета; в других это колонка очистки (например, колонка аффинной хроматографии). Этот термин также включает в себя прерывистую твердую фазу из дискретных частиц, такую как описанная в патенте США № 4,275,149.
Антитела, также называемые иммуноглобулинами, обычно содержат по меньшей мере одну тяжелую цепь и одну легкую цепь, причем аминоконцевой домен тяжелой и легкой цепей является вариабельным по последовательности, и поэтому обычно называется доменом вариабельной области, или вариабельным доменом тяжелой цепи (VH) и вариабельным доменом легкой цепи (VH). Эти два домена обычно связываются друг с другом, образуя специфическую область связывания, хотя здесь также обсуждается, что специфическое связывание также можно получить с применением только вариабельных последовательностей тяжелой цепи, и в данной области техники известно и применяется большое количество неприродных конфигураций антител.
"Функциональное" или "биологически активное" антитело или антигенсвязывающая молекула (включая антитела, содержащие только тяжелые цепи, и биспецифичные трехцепочечные антителоподобные молекулы (ТСА - three-chain antibody-like molecules) в данном документе) представляет собой антитело или молекулу, способную проявлять одну или более из своих естественных активностей при структурных, регуляторных, биохимических или биофизических явлениях. Например, функциональное антитело или другая связывающая молекула, например, TCA, может обладать способностью специфически связывать антиген, и это связывание, в свою очередь, может вызывать или изменять клеточные, или молекулярные явления, например, передачу сигнала или ферментативную активность. Функциональное антитело или другая связывающая молекула, например, TCA, также может блокировать активацию лиганда или рецептора или действовать как агонист или антагонист. Способность антитела или другой связывающей молекулы, например, TCA, проявить одну или более своих природных активностей, зависит от нескольких факторов, включая правильный фолдинг и сборку полипептидных цепей.
Термин "антитело" в данном документе применяют в его наиболее широком смысле; он специфически охватывает моноклональные антитела, поликлональные антитела, мономеры, димеры, мультимеры, полиспецифические антитела (например, биспецифические антитела), антитела, содержащие только тяжелую цепь, трехцепочечные антитела, одноцепочечные Fv-фрагменты, нанотела и тому подобное, а также включает фрагменты антител, при условии, что они обладают желательной биологической активностью (Miller и соавт. (2003) Jour. of Immunology 170:4854-4861). Антитела могут являться антителами мыши, человека, гуманизированными, химерными антителами или могут быть происходить от других видов животных.
Термин антитело может относиться к полноразмерной тяжелой цепи, полноразмерной легкой цепи, интактной молекуле иммуноглобулина; или иммунологически активному фрагменту любого из этих полипептидов, то есть, полипептиду, содержащему антигенсвязывающий сайт, иммуноспецифически связывающий антиген или мишень, представляющую интерес, или их фрагмент, причем такие мишени включают раковую клетку или клетки, продуцирующие аутоиммунные антитела, ассоциированные с аутоиммунным заболеванием, но не ограничиваются ими. Описанный в данном документе иммуноглобулин может быть любого типа (например, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA), класса (например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2) или подкласса молекул иммуноглобулинов, включая сконструированные подклассы с измененными Fc-фрагментами, обеспечивающими ослабление или усиление активности эффекторных клеток. Иммуноглобулины могут происходить от любого вида животных. В одном аспекте иммуноглобулин имеет в основном человеческое происхождение.
Термин “вариабельный” относится к тому факту, что последовательности некоторых частей вариабельных доменов сильно различаются у разных антител и вносят вклад в связывание и специфичность каждого конкретного антитела по отношению к его конкретному антигену. В то же время изменчивость не является равномерно распределенной по вариабельным доменам антител. Она сосредоточена в трех сегментах вариабельных доменов как легкой, так и тяжелой цепи, называемых гипервариабельными областями. Более консервативные фрагменты вариабельных доменов называются каркасными областями (FR). Каждый из вариабельных доменов нативных тяжелых и легких цепей содержит четыре FR, преимущественно принимающих конфигурацию бета-листа, соединенных тремя гипервариабельными участками, которые образуют петли, соединяющие структуру бета-листа, а в некоторых случаях - образующие часть структуры бета-листа. Гипервариабельные области каждой цепи объединены друг с другом в непосредственной близости от FR и, вместе с гипервариабельными областями другой цепи, участвуют в образовании антигенсвязывающего сайта антител (см. Kabat и соавт. (1991), Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5-е Изд. Public Health Service, National Institutes of Health, Бетесда, штат Мэриленд). Константные домены не принимают непосредственного участия в связывании антитела с антигеном, однако проявляют различные эффекторные функции, такие как участие антитела в антителозависимой клеточной токсичности (АЗКЦ).
Термин "гипервариабельная область", в случае если применяется в данном документе, относится к аминокислотным остаткам антитела, которые отвечают за связывания антигена. Гипервариабельная область может содержать аминокислотные остатки из "определяющей комплементарность области" или "CDR" и/или эти остатки из "гипервариабельной петли". Остатки "каркасной области" или "FR" представляют собой остатки вариабельного домена, отличные от остатков гипервариабельной области, как определено в данном документе.
Вариабельные области, представляющие интерес, включают, по меньшей мере, одну последовательность CDR из вариабельных областей семейства 2, представленных в данном документе, обычно, по меньшей мере, 2 последовательности CDR и, более обычно, 3 последовательности CDR. Типовые обозначения CDR показаны в данном документе, однако специалист в данной области техники поймет, что обычно применяется ряд определений CDR, включая определение по Кабату (см. "Zhao и соавт., A germline knowledge based computational approach for determining antibody complementarity determining regions". Mol Immunol. 2010 год; 47:694-700), которое основано на изменчивости последовательности и является наиболее часто применяемым. Определение по Чотиа основано на расположении областей структурной петли (Chothia и соавт. "Conformations of immunoglobulin hypervariable regions." Nature. 1989 год; 342:877-883). Предоставляющие интерес альтернативные определения CDR включают, без ограничения, те, которые раскрыты в работах Honegger, "Yet another numbering scheme for immunoglobulin variable domains: an automatic modeling and analysis tool. " J Mol Biol. 2001 год; 309:657-670; Ofran и соавт. "Automated identification of complementarity determining regions (CDRs) reveals peculiar characteristics of CDRs and B cell epitopes". J Immunol. 2008 год; 181:6230-6235; Almagro "Identification of differences in the specificity-determining residues of antibodies that recognize antigens of different size: implications for the rational design of antibody repertoires". J Mol Recognit. 2004 год; 17:132-143; и Padlanet и соавт. "Identification of specificity-determining residues in antibodies. " Faseb J. 1995 год; 9:133-139., каждая из которых специально включена в данном документе посредством ссылки.
Термин "моноклональное антитело" в данном документе относится к антителу, полученному из популяции в значительной степени однородных антител, то есть, отдельные антитела в составе популяции являются идентичными, за исключением мутаций, происходящих по естественным причинам, которые могут присутствовать в небольших количествах. Моноклональные антитела являются высокоспецифичными, поскольку они направлены против одиночного антигенного сайта. Кроме того, по сравнению с препаратами поликлональных антител, которые содержат различные антитела против различных детерминант (эпитопов), каждое моноклональное антитело направлено против одиночной детерминанты антигена. Кроме специфичности, моноклональные антитела обладают преимуществом, заключающимся в том, что их можно синтезировать в виде, не загрязненном другими антителами. Модификатор “моноклональное” указывает на то, что антитело получено из практически однородной популяции антител; его не следует интерпретировать как требование о продукции антитела посредством какого-либо конкретного способа.
Антитела в данном документе включают "химерные" антитела, в которых часть тяжелой и/или легкой цепи идентична или гомологична соответствующим последовательностям антител конкретного вида животных или антител, принадлежащих к конкретному классу или подклассу, в то время как остальная часть цепи(ей) идентична или гомологична соответствующим последовательностям антител другого вида животных или антител, принадлежащих к другому классу или подклассу, а также фрагментам таких антител, при условии, что они демонстрируют желательную биологическую активность (патент США № 4,816,567; и Morrison и соавт. (1984 год) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851-6855). Представляющие интерес химерные антитела включают "приматизированные" антитела, содержащие антигенсвязывающие последовательности вариабельного домена, полученные от примата отличного от человека (например, мартышки Старого Света, обезьяны и тому подобное), и человеческие последовательности константной области.
"Интактная цепь антитела" в данном документе представляет собой цепь, содержащую полноразмерную вариабельную область и полноразмерную константную область (Fc). Интактное “стандартное” антитело содержит интактную легкую цепь и интактную тяжелую цепь, а также константный домен легкой цепи (CL) и константные домены тяжелой цепи - CH1, шарнир, CH2 и CH3 (для секретируемого IgG). Другие изотипы, например, IgM или IgA, могут содержать другие CH-домены. Константные домены могут представлять собой константные домены с нативной последовательностью (например, константные домены человека с нативной последовательностью) или варианты их аминокислотных последовательностей. Интактное антитело может обладать одной или более “эффекторными функциями”, которые относятся к его биологической активности, относимой на счет Fc-константной области (нативной последовательности Fc-области или аминокислотной последовательности вариантной Fc-области) антитела. Примеры эффекторных функций антител включают связывание C1q; комплемент-зависимую цитотоксичность; связывание с рецептором Fc; антитело-зависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность (АЗКЦ); фагоцитоз; и подавление рецепторов поверхности клетки. Варианты константной области включают варианты, изменяющие эффекторный профиль, связывание с рецепторами Fc и тому подобным.
В зависимости от аминокислотных последовательностей Fc (константных доменов) тяжелых цепей антитела и разнообразные антиген-связывающие белки могут быть предоставлены как различные "классы". Существует пять основных классов Fc областей тяжелой цепи: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, и некоторые из них могут быть дополнительно подразделены на "подклассы" (изотипы), например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, и IgA2. Fc константные домены, соответствующие различным классам антител, могут упоминатся как α, δ, ε, γ и μ, соответственно. Хорошо известны субъединичная структура и трехмерная конфигурация различных классов иммуноглобулинов. Формы Ig включают модификации шарнирной области или бесшарнирные формы (Roux и соавт. (1998 год) J. Immunol. 161:4083-4090; Lund и соавт. (2000 год) Eur. J. Biochem. 267:7246-7256; США 2005/0048572; США 2004/0229310). Легкие цепи антител любого вида позвоночных можно отнести к одному из двух типов, называемых κ- и λ-цепями, на основе аминокислотной последовательности их константных доменов.
"Функциональная область Fc" обладает "эффекторной функцией" нативной последовательности области Fc. Типовые эффекторные функции включают связывание C1q; КЗЦ (комплементзависимую цитотоксичность); Связывание с рецептором Fc; АЗКЦ; АЗКФ (антителозависимый клеточный фагоцитоз); подавление рецепторов клеточной поверхности (например, B-клеточного рецептора) и тому подобное. Такие эффекторные функции обычно требуют взаимодействия области Fc с рецептором, например, рецепторами FcγRI; FcγRIIA; FcγRIIB1; FcγRIIB2; FcγRIIIA; FcγRIIIB, и рецептором FcRn, обладающим низкой аффинностью; их оценку можно выполнить с помощью различных анализов, описанных, например, в определениях в данном документе. "Мертвая" область Fc представляет собой область Fc, мутированную с целью сохранения активности по отношению к, например, увеличению продолжительности периода полужизни сыворотки, однако не активирующую рецептор Fc, обладающий высокой аффинностью.
“Нативная последовательность Fc-области” содержит аминокислотную последовательность, идентичную аминокислотной последовательности Fc-области, встречающейся в природе. Нативные последовательности Fc-областей человека включают, например, нативную последовательность Fc-области IgG1 человека (отличных от А и А аллотипов); нативную последовательность Fc-области IgG2 человека; нативную последовательность Fc-области IgG3 человека; и нативную последовательность Fc-области IgG4 человека, а также их варианты, встречающиеся в природе.
“Вариантная Fc-область” содержит аминокислотную последовательность, отличающуюся от нативной последовательности Fc-области за счет модификации по меньшей мере одной аминокислоты, предпочтительно замены одной или более аминокислот. Предпочтительно, вариантная Fc-область содержит по меньшей мере одну аминокислотную замену по сравнению с нативной последовательностью Fc-области или Fc-области исходного полипептида, например, от приблизительно одной до приблизительно десяти аминокислотных замен, и предпочтительно от приблизительно одной до приблизительно пяти аминокислотных замен в нативной последовательности Fc-области или Fc-области исходного полипептида. Вариантная область Fc согласно данному изобретению предпочтительно обладает по меньшей мере около 80% гомологией по отношению к нативной последовательности области Fc и/или с области Fc исходного полипептида, и наиболее предпочтительно, по меньшей мере около 90% гомологией по отношению к ним, более предпочтительно, по меньшей мере около 95% гомологией по отношению к ним.
Вариантные последовательности Fc могут содержать три аминокислотных замены в области СН2 с целью ослабления связывания FcγRI в положениях 234, 235 и 237 согласно индексу ЕС (см., Duncan и соавт., (1988 год) Nature 332:563). Две аминокислотные замены в сайте связывания комплемента C1q в положениях 330 и 331 согласно индексу ЕС, ослабляют фиксацию комплемента (см., Tao и соавт., J. Exp. Med. 178:661 (1993 год) и Canfield and Morrison, J. Exp. Med. 173:1483 (1991 год)). Замена остатков в положениях 233-236 IgG1 или IgG2 человека и в положениях 327, 330 и 331 IgG4 значительно ослабляет АЗКЦ и КЗЦ (см., например, Armour KL. и соавт., 1999 год Eur J Immunol. 29(8):2613-24; и Shields RL. и соавт., 2001 год. J Biol Chem. 276(9):6591-604). Возможны другие варианты Fc-области, в том числе, без ограничений, вариант, в котором область, способная образовывать дисульфидную связь, удалена, или вариант, в котором удалены некоторые аминокислотные остатки на N-конце нативной Fc-формы или к ним добавлен остаток метионина. Таким образом, в одном варианте реализации данного изобретения один или более из Fc-фрагментов молекулы scFc может содержать одну или более мутацию в шарнирной области с целью устранения возможности образования дисульфидных связей. В еще одном варианте реализации шарнирная область Fc может быть полностью удалена. В еще одном варианте реализации молекула может содержать вариант Fc-области.
Кроме того, можно сконструировать вариант Fc-области, удалив или значительно ослабив эффекторные функции посредством замены, делеции или добавления аминокислотных остатков для влияния на связывание комплемента или рецептора Fc. В качестве неограничивающего примера, возможна делеция в сайте связывания комплемента, например, C1q-связывающем сайте. Методы получения таких производных последовательностей фрагмента Fc иммуноглобулинов описаны в международных патентных публикациях № WO 97/34631 и WO 96/32478. Кроме того, можно модифицировать домен Fc путем фосфорилирования, сульфатирования, ацилирования, гликозилирования, метилирования, фарнезилирования, ацетилирования, амидирования и тому подобного.
Fc-область может находиться в форме, содержащей нативные углеводные цепи, увеличенное количество углеводных цепей по сравнению с нативной формой или уменьшенное количество углеводных цепей по сравнению с нативной формой, или может находиться в агликозилированной или дегликозилированной форме. Увеличение, уменьшение, удаление или другие модификации углеводных цепей можно осуществить с помощью способов, часто применяемых в данной области техники, например, химического способа, ферментативного способа или посредством экспрессии в генетически сконструированной линии клеток-продуцентов. Такие линии клеток могут включать микроорганизмы, например, Pichia Pastoris и клеточную линию млекопитающих, например, клетки СНО, которые естественным образом экспрессируют гликозилирующие ферменты. Кроме того, можно сконструировать микроорганизмы или клетки для экспрессии гликозилирующих ферментов или сделать их неспособными к экспрессии ферментов гликозилирования (см., например, Hamilton и соавт., Science, 313:1441 (2006 год); Kanda, и соавт, J. Biotechnology, 130:300 (2007 год); Kitagawa и соавт., J. Biol. Chem., 269 (27):17872 (1994 год); Ujita-Lee и соавт., J. Biol. Chem., 264 (23):13848 (1989 год); Imai-Nishiya и соавт., BMC Biotechnology 7:84 (2007 год); и WO 07/055916). В качестве примера сконструированных клеток с модифицированной активностью сиалирования, в клетки яичника китайского хомячка и в клетки sf9 рекомбинантно внедрили ген альфа-2,6-сиалилтрансферазы 1. Антитела, экспрессируемые этими рекомбинантными клетками, подвергаются сиалированию продуктом экзогенного гена. Дополнительный способ получения молекул Fc с модифицированным количеством углеводных остатков по сравнению с множеством нативных молекул включает разделение указанного множества молекул на гликозилированную и негликозилированную фракции, например, с помощью аффинной хроматографии с лектином (см., например, WO 07/117505). Показано, что наличие конкретных гликозилирующих функциональных групп приводит к изменению функции иммуноглобулинов. Например, удаление углеводных цепей с молекулы Fc приводит к резкому снижению аффинности связывания с фрагментом C1q первого компонента комплемента C1 и ослаблению или потере антителозависимой клеточноопосредованной цитотоксичности (АЗКЦ) или комплементзависимой цитотоксичности (КЗЦ) и, следовательно, отсутствию индукции ненужных иммунных реакций in vivo. Дополнительные важные модификации включают сиалирование и фукозилирование: присутствие сиаловой кислоты в IgG коррелировало с противовоспалительной активностью (см., например, Kaneko, и соавт., Science 313:760 (2006 год)), в то время как удаление фукозы из IgG приводит к усилению активности АЗКЦ (см., например, Shoj-Hosaka, и соавт., J. Biochem., 140:777 (2006 год)).
В альтернативных вариантах реализации антитела по данному изобретению могут содержать последовательность Fc с усиленными эффекторными функциями, например, повышенной способностью к связыванию с FcγRIIIA и повышенной активностью АЗКЦ. Например, присоединение фукозы к N-связанному гликану при Asn-297 области Fc стерически затрудняет взаимодействие Fc с FcγRIIIA, а удаление фукозы посредством гликоинженерии может усилить связывание с FcγRIIIA, что приводит к > 50-кратному увеличению активности АЗКЦ по сравнению с контрольными IgG1 дикого типа. Белковая инженерия позволяет получить различные варианты с повышенной аффинностью связывания Fc с FcγRIIIA за счет мутаций аминокислот в области Fc IgG1. Примечательно, что тройной мутант с заменой на аланин S298A/E333A/K334A демонстрирует 2-кратное усиление связывания с FcγRIIIA и функцию АЗКЦ. Варианты S239D/I332E (2X) и S239D/I332E/A330L (3X) характеризуются значительным увеличением сродства связывания с FcγRIIIA и усилением АЗКЦ in vitro и in vivo. Другие варианты области Fc, выявленные посредством фагового дисплея, также демонстрировали улучшенное связывание с FcγRIIIA и усиленное уничтожение опухолевых клеток в моделях ксенотрансплантатов у мышей. См., например, Liu и соавт. (2014 год) JBC 289(6):3571-90, специально включенный в данный документ посредством ссылки.
Термин "антитело, содержащее область Fc" относится к антителу, содержащему область Fc. С-концевой остаток лизина (остаток 447 в соответствии с ЕС-системой нумерации) в Fc-области можно удалить, например, при очистке антитела или с помощью рекомбинантной инженерии нуклеиновой кислоты, кодирующей антитело. Соответственно, антитело, содержащее область Fc согласно данному изобретению, может включать антитело с K447 или без него.
"Fv" представляет собой минимальный фрагмент антитела, содержащий полный антигенраспознающий и антигенсвязывающий участок. Связывающие CD3 антитела по данному изобретению содержат димер одного домена вариабельной области тяжелой цепи и одного домена вариабельной области легкой цепи, соединенных жесткой нековалентной связью; однако дополнительные антитела, например, для применения в мультиспецифической конфигурации может содержать VH в отсутствие последовательности VL. Даже один вариабельный домен (или половина Fv, содержащего только три гипервариабельные области, специфичные для антигена) обладает способностью распознавать и связывать антиген, хотя аффинность может быть ниже, чем аффинность сайта связывания двух доменов.
Фрагмент Fab также содержит константный домен легкой цепи и первый константный домен (CH1) тяжелой цепи. Фрагменты Fab' отличаются от фрагментов Fab по дополнительным нескольким остаткам на карбоксильном конце домена CH1 тяжелой цепи, включая один или более цистеинов из шарнирной области антитела. В данном описании Fab'-SH представляет собой обозначение Fab', в котором цистеиновый(е) остаток(и) константных доменов несет по меньшей мере одну свободную тиольную группу. Фрагменты F(ab')2 антитела первоначально получали в виде пар фрагментов Fab’, между которыми находятся шарнирные остатки цистеина. Известны также другие варианты химического связывания фрагментов антител.
"Гуманизированные" формы антител нечеловеческого происхождения (например, грызунов), включая одноцепочечные антитела, представляют собой химерные антитела (включая одноцепочечные антитела), содержащие минимальные последовательности, происходящие от иммуноглобулина нечеловеческого происхождения. См., например, Jones и соавт., (1986 год) Nature 321:522-525; Chothia и соавт., (1989 год) Nature 342:877; Riechmann и соавт., (1992 год) J. Mol. Biol. 224, 487-499; Foote and Winter, (1992 год) J. Mol. Biol. 224:487-499; Presta и соавт., (1993 год) J. Immunol. 151, 2623-2632; Werther и соавт., (1996 год) J. Immunol. Methods 157:4986-4995; и Presta и соавт., (2001 год) Thromb. Haemost. 85:379-389. Дополнительную информацию см. в патентах США № 5,225,539; 6,548,640; 6,982,321; 5,585,089; 5,693,761; 6,407,213; Jones и соавт., (1986 год) Nature, 321:522-525; и Riechmann и соавт., (1988 год) Nature 332:323-329.
В данном контексте термин "одноцепочечное антитело" означает одну полипептидную цепь, содержащую один или более антигенсвязывающих доменов, которые связывают эпитоп антигена, при этом такие домены получены из или имеют идентичность последовательности с вариабельной областью тяжелой или легкой цепи антитела. Части такой вариабельной области могут кодироваться генными сегментами VH или VL, генными сегментами D и JH или генными сегментами JL. Вариабельная область может кодироваться перестроенными генными сегментами VHDJH, VLDJH, VHJL или VLJL. Генные сегменты V-, D- и J- могут быть получены от людей и различных животных, включая птиц, рыб, акул, млекопитающих, грызунов, приматов, отличных от человека, верблюдов, лам, кроликов и тому подобных.
CD3-связывающие антитела по данному изобретению находят конкретное применение в мультиспецифических конфигурациях, которые включают, без ограничения, биспецифические антитела, трифункциональные антитела и тому подобное. Большое разнообразие способов и конфигураций белков известно и применяется в биспецифических моноклональных антителах (БсмАт), триспецифических антителах и тому подобных.
БсмАт первого поколения состояли из двух тяжелых и двух легких цепей, по одной от двух разных антител. Две области Fab направлены против двух антигенов. Область Fc состоит из двух тяжелых цепей и образует третий сайт связывания с рецептором Fc на иммунных клетках (см., например, Lindhofer и соавт., The Journal of Immunology, Том 155, стр. 219-225, 1995 год). Антитела могут быть из одного или разных видов. Например, клеточные линии, экспрессирующие антитела крысы и мыши, секретируют функциональное биспецифическое Ат из-за преимущественного, ограниченного видом, спаривания тяжелых и легких цепей. В других вариантах реализации изобретения области Fc сконструированы так, что они подходят друг другу только определенным образом.
Другие типы биспецифических антител включают химически связанные Fab, состоящие только из областей Fab. Два химически связанных фрагмента Fab или Fab2 образуют искусственное антитело, которое связывается с двумя различными антигенами, что делает его типом биспецифического антитела. Получаются антигенсвязывающие фрагменты (Fab или Fab2) двух разных моноклональных антител связанные химическими средствами, такими как тиоэфир (см., Glennie, M J и соавт., Journal of immunology 139, стр. 2367-75, 1987 год; Peter Borchmann и соавт., Blood, Том 100, № 9, стр. 3101-3107, 2002 год).
Различные другие способы получения поливалентных искусственных антител были разработаны путем рекомбинантного слияния вариабельных доменов двух антител. Одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv) представляет собой слитый белок вариабельных областей тяжелых (VH) и легких цепей (VL) иммуноглобулинов, связанных с коротким линкерным пептидом из 10-25 аминокислот. Обычно линкер насыщен глицином для гибкости, а также серином или треонином для растворимости и может соединять N-конец VH с C-концом VL, или наоборот. Биспецифические одноцепочечные вариабельные фрагменты (ди-scFvs, би-scFvs) могут быть сконструированы путем связывания двух scFv с различной специфичностью. Производится одна пептидная цепь с двумя областями VH и двумя областями VL, что приводит к получению двухвалентных scFv.
Биспецифические тандемные scFv также известны как привлекающие T-клетки биспецифические активаторы (BiTE). Биспецифические scFv могут быть созданы с помощью линкерных пептидов, которые являются слишком короткими для того, чтобы две вариабельные области складывались вместе (длиной около пяти аминокислот), заставляя scFvs димеризоваться. Этот тип известен как диатела (Adams и соавт., British journal of cancer 77, стр. 1405-12, 1998 год). Технология платформы двуафинного перенацеливания (DART - Dual-Affinity Re-Targeting) (Macrogenics, Роквилл, штат Мэриленд). Эта технология слияния белков применяет два одноцепочечных вариабельных фрагмента (scFv) различных антител на одной пептидной цепи длиной около 55 килодальтон. SCORPION Therapeutics (Emergent Biosolutions, Inc., Сиэтл, штат Вашингтон) объединяет два антигенсвязывающих домена в одноцепочечный белок. Один связывающий домен находится на С-конце, а второй связывающий домен находится на N-конце эффекторного домена на основе областей Fc иммуноглобулина.
Тетравалентные и биспецифические подобные антителам белки также включают DVD-Ig, которые сконструированы из двух моноклональных антител (Wu, C. и соавт., Nature Biotechnology, 25, стр. 1290-1297, 2007 год). Для конструирования молекулы DVD-Ig домены V двух мАт сливаются в тандеме с помощью короткого линкера (TVAAP) с вариабельным доменом легкой цепи (VL) первого антитела на N-конце, за которым следуют VL и Ck других антител для образования легкой цепи белка DVD-Ig. Аналогичным образом, вариабельные области тяжелой (VH) цепи двух мАт сливаются в тандеме с помощью короткого линкера (ASTKGP) с первым антителом на N-конце, за которым следует другое антитело и константные домены тяжелой цепи с образованием тяжелой цепи (VH1/VL1) белка DVD-Ig. Все константные домены легкой цепи и тяжелой цепи сохраняются в конструкции DVD-Ig, поскольку они являются критическими для образования дисульфид-связанной полной IgG-подобной молекулы. Котрансфекция клеток млекопитающих экспрессионными векторами, кодирующими легкую цепь и тяжелую цепь DVD-Ig, приводит к секреции IgG-подобной молекулы одного вида с молекулярной массой приблизительно 200 кДа. Эта молекула теперь имеет четыре сайта связывания, по 2 от каждого мАт.
Термин "биспецифическая трехцепочечная антитело-подобная молекула" или "ТСА" применяется в данном документе для обозначения антитело-подобных молекул, включающих, состоящих по существу или состоящих из трех полипептидных субъединиц, две из которых включают в себя, состоят по существу из или состоят из одной тяжелой и одной легкой цепи моноклонального антитела или функциональных антигенсвязывающих фрагментов таких цепей антитела, содержащих антигенсвязывающую область и по меньшей мере один домен СН. Эта пара тяжелая цепь/легкая цепь обладает специфичностью связывания для первого антигена. Третья полипептидная субъединица содержит, состоит по существу или состоит из антитела с только тяжелой цепью, содержащего участок Fc, содержащий домены СН2 и/или СН3, и/или СН4, в отсутствие домена СН1, и антигенсвязывающий домен, который связывает эпитоп второго антигена или другой эпитоп первого антигена, при этом такой связывающий домен происходит из или имеет идентичность последовательности с вариабельной областью тяжелой или легкой цепи антитела. Части такой вариабельной области могут кодироваться генными сегментами VH или VL, генными сегментами D и JH или генными сегментами JL. Вариабельная область может кодироваться перестроенными генными сегментами VHDJH, VLDJH, VHJL или VLJL.
Белок TCA использующий "антитело только с тяжелой цепью" или "антитело с тяжелой цепью" или "полипептид тяжелой цепи", в данном контексте означает одноцепочечное антитело, содержащее константные области тяжелой цепи СН2 и/или СН3, и/или СН4, но не имеющее домена СН1. В одном варианте реализации изобретения антитело с тяжелой цепью состоит из антигенсвязывающего домена, по меньшей мере, части шарнирной области и доменов CH2 и CH3. В другом варианте реализации изобретения антитело с тяжелой цепью состоит из антигенсвязывающего домена, по меньшей мере, части шарнирной области и домена CH2. В дополнительном варианте реализации изобретения антитело с тяжелой цепью состоит из антигенсвязывающего домена, по меньшей мере, части шарнирной области и домена CH3. Антитела с тяжелой цепью, в которых домен СН2 и/или СН3 укорочен, также включены в данный документ. В дополнительном варианте реализации изобретения тяжелая цепь состоит из антигенсвязывающего домена и, по меньшей мере, одного домена СН (СН1, СН2, СН3 или СН4), но без шарнирной области. Антитело только с тяжелой цепью может быть в форме димера, в котором две тяжелые цепи дисульфидно связаны друг с другом или ковалентно или нековалентно связаны друг с другом. Антитело с тяжелой цепью может принадлежать к подклассу IgG, но антитела, принадлежащие к другим подклассам, таким как подкласс IgM, IgA, IgD и IgE, также включены в данный документ. В конкретном варианте реализации изобретения антитело с тяжелой цепью относится к подтипу IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4, в частности подтипу IgG1.
Антитела с тяжелой цепью составляют около одной четвертой части антител IgG, продуцируемых верблюдовыми, например, верблюдами и ламами (Hamers-Casterman C., и соавт. Nature. 363, 446-448 (1993 год)). Эти антитела образованы двумя тяжелыми цепями, но лишены легких цепей. Как следствие, вариабельная антигенсвязывающая часть называется доменом VHH и представляет собой наименьший встречающийся в природе интактный антигенсвязывающий сайт длиной всего около 120 аминокислот (Desmyter A., и соавт. J. Biol. Chem. 276, 26285-26290 (2001 год)). Антитела с тяжелой цепью с высокой специфичностью и аффинностью могут производиться против различных антигенов посредством иммунизации (van der Linden, R. H., и соавт. Biochim. Biophys. Acta. 1431, 37-46 (1999 год)), а часть VHH может быть легко клонирована и экспрессирована в дрожжах (Frenken, L. G. J., и соавт. J. Biotechnol. 78, 11-21 (2000 год)). Их уровни экспрессии, растворимости и стабильности значительно выше, чем у классических фрагментов F(ab) или Fv (Ghahroudi, M. A. и соавт. FEBS Lett. 414, 521-526 (1997 год)). Также было показано, что акулы имеют один VH-подобный домен в своих антителах, называемый VNAR. (Nuttall и соавт. Eur. J. Biochem. 270, 3543-3554 (2003 год); Nuttall и соавт., Function and Bioinformatics 55, 187-197 (2004 год); Dooley и соавт., Molecular Immunology 40, 25-33 (2003 год)).
Антитело или антигенсвязывающая молекула, включая антитела, содержащие только тяжелую цепь, и биспецифические трехцепочечные антителоподобные молекулы (ТСА) в данном документе, "которые связывают" представляющий интерес антиген, представляют собой молекулу, которая связывает антиген с достаточной аффинностью, так что антитело или связывающая молекула полезна в качестве диагностического и/или терапевтического агента при нацеливании на антиген и не имеет значительного перекрестного взаимодействия с другими белками. В таких вариантах реализации изобретения степень связывания антитела или другой связывающей молекулы с нецелевым антигеном будет составлять не более 10%, как определено анализом сортировки клеток с активированной флуоресценцией (FACS - fluorescence activated cell sorting) или радиоиммунопреципитацией (РИА)
Белки
Данное изобретение обеспечивает семейство родственных антител, которые связываются и активируют передачу сигналов посредством CD3, например, активацией CD3+ T-клеток. Антитела в семействе содержат набор последовательностей CDR, как определено в данном документе, и примерами которых являются предоставленные последовательности VH из SEQ ID NO: 1-18. Семейство антител обеспечивает ряд преимуществ, которые способствуют полезности в качестве клинического лекарственного средства(в). Антитела в семействе включают членов с рядом аффинностей связывания, позволяющих выбирать конкретную последовательность с желаемой аффинностью. Способность точно настраивать аффинность имеет особое значение для управления уровнем активации CD3 у индивида, которого лечат, и, таким образом, для снижения токсичности. Например, если целью являются опухолевые антигены, присутствующие в небольшом количестве (менее 10000 молекул на клетку), ожидается, что предпочтительными являются высокоаффинные связыватели CD3 (<30 нМ). Если целью являются опухолевые антигены, присутствующие в большом количестве (более 50000 молекул на клетку), предпочтительными являются низкоаффинные связыватели CD3 (> 50 нМ). Отдельно от афинности может определятся способность антитела индуцировать высвобождение цитокинов при связывании Т клеток, например, высвобождение ИЛ-2, ИФН-γ и др., в условиях, в которых высвобождение цитокинов может быть желательным.
Подходящее антитело может быть выбрано из тех, которые предоставлены в данном документе для разработки и применения, включая без ограничения применение в качестве биспецифического антитела. Определение аффинности к белку-кандидату может быть выполнено с применением способов, известных в данной области техники, например, измерения Biacore и тому подобного. Члены семейства антител могут иметь аффинность к CD3 с Kd от около 10-6 до около 10-11, включая без ограничений: от около 10-6 до около 10-10; от около 10-6 до около 10-9; от около 10-6 до около 10-8; от около 10-8 до около 10-11; от около 10-8 до около 10-10; от около 10-8 до около 10-9; от около 10-9 до около 10-11; от около 10-9 до около 10-10; или любое значение в этих диапазонах. Выбор аффинности может быть подтвержден биологической оценкой активации Т-клеток, например, in vitro или в доклинической модели, и оценкой потенциальной токсичности. Измерение высвобождения цитокинов может осуществляться с помощью любого удобного анализа, включая, но не ограничиваясь ими, анализы, описанные в примерах.
Стимуляция рецептора T-клетки (ТКР) путем связывания комплексов MH-пептид или антител к ТКР/CD3 инициирует активацию T-клеток. Примерами антител к ТКР/CD3, которые активируют Т-клетки, являются OKT3 и UCHT1. Эти антитела к CD3 перекрестно конкурируют за связывание с CD3 на Т-клетках и обычно применяются в анализах активации Т-клеток. Антитела к CD3 по данному изобретению перекрестно конкурируют с OKT3 за связывание с CD3 человека. В зависимости от аффинности связывания CD3 и эпитопа на CD3 антитела к CD3 активировали Т-клетки с различными функциональными результатами. Инкубация in vitro Т-клеток человека с низкоаффинными антителами к CD3 приводила к неполной активации Т-клеток, низкой продукции ИЛ-2 и ИЛ-10. Напротив, высокоаффинные связыватели CD3 активировали Т-клетки, чтобы продуцировать значительно больше ИЛ-2 и других цитокинов. Низкоаффинные антитела к CD3 считаются частичными агонистами, которые избирательно индуцируют некоторые эффекторные функции, сильное уничтожение опухоли и активацию CD69, но не вызывают других, таких как продукция ИЛ-2 и ИЛ-10. Высокоаффинные связыватели по данному изобретению являются полными агонистами, активирующими многие иммунные эффекторные функции Т-клеток. Сила взаимодействия с CD3 и узнаваемым эпитопом привела к качественно различной активации Т-клеток. Максимальная продукция цитокинов Т-клетками, активированными низкоаффинными антителами к CD3, была ниже, чем максимальная активация высокоаффинными антителами к CD3. В некоторых вариантах реализации антитело по данному изобретению приводит к более низкому высвобождению одного или обоих ИЛ-2 и ИЛ-10 при объединении с Т-клетками в анализе активации по сравнению с эталонным антителом к CD3 в том же анализе, при этом эталонное антитело может представлять собой ID 304703 (SEQ ID NO: 22) или антитело с эквивалентной аффинностью. Максимальное высвобождение ИЛ-2 и/или ИЛ-10 может составлять менее чем около 75% высвобождения с помощью эталонного антитела, менее чем около 50% высвобождения с помощью эталонного антитела, менее чем около 25% высвобождения с помощью эталонного антитела, и может составлять менее чем около 10% высвобождения с помощью эталонного антитела.
В некоторых вариантах реализации изобретения предлагаются биспецифические или мультиспецифические антитела, которые могут иметь любую из обсуждаемых в данном документе конфигураций, включая, без ограничения, биспецифическую трехцепочечную конфигурацию. Биспецифические антитела содержат по меньшей мере вариабельную область тяжелой цепи антитела, специфичного к белку, отличному от CD3, и могут содержать вариабельную область тяжелой и легкой цепи. В некоторых таких вариантах реализации изобретения вторая специфичность антитела связывается с антигеном, ассоциированным с опухолью, нацеливающим антигеном, например, интегринами и тому подобное, патогенным антигеном, белком контрольной точки и тому подобным. Различные форматы биспецифических антител находятся в пределах объема изобретения, включая без ограничения одноцепочечные полипептиды, двухцепочечные полипептиды, трехцепочечные полипептиды, четырехцепочечные полипептиды и кратные им.
Семейство CD3-специфических антител содержит домен VH, содержащий последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 в каркасе VH человека. Последовательности CDR могут быть расположены, например, в области аминокислотных остатков 26-33; 51-58; и 97-112 для CDR1, CDR2 и CDR3, соответственно, предоставленных типовых последовательностей вариабельной области, изложенных в SEQ ID NO: 1-18. Специалисту в данной области техники должно быть понятно, что последовательности CDR могут находиться в другом положении, в случае если выбрана другая каркасная последовательность, хотя обычно порядок последовательностей будет оставаться тем же.
Последовательности CDR для антитела семейства 2 могут иметь следующие формулы последовательности. Х обозначает вариабельную аминокислоту, которая может представлять собой специфические аминокислоты, как указано ниже.
CDR1
G1 | F2 | T3 | F4 | X5 | X6 | Y7 | A8 |
при этом:
X5 может быть любой аминокислотой; в некоторых вариантах реализации изобретения X5 представляет собой D, A или H; в некоторых вариантах реализации изобретения X5 представляет собой D.
X6 может быть любой аминокислотой; в некоторых вариантах реализации изобретения X6 представляет собой D или N; в некоторых вариантах реализации изобретения D6 представляет собой D.
В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность CDR1 анти-CD3 антитела семейства 2 содержит последовательность определенную в любой из SEQ ID NO: 1-18, остатках 26-33.
CDR2
I1’ S2’ W3’ N4’ S5’ G6’ S7’ I8’
В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность CDR2 антитела к CD3 семейства 2 содержит последовательность, изложенную в любой из SEQ ID NO: 1-18, остатки 51-58.
CDR3
A1” K2” D3” S4” R5” G6” Y7” G8” X9” Y10” X11” X12” G13” G12” A15” Y16”
при этом:
X9” может быть любой аминокислотой; в некоторых вариантах реализации изобретения X9” представляет собой D или S; в некоторых вариантах реализации изобретения X9” представляет собой D;
X11” может быть любой аминокислотой; в некоторых вариантах реализации изобретения X11” представляет собой R или S.
X12” может быть любой аминокислотой; в некоторых вариантах реализации изобретения X12” представляет собой L или R.
В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность CD3 анти-CD3 антитела семейства 2 имеет формулу A K D S R G Y G D Y X11” X12” G G A Y, в которой X11” и X12” представляют собой определенное выше. В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность CDR3 антитела к CD3 семейства 2 содержит последовательность, изложенную в любой из SEQ ID NO: 1-18, остатки 97-112.
В некоторых вариантах реализации изобретения CD3-связывающий домен VH связан с доменом вариабельной области легкой цепи. В некоторых таких вариантах реализации изобретения легкая цепь представляет собой фиксированную легкую цепь. В некоторых вариантах реализации изобретения легкая цепь содержит домен VL с последовательностями CDR1, CDR2 и CDR3 в каркасе VL человека. Последовательности CDR могут быть последовательностями из SEQ ID NO: 19. В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность CDR1 содержит аминокислотные остатки 27-32; 50-52; 89-97 для CDR1, CDR2, CDR3 соответственно.
В некоторых вариантах реализации изобретения последовательности CDR антитела семейства 2 имеют последовательность с по меньшей мере 85% идентичностью, по меньшей мере 90% идентичностью, по меньшей мере 95% идентичностью, по меньшей мере 99% идентичностью относительно последовательности CDR или набора последовательностей CDR в любой из SEQ ID NO: 1-18. В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность CDR по данному изобретению содержит одну, две, три или более аминокислотных замен по отношению к последовательности CDR или набора последовательностей CDR в любой из SEQ ID NO: 1-18. В некоторых вариантах реализации изобретения указанная аминокислотная замена(ы) представляет собой одну или более в положении 5 или 10 из CDR1, положении 2, 6 или 7 из CDR2, положении 1, 8, 9 или 10 из CDR3 относительно формул, представленных выше.
Когда белок по данному изобретению представляет собой биспецифическое антитело, один связывающий фрагмент, то есть комбинация VH/VL или только VH, является специфичным для CD3 человека, тогда как другое плече может быть специфичным для клеток-мишеней, включая раковые клетки, такие как клетки яичника, молочной железы, желудочно-кишечного тракта, головного мозга, головы и шеи, предстательной железы, толстой кишки и рак легкого и тому подобное, а также гематологические опухоли, такие как В-клеточные опухоли, включая лейкемии, лимфомы, саркомы, карциномы, опухоли нервных клеток, плоскоклеточные карциномы, эмбрионально-клеточные опухоли, метастазы, недифференцированные опухоли, семиномы, меланомы, миеломы, нейробластомы, опухоли смешанных клеток, новообразования, вызванные инфекционными агентами, и другие злокачественные новообразования, клетки, инфицированные патогеном, аутореактивные клетки, вызывающие воспаление и/или аутоиммунную реакцию. Часть, не содержащая CD3, также может быть специфичной для иммунорегуляторного белка, как будет описано в данном документе.
Опухолеассоциированные антигены (TAA) относительно ограничены опухолевыми клетками, тогда как опухолеспецифические антигены (TSA) являются уникальными для опухолевых клеток. TSA и TAA обычно представляют собой части внутриклеточных молекул, экспрессируемых на поверхности клетки как часть основного комплекса гистосовместимости.
Тканеспецифические дифференцировочные антигены представляют собой молекулы, присутствующие на опухолевых клетках и их нормальных клеточных аналогах. Опухолеассоциированные антигены, о которых известно, что они распознаются терапевтическими мАт, подразделяются на несколько различных категорий. Гематопоэтические дифференцировочные антигены представляют собой гликопротеины, которые обычно связаны с группами кластера дифференцировки (CD) и включают в себя CD20, CD30, CD33 и CD52. Дифференцировочные антигены клеточной поверхности представляют собой разнообразную группу гликопротеинов и углеводов, которые находятся на поверхности как нормальных, так и опухолевых клеток. Антигены, которые участвуют в передаче сигналов роста и дифференцировки, часто являются факторами роста и рецепторами факторов роста. Факторы роста, которые являются целями для антител у онкопациентов, включают CEA, рецептор эпидермального фактора роста (EGFR (epidermal growth factor receptor); также известный как ERBB1), ERBB2 (также известный как HER2), ERBB3, MET (также известный как HGFR), рецептор инсулиноподобного фактора роста 1 (IGF1R - insulin-like growth factor 1 receptor), рецептор эфрина A3 (EPHA3), рецептор ФНО-зависимого апоптоз-индуцирующего лиганда 1 (TRAILR1 (tumor necrosis factor (TNF)-related apoptosis-inducing ligand receptor 1); также известный как TNFRSF10A), TRAILR2 (также известный как TNFRSF10B) и лиганд рецептора-активатора ядерного фактора κВ (RANKL; также известный как TNFSF11). Антигенами, участвующими в ангиогенезе, обычно являются белки или факторы роста, которые поддерживают образование нового микроциркуляторного русла, включая фактор роста сосудистого эндотелия (VEGF - vascular endothelial growth factor), рецептор VEGF (VEGFR), интегрин αVβ3 и интегрин α5β1. Строма опухоли и внеклеточный матрикс являются необходимыми опорными структурами для опухоли. Антигены стромального и внеклеточного матрикса, которые являются терапевтическими мишенями, включают белок активации фибробластов (FAP - fibroblast activation protein) и тенасцин.
Примеры лекарственных средств на основе моноклональных антител, полезных в биспецифических конфигурациях, включают, без ограничения, ритуксимаб; Ибритумомаб; Тиуксетан; Тозитумомаб; Брентуксимаб; ведотин; Гемтузумаб; озогамицин; Алемтузумаб; IGN101; адекатумумаб; Лабетузумаб; huA33; Пемтумомаб; ореговомаб; CC49 (минретумомаб); cG250; J591; MOv18; MORAb-003 (фарлетузумаб); 3F8, ch14. 18; KW-2871; hu3S193; IgN311; Бевацизумаб; IM-2C6; CDP791; Етарацизумаб; Волоциксимаб; Цетуксимаб, панитумумаб, нимотузумаб; 806; Трастузумаб; пертузумаб; MM-121; AMG 102, METMAB; SCH 900105; AVE1642, IMC-A12, MK-0646, R1507; CP 751871; KB004; IIIA4; Мапатумумаб (HGS-ETR1); HGS-ETR2; CS-1008; Деносумаб; Сибротузумаб; F19; и 81C6.
Рецепторы иммунной контрольной точки, которые наиболее активно изучались в контексте клинической иммунотерапии рака, антиген 4 ассоцииированный с цитотоксическими Т-лимфоцитами (CTLA4 - cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen 4; также известный как CD152) и белок 1 запрограммированной смерти клетки (PD1 - programmed cell death protein 1; также известный как CD279) - оба представляют собой ингибирующие рецепторы. Клиническая активность антител, которые блокируют любой из этих рецепторов, подразумевает, что противоопухолевый иммунитет может быть усилен на нескольких уровнях и что комбинаторные стратегии могут быть разумно разработаны, руководствуясь механистическими соображениями и доклиническими моделями.
Двумя лигандами для PD1 являются лиганд 1 PD1 (PDL1; также известный как B7-H1 и CD274) и PDL2 (также известный как B7-DC и CD273). PDL1 экспрессируется на раковых клетках и посредством связывания с его рецептором PD1 на Т-клетках ингибирует активацию/функцию Т-клеток.
Ген 3 активации лимфоцитов (LAG3; также известный как CD223), 2B4 (также известный как CD244), аттенюатор (attenuator) В и Т-лимфоцитов (BTLA; также известный как CD272), белок 3 мембраны Т-клеток (TIM3; также известный как HAVcr2), рецептор аденозина A2a (A2aR) и семейство рецепторов подавления цитотоксичности, были связаны с ингибированием активности лимфоцитов и в некоторых случаях с индукцией анергии лимфоцитов. Нацеливание антител этих рецепторов можно применять в способах по данному изобретению.
Агенты, которые агонизируют иммунную костимулирующую молекулу, также полезны в способах по данному изобретению. Такие агенты включают агонисты или CD40 и OX40. CD40 представляет собой костимулирующий белок, обнаруженный в антигенпрезентирующих клетках (АПК) и необходимый для их активации. Эти АПК включают фагоциты (макрофаги и дендритные клетки) и B-клетки. CD40 является частью семейства рецепторов ФНО. Первичными активирующими сигнальными молекулами для CD40 являются ИФНγ и лиганд CD40 (CD40L). Стимуляция через CD40 активирует макрофаги.
Представляющие интерес антитела к CCR4 (CD194) включают в себя гуманизированные моноклональные антитела, направленные против C-C-хемокинового рецептора 4 (CCR4) с потенциальной противовоспалительной и противоопухолевой активностями. CCR2 экспрессируется на свободных макрофагах, которые могут быть обнаружены при различных воспалительных состояниях, например, ревматоидном артрите; и также были идентифицированы как экспрессирующиеся на макрофагах, стимулирующих опухоль. CCR2 также экспрессируется на регуляторных Т-клетках, а лиганд CCR2, CCL2, опосредует рекрутирование регуляторных Т-клеток в опухоли. Регуляторные Т-клетки подавляют ответ на противоопухолевые Т-клетки, и поэтому желательно их ингибирование или истощение их популяции.
Получение белков по данному изобретению
Хотя антитела могут быть получены с помощью химического синтеза, их обычно получают методами рекомбинантной ДНК, такими как коэкспрессия всех цепей, составляющих белок в одной рекомбинантной клетке-хозяине, или коэкспрессия полипептида тяжелой цепи и антитела, например, человеческого антитела. Кроме того, тяжелая и легкая цепи антитела также могут быть экспрессированы с применением одного полицистронного экспрессионного вектора. Очистка отдельных полипептидов достигается с применением стандартных методов очистки белков, таких как аффинная (белок А) хроматография, эксклюзионная хроматография и/или хроматография гидрофобного взаимодействия. Биспецифические достаточно различаются по размеру и гидрофобности, поэтому очистку можно проводить с применением стандартных процедур.
Количество антитела и полипептида тяжелой цепи, продуцируемых в одной клетке-хозяине, можно минимизировать путем конструирования константных областей антитела и тяжелой цепи, так что гомодимеризация является предпочтительнее гетеродимеризации, например, путем введения самокомплементарных взаимодействий (см., например, WO 98/50431 о возможностях, таких как стратегии "выпуклости-в-полость" (см., WO 96/27011)). Поэтому еще одним аспектом данного изобретения является предоставление способа получения биспецифического в рекомбинантном хозяине, способа, включающего этап: экспрессии в рекомбинантной клетке-хозяине последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей по меньшей мере два полипептида тяжелой цепи, при этом указанные полипептиды тяжелой цепи отличаются своими константным областям в достаточной степени, чтобы уменьшить или предотвратить образование гомодимера, но увеличить образование биспецифического.
Когда белок содержит три цепи, например, FlicAb, они могут быть получены путем коэкспрессии трех цепей (2 тяжелых цепи и одна легкая цепь), составляющих молекулу в одной рекомбинантной клетке-хозяине.
Для рекомбинантной продукции белков в данном документе применяют одну или более нуклеиновых кислот, кодирующих все цепи, например, 2, 3, 4 и тому подобное, выделяют и встраивают в реплицируемый вектор для дальнейшего клонирования (амплификации ДНК) или для экспрессии. Многие векторы являются доступными. Компоненты вектора, как правило, включают в себя, но не ограничиваются ими, один или более из следующих элементов: сигнальную последовательность, точку начала репликации, один или более маркерных генов и энхансерный элемент, промотор и последовательность терминации транскрипции.
В предпочтительном варианте реализации изобретения клетка-хозяин в соответствии со способом по данному изобретению способна к экспрессии человеческого иммуноглобулина на высоком уровне, то есть, по меньшей мере, 1 пг/клетка/день, предпочтительно, по меньшей мере, 10 пг/клетка/день и даже более предпочтительно по меньшей мере 20 пг/клетка/день или более без необходимости амплификации молекул нуклеиновой кислоты, кодирующих отдельные цепи в указанной клетке-хозяине.
Фармацевтическая композиция
Другим аспектом данного изобретения является предоставление фармацевтических композиций, содержащих один или более белков по данному изобретению в смеси с подходящим фармацевтически приемлемым носителем. Примеры фармацевтически приемлемых носителей, применяемых в данном документе, представляют собой, но без ограничений, адъюванты, твердые носители, воду, буферы или другие носители, применяемые в данной области техники для хранения терапевтических компонентов или их комбинаций.
Терапевтические составы белков, применяемые в соответствии с данным изобретением, готовят для хранения путем смешивания белков, имеющих желаемую степень чистоты, с необязательными фармацевтически приемлемыми носителями, наполнителями или стабилизаторами (см., например, Remington's Pharmaceutical Sciences 16-е издание, Osol, A. Ред. (1980 год)), например, в виде лиофилизированных составов или водных растворов. Приемлемые носители, вспомогательные вещества или стабилизаторы являются нетоксичными для реципиентов в используемых дозировках и концентрациях, и включают буферные вещества, например, фосфат, цитрат и другие органические соли; антиоксиданты, включая аскорбиновую кислоту и метионин; консерванты (например, хлорид октадецилдиметилбензиламмония; хлорид гексаметония; хлорид бензалкония; хлорид бензэтония; фенол; бутиловый или бензиловый спирт; алкилпарабены, например, метил- или пропилпарабен; катехол; резорцин; циклогексанол; 3-пентанол; и m-крезол); низкомолекулярные (содержащие менее 10 остатков) полипептиды; белки, например, сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, например, поливинилпирролидон; аминокислоты, например, глицин, глутамин, аспарагин, гистидин, аргинин или лизин; моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включая глюкозу, маннозу или декстрины; хелатирующие агенты, например, ЭДТК; сахара, например, сахарозу, маннит, трегалозу или сорбит; солеобразующие противоионы, например, натрия; металлсодержащие комплексы (например, комплексы Zn-белок) и/или неионогенные ПАВ, например, TWEEN™, PLURONICS™ или полиэтиленгликоль (ПЭГ).
Составы антител к CD3 описаны, например, в патентной публикации США № 20070065437, полное описание которой включено в данный документ посредством ссылки. Подобные составы могут быть применены для белков по данному изобретению. Основными компонентами таких составов являются рН-буферное средство, эффективное в диапазоне от 3,0 до 6,2, соль, поверхностно-активное вещество и эффективное количество биспецифического со специфичностью к CD3.
Способы применения
Предлагаются способы лечения или снижения заболеваемости, включая, без ограничения, инфекцию, аутоиммунное заболевание, первичный или метастатический рак и тому подобное, в схеме приема лекарств, включающей контакт клеток-мишеней с антигенсвязывающей композицией по данному изобретению, особенно когда антигенсвязывающая композиция представляет собой мультиспецифическое антитело, подходящее для состояния, подвергаемого лечению, например, где один связывающий фрагмент специфически связывается с антигеном, ассоциированным с опухолью, для лечения соответствующих раковых клеток; связывающий фрагмент, специфичный для патогена, представляющего интерес, для лечения соответствующей инфекции, и тому подобное. Такие способы включают в себя введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества или эффективной дозы агентов по данному изобретению, включая без ограничения комбинации реагента с химиотерапевтическим лекарственным средством, лучевую терапию или хирургическое вмешательство.
Эффективные дозы композиций по данному изобретению для лечения заболевания варьируют в зависимости от многих разных факторов, в том числе способа введения, целевого сайта, физиологического состояния пациента, от того, представляет ли собой пациент человека или животное, других вводимых медикаментов, и того, является ли лечение профилактическим или терапевтическим. Обычно пациентом является человек, но млекопитающие, отличные от человека, также могут подвергаться лечению, например, домашние животные, такие как собаки, кошки, лошади и тому подобное, лабораторные млекопитающие, такие как кролики, мыши, крысы и тому подобное, и тому подобное. Дозировки для лечения можно подбирать для оптимизации безопасности и эффективности.
Уровни дозировки могут быть легко определены квалифицированным лечащим врачом и могут быть изменены при необходимости, например, при необходимости изменения реакции субъекта на терапию. Количество активного ингредиента, которое можно комбинировать с веществами-носителями для получения разовой лекарственной формы, изменяется в зависимости от получающего лечение индивида и конкретного способа введения. Единичные лекарственные формы обычно содержат от около 1 мг до около 500 мг активного ингредиента.
В некоторых вариантах реализации изобретения терапевтическая дозировка агента может составлять от около 0,0001 до 100 мг/кг и более, обычно от 0,01 до 5 мг/кг от массы тела хозяина. Например, дозировки могут составлять 1 мг/кг массы тела или 10 мг/кг массы тела или в пределах 1-10 мг/кг. Типовая схема лечения включает в себя введение один раз каждые две недели или один раз в месяц или один раз каждые 3-6 месяцев. Терапевтические препараты по данному изобретению обычно вводят несколько раз. Интервалы между введением каждой дозы могут быть еженедельными, ежемесячными или ежегодными. Интервалы также могут быть неравномерными, на что указывает измерение уровня терапевтического препарат в крови пациента. В альтернативном варианте, терапевтические препараты по данному изобретению могут быть введены в виде состава для продолжительного высвобождения, в этом случае необходимо менее частое введение. Дозировка и частота варьируют в зависимости от времени полужизни полипептида у пациента.
В профилактических целях относительно небольшая доза может вводиться через относительно длительные интервалы на протяжении продолжительного периода времени. Некоторые пациенты продолжают получать лечение на протяжении всей жизни. В других терапевтических применениях иногда требуется относительно высокая дозировка с относительно короткими интервалами, до тех пор, пока прогрессирование заболевания не уменьшится или не прекратится, и предпочтительно, до тех пор, пока пациент не покажет частичное или полное улучшение симптомов заболевания. После этого пациенту может быть назначен профилактический режим.
В еще других вариантах реализации способы по данному изобретению включают в себя лечение, уменьшение или предотвращение роста опухоли, метастазирования опухоли или инвазии опухоли раков, включая карциномы, гематологические злокачественные опухоли, такие как лейкемии и лимфомы, меланомы, саркомы, глиомы, и тому подобное. Для профилактического применения фармацевтические композиции или лекарственные препараты вводят пациенту, подверженному риску заболевания или иным образом восприимчивому к заболеванию, в количестве, достаточном для устранения или уменьшения риска, уменьшения степени тяжести или задержки начала заболевания, включая биохимические, гистологические и/или поведенческие симптомы заболевания, его осложнения и промежуточные патологические фенотипы, присутствующие в ходе развития заболевания.
Композиции для лечения заболевания могут вводиться парентеральным, местным, внутривенным, внутриопухолевым, пероральным, подкожным, внутриартериальным, внутричерепным, внутрибрюшинным, интраназальным или внутримышечным способом. Типичным путем введения является внутривенный или внутриопухолевый, хотя другие пути могут быть одинаково эффективными.
Обычно композиции готовят в виде инъекционных растворов, либо в виде жидких растворов, либо суспензий; также могут быть приготовлены твердые формы, подходящие для растворения или суспендирования в жидких носителях перед инъекцией. Препарат также может быть эмульгирован или инкапсулирован в липосомы или микрочастицы, такие как полилактид, полигликолид или сополимер, для усиления адъювантного эффекта, как обсуждалось выше. Langer, Science 249:1527, 1990 год и Hanes, Advanced Drug Delivery Reviews 28:97-119, 1997 год. Агенты по данному изобретению можно вводить в форме инъекции веществ замедленного всасывания или имплантата препарата, который может быть составлен таким образом, чтобы обеспечить длительное или пульсирующее высвобождение активного ингредиента. Фармацевтические композиции, как правило, составлены как стерильные, по существу изотонические и полностью соответствующие всем нормам Надлежащей Производственной Практики (GMP - Good Manufacturing Practice) США. Управление по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных средств США.
Токсичность белков, описанных в данном документе, может быть определена стандартными фармацевтическими процедурами на клеточных культурах или экспериментальных животных, например, путем определения ЛД50 (доза, летальная для 50% популяции) или ЛД100 (доза, летальная для 100% популяции). Соотношение доз между токсическим и терапевтическим эффектом, представляет собой терапевтический индекс. Данные, полученные из этих анализов клеточных культур и исследований на животных, могут быть применены при определении диапазона доз, который не токсичен для применения у человека. Дозировка белков, описанных в данном документе, предпочтительно находится в диапазоне значений концентраций в кровообращении, которые включают эффективную дозу с небольшой токсичностью или без нее. Дозировка может меняться в этом диапазоне в зависимости от применяемой формы дозировки и используемого пути введения. Точный состав, способ введения и дозировка могут быть выбраны отдельным врачом с учетом состояния пациента.
Фармацевтические композиции можно вводить в различных стандартных лекарственных формах в зависимости от способа введения. Например, стандартные лекарственные формы, подходящие для перорального введения, включают, но без ограничения, порошок, таблетки, пилюли, капсулы и пастилки для рассасывания. Общепризнано, что композиции по данному изобретению при пероральном введении должны быть защищены от воздействия пищеварения. Это обычно достигается либо путем образования комплексов молекул с композицией для придания им устойчивости к кислотному и ферментативному гидролизу, либо путем упаковки молекул в подходяще устойчивый носитель, такой как липосома или защитный барьер. Средства защиты агентов от системы пищеварения хорошо известны в данной области техники.
Композиции для введения обычно содержат антитело или другой абляционный агент, растворенный в фармацевтически приемлемом носителе, предпочтительно в водном носителе. Могут применяться различные водные носители, например, забуференный физиологический раствор и тому подобное. Эти растворы являются стерильными и, как правило, не содержат нежелательных веществ. Эти композиции могут быть стерилизованы обычными, хорошо известными методами стерилизации. Композиции могут содержать фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, которые необходимы для соответствия физиологическим условиям, такие как средства регулирующие рН и буферные средства, средства, регулирующие токсичность и тому подобное, например, ацетат натрия, хлорид натрия, хлорид калия, хлорид кальция, лактат натрия и тому подобное. Концентрация активного агента в этих составах может варьироваться в широких пределах и будет выбираться в первую очередь на основе объемов жидкости, вязкости, массы тела и тому подобного в соответствии с конкретным выбранным путем введения и потребностями пациента (например, Remington's Pharmaceutical Science (15-е. изд., 1980 год) и Goodman & Gillman, The Pharmacological Basis of Therapeutics (Hardman и соавт., ред., 1996 год)).
Также в объем данного изобретения входят наборы, содержащие активные агенты и их составы, по данному изобретению и инструкции по применению. Набор может дополнительно содержать по меньшей мере один дополнительный реагент, например, химиотерапевтическое лекарственное средство и тому подобное. Наборы обычно включают в себя этикетку, указывающую на предполагаемое применение содержимого набора. Термин "этикетка" включает в себя любые письменные или записанные материалы, поставляемые в комплекте или вместе с ним, или иным образом сопровождающие набор.
Композиции можно вводить для терапевтического лечения. Композиции вводят пациенту в количестве, достаточном для существенного удаления клеток-мишеней, как описано выше. Количество, достаточное для достижения этого, определяется как "терапевтически эффективная доза", которая может обеспечить улучшение общей выживаемости. Композиции можно вводить однократно или многократно в зависимости от требуемой и переносимой пациентом дозировки и частоты. Конкретная доза, необходимая для лечения, будет зависеть от медицинского диагноза и истории заболевания млекопитающего, а также от других факторов, таких как возраст, вес, пол, путь введения, эффективность и тому подобного.
Теперь, когда изобретение полностью описано, для специалиста в данной области техники будет очевидно, что различные изменения и модификации могут быть сделаны без отклонения от сущности или объема изобретения.
Примеры
Пример 1
Генетически сконструированные крысы, экспрессирующие антитела, содержащие только тяжелые цепи
Человеческий локус IgH был сконструирован и собран из нескольких частей, которые включали модификацию и объединение генов С-области крысы, которые затем соединялись по ходу транскрипции области VH6-D-JH человека. Два BAC с отдельными кластерами человеческих генов VH были затем совместно введены с BAC, кодирующим собранный (человеческий VH6-D-JH-крысиный C) фрагмент.
Были получены трансгенные крысы, несущие искусственные локусы иммуноглобулинов тяжелой цепи в неупорядоченной конфигурации. Включенные гены константной области кодируют IgM, IgD, IgG2b, IgE, IgA и 3'-энхансер. ОТ-ПЦР и анализ сыворотки (ИФА) трансгенных крыс выявили продуктивную перестройку локусов трансгенных иммуноглобулинов и экспрессию в сыворотке различных изотипов антител только с тяжелой цепью. Трансгенные крысы перекрестно скрещивались с крысами с мутированными эндогенными локусами тяжелой цепи и легкой цепи, ранее описанными в публикации патента США 2009/0098134 А1. Анализ таких животных продемонстрировал инактивацию экспрессии тяжелой и легкой цепи иммуноглобулина крысы и высокий уровень экспрессии антител тяжелой цепи с вариабельными областями, кодируемыми генами V, D и J человека. Иммунизация трансгенных крыс приводила к получению сывороточных ответов с высоким титром антигенспецифических антител с тяжелой цепью. Эти трансгенные крысы, экспрессирующие антитела с тяжелой цепью с областью VDJ человека, были названы UniRats.
Пример 2
Генетически сконструированные крысы, экспрессирующие антитела с фиксированной легкой цепью
Наборы трансгенных человеческих антител были получены из Н-цепей с разнообразной (VH-D-JH)n перестройкой в сочетании с уникальной L-цепью. Для этого перестроенная L-цепь, человеческий Vk-Jk1-Ck, была интегрирована в зародышевую линию крысы посредством микроинъекции ДНК, и полученные трансгенные животные были скрещены с ранее описанной линией крысы, которая естественным образом экспрессирует набор человеческой H-цепи (Osborn и соавт., 2013 год). Эта новая линия крыс была названа OmniFlic.
Иммунизация крыс OmniFlic с применением множества различных антигенов продуцировала высокие уровни антигенспецифического IgG, сходного с другими трансгенными крысами, несущими тот же локус IgH. Анализ набора методом ОТ-ПЦР позволил выявить сильно вариабельные перестройки гена VH при высоких уровнях транскрипта и белка. Кроме того, был идентифицирован только один продукт L-цепи, также экспрессирующийся на высоком уровне.
Антигенспецифические связыватели из OmniFlic были получены с помощью сиквенирования нового поколения (NGS) и отобраны из библиотек кДНК (дрожжей, E. coli, фагов), которые после сиквенирования идентифицировали разнообразные транскрипты H-цепи. Для экспрессии в клетках млекопитающих гипермутированные конструкции H-цепи трансфицировали в комбинации с исходной трансгенной последовательностью Igκ. В этом перестроенном Vk-Jk1-Ck не допускались мутационные изменения, и всегда одна и та же L-цепь экспрессировалась с различными продуктами H-цепи для генерации моноклонального человеческого IgG.
Пример 3
Получение антигенспецифических антител у трансгенных крыс.
Для получения антигенспецифических антител с тяжелой цепью у крыс, экспрессирующих генетически сконструированных крыс, иммунизировали двумя способами.
Иммунизация рекомбинантными внеклеточными доменами PD-L1 и BCMA. Рекомбинантные внеклеточные домены PD-L1 и BCMA были приобретены у R&D Systems, разбавлены стерильным физиологическим раствором и объединены с адъювантом. Иммуногены либо комбинировали с полным адъювантом Фрейнда (CFA) и неполным адъювантом Фрейнда (IFA), либо с адъювантами Titermax и Ribi. Первую иммунизацию (примирование) иммуногеном в CFA или Titermax вводили в левую и правую ноги. После первой иммунизации иммуногенами в CFA в каждую ногу вводили еще две иммунизации в IFA (бустер-инъекции) или еще 4 иммунизации в Ribi и еще одну в Titermax. Эта последовательность иммунизаций приводит к развитию В-клеток, продуцирующих высокоаффинные антитела. Концентрации иммуногена составляли 10 мкг на ногу. Сыворотку собирали у крыс при последнем кровопускании для определения титров сыворотки.
Для получения антител к CD3δε человека генетически сконструированных крыс иммунизировали с применением протоколов иммунизации на основе ДНК.
Крыс OmniFlic иммунизировали конструкциями CD3-эпсилон/дельта человека и яванской макаки в Aldevron, Inc. (Фарго, штат Северная Дакота) с применением технологии антител GENOVAC. Дренирующие лимфатические узлы собирали после окончательной иммунизации и выделяли РНК. После синтеза кДНК набор антител тяжелой цепи IgH был охарактеризован с помощью сиквенирования нового поколения и нашего собственного программного обеспечения для внутреннего использования. Были отобраны кандидатные антигенспецифические последовательности VH, демонстрирующие доказательства антигенспецифического положительного отбора. Несколько сотен последовательностей VH, кодирующих FlicAb, были отобраны для сборки генов и клонированы в экспрессионный вектор. Впоследствии полностью человеческие антитела FlicAb IgG1 экспрессировали в клетках HEK для анализа с помощью Flow и ИФА. Человеческие FlicAb тестировали на связывание с первичными человеческими Т-клетками и клетками Jurkat с помощью потока. Кроме того, человеческие FlicAb были протестированы с применением рекомбинантных белков CD3δε в ИФА. Все FlicAb с положительным связыванием с Т-клетками человека перечислены на фиг. 1 и 2. Выбранные последовательности были дополнительно охарактеризованы в анализах активации Т-клеток.
Пример 4. Характеристизация антител.
Таблица данных на фиг. 3 обобщает поведение анти-CD3 антител семейства 2 в моноспецифическом и биспецифическом формате. В столбце 1 показан идентификатор последовательности для последовательности VH анти-CD3. В столбце 2 показано значение СИФ для связывания клетками Jurkat исходного моноспецифического (антитела) к CD3. В столбце 3 показано значение СИФ для связывания T-клетками яванского макака исходного моноспецифического (антитела) к CD3. Столбец 4 демонстрирует название aCD3:aBCMA биспецифического антитела. В столбце 5 показаны пикограммы ИЛ-2, высвобождаемого пан-Т-клетками, стимулированными биспецифическим антителом, связывающим белок ВСМА, помещенным на пластике, в указанной дозе. В столбце 6 показаны пикограммы ИЛ-6, высвобождаемого пан-Т-клетками, стимулированными биспецифическим антителом, связывающим белок ВСМА, помещенным на пластике, в указанной дозе. В столбце 7 показаны пикограммы ИЛ-10, высвобождаемого пан-Т-клетками, стимулированными биспецифическим антителом, связывающим белок ВСМА, помещенным на пластике, в указанной дозе. В столбце 8 показаны пикограммы ИФН-γ, высвобождаемого пан-Т-клетками, стимулированными биспецифическим антителом, связывающим белок ВСМА, помещенным на пластике, в указанной дозе. В столбце 9 показаны пикограммы ФНОα, высвобождаемого пан-Т-клетками, стимулированными биспецифическим антителом, связывающим белок ВСМА, помещенным на пластике, в указанной дозе. В столбце 10 показана ЭК50 лизиса опухолевых клеток U266, опосредованного биспецифическими антителами, в присутствии пан-Т-клеток человека. В столбце 11 показан процент лизиса опухолевых клеток U266, в присутствии биспецифического антитела и пан-Т-клеток человека при дозе 333 нг/мл биспецифического антитела. В столбце 12 показана аффинность белкового связывания плеча к CD3 биспецифического антитела, измеренная с помощью Octet. В столбце 13 показано значение СИФ для связывания клетками Jurkat биспецифического антитела.
Пример 5. Характеризация биспецифических антител.
Семь биспецифических антител αCD3_fam2:aBCMA, каждое с уникальным плечом к CD3 и общим плечом к BCMA, были протестированы на способность убивать опухолевые клетки U266 BCMA+ посредством перенаправления активированных первичных Т-клеток. В этом эксперименте клетки U266, которые экспрессируют BCMA, смешивали с активированными пан-Т-клетками в соотношении E:T 10:1 наряду с добавлением биспецифического антитела. На фиг. 4 ось x демонстрирует концентрацию применяемого антитела, а ось y демонстрирует % лизиса опухолевых клеток через 6 часов после добавления антитела.
Сравнение активности по лизису опухолевых клеток опосредованной биспецифическими антителами с высвобождением цитокина ИЛ-2 продемонстрировано на точечной диаграмме фиг. 5. Корреляция между производством ИЛ-2 и лизисом опухолевых клеток U266 составляет R2= 0,37. Сравнение активности по лизису опухолевых клеток опосредованной биспецифическими антителами с высвобождением цитокина ИФН-γ продемонстрировано на точечной диаграмме фиг. 6. Корреляция между производством ИФН-γ и лизисом опухолевых клеток U266 составляет R2= 0,53. Сравнение активности по лизису опухолевых клеток U266 опосредованной биспецифическими антителами с анти-CD3 связывающей афинностью продемонстрировано на точечной диаграмме фиг. 7. Корреляция между ЭК50 уничтожения U266 и аффинностью связывания белка составляет R2= 0,93.
Пример 6. Лизис опухолевых клеток.
Биспецифические антитела αCD3_F1F:αBCMA анализировали на способность уничтожать три различных линии опухолевых клеток ВСМА+ и одну линию ВСМА-негативных клеток путем перенаправления активированных исходных Т-клеток. В этом эксперименте опухолевые клетки смешивали с активированными пан-Т-клетками в соотношении E:T 10:1 наряду с добавлением биспецифического антитела. Результаты продемонстрированы на фиг. 8А-6D. Панель А демонстрирует уничтожение клеток RPMI-8226, панель B демонстрирует уничтожение клеток NCI-H929, панель C демонстрирует уничтожение клеток U-266 и панель D демонстрирует уничтожение клеток K562, отрицательный контроль. Ось x демонстрирует концентрацию применяемого антитела, а ось y демонстрирует % лизиса опухолевых клеток через 6 часов после добавления антитела.
Измеряли уровень высвобождения цитокинов ИЛ-2 измеренный после культивирования Т-клеток человека в покое с различными линиями опухолевых клеток и увеличивающимися дозами биспецифического антитела αCD3_F1F:αBCMA. На фиг. 9A проиллюстрировано высвобождение ИЛ-2, стимулированное клетками RPMI-8226, на фиг. 9B проиллюстрировано высвобождение ИЛ-2, стимулированное клетками NCI-H929, на фиг. 9C проиллюстрировано высвобождение ИЛ-2, стимулированное клетками U-266 и на фиг. 9D проиллюстрировано высвобождение ИЛ-2, стимулированное клетками K562, отрицательный контроль.
Уровень высвобождения цитокина ИФН-γ измеряли после культивирования Т-клеток человека в покое с различными линиями опухолевых клеток и увеличивающимися дозами биспецифического антитела αCD3_F1F:aBCMA. Фиг. 10A демонстрирует высвобождение ИФН-γ, стимулированное клетками RPMI-8226, на фиг. 10B проиллюстрировано высвобождение ИФН-γ, стимулированное клетками NCI-H929, на фиг. 10C проиллюстрировано высвобождение ИФН-γ, стимулированное клетками U-266 и на фиг. 10D проиллюстрировано высвобождение ИФН-γ, стимулированное клетками K562, отрицательный контроль.
Примеры указаны таким образом, чтобы обеспечить обычным специалистам в этой области техники полное раскрытие и описание того, как изготавливать и применять данное изобретение, и не предназначены для ограничения объема того, что авторы изобретения считают своим изобретением, и они не предназначены для представления того, что эксперименты, приведенные ниже, это все эксперименты, которые проводились. Были предприняты меры для обеспечения точности в отношении применяемых чисел (например, количеств, температуры и тому подобного), но некоторые экспериментальные ошибки и отклонения должны учитываться. Если не указано иное, части представляют собой части по весу, молекулярная масса представляет собой среднюю молекулярную массу, температура представлена в градусах Цельсия, а давление равно или близко к атмосферному.
В то время как данное изобретение было описано со ссылками на конкретные варианты его реализации, специалистам в данной области техники следует понимать, что могут быть проведены различные изменения и эквиваленты могут быть заменены без отхода от истинной сути и объема данного изобретения. Кроме того, многие модификации могут быть произведены для того, чтобы адаптировать конкретную ситуацию, материал, состав вещества, процесс, технологические стадии или стадию к задаче, сути и объему данного изобретения. Предполагается, что все указанные модификации находятся в пределах объема прилагаемой формулы изобретения.
--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> Trinklein, Nathan
vanSchooten, Wim
Aldred, Shelley Force
Harris, Katherine
Pham, Duy
<120> Антитела, связывающие CD3
<130> TEBO-001WO2
<150> 62/394,360
<151> 2016-09-14
<150> 62/491,908
<151> 2017-04-28
<160> 22
<170> FastSEQ для Windows версия 4.0
<210> 1
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 1
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Asp Tyr Arg Leu Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 2
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 2
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Asp Tyr Arg Leu Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 3
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 3
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Asp Tyr Ser Arg Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 4
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 4
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Asp Tyr Ser Leu Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 5
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 5
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Asp Tyr Ser Leu Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 6
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 6
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Asn Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Asp Tyr Ser Arg Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 7
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 7
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Asn Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Gly Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Asp Tyr Ser Arg Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 8
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 8
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Asp Tyr Ser Arg Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 9
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 9
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asn Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Asp Tyr Ser Arg Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 10
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 10
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asn Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Asp Tyr Ser Arg Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 11
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 11
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Asp Tyr Ser Arg Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 12
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 12
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Ser Tyr Ser Arg Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 13
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 13
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe His Asn Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Asp Tyr Ser Leu Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 14
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 14
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Asp Tyr Ser Arg Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Cys Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 15
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 15
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asn Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Asp Tyr Ser Leu Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 16
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 16
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Asp Tyr Arg Leu Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 17
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 17
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Asp Tyr Arg Leu Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 18
<211> 123
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 18
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Gly Asp Tyr Arg Leu Gly Gly Ala Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 19
<211> 107
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 19
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Trp Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 20
<211> 243
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 20
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Arg Gly Ser Asp Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Gln Gly Glu Asn Asp Gly Pro Phe Asp His Arg Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu
115 120 125
Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu
130 135 140
Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Ser Tyr Gly Met Ser Trp
145 150 155 160
Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val Ser Gly Ile Arg
165 170 175
Gly Ser Asp Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe
180 185 190
Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn
195 200 205
Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys Gln Gly
210 215 220
Glu Asn Asp Gly Pro Phe Asp His Arg Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
225 230 235 240
Val Ser Ser
<210> 21
<211> 119
<212> Белок
<213> Homo sapiens
<400> 21
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Arg Gly Ser Asp Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Gln Gly Glu Asn Asp Gly Pro Phe Asp His Arg Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 22
<211> 128
<212> Белок
<213> H. sapiens
<400> 22
Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
20 25 30
Gly His Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile His Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Ile Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Trp Arg His Asp Ile Phe Ala Ala Tyr Pro Tyr Tyr Tyr
100 105 110
Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<---
Claims (34)
1. Биспецифическое антитело для связывания с CD3δε и ВСМА, содержащее:
(а) первый связывающий фрагмент молекулы, специфичный к человеческому CD3δε, причем первый связывающий фрагмент включает:
(i) первую полипептидную субъединицу, содержащую вариабельный домен тяжелой цепи (VH), включающий CDR1, имеющий аминокислотную последовательностью GFTFDDYA, CDR2, имеющий аминокислотную последовательность ISWNSGSI, и CDR3, имеющий аминокислотную последовательность AKDSRGYGDYRLGGAY; и
(ii) вторую полипептидную субъединицу, содержащую вариабельный домен легкой цепи (VL), включающий CDR1, имеющий аминокислотную последовательностью QSVSSN, CDR2, имеющий аминокислотную последовательность GAS, и CDR3, имеющий аминокислотную последовательность QQYNNWPWT; и
(б) второй связывающий фрагмент, специфичный к человеческому ВСМА, причем второй связывающий фрагмент включает:
(i) третью полипептидную субъединицу, содержащую вариабельный домен (VН), включающий CDR1, имеющий аминокислотную последовательность GFTVSSYG, CDR2, имеющий аминокислотную последовательность IRGSDGST, и CDR3, имеющий аминокислотную последовательность AKQGENDGPFDH
2. Биспецифическое антитело по п. 1, причем последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 домена VH первой полипептидной субъединицы присутствуют в каркасе VH человека
3. Биспецифическое антитело по п. 1, причем последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 домена VL второй полипептидной субъединицы присутствуют в каркасе VL человека.
4. Биспецифическое антитело по п. 1, причем последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 домена VH первой полипептидной субъединицы присутствуют в каркасе VH человека; и последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 VL домена второй полипептидной субъединицы присутствуют в каркасе VL человека
5. Биспецифическое антитело по п. 1, в котором первая полипептидная субъединица включает домен VH, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1.
6. Биспецифическое антитело по п. 1, в котором вторая полипептидная субъединица включает домен VL, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19.
7. Биспецифическое антитело по п. 1, в котором первая полипептидная субъединица включает домен VH, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, и вторая полипептидная субъединица включает домен VL, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19.
8. Биспецифическое антитело по п. 1, в котором третья полипептидная субъединица включает домен VH, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21.
9. Биспецифическое антитело по п. 1, в котором третья полипептидная субъединица имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20.
10. Биспецифическое антитело по п. 5, в котором третья полипептидная субъединица включает домен VH, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21.
11. Биспецифическое антитело по п. 5, в котором третья полипептидная субъединица имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20.
12. Биспецифическое антитело по п. 6, в котором третья полипептидная субъединица включает домен VH, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21.
13. Биспецифическое антитело по п. 6, в котором третья полипептидная субъединица имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20.
14. Биспецифическое антитело для связывания с CD3δε и ВСМА, содержащее:
(а) первый связывающий фрагмент молекулы, специфичный к человеческому CD3δε, причем первый связывающий фрагмент включает первую полипептидную субъединицу, содержащую домен VH, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, и вторую полипептидную субъединицу, содержащую домен VL, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19; и
(б) второй связывающий фрагмент молекулы, специфичный к человеческому ВСМА, причем второй связывающий фрагмент включает третью полипептидную субъединицу, содержащую домен VH, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21.
15. Биспецифическое антитело по п. 14, в котором третья полипептидная субъединица включает домен VH, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21, и второй домен VH, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21, причем первый домен VH и второй домен VH скомпонованы в тандемную конфигурацию.
16. Биспецифическое антитело по п. 15, в котором первый домен VH и второй домен VH третьей полипептидной субъединицы скомпонованы в тандемную конфигурацию и соединены линкером.
17. Биспецифическое антитело для связывания с CD3δε и ВСМА, содержащее:
(а) первый связывающий фрагмент молекулы, специфичный к человеческому CD3δε, причем первый связывающий фрагмент включает первую полипептидную субъединицу, содержащую домен VH, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, и вторую полипептидную субъединицу, содержащую домен VL, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19; и
(б) второй связывающий фрагмент молекулы, специфичный к человеческому ВСМА, причем второй связывающий фрагмент включает третью полипептидную субъединицу, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20.
18. Фармацевтическая композиция для лечения ВСМА-экспрессирующего рака, включающая эффективное количество биспецифичного антитела по любому из пп. 1-17 и фармацевтически приемлемый носитель.
19. Полинуклеотид, кодирующий биспецифическое антитело по любому из пп. 1-17.
20. Вектор экспрессии, включающий полинуклеотид по п. 19.
21. Клетка для экспресии антител по любому из пп. 1-17, включающая вектор по п. 20.
22. Способ получения биспецифического антитела, включающий выращивание клеток по п. 21 в условиях, обеспечивающих экспрессию биспецифических антител, и выделение биспецифических антител из клетки.
23. Набор для лечения ВСМА-экспрессирующего рака у объекта «человек», в случае необходимости включающий вышеупомянутое биспецифическое антитело по любому из пп. 1-17 и инструкцию по применению.
24. Лекарственное средство для лечения ВСМА-экспрессирующего рака, включающее эффективное количество биспецифического антитела по любому из пп. 1-17.
25. Применение биспецифического антитела по любому из пп. 1-17 для получения лекарственного средства для лечения ВСМА-экспрессирующего рака у объекта «человек».
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201662394360P | 2016-09-14 | 2016-09-14 | |
US62/394,360 | 2016-09-14 | ||
US201762491908P | 2017-04-28 | 2017-04-28 | |
US62/491,908 | 2017-04-28 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2019111037A Division RU2790288C2 (ru) | 2016-09-14 | 2017-06-20 | Антитела, связывающие cd3 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2022103374A RU2022103374A (ru) | 2022-03-02 |
RU2807216C2 true RU2807216C2 (ru) | 2023-11-13 |
Family
ID=
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2012066058A1 (en) * | 2010-11-16 | 2012-05-24 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Agents and methods for treating diseases that correlate with bcma expression |
WO2012122528A1 (en) * | 2011-03-10 | 2012-09-13 | Hco Antibody, Inc. | Bispecific three-chain antibody-like molecules |
WO2013072406A1 (en) * | 2011-11-15 | 2013-05-23 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Binding molecules for bcma and cd3 |
RU2561457C2 (ru) * | 2007-04-03 | 2015-08-27 | Эмджен Рисерч (Мьюник) Гмбх | Cd3-эпсилон-связывающий домен с межвидовой специфичностью |
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2561457C2 (ru) * | 2007-04-03 | 2015-08-27 | Эмджен Рисерч (Мьюник) Гмбх | Cd3-эпсилон-связывающий домен с межвидовой специфичностью |
WO2012066058A1 (en) * | 2010-11-16 | 2012-05-24 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Agents and methods for treating diseases that correlate with bcma expression |
WO2012122528A1 (en) * | 2011-03-10 | 2012-09-13 | Hco Antibody, Inc. | Bispecific three-chain antibody-like molecules |
WO2013072406A1 (en) * | 2011-11-15 | 2013-05-23 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Binding molecules for bcma and cd3 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
TRINKLEIN N. et al. Abstract LB-090: Sequence-based discovery of fully human anti-CD3 and anti-PDL1 single domain antibodies using novel transgenic rats, Cancer Research, Suppl, 2016, Vol.76, N.14, Найдено в Интернет, URL: https://aacrjournals.org/cancerres/article/76/14_Supplement/LB-090/613383/Abstract-LB-090-Sequence-based-discovery-of-fully [найдено 03.08.2022]. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11421027B2 (en) | CD3 binding antibodies | |
US20240018235A1 (en) | Cd3 binding antibodies | |
US20240117050A1 (en) | Cd3-delta/epsilon heterodimer specific antibodies | |
RU2807216C2 (ru) | Антитела, связывающие cd3 | |
RU2790288C2 (ru) | Антитела, связывающие cd3 | |
RU2779489C2 (ru) | Антитела, связывающие cd3 | |
NZ785574A (en) | CD3 binding antibodies |